WST-1；CCK-8；WST-8；MTT 噻唑兰；Alamar Blue 阿尔玛蓝；XTT；CAS：150849-52-8；

WST-1细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒（WST-1 Cell Proliferation and Cytotoxicity Assay Kit）是一种广泛用于细胞增殖和细胞毒性检测的快速高灵敏度试剂盒。

WST-1是MTT（噻唑兰）的升级产品，检测原理为：在电子耦合试剂存在的情况下，WST-1可被线粒体内的脱氢酶还原生成水溶性的橙黄色甲臜产物（formazan）。颜色的深浅与活细胞数量（细胞增殖）成正比，与细胞毒性成反比。通过酶标仪在450nm波长处测定OD值来反映细胞增殖以及细胞毒性水平。WST-1和MTT，以及其它MTT类似产品比如：XTT、MTS相比具有明显的优势：①WST-1、XTT和MTS生成的甲臜产物是水溶的，可以省去后续的溶解步骤；不像MTT，生成的甲臜产物不是水溶的，必需用特定的溶解液来溶解；②WST-1生成的甲臜产物比XTT和MTS生成的更易溶解；③WST-1比XTT和MTS更加稳定，使结果更加稳定；④WST-1比XTT和MTS的线性范围更宽，灵敏度更高。

WST-1细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒适用于细胞因子等诱导的细胞增殖检测，也可用于小分子药物等诱导的细胞毒性或细胞生长抑制实验等。本试剂盒操作便捷，所有的检测步骤在一块96孔板内即能完成。不必洗涤细胞，不必收集细胞。也不需要额外步骤来溶解甲臜产物，可用于大批量样品的检测。酚红和血清对本试剂盒的测定无明显影响。

我司提供两种规格的试剂盒，按照96孔板来计算，分别可以做100个孔和500个孔（500T）。

产品组分

保存与运输方法

保存：-20℃避光保存，一年有效。

运输：冰袋运输。

注意事项

1）使用96孔板进行检测，如果细胞培养时间较长，一定要注意蒸发的问题。①由于96孔板周围一圈最容易蒸发，可以采取弃用周围一圈的办法，改加PBS、无菌水或培养液；②可以把96孔板置于靠近培养箱内水源的地方以缓解蒸发。

2）接种时注意细胞悬液一定要混匀，以避免细胞沉淀下来导致每孔中的细胞数量不等，可以每接种几个孔就混匀一下。

3）培养基内的酚红和血清不会显著干扰结果。

4）如果没有450nm的滤光片，可以使用吸光度在420-480 nm之间的滤光片。

5）如果样品为高浑浊的细胞悬液，建议设定＞600nm的波长作为参比波长，扣除参比波长的OD值即可。

6）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

储存液制备

1）对于WST-1细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒（MX3007-100T）：于使用前，将盒子内的1管WST-1（粉末）从冰箱取出，置于室温至少回温20min，之后加入1ml 电子耦合试剂，完全溶解即得到WST-1溶液；

2）对于WST-1细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒（MX3007-500T）：于使用前，将盒子内的1管WST-1（粉末）从冰箱取出，置于室温至少回温20min，之后加入5ml 电子耦合试剂，完全溶解即得到WST-1溶液；

3）WST-1溶液于4℃保存一周，不影响使用效果。短期不用务必分装后置于-20℃保存，半年稳定。冻存的WST-1溶液融化后可能会观察到一些沉淀物，此为正常现象。可于37℃水浴2-10min，通常能完全溶解。

检测流程（96孔板）

1）收集对数期细胞，96孔平底板内接种细胞，调整细胞密度为1×10⁴-1×10⁵细胞/孔，每孔接种100μl（含或不含待测的化合物）。

【注①】：具体每孔所用的细胞数目，需根据细胞大小，细胞增殖速度的快慢以及实验用途等因素决定。对于细胞毒性实验，建议接种更高的起始细胞，比如：5×10⁴-1×10⁵细胞/孔。

【注②】：接种时，需注意四周孔用无菌水、无菌PBS或细胞培养基填充。

【注③】：【可选】根据自身实验设计选择适宜时间加入药物，一般来说，细胞贴壁后即可加药， 或2h，或12h，每孔0-10μl，设3-5个复孔。建议设5个复孔。

【注④】：需设置空白对照孔（不含细胞，仅含培养基，WST-1）。

2）5% CO₂，37℃培养细胞24-96h。

3）每孔加入10μl WST-1溶液（注意不要引入气泡），继续培养0.5-4h。

【注①】：若药物与 WST-1 有反应，可先离心后弃去培养液，小心用 PBS 冲2-3 遍后，再加入含 WST-1的培养液。

【注②】：在细胞培养箱内继续孵育时间长短根据细胞的类型和细胞密度等实验情况而定，初次实验时可以在 0.5、1、2 和 4h后分别用酶标仪检测，然后选取吸光度范围比较适宜的一个时间点用于后续实验。

4）把 96孔板置于摇床上摇动1min，以充分混匀待检测体系。

5）在450nm处测定吸光度。如无450nm 滤光片，可以使用 420-480nm的滤光片。另外，可以使用＞600nm 的波长作为参考波长进行双波长测定。

结果分析

1）细胞增殖分析

2）细胞毒性分析

相关产品

描述

WST-1细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒

产品标签

WST-1；CCK-8；WST-8；MTT 噻唑兰；Alamar Blue 阿尔玛蓝；XTT；CAS：150849-52-8；

产品信息

产品描述

WST-1细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒（WST-1 Cell Proliferation and Cytotoxicity Assay Kit）是一种广泛用于细胞增殖和细胞毒性检测的快速高灵敏度试剂盒。

WST-1是MTT（噻唑兰）的升级产品，检测原理为：在电子耦合试剂存在的情况下，WST-1可被线粒体内的脱氢酶还原生成水溶性的橙黄色甲臜产物（formazan）。颜色的深浅与活细胞数量（细胞增殖）成正比，与细胞毒性成反比。通过酶标仪在450nm波长处测定OD值来反映细胞增殖以及细胞毒性水平。WST-1和MTT，以及其它MTT类似产品比如：XTT、MTS相比具有明显的优势：①WST-1、XTT和MTS生成的甲臜产物是水溶的，可以省去后续的溶解步骤；不像MTT，生成的甲臜产物不是水溶的，必需用特定的溶解液来溶解；②WST-1生成的甲臜产物比XTT和MTS生成的更易溶解；③WST-1比XTT和MTS更加稳定，使结果更加稳定；④WST-1比XTT和MTS的线性范围更宽，灵敏度更高。

WST-1细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒适用于细胞因子等诱导的细胞增殖检测，也可用于小分子药物等诱导的细胞毒性或细胞生长抑制实验等。本试剂盒操作便捷，所有的检测步骤在一块96孔板内即能完成。不必洗涤细胞，不必收集细胞。也不需要额外步骤来溶解甲臜产物，可用于大批量样品的检测。酚红和血清对本试剂盒的测定无明显影响。

我司提供两种规格的试剂盒，按照96孔板来计算，分别可以做100个孔（MX3007-100T）和500个孔（500T）。

产品组分

保存与运输方法

保存：-20℃避光保存，一年有效。

运输：冰袋运输。

注意事项

1）使用96孔板进行检测，如果细胞培养时间较长，一定要注意蒸发的问题。①由于96孔板周围一圈最容易蒸发，可以采取弃用周围一圈的办法，改加PBS、无菌水或培养液；②可以把96孔板置于靠近培养箱内水源的地方以缓解蒸发。

2）接种时注意细胞悬液一定要混匀，以避免细胞沉淀下来导致每孔中的细胞数量不等，可以每接种几个孔就混匀一下。

3）培养基内的酚红和血清不会显著干扰结果。

4）如果没有450nm的滤光片，可以使用吸光度在420-480 nm之间的滤光片。

5）如果样品为高浑浊的细胞悬液，建议设定＞600nm的波长作为参比波长，扣除参比波长的OD值即可。

6）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

储存液制备

1）对于WST-1细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒（MX3007-100T）：于使用前，将盒子内的1管WST-1（粉末）从冰箱取出，置于室温至少回温20min，之后加入1ml 电子耦合试剂，完全溶解即得到WST-1溶液；

2）对于WST-1细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒（MX3007-500T）：于使用前，将盒子内的1管WST-1（粉末）从冰箱取出，置于室温至少回温20min，之后加入5ml 电子耦合试剂，完全溶解即得到WST-1溶液；

3）WST-1溶液于4℃保存一周，不影响使用效果。短期不用务必分装后置于-20℃保存，半年稳定。冻存的WST-1溶液融化后可能会观察到一些沉淀物，此为正常现象。可于37℃水浴2-10min，通常能完全溶解。

检测流程（96孔板）

1）收集对数期细胞，96孔平底板内接种细胞，调整细胞密度为1×10⁴-1×10⁵细胞/孔，每孔接种100μl（含或不含待测的化合物）。

【注①】：具体每孔所用的细胞数目，需根据细胞大小，细胞增殖速度的快慢以及实验用途等因素决定。对于细胞毒性实验，建议接种更高的起始细胞，比如：5×10⁴-1×10⁵细胞/孔。

【注②】：接种时，需注意四周孔用无菌水、无菌PBS或细胞培养基填充。

【注③】：【可选】根据自身实验设计选择适宜时间加入药物，一般来说，细胞贴壁后即可加药， 或2h，或12h，每孔0-10μl，设3-5个复孔。建议设5个复孔。

【注④】：需设置空白对照孔（不含细胞，仅含培养基，WST-1）。

2）5% CO₂，37℃培养细胞24-96h。

3）每孔加入10μl WST-1溶液（注意不要引入气泡），继续培养0.5-4h。

【注①】：若药物与 WST-1 有反应，可先离心后弃去培养液，小心用 PBS 冲2-3 遍后，再加入含 WST-1的培养液。

【注②】：在细胞培养箱内继续孵育时间长短根据细胞的类型和细胞密度等实验情况而定，初次实验时可以在 0.5、1、2 和 4h后分别用酶标仪检测，然后选取吸光度范围比较适宜的一个时间点用于后续实验。

4）把 96孔板置于摇床上摇动1min，以充分混匀待检测体系。

5）在450nm处测定吸光度。如无450nm 滤光片，可以使用 420-480nm的滤光片。另外，可以使用＞600nm 的波长作为参考波长进行双波长测定。

结果分析

1）细胞增殖分析

2）细胞毒性分析

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