描述

Trypsin 1:2500, Powder (Bovine)

牛源胰蛋白酶1:2500（粉末）

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Trypsin 1:2500 胰酶；Collagenase NB 4 胶原酶NB4；Trypsin-EDTA (0.25%)；Dispase II 中性蛋白酶；CAS：9002-07-7；

产品信息

产品描述

胰蛋白酶（胰酶，Trypsin），CAS：9002-07-7，来源于胰腺的一种丝氨酸蛋白酶，由223个氨基酸残基组成的单链多肽，底物特异性是带正电荷的赖氨酸和精氨酸侧链。胰酶主要切割赖氨酸和精氨酸羧基端，当两者之一紧随为脯氨酸的情况除外。另外，当切割位点任一边紧邻酸性残基，胰酶水解速率也会减缓。

胰蛋白酶（胰酶，Trypsin），以无活性的胰蛋白酶原（Trypsinogen）形式分泌于胰腺中，通过切割其末端六肽而得到活化，产生天然单链形式的β-胰酶（β-Trypsin），随后进行有限的自发裂解产生具水解活性的α-Trypsin（由二硫键共价连接的二条肽链组成）。胰酶水解活性可被多种化合物所抑制，有1）来源于胰腺、大豆、青豆、蛋清的天然胰蛋白酶抑制剂；2）银离子；3）有机磷化合物，如氟磷酸异丙酯DFP；4）特定蛋白酶抑制剂，如AEBSF、抗蛋白酶、抑肽酶、PMSF、TLCK等；

本品是来源于牛胰腺的胰蛋白酶冻干粉，酶活力为2500 units/mg，即1:2500，达USP级。

产品特性

1） EC NO：3.4.21.4

2） CAS NO：9002-07-7

3） 同义名：Trypsin, from Porcine Pancreas; Trypsin Powder, Porcine 1:250; Tryptase; Tryptar; Cocoonase; Parenzyme;

arenzymol; 胰脏丝氨酸蛋白酶；胰朊酶；胰酶；

4） 来源：牛胰腺

5） 外观：白色或类白色粉末

6） 溶解性：溶于水，不溶于乙醇、甘油、氯仿和乙醚

7） 最佳工作温度：37°C

8） 最佳工作pH：7.5-8.5

9） 酶活性：≥2500 U/mg

10） 糜蛋白酶：≤50 U/mg

保存与运输方法

保存：2-8℃干燥保存，3年有效。

运输：冰袋运输。

注意事项

为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

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Trypsin 1:250 胰酶；Collagenase NB 4 胶原酶NB4（标准级别）；Trypsin-EDTA (0.25%)；Dispase II中性蛋白酶；Roche；CAS：9001-12-1；

产品信息

产品描述

胰蛋白酶（胰酶，Trypsin），CAS：9002-07-7，来源于胰腺的一种丝氨酸蛋白酶，由223个氨基酸残基组成的单链多肽，底物特异性是带正电荷的赖氨酸和精氨酸侧链。胰酶主要切割赖氨酸和精氨酸羧基端，当两者之一紧随为脯氨酸的情况除外。另外，当切割位点任一边紧邻酸性残基，胰酶水解速率也会减缓。

胰蛋白酶（胰酶，Trypsin），以无活性的胰蛋白酶原（Trypsinogen）形式分泌于胰腺中，通过切割其末端六肽而得到活化，产生天然单链形式的β-胰酶（β-Trypsin），随后进行有限的自发裂解产生具水解活性的α-Trypsin（由二硫键共价连接的二条肽链组成）。胰酶水解活性可被多种化合物所抑制，有1）来源于胰腺、大豆、青豆、蛋清的天然胰蛋白酶抑制剂；2）银离子；3）有机磷化合物，如氟磷酸异丙酯DFP；4）特定蛋白酶抑制剂，如AEBSF、抗蛋白酶、抑肽酶、PMSF、TLCK等；

本品是来源于猪胰腺的胰蛋白酶冻干粉，经γ射线处理灭活病毒，经过猪细小病毒和支原体检测。基于标准测定方法的酶活力为250 units/mg，即1:250。广泛用于细胞传代，对贴壁细胞进行消化以制备单细胞悬液，常用的工作浓度是0.025-0.5%（w/v）。也可联合其他蛋白酶如胶原酶、弹性蛋白酶一起使用，以消化组织。

产品特性

1） EC NO：3.4.21.4

2） CAS NO：9002-07-7

3） 同义名：Trypsin, from Porcine Pancreas; Trypsin Powder, Porcine 1:250; Tryptase; Tryptar; Cocoonase; Parenzyme; Parenzymol;

4） 分子量：23.4 kDa

5） 螯合剂：无EDTA

6） 酚红指示剂：无酚红

7） 外观：白色至类白色粉末

8） 溶解性：溶于水，几乎不溶于乙醇和甘油

9） 最佳工作温度：37°C

10）最佳工作pH：7.0-9.0

11）酶活性：根据美国药典专论规定的胰蛋白酶活性测定条件（25°C 10 min，pH 7.6），1 g胰蛋白酶能消化250 g酪蛋白底物。

保存与运输方法

保存：2-8℃干燥保存，3年有效。

运输：冰袋运输。

使用方法

1. 胰酶储存液（2.5%，w/v）的配制

1.1 称取2.5g胰酶粉末溶于100ml不含钙镁的平衡盐缓冲液，如HBSS（Hank′s Balanced Salt Solution），并调整pH在7.4-7.6，此时得到的即2.5%胰酶储存液，置于4℃短时间保存，3个月相对稳定。建议分装冻存，利于长期保存。解冻后可能会出现少量沉淀，属于正常现象，不会影响使用效力。

1.2 细胞的消化可以直接用胰酶溶液，但常使用胰酶-EDTA溶液，因为EDTA是一种II价金属离子螯合剂，能够螯合钙镁离子，减少细胞间的粘附性，从而增强胰酶活性。

【注①】：胰酶用于细胞传代的工作浓度范围为0.025%-0.5%，具体浓度的选择主要受胰酶活性、孵育时间和细胞系类型几个方面影响。若用过高浓度消化过长时间，会破坏细胞膜结构，进而杀死细胞。当对使用浓度把握不大，建议先使用低浓度消化，慢慢的摸索出合适的工作浓度。

【注②】：胰酶-EDTA溶液的配制（仅作参考，根据需要的实际胰酶浓度来调整）

2. 2. 贴壁细胞消化（培养板）
3. 2.1 吸掉培养板内培养液，用不含Ca2+/Mg2+的缓冲液清洗单层贴壁细胞，直至清除残余血清，吸掉盐溶液。
4. 2.2 向上述贴壁细胞中加入适量胰酶溶液或者胰酶-EDTA溶液，完全覆盖细胞即可。此时将细胞置于37℃培养箱孵育2min左右
5. 2.3 立即取出，倾斜培养板，吸掉胰酶或者胰酶-EDTA溶液，轻拍培养板，观察细胞的消化状态。若消化不够，可放回37℃培养箱短时孵育，直至细胞从表面脱落。整个消化过程可通过倒置显微镜来观察。
6. 【注①】：消化时间跟细胞类型、细胞密度、培养液内血清浓度、胰酶活性、以及消化前细胞培养时间等因素有关。胰酶对细胞的损伤以及消化时间尽量保持在最低水平】。
7. 2.4 加入含血清的适量培养液到消化好的细胞内，轻轻反复吹吸从而将细胞从培养板底尽可能吹离，以及吹散细胞团，吹洗时尽量避免气泡的产生。
8. 【注①】：血清能抑制进一步的胰酶消化，保护细胞不被过度消化。当使用无血清培养液，建议此时加入等摩尔的大豆胰酶抑制剂（Soybean trypsin inhibitor）以起到相同效果。
9. 2.5 进行下一步操作【亚培养，或细胞计数】或细胞冻存。
10. 【注①】：操作时务必小心谨慎，同时时刻注意避免交叉污染发生的可能性。

注意事项

1）胰蛋白冻干粉产品常遇到的活性定义及其转换，

1 BAEE Unit：在25℃，pH 7.6的条件下，以BAEE为底物，3.2 ml的反应体系中，A253吸光值每分钟会发生0.001的变化即为一个酶活单位。

1 TAME Unit：在25℃，pH 8.2，0.001M Ca2+条件下，每分钟水解1μmol p-toluenesulfonyl-L-arginine methyl ester（TAME）的用量。

1 USP Unit：在指定条件下，每分钟引起吸光值发生0.003的变化的样品活性。

1 TAME unit = 19.2 USP or NF units = 57.5 BAEE Unit

2）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

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Trypsin (0.05%)胰酶溶液（0.05%）

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Trypsin 1:250胰酶；Collagenase NB 4胶原酶NB4（标准级别）；Trypsin-EDTA (0.25%)；Dispase II中性蛋白酶；CAS：9001-12-1；

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胰蛋白酶（胰酶，Trypsin），CAS：9002-07-7，来源于胰腺的一种丝氨酸蛋白酶，由223个氨基酸残基组成的单链多肽，底物特异性是带正电荷的赖氨酸和精氨酸侧链。胰酶主要切割赖氨酸和精氨酸羧基端，当两者之一紧随为脯氨酸的情况除外。另外，当切割位点任一边紧邻酸性残基，胰酶水解速率也会减缓。

胰蛋白酶（胰酶，Trypsin），以无活性的胰蛋白酶原（Trypsinogen）形式分泌于胰腺中，通过切割其末端六肽而得到活化，产生天然单链形式的β-胰酶（β-Trypsin），随后进行有限的自发裂解产生具水解活性的α-Trypsin（由二硫键共价连接的二条肽链组成）。胰酶水解活性可被多种化合物所抑制，有1）来源于胰腺、大豆、青豆、蛋清的天然胰蛋白酶抑制剂；2）银离子；3）有机磷化合物，如氟磷酸异丙酯DFP；4）特定蛋白酶抑制剂，如AEBSF、抗蛋白酶、抑肽酶、PMSF、TLCK等；

本品为溶于Hanks平衡盐溶液（Hanks’ Balanced Salt Solution, HBSS）的胰酶溶液，包含0.5g/L胰酶（1:250），不含钙镁，经0.1μm滤膜过滤处理，可直接用于细胞消化。

产品特性

保存与运输方法

保存：-20℃保存，1年有效。

运输：冰袋运输。

注意事项

1） 一般情况，常用胰酶的工作浓度为0.25%，但是，半贴壁细胞或对胰酶敏感的细胞常采用0.05%的胰酶进行细胞消化。另外，由于EDTA能螯合Ca2+和Mg2+，破坏细胞连接从而促进细胞的解离，所以很多情况，在胰酶消化液中加入一定量的EDTA，目的在于提高解离效果。

2） 使用前于2-8℃解冻，摇匀后使用。初次使用可根据单次用量，分装冻存，避免反复冻融。

3） 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

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Trypsin (0.25%)胰酶溶液（0.25%）

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Trypsin 1:250胰酶；Collagenase NB 4胶原酶NB4（标准级别）；Trypsin-EDTA (0.25%)；Dispase II中性蛋白酶；CAS：9001-12-1；

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胰蛋白酶（胰酶，Trypsin），CAS：9002-07-7，来源于胰腺的一种丝氨酸蛋白酶，由223个氨基酸残基组成的单链多肽，底物特异性是带正电荷的赖氨酸和精氨酸侧链。胰酶主要切割赖氨酸和精氨酸羧基端，当两者之一紧随为脯氨酸的情况除外。另外，当切割位点任一边紧邻酸性残基，胰酶水解速率也会减缓。

胰蛋白酶（胰酶，Trypsin），以无活性的胰蛋白酶原（Trypsinogen）形式分泌于胰腺中，通过切割其末端六肽而得到活化，产生天然单链形式的β-胰酶（β-Trypsin），随后进行有限的自发裂解产生具水解活性的α-Trypsin（由二硫键共价连接的二条肽链组成）。胰酶水解活性可被多种化合物所抑制，有1）来源于胰腺、大豆、青豆、蛋清的天然胰蛋白酶抑制剂；2）银离子；3）有机磷化合物，如氟磷酸异丙酯DFP；4）特定蛋白酶抑制剂，如AEBSF、抗蛋白酶、抑肽酶、PMSF、TLCK等；

本品为溶于Hanks平衡盐溶液（Hanks’ Balanced Salt Solution, HBSS）的胰酶溶液，包含2.5g/L胰酶（1:250），不含钙镁，经0.1μm滤膜过滤处理，可直接用于细胞消化。

产品特性

保存与运输方法

保存：-20℃保存，1年有效。

运输：冰袋运输。

注意事项

1） 一般情况，常用胰酶的工作浓度为0.25%，但是，半贴壁细胞或对胰酶敏感的细胞常采用0.05%的胰酶进行细胞消化。另外，由于EDTA能螯合Ca2+和Mg2+，破坏细胞连接从而促进细胞的解离，所以很多情况，在胰酶消化液中加入一定量的EDTA，目的在于提高解离效果。

2） 使用前于2-8℃解冻，摇匀后使用。初次使用可根据单次用量，分装冻存，避免反复冻融。

3） 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

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Trypsin 1:2500, Powder (Porcine)

猪源胰蛋白酶1:2500（粉末）

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Trypsin 1:2500 胰酶；Collagenase NB 4 胶原酶NB4；Trypsin-EDTA (0.25%)；Dispase II 中性蛋白酶；CAS：9002-07-7；

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胰蛋白酶（胰酶，Trypsin），CAS：9002-07-7，来源于胰腺的一种丝氨酸蛋白酶，由223个氨基酸残基组成的单链多肽，底物特异性是带正电荷的赖氨酸和精氨酸侧链。胰酶主要切割赖氨酸和精氨酸羧基端，当两者之一紧随为脯氨酸的情况除外。另外，当切割位点任一边紧邻酸性残基，胰酶水解速率也会减缓。

胰蛋白酶（胰酶，Trypsin），以无活性的胰蛋白酶原（Trypsinogen）形式分泌于胰腺中，通过切割其末端六肽而得到活化，产生天然单链形式的β-胰酶（β-Trypsin），随后进行有限的自发裂解产生具水解活性的α-Trypsin（由二硫键共价连接的二条肽链组成）。胰酶水解活性可被多种化合物所抑制，有1）来源于胰腺、大豆、青豆、蛋清的天然胰蛋白酶抑制剂；2）银离子；3）有机磷化合物，如氟磷酸异丙酯DFP；4）特定蛋白酶抑制剂，如AEBSF、抗蛋白酶、抑肽酶、PMSF、TLCK等；

本品是来源于猪胰腺的胰蛋白酶冻干粉，酶活力为2500 units/mg，即1:2500。

产品特性

1） EC NO：3.4.21.4

2） CAS NO：9002-07-7

3） 同义名：Trypsin, from Porcine Pancreas; Trypsin Powder, Porcine 1:250; Tryptase; Tryptar; Cocoonase; Parenzyme; Parenzymol;

4） 来源：猪胰腺

5） 外观：白色或浅黄色粉末

6） 溶解性：溶于水（温热助溶），几乎不溶于乙醇和甘油

7） 最佳工作温度：37°C

8） 最佳工作pH：7.0-9.0

9） 酶活性：≥2500 U/mg

保存与运输方法

保存：2-8℃干燥保存，3年有效。

运输：冰袋运输。

注意事项

1）本品用水溶解，加热助溶（35~40℃），溶液可能有点浑浊，因并非纯酶，含杂质，不影响使用。

2）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

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Trypsin 1:2500, Powder (Porcine)

猪源胰蛋白酶1:2500（粉末）

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Trypsin 1:2500 胰酶；Collagenase NB 4 胶原酶NB4；Trypsin-EDTA (0.25%)；Dispase II 中性蛋白酶；CAS：9002-07-7；

产品信息

产品描述

胰蛋白酶（胰酶，Trypsin），CAS：9002-07-7，来源于胰腺的一种丝氨酸蛋白酶，由223个氨基酸残基组成的单链多肽，底物特异性是带正电荷的赖氨酸和精氨酸侧链。胰酶主要切割赖氨酸和精氨酸羧基端，当两者之一紧随为脯氨酸的情况除外。另外，当切割位点任一边紧邻酸性残基，胰酶水解速率也会减缓。

胰蛋白酶（胰酶，Trypsin），以无活性的胰蛋白酶原（Trypsinogen）形式分泌于胰腺中，通过切割其末端六肽而得到活化，产生天然单链形式的β-胰酶（β-Trypsin），随后进行有限的自发裂解产生具水解活性的α-Trypsin（由二硫键共价连接的二条肽链组成）。胰酶水解活性可被多种化合物所抑制，有1）来源于胰腺、大豆、青豆、蛋清的天然胰蛋白酶抑制剂；2）银离子；3）有机磷化合物，如氟磷酸异丙酯DFP；4）特定蛋白酶抑制剂，如AEBSF、抗蛋白酶、抑肽酶、PMSF、TLCK等；

本品是来源于猪胰腺的胰蛋白酶冻干粉，酶活力为2500 units/mg，即1:2500。

产品特性

1） EC NO：3.4.21.4

2） CAS NO：9002-07-7

3） 同义名：Trypsin, from Porcine Pancreas; Trypsin Powder, Porcine 1:250; Tryptase; Tryptar; Cocoonase; Parenzyme; Parenzymol;

4） 来源：猪胰腺

5） 外观：白色或浅黄色粉末

6） 溶解性：溶于水（温热助溶），几乎不溶于乙醇和甘油

7） 最佳工作温度：37°C

8） 最佳工作pH：7.0-9.0

9） 酶活性：≥2500 U/mg

保存与运输方法

保存：2-8℃干燥保存，3年有效。

运输：冰袋运输。

注意事项

1）本品用水溶解，加热助溶（35~40℃），溶液可能有点浑浊，因并非纯酶，含杂质，不影响使用。

2）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

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描述

Trypsin 1:2500, Powder (Bovine)

牛源胰蛋白酶1:2500（粉末）

产品标签

Trypsin 1:2500 胰酶；Collagenase NB 4 胶原酶NB4；Trypsin-EDTA (0.25%)；Dispase II 中性蛋白酶；CAS：9002-07-7；

产品信息

产品描述

胰蛋白酶（胰酶，Trypsin），CAS：9002-07-7，来源于胰腺的一种丝氨酸蛋白酶，由223个氨基酸残基组成的单链多肽，底物特异性是带正电荷的赖氨酸和精氨酸侧链。胰酶主要切割赖氨酸和精氨酸羧基端，当两者之一紧随为脯氨酸的情况除外。另外，当切割位点任一边紧邻酸性残基，胰酶水解速率也会减缓。

胰蛋白酶（胰酶，Trypsin），以无活性的胰蛋白酶原（Trypsinogen）形式分泌于胰腺中，通过切割其末端六肽而得到活化，产生天然单链形式的β-胰酶（β-Trypsin），随后进行有限的自发裂解产生具水解活性的α-Trypsin（由二硫键共价连接的二条肽链组成）。胰酶水解活性可被多种化合物所抑制，有1）来源于胰腺、大豆、青豆、蛋清的天然胰蛋白酶抑制剂；2）银离子；3）有机磷化合物，如氟磷酸异丙酯DFP；4）特定蛋白酶抑制剂，如AEBSF、抗蛋白酶、抑肽酶、PMSF、TLCK等；

本品是来源于牛胰腺的胰蛋白酶冻干粉，酶活力为2500 units/mg，即1:2500，达USP级。

产品特性

1） EC NO：3.4.21.4

2） CAS NO：9002-07-7

3） 同义名：Trypsin, from Porcine Pancreas; Trypsin Powder, Porcine 1:250; Tryptase; Tryptar; Cocoonase; Parenzyme;

arenzymol; 胰脏丝氨酸蛋白酶；胰朊酶；胰酶；

4） 来源：牛胰腺

5） 外观：白色或类白色粉末

6） 溶解性：溶于水，不溶于乙醇、甘油、氯仿和乙醚

7） 最佳工作温度：37°C

8） 最佳工作pH：7.5-8.5

9） 酶活性：≥2500 U/mg

10） 糜蛋白酶：≤50 U/mg

保存与运输方法

保存：2-8℃干燥保存，3年有效。

运输：冰袋运输。

注意事项

为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

相关产品

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Trypsin (0.25%), Phenol Red

胰酶溶液（0.25%），含酚红

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Trypsin 1:250胰酶；Collagenase NB 4胶原酶NB4（标准级别）；Trypsin-EDTA (0.25%)；Dispase II中性蛋白酶；CAS：9001-12-1；

产品信息

产品描述

胰蛋白酶（胰酶，Trypsin），CAS：9002-07-7，来源于胰腺的一种丝氨酸蛋白酶，由223个氨基酸残基组成的单链多肽，底物特异性是带正电荷的赖氨酸和精氨酸侧链。胰酶主要切割赖氨酸和精氨酸羧基端，当两者之一紧随为脯氨酸的情况除外。另外，当切割位点任一边紧邻酸性残基，胰酶水解速率也会减缓。

胰蛋白酶（胰酶，Trypsin），以无活性的胰蛋白酶原（Trypsinogen）形式分泌于胰腺中，通过切割其末端六肽而得到活化，产生天然单链形式的β-胰酶（β-Trypsin），随后进行有限的自发裂解产生具水解活性的α-Trypsin（由二硫键共价连接的二条肽链组成）。胰酶水解活性可被多种化合物所抑制，有1）来源于胰腺、大豆、青豆、蛋清的天然胰蛋白酶抑制剂；2）银离子；3）有机磷化合物，如氟磷酸异丙酯DFP；4）特定蛋白酶抑制剂，如AEBSF、抗蛋白酶、抑肽酶、PMSF、TLCK等；

本品为溶于Hanks平衡盐溶液（Hanks’ Balanced Salt Solution, HBSS）的胰酶溶液，包含2.5g/L胰酶（1:250），含酚红，不含EDTA，不含钙镁，经0.1μm滤膜过滤处理，可直接用于细胞消化。

产品特性

保存与运输方法

保存：-20℃保存，1年有效。

运输：冰袋运输。

注意事项

1） 一般情况，常用胰酶的工作浓度为0.25%，但是，半贴壁细胞或对胰酶敏感的细胞常采用0.05%的胰酶进行细胞消化。另外，由于EDTA能螯合Ca2+和Mg2+，破坏细胞连接从而促进细胞的解离，所以很多情况，在胰酶消化液中加入一定量的EDTA，目的在于提高解离效果。

2） 使用前于2-8℃解冻，摇匀后使用。初次使用可根据单次用量，分装冻存，避免反复冻融。

3） 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

相关产品

Trypsin 1:250 胰酶；Collagenase NB 4 胶原酶NB4（标准级别）；Trypsin-EDTA (0.25%)；Dispase II中性蛋白酶；Roche；CAS：9001-12-1；

产品信息

产品描述

胰蛋白酶（胰酶，Trypsin），CAS：9002-07-7，来源于胰腺的一种丝氨酸蛋白酶，由223个氨基酸残基组成的单链多肽，底物特异性是带正电荷的赖氨酸和精氨酸侧链。胰酶主要切割赖氨酸和精氨酸羧基端，当两者之一紧随为脯氨酸的情况除外。另外，当切割位点任一边紧邻酸性残基，胰酶水解速率也会减缓。

胰蛋白酶（胰酶，Trypsin），以无活性的胰蛋白酶原（Trypsinogen）形式分泌于胰腺中，通过切割其末端六肽而得到活化，产生天然单链形式的β-胰酶（β-Trypsin），随后进行有限的自发裂解产生具水解活性的α-Trypsin（由二硫键共价连接的二条肽链组成）。胰酶水解活性可被多种化合物所抑制，有1）来源于胰腺、大豆、青豆、蛋清的天然胰蛋白酶抑制剂；2）银离子；3）有机磷化合物，如氟磷酸异丙酯DFP；4）特定蛋白酶抑制剂，如AEBSF、抗蛋白酶、抑肽酶、PMSF、TLCK等；

本品是来源于猪胰腺的胰蛋白酶冻干粉，经γ射线处理灭活病毒，经过猪细小病毒和支原体检测。基于标准测定方法的酶活力为250 units/mg，即1:250。广泛用于细胞传代，对贴壁细胞进行消化以制备单细胞悬液，常用的工作浓度是0.025-0.5%（w/v）。也可联合其他蛋白酶如胶原酶、弹性蛋白酶一起使用，以消化组织。

产品特性

1） EC NO：3.4.21.4

2） CAS NO：9002-07-7

3） 同义名：Trypsin, from Porcine Pancreas; Trypsin Powder, Porcine 1:250; Tryptase; Tryptar; Cocoonase; Parenzyme; Parenzymol;

4） 分子量：23.4 kDa

5） 螯合剂：无EDTA

6） 酚红指示剂：无酚红

7） 外观：白色至类白色粉末

8） 溶解性：溶于水，几乎不溶于乙醇和甘油

9） 最佳工作温度：37°C

10）最佳工作pH：7.0-9.0

11）酶活性：根据美国药典专论规定的胰蛋白酶活性测定条件（25°C 10 min，pH 7.6），1 g胰蛋白酶能消化250 g酪蛋白底物。

保存与运输方法

保存：2-8℃干燥保存，3年有效。

运输：冰袋运输。

使用方法

1. 胰酶储存液（2.5%，w/v）的配制

1.1 称取2.5g胰酶粉末溶于100ml不含钙镁的平衡盐缓冲液，如HBSS（Hank′s Balanced Salt Solution），并调整pH在7.4-7.6，此时得到的即2.5%胰酶储存液，置于4℃短时间保存，3个月相对稳定。建议分装冻存，利于长期保存。解冻后可能会出现少量沉淀，属于正常现象，不会影响使用效力。

1.2 细胞的消化可以直接用胰酶溶液，但常使用胰酶-EDTA溶液，因为EDTA是一种II价金属离子螯合剂，能够螯合钙镁离子，减少细胞间的粘附性，从而增强胰酶活性。

【注①】：胰酶用于细胞传代的工作浓度范围为0.025%-0.5%，具体浓度的选择主要受胰酶活性、孵育时间和细胞系类型几个方面影响。若用过高浓度消化过长时间，会破坏细胞膜结构，进而杀死细胞。当对使用浓度把握不大，建议先使用低浓度消化，慢慢的摸索出合适的工作浓度。

【注②】：胰酶-EDTA溶液的配制（仅作参考，根据需要的实际胰酶浓度来调整）

2. 2. 贴壁细胞消化（培养板）
3. 2.1 吸掉培养板内培养液，用不含Ca2+/Mg2+的缓冲液清洗单层贴壁细胞，直至清除残余血清，吸掉盐溶液。
4. 2.2 向上述贴壁细胞中加入适量胰酶溶液或者胰酶-EDTA溶液，完全覆盖细胞即可。此时将细胞置于37℃培养箱孵育2min左右
5. 2.3 立即取出，倾斜培养板，吸掉胰酶或者胰酶-EDTA溶液，轻拍培养板，观察细胞的消化状态。若消化不够，可放回37℃培养箱短时孵育，直至细胞从表面脱落。整个消化过程可通过倒置显微镜来观察。
6. 【注①】：消化时间跟细胞类型、细胞密度、培养液内血清浓度、胰酶活性、以及消化前细胞培养时间等因素有关。胰酶对细胞的损伤以及消化时间尽量保持在最低水平】。
7. 2.4 加入含血清的适量培养液到消化好的细胞内，轻轻反复吹吸从而将细胞从培养板底尽可能吹离，以及吹散细胞团，吹洗时尽量避免气泡的产生。
8. 【注①】：血清能抑制进一步的胰酶消化，保护细胞不被过度消化。当使用无血清培养液，建议此时加入等摩尔的大豆胰酶抑制剂（Soybean trypsin inhibitor）以起到相同效果。
9. 2.5 进行下一步操作【亚培养，或细胞计数】或细胞冻存。
10. 【注①】：操作时务必小心谨慎，同时时刻注意避免交叉污染发生的可能性。

注意事项

1）胰蛋白冻干粉产品常遇到的活性定义及其转换，

1 BAEE Unit：在25℃，pH 7.6的条件下，以BAEE为底物，3.2 ml的反应体系中，A253吸光值每分钟会发生0.001的变化即为一个酶活单位。

1 TAME Unit：在25℃，pH 8.2，0.001M Ca2+条件下，每分钟水解1μmol p-toluenesulfonyl-L-arginine methyl ester（TAME）的用量。

1 USP Unit：在指定条件下，每分钟引起吸光值发生0.003的变化的样品活性。

1 TAME unit = 19.2 USP or NF units = 57.5 BAEE Unit

2）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

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