Recombinant Human Soluble TNF-α (Trimeric form)

产品编号

JP520-10μg
Recombinant Human Soluble TNF-α (Trimeric form)
10μg

356

JP520-100μg
Recombinant Human Soluble TNF-α (Trimeric form)
100μg

1298

JP520-1mg
Recombinant Human Soluble TNF-α (Trimeric form)
1mg

6898

Species
Gene ID
Accession
Source
Length
MW
Tag

Human
7124
JP1375
E. coli
157aa
17.3kDa
No

蛋白信息(About this protein)

名称(Name)
Recombinant Human Soluble TNF-α (Trimeric form);重组可溶性人肿瘤坏死因子α (三聚体)

别名(Synonyms)
Cachetin; DIF; TNF; tnfa; tnf-a; TNFSF1A; TNFSF2; APC1 protein; Cachectin; DIF; TNF, monocyte-derived; TNF-a; TNF-alphacachectin; TNFATNF, macrophage-derived; TNFSF2TNF superfamily, member 2; tumor necrosis factor; tumor necrosis factor (TNF superfamily, member 2); tumor necrosis factor alpha; Tumor necrosis factor ligand superfamily member 2; tumor necrosis factor-alpha

产品简介(Background)
Recombinant Human TNF-α contains soluble cytokines (77-233aa) of the protein. This protein was expressed in E.coli and purified without tag. It is expressed as soluble trimer, which has been validated by Size-exclusion chromatography. Apoptosis induced experiments confirmed that the protein had high biological activity.
TNF-α is a multifunctional proinflammatory cytokine that belongs to the tumor necrosis factor (TNF) superfamily,and it produced by various immune cells, including T cells, B cells, natural killer cells and macrophages. As a transmembrane protein, TNF-α’s membrane-bound site can be cleaved by the metalloprotease ADAM17/TACE, releasing the soluble cytokine into the extracellular space to form polymers [1-2]. The cellular response to TNF-α is mediated through the receptors TNFR1 and TNFR2. TNFR1 can be activated by both the membrane-bound and soluble trimeric forms of TNF-α, and resulting the downstream apoptosis signaling pathway. While the TNFR2 responds to the membrane-bound form of TNF-α, and promotes T cell activation and proliferation [3]. TNF-α plays a key regulatory role in inflammation and host defense against bacterial infection. The role of TNF-α in autoimmunity is underscored by blocking TNF-α action to treat rheumatoid arthritis and Crohn’s disease.

产品用途(Applications)
Sandwich ELISA, Cell Culture, Functional Studies, Mass Spectrometry, HPLC, SDS-PAGE

外观(Physical appearance)
Liquid

活性(Biological activity)
Fully biologically active when compared to standard. The ED50 as determined by the dose-dependent Killing/apoptosis of L-929 cells is 0.05ng/ml corresponding to a Specific Activity of 2×107 units/mg.

浓度(Concentration)
1mg/ml

纯度(Purity)
Sterile, >98% as determined by SDS-PAGE

储存液(Storage buffer)
PBS (pH7.4)

本产品纯度高,并经过滤除菌处理。本产品经SDS-PAGE电泳检测蛋白纯度和分子量参考图1。本产品经过滤除菌处理,可以直接用于培养细胞的刺激。

图1. Recombinant Human Soluble TNF-α (Trimeric form) (JP520)的SDS-PAGE电泳检测图。本产品经BeyoGel? Plus PAGE预制胶(Hepes, 4-20%, 10孔) (JP010523)电泳,蛋白Marker (M)为BeyoColor?彩色预染蛋白分子量标准(6.5-270kD) (JP010071/JP010072),后续经BeyoBlue?考马斯亮蓝超快染色液(JP010017F)染色。实际效果会因样品种类、检测仪器等的不同而存在差异,图中数据仅供参考。
本产品可有效激活NF-κB的核转运信号通路,使JP6 (REL-associated protein, Rel-A)转移到细胞核内。稳定表达EGFP-JP6的HeLa细胞(C8001)经终浓度为10ng/ml的本产品刺激后EGFP-JP6进入细胞核,需要注意的是随着时间的延长EGFP-JP6会出核再次回到细胞质中,因此加入本产品后观察EGFP-JP6进入细胞核理想的时间为15-60分钟(图2)。

图2. Recombinant Human Soluble TNF-α (Trimeric form) (JP520)激活NF-κB信号通路诱导核转运的效果图。稳定表达EGFP-JP6的HeLa细胞(C8001)加入或不加入终浓度为10ng/ml的本产品,分别在0、30、60和120分钟用荧光显微镜进行拍照。可见在静息状态(Inactive state)下(Control),EGFP-JP6均匀分布在细胞质中(第1行);加入TNF-α刺激后,激活状态(Active state)下EGFP-JP6进入细胞核内(第2行,30分钟),但是随着时间的延长EGFP-JP6会出核再次回到细胞质中(第2行,120分钟)。实际效果会因实验仪器、检测条件等的不同而存在差异,图中效果仅供参考。
本产品与SM-164 (XIAP抑制剂)联合使用可有效诱导细胞凋亡。100nM SM-164 (XIAP抑制剂) (SJP114)与不同浓度的本产品组成的细胞凋亡诱导剂,诱导BGC-823 (人胃癌细胞)(C6123)细胞凋亡的效果参考图3。

图3. Recombinant Human Soluble TNF-α (Trimeric form) (JP520)诱导细胞凋亡效果图。BGC-823 (人胃癌细胞) (C6123)经100nM SM-164 (XIAP抑制剂) (SJP114)与相应浓度的本产品组成的细胞凋亡诱导剂处理5-6小时,后续采用YO-PRO-1 (凋亡与坏死细胞绿色荧光探针) (C2022)对细胞进行染色。图中可见TNF-α三聚体(Trimer)的本产品比常规的TNF-α单体(monomer)有更强的细胞凋亡诱导效果。实际效果会因实验仪器、检测条件等的不同而存在差异,图中效果仅供参考。
本产品经尺寸排阻层析(Size-exclusion chromatography, SEC)验证为三聚体。人体中TNF-α为26kDa的单次跨膜蛋白,TNF-α被TACE/ADAM17 (TNF-α Converting Enzyme/A Disintegrin and Metalloprotease 17)在Ala76-Val77之间切割,成为游离于细胞膜外可溶形式的TNF-α (77-233aa),无论是单次跨膜的TNF-α,还是游离于细胞膜外可溶形式的TNF-α,都以同源三聚体的构象行使其生物活性[4]。参考图4,本产品经16/60 Beyodex? 200pg验证为三聚体。

图4. Recombinant Human Soluble TNF-α (Trimeric form) (JP520)经使用16/60 Beyodex? 200pg进行凝胶过滤层析(也称尺寸排阻层析)分析确认为三聚体的参考图。牛血清白蛋白(Bovine Serum Albumin, BSA)分子量约为66kDa,是一种常见的蛋白分子量标准,在使用16/60 Beyodex? 200pg检测中A280nm实际出峰位置为78min (见绿色实线)。如果TNF-α为单体形式(TNF-α Monomer, 17.3kDa),那么在使用16/60 Beyodex? 200pg检测中A280nm理论出峰位置应为95min (见紫色虚线)。本产品在使用16/60 Beyodex? 200pg检测中A280nm实际出峰位置为86min (见蓝色实线),符合TNF-α三聚体形式(TNF-α Trimer, 51.9kDa)的出峰位置。实际检测结果可能会因样品和检测条件等的不同而存在差异,结果图仅供参考。
包装清单:

产品编号
产品名称
包装

JP520-10μg
Recombinant Human Soluble TNF-α (Trimeric form)
10μg

JP520-100μg
Recombinant Human Soluble TNF-α (Trimeric form)
100μg

JP520-1mg
Recombinant Human Soluble TNF-α (Trimeric form)
1mg


说明书
1份

保存条件:
-20℃保存,一年有效。-80℃保存,可以保存更长时间。
注意事项:
由于蛋白的每次冻融均会引起部分失活,所以首次配制成相应浓度的储存液后,须分装后-20℃或更低温度冻存,尽量避免反复冻融。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

Aniline Blue (Water Soluble) 苯胺蓝(水溶)


描述

Aniline Blue (Water Soluble) 苯胺蓝(水溶)

 

产品信息

产品名称

产品编号 规格            价格(元)    
Aniline Blue (Water Soluble) 苯胺蓝(水溶)     MS4024-25G     25g

90

产品描述

苯胺蓝(水溶)(Aniline Blue, Water Soluble)是一种可溶的生物染料。在组织学和细胞学中用作一种对比染色剂(Contrast stain),也是一种pH指示剂(pH 10.0-13.0)。与酸性品红一起,用作Mallory结缔组织染色剂。也能用于揭示植物组织胼胝质结构。

产品特性

同义名:Water-soluble aniline blue;Aniline blue sodium salt; Acid blue 22; China blue; 

Soluble Blue B;C.I. 42755;水溶苯胺蓝;酸性蓝22;水溶蓝;可溶性蓝;中国蓝;

CAS NO:28631-66-5
颜色指标:42755 级别:生物染色级(BS Grade)
分子式:C32H25N3Na2O9S3 分子量:737.73g/mol
外观:蓝色粉末 溶解性:溶于水,微溶于乙醇
化学结构式:

保存与运输方法

保存:室温密封避光干燥保存,3年有效。

运输:室温运输。

注意事项

1)   本品仅用作科研用途,绝不可用于临床诊断或治疗药物,绝不可用做食品或药品。

2)   为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

 

 

 

可溶性人重组RANKL RANKL, Soluble (human) (rec.)

可溶性人重组RANKL

RANKL, Soluble (human) (rec.)

 

 

可溶性人重组RANKL RANKL, Soluble (human) (rec.)

 

图1:人RANKL(产品编号:AG-40B-0008)和鼠RANK:Fc(产品编号:AG-40B-0092)间的免疫结合检测。

图1:小鼠RANK受体上的EC50 =15 ng/mL。未显示,人RANK受体上的EC50 =1 ng/mL。

 

 

RANKL是一种破骨细胞分化和激活因子,有增强树突状细胞刺激天然T细胞增殖的能力,同时也是T细胞与树突状细胞间相互作用的重要调节剂,可能在调节T细胞依赖性免疫应答中发挥作用。现有文献表明RANKL在乳腺癌的发展中起重要作用。

 

 

产品规格/储存说明

 

产品详情

 

别名:TRANCE;ODF;OPGL;TNFSF11;CD254

产品类型:蛋白

 

 

产品特性

 

来源:HEK 293细胞

序列:人RANKL(aa 152-317)融合至FLAG®-tag的N端

交叉反应:人、小鼠

特异性:结合人和小鼠RANK

MW:~28 kDa (SDS-PAGE)

纯度:≥95% (SDS-PAGE)

内毒素含量:<0.01 EU/μg纯化蛋白(LAL 测试;Lonza)

浓度:0.1 mg/mL溶解后

重组:用100 μL无菌水进行重组

制剂:冻干、含PBS

其他产品数据:UniProt link O14788:RANKL (human)

 

 

运输/储存条件

 

运输:干冰

期储存温度:+4°C

长期储存温度:-20°C

建议储存条件:重组后准备等分试样,并储存于-20°C下。

建议储存条件:避免冻结/解冻循环。

建议储存条件:打开并重组前离心冻干小瓶。

建议储存条件:至少含0.1%BSA的PBS需用于进一步稀释。

使用事项/稳定性:自生产后于-20°C下储存,至少可稳定六个月;

使用事项/稳定性:于-20°C下储存,等分试样可稳定长达三个月。

 

◆产品列表

 

 

产品编号

产品名称

包装

AG-40B-0008-C010

RANKL, Soluble (human) (rec.) MultiPack
重组人可溶性RANKL套装

10 μg

AG-40B-0008-3010

RANKL, Soluble (human) (rec.) MultiPack
重组人可溶性RANKL套装

3×10 μg

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产品编号 产品名称 包装
294-67001 TRAP/ALP stain kit
TRAP/ALP双重染色试剂盒
60次

 

■ WB/FC/ELISA用检测抗体

产品编号 产品名称 包装
AG-25A-0016-C100 anti-RANKL (human), pAb
抗人RANKL多抗
100 μg

 

■ 易于多聚化、体内稳定性更佳

产品编号 产品名称 包装
AG-40B-0059 Fc (human):RANKL, Soluble (mouse)   (rec.)
重组型Fc(人):RANKL(小鼠)
10 μg

 

 

※ 本页面产品仅供研究用,研究以外不可使用。

 

参考文献

 

 

1.

Receptor activator of NF-κB and osteoprotegerin expression by human microvascular endothelial cells, regulation by inflammatory cytokines, and role in human osteoclastogenesis: P. Collin-Osdoby, et al.; J. Biol. Chem. 276, 20659 (2001)

 

2.

Functional expression of receptor activator of nuclear factor kappaB in Hodgkin disease cell lines: P. Fiumara, et al.; Blood 98, 2784 (2001)

 

3.

Suppression of IL-12 Production by Soluble CD40 Ligand: Evidence for Involvement of the p44/42 Mitogen-Activated Protein Kinase Pathway: M. Wittmann, et al.; J. Immunol168, 3793 (2002)

 

4.

Induction of Cell Cycle Arrest and Apoptosis by the Proteasome Inhibitor PS-341 in Hodgkin Disease Cell Lines Is Independent of Inhibitor of Nuclear Factor-kappaB Mutations or Activation of the CD30, CD40, and RANK Receptors: B. Zheng, et al.; Clin. Cancer Res. 10, 3207 (2004)

 

5.

Osteoprotegerin production by human intestinal epithelial cells: a potential regulator of mucosal immune responses: K. Vidal, et al.; Am. J. Physiol. Gastrointest. Liver Physiol. 287, G836 (2004)

 

6.

A novel in vivo role for osteoprotegerin ligand in activation of monocyte effector function and inflammatory response: D. Seshasayee, et al.; J. Biol. Chem279, 30202 (2004)

 

7.

Mechanisms of spontaneous osteoclastogenesis in cancer with bone involvement: I. Roato, et al.; FASEB J. 19, 228 (2005)

 

8.

Icariin inhibits the osteoclast formation induced by RANKL and macrophage-colony stimulating factor in mouse bone marrow culture: K.M. Chen, et al.; Pharmazie 62, 388 (2007)

 

9.

Receptor Activator of Nuclear Factor Kappa B Ligand (RANKL) Modulates the Expression of Genes Involved in Apoptosis and Cell Cycle in Human Osteoclasts: E. Rimondi, et al.; Anatom. Rec. 290, 838 (2007)

 

10.

Evaluating the Bone Tissue Regeneration Capability of the Chinese Herbal Decoction Danggui Buxue Tang from a Molecular Biology Perspective: W.-L. Wang, et al.; Biomed. Res. Int. 2014, 853234 (2014)

 


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