HP Total RNA Kit R6812
HP组织RNA提取试剂盒
| Poduct Number | Preps | Price |
|---|---|---|
| R6812-00 | 5 | ￥150 |
| R6812-01 | 50 | ￥1200 |
| R6812-02 | 200 | ￥3800 |
参数
组分
流程
标签归档：rna
Monad-莫纳生物代理,Total RNA Kit II R6934 总RNA提取试剂盒II
Total RNA Kit II R6934
总RNA提取试剂盒II
| Poduct Number | Preps | Price |
|---|---|---|
| R6934-00 | 5 | ￥150 |
| R6934-01 | 50 | ￥900 |
| R6934-02 | 200 | ￥3500 |
参数
组分
流程
Monad-莫纳生物代理,Total RNA Kit I R6834 总RNA提取试剂盒I
Total RNA Kit I R6834
总RNA提取试剂盒I
| Poduct Number | Preps | Price |
|---|---|---|
| R6834-00 | 5 | ￥135 |
| R6834-01 | 50 | ￥900 |
| R6834-02 | 200 | ￥3500 |
参数
组分
流程
Monad-莫纳生物代理,Mag-Bind® RNA Clean Up Kit M6248 磁珠法RNA纯化试剂盒
Mag-Bind® RNA Clean Up Kit M6248
磁珠法RNA纯化试剂盒
| Poduct Number | Preps | Price |
|---|---|---|
| M6248-01 | 50 | ￥450 |
| M6248-02 | 200 | ￥1650 |
该试剂盒适合于从酶促反应液纯化以及浓缩RNA或者对使用酚氯仿抽提所得的RNA进行除盐。该试剂盒操作简单，纯化的RNA可以用于任何下游的操作。磁珠操作可以和各种型号的自动化装置进行配合使用。
快速 — 96个样品可以同时进行操作
方便 — 可同各种核酸纯化仪配合使用,自动化操作
安全 — 无有害的酚氯仿抽提
组分
Monad-莫纳生物代理,RNA Probe Purification Kit R6249 RNA探针回收试剂盒
RNA Probe Purification Kit R6249
RNA探针回收试剂盒
| Poduct Number | Preps | Price |
|---|---|---|
| R6249-00 | 5 | ￥100 |
| R6249-01 | 50 | ￥924 |
| R6249-02 | 200 | ￥3520 |
E.Z.N.A RNA Probe Purification Kit 适合于从各种转录产物中纯化高达至50ug的总RNA 或低至pg级的RNA。HiBind 结合柱和理想缓冲液保证纯化的RNA 不带有核苷酸，游离的标记物，酶以及各种盐。
快速 ― 在≦20min内就可以从各种转录产物中回收RNA。
可靠 ― 最适的缓冲液保证了高纯度的DNA
安全 ― 这是无有机物的抽提
质量 ― 纯化得的RNA 可做任何下游应用
组分
Monad-莫纳生物代理,MicroElute® RNA Clean Up Kit R6247 微量RNA纯化试剂盒
MicroElute® RNA Clean Up Kit R6247
微量RNA纯化试剂盒
| Poduct Number | Preps | Price |
|---|---|---|
| R6247-00 | 5 | ￥110 |
| R6247-01 | 50 | ￥990 |
| R6247-02 | 200 | ￥3600 |
该试剂盒采用超薄的结合柱，适合于从各种RNA溶液中或RNA反应体系中纯化或浓缩RNA。一次实验可纯化低至pg级的微量RNA或高至50µg的RNA。纯化的RNA可直接用RT-PCR,Northern杂交,定量RT-PCR,核酸保护和体外转录等应用。
首先加入结合液至RNA溶液中调节结合条件后，并转移至RNA结合柱子中离心吸附RNA后，经过两次快速洗涤去除杂质和盐分，最后用DEPC水洗脱出高纯度的RNA。由于采用了超薄的RNA结合柱，最后可用低至10µl的DEPC水洗脱RNA，因而纯化的RNA可达至比较高的浓度，起到浓缩RNA的目的。
快速 — 10分钟内可以完成一次纯化操作
可靠 — 保证每一次所得产物的纯度
高结合力 — 可结合50µg的RNA
高浓度 — 洗脱体积可低至15µl,产物浓度高
参数
组分
流程
Monad-莫纳生物代理,Poly-Gel RNA Extraction Kit R6376 RNA聚丙烯酰胺凝胶回收试剂盒
Poly-Gel RNA Extraction Kit R6376
RNA聚丙烯酰胺凝胶回收试剂盒
| Poduct Number | Preps | Price |
|---|---|---|
| R6376-00 | 5 | ￥150 |
| R6376-01 | 20 | ￥540 |
| R6376-02 | 50 | ￥1242 |
Poly-Gel RNA Extraction Kit采用硅胶柱纯化方式，适合于从各种浓度各种类型的聚丙烯酰胺凝胶中回收RNA。纯化过程无需用到有害的有机物萃取及乙醇沉淀，大大减少了操作时间，提高了RNA回收效率。回收产物可用于RT-PCR、Northern杂交等实验。
RNA经PAGE凝胶电泳分离后，切下含目标RNA片段的凝胶块，用两块无RNase的玻璃片压碎凝胶块(因聚丙烯酰胺胺凝胶不能溶解，这一步要尽量压碎凝胶)，用含有EDTA的缓冲液浸泡凝胶后，转移至过滤柱中过滤去除凝胶碎片，加入新型的结合缓冲液后，转移至HiBind®离心柱，离心结合RNA，经简单的洗涤后，用DEPC-Water洗脱RNA。
可靠 — 保证每一次所得产物的纯度
安全 — 无须接触有害的有机物
高质 — 高纯的RNA适合于各种应用
参数
组分
SYBR Green II RNA Gel Stain (10,000× in DMSO) 核酸凝胶染料
SYBR Green II；GoldView；Acridine Orange 吖啶橙；GelRed； GelGreen；溴化乙锭（EB）；SYBR Green I；
SYBR Green II是目前已知电泳凝胶中RNA检测最灵敏的染料之一，在琼脂糖或聚丙烯酰胺凝胶中最低检到100pg RNA或ssDNA的单一条带（使用254nm紫外反射光源照射，并用宝丽来667黑白胶片和SYBR滤光片拍照）。即使用300nm透射光也能检测到500pg RNA的单一条带。SYBR Green II的灵敏度明显强于溴化乙啶（EB）。标准琼脂糖迷你胶EB最低检出1.5ng单链核酸的单一条带（使用300nm透射光照射并用橙-红明胶滤光片拍照）。
SYBR Green II在变性琼脂糖/甲醛凝胶和聚丙烯酰胺/尿素凝胶中的检测灵敏度有点降低，然而仍优于EB。为了获得最大的检测灵敏度，琼脂糖/甲醛凝胶必须在EB染色前清洗数小时。相反，不做任何的清洗或脱色步骤，用SYBR Green II染色的琼脂糖/甲醛凝胶或聚丙烯酰胺/尿素凝胶能检测到1ng RNA单一条带（254nm反射照明）和4ng RNA单一条带（300nm透射照明）。SYBR Green II在RNA检测具备这一卓越灵敏度的特性归因于几个因素，包括优越的荧光量子产量、结合能力和荧光增强。
本品为溶于DMSO 的10,000×的SYBR Green II RNA核酸染料，可用于：1）Northern Blot、起始位点作图或cDNA制备前对RNA产物的小量分析；2）高分辨率变性梯度凝胶电泳（DGGE）后对5S rRNA迁移方式的观察；3）单链构象多态性（SSCP）中的DNA染色；4）PCR扩增前对DNA染色。
保存与运输方法
保存：-20°C避光干燥保存，1年有效。
运输：冰袋运输。
注意事项
1） 必须警告用户注意，目前尚无关于SYBR Green II 对人体的致突变性或毒性的数据。由于该染料与核酸结合，应当被看作潜在诱变剂，使用时要小心谨慎。在处理DMSO储存液时应特别小心，因DMSO能促进有机分子进入组织。强烈建议处理DMO储存液需戴双层手套。和所有的核酸染料一样，含SYBR Green II RNA核酸染料的溶液需先穿过活性炭再丢弃。活性炭之后必须焚烧来破坏染料。
2） SYBR Green II可通过乙醇沉淀法从核酸中去除。异丙醇沉淀法去除效果稍差些。正丁醇萃取、氯仿萃取和酚萃取法无法有效去除该染料。
3） 先用EB染色的凝胶可接下来用SYBR Green II染色，根据电泳后染色（post-staining）的标准步骤操作。与直接用SYBR Green II染色相比较可能灵敏度有些降低。
4） 不要在玻璃器皿中稀释SYBR Green II储存液，因其会结合到玻璃上。在聚丙烯器皿中稀释储存液。
5） SYBR Green II不会干扰酶反应。
6） 当用SYBR Green II染Northern或Southern Blot凝胶，建议在预杂交液和杂交液内加入0.1%-0.3% SDS。
7） 不建议用254nm紫外透射仪对凝胶拍照，因紫外光源的轮廓会出现在照片上。需要使用允许525nm光透过且排斥其他波长光的滤光片。
8） 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
光谱特征
SYBR Green II RNA核酸染料可用常见的紫外反射和透射激发光源，以及手持式紫外灯检测。SYBR Green II的最大激发波长为497nm，但还有一个二级激发峰集中在254nm附近。与RNA结合的SYBR Green II的荧光发射集中在520nm。这些光谱特性让SYBR Green II适用于多种凝胶检测仪，从紫外反射（上紫外）和透射仪（下紫外）到氩离子激光器和水银灯激发的凝胶扫描仪。
使用方法
一、使用前准备工作
使用前将本品取出并回温至室温，使DMSO彻底解冻、溶液均一。于离心机上短暂离心确保所有溶液到管底。第一次使用时可将本品分装成多个小份后冻存，小份染料能更快溶解。
二、染色方法
1．电泳后染色（后染，推荐）
1）在非变性凝胶或变性聚丙烯酰胺/尿素或琼脂/甲醛凝胶上进行电泳。
【注】：其他凝胶基质未做测试，不确定染色效果如何。
2）稀释SYBR Green II储存液：对于非变性凝胶和变性聚丙烯酰胺/尿素凝胶，建议用TBE做1:10,000倍
稀释；对于变性琼脂糖/甲醛凝胶，建议用TBE做1:5,000倍稀释。
【注】：SYBR Green II染色对pH敏感，为获得最佳的灵敏度，应确认在染色温度下染色液的pH值在7.5-
8.0之间（pH8.0更佳）。
3）将凝胶小心的放入合适的容器中，比如聚丙烯容器。缓慢加入足量的SYBR Green II染色工作液浸没凝胶。用铝箔等盖住容器或将容器置于黑暗处使得染料避光。染色前没有必要洗掉凝胶上的尿素或甲醛。
4）室温轻摇凝胶。聚丙烯酰胺凝胶的最佳染色时间通常为10-40min，琼脂糖凝胶的通常为20-40min。凝胶厚度及琼脂糖或聚丙烯酰胺的比例不同，染色时间将有所不同。不需要脱色。染色液需保存在暗处（最好是冷藏）和重复使用3-4次。
【注】：用缓冲液制备的染色液置于4℃避光能放置1周或更久，置于室温避光能放3-4天。用水制备的染色液比缓冲液制备的稳定性差很多，建议24h内用完保证最大灵敏度。另外，用缓冲液（pH＞8.0或pH＜7.5）的缓冲液制备的染色液稳定性差很多，染色效率也会降低。
2．电泳前染色（预染）
1）配制成SYBR Green II预制凝胶
临灌胶前，按照每100ml凝胶中加入3-5µl SYBR Green II储存液（10,000× in DMSO）的比例加量。需注意到SYBR Green II热稳定性较差，不能在过热胶溶液中直接添加，需要等溶液冷却至50℃左右才能加染料。摇晃，震荡或翻转以保证染料充分混匀。
2）按照常规方法进行电泳。
三、观察和凝胶成像
3.1 使用300nm紫外透射光或254nm紫外反射光（灵敏度更高）照射染色凝胶。
3.2 为了最佳灵敏度，建议使用黑白胶片，可用专用的SYBR Green照相滤光片（Thermo fisher, #S7569）拍照。许多其他的黄色或绿色明胶或玻璃纸滤光片也能用来拍照，但绝大多数可能会减低灵敏度。EB染色凝胶拍照用的橙-红滤光片不适合于SYBR Green II染色凝胶。
3.3 用专用的SYBR Green照相滤光片（Thermo fisher, #S-7569）和Polaroid 667黑白胶片对凝胶进行拍照。染色凝胶基本无背景荧光，当检测少量RNA，允许长期胶片曝光。对于300nm透射，通常F-stop设置4.5时曝光1-2s足够。对于254nm反射（特别是手持灯），大约需要曝光1-1.5min以得到最大灵敏度。
相关产品
| 名称 | 规格 | |
| SYBR Green I Nucleic Acid Gel Stain (10,000× in DMSO) 核酸凝胶染料 | 100µl | |
| SYBR Green II RNA Gel Stain (10,000× in DMSO) RNA凝胶染料 | 100µl | |
| GoldView Nucleic Acid Gel Stain (10,000×) 核酸染料（10,000×） | 1ml | |
| MKRed Nucleic Acid Gel Stain (10,000× in Water) 核酸凝胶染料（效果同GelRed） | 500µl | |
| MKGreen Nucleic Acid Gel Stain (10,000× in Water) 核酸凝胶染料（效果同GelGreen） | 500µl | |
| Ethidium Bromide (EB)溴化乙锭（EB，粉末） | 1g |
SYBR Green II RNA Gel Stain (10,000× in DMSO) 核酸凝胶染料
SYBR Green II；GoldView；Acridine Orange 吖啶橙；GelRed； GelGreen；溴化乙锭（EB）；SYBR Green I；
SYBR Green II是目前已知电泳凝胶中RNA检测最灵敏的染料之一，在琼脂糖或聚丙烯酰胺凝胶中最低检到100pg RNA或ssDNA的单一条带（使用254nm紫外反射光源照射，并用宝丽来667黑白胶片和SYBR滤光片拍照）。即使用300nm透射光也能检测到500pg RNA的单一条带。SYBR Green II的灵敏度明显强于溴化乙啶（EB）。标准琼脂糖迷你胶EB最低检出1.5ng单链核酸的单一条带（使用300nm透射光照射并用橙-红明胶滤光片拍照）。
SYBR Green II在变性琼脂糖/甲醛凝胶和聚丙烯酰胺/尿素凝胶中的检测灵敏度有点降低，然而仍优于EB。为了获得最大的检测灵敏度，琼脂糖/甲醛凝胶必须在EB染色前清洗数小时。相反，不做任何的清洗或脱色步骤，用SYBR Green II染色的琼脂糖/甲醛凝胶或聚丙烯酰胺/尿素凝胶能检测到1ng RNA单一条带（254nm反射照明）和4ng RNA单一条带（300nm透射照明）。SYBR Green II在RNA检测具备这一卓越灵敏度的特性归因于几个因素，包括优越的荧光量子产量、结合能力和荧光增强。
本品为溶于DMSO 的10,000×的SYBR Green II RNA核酸染料，可用于：1）Northern Blot、起始位点作图或cDNA制备前对RNA产物的小量分析；2）高分辨率变性梯度凝胶电泳（DGGE）后对5S rRNA迁移方式的观察；3）单链构象多态性（SSCP）中的DNA染色；4）PCR扩增前对DNA染色。
保存与运输方法
保存：-20°C避光干燥保存，1年有效。
运输：冰袋运输。
注意事项
1） 必须警告用户注意，目前尚无关于SYBR Green II 对人体的致突变性或毒性的数据。由于该染料与核酸结合，应当被看作潜在诱变剂，使用时要小心谨慎。在处理DMSO储存液时应特别小心，因DMSO能促进有机分子进入组织。强烈建议处理DMO储存液需戴双层手套。和所有的核酸染料一样，含SYBR Green II RNA核酸染料的溶液需先穿过活性炭再丢弃。活性炭之后必须焚烧来破坏染料。
2） SYBR Green II可通过乙醇沉淀法从核酸中去除。异丙醇沉淀法去除效果稍差些。正丁醇萃取、氯仿萃取和酚萃取法无法有效去除该染料。
3） 先用EB染色的凝胶可接下来用SYBR Green II染色，根据电泳后染色（post-staining）的标准步骤操作。与直接用SYBR Green II染色相比较可能灵敏度有些降低。
4） 不要在玻璃器皿中稀释SYBR Green II储存液，因其会结合到玻璃上。在聚丙烯器皿中稀释储存液。
5） SYBR Green II不会干扰酶反应。
6） 当用SYBR Green II染Northern或Southern Blot凝胶，建议在预杂交液和杂交液内加入0.1%-0.3% SDS。
7） 不建议用254nm紫外透射仪对凝胶拍照，因紫外光源的轮廓会出现在照片上。需要使用允许525nm光透过且排斥其他波长光的滤光片。
8） 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
光谱特征
SYBR Green II RNA核酸染料可用常见的紫外反射和透射激发光源，以及手持式紫外灯检测。SYBR Green II的最大激发波长为497nm，但还有一个二级激发峰集中在254nm附近。与RNA结合的SYBR Green II的荧光发射集中在520nm。这些光谱特性让SYBR Green II适用于多种凝胶检测仪，从紫外反射（上紫外）和透射仪（下紫外）到氩离子激光器和水银灯激发的凝胶扫描仪。
使用方法
一、使用前准备工作
使用前将本品取出并回温至室温，使DMSO彻底解冻、溶液均一。于离心机上短暂离心确保所有溶液到管底。第一次使用时可将本品分装成多个小份后冻存，小份染料能更快溶解。
二、染色方法
1．电泳后染色（后染，推荐）
1）在非变性凝胶或变性聚丙烯酰胺/尿素或琼脂/甲醛凝胶上进行电泳。
【注】：其他凝胶基质未做测试，不确定染色效果如何。
2）稀释SYBR Green II储存液：对于非变性凝胶和变性聚丙烯酰胺/尿素凝胶，建议用TBE做1:10,000倍
稀释；对于变性琼脂糖/甲醛凝胶，建议用TBE做1:5,000倍稀释。
【注】：SYBR Green II染色对pH敏感，为获得最佳的灵敏度，应确认在染色温度下染色液的pH值在7.5-
8.0之间（pH8.0更佳）。
3）将凝胶小心的放入合适的容器中，比如聚丙烯容器。缓慢加入足量的SYBR Green II染色工作液浸没凝胶。用铝箔等盖住容器或将容器置于黑暗处使得染料避光。染色前没有必要洗掉凝胶上的尿素或甲醛。
4）室温轻摇凝胶。聚丙烯酰胺凝胶的最佳染色时间通常为10-40min，琼脂糖凝胶的通常为20-40min。凝胶厚度及琼脂糖或聚丙烯酰胺的比例不同，染色时间将有所不同。不需要脱色。染色液需保存在暗处（最好是冷藏）和重复使用3-4次。
【注】：用缓冲液制备的染色液置于4℃避光能放置1周或更久，置于室温避光能放3-4天。用水制备的染色液比缓冲液制备的稳定性差很多，建议24h内用完保证最大灵敏度。另外，用缓冲液（pH＞8.0或pH＜7.5）的缓冲液制备的染色液稳定性差很多，染色效率也会降低。
2．电泳前染色（预染）
1）配制成SYBR Green II预制凝胶
临灌胶前，按照每100ml凝胶中加入3-5µl SYBR Green II储存液（10,000× in DMSO）的比例加量。需注意到SYBR Green II热稳定性较差，不能在过热胶溶液中直接添加，需要等溶液冷却至50℃左右才能加染料。摇晃，震荡或翻转以保证染料充分混匀。
2）按照常规方法进行电泳。
三、观察和凝胶成像
3.1 使用300nm紫外透射光或254nm紫外反射光（灵敏度更高）照射染色凝胶。
3.2 为了最佳灵敏度，建议使用黑白胶片，可用专用的SYBR Green照相滤光片（Thermo fisher, #S7569）拍照。许多其他的黄色或绿色明胶或玻璃纸滤光片也能用来拍照，但绝大多数可能会减低灵敏度。EB染色凝胶拍照用的橙-红滤光片不适合于SYBR Green II染色凝胶。
3.3 用专用的SYBR Green照相滤光片（Thermo fisher, #S-7569）和Polaroid 667黑白胶片对凝胶进行拍照。染色凝胶基本无背景荧光，当检测少量RNA，允许长期胶片曝光。对于300nm透射，通常F-stop设置4.5时曝光1-2s足够。对于254nm反射（特别是手持灯），大约需要曝光1-1.5min以得到最大灵敏度。
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| SYBR Green I Nucleic Acid Gel Stain (10,000× in DMSO) 核酸凝胶染料 | 100µl | |
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| GoldView Nucleic Acid Gel Stain (10,000×) 核酸染料（10,000×） | 1ml | |
| MKRed Nucleic Acid Gel Stain (10,000× in Water) 核酸凝胶染料（效果同GelRed） | 500µl | |
| MKGreen Nucleic Acid Gel Stain (10,000× in Water) 核酸凝胶染料（效果同GelGreen） | 500µl | |
| Ethidium Bromide (EB)溴化乙锭（EB，粉末） | 1g |
RiboGreen RNA检测试剂
描述
RiboGreen RNA检测试剂
产品关键词
RiboGreen RNA Reagent；Picogreen dsDNA Reagent；双链DNA检测试剂；RNA定量试剂；ssDNA定量试剂；药物残留DNA检测；
产品信息
|
产品名称 |
产品编号 | 规格 | 价格（元） |
|
RiboGreen RNA Reagent RiboGreen RNA检测试剂 |
MF0785-100UL | 100 µL | 480 |
| RiboGreen RNA Reagent RiboGreen RNA检测试剂 | MF0785-500UL | 5×100 µL |
1480 |
| RiboGreen RNA Reagent RiboGreen RNA检测试剂 | MF0785-1ML | 10×100 µL |
2280 |
产品描述
RiboGreen是一种超灵敏的荧光核酸染料，用于溶液内RNA的定量检测。在大量分子生物学实验过程中对微量RNA的检测和定量特别重要，这些过程包括：体外转录RNA产量的测定，以及在进行Northern Blot、S1核酸酶实验、RNase保护实验、cDNA文库制备、逆转录PCR和差异显示PCR前对RNA浓度的测定。
核酸浓度测定最常见的方法是测量260nm波长处的吸光值（A260），然而，基于吸光值检测法主要的缺点在于蛋白和游离核苷酸对光信号具有较大的干扰；以及检测灵敏度较低（A260=0.1相当于溶液中4µg/mL的RNA）；而应用灵敏的荧光核酸染料能避免很多由于这些因素引起的问题。
RiboGreen能定量浓度低至1ng/mL的RNA，通过荧光酶标仪、标准的荧光光度计或滤光荧光计来测量。此探针与RNA结合后的最大激发波长~500nm，最大发射波长~525nm。用荧光酶标仪读数，200µL的反应体系可检测低至200pg RNA，这一灵敏度比基于溴化乙锭的荧光分析法高200倍，比基于紫外吸收峰的分析法高1000倍。使用两个染料浓度，RiboGreen可测量的RNA浓度线性范围可达3个数量级，从1ng/mL到1µg/mL RNA（见Fig 1）。高宽度实验（High-range assay）能定量1ng/mL-50ng/mL的RNA，低宽度实验（Low-range assay）能定量1ng/mL-50ng/mL的RNA，即使体系内存在核酸制备物中常见的几种杂质（包括：核苷酸、盐类、尿素、乙醇、氯仿、表面活性剂、蛋白和琼脂糖），也能维持这一线性关系。另外，RiboGreen也会结合DNA，先用DNase预处理混合样品，再用RiboGreen进行RNA选择性的定量分析。
Fig 1. 用RiboGreen RNA试剂测量RNA标准获得的标准曲线：High-range assay (A)和Low-range assay(B)。
我司（金畔生物）可根据用户需求提供多种规格的RiboGreen RNA检测试剂（RiboGreen RNA Reagent），本品以溶于DMSO的母液形式提供，浓度为200×（High-range assay），浓度为2000×（Low-range assay）。
若按照2ml反应体系来计算（比色皿），10×100 µL规格可做200次反应（High-range assay），10×100 µL规格可做2000次反应（Low-range assay）。
保存与运输方法
保存：2-6℃避光保存，亦可置于-20℃避光保存。至少1年有效。
运输：冰袋运输。
注意事项
1） 操作过程中，需注意防止RNase污染RiboGreen RNA Reagent。使用洁净的一次性手套来处理所有材料。
2） 目前尚无关于RiboGreen对人体的致突变性或毒性的数据。由于该染料与核酸结合，应当被看作潜在诱变剂，使用时要小心谨慎。在处理DMSO储存液时应特别小心，因DMSO能促进有机分子进入组织。染料的废弃处理应当符合当地的规定。
3） 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
需自备材料
1）无核酸酶水（比如：MF0416-100ML）
2）20× TE缓冲液（RNase-free）（比如：MS3542R-500ML）
3）RNA Standard（比如：MF0786-200UL）
4）【可选】荧光比色皿以及荧光光度计
5）【可选】全黑96孔板以及荧光酶标仪
反应缓冲液准备
TE buffer（10 mM Tris-HCl, 1 mM EDTA, pH 7.5）用来稀释RiboGreen试剂和RNA样品，必须保证TE buffer没有受到核酸及核酸酶的污染。在处理和准备各种材料及试剂时应佩戴一次性手套。所有的溶液应该存放在无菌的一次性塑料瓶或无核酸酶污染的玻璃瓶中。应使用无核酸酶污染的吸管。
【注意】：用户可直接购买商业化或自行配制1×TE buffer, Nuclease-free；或直接购买商业化或自行配制20×TE buffer, Nuclease-free。如果手头是20×TE buffer, Nuclease-free，于实验前，用Nuclease-free water稀释到1×TE buffer, Nuclease-free；
操作步骤
1.概述
在RiboGreen的RNA定量检测中，为了获得完全的线性动力学范围，需要使用两个不同的染料浓度。在准备RiboGreen的工作液之前（见下试剂准备），需要先决定是希望测定高宽度实验（High-range assay）（20ng/mL-500ng/mL RNA），还是低宽度实验（Low-range assay）（1ng/mL-50ng/mL RNA），或两个范围都要检测。
2.试剂准备
实验当天，在无菌的一次性聚丙烯塑料管内制备RiboGreen的水溶性工作液。避免使用玻璃器皿，因RiboGreen可能粘附到玻璃表面。制备好的RiboGreen工作液需避光保存。最好在工作液配制后数小时内用完，不要长期保存待用。
3.准备RNA标准曲线
对于标准曲线，可以使用商业化的RNA Standard，比如：普遍使用的16S和23S核糖体RNA；或其它纯化的RNA制品。有的时候，推荐使用与待测定样本类似的RNA标准来建立标准曲线。一般来说，绝大多数单链的RNA分子能产生几乎等同的荧光信号。在核苷、盐、尿素、乙醇、氯仿、去污剂、蛋白质和琼脂糖这些常见的污染核酸试剂的化合物存在时，RiboGreen的检测结果仍可维持良好的线性关系，即使荧光强度可能会受到影响（见附表3）。为了确保达到有效的对照，用于制备标准曲线的RNA溶液应该与待测样本保持一致，这样能保证含接近相似水平的杂质化合物。
3.1在塑料瓶中用1×TE buffer配制浓度为2 µg/mL RNA溶液。用比色杯在1cm长度通路下测量该RNA溶液在260 nm (A260)下的基本吸光值，A260＝0.05相当于RNA浓度2 µg/mL。
3.2制作High-range标准曲线时，通过稀释2 µg/mL RNA溶液配制一系列的2×终浓度RNA标准溶液至一次性无核酸酶的塑料管中，最后转移到比色皿或培养板中（参考表1）。
3.3制作Low-Range标准曲线时，通过稀释2 µg/mLRNA溶液配制一系列的2×终浓度RNA标准溶液至一 次性无核酸酶的塑料管中，最后转移到比色皿或培养板中（参考表2）。
3.4等体积混合RiboGreen试剂工作液 （见 2-试剂准备）和2×RNA标准溶液。于室温避光孵育2-5min。务必确保测量容器内加入了足够体积的测量液，对10×10mm比色皿来说，不能低于2 mL；对96孔板的各孔来说，不要低于200 µL。
3.5选择使用荧光光度计或荧光酶标仪来测定样本荧光值，选择标准的荧光素波长（激发~480nm，发射~520nm）。
3.6将每个样的荧光值减掉空白的荧光值。之后使用校正好的荧光值为纵坐标，RNA浓度为横坐标，来建立标准曲线。
4.样本分析
4.1用1×TE buffer稀释样品到合适体积（比如：1.0 mL到10×10 mm比色杯或100 µL到96孔微孔板）。最好每个待测样本做不只一个稀释倍数。
待测样本稀释倍数越高，越有助于降低特定污染物的干扰作用。然而,也要避免特别小的样本体积，因为难以准确测量。另外，同一个实验中，杂质水平尽量保持一致，要降低杂质引起的样品之间信号差异。 例如，如果一系列RNA样品含盐浓度相差很大，那么它们就无法用一个简单的标准曲线来进行比较。为了避免这样的问题，如果可能，调整所有样品中杂质浓度到相同水平。（见5-样本中的DNA清除）
4.2每个样品中加入等体积的RiboGreen测量试剂（见2-试剂准备），于室温避光孵育2-5min。
4.3选择与标准曲线测定时相同的仪器参数来测定样本荧光值。为了降低光漂白效应，所有样本的荧光测定时间保持不变。
4.4将每个样的荧光值减掉空白的荧光值。根据已经产生的RNA标准曲线来确定样本的RNA浓度。
4.5可能的话，通过做不同的样本稀释再重复测定，来验证定量结果。
5.样本中的DNA清除
RiboGreen也可以结合DNA。可以先用无RNA酶的DNA酶来去除样本中的DNA，从而避免由于DNA和RiboGreen结合产生的荧光干扰，确保样品中的荧光全部来自RiboGreen和RNA的结合。
5.1准备10× DNase digestion buffer：无核酸酶的200 mM Tris-HCl, pH 7.5, 100 mM MgCl2 , 20 mM CaCl2。
5.2向每个含DNA样品中加0.11倍体积的10×DNase digestion buffer。（例如，如果样品为9 mL，就加入1mL的10× buffer）。
5.3按照1 µg DNA添加~ 5 unit的无RNase的DNase I。
5.5 37°C孵育90min。
5.5用1×TE buffer至少10倍稀释样品以降低消化液中残留盐离子对RiboGreen测量产生干扰。
5.6按照上述步骤进行RiboGreen测定实验。
附表3 RNA制备产物中常见污染化合物对RiboGreen定量的影响
| 物质名称 | 最大耐受浓度 | 信号变化百分比（%） |
| Salts | ||
| Ammonium acetate | 20 mM | 4% decrease |
| Sodium acetate | 20 mM | 11% increase |
| Sodium chloride | 20 mM | 15% decrease |
| Zinc chloride | 1 mM | 9% decrease |
| Magnesium chloride | 0.5 mM | 9% decrease |
| Calcium chloride | 0.1 mM | 2% increase |
| Cesium Chloride | 10 mM | 8% decrease |
| Guanidinium thiocyanate | 10 mM | 9% decrease |
| Urea | 3M | 13% decrease |
| Organic Solvents | ||
| Phenol | 0.5% | 5% decrease |
| Ethanol | 20% | 10% decrease |
| Chloroform | 2% | 15% increase |
| Detergents | ||
| Sodium dodecyl sulfate | 0.05% | 10% decrease |
| Triton X-100 | 0.5% | 8% decrease |
| Proteins | ||
| Bovine serum albumin | 0.2% | 11% decrease |
| IgG | 0.02% | 4% decrease |
| Other Compounds | ||
| Formamide | 10% | 12% decrease |
| Sucrose | ＞500 mM | 4% decrease |
| Boric acid | 100 mM | 15% decrease |
| Polyethylene glycol | 10% | 10% decrease |
| Agarose | 0.2% | 3% increase |
RiboGreen RNA检测试剂
描述
RiboGreen RNA检测试剂
产品关键词
RiboGreen RNA Reagent；Picogreen dsDNA Reagent；双链DNA检测试剂；RNA定量试剂；ssDNA定量试剂；药物残留DNA检测；
产品信息
|
产品名称 |
产品编号 | 规格 | 价格（元） |
|
RiboGreen RNA Reagent RiboGreen RNA检测试剂 |
MF0785-100UL | 100 µL | 480 |
| RiboGreen RNA Reagent RiboGreen RNA检测试剂 | MF0785-500UL | 5×100 µL |
1480 |
| RiboGreen RNA Reagent RiboGreen RNA检测试剂 | MF0785-1ML | 10×100 µL |
2280 |
产品描述
RiboGreen是一种超灵敏的荧光核酸染料，用于溶液内RNA的定量检测。在大量分子生物学实验过程中对微量RNA的检测和定量特别重要，这些过程包括：体外转录RNA产量的测定，以及在进行Northern Blot、S1核酸酶实验、RNase保护实验、cDNA文库制备、逆转录PCR和差异显示PCR前对RNA浓度的测定。
核酸浓度测定最常见的方法是测量260nm波长处的吸光值（A260），然而，基于吸光值检测法主要的缺点在于蛋白和游离核苷酸对光信号具有较大的干扰；以及检测灵敏度较低（A260=0.1相当于溶液中4µg/mL的RNA）；而应用灵敏的荧光核酸染料能避免很多由于这些因素引起的问题。
RiboGreen能定量浓度低至1ng/mL的RNA，通过荧光酶标仪、标准的荧光光度计或滤光荧光计来测量。此探针与RNA结合后的最大激发波长~500nm，最大发射波长~525nm。用荧光酶标仪读数，200µL的反应体系可检测低至200pg RNA，这一灵敏度比基于溴化乙锭的荧光分析法高200倍，比基于紫外吸收峰的分析法高1000倍。使用两个染料浓度，RiboGreen可测量的RNA浓度线性范围可达3个数量级，从1ng/mL到1µg/mL RNA（见Fig 1）。高宽度实验（High-range assay）能定量1ng/mL-50ng/mL的RNA，低宽度实验（Low-range assay）能定量1ng/mL-50ng/mL的RNA，即使体系内存在核酸制备物中常见的几种杂质（包括：核苷酸、盐类、尿素、乙醇、氯仿、表面活性剂、蛋白和琼脂糖），也能维持这一线性关系。另外，RiboGreen也会结合DNA，先用DNase预处理混合样品，再用RiboGreen进行RNA选择性的定量分析。
Fig 1. 用RiboGreen RNA试剂测量RNA标准获得的标准曲线：High-range assay (A)和Low-range assay(B)。
我司（金畔生物）可根据用户需求提供多种规格的RiboGreen RNA检测试剂（RiboGreen RNA Reagent），本品以溶于DMSO的母液形式提供，浓度为200×（High-range assay），浓度为2000×（Low-range assay）。
若按照2ml反应体系来计算（比色皿），10×100 µL规格可做200次反应（High-range assay），10×100 µL规格可做2000次反应（Low-range assay）。
保存与运输方法
保存：2-6℃避光保存，亦可置于-20℃避光保存。至少1年有效。
运输：冰袋运输。
注意事项
1） 操作过程中，需注意防止RNase污染RiboGreen RNA Reagent。使用洁净的一次性手套来处理所有材料。
2） 目前尚无关于RiboGreen对人体的致突变性或毒性的数据。由于该染料与核酸结合，应当被看作潜在诱变剂，使用时要小心谨慎。在处理DMSO储存液时应特别小心，因DMSO能促进有机分子进入组织。染料的废弃处理应当符合当地的规定。
3） 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
需自备材料
1）无核酸酶水（比如：MF0416-100ML）
2）20× TE缓冲液（RNase-free）（比如：MS3542R-500ML）
3）RNA Standard（比如：MF0786-200UL）
4）【可选】荧光比色皿以及荧光光度计
5）【可选】全黑96孔板以及荧光酶标仪
反应缓冲液准备
TE buffer（10 mM Tris-HCl, 1 mM EDTA, pH 7.5）用来稀释RiboGreen试剂和RNA样品，必须保证TE buffer没有受到核酸及核酸酶的污染。在处理和准备各种材料及试剂时应佩戴一次性手套。所有的溶液应该存放在无菌的一次性塑料瓶或无核酸酶污染的玻璃瓶中。应使用无核酸酶污染的吸管。
【注意】：用户可直接购买商业化或自行配制1×TE buffer, Nuclease-free；或直接购买商业化或自行配制20×TE buffer, Nuclease-free。如果手头是20×TE buffer, Nuclease-free，于实验前，用Nuclease-free water稀释到1×TE buffer, Nuclease-free；
操作步骤
1.概述
在RiboGreen的RNA定量检测中，为了获得完全的线性动力学范围，需要使用两个不同的染料浓度。在准备RiboGreen的工作液之前（见下试剂准备），需要先决定是希望测定高宽度实验（High-range assay）（20ng/mL-500ng/mL RNA），还是低宽度实验（Low-range assay）（1ng/mL-50ng/mL RNA），或两个范围都要检测。
2.试剂准备
实验当天，在无菌的一次性聚丙烯塑料管内制备RiboGreen的水溶性工作液。避免使用玻璃器皿，因RiboGreen可能粘附到玻璃表面。制备好的RiboGreen工作液需避光保存。最好在工作液配制后数小时内用完，不要长期保存待用。
3.准备RNA标准曲线
对于标准曲线，可以使用商业化的RNA Standard，比如：普遍使用的16S和23S核糖体RNA；或其它纯化的RNA制品。有的时候，推荐使用与待测定样本类似的RNA标准来建立标准曲线。一般来说，绝大多数单链的RNA分子能产生几乎等同的荧光信号。在核苷、盐、尿素、乙醇、氯仿、去污剂、蛋白质和琼脂糖这些常见的污染核酸试剂的化合物存在时，RiboGreen的检测结果仍可维持良好的线性关系，即使荧光强度可能会受到影响（见附表3）。为了确保达到有效的对照，用于制备标准曲线的RNA溶液应该与待测样本保持一致，这样能保证含接近相似水平的杂质化合物。
3.1在塑料瓶中用1×TE buffer配制浓度为2 µg/mL RNA溶液。用比色杯在1cm长度通路下测量该RNA溶液在260 nm (A260)下的基本吸光值，A260＝0.05相当于RNA浓度2 µg/mL。
3.2制作High-range标准曲线时，通过稀释2 µg/mL RNA溶液配制一系列的2×终浓度RNA标准溶液至一次性无核酸酶的塑料管中，最后转移到比色皿或培养板中（参考表1）。
3.3制作Low-Range标准曲线时，通过稀释2 µg/mLRNA溶液配制一系列的2×终浓度RNA标准溶液至一 次性无核酸酶的塑料管中，最后转移到比色皿或培养板中（参考表2）。
3.4等体积混合RiboGreen试剂工作液 （见 2-试剂准备）和2×RNA标准溶液。于室温避光孵育2-5min。务必确保测量容器内加入了足够体积的测量液，对10×10mm比色皿来说，不能低于2 mL；对96孔板的各孔来说，不要低于200 µL。
3.5选择使用荧光光度计或荧光酶标仪来测定样本荧光值，选择标准的荧光素波长（激发~480nm，发射~520nm）。
3.6将每个样的荧光值减掉空白的荧光值。之后使用校正好的荧光值为纵坐标，RNA浓度为横坐标，来建立标准曲线。
4.样本分析
4.1用1×TE buffer稀释样品到合适体积（比如：1.0 mL到10×10 mm比色杯或100 µL到96孔微孔板）。最好每个待测样本做不只一个稀释倍数。
待测样本稀释倍数越高，越有助于降低特定污染物的干扰作用。然而,也要避免特别小的样本体积，因为难以准确测量。另外，同一个实验中，杂质水平尽量保持一致，要降低杂质引起的样品之间信号差异。 例如，如果一系列RNA样品含盐浓度相差很大，那么它们就无法用一个简单的标准曲线来进行比较。为了避免这样的问题，如果可能，调整所有样品中杂质浓度到相同水平。（见5-样本中的DNA清除）
4.2每个样品中加入等体积的RiboGreen测量试剂（见2-试剂准备），于室温避光孵育2-5min。
4.3选择与标准曲线测定时相同的仪器参数来测定样本荧光值。为了降低光漂白效应，所有样本的荧光测定时间保持不变。
4.4将每个样的荧光值减掉空白的荧光值。根据已经产生的RNA标准曲线来确定样本的RNA浓度。
4.5可能的话，通过做不同的样本稀释再重复测定，来验证定量结果。
5.样本中的DNA清除
RiboGreen也可以结合DNA。可以先用无RNA酶的DNA酶来去除样本中的DNA，从而避免由于DNA和RiboGreen结合产生的荧光干扰，确保样品中的荧光全部来自RiboGreen和RNA的结合。
5.1准备10× DNase digestion buffer：无核酸酶的200 mM Tris-HCl, pH 7.5, 100 mM MgCl2 , 20 mM CaCl2。
5.2向每个含DNA样品中加0.11倍体积的10×DNase digestion buffer。（例如，如果样品为9 mL，就加入1mL的10× buffer）。
5.3按照1 µg DNA添加~ 5 unit的无RNase的DNase I。
5.5 37°C孵育90min。
5.5用1×TE buffer至少10倍稀释样品以降低消化液中残留盐离子对RiboGreen测量产生干扰。
5.6按照上述步骤进行RiboGreen测定实验。
附表3 RNA制备产物中常见污染化合物对RiboGreen定量的影响
| 物质名称 | 最大耐受浓度 | 信号变化百分比（%） |
| Salts | ||
| Ammonium acetate | 20 mM | 4% decrease |
| Sodium acetate | 20 mM | 11% increase |
| Sodium chloride | 20 mM | 15% decrease |
| Zinc chloride | 1 mM | 9% decrease |
| Magnesium chloride | 0.5 mM | 9% decrease |
| Calcium chloride | 0.1 mM | 2% increase |
| Cesium Chloride | 10 mM | 8% decrease |
| Guanidinium thiocyanate | 10 mM | 9% decrease |
| Urea | 3M | 13% decrease |
| Organic Solvents | ||
| Phenol | 0.5% | 5% decrease |
| Ethanol | 20% | 10% decrease |
| Chloroform | 2% | 15% increase |
| Detergents | ||
| Sodium dodecyl sulfate | 0.05% | 10% decrease |
| Triton X-100 | 0.5% | 8% decrease |
| Proteins | ||
| Bovine serum albumin | 0.2% | 11% decrease |
| IgG | 0.02% | 4% decrease |
| Other Compounds | ||
| Formamide | 10% | 12% decrease |
| Sucrose | ＞500 mM | 4% decrease |
| Boric acid | 100 mM | 15% decrease |
| Polyethylene glycol | 10% | 10% decrease |
| Agarose | 0.2% | 3% increase |
RiboGreen RNA检测试剂
描述
RiboGreen RNA检测试剂
产品关键词
RiboGreen RNA Reagent；Picogreen dsDNA Reagent；双链DNA检测试剂；RNA定量试剂；ssDNA定量试剂；药物残留DNA检测；
产品信息
|
产品名称 |
产品编号 | 规格 | 价格（元） |
|
RiboGreen RNA Reagent RiboGreen RNA检测试剂 |
MF0785-100UL | 100 µL | 480 |
| RiboGreen RNA Reagent RiboGreen RNA检测试剂 | MF0785-500UL | 5×100 µL |
1480 |
| RiboGreen RNA Reagent RiboGreen RNA检测试剂 | MF0785-1ML | 10×100 µL |
2280 |
产品描述
RiboGreen是一种超灵敏的荧光核酸染料，用于溶液内RNA的定量检测。在大量分子生物学实验过程中对微量RNA的检测和定量特别重要，这些过程包括：体外转录RNA产量的测定，以及在进行Northern Blot、S1核酸酶实验、RNase保护实验、cDNA文库制备、逆转录PCR和差异显示PCR前对RNA浓度的测定。
核酸浓度测定最常见的方法是测量260nm波长处的吸光值（A260），然而，基于吸光值检测法主要的缺点在于蛋白和游离核苷酸对光信号具有较大的干扰；以及检测灵敏度较低（A260=0.1相当于溶液中4µg/mL的RNA）；而应用灵敏的荧光核酸染料能避免很多由于这些因素引起的问题。
RiboGreen能定量浓度低至1ng/mL的RNA，通过荧光酶标仪、标准的荧光光度计或滤光荧光计来测量。此探针与RNA结合后的最大激发波长~500nm，最大发射波长~525nm。用荧光酶标仪读数，200µL的反应体系可检测低至200pg RNA，这一灵敏度比基于溴化乙锭的荧光分析法高200倍，比基于紫外吸收峰的分析法高1000倍。使用两个染料浓度，RiboGreen可测量的RNA浓度线性范围可达3个数量级，从1ng/mL到1µg/mL RNA（见Fig 1）。高宽度实验（High-range assay）能定量1ng/mL-50ng/mL的RNA，低宽度实验（Low-range assay）能定量1ng/mL-50ng/mL的RNA，即使体系内存在核酸制备物中常见的几种杂质（包括：核苷酸、盐类、尿素、乙醇、氯仿、表面活性剂、蛋白和琼脂糖），也能维持这一线性关系。另外，RiboGreen也会结合DNA，先用DNase预处理混合样品，再用RiboGreen进行RNA选择性的定量分析。
Fig 1. 用RiboGreen RNA试剂测量RNA标准获得的标准曲线：High-range assay (A)和Low-range assay(B)。
我司（金畔生物）可根据用户需求提供多种规格的RiboGreen RNA检测试剂（RiboGreen RNA Reagent），本品以溶于DMSO的母液形式提供，浓度为200×（High-range assay），浓度为2000×（Low-range assay）。
若按照2ml反应体系来计算（比色皿），10×100 µL规格可做200次反应（High-range assay），10×100 µL规格可做2000次反应（Low-range assay）。
保存与运输方法
保存：2-6℃避光保存，亦可置于-20℃避光保存。至少1年有效。
运输：冰袋运输。
注意事项
1） 操作过程中，需注意防止RNase污染RiboGreen RNA Reagent。使用洁净的一次性手套来处理所有材料。
2） 目前尚无关于RiboGreen对人体的致突变性或毒性的数据。由于该染料与核酸结合，应当被看作潜在诱变剂，使用时要小心谨慎。在处理DMSO储存液时应特别小心，因DMSO能促进有机分子进入组织。染料的废弃处理应当符合当地的规定。
3） 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
需自备材料
1）无核酸酶水（比如：MF0416-100ML）
2）20× TE缓冲液（RNase-free）（比如：MS3542R-500ML）
3）RNA Standard（比如：MF0786-200UL）
4）【可选】荧光比色皿以及荧光光度计
5）【可选】全黑96孔板以及荧光酶标仪
反应缓冲液准备
TE buffer（10 mM Tris-HCl, 1 mM EDTA, pH 7.5）用来稀释RiboGreen试剂和RNA样品，必须保证TE buffer没有受到核酸及核酸酶的污染。在处理和准备各种材料及试剂时应佩戴一次性手套。所有的溶液应该存放在无菌的一次性塑料瓶或无核酸酶污染的玻璃瓶中。应使用无核酸酶污染的吸管。
【注意】：用户可直接购买商业化或自行配制1×TE buffer, Nuclease-free；或直接购买商业化或自行配制20×TE buffer, Nuclease-free。如果手头是20×TE buffer, Nuclease-free，于实验前，用Nuclease-free water稀释到1×TE buffer, Nuclease-free；
操作步骤
1.概述
在RiboGreen的RNA定量检测中，为了获得完全的线性动力学范围，需要使用两个不同的染料浓度。在准备RiboGreen的工作液之前（见下试剂准备），需要先决定是希望测定高宽度实验（High-range assay）（20ng/mL-500ng/mL RNA），还是低宽度实验（Low-range assay）（1ng/mL-50ng/mL RNA），或两个范围都要检测。
2.试剂准备
实验当天，在无菌的一次性聚丙烯塑料管内制备RiboGreen的水溶性工作液。避免使用玻璃器皿，因RiboGreen可能粘附到玻璃表面。制备好的RiboGreen工作液需避光保存。最好在工作液配制后数小时内用完，不要长期保存待用。
3.准备RNA标准曲线
对于标准曲线，可以使用商业化的RNA Standard，比如：普遍使用的16S和23S核糖体RNA；或其它纯化的RNA制品。有的时候，推荐使用与待测定样本类似的RNA标准来建立标准曲线。一般来说，绝大多数单链的RNA分子能产生几乎等同的荧光信号。在核苷、盐、尿素、乙醇、氯仿、去污剂、蛋白质和琼脂糖这些常见的污染核酸试剂的化合物存在时，RiboGreen的检测结果仍可维持良好的线性关系，即使荧光强度可能会受到影响（见附表3）。为了确保达到有效的对照，用于制备标准曲线的RNA溶液应该与待测样本保持一致，这样能保证含接近相似水平的杂质化合物。
3.1在塑料瓶中用1×TE buffer配制浓度为2 µg/mL RNA溶液。用比色杯在1cm长度通路下测量该RNA溶液在260 nm (A260)下的基本吸光值，A260＝0.05相当于RNA浓度2 µg/mL。
3.2制作High-range标准曲线时，通过稀释2 µg/mL RNA溶液配制一系列的2×终浓度RNA标准溶液至一次性无核酸酶的塑料管中，最后转移到比色皿或培养板中（参考表1）。
3.3制作Low-Range标准曲线时，通过稀释2 µg/mLRNA溶液配制一系列的2×终浓度RNA标准溶液至一 次性无核酸酶的塑料管中，最后转移到比色皿或培养板中（参考表2）。
3.4等体积混合RiboGreen试剂工作液 （见 2-试剂准备）和2×RNA标准溶液。于室温避光孵育2-5min。务必确保测量容器内加入了足够体积的测量液，对10×10mm比色皿来说，不能低于2 mL；对96孔板的各孔来说，不要低于200 µL。
3.5选择使用荧光光度计或荧光酶标仪来测定样本荧光值，选择标准的荧光素波长（激发~480nm，发射~520nm）。
3.6将每个样的荧光值减掉空白的荧光值。之后使用校正好的荧光值为纵坐标，RNA浓度为横坐标，来建立标准曲线。
4.样本分析
4.1用1×TE buffer稀释样品到合适体积（比如：1.0 mL到10×10 mm比色杯或100 µL到96孔微孔板）。最好每个待测样本做不只一个稀释倍数。
待测样本稀释倍数越高，越有助于降低特定污染物的干扰作用。然而,也要避免特别小的样本体积，因为难以准确测量。另外，同一个实验中，杂质水平尽量保持一致，要降低杂质引起的样品之间信号差异。 例如，如果一系列RNA样品含盐浓度相差很大，那么它们就无法用一个简单的标准曲线来进行比较。为了避免这样的问题，如果可能，调整所有样品中杂质浓度到相同水平。（见5-样本中的DNA清除）
4.2每个样品中加入等体积的RiboGreen测量试剂（见2-试剂准备），于室温避光孵育2-5min。
4.3选择与标准曲线测定时相同的仪器参数来测定样本荧光值。为了降低光漂白效应，所有样本的荧光测定时间保持不变。
4.4将每个样的荧光值减掉空白的荧光值。根据已经产生的RNA标准曲线来确定样本的RNA浓度。
4.5可能的话，通过做不同的样本稀释再重复测定，来验证定量结果。
5.样本中的DNA清除
RiboGreen也可以结合DNA。可以先用无RNA酶的DNA酶来去除样本中的DNA，从而避免由于DNA和RiboGreen结合产生的荧光干扰，确保样品中的荧光全部来自RiboGreen和RNA的结合。
5.1准备10× DNase digestion buffer：无核酸酶的200 mM Tris-HCl, pH 7.5, 100 mM MgCl2 , 20 mM CaCl2。
5.2向每个含DNA样品中加0.11倍体积的10×DNase digestion buffer。（例如，如果样品为9 mL，就加入1mL的10× buffer）。
5.3按照1 µg DNA添加~ 5 unit的无RNase的DNase I。
5.5 37°C孵育90min。
5.5用1×TE buffer至少10倍稀释样品以降低消化液中残留盐离子对RiboGreen测量产生干扰。
5.6按照上述步骤进行RiboGreen测定实验。
附表3 RNA制备产物中常见污染化合物对RiboGreen定量的影响
| 物质名称 | 最大耐受浓度 | 信号变化百分比（%） |
| Salts | ||
| Ammonium acetate | 20 mM | 4% decrease |
| Sodium acetate | 20 mM | 11% increase |
| Sodium chloride | 20 mM | 15% decrease |
| Zinc chloride | 1 mM | 9% decrease |
| Magnesium chloride | 0.5 mM | 9% decrease |
| Calcium chloride | 0.1 mM | 2% increase |
| Cesium Chloride | 10 mM | 8% decrease |
| Guanidinium thiocyanate | 10 mM | 9% decrease |
| Urea | 3M | 13% decrease |
| Organic Solvents | ||
| Phenol | 0.5% | 5% decrease |
| Ethanol | 20% | 10% decrease |
| Chloroform | 2% | 15% increase |
| Detergents | ||
| Sodium dodecyl sulfate | 0.05% | 10% decrease |
| Triton X-100 | 0.5% | 8% decrease |
| Proteins | ||
| Bovine serum albumin | 0.2% | 11% decrease |
| IgG | 0.02% | 4% decrease |
| Other Compounds | ||
| Formamide | 10% | 12% decrease |
| Sucrose | ＞500 mM | 4% decrease |
| Boric acid | 100 mM | 15% decrease |
| Polyethylene glycol | 10% | 10% decrease |
| Agarose | 0.2% | 3% increase |
RNATector-ICE Frozen Tissue Transition Solution 冰冻组织RNA稳定保存液
描述
RNATector-ICE Frozen Tissue Transition Solution
冰冻组织RNA稳定保存液
产品信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格（元） |
| RNATector-ICE Frozen Tissue Transition Solution
冰冻组织RNA稳定保存液 |
MF0410-100ML | 100ml | 760 |
产品描述
冰冻组织RNA稳定保存液（RNATector-ICE Frozen Tissue Transition Solution）是一种新型试剂，能使冰冻组织解冻并转变到易于匀浆方法处理的状态，从而提取高质量的RNA。当浸没在RNATector-ICE中的组织从坚硬的冰冻状态变柔软的过程中，该溶液可渗入组织，使RNase失活。组织一旦经RNATector-ICE溶液处理，就能在室温下操作而不用担心RNA降解。样品可在常温下称重，切割，或者进行多种实验而不影响RNA质量。
保存与运输方法
保存：室温保存，2年有效。
运输：室温运输。
注意事项
1）本产品适用于动物组织以及培养细胞、白细胞。
2）本品能用于肝、肾、脾、肺、心、胸腺、胰等组织的保存。
3）本品与商业化的大部分RNA提取试剂比如Trizol兼容。
4）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用方法
1）于实验前，将本品置于-80℃预冷。
2）样品保存：
A.动物组织：按100 mg组织使用≥1 mLRNATector-ICE的比例，将冰冻组织浸没于预冷的RNATector-ICE中。【注意】：组织块的厚度应不超过0.5 cm，否则会影响RNATector-ICE的渗透效率，导致RNA稳定效果变差。
B.培养细胞、白细胞：按照标准实验步骤，收集细胞，用PBS清洗后加入至少10倍体积RNATector-ICE，盖紧管盖，上下颠倒数次。此时沉淀是否被完全悬浮对实验无影响。
3） 将浸没于RNATector-ICE的组织转移至-20℃。至少16h后，组织即可匀浆进入后续提取过程；若不立即匀浆，组织可继续在-20℃稳定存放6个月。这个过程中，组织可从溶液中取出，在室温进行切割、称重等操作【注意：在室温暴露的时间不要超过30 min】后继续浸没在RNATector-ICE中保存。
4）RNA提取：将组织取出，用镊子轻轻挤掉多余的RNATector-ICE溶液，置于裂解液中，立刻匀浆。如果是细胞样品，10000 g，4℃离心1 min，弃上清，加入裂解液。
相关产品
| 货号 | 名称 | 规格 |
| MS5513-10ML | Diethyl Pyrocarbonate (DEPC) 焦碳酸二乙酯 | 10ml |
| MF0404-500ML | DEPC-treated Water (DNase、RNase free) DEPC水（无DNase、RNase ) | 500ml |
| MF0406-100ML | Surface RNase Remover固相RNase清除剂 | 100ml |
| MF0407-1.5ML | Solution RNase Remover液相RNase清除剂 | 1.5ml |
| MF0409-50ML | RNATector Stabilization Solution RNA稳定保存液 | 50ml |
| MF0410-100ML | RNATector-ICE Frozen Tissue Transition Solution冰冻组织RNA稳定保存液 | 100ml |
| MF0416-100ML | Nuclease-Free Water (not DEPC-Treated)无核酸酶水（非DEPC处理） | 100ml |
TRIzol Reagent 总RNA抽提试剂
描述
TRIzol Reagent 总RNA抽提试剂
关键词：TRIzol Reagent；酚氯仿抽提；RNase-free H2O； Total RNA 总RNA提取；RNAlater；Invitrogen 15596026；
产品信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 |
价格（元） |
| TRIzol Reagent 总RNA抽提试剂 | MF0403-100ML | 100ml |
450 |
产品描述
TRIzol Reagent是一种即用型且操作迅捷的总RNA抽提试剂，适用样本广泛，包括人、动物、植物、酵母或细菌来源的细胞和组织样本。TRIzol Reagent是一种含酚、异硫氰酸胍和其他专利成分的单相溶液，有利于抽提分子量大小不一的各种RNA类型。TRIzol Reagent能够良好的维持RNA完整性，因能高效抑制样本匀浆过程中细胞破损和细胞组分溶解时释放的RNase活性。TRIzol Reagent能够同时处理大量样本，且以优化的方式一步法提取RNA，整个过程可在一小时内完成。
TRIzol Reagent分离的总RNA无蛋白质和DNA污染，适用于RT-PCR、Northern Blot、Dot Blot、poly(A)+筛选、体外翻译、RNase保护分析和分子克隆等下游实验。
保存与运输方法
保存：2-8℃保存，至少一年有效。
运输：冰袋运输。
注意事项
1） 所有离心管、枪头以及相关溶液都必须无RNase污染。对于塑料制品、玻璃和金属器皿、实验仪器等可使用金畔生物的固相RNase清除剂去除RNase（货号：MF0406-100ML），或者用含0.01% DEPC（货号：MS5513-10ML）的去离子水浸泡过夜，之后高压灭菌、烘干。对于实验溶液可使用金畔生物的液相RNase清除剂（货号：MF0407-1.5ML）来处理或用DEPC处理水（比如：MF0404-500ML）来配制。
2） 对新鲜组织或细胞样本的抽提效果通常优于冻存的组织或细胞，由于组织或细胞冻融过程中可能存在一些RNase释放出来并酶切样品。若是不能及时抽提RNA，推荐先加入适量TRIzol Reagent，之后裂解样品后再冻存。
3） TRIzol Reagent含有毒物质，请在操作过程中注意好防护工作，戴好手套和护眼罩，避免皮肤接触。在通风橱内完成操作，避免呼吸道吸入。
4） 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用方法
1. 需要自行准备的材料
水浴锅或微量恒温仪（Heat block）
异丙醇
75%乙醇
含0.5% SDS的RNase-free水或RNase-free水或DEPC处理水
【可选】RNase-free的糖原（核酸助沉剂）
2. 样本要求
【重要】：样本收集后立即进行RNA分离，或样本收集后立即冻存样本并保存在-80℃或液氮中直至RNA抽提。
| 样本类型 | 每mlTRIzol Reagent处理的起始样本量 |
| 组织（新鲜组织或保存在RNAlater等稳定液内的组织） | 50~100mg组织 |
| 单层生长的细胞 | 1×105~1×107单细胞层（35mm培养皿，10cm2） |
| 悬浮生长的细胞 | 5-10×106个细胞（动植物或酵母来源）或1×107个
细胞（细菌来源） |
3. 样本准备与分相
3.1 根据起始材料用TRIzol Reagent裂解和匀浆样本。
◇组织样本
按比例每50~100mg 组织加1ml TRIzol Reagent，之后用合适的方法进行匀浆。通常用50~100mg组织即可获得足量的RNA，满足绝大多数下游实验。加入过量组织或过少TRIzol都容易导致RNA提取失败。
a）对于研钵研磨：将液氮冻存组织，放到研钵中研磨成粉末，之后加入1ml TRIzol，继续研磨至组织完全裂解【研磨要迅速，最好不要超过1min】。b）对于玻璃匀浆器匀浆：加入1ml TRIzol上下手动匀浆组织10~15次。c）对于机械匀浆器：将组织放入塑料管内，将塑料管置于冰浴烧杯内，加入1ml TRIzol，将分散器头垂直插入管内与组织直接接触，设置转速12,000~20,000 rpm，上下移动试管10~20次，直至组织完全打散，无明显可见大块即可。
◇单层生长的细胞
吸尽培养基，之后往35mm培养皿（10cm2）内加入1ml TRIzol Reagent，晃动3~5次，再用移液枪上下吹打3~5次，使其充分裂解。【按照10cm2培养面积加入1ml TRIzol加量。比如：六孔板每孔加入1ml TRIzol，12孔板每孔加0.5ml TRIzol】
◇ 悬浮生长的细胞
离心收集细胞，吸尽上清，每5-10×106个细胞（动植物或酵母来源）或1×107个细胞（细菌来源）加入1ml TRIzol Reagent【加入TRIzol前不要清洗细胞，否则会增加mRNA降解的可能性】。用枪吹打几次或适当涡旋，使其充分裂解。某些酵母和细菌如裂解不充分，可用匀浆器匀浆，使其完全裂解。
【注意】：样本体积不要超过加入TRIzol体积的10%。
3.2 特殊样本处理【可选】：对于某些富含蛋白，多糖或脂肪的样本，经TRIzol Reagent裂解后可能会有不溶物或油脂状漂浮物出现。此时需12,000g 4℃离心10min，之后吸取澄清的上清液至一新的离心管中。
3.3 室温孵育5min，使得核蛋白体完全分解。
3.4 按照每1ml TRIzol Reagent加入0.2ml 氯仿，盖紧盖子。涡旋混匀或用手剧烈晃动15s，室温孵育2~3min。
3.5 于12,000g 4℃离心15min。离心后混合物分为三层：下层酚-氯仿层，中间层，和上层无色的水相层。RNA无一例外的停留在水相层中。水相层的容量约为所加TRIzol Reagent体积的60%。用枪吸取上层无色水相到一新的离心管中，避免吸到任何中间层或下层成分。
【注意】：如果希望分离DNA和蛋白，请保留中间层和有机层。
4. RNA分离
4.1 RNA的沉淀：a）【可选】如果起始样本量比较少（＜106个细胞或＜10mg组织），加入5-10μg RNase-free的糖原作为核酸助沉剂到水相中。b）按每ml起初TRIzol Reagent加入0.5ml异丙醇，颠倒数次混匀，室温沉淀10min。如果希望提取microRNA等小RNA，推荐-70℃沉淀过夜。c）于12,000g 4℃离心10min，在管底可见RNA沉淀，弃上清。
4.2 RNA的清洗：a）按每ml起初TRIzol Reagent加入1ml 75%乙醇重悬沉淀。【注：RNA在75%乙醇中-20℃至少保存1年，4℃至少1周】；b）低速漩涡或颠倒混匀，于7,500g 4℃离心5min，弃上清。再用离心机甩一下（>5,000rpm, 离心1秒），小心吸尽液体。c）操作的最后，简单干燥RNA沉淀（空气干燥或真空干燥5~10min）。不要在真空管里离心干燥RNA。尤为重要的是，不能让RNA沉淀完全干燥，否则会极大的降低其可溶性。部分溶解的RNA样本的A260/A280比值＜1.6。
4.3 RNA的溶解：用20~50μl 无RNases水或含0.5% SDS的无RNases水溶解RNA，用枪上下吹打2~3次，使其充分溶解，置于-70℃保存或直接用于后续实验，如果后续要做酶切反应请勿用SDS。
【注意】：对于肝脏、胰腺、肾脏等RNase含量较高的组织，沉淀可用100%去离子甲酰胺（货号：MS5515-50ML）溶解。
5. RNA产量的测定
5.1 用无RNase水稀释RNA，之后测定在260nm和280nm的吸收值。
5.2 使用公式A260×稀释倍数×40= μg RNA/ml。
5.3 计算A260/A280比值，比值在1.8~2.0之间视为纯度较高，浓度＞4 μg/ml的样品适用于分光光度计测定。
5.4 进行甲醛变性琼脂糖电泳，确定RNA的完整性和污染情况。
相关产品
| 货号 | 名称 | 规格 |
| MF0403-100ML | TRIzol Reagent总RNA抽提试剂 | 100ml |
| MF0404-500ML | DEPC-treated Water (DNase、RNase free) DEPC水（无DNase、RNase ) | 500ml |
| MF0406-100ML | Surface RNase Remover固相RNase清除剂 | 100ml |
| MF0407-1.5ML | Solution RNase Remover液相RNase清除剂 | 1.5ml |
| MF0409-50ML | RNATector Stabilization Solution RNA稳定保存液 | 50ml |
| MF0410-100ML | RNATector-ICE Frozen Tissue Transition Solution冰冻组织RNA稳定液 | 100ml |
| MF0412-1G | Glycogen (5mg/ml)核酸助沉剂糖原（5mg/ml） | 1ml |
| MF0413-500UL | Glycogen (20mg/ml)核酸助沉剂糖原（20mg/ml） | 500µl |
| MF0416-100ML | DNase/RNase-Free Water | 100ml |
| MS5515-50ML | Formamide Deionized去离子甲酰胺 | 50ml |
附录1 常见问题与解决方案
| 出现问题 | 可能起因 | 解决方案 |
| 比预期产量低 | 样本未充分匀浆或裂解 | 降低起始样本量；剪切组织到更小块，确保组织完全浸泡到TRIzol Reagent以达到完全裂解。 |
| 沉淀未完全溶解 | 通过反复用枪吸取样品和在50~60℃加热样品的方式来增加溶解率 | |
| 样本被降解 | 样本未及时处理或收集后未马上冻存 | 样本必须在收集后马上处理或立即冻存 |
| 溶液或使用管子未经RNase去除处理 | 确保实验中所用到的耗材和溶液不受RNase污染 | |
| 样本制备物没有保存在适当温度下 | 将RNA样本保存在-70℃。 | |
| DNA污染 | 吸取水相层时带入中间/有机相层 | 不要尝试吸取离心分层后的所有水相层 |
| RNA A260/A280低 | 在不足量的TRIzol Reagent内匀浆样品，RNA与蛋白质、DNA未完全分离 | 加入足量的TRIzol Reagent到样本 |
| 匀浆后样品未在室温放置5min，RNA与核蛋白未完全解离 | 匀浆后样品需室温放置5min | |
| 水相中混有有机相，带有蛋白质和DNA的污染 | 不要尝试吸取离心分层后的所有水相层 | |
| 抽提得到的RNA沉淀未完全溶解 | RNA需要完全溶解 |
预染单链 RNA Ladder Marker DynaMarker® Prestain Ladder Marker for RNA
产品中心 > 生命科学 > 分子生物学 > Marker
预染单链 RNA Ladder Marker
DynaMarker® Prestain Ladder Marker for RNA
- 产品特性
- 相关资料
- Q&A
- 参考文献
预染单链 RNA Ladder Marker
DynaMarker® Prestain Ladder Marker for RNA
由完成染色的核酸构成，新型的单链预染 RNA Ladder Marker（Prestain RNA Ladder Marker）。
适用于监控变性凝胶电泳和 Northern 印迹杂交。
※ 本产品仅供研究使用。研究以外不可使用。
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|
|
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Prestain Marker for RNA High （#DM260） |
DynaMarker® Prestain Marker for Small RNA Plus （#DM253） |
◆特点
● 与低分子有机色素不同，通过色素结合方法直接导入色素至核酸链，因此使用凝胶的浓度发生变化也能显示准确的分子量。
● 电泳中也能观察分离状态，可以在最佳时间停止电泳。
● 可转至尼龙膜，确认RNA 转膜情况。
● 采用蓝红（或蓝紫）配色，辨析度优异。
● 无需加热变性操作，可直接使用。
● 与未着色 RNA 标记显示高度一致。
● 拥有各条带尺寸不相同的两种产品。
◆DynaMarker® Prestain Marker for RNA 系列产品
|
产品名称 |
RNA High |
Small RNA Plus |
|
产品编号 |
DM260 |
DM253 |
|
条带大小（base） |
200～8,000 |
20～100 |
|
条带颜色 |
蓝、紫 |
蓝、红 |
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适用凝胶 |
变性琼脂糖 |
变性聚丙烯酰胺 |
|
对应的未标记 RNA Maker |
RNA High（#DM160） |
Small RNA Ⅱ（#DM192） |
|
应用 |
高分子 RNA 电泳 |
涵盖 miRNA 前体 |
◆DM253电泳（64倍速）
产品列表
| 产品编号 | 产品名称 | 产品规格 | 产品等级 | 备注 |
| DM260 | DynaMarker, Prestain Marker for RNA High 预染RNA Marker |
180 μL | ||
| DM253 | Prestain Marker for Small RNA Plus DynaMarker 预染RNA Marker |
150 μL |
| 免责声明 |
|
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RNase Knockout RNA酶清除喷雾 RNase Knockout
产品中心 > 生命科学 > 分子生物学 > 其他试剂
RNase Knockout RNA酶清除喷雾
RNase Knockout
- 产品特性
- 相关资料
- Q&A
- 参考文献
RNase Knockout
RNase Knockout RNA酶清除喷雾
基因研究用 for Genetic Research
制造商：FUJIFILM Wako Pure Chemical Corporation
储存条件：室温
◆概述/使用案例
概述
RNase Knockout是一种使RNase失活的试剂。请在涉及到RNA的实验中，需要控制RNA污染的情况下使用。仅需喷洒在实验器材与实验台上并进行擦拭，即可使RNase失活。
使用方法
● 喷洒在实验器材与实验台上并进行擦拭。
● 喷洒30秒左右后再擦拭效果更佳。
◆应用实例
为确认RNase Knockout可使RNase失活，根据以下实验条件进行了验证实验。
【实验条件】
1. 根据①～③的条件混合溶液，孵育1 min；
1. ① RNase Knockout（1 mL） + 水（10 μL）
1. ② RNase Knockout（1 mL）+ 10 mg/mL RNase溶液（10 μL）
1. ③ 水（1 mL）+ 10 mg/mL RNase溶液（10 μL）
2. 吸走上述溶液，并使用DEPC处理水润洗EP管；
3. 添加25 μL 40 μg/mL RNA溶液，在37°C的条件下孵育1 h；
4. 添加反应终止液（3 μL）；
5. 进行琼脂糖凝胶电泳，并使用致突变性低的核酸染色试剂SAFELOOK™ Post-Green核酸染料染色。置于 LED 照射下观察。
结果显示，添加了RNase Knockout的样品②，即使存在RNase也可以抑制RNA的降解。
◆物性信息
外观：无色透明液体
◆产品列表
|
产品编号 |
产品名称 |
规格 |
包装 |
|
181-03381 |
RNase Knockout |
基因研究用 |
475 mL |
◆相关产品
|
产品编号 |
产品名称 |
规格 |
包装 |
|
180-01891 |
RNAstabilizer, Irrevesible RNase Inactivation Reagent |
基因研究用 |
50 tests |
|
315-08121 |
RNase Inhibitor |
基因研究用 |
2000 units |
※ 本页面产品仅供研究用，研究以外不可使用。
| 免责声明 |
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RNase Knockout RNA酶清除喷雾 RNase Knockout
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RNase Knockout RNA酶清除喷雾
RNase Knockout
- 产品特性
- 相关资料
- Q&A
- 参考文献
RNase Knockout
RNase Knockout RNA酶清除喷雾
基因研究用 for Genetic Research
制造商：FUJIFILM Wako Pure Chemical Corporation
储存条件：室温
◆概述/使用案例
概述
RNase Knockout是一种使RNase失活的试剂。请在涉及到RNA的实验中，需要控制RNA污染的情况下使用。仅需喷洒在实验器材与实验台上并进行擦拭，即可使RNase失活。
使用方法
● 喷洒在实验器材与实验台上并进行擦拭。
● 喷洒30秒左右后再擦拭效果更佳。
◆应用实例
为确认RNase Knockout可使RNase失活，根据以下实验条件进行了验证实验。
【实验条件】
1. 根据①～③的条件混合溶液，孵育1 min；
1. ① RNase Knockout（1 mL） + 水（10 μL）
1. ② RNase Knockout（1 mL）+ 10 mg/mL RNase溶液（10 μL）
1. ③ 水（1 mL）+ 10 mg/mL RNase溶液（10 μL）
2. 吸走上述溶液，并使用DEPC处理水润洗EP管；
3. 添加25 μL 40 μg/mL RNA溶液，在37°C的条件下孵育1 h；
4. 添加反应终止液（3 μL）；
5. 进行琼脂糖凝胶电泳，并使用致突变性低的核酸染色试剂SAFELOOK™ Post-Green核酸染料染色。置于 LED 照射下观察。
结果显示，添加了RNase Knockout的样品②，即使存在RNase也可以抑制RNA的降解。
◆物性信息
外观：无色透明液体
◆产品列表
|
产品编号 |
产品名称 |
规格 |
包装 |
|
181-03381 |
RNase Knockout |
基因研究用 |
475 mL |
◆相关产品
|
产品编号 |
产品名称 |
规格 |
包装 |
|
180-01891 |
RNAstabilizer, Irrevesible RNase Inactivation Reagent |
基因研究用 |
50 tests |
|
315-08121 |
RNase Inhibitor |
基因研究用 |
2000 units |
※ 本页面产品仅供研究用，研究以外不可使用。
| 免责声明 |
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RNA稳定剂，RNase不可逆灭活剂 RNAstabilizer,Irrevesible RNase Inactivation Reagent
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RNA稳定剂，RNase不可逆灭活剂
RNAstabilizer,Irrevesible RNase Inactivation Reagent
- 产品特性
- 相关资料
- Q&A
- 参考文献
RNA稳定剂，RNase不可逆灭活剂
RNAstabilizer,Irrevesible RNase Inactivation Reagent
基因研究用 for Genetic Research
规格含量：3.5 mL（甲醇溶液）×1
制造商：FUJIFILM Wako Pure Chemical Corporation
储存条件：冷冻（干冰运输）
◆概述/使用案例
稳定剂是一种用于提高从肝脏、胰脏、肾脏等RNase含量丰富的器官组织中纯化的RNA储存稳定性的试剂。本品溶于甲醇，可配合二氧化硅载体等的核酸吸附过滤法的RNA纯化试剂使用，使样品来源RNase不可逆性地灭活，获得拥有优秀储存稳定性的高品质RNA。
特点
● 抑制巯基乙醇等还原剂重新活化失活RNase，使RNase不可逆性地灭活；
● 实现从肝脏、胰脏、肾脏等RNase含量丰富的器官中纯化储存稳定性高的RNA；
● 适用于现有的利用二氧化硅载体等的核酸吸附过滤法的RNA纯化试剂（Invitek公司、QIAGEN公司等），不影响回收率，可获得高品质RNA。
使用方法
1. 在通常的两个洗涤步骤中，向第一步洗涤液中添加容量1/10的RNA稳定剂溶液；
2. 吸附样品（RNA）前的操作，请依照试剂盒说明书进行；
3. 在吸附后的首次洗涤操作中，将添加了RNA稳定剂的洗涤液（用量请参照试剂盒说明书）加入核酸纯化柱中；
4. 静置20 min后，请按照试剂盒说明书所要求的条件进行离心过滤；
5. 第二次的洗涤液无需添加RNA稳定剂并依照试剂盒随附实验方案洗涤柱子，请务必进行两次RNA吸附后的柱洗涤（分别用含与不含RNA稳定剂
5. 的洗涤液各洗涤一次）；
6. 随后，请按照试剂盒附带的实验步骤进行操作直至洗脱。
使用注意
适用于使用二氧化硅等的核酸吸附载体的过滤法的RNA纯化试剂盒的洗涤操作。
◆物性信息
外观：无色透明液体
◆产品列表
|
产品编号 |
产品名称 |
规格 |
包装 |
|
180-01891 |
RNAstabilizer,Irrevesible RNase Inactivation Reagent |
基因研究用 |
50 tests |
◆相关产品
|
产品编号 |
产品名称 |
规格 |
包装 |
|
181-03381 |
RNase Knockout |
基因研究用 |
475 mL |
|
315-08121 |
RNase Inhibitor |
基因研究用 |
2000 units |
※ 本页面产品仅供研究用，研究以外不可使用。
| 免责声明 |
|
1. 本公司密切关注本网站发布的内容，但不保证发布内容的准确性、完整性、可靠性和最新性等。 2. 本公司不保证使用本网站期间不会出现故障或计算机病毒污染的风险。 3. 无论何种原因，使用本网站时给用户或第三方造成的任何不利或损害，本公司概不负责。此外，对于用户与其他用户或第三方之间因本网站发生的任何交易、通讯 3. 或纠纷，本公司概不负责。 4. 本网站可提供的所有产品和服务均不得用于人体或动物的临床诊断或治疗，仅可用于科研等非医疗目的。如任何用户将本网站提供的产品和服务用于临床诊断或治 4. 疗，以及其他特定的用途或行为，本公司概不保证其安全性和有效性，并且不负任何相关的法律责任。 |
Gene Keeper RNA & DNA stabilization solution 核酸提取用样品保存溶液
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Gene Keeper RNA & DNA stabilization solution
核酸提取用样品保存溶液
- 产品特性
- 相关资料
- Q&A
- 参考文献
核酸提取用样品保存溶液
Gene Keeper RNA & DNA stabilization solution
Gene Keeper RNA & DNA stabilization solution是核酸提取样品用的保存液。由于本产品能够迅速浸透提取出的组织或细胞等样品，并稳定细胞内的RNA与DNA，因此可将样品稳定保存于常温下直至进行核酸提取。
◆特点
● 迅速浸透样品，稳定组织、细胞内的RNA与DNA
● 提取时无需清洗保存液
● 在-20°C环境下不易冻结与结晶
● 同样适合用于非液氮和干冰环境下的样品运输
● 不含有毒物质
◆样品存储时间
37°C——2天
25℃——2周
4℃——1个月
-20℃——6个月
◆操作方法
◆应用实例
1. 从室温下使用保存溶液保存的人类口腔细胞中提纯RNA
使用药勺轻轻刮过口腔黏膜表面并将附着物用PBS悬浮后，分装到两根试管中。
离心去除上清液后，将沉淀物分别加入Gene Keeper（本产品）与其他公司的保存液，混合后保存。使用RNA提取试剂盒“ISOSPIN Cell & Tissue RNA”（无DNase处理）从在室温（25°C）下保存了10天的样品中提取RNA（图1）。
结果
从Gene Keeper溶液保存的样品中纯化的RNA能够观察到清晰的18S rRNA 与28S rRNA条带。另外，在凝胶上半部分也观察到了基因组DNA的条带。
图1. 人口腔细胞中纯化的RNA（室温保存10日）
2. 使用保存液从室温下保存的小鼠肝脏中纯化RNA与DNA
切取提取的小鼠肝脏并浸入10倍量的Gene Keeper中，在室温（25°C）下保存。使用ISOSPIN Cell & Tissue RNA提取试剂盒提取RNA，使用ISOSPIN Tissue DNA提取试剂盒提取DNA。为方便比较，对从提取后立刻使用液氮冷冻并在-80℃下保存的样品（C），与其他公司产品处理后在室温下保存的样品中提取的核酸进行了电泳（图2,3）。
图2. 小鼠肝脏中提取的RNA
图3. 小鼠肝脏中提取的DNA
结果
从Gene Keeper溶液保存的样品中提取的RNA与DNA与其他公司产品和对照（C）比较可观察到相同的条带。
◆产品列表
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产品编号 |
产品名称 |
包装 |
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319-08901 |
Gene Keeper RNA & DNA stabilization solution |
100 mL |
◆相关产品
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产品编号 |
产品名称 |
包装 |
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317-07363 |
ISOGEN Ⅱ |
10 mL |
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311-07361 |
100 mL |
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314-08211 |
ISOSPIN Cell & Tissue RNA |
50 tests |
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310-08171 |
ISOSPIN PLANT RNA |
50 tests |
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316-08891 |
ISOSPIN Tissue DNA |
50 tests |
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312-08131 |
ISOSPIN Blood and Plasma DNA |
50 tests |
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312-08631 |
ISOSPIN Plant DNA |
50 tests |
※ 本页面产品仅供研究用，研究以外不可使用。
| 免责声明 |
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gDNA removal kit 从RNA提取物中快速、完全去除gDNA
产品中心 > 生命科学 > 分子生物学 > 其他试剂
gDNA removal kit
从RNA提取物中快速、完全去除gDNA
- 产品特性
- 相关资料
- Q&A
- 参考文献
gDNA removal kit
从RNA提取物中快速、完全去除gDNA
gDNA removal kit使用不耐热的dsDNase（heat labile dsDNase）在逆转录之前，从RNA提取物中去除gDNA。
本产品基于重组的热不稳定dsDNase，该酶在低温下不可逆地失活。这使得在灭活步骤中，仅仅加热至中等温度（58°C），就足够温和地保留所有存在的RNA的质量和数量。可以在同一管中进行逆转录，从而较高程度地减少了移液步骤并减少了操作时间。
◆产品规格
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应用说明 |
用于在逆转录之前从RNA中去除gDNA。 |
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质量控制 |
通过了RNase检测。 |
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运输条件 |
冰袋运输 |
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短期储存 |
-20℃ |
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长期储存 |
-20℃ |
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试剂盒组成 |
10x reaction buffer,Heat-labile dsDNase |
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科学背景 |
大多数用于RNA分离的技术，提到的RNA都会带有大量基因组DNA（gDNA），这可能会导致mRNA的定 量错误或不准确。这个问题在低拷贝转录或小样品的定量中更为突出。gDNA removal kit可有效地从RNA 制备物中去除gDNA，使其水平低于RT-qPCR的检测下限。 |
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UniProt ID |
C9YSL6_PANBO |
◆特点
● 在同一管中进行逆转录之前，先从RNA中去除gDNA
● 不降低RNA的质量或数量就能灭活HL-dsDNase
● 最小化移液步骤，适合高通量实验
◆使用方法
◆应用案例
图1：在RT-qPCR之前，gDNA removal kit用于RNA提取物中。gDNA removal kit可在10 µL反应体系中去除至少50 ng的gDNA。
图2：经过gDNA removal kit操作的mRNA。 去除所有gDNA污染，同时保持RNA不受损伤。与未处理的对照相比，未检测到定量cDNA（SDHA）
图2：的减少。
图3：在RNA测序之前，使用7种RNA提取物进行基于液滴数字PCR（ddPCR）的DNA测定。结果由位于英国的临床实验室在其RNA NGS工作流
图3：程的研发过程中获得。
图4：在RNA测序之前，使用7种cDNA制备物进行基于液滴数字PCR（ddPCR）的RNA测定。结果由位于英国的临床实验室在其RNA NGS工作流
图3：程的研发过程中获得。
◆产品列表
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产品编号 |
产品名称 |
包装 |
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ENZ-KIT136-0250 |
gDNA removal kit |
250 Reactions |
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ENZ-KIT136-0050 |
50 Reactions |
◆相关产品
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产品编号 |
产品名称 |
包装 |
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ENZ-KIT105-1000 |
AMPIGENE 1-Step RT-PCR Kit |
1000 Reactions |
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ENZ-KIT105-0200 |
200 Reactions |
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ENZ-KIT105-0050 |
50 Reactions |
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ENZ-KIT106-0200 |
AMPIGENE cDNA Synthesis Kit |
200 Reactions |
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ENZ-KIT106-0050 |
50 Reactions |
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ENZ-NUC108-1000 |
AMPIGENE qPCR 1-Step Green Kit Lo-ROX |
1000 Reactions |
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ENZ-NUC108-0200 |
200 Reactions |
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ENZ-NUC109-1000 |
AMPIGENE qPCR 1-Step Green Kit Hi-ROX |
1000 Reactions |
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ENZ-NUC109-0200 |
200 Reactions |
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ENZ-NUC110-1000 |
AMPIGENE qPCR 1-Step Probe Kit Lo-ROX |
1000 Reactions |
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ENZ-NUC110-0200 |
200 Reactions |
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ENZ-NUC111-1000 |
AMPIGENE qPCR 1-Step Probe Kit Hi-ROX |
1000 Reactions |
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ENZ-NUC111-0200 |
200 Reactions |
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ENZ-NUC112-1000 |
AMPIGENE qPCR 1-Step Probe Kit No-ROX |
1000 Reactions |
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ENZ-NUC112-0200 |
200 Reactions |
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