Benzonase Nuclease 全能核酸酶(广谱核酸酶);粘质沙雷氏菌(Serratia Marcescen);RIPA裂解液;DNA/RNA降解;Strep-tag II Tag;Strep-Tactin®XT;CAS:9025-65-4;
品牌/名称 | 货号 | 规格 | 浓度 | |
Merck(Benzonase Nuclease,纯度>90%,E. Coli) | 70746-3 | 10KU | 25 U/μL | |
Merck(Benzonase Nuclease,纯度>90%,E. Coli) | 71205-3 | 25KU | 250 U/μL | |
Sigma(Benzonase Nuclease,纯度>90%,E. Coli) | E1014 | 5KU | ≥250 U/μL | |
Sigma(Benzonase Nuclease,纯度>90%,E. Coli) | E1014 | 25KU | ≥250 U/μL |
【注】:Benzonase is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
基本描述:
Benzonase,中文名全能核酸酶,或广谱核酸酶,一种源于粘质沙雷氏菌(Serratia Marcescen,又称为灵杆菌)的非特异性核酸内切酶,由两个完全一样的亚基构成,每个亚基大约30kDa,含有245个氨基酸和两个必需的二硫键。可以切割和降解各种形式的DNA和RNA(单链,双链,线性,环状,或超螺旋形式),生成含有5’-磷酸末端的3-5个寡核苷酸残基片段,并且在很多种操作条件下有效。对核酸碱基序列无特异性要求,可在链内任意核苷酸间进行切割,广泛用于去除生物制品中的核酸。
本品经基因工程改造的原核表达纯化所得,携带Strep-tag II标签(Trp-Ser-His-Pro-Gln-Phe-Glu-Lys),核酸消化后可用牢固结合Strep-tag II的磁珠或树脂来去除。Strep-tag II标签很小,对酶的结合和活性基本无影响。本品能有效降低蛋白样本粘度,去除蛋白样品中核酸的污染,无蛋白酶活性残留,核酸酶活性高达1×106 U/mg蛋白。本品未经特殊的内毒素去除处理,适用于常规的科研应用,包括常规蛋白样本(非药物蛋白)提取时核酸污染的去除,2D凝胶电泳蛋白样本的制备,WB,WB-IP等。
产品特性
1)CAS NO:9025-65-4
2)同义名:BenzNuclease; Universal Nuclease; Benzonase endonuclease
3)纯度:≥ 90%(SDS-PAGE)
4)酶活性值:≥250 U/μL
5)比活性值:≥1×106U/mg蛋白
6)蛋白酶:未检出
7)最适pH:8.0(工作范围pH6-10)
8)最适温度:37℃(工作范围0-42℃)
9)活性单位定义:在37℃,pH8.0反应条件,30min内使△A260值降低1.0(相当于完全消化37μg DNA)所用的酶量定义为一个活性单位(U)。
保存与运输方法
保存:-20℃冻存,至少1年稳定。【注】:不要置于-70℃,因冷冻结冰会造成酶活性的丧失。
运输:冰袋运输。
注意事项
1) 对于不带标签的全能核酸酶,可通过色谱纯化去除,常用的色谱纯化方式有阳离子交换介质和阴离子交换介质。具体的去除条件可与我司联系。
2) 若需带标签的全能核酸酶,可选择带Strep标签的全能核酸酶(货号:MP1511-25KU)或带His标签的全能核酸酶(货号:MP1509-25KU)。
3) 若需不含内毒素污染的全能核酸酶,请选择真核重组表达的全能核酸酶(货号:MP1509-25KU)。
4) 若处理样本中含高浓度蛋白、其他盐分或细胞壁残留成分,可能会部分抑制酶活性,因此,需增加酶的使用量。
5) 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
产品使用
本品为即用型溶液,可根据终浓度直接加入反应体系。对于不同的应用,酶使用量有所差别,建议用量参考下表,具体实验请做优化调整。
应用试验 | 样本量 | 建议用量 | 工作条件* |
电泳蛋白样品制备 | 106个细胞(10mg组织) | 500U,不少于125U | 37℃30-60min |
非药物蛋白生产 | 1g湿重(10ml重悬液) | 250U/ml,不少于50U/ml | 37℃30-60min |
【*】Benzonase Nuclease的有效工作温度是0-42°C,最佳工作温度是37℃。低温使用酶活性有所降低,可通过多添加2-5倍Benzonase Nuclease或延长消化时间(2-3h)来进行活力补偿。 |
全能核酸酶的去除
对于Strep-tag II标签的全能核酸酶(Benzonase Nuclease),可通过牢固结合Strep-tag II的磁珠或树脂来去除,比如:MagStrep “type3” XT beads(2-4090, IBA Life Sciences)或Strep-Tactin®XT Superflow® Resin(2-4010, IBA Life Sciences),去除率>95%。
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产品名称 | 规格 | |
Benzonase Nuclease 全能核酸酶(无内毒素) | 25KU | |
Benzonase Nuclease 全能核酸酶(不含标签) | 25KU | |
Benzonase Nuclease 全能核酸酶(带Strep标签) | 25KU | |
RIPA Lysis Buffer (Strong) RIPA裂解液(强) | 100ml | |
RIPA Lysis Buffer (Medium) RIPA裂解液(中) | 100ml | |
RIPA Lysis Buffer (Weak) RIPA裂解液(弱) | 100ml | |
Lysis Buffer for WB/IP Assays 免疫印迹及免疫沉淀用(WB/IP)裂解液 | 100ml | |
NP-40 Lysis Buffer NP-40 裂解液 | 100ml | |
SDS Lysis Buffer SDS 裂解液 | 100ml | |
Deoxyribonuclease I (DNase I), ≥2,000 units/mg protein | 15KU | |
Deoxyribonuclease I (DNase I), ≥500 units/mg protein | 10MG | |
Ribonuclease A (RNase A) from Bovine Pancreas | 100MG |