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CellROX Deep Red Reagent, for oxidative stress detection 氧化应激检测用探针（深红色）

发表于由

Reactive oxygen species (ROS) 活性氧；DCFH-DA；HPF羟苯基荧光素；Mitosox 线粒体超氧化物探针；Dihydroethidium (DHE) 二氢乙锭；ROSGreenTM H2O2Probe；Life (Molecular Probe)；

CellROX Deep Red Reagent是一种检测活细胞氧化应激的新型荧光探针。此细胞膜渗透性的染料在还原态时无荧光或呈微弱荧光，一旦被活性氧物质（ROS）氧化后发明亮稳定的荧光，最大吸收/发射波长约~ 644/ 665nm（见图I.CellROX Deep Red氧化后的荧光光谱图）。其荧光信号主要定位在细胞质。CellROX Deep Red Reagent的深红色荧光信号与其他活细胞染料和GFP兼容，使其适用于多重荧光试验来测定各种细胞现象，包括与细胞毒性和细胞死亡的参数。不同于其它的ROS探针，比如H2DCFDA（MX4802-50MG），CellROX Deep Red Reagent的荧光信号经醛类固定后也能保留，使其相对于传统的ROS探针来说在应用和操作流程更加灵活。CellROX Deep Red Reagent与各种检测平台兼容，比如传统荧光显微镜、高内涵筛选仪器（HCS）、流式细胞仪、荧光酶标仪或高通量筛选（HTS）。还与各种台式仪器兼容，比如Attune™仪器。

本品以稳定、即用型的DMSO溶液形式提供，浓度为2.5mM，操作简单，与荧光显微镜的标准工作流程兼容。每管染料（50µl）足够做1个96孔板或20张爬片。适用于任何细胞类型的氧化应激检测。

保存与运输方法

保存：≤-20ºC避光保存，保持干燥，1年有效。

运输：冰袋运输。

注意事项

  1. 本品对光和空气敏感，使用过程中切记不可长时间敞开瓶盖。当瓶子开口后建议丢掉未用完的材料。
  2. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法

  1. 需要自行准备的材料
    1. 细胞和培养基
    2. 生理盐缓冲液（PBS，pH 7.2-7.6）
    3. 【可选】固定剂（比如，溶于PBS的3.7%甲醛）
  2. 实验步骤

以下步骤专门为BPAE，HepG2, U-2 OS和RAW巨噬细胞所开发，优化后的染色工作浓度为5µM，但是此实验适用于任何细胞类型。生长培养基、细胞密度、细胞类型变化和其他因素可能会影响标记效率。在初始实验，建议设置浓度梯度，以确定最佳的实验条件和适合研究细胞类型的工作浓度。

CellROX Deep RedReagent对光和空气敏感，使用过程中切记不可长时间敞开瓶盖。当瓶子开口后建议丢掉未用完的材料。

    1. 用待测化合物或药物处理细胞，孵育一定时间。【注】：待测化合物或药物处理后没有必要去除培养基。
    2. 加CellROX Deep RedReagent到细胞内使其终浓度为5µM，37℃孵育30min。
    3. 去除培养基，用PBS清洗3次。
    4. 【可选】可用3.7%甲醛固定细胞15min。需在CellROX Deep RedReagent染色2h内进行荧光信号检测。
    5. 【可选】此时可用NucBlue活细胞染料（一种细胞核复染剂）或其他复染剂如Hoechst 33342（CAT#：MX4204-10ML）对细胞染色。

应用示例

图II. CellROX Deep RedReagent测定牛肺动脉内皮细胞（BPAE）的氧化应激水平。在96孔板内接种BPAE细胞。之后用含维生素K3（100µM）或不含维生素K3的培养基37℃处理1h【在孵育的后30min时向某些对照和维生素K3处理孔内加入超氧化物清除剂MnTBAP（100µM）】。之后细胞用CellROX Deep RedReagent（5µM）和Hoechst 33342染色，将探针加入完全培养基内37℃孵育30min。细胞经PBS清洗后，之后成像检测。

相关产品

名称 规格            
     Reactive Oxygen Species (ROS) Assay Kit活性氧（ROS）检测试剂盒 100~500T
H2DCFDA (DCFH-DA)活性氧（ROS）荧光探针 50mg
Aminophenyl fluorescein (APF) 氨基苯基荧光素 1mg
Hydroxyphenyl fluorescein (HPF) 羟苯基荧光素 1mg
30% H2O2Solution 30%过氧化氢溶液（30%双氧水） 500ml
tert-Butyl hydroperoxide (TBHP) Solution 叔丁基过氧化氢溶液 50ml
PMA (TPA, 5mg/ml) 佛波肉荳蔻醋酸（5mg/ml） 100μl
Dihydrorhodamine 123 (DHR 123) 二氢罗丹明123 1mg
Luminol 鲁米诺 1g
Coelenterazine Native 天然腔肠素 500μg
CellROX Green Reagent, for oxidative stress detection 氧化应激检测用探针（绿色）           50µl
CellROX Deep Red Reagent, for oxidative stress detection 氧化应激检测用探针（深红色） 50µl

CellROX Deep Red Reagent, for oxidative stress detection 氧化应激检测用探针（深红色）

发表于由

Reactive oxygen species (ROS) 活性氧；DCFH-DA；HPF羟苯基荧光素；Mitosox 线粒体超氧化物探针；Dihydroethidium (DHE) 二氢乙锭；ROSGreenTM H2O2Probe；Life (Molecular Probe)；

CellROX Deep Red Reagent是一种检测活细胞氧化应激的新型荧光探针。此细胞膜渗透性的染料在还原态时无荧光或呈微弱荧光，一旦被活性氧物质（ROS）氧化后发明亮稳定的荧光，最大吸收/发射波长约~ 644/ 665nm（见图I.CellROX Deep Red氧化后的荧光光谱图）。其荧光信号主要定位在细胞质。CellROX Deep Red Reagent的深红色荧光信号与其他活细胞染料和GFP兼容，使其适用于多重荧光试验来测定各种细胞现象，包括与细胞毒性和细胞死亡的参数。不同于其它的ROS探针，比如H2DCFDA（MX4802-50MG），CellROX Deep Red Reagent的荧光信号经醛类固定后也能保留，使其相对于传统的ROS探针来说在应用和操作流程更加灵活。CellROX Deep Red Reagent与各种检测平台兼容，比如传统荧光显微镜、高内涵筛选仪器（HCS）、流式细胞仪、荧光酶标仪或高通量筛选（HTS）。还与各种台式仪器兼容，比如Attune™仪器。

本品以稳定、即用型的DMSO溶液形式提供，浓度为2.5mM，操作简单，与荧光显微镜的标准工作流程兼容。每管染料（50µl）足够做1个96孔板或20张爬片。适用于任何细胞类型的氧化应激检测。

保存与运输方法

保存：≤-20ºC避光保存，保持干燥，1年有效。

运输：冰袋运输。

注意事项

  1. 本品对光和空气敏感，使用过程中切记不可长时间敞开瓶盖。当瓶子开口后建议丢掉未用完的材料。
  2. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法

  1. 需要自行准备的材料
    1. 细胞和培养基
    2. 生理盐缓冲液（PBS，pH 7.2-7.6）
    3. 【可选】固定剂（比如，溶于PBS的3.7%甲醛）
  2. 实验步骤

以下步骤专门为BPAE，HepG2, U-2 OS和RAW巨噬细胞所开发，优化后的染色工作浓度为5µM，但是此实验适用于任何细胞类型。生长培养基、细胞密度、细胞类型变化和其他因素可能会影响标记效率。在初始实验，建议设置浓度梯度，以确定最佳的实验条件和适合研究细胞类型的工作浓度。

CellROX Deep RedReagent对光和空气敏感，使用过程中切记不可长时间敞开瓶盖。当瓶子开口后建议丢掉未用完的材料。

    1. 用待测化合物或药物处理细胞，孵育一定时间。【注】：待测化合物或药物处理后没有必要去除培养基。
    2. 加CellROX Deep RedReagent到细胞内使其终浓度为5µM，37℃孵育30min。
    3. 去除培养基，用PBS清洗3次。
    4. 【可选】可用3.7%甲醛固定细胞15min。需在CellROX Deep RedReagent染色2h内进行荧光信号检测。
    5. 【可选】此时可用NucBlue活细胞染料（一种细胞核复染剂）或其他复染剂如Hoechst 33342（CAT#：MX4204-10ML）对细胞染色。

应用示例

图II. CellROX Deep RedReagent测定牛肺动脉内皮细胞（BPAE）的氧化应激水平。在96孔板内接种BPAE细胞。之后用含维生素K3（100µM）或不含维生素K3的培养基37℃处理1h【在孵育的后30min时向某些对照和维生素K3处理孔内加入超氧化物清除剂MnTBAP（100µM）】。之后细胞用CellROX Deep RedReagent（5µM）和Hoechst 33342染色，将探针加入完全培养基内37℃孵育30min。细胞经PBS清洗后，之后成像检测。

相关产品

名称 规格            
      Reactive Oxygen Species (ROS) Assay Kit活性氧（ROS）检测试剂盒 100~500T
H2DCFDA (DCFH-DA)活性氧（ROS）荧光探针 50mg
Aminophenyl fluorescein (APF) 氨基苯基荧光素 1mg
Hydroxyphenyl fluorescein (HPF) 羟苯基荧光素 1mg
30% H2O2Solution 30%过氧化氢溶液（30%双氧水） 500ml
tert-Butyl hydroperoxide (TBHP) Solution 叔丁基过氧化氢溶液 50ml
PMA (TPA, 5mg/ml) 佛波肉荳蔻醋酸（5mg/ml） 100μl
Dihydrorhodamine 123 (DHR 123) 二氢罗丹明123 1mg
Luminol 鲁米诺 1g
Coelenterazine Native 天然腔肠素 500μg
CellROX Green Reagent, for oxidative stress detection 氧化应激检测用探针（绿色）           50µl
CellROX Deep Red Reagent, for oxidative stress detection 氧化应激检测用探针（深红色） 50µl

 

Dewaxing/Clearing Reagent for Histology 组织学用环保脱蜡透明液

发表于由

Dewaxing Reagent；Deparaffinized Reagent；脱蜡剂；二甲苯无毒替代品；

产品信息

产品名称

 产品编号 规格    

Dewaxing/Clearing Reagent 组织学用环保脱蜡透明液    

 MM1601-500ML   500ml
Dewaxing/Clearing Reagent 组织学用环保脱蜡透明液 MM1601-5L 10×500ml      

Dewaxing/Clearing Reagent 组织学用环保脱蜡透明液 MM1601-10L 20×500ml

1550

产品描述

长期以来免疫组化石蜡切片脱蜡所用为二甲苯，但其是一种有害试剂，长期接触会对人身体健康造成伤害。本组织学用

环保脱蜡透明液（Dewaxing/Clearing Reagent for Histology）正是一种无毒环保的二甲苯替代物，是一种新合成的，专门为组织病理学和细胞学样品处理所开发的一款无色无味、挥发速率低，具有生物降解性的有机溶剂，不含苯，适用于病理组织脱水及染色过程，对生物组织的蛋白、核酸无影响，效果可媲美于二甲苯，使用步骤和二甲苯一致，无需做更改。对仪器也无腐蚀性。本品主要用于浸蜡组织样本处理及脱蜡、透明以及细胞学制片的透明。

保存与运输方法

保存：5-35℃密封保存，未开封包装3年有效；开封后6个月有效。

运输：室温运输。

使用方法（仅做参考）

1）   脱蜡：将所需脱蜡的石蜡切片浸入本环保脱蜡透明液中，分两缸进行脱蜡，每缸中脱蜡5-15min（视切片厚薄调整），若需要时间较长，请更换新的脱蜡液。

2）   透明：①将脱水充分的组织块浸入本环保脱蜡透明液中，分两缸进行透明，每缸中透明15-60min（视组织块大小调整）；②将脱水充分的染色切片浸入本环保脱蜡透明液中，分两缸进行透明，每缸中透明2-10min（视切片厚薄调整）；

注意事项

1）   本品不具腐蚀性，不会易燃易爆，能放心用于半封闭和全封闭脱蜡、染色等仪器内。

2）   本品无色透明、无毒，挥发性低，对人体无伤害。

3）   本品适用于细胞学制片巴氏染色程序的透明，也适用于冰冻快速制片程序的透明，需根据实际情况缩短透明时间。

4）   本品的脱蜡和透明步骤不会对组织样本染色效果产生影响，也不会影响组织切片（细胞涂片）的保存。

5）   为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

操作示例一（组织切片的常规HE染色）

操作步骤 操作时间
1 环保脱蜡透明液脱蜡第一次 5~10min
2 环保脱蜡透明液脱蜡第二次 5~10min
3 无水乙醇 2~3min
4 95%乙醇 1~2min
5 80%乙醇 1~2min
6          水洗 1~2min
7 HE染色 此处省略
8 脱水 此处省略
9 环保脱蜡透明液透明第一次 2~5min
10 环保脱蜡透明液透明第二次 2~5min
11 封片 封固

操作示例二（组织块浸蜡）

操作步骤 操作时间
1            10%中性福尔马林固定第一次 2h
2 10%中性福尔马林固定第二次 2h
3 80%乙醇 45min
4 95%乙醇第一次 45min
5 95%乙醇第二次 45min
6 无水乙醇第一次 45min
7 无水乙醇第二次 45min
8 环保脱蜡透明液透明第一次 5~10min
9 环保脱蜡透明液透明第二次 5~10min
10 65℃浸蜡第一次 60min
11 65℃浸蜡第二次 60min
12 65℃浸蜡第三次 120~180min

相关产品

货号 名称 规格
MM1041-150ML Alcian Blue (pH 2.5) Stain Kit阿利新蓝染色试剂盒（pH2.5） 3×50ml
MM1042-150ML Alcian Blue (pH 1.0) Stain Kit阿利新蓝染色试剂盒（pH1.0） 3×50ml
MM1044-100ML Nuclear Fast Red Stain Solution核固红染色液（0.1%） 100ml
MM1045-100ML Nuclear Fast Red Stain Solution核固红染色液（0.2%） 100ml
MM1601-500ML Dewaxing/Clearing Reagent for Histology组织学用环保脱蜡透明液 500ml

Dewaxing/Clearing Reagent for Histology 组织学用环保脱蜡透明液

发表于由

描述

Dewaxing/Clearing Reagent for Histology

组织学用环保脱蜡透明液

 

同义名：

Dewaxing Reagent；Deparaffinized Reagent；脱蜡剂；二甲苯无毒替代品；

产品信息

产品名称

 产品编号 规格 价格（元）   

Dewaxing/Clearing Reagent 组织学用环保脱蜡透明液    

 MM1601-500ML   500ml 130
Dewaxing/Clearing Reagent 组织学用环保脱蜡透明液 MM1601-5L 10×500ml      

950
Dewaxing/Clearing Reagent 组织学用环保脱蜡透明液 MM1601-10L 20×500ml

1550

产品描述

长期以来免疫组化石蜡切片脱蜡所用为二甲苯，但其是一种有害试剂，长期接触会对人身体健康造成伤害。本组织学用

环保脱蜡透明液（Dewaxing/Clearing Reagent for Histology）正是一种无毒环保的二甲苯替代物，是一种新合成的，专门为组织病理学和细胞学样品处理所开发的一款无色无味、挥发速率低，具有生物降解性的有机溶剂，不含苯，适用于病理组织脱水及染色过程，对生物组织的蛋白、核酸无影响，效果可媲美于二甲苯，使用步骤和二甲苯一致，无需做更改。对仪器也无腐蚀性。本品主要用于浸蜡组织样本处理及脱蜡、透明以及细胞学制片的透明。

保存与运输方法

保存：5-35℃密封保存，未开封包装3年有效；开封后6个月有效。

运输：室温运输。

使用方法（仅做参考）

1）   脱蜡：将所需脱蜡的石蜡切片浸入本环保脱蜡透明液中，分两缸进行脱蜡，每缸中脱蜡5-15min（视切片厚薄调整），若需要时间较长，请更换新的脱蜡液。

2）   透明：①将脱水充分的组织块浸入本环保脱蜡透明液中，分两缸进行透明，每缸中透明15-60min（视组织块大小调整）；②将脱水充分的染色切片浸入本环保脱蜡透明液中，分两缸进行透明，每缸中透明2-10min（视切片厚薄调整）；

注意事项

1）   本品不具腐蚀性，不会易燃易爆，能放心用于半封闭和全封闭脱蜡、染色等仪器内。

2）   本品无色透明、无毒，挥发性低，对人体无伤害。

3）   本品适用于细胞学制片巴氏染色程序的透明，也适用于冰冻快速制片程序的透明，需根据实际情况缩短透明时间。

4）   本品的脱蜡和透明步骤不会对组织样本染色效果产生影响，也不会影响组织切片（细胞涂片）的保存。

5）   为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

操作示例一（组织切片的常规HE染色）

操作步骤 操作时间
1 环保脱蜡透明液脱蜡第一次 5~10min
2 环保脱蜡透明液脱蜡第二次 5~10min
3 无水乙醇 2~3min
4 95%乙醇 1~2min
5 80%乙醇 1~2min
6          水洗 1~2min
7 HE染色 此处省略
8 脱水 此处省略
9 环保脱蜡透明液透明第一次 2~5min
10 环保脱蜡透明液透明第二次 2~5min
11 封片 封固

操作示例二（组织块浸蜡）

操作步骤 操作时间
1            10%中性福尔马林固定第一次 2h
2 10%中性福尔马林固定第二次 2h
3 80%乙醇 45min
4 95%乙醇第一次 45min
5 95%乙醇第二次 45min
6 无水乙醇第一次 45min
7 无水乙醇第二次 45min
8 环保脱蜡透明液透明第一次 5~10min
9 环保脱蜡透明液透明第二次 5~10min
10 65℃浸蜡第一次 60min
11 65℃浸蜡第二次 60min
12 65℃浸蜡第三次 120~180min

相关产品

货号 名称 规格
MM1041-150ML Alcian Blue (pH 2.5) Stain Kit阿利新蓝染色试剂盒（pH2.5） 3×50ml
MM1042-150ML Alcian Blue (pH 1.0) Stain Kit阿利新蓝染色试剂盒（pH1.0） 3×50ml
MM1044-100ML Nuclear Fast Red Stain Solution核固红染色液（0.1%） 100ml
MM1045-100ML Nuclear Fast Red Stain Solution核固红染色液（0.2%） 100ml
MM1601-500ML Dewaxing/Clearing Reagent for Histology组织学用环保脱蜡透明液 500ml

 

Dewaxing/Clearing Reagent for Histology 组织学用环保脱蜡透明液

发表于由

描述

Dewaxing/Clearing Reagent for Histology

组织学用环保脱蜡透明液

 

同义名：

Dewaxing Reagent；Deparaffinized Reagent；脱蜡剂；二甲苯无毒替代品；

产品信息

产品名称

 产品编号 规格 价格（元）   

Dewaxing/Clearing Reagent 组织学用环保脱蜡透明液    

 MM1601-500ML   500ml 130
Dewaxing/Clearing Reagent 组织学用环保脱蜡透明液 MM1601-5L 10×500ml      

950
Dewaxing/Clearing Reagent 组织学用环保脱蜡透明液 MM1601-10L 20×500ml

1550

产品描述

长期以来免疫组化石蜡切片脱蜡所用为二甲苯，但其是一种有害试剂，长期接触会对人身体健康造成伤害。本组织学用

环保脱蜡透明液（Dewaxing/Clearing Reagent for Histology）正是一种无毒环保的二甲苯替代物，是一种新合成的，专门为组织病理学和细胞学样品处理所开发的一款无色无味、挥发速率低，具有生物降解性的有机溶剂，不含苯，适用于病理组织脱水及染色过程，对生物组织的蛋白、核酸无影响，效果可媲美于二甲苯，使用步骤和二甲苯一致，无需做更改。对仪器也无腐蚀性。本品主要用于浸蜡组织样本处理及脱蜡、透明以及细胞学制片的透明。

保存与运输方法

保存：5-35℃密封保存，未开封包装3年有效；开封后6个月有效。

运输：室温运输。

使用方法（仅做参考）

1）   脱蜡：将所需脱蜡的石蜡切片浸入本环保脱蜡透明液中，分两缸进行脱蜡，每缸中脱蜡5-15min（视切片厚薄调整），若需要时间较长，请更换新的脱蜡液。

2）   透明：①将脱水充分的组织块浸入本环保脱蜡透明液中，分两缸进行透明，每缸中透明15-60min（视组织块大小调整）；②将脱水充分的染色切片浸入本环保脱蜡透明液中，分两缸进行透明，每缸中透明2-10min（视切片厚薄调整）；

注意事项

1）   本品不具腐蚀性，不会易燃易爆，能放心用于半封闭和全封闭脱蜡、染色等仪器内。

2）   本品无色透明、无毒，挥发性低，对人体无伤害。

3）   本品适用于细胞学制片巴氏染色程序的透明，也适用于冰冻快速制片程序的透明，需根据实际情况缩短透明时间。

4）   本品的脱蜡和透明步骤不会对组织样本染色效果产生影响，也不会影响组织切片（细胞涂片）的保存。

5）   为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

操作示例一（组织切片的常规HE染色）

操作步骤 操作时间
1 环保脱蜡透明液脱蜡第一次 5~10min
2 环保脱蜡透明液脱蜡第二次 5~10min
3 无水乙醇 2~3min
4 95%乙醇 1~2min
5 80%乙醇 1~2min
6          水洗 1~2min
7 HE染色 此处省略
8 脱水 此处省略
9 环保脱蜡透明液透明第一次 2~5min
10 环保脱蜡透明液透明第二次 2~5min
11 封片 封固

操作示例二（组织块浸蜡）

操作步骤 操作时间
1            10%中性福尔马林固定第一次 2h
2 10%中性福尔马林固定第二次 2h
3 80%乙醇 45min
4 95%乙醇第一次 45min
5 95%乙醇第二次 45min
6 无水乙醇第一次 45min
7 无水乙醇第二次 45min
8 环保脱蜡透明液透明第一次 5~10min
9 环保脱蜡透明液透明第二次 5~10min
10 65℃浸蜡第一次 60min
11 65℃浸蜡第二次 60min
12 65℃浸蜡第三次 120~180min

相关产品

货号 名称 规格
MM1041-150ML Alcian Blue (pH 2.5) Stain Kit阿利新蓝染色试剂盒（pH2.5） 3×50ml
MM1042-150ML Alcian Blue (pH 1.0) Stain Kit阿利新蓝染色试剂盒（pH1.0） 3×50ml
MM1044-100ML Nuclear Fast Red Stain Solution核固红染色液（0.1%） 100ml
MM1045-100ML Nuclear Fast Red Stain Solution核固红染色液（0.2%） 100ml
MM1601-500ML Dewaxing/Clearing Reagent for Histology组织学用环保脱蜡透明液 500ml

 

CellROX Green Reagent, for oxidative stress detection 氧化应激检测用探针（绿色）

发表于由

描述

CellROX Green Reagent, for oxidative stress detection

氧化应激检测用探针（绿色）

 

温馨提示：

见我司整理的活性氧ROS荧光探针专题。

见我司整理的CellROX Reagent, for oxidative stress detection 氧化应激检测探针产品专题。

 

搜索关键词：

Reactive oxygen species (ROS) 活性氧；DCFH-DA；HPF 羟苯基荧光素；Mitosox 线粒体超氧化物探针；Dihydroethidium (DHE)  二氢乙锭；ROSGreenTMH2O2Probe；Life (Molecular Probe) ；

 

订购信息：

产品名称 产品编号 规格               价格（元）   

CellROX Green Reagent, for oxidative stress detection     

氧化应激检测用探针（绿色）

 MX4815-50UL         50µl 1988
MX4815-100UL 2×50µl 3778

 

产品描述：

CellROX Green Reagent是一种检测活细胞氧化应激的新型荧光探针。此细胞膜渗透性的染料在还原态时无荧光或呈微弱荧光，一旦被活性氧物质（ROS）氧化并结合到DNA后发明亮稳定的绿色荧光，最大吸收/发射波长约~485/520 nm（见图I. CellROX Green氧化后的荧光光谱图）。其荧光信号主要定位在细胞核和线粒体。此染料能够被甲醛固定且能承受表面活性剂处理，因此，特别适合与其他兼容性染料和抗体进行多重标记检测。CellROX Green Reagent与各种检测平台兼容，比如传统荧光显微镜、高内涵筛选仪器（HCS）、流式细胞仪、荧光酶标仪或高通量筛选（HTS）。还与各种台式仪器兼容，比如FLoid™，Tali™，和Attune™仪器。

图1. CellROX Green氧化后的荧光光谱图

本品以稳定、即用型的DMSO溶液形式提供，浓度为2.5mM，操作简单，勿需清洗，与荧光显微镜的标准工作流程兼容。每管染料（50µl）足够做1个96孔板或20张爬片。适用于任何细胞类型的氧化应激检测。

保存与运输方法

保存：≤-20ºC避光保存，保持干燥，1年有效。

运输：冰袋运输。

注意事项

1）   本品对光和空气敏感，使用过程中切记不可长时间敞开瓶盖。当瓶子开口后建议丢掉未用完的材料。

2）   为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法

1.     需要自行准备的材料

1.1    细胞和培养基

1.2    生理盐缓冲液（PBS，pH 7.2-7.6）

1.3    【可选】固定剂（比如，溶于PBS的3.7%甲醛）

1.4    【可选】破膜剂（比如，0.5% Triton X-100）

2.     实验步骤

以下步骤专门为BPAE，HepG2, U-2 OS和RAW巨噬细胞所开发，优化后的染色工作浓度为5µM，但是此实验适用于任何细胞类型。生长培养基、细胞密度、细胞类型变化和其他因素可能会影响标记效率。在初始实验，建议设置浓度梯度，以确定最佳的实验条件和适合研究细胞类型的工作浓度。

CellROX Green Reagent对光和空气敏感，使用过程中切记不可长时间敞开瓶盖。当瓶子开口后建议丢掉未用完的材料。

2.1    用待测化合物或药物处理细胞，孵育一定时间。【注】：待测化合物或药物处理后没有必要去除培养基。

2.2    加CellROX Green Reagent到细胞内使其终浓度为5µM，37℃孵育30min。

2.3    去除培养基，用PBS清洗3次。

2.4    【可选】可用3.7%甲醛固定细胞15min。需在CellROX Green Reagent染色24h内进行荧光信号检测。

2.5    【可选】此时可用NucBlue活细胞染料（一种细胞核复染剂）或其他复染剂如Hoechst 33342（CAT#：MX4204-10ML）对细胞染色。

2.6    【可选】如果与其他试剂的多重标记实验要求进行细胞透化，可用0.5% Triton X-100透化处理10min。

应用示例

图II. CellROX Green Reagent测定牛肺动脉内皮细胞（BPAE）的氧化应激水平。在MatTek激光共聚焦专用玻底培养皿内铺BPAE细胞。之后用含维生素K3（100µM）或不含维生素K3的培养基37℃处理1h。向某些对照和维生素K3处理孔内加入N-乙酰半胱氨酸（NAC，50µM）。之后细胞用CellROX Green Reagent（5µM）和Hoechst 33342染色，前者加入完全培养基内37℃孵育30min。细胞经PBS清洗后，在Zeiss Axiovert倒置显微镜下检测（40X物镜）。

相关产品

货号 名称 规格
MX4801-1KIT Reactive Oxygen Species (ROS) Assay Kit 活性氧（ROS）检测试剂盒 100~500T     
MX4802-50MG H2DCFDA (DCFH-DA) 活性氧（ROS）荧光探针 50mg
MX4804-1MG Aminophenyl fluorescein (APF) 氨基苯基荧光素 1mg
MX4805-1MG Hydroxyphenyl fluorescein (HPF) 羟苯基荧光素 1mg
MM0707-500ML    30% H2O2Solution 30%过氧化氢溶液（30%双氧水） 500ml
MS5603-50ML tert-Butyl hydroperoxide (TBHP) Solution  叔丁基过氧化氢溶液 50ml
MZ2401-100UL PMA (TPA, 5mg/ml) 佛波肉荳蔻醋酸（5mg/ml） 100μl
MX4455-1MG Dihydrorhodamine 123 (DHR 123) 二氢罗丹明123 1mg
MM0706-1G Luminol 鲁米诺 1g
MX4606-500UG Coelenterazine Native 天然腔肠素 500μg
MX4815-50UL CellROX Green Reagent, for oxidative stress detection 氧化应激检测用探针（绿色） 50µl

 

 

 

CellROX Green Reagent, for oxidative stress detection 氧化应激检测用探针（绿色）

发表于由

描述

CellROX Green Reagent, for oxidative stress detection

氧化应激检测用探针（绿色）

 

温馨提示：

见我司整理的活性氧ROS荧光探针专题。

见我司整理的CellROX Reagent, for oxidative stress detection 氧化应激检测探针产品专题。

 

搜索关键词：

Reactive oxygen species (ROS) 活性氧；DCFH-DA；HPF 羟苯基荧光素；Mitosox 线粒体超氧化物探针；Dihydroethidium (DHE)  二氢乙锭；ROSGreenTMH2O2Probe；Life (Molecular Probe) ；

 

订购信息：

产品名称 产品编号 规格               价格（元）   

CellROX Green Reagent, for oxidative stress detection     

氧化应激检测用探针（绿色）

 MX4815-50UL         50µl 1988
MX4815-100UL 2×50µl 3778

 

产品描述：

CellROX Green Reagent是一种检测活细胞氧化应激的新型荧光探针。此细胞膜渗透性的染料在还原态时无荧光或呈微弱荧光，一旦被活性氧物质（ROS）氧化并结合到DNA后发明亮稳定的绿色荧光，最大吸收/发射波长约~485/520 nm（见图I. CellROX Green氧化后的荧光光谱图）。其荧光信号主要定位在细胞核和线粒体。此染料能够被甲醛固定且能承受表面活性剂处理，因此，特别适合与其他兼容性染料和抗体进行多重标记检测。CellROX Green Reagent与各种检测平台兼容，比如传统荧光显微镜、高内涵筛选仪器（HCS）、流式细胞仪、荧光酶标仪或高通量筛选（HTS）。还与各种台式仪器兼容，比如FLoid™，Tali™，和Attune™仪器。

图1. CellROX Green氧化后的荧光光谱图

本品以稳定、即用型的DMSO溶液形式提供，浓度为2.5mM，操作简单，勿需清洗，与荧光显微镜的标准工作流程兼容。每管染料（50µl）足够做1个96孔板或20张爬片。适用于任何细胞类型的氧化应激检测。

保存与运输方法

保存：≤-20ºC避光保存，保持干燥，1年有效。

运输：冰袋运输。

注意事项

1）   本品对光和空气敏感，使用过程中切记不可长时间敞开瓶盖。当瓶子开口后建议丢掉未用完的材料。

2）   为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法

1.     需要自行准备的材料

1.1    细胞和培养基

1.2    生理盐缓冲液（PBS，pH 7.2-7.6）

1.3    【可选】固定剂（比如，溶于PBS的3.7%甲醛）

1.4    【可选】破膜剂（比如，0.5% Triton X-100）

2.     实验步骤

以下步骤专门为BPAE，HepG2, U-2 OS和RAW巨噬细胞所开发，优化后的染色工作浓度为5µM，但是此实验适用于任何细胞类型。生长培养基、细胞密度、细胞类型变化和其他因素可能会影响标记效率。在初始实验，建议设置浓度梯度，以确定最佳的实验条件和适合研究细胞类型的工作浓度。

CellROX Green Reagent对光和空气敏感，使用过程中切记不可长时间敞开瓶盖。当瓶子开口后建议丢掉未用完的材料。

2.1    用待测化合物或药物处理细胞，孵育一定时间。【注】：待测化合物或药物处理后没有必要去除培养基。

2.2    加CellROX Green Reagent到细胞内使其终浓度为5µM，37℃孵育30min。

2.3    去除培养基，用PBS清洗3次。

2.4    【可选】可用3.7%甲醛固定细胞15min。需在CellROX Green Reagent染色24h内进行荧光信号检测。

2.5    【可选】此时可用NucBlue活细胞染料（一种细胞核复染剂）或其他复染剂如Hoechst 33342（CAT#：MX4204-10ML）对细胞染色。

2.6    【可选】如果与其他试剂的多重标记实验要求进行细胞透化，可用0.5% Triton X-100透化处理10min。

应用示例

图II. CellROX Green Reagent测定牛肺动脉内皮细胞（BPAE）的氧化应激水平。在MatTek激光共聚焦专用玻底培养皿内铺BPAE细胞。之后用含维生素K3（100µM）或不含维生素K3的培养基37℃处理1h。向某些对照和维生素K3处理孔内加入N-乙酰半胱氨酸（NAC，50µM）。之后细胞用CellROX Green Reagent（5µM）和Hoechst 33342染色，前者加入完全培养基内37℃孵育30min。细胞经PBS清洗后，在Zeiss Axiovert倒置显微镜下检测（40X物镜）。

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货号 名称 规格
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MX4815-50UL CellROX Green Reagent, for oxidative stress detection 氧化应激检测用探针（绿色） 50µl

 

 

 

TRIzol Reagent 总RNA抽提试剂

发表于由

描述

TRIzol Reagent 总RNA抽提试剂

 

关键词：TRIzol Reagent；酚氯仿抽提；RNase-free H2O； Total RNA 总RNA提取；RNAlater；Invitrogen 15596026；

产品信息

产品名称 产品编号 规格  

价格（元）  
TRIzol Reagent 总RNA抽提试剂    MF0403-100ML     100ml

450

产品描述

TRIzol Reagent是一种即用型且操作迅捷的总RNA抽提试剂，适用样本广泛，包括人、动物、植物、酵母或细菌来源的细胞和组织样本。TRIzol Reagent是一种含酚、异硫氰酸胍和其他专利成分的单相溶液，有利于抽提分子量大小不一的各种RNA类型。TRIzol Reagent能够良好的维持RNA完整性，因能高效抑制样本匀浆过程中细胞破损和细胞组分溶解时释放的RNase活性。TRIzol Reagent能够同时处理大量样本，且以优化的方式一步法提取RNA，整个过程可在一小时内完成。

TRIzol Reagent分离的总RNA无蛋白质和DNA污染，适用于RT-PCR、Northern Blot、Dot Blot、poly(A)+筛选、体外翻译、RNase保护分析和分子克隆等下游实验。

保存与运输方法

保存：2-8℃保存，至少一年有效。

运输：冰袋运输。

注意事项

1）   所有离心管、枪头以及相关溶液都必须无RNase污染。对于塑料制品、玻璃和金属器皿、实验仪器等可使用金畔生物的固相RNase清除剂去除RNase（货号：MF0406-100ML），或者用含0.01% DEPC（货号：MS5513-10ML）的去离子水浸泡过夜，之后高压灭菌、烘干。对于实验溶液可使用金畔生物的液相RNase清除剂（货号：MF0407-1.5ML）来处理或用DEPC处理水（比如：MF0404-500ML）来配制。

2）   对新鲜组织或细胞样本的抽提效果通常优于冻存的组织或细胞，由于组织或细胞冻融过程中可能存在一些RNase释放出来并酶切样品。若是不能及时抽提RNA，推荐先加入适量TRIzol Reagent，之后裂解样品后再冻存。

3）   TRIzol Reagent含有毒物质，请在操作过程中注意好防护工作，戴好手套和护眼罩，避免皮肤接触。在通风橱内完成操作，避免呼吸道吸入。

4）  为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法

1.  需要自行准备的材料

水浴锅或微量恒温仪（Heat block）

异丙醇

75%乙醇

含0.5% SDS的RNase-free水或RNase-free水或DEPC处理水

【可选】RNase-free的糖原（核酸助沉剂）

2.  样本要求

【重要】：样本收集后立即进行RNA分离，或样本收集后立即冻存样本并保存在-80℃或液氮中直至RNA抽提。

样本类型 每mlTRIzol Reagent处理的起始样本量
组织（新鲜组织或保存在RNAlater等稳定液内的组织） 50~100mg组织
单层生长的细胞 1×105~1×107单细胞层（35mm培养皿，10cm2）
悬浮生长的细胞 5-10×106个细胞（动植物或酵母来源）或1×107个  

细胞（细菌来源）

 

3. 样本准备与分相

3.1 根据起始材料用TRIzol Reagent裂解和匀浆样本。

◇组织样本

按比例每50~100mg 组织加1ml TRIzol Reagent，之后用合适的方法进行匀浆。通常用50~100mg组织即可获得足量的RNA，满足绝大多数下游实验。加入过量组织或过少TRIzol都容易导致RNA提取失败。

a）对于研钵研磨：将液氮冻存组织，放到研钵中研磨成粉末，之后加入1ml TRIzol，继续研磨至组织完全裂解【研磨要迅速，最好不要超过1min】。b）对于玻璃匀浆器匀浆：加入1ml TRIzol上下手动匀浆组织10~15次。c）对于机械匀浆器：将组织放入塑料管内，将塑料管置于冰浴烧杯内，加入1ml TRIzol，将分散器头垂直插入管内与组织直接接触，设置转速12,000~20,000 rpm，上下移动试管10~20次，直至组织完全打散，无明显可见大块即可。

◇单层生长的细胞

吸尽培养基，之后往35mm培养皿（10cm2）内加入1ml TRIzol Reagent，晃动3~5次，再用移液枪上下吹打3~5次，使其充分裂解。【按照10cm2培养面积加入1ml TRIzol加量。比如：六孔板每孔加入1ml TRIzol，12孔板每孔加0.5ml TRIzol】

◇  悬浮生长的细胞

离心收集细胞，吸尽上清，每5-10×106个细胞（动植物或酵母来源）或1×107个细胞（细菌来源）加入1ml TRIzol Reagent【加入TRIzol前不要清洗细胞，否则会增加mRNA降解的可能性】。用枪吹打几次或适当涡旋，使其充分裂解。某些酵母和细菌如裂解不充分，可用匀浆器匀浆，使其完全裂解。

【注意】：样本体积不要超过加入TRIzol体积的10%。

 

3.2 特殊样本处理【可选】：对于某些富含蛋白，多糖或脂肪的样本，经TRIzol Reagent裂解后可能会有不溶物或油脂状漂浮物出现。此时需12,000g 4℃离心10min，之后吸取澄清的上清液至一新的离心管中。

3.3 室温孵育5min，使得核蛋白体完全分解。

3.4 按照每1ml TRIzol Reagent加入0.2ml 氯仿，盖紧盖子。涡旋混匀或用手剧烈晃动15s，室温孵育2~3min。

3.5 于12,000g 4℃离心15min。离心后混合物分为三层：下层酚-氯仿层，中间层，和上层无色的水相层。RNA无一例外的停留在水相层中。水相层的容量约为所加TRIzol Reagent体积的60%。用枪吸取上层无色水相到一新的离心管中，避免吸到任何中间层或下层成分。

【注意】：如果希望分离DNA和蛋白，请保留中间层和有机层。

 

4.      RNA分离

4.1    RNA的沉淀：a）【可选】如果起始样本量比较少（＜106个细胞或＜10mg组织），加入5-10μg RNase-free的糖原作为核酸助沉剂到水相中。b）按每ml起初TRIzol Reagent加入0.5ml异丙醇，颠倒数次混匀，室温沉淀10min。如果希望提取microRNA等小RNA，推荐-70℃沉淀过夜。c）于12,000g 4℃离心10min，在管底可见RNA沉淀，弃上清。

 

4.2    RNA的清洗：a）按每ml起初TRIzol Reagent加入1ml 75%乙醇重悬沉淀。【注：RNA在75%乙醇中-20℃至少保存1年，4℃至少1周】；b）低速漩涡或颠倒混匀，于7,500g 4℃离心5min，弃上清。再用离心机甩一下（>5,000rpm, 离心1秒），小心吸尽液体。c）操作的最后，简单干燥RNA沉淀（空气干燥或真空干燥5~10min）。不要在真空管里离心干燥RNA。尤为重要的是，不能让RNA沉淀完全干燥，否则会极大的降低其可溶性。部分溶解的RNA样本的A260/A280比值＜1.6。

4.3    RNA的溶解：用20~50μl 无RNases水或含0.5% SDS的无RNases水溶解RNA，用枪上下吹打2~3次，使其充分溶解，置于-70℃保存或直接用于后续实验，如果后续要做酶切反应请勿用SDS。

【注意】：对于肝脏、胰腺、肾脏等RNase含量较高的组织，沉淀可用100%去离子甲酰胺（货号：MS5515-50ML）溶解。

 

5.      RNA产量的测定

5.1    用无RNase水稀释RNA，之后测定在260nm和280nm的吸收值。

5.2    使用公式A260×稀释倍数×40= μg RNA/ml。

5.3    计算A260/A280比值，比值在1.8~2.0之间视为纯度较高，浓度＞4 μg/ml的样品适用于分光光度计测定。

5.4    进行甲醛变性琼脂糖电泳，确定RNA的完整性和污染情况。

相关产品

货号 名称 规格            
MF0403-100ML      TRIzol Reagent总RNA抽提试剂 100ml
MF0404-500ML DEPC-treated Water (DNase、RNase free) DEPC水（无DNase、RNase )    500ml
MF0406-100ML Surface RNase Remover固相RNase清除剂 100ml
MF0407-1.5ML Solution RNase Remover液相RNase清除剂 1.5ml
MF0409-50ML RNATector Stabilization Solution RNA稳定保存液 50ml
MF0410-100ML RNATector-ICE Frozen Tissue Transition Solution冰冻组织RNA稳定液 100ml
MF0412-1G Glycogen (5mg/ml)核酸助沉剂糖原（5mg/ml） 1ml
MF0413-500UL Glycogen (20mg/ml)核酸助沉剂糖原（20mg/ml） 500µl
MF0416-100ML DNase/RNase-Free Water 100ml
MS5515-50ML Formamide Deionized去离子甲酰胺 50ml

附录1 常见问题与解决方案

出现问题 可能起因 解决方案
比预期产量低 样本未充分匀浆或裂解 降低起始样本量；剪切组织到更小块，确保组织完全浸泡到TRIzol Reagent以达到完全裂解。
沉淀未完全溶解 通过反复用枪吸取样品和在50~60℃加热样品的方式来增加溶解率
样本被降解 样本未及时处理或收集后未马上冻存 样本必须在收集后马上处理或立即冻存
溶液或使用管子未经RNase去除处理 确保实验中所用到的耗材和溶液不受RNase污染
样本制备物没有保存在适当温度下 将RNA样本保存在-70℃。
DNA污染 吸取水相层时带入中间/有机相层 不要尝试吸取离心分层后的所有水相层
RNA A260/A280低 在不足量的TRIzol Reagent内匀浆样品，RNA与蛋白质、DNA未完全分离 加入足量的TRIzol Reagent到样本
匀浆后样品未在室温放置5min，RNA与核蛋白未完全解离 匀浆后样品需室温放置5min
水相中混有有机相，带有蛋白质和DNA的污染 不要尝试吸取离心分层后的所有水相层
抽提得到的RNA沉淀未完全溶解 RNA需要完全溶解