SRV™ Vector 系列
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- 参考文献
SRV™ Vector 系列
通过简单的操作即可建立高质量的iPS细胞系。
推荐使用对象
● 初次尝试建立iPS细胞系的用户
● 需要高效建立细胞系，但转录因子不整合到细胞基因组的用户
● 尝试了其他方法但不成功的用户
SRV™ iPSC Vector的特点
● 在细胞质中也可稳定表达，无需整合进宿主细胞基因组
● SRV™ 载体的密码子经人工修饰优化，细胞毒性低，不容易发生干扰素诱导
● 重编程iPS细胞后，可在短时间内消除SRV™
● 人、小鼠等广泛宿主中的分裂细胞和非分裂细胞均可导入基因
● 在单个RNA上搭载所有转录因子，实现高效重编程
● 通过EGFP可以判断基因导入的效率和消除的状况
● 无需饲养细胞
● 基因导入步骤需要BSL2级别实验室，但后续过程均可在BSL1级别实验室处理
什么是隐形RNA载体（SRV™ ）？
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根据产业技术综合研究所（日本）开发的持续表达型仙台病毒（SeVdp）进一步改良而成的载体，在直径240 nm的类病毒粒子中包封了由人 工核酸组成的一系列RNA转录基因。 ● 为了避免（病毒成分导致的）干扰素诱导，使用了针对人体细胞优化的人工核酸 ● 编码区和非编码区经过人工修饰，大部分非编码区来源于人mRNA ● 仅使用重编程基因表达所需的最少基因 人体细胞难以将这种载体识别为异物
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SRV™ iPSC Vector的种类
SRV™ iPSC-1 Vector : siRNA导入后去除载体
SRV™ iPSC-2 Vector : 伴随重编程自动去除载体
导入基因表达的调节
隐形RNA载体（SRV™）可以调节导入基因的表达水平。
在SRV™ iPSC Vector 系列中，转录因子的表达根据所使用的细胞均已调整到最佳水平。
iPS 细胞的制备效率＊
※制备效率是本产品在Feeder-free条件下的实验方案得出的内部数据。当使用其他细胞作为iPS细胞诱导的亲细胞时，应考虑实验方案的适配性。
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载体名 |
SRV™ iPSC-1 Vector |
SRV™ iPSC-2 Vector |
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载体去除方法 |
siRNA导入后去除载体※ |
自动去除载体 |
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重编程基因的表达水平 |
低水平
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中水平
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成纤维细胞 |
5% |
ー |
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外周血单核细胞、含淋巴细胞的外周血单核细胞 |
ー |
0.05% |
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CD34阳性细胞 |
9% |
17% |
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推荐靶细胞 |
成纤维细胞 |
外周血单个核细胞（PBMC） CD34阳性细胞 |
※请另单独购买siRNA产品。
◆SRV™ iPSC-1 Vector
通过导入siRNA来去除载体，适用于成纤维细胞的重编程
SRV™ iPSC-1 Vector是一款经基因表达水平优化的，主要用于成纤维细胞制备iPS细胞的产品。它搭载了四种人源重编程基因OCT3/4、KLF4、SOX2、c-MYC 以及EGFP、Puro抗性基因。通过导入siRNA※来去除隐形RNA载体。
※对于使用SRV™ iPSC-1 Vector的实验，请单独购买siRNA。使用SRV™ iPSC-1 Vector的iPS细胞诱导方案中记载了所需siRNA的序列信息。
iPS细胞制备流程：使用SRV™ iPSC-1 Vector将成纤维细胞诱导为iPS细胞的示例
此数据为使用细胞基质（iMatrix511）和培养基（StemFit® Basic02N）的内部数据。如果使用其他基质或培养基，请考虑实验方案的适配性。
◆SRV™ iPSC-2 Vector
伴随着miR-302的表达而响应并自动去除载体的类型，适用于外周血或脐带血中含有的单核细胞的重编程！
SRV™ iPSC-2 Vector是一款经基因表达水平优化的，用于外周血单核细胞（PBMC）和CD34阳性细胞制备iPS细胞的产品，它搭载了四种人源重编程基因OCT3/4、KLF4、SOX2、c-MYC 以及EGFP、Puro抗性基因。该隐形RNA载体通过响应miR-302 的表达而自动清除。
iPS细胞制备流程 : 使用SRV™ iPSC-2 Vector将血细胞（单核细胞）诱导为iPS细胞的示例
此数据为使用细胞基质（iMatrix511）和培养基（StemFit® BasicAK02N）的内部数据。如果使用其他基质或培养基，请考虑实验方案的适配性。
◆SRV™ control Vector
通过隐形RNA载体确认导入的基因在各种细胞中的活性
SRV™ control Vector 是一种搭载了荧光蛋白EGFP的隐形RNA载体。
可以通过将该载体的基因导入到各种细胞来确认隐形RNA载体的导入效率。
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SRV™ control Vector基因导入HDF细胞（人成纤维细胞）的结果（MOI=3）。 |
隐形RNA载体导入到人软骨原代培养细胞中的结果（MOI=20）。 （与近畿大学寺村教授的共同研究） |
SRV可以导入到多种细胞中，而且不论是分裂细胞还是非分裂细胞均可高效导入，但请根据使用的靶细胞，提前摸索MOI值。
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产品编号 |
生产商编号 |
产品名称 |
规格 |
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385-19071 |
S1011624P |
SRV™ iPSC-1 Vector |
3×106 CIU/tube 以上 |
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389-19091 |
S1011694P |
SRV™ iPSC-2 Vector |
3×106 CIU/tube 以上 |
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381-19051 |
S0011590P |
SRV™ control Vector |
5×106 CIU/tube以上 |
请在前面提到的级别或更高级别的实验室中进行实验。对于基因重组实验，需在BSL2实验室进行。
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关于iPS细胞技术相关专利及产品使用的通知 SRV 产品（SRV™ iPSC-1 Vector, SRV™ iPSC-2 Vector）基于iPS Academia Japan公司和Tokiwa-Bio公司签订的共享iPS细胞技术相关专利 的协议进行售卖。如果以营利为目的使用SRV开发和售卖产品等，那么请另行与iPS Academia Japan公司和Tokiwa-Bio公司签订技术相关的 专利协议。 如果是非营利组织或以学术，教育为目的使用则为非营利目的。详情请通过以下联系方式进行咨询。 联系方式： iPS Academia Japan, Inc. 〒606-8501 京都市左京区吉田本町 36 番地 1 京都大学国际科学创新栋 東馆 207 E-mail : license@ips-ac.co.jp（专利部门） |
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