标签归档：nhs

定制Sulfo-Cyanine5.5 NHS Ester 磺化Cy5.5 NHS酯（水溶性）

发表于由

1）吲哚啉环氮原子上取代基引入乙氧基，结构同Amershan Pharmacia的花菁类染料，应用于基因芯片的双色荧光检测。结构同美国化学会注册CAS号对应结构。乙氧基形式的花菁类染料比甲基形式（比如Lumiprobe公司）表现出更好的光稳定性，色牢度，且能更好的防止染料自聚。

2）从化学合成和分离纯化角度来看，乙氧基形式的花菁类染料比甲基形式要求更高，合成难度更大，成本也随之提高，但我司在保质的基础上仍以更有竞争力的价格提供此系列的花菁类染料，欢迎所有科研用户使用我司的产品。

3）可接受定制包装业务。25mg，100mg，500mg，1g，5g………。

产品描述

花菁类染料（Cyanine Dyes）是一种在两个氮原子间含聚亚甲基桥键且携带一非定域电荷的分子。

归其结构特征，花菁素具有极其高的消光系数通常高于100,000 L⋅mol-1⋅cm-1。不同的替代基允许控制发光团的性能比如吸光波长，光稳定性和荧光强度。例如，通过选择不同长度的聚亚甲基桥键能够控制吸光和荧光波长：花菁素越长，吸光和发射波长更高，高达至近红外区。

在生命科学领域广受欢迎的花菁类染料由美国卡耐基梅隆大学（CMU）的Alan Waggoner教授和同事于二十世纪90年代早期研发应用。这些染料呈现出低的生物分子非特异性结合，并由其巨大的消光系数和良好的量子产量产生明亮的荧光。目前商业化可提供各种反应性衍生物，比如点击化学用的N-羟基琥珀酰亚胺酯，马来酰亚胺，叠氮化物和其他衍生物。目前花菁染料常以两种异构体的形式供应：一种非磺化的花菁类染料和磺化的花菁类染料，对于许多应用，两种是可以互相替换的，因其光谱属性基本相同。两种染料都可用于DNA和蛋白质等生物分子的标记。两者的区别在于溶解度：磺化染料具水溶性，可以在水环境中标记，无需有机共溶剂，且在水中不易聚集。 

Sulfo-Cyanine5.5是一种水溶性，远红外发射的荧光团。因含4个磺基，该染料在中性pH中带负电荷，且有非常高的亲水性。

Sulfo-Cyanine5.5 NHS Ester (Sulfo-Cyanine5.5 SE)是Sulfo-Cyanine5.5的氨基反应活化酯。特别适合用于要求纯水溶性环境或无任何有机溶剂反应体内的抗体、敏感蛋白和其他物质的荧光标记。标记后的分子适用于小动物活体成像研究。

产品特性

1）   CAS NO.：N/A

2）   同义名：Sulfo-Cyanine5.5 NHS ester; Sulfo-Cy5.5 NHS ester; Sulfo-Cyanine5.5 SE; Sulfo-Cy5.5琥珀酰亚胺酯；Sulfo-Cy5.5 NHS酯；

3）   分子式：C45H44N3K3O16S4

4）   分子量：1128.40 g/mol

5）   纯度：≥95%

6）   外观：蓝色至深蓝色固体

7）   溶解性：溶于水，DMF，DMSO

8）   Ex/Em：~678/695 nm

9）   消光系数：250, 000 L⋅mol-1⋅cm-1

10）A280/Amax：18%

11）化学结构式：

保存与运输方法

保存：-20°C避光干燥保存，2年有效。

运输：室温运输。

注意事项

1）   Sulfo-Cyanine5.5 NHS Ester水溶液的稳定性很弱，建议现配现用。Sulfo-Cyanine5.5 NHS Ester DMSO溶液的稳定性相对高，建议置于-20℃避光保存，1个月内稳定。

2）   Sulfo-Cyanine5.5 NHS Ester具水溶性，除非标记实验严格要求纯水溶性环境，建议用DMSO溶解配制成母液后使用。一般情况下，Cy系列染料在含有机溶剂体系内的标记效率相对高些。

3）   为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法

【注意】：Cy染料和生物分子的比例（F/P）=4~12之间荧光强度最高。F/P过高，荧光探针会自我淬灭并且影响生物分子的活性。CyDye NHS在pH 8.5~9.4内标记抗体10min，F/P可达5~6。但在pH 7.0内几乎无反应。我司（金畔生物）内部使用Cy3 NHS标记Anti-GST抗体发现按1:1，1:5，1:10，和1:20标记得到的F/P分别为0.28:1，1.16:1，2.3:1和4.6:1。

一、 水溶性Cy3 NHS标记Anti-GST抗体【其它CyDye NHS参考此方法进行并做适当摸索】

商业化购买的抗体如果含有其他蛋白（如血清白蛋白，明胶等），或溶于带氨基的缓冲液，会影响标记。需在标记前对抗体进行纯化。

1.       于1L 0.15M NaCl溶液中透析Anti-GST（0.5ml，3mg/ml），室温或4℃透析4h。

2.       换用1L 新鲜的0.15M NaCl溶液，4℃透析过夜。

3.       第二天再换用1L 0.1M NaHCO3（pH 8.3），4℃透析4h。

4.      【可选】用0.22μm低吸附滤膜过滤透析后的抗体溶液。

5.       用0.1M NaHCO3（pH 8.3）稀释少量的抗体，于280nm测其紫外吸收值并计算标记抗体的总量（IgG抗体摩尔吸光系数为170,000 at 280nm）。

6.       用DMSO配制Cy3 NHS（Mw:765.95），浓度为10mg/ml。根据CyDye NHS和抗体的使用比值（比如1:20）来计算所需要染料的体积。然后慢慢将其加入到抗体溶液中，同时于暗处低速搅拌，室温45min。

7.       用1L 0.15M NaCl溶液，常温或4℃避光透析4h，以除去未标记上的Cy3 NHS。

8.       换用新鲜的1L 0.15M NaCl溶液，4℃避光透析过夜。

9.       换用1L 0.01M PBS/0.01% NaN3溶液室温或4℃避光透析4h，然后在4℃避光再次透析过夜。

10.   【可选】用0.22μm低吸附滤膜过滤透析后的抗体溶液。

11.    用0.01M PBS/0.01% NaN3溶液整数倍稀释标记抗体，测定280nm（蛋白）和552nm（Cy3）处的紫外可见吸光度。

12.    产品冷冻干燥成粉末或置于0.01M PBS/0.01% NaN3溶液中，-20℃避光保存。

【F/P计算】：

Cy3在552nm下的摩尔吸光系数为150,000 L⋅mol-1⋅cm-1，此蛋白在280nm的摩尔吸光系数为170,000 L⋅mol-1⋅cm-1，不同蛋白的摩尔吸光系数不同。Cy3本身在280nm处的吸收是552nm处的8%。按照以下公式计算F/P值。

[Cy3] = A552/150000; [Antibody] = [A280-(0.08×A552)]/170000

F/Pfinal= [Cy3]/ [Antibody]= [1.13×A552]/ [A280-(0.08×A552)]

二、 水溶性Cy5 NHS标记（D-ser2）-Leu-Enkephalin【其它CyDye NHS参考此方法进行并做适当摸索】

1.       低温保存的Cy5 NHS置于室温回温至少20min。往1mg粉末内加入400μl 高品质无水DMSO充分溶解。同样，低温保存的玻璃瓶装的（D-ser2）-Leu-Enkephalin（YSGFLT，0.75mg）室温回温后加入400μl 高品质无水DMSO充分溶解。将400μl Cy5 NHS加入400μl 多肽内。【染料与多肽通常质量比1:1】。

2.       再加入15μl 三乙胺，常温避光搅拌反应混合物，过夜。【若多肽稳定性较弱，则于4℃反应过夜】。

3.       用HPLC纯度多肽。使用C18柱子（25cm×10mm），每次上样注入2×400μl，30min梯度洗脱从0.1% TFA水溶液到MeCN:H2O (0.1% TFA)=70：30，流速4ml/min。（对不同的多肽选择不同的合适HPLC梯度流动相）

4.       收集适当的色带峰，标记多肽的保留时间比未标记的多肽长。

5.       产品冷冻干燥成粉末或置于水溶液中，-20℃避光保存。必要时可用质谱表征。

6.       CyDye标记的蛋白/多肽稳定性取决于蛋白本身。例如标记的IgG在4℃可避光保存2月，更长保存需加入等体积甘油-20℃避光保存。

【F/P计算】：

Cy5在650nm下的摩尔吸光系数为250,000 L⋅mol-1⋅cm-1，此蛋白在280nm的摩尔吸光系数为170,000 L⋅mol-1⋅cm-1，不同蛋白的摩尔吸光系数不同。Cy5本身在280nm处的吸收是650nm处的5%。按照以下公式计算F/P值。

[Cy5] = A650/250000; [Peptide] = [A280-(0.05×A650)]/170000

F/Pfinal= [Cy5]/ [Peptide]= [0.68×A650]/ [A280-(0.05×A650)] 

相关产品

货号 名称 规格          
         Sulfo-Cyanine3 Carboxylic Acid 磺化Cy3羧酸（水溶性） 5mg
Sulfo-Cyanine5 Carboxylic Acid 磺化Cy5羧酸（水溶性） 5mg
Sulfo-Cyanine5.5 Carboxylic Acid 磺化Cy5.5羧酸（水溶性）     5mg
Sulfo-Cyanine7 Carboxylic Acid 磺化Cy7羧酸（水溶性） 5mg
Sulfo-Cyanine3 NHS Ester 磺化Cy3 NHS酯（水溶性） 1mg
Sulfo-Cyanine5 NHS Ester 磺化Cy3 NHS酯（水溶性） 1mg
Sulfo-Cyanine5.5 NHS Ester 磺化Cy5.5 NHS酯（水溶性） 1mg
Sulfo-Cyanine7 NHS Ester 磺化Cy7 NHS酯（水溶性） 1mg

Sulfo-Cyanine7 NHS Ester 磺化Cy7 NHS酯（水溶性）

发表于由

1）吲哚啉环氮原子上取代基引入乙氧基，结构同Amershan Pharmacia的花菁类染料，应用于基因芯片的双色荧光检测。结构同美国化学会注册CAS号对应结构。乙氧基形式的花菁类染料比甲基形式（比如Lumiprobe公司）表现出更好的光稳定性，色牢度，且能更好的防止染料自聚。

2）从化学合成和分离纯化角度来看，乙氧基形式的花菁类染料比甲基形式要求更高，合成难度更大，成本也随之提高，但我司在保质的基础上仍以更有竞争力的价格提供此系列的花菁类染料，欢迎所有科研用户使用我司的产品。

3）可接受定制包装业务。25mg，100mg，500mg，1g，5g………。

产品描述

花菁类染料（Cyanine Dyes）是一种在两个氮原子间含聚亚甲基桥键且携带一非定域电荷的分子。

归其结构特征，花菁素具有极其高的消光系数通常高于100,000 L⋅mol-1⋅cm-1。不同的替代基允许控制发光团的性能比如吸光波长，光稳定性和荧光强度。例如，通过选择不同长度的聚亚甲基桥键能够控制吸光和荧光波长：花菁素越长，吸光和发射波长更高，高达至近红外区。

在生命科学领域广受欢迎的花菁类染料由美国卡耐基梅隆大学（CMU）的Alan Waggoner教授和同事于二十世纪90年代早期研发应用。这些染料呈现出低的生物分子非特异性结合，并由其巨大的消光系数和良好的量子产量产生明亮的荧光。目前商业化可提供各种反应性衍生物，比如点击化学用的N-羟基琥珀酰亚胺酯，马来酰亚胺，叠氮化物和其他衍生物。目前花菁染料常以两种异构体的形式供应：一种非磺化的花菁类染料和磺化的花菁类染料，对于许多应用，两种是可以互相替换的，因其光谱属性基本相同。两种染料都可用于DNA和蛋白质等生物分子的标记。两者的区别在于溶解度：磺化染料具水溶性，可以在水环境中标记，无需有机共溶剂，且在水中不易聚集。

Sulfo-Cyanine7是一种水溶性，近红外（NIR）发射的荧光团。近红外成像具备在特定波段范围内生物组织近乎透明，无背景信号干扰的优势，且无介入损伤，适用于监测活体内各种标记分子的分布情况。

Sulfo-Cyanine7 NHS Ester (Sulfo-Cyanine7 SE)是Sulfo-Cyanine7的氨基反应活化酯，能轻易标记生物分子比如蛋白。本品具水溶性，特别适合用来标记敏感蛋白和易降解的蛋白。标记后的分子适用于小动物活体成像研究。

产品特性

1）CAS NO.：N/A
2）同义名：Sulfo-Cyanine7 NHS ester; Sulfo-Cy7 NHS ester; Sulfo-Cyanine7 SE; Sulfo-Cy7琥珀酰亚胺酯；Sulfo-Cy7 NHS酯；
3）分子式：C39H44N3KO10S2
4）分子量：818.01 g/mol
5）纯度：≥95%
6）外观：绿色至深绿色粉末
7）溶解性：溶于水，DMF，DMSO
8）Ex/Em：~750/780 nm
9）消光系数：200, 000 L⋅mol-1⋅cm-1

保存与运输方法 

保存：-20°C避光干燥保存，2年有效。
运输：室温运输。

注意事项

1） Sulfo-Cyanine7 NHS Ester水溶液的稳定性很弱，建议现配现用。Sulfo-Cyanine7 NHS Ester DMSO溶液的稳定性相对高，建议置于-20℃避光保存，1个月内稳定。

2） Sulfo-Cyanine7 NHS Ester具水溶性，除非标记实验严格要求纯水溶性环境，建议用DMSO溶解配制成母液后使用。一般情况下，Cy系列染料在含有机溶剂体系内的标记效率相对高些。

3） 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法

【注意】：Cy染料和生物分子的比例（F/P）=4~12之间荧光强度最高。F/P过高，荧光探针会自我淬灭并且影响生物分子的活性。CyDye NHS在pH 8.5~9.4内标记抗体10min，F/P可达5~6。但在pH 7.0内几乎无反应。我司（金畔生物）内部使用Cy3NHS标记Anti-GST抗体发现按1:1，1:5，1:10，和1:20标记得到的F/P分别为0.28:1，1.16:1，2.3:1和4.6:1。

一、 水溶性Cy3NHS标记Anti-GST抗体【其它CyDye NHS参考此方法进行并做适当摸索】

商业化购买的抗体如果含有其他蛋白（如血清白蛋白，明胶等），或溶于带氨基的缓冲液，会影响标记。需在标记前对抗体进行纯化。

1. 于1L 0.15M NaCl溶液中透析Anti-GST（0.5ml，3mg/ml），室温或4℃透析4h。

2. 换用1L新鲜的0.15M NaCl溶液，4℃透析过夜。

3. 第二天再换用1L 0.1M NaHCO3（pH 8.3），4℃透析4h。

4. 【可选】用0.22μm低吸附滤膜过滤透析后的抗体溶液。

5. 用0.1M NaHCO3（pH 8.3）稀释少量的抗体，于280nm测其紫外吸收值并计算标记抗体的总量（IgG抗体摩尔吸光系数为170,000 at 280nm）。

6. 用DMSO配制Cy3 NHS（Mw:765.95），浓度为10mg/ml。根据CyDye NHS和抗体的使用比值（比如1:20）来计算所需要染料的体积。然后慢慢将其加入到抗体溶液中，同时于暗处低速搅拌，室温45min。

7. 用1L 0.15M NaCl溶液，常温或4℃避光透析4h，以除去未标记上的Cy3 NHS。

8. 换用新鲜的1L 0.15M NaCl溶液，4℃避光透析过夜。

9. 换用1L 0.01M PBS/0.01% NaN3溶液室温或4℃避光透析4h，然后在4℃避光再次透析过夜。

10. 【可选】用0.22μm低吸附滤膜过滤透析后的抗体溶液。

11. 用0.01M PBS/0.01% NaN3溶液整数倍稀释标记抗体，测定280nm（蛋白）和552nm（Cy3）处的紫外可见吸光度。

12. 产品冷冻干燥成粉末或置于0.01M PBS/0.01% NaN3溶液中，-20℃避光保存。

【F/P计算】：

Cy3在552nm下的摩尔吸光系数为150,000L⋅mol-1⋅cm-1，此蛋白在280nm的摩尔吸光系数为170,000 L⋅mol-1⋅cm-1，不同蛋白的摩尔吸光系数不同。Cy3本身在280nm处的吸收是552nm处的8%。按照以下公式计算F/P值。

[Cy3] = A552/150000; [Antibody] =[A280-(0.08×A552)]/170000

F/Pfinal =[Cy3]/ [Antibody]= [1.13×A552]/[A280-(0.08×A552)]

二、 水溶性Cy5 NHS标记（D-ser2）- Leu-Enkephalin【其它CyDye NHS参考此方法进行并做适当摸索】

1. 低温保存的Cy5 NHS置于室温回温至少20min。往1mg粉末内加入400μl高品质无水DMSO充分溶解。同样，低温保存的玻璃瓶装的（D-ser2）- Leu-Enkephalin（YSGFLT，0.75mg）室温回温后加入400μl高品质无水DMSO充分溶解。将400μl Cy5 NHS加入400μl多肽内。【染料与多肽通常质量比1:1】。

2. 再加入15μl三乙胺，常温避光搅拌反应混合物，过夜。【若多肽稳定性较弱，则于4℃反应过夜】。

3. 用HPLC纯度多肽。使用C18柱子（25cm×10mm），每次上样注入2×400μl，30min梯度洗脱从0.1% TFA水溶液到MeCN:H2O (0.1% TFA)=70：30，流速4ml/min。（对不同的多肽选择不同的合适HPLC梯度流动相）

4. 收集适当的色带峰，标记多肽的保留时间比未标记的多肽长。

5. 产品冷冻干燥成粉末或置于水溶液中，-20℃避光保存。必要时可用质谱表征。

6. CyDye标记的蛋白/多肽稳定性取决于蛋白本身。例如标记的IgG在4℃可避光保存2月，更长保存需加入等体积甘油-20℃避光保存。

【F/P计算】：

Cy5在650nm下的摩尔吸光系数为250,000L⋅mol-1⋅cm-1，此蛋白在280nm的摩尔吸光系数为170,000 L⋅mol-1⋅cm-1，不同蛋白的摩尔吸光系数不同。Cy5本身在280nm处的吸收是650nm处的5%。按照以下公式计算F/P值。

[Cy5] = A650/250000; [Peptide] =[A280-(0.05×A650)]/170000

F/Pfinal =[Cy5]/ [Peptide]= [0.68×A650]/[A280-(0.05×A650)]

相关产品

             名称       规格     
Sulfo-Cyanine3 Carboxylic Acid磺化Cy3羧酸（水溶性）       5mg
Sulfo-Cyanine5 Carboxylic Acid磺化Cy5羧酸（水溶性）       5mg
Sulfo-Cyanine5.5 Carboxylic Acid磺化Cy5.5羧酸（水溶性）        5mg
Sulfo-Cyanine7 Carboxylic Acid磺化Cy7羧酸（水溶性）       5mg
Sulfo-Cyanine3 NHS Ester磺化Cy3 NHS酯（水溶性）       1mg
Sulfo-Cyanine5 NHS Ester磺化Cy3 NHS酯（水溶性）       1mg
Sulfo-Cyanine5.5 NHS Ester磺化Cy5.5 NHS酯（水溶性）       1mg
Sulfo-Cyanine7 NHS Ester磺化Cy7 NHS酯（水溶性）       1mg

Sulfo-Cyanine7 NHS Ester 磺化Cy7 NHS酯（水溶性）

发表于由
产品名称                规格           
Sulfo-Cyanine7 NHS Ester磺化Cy7 NHS酯（水溶性）             1mg        
Sulfo-Cyanine7 NHS Ester磺化Cy7 NHS酯（水溶性）             5mg        

1）吲哚啉环氮原子上取代基引入乙氧基，结构同Amershan Pharmacia的花菁类染料，应用于基因芯片的双色荧光检测。结构同美国化学会注册CAS号对应结构。乙氧基形式的花菁类染料比甲基形式（比如Lumiprobe公司）表现出更好的光稳定性，色牢度，且能更好的防止染料自聚。

2）从化学合成和分离纯化角度来看，乙氧基形式的花菁类染料比甲基形式要求更高，合成难度更大，成本也随之提高，但我司在保质的基础上仍以更有竞争力的价格提供此系列的花菁类染料，欢迎所有科研用户使用我司的产品。

3）可接受定制包装业务。25mg，100mg，500mg，1g，5g………。

产品描述

花菁类染料（Cyanine Dyes）是一种在两个氮原子间含聚亚甲基桥键且携带一非定域电荷的分子【见下图】。

归其结构特征，花菁素具有极其高的消光系数通常高于100,000 L⋅mol-1⋅cm-1。不同的替代基允许控制发光团的性能比如吸光波长，光稳定性和荧光强度。例如，通过选择不同长度的聚亚甲基桥键能够控制吸光和荧光波长：花菁素越长，吸光和发射波长更高，高达至近红外区。

在生命科学领域广受欢迎的花菁类染料由美国卡耐基梅隆大学（CMU）的Alan Waggoner教授和同事于二十世纪90年代早期研发应用。这些染料呈现出低的生物分子非特异性结合，并由其巨大的消光系数和良好的量子产量产生明亮的荧光。目前商业化可提供各种反应性衍生物，比如点击化学用的N-羟基琥珀酰亚胺酯，马来酰亚胺，叠氮化物和其他衍生物。目前花菁染料常以两种异构体的形式供应：一种非磺化的花菁类染料和磺化的花菁类染料，对于许多应用，两种是可以互相替换的，因其光谱属性基本相同。两种染料都可用于DNA和蛋白质等生物分子的标记。两者的区别在于溶解度：磺化染料具水溶性，可以在水环境中标记，无需有机共溶剂，且在水中不易聚集。

Sulfo-Cyanine7是一种水溶性，近红外（NIR）发射的荧光团。近红外成像具备在特定波段范围内生物组织近乎透明，无背景信号干扰的优势，且无介入损伤，适用于监测活体内各种标记分子的分布情况。

Sulfo-Cyanine7 NHS Ester (Sulfo-Cyanine7 SE)是Sulfo-Cyanine7的氨基反应活化酯，能轻易标记生物分子比如蛋白。本品具水溶性，特别适合用来标记敏感蛋白和易降解的蛋白。标记后的分子适用于小动物活体成像研究。

产品特性

1）CAS NO.：N/A
2）同义名：Sulfo-Cyanine7 NHS ester; Sulfo-Cy7 NHS ester; Sulfo-Cyanine7 SE; Sulfo-Cy7琥珀酰亚胺酯；Sulfo-Cy7 NHS酯；
3）分子式：C39H44N3KO10S2
4）分子量：818.01 g/mol
5）纯度：≥95%
6）外观：绿色至深绿色粉末
7）溶解性：溶于水，DMF，DMSO
8）Ex/Em：~750/780 nm
9）消光系数：200, 000 L⋅mol-1⋅cm-1

保存与运输方法 

保存：-20°C避光干燥保存，2年有效。
运输：室温运输。

注意事项

1） Sulfo-Cyanine7 NHS Ester水溶液的稳定性很弱，建议现配现用。Sulfo-Cyanine7 NHS Ester DMSO溶液的稳定性相对高，建议置于-20℃避光保存，1个月内稳定。

2） Sulfo-Cyanine7 NHS Ester具水溶性，除非标记实验严格要求纯水溶性环境，建议用DMSO溶解配制成母液后使用。一般情况下，Cy系列染料在含有机溶剂体系内的标记效率相对高些。

3） 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法

【注意】：Cy染料和生物分子的比例（F/P）=4~12之间荧光强度最高。F/P过高，荧光探针会自我淬灭并且影响生物分子的活性。CyDye NHS在pH 8.5~9.4内标记抗体10min，F/P可达5~6。但在pH 7.0内几乎无反应。我司（金畔生物）内部使用Cy3NHS标记Anti-GST抗体发现按1:1，1:5，1:10，和1:20标记得到的F/P分别为0.28:1，1.16:1，2.3:1和4.6:1。

一、 水溶性Cy3NHS标记Anti-GST抗体【其它CyDye NHS参考此方法进行并做适当摸索】

商业化购买的抗体如果含有其他蛋白（如血清白蛋白，明胶等），或溶于带氨基的缓冲液，会影响标记。需在标记前对抗体进行纯化。

1. 于1L 0.15M NaCl溶液中透析Anti-GST（0.5ml，3mg/ml），室温或4℃透析4h。

2. 换用1L新鲜的0.15M NaCl溶液，4℃透析过夜。

3. 第二天再换用1L 0.1M NaHCO3（pH 8.3），4℃透析4h。

4. 【可选】用0.22μm低吸附滤膜过滤透析后的抗体溶液。

5. 用0.1M NaHCO3（pH 8.3）稀释少量的抗体，于280nm测其紫外吸收值并计算标记抗体的总量（IgG抗体摩尔吸光系数为170,000 at 280nm）。

6. 用DMSO配制Cy3 NHS（Mw:765.95），浓度为10mg/ml。根据CyDye NHS和抗体的使用比值（比如1:20）来计算所需要染料的体积。然后慢慢将其加入到抗体溶液中，同时于暗处低速搅拌，室温45min。

7. 用1L 0.15M NaCl溶液，常温或4℃避光透析4h，以除去未标记上的Cy3 NHS。

8. 换用新鲜的1L 0.15M NaCl溶液，4℃避光透析过夜。

9. 换用1L 0.01M PBS/0.01% NaN3溶液室温或4℃避光透析4h，然后在4℃避光再次透析过夜。

10. 【可选】用0.22μm低吸附滤膜过滤透析后的抗体溶液。

11. 用0.01M PBS/0.01% NaN3溶液整数倍稀释标记抗体，测定280nm（蛋白）和552nm（Cy3）处的紫外可见吸光度。

12. 产品冷冻干燥成粉末或置于0.01M PBS/0.01% NaN3溶液中，-20℃避光保存。

【F/P计算】：

Cy3在552nm下的摩尔吸光系数为150,000L⋅mol-1⋅cm-1，此蛋白在280nm的摩尔吸光系数为170,000 L⋅mol-1⋅cm-1，不同蛋白的摩尔吸光系数不同。Cy3本身在280nm处的吸收是552nm处的8%。按照以下公式计算F/P值。

[Cy3] = A552/150000; [Antibody] =[A280-(0.08×A552)]/170000

F/Pfinal =[Cy3]/ [Antibody]= [1.13×A552]/[A280-(0.08×A552)]

二、 水溶性Cy5 NHS标记（D-ser2）- Leu-Enkephalin【其它CyDye NHS参考此方法进行并做适当摸索】

1. 低温保存的Cy5 NHS置于室温回温至少20min。往1mg粉末内加入400μl高品质无水DMSO充分溶解。同样，低温保存的玻璃瓶装的（D-ser2）- Leu-Enkephalin（YSGFLT，0.75mg）室温回温后加入400μl高品质无水DMSO充分溶解。将400μl Cy5 NHS加入400μl多肽内。【染料与多肽通常质量比1:1】。

2. 再加入15μl三乙胺，常温避光搅拌反应混合物，过夜。【若多肽稳定性较弱，则于4℃反应过夜】。

3. 用HPLC纯度多肽。使用C18柱子（25cm×10mm），每次上样注入2×400μl，30min梯度洗脱从0.1% TFA水溶液到MeCN:H2O (0.1% TFA)=70：30，流速4ml/min。（对不同的多肽选择不同的合适HPLC梯度流动相）

4. 收集适当的色带峰，标记多肽的保留时间比未标记的多肽长。

5. 产品冷冻干燥成粉末或置于水溶液中，-20℃避光保存。必要时可用质谱表征。

6. CyDye标记的蛋白/多肽稳定性取决于蛋白本身。例如标记的IgG在4℃可避光保存2月，更长保存需加入等体积甘油-20℃避光保存。

【F/P计算】：

Cy5在650nm下的摩尔吸光系数为250,000L⋅mol-1⋅cm-1，此蛋白在280nm的摩尔吸光系数为170,000 L⋅mol-1⋅cm-1，不同蛋白的摩尔吸光系数不同。Cy5本身在280nm处的吸收是650nm处的5%。按照以下公式计算F/P值。

[Cy5] = A650/250000; [Peptide] =[A280-(0.05×A650)]/170000

F/Pfinal =[Cy5]/ [Peptide]= [0.68×A650]/[A280-(0.05×A650)]

相关产品

           名称       规格     
Sulfo-Cyanine3 Carboxylic Acid磺化Cy3羧酸（水溶性）       5mg
Sulfo-Cyanine5 Carboxylic Acid磺化Cy5羧酸（水溶性）       5mg
Sulfo-Cyanine5.5 Carboxylic Acid磺化Cy5.5羧酸（水溶性）        5mg
Sulfo-Cyanine7 Carboxylic Acid磺化Cy7羧酸（水溶性）       5mg
Sulfo-Cyanine3 NHS Ester磺化Cy3 NHS酯（水溶性）       1mg
Sulfo-Cyanine5 NHS Ester磺化Cy3 NHS酯（水溶性）       1mg
Sulfo-Cyanine5.5 NHS Ester磺化Cy5.5 NHS酯（水溶性）       1mg
Sulfo-Cyanine7 NHS Ester磺化Cy7 NHS酯（水溶性）       1mg

Cyanine5 NHS Ester Cy5 NHS酯（脂溶性）

发表于由

1）吲哚啉环氮原子上取代基引入乙氧基，结构同Amershan Pharmacia的花菁类染料，应用于基因芯片的双色荧光检测。结构同美国化学会注册CAS号对应结构。乙氧基形式的花菁类染料比甲基形式（比如Lumiprobe公司）表现出更好的光稳定性，色牢度，且能更好的防止染料自聚。

2）从化学合成和分离纯化角度来看，乙氧基形式的花菁类染料比甲基形式要求更高，合成难度更大，成本也随之提高，但我司在保质的基础上仍以更有竞争力的价格提供此系列的花菁类染料，欢迎所有科研用户使用我司的产品。

3）可接受定制包装业务。25mg，100mg，500mg，1g，5g………。

产品描述

花菁类染料（Cyanine Dyes）是一种在两个氮原子间含聚亚甲基桥键且携带一非定域电荷的分子【见下图】。 

归其结构特征，花菁素具有极其高的消光系数通常高于100,000 L⋅mol-1⋅cm-1。不同的替代基允许控制发光团的性能比如吸光波长，光稳定性和荧光强度。例如，通过选择不同长度的聚亚甲基桥键能够控制吸光和荧光波长：花菁素越长，吸光和发射波长更高，高达至近红外区。

在生命科学领域广受欢迎的花菁类染料由美国卡耐基梅隆大学（CMU）的Alan Waggoner教授和同事于二十世纪90年代早期研发应用。这些染料呈现出低的生物分子非特异性结合，并由其巨大的消光系数和良好的量子产量产生明亮的荧光。目前商业化可提供各种反应性衍生物，比如点击化学用的N-羟基琥珀酰亚胺酯，马来酰亚胺，叠氮化物和其他衍生物。目前花菁染料常以两种异构体的形式供应：一种非磺化的花菁类染料和磺化的花菁类染料，对于许多应用，两种是可以互相替换的，因其光谱属性基本相同。两种染料都可用于DNA和蛋白质等生物分子的标记。两者的区别在于溶解度：磺化染料具水溶性，可以在水环境中标记，无需有机共溶剂，且在水中不易聚集。

Cyanine5是一种脂溶性的，红色发射波长的荧光染料，与各种仪器兼容，包括许多荧光显微镜、成像仪、扫描仪和荧光酶标仪。Cyanine5 NHS Ester是Cyanine5的胺反应活化酯，用于标记多肽、蛋白和寡核苷酸的氨基基团，其标记体系内需要少量的有机共溶剂（比如DMF和DMSO）。Cyanine5 NHS Ester非常适用于低成本标记可溶性蛋白以及各种多肽和寡核苷酸。也适用于有机溶剂内对小分子的标记。对于要求更严格的靶标比如易降解蛋白，当反应体系不能使用DMF或DMSO时，建议使用水溶性的Sulfo-Cyanine5 NHS Ester（Cat#：MX4657-1MG）。

产品特性

1）CAS NO：N/A
2）同义名：Cyanine5 NHS ester; Cy5 NHS ester; Cy5 SE; Cyanine5 N-hydroxysuccinimide ester; Cy5琥珀酰亚胺酯；Cy5 NHS酯；
3）纯度：≥95%
4）外观：深蓝色粉末或固体
5）溶解性：溶于DMF，DMSO，几乎不溶于水
6）Ex/Em：~646/664 nm
7）消光系数：250, 000 L⋅mol-1⋅cm-1
8）光谱相似染料：Alexa Fluor® 647, DyLight™ 649

保存与运输方法

保存：-20°C避光干燥保存，2年有效。

运输：室温运输。

注意事项

  1. Cyanine5 NHS Ester是脂溶性的，先用有机溶剂如DMSO，DMF配制成母液后，再加入水溶性反应溶液内。纯有机溶剂的母液置于-20℃避光保存，最好2周内用完，避免反复冻融。水溶性反应液必须现配现用，尽快用完。
  2. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法

【注意】：Cy染料和生物分子的比例（F/P）=4~12之间荧光强度最高。F/P过高，荧光探针会自我淬灭并且影响生物分子的活性。CyDye NHS在pH 8.5~9.4内标记抗体10min，F/P可达5~6。但在pH 7.0内几乎无反应。我司内部使用Cy3NHS标记Anti-GST抗体发现按1:1，1:5，1:10，和1:20标记得到的F/P分别为0.28:1，1.16:1，2.3:1和4.6:1。

  1. 水溶性Cy3NHS标记Anti-GST抗体【其它CyDye NHS参考此方法进行并做适当摸索】

商业化购买的抗体如果含有其他蛋白（如血清白蛋白，明胶等），或溶于带氨基的缓冲液，会影响标记。需在标记前对抗体进行纯化。

    1. 于1L 0.15M NaCl溶液中透析Anti-GST（0.5ml，3mg/ml），室温或4℃透析4h。
    2. 换用1L新鲜的0.15M NaCl溶液，4℃透析过夜。
    3. 第二天再换用1L 0.1M NaHCO3（pH 8.3），4℃透析4h。
    4. 【可选】用0.22μm低吸附滤膜过滤透析后的抗体溶液。
    5. 用0.1M NaHCO3（pH 8.3）稀释少量的抗体，于280nm测其紫外吸收值并计算标记抗体的总量（IgG抗体摩尔吸光系数为170,000 at 280nm）。
    6. 用DMSO配制Cy3 NHS（Mw:765.95），浓度为10mg/ml。根据CyDye NHS和抗体的使用比值（比如1:20）来计算所需要染料的体积。然后慢慢将其加入到抗体溶液中，同时于暗处低速搅拌，室温45min。
    7. 用1L 0.15M NaCl溶液，常温或4℃避光透析4h，以除去未标记上的Cy3 NHS。
    8. 换用新鲜的1L 0.15M NaCl溶液，4℃避光透析过夜。
    9. 换用1L 0.01M PBS/0.01% NaN3溶液室温或4℃避光透析4h，然后在4℃避光再次透析过夜。
    10. 【可选】用0.22μm低吸附滤膜过滤透析后的抗体溶液。
    11. 用0.01M PBS/0.01% NaN3溶液整数倍稀释标记抗体，测定280nm（蛋白）和552nm（Cy3）处的紫外可见吸光度。
    12. 产品冷冻干燥成粉末或置于0.01M PBS/0.01% NaN3溶液中，-20℃避光保存。

【F/P计算】：

Cy3在552nm下的摩尔吸光系数为150,000L⋅mol-1⋅cm-1，此蛋白在280nm的摩尔吸光系数为170,000 L⋅mol-1⋅cm-1，不同蛋白的摩尔吸光系数不同。Cy3本身在280nm处的吸收是552nm处的8%。按照以下公式计算F/P值。

[Cy3] = A552/150000; [Antibody] =[A280-(0.08×A552)]/170000

F/Pfinal =[Cy3]/ [Antibody]= [1.13×A552]/[A280-(0.08×A552)]

  1. 水溶性Cy5 NHS标记（D-ser2）- Leu-Enkephalin【其它CyDye NHS参考此方法进行并做适当摸索】
  1. 低温保存的Cy5 NHS置于室温回温至少20min。往1mg粉末内加入400μl高品质无水DMSO充分溶解。同样，低温保存的玻璃瓶装的（D-ser2）- Leu-Enkephalin（YSGFLT，0.75mg）室温回温后加入400μl高品质无水DMSO充分溶解。将400μl Cy5 NHS加入400μl多肽内。【染料与多肽通常质量比1:1】。
  2. 再加入15μl三乙胺，常温避光搅拌反应混合物，过夜。【若多肽稳定性较弱，则于4℃反应过夜】。
  3. 用HPLC纯度多肽。使用C18柱子（25cm×10mm），每次上样注入2×400μl，30min梯度洗脱从0.1% TFA水溶液到MeCN:H2O (0.1% TFA)=70：30，流速4ml/min。（对不同的多肽选择不同的合适HPLC梯度流动相）
  4. 收集适当的色带峰，标记多肽的保留时间比未标记的多肽长。
  5. 产品冷冻干燥成粉末或置于水溶液中，-20℃避光保存。必要时可用质谱表征。
  6. CyDye标记的蛋白/多肽稳定性取决于蛋白本身。例如标记的IgG在4℃可避光保存2月，更长保存需加入等体积甘油-20℃避光保存。

【F/P计算】：

Cy5在650nm下的摩尔吸光系数为250,000L⋅mol-1⋅cm-1，此蛋白在280nm的摩尔吸光系数为170,000 L⋅mol-1⋅cm-1，不同蛋白的摩尔吸光系数不同。Cy5本身在280nm处的吸收是650nm处的5%。按照以下公式计算F/P值。

[Cy5] = A650/250000; [Peptide] =[A280-(0.05×A650)]/170000

F/Pfinal =[Cy5]/ [Peptide]= [0.68×A650]/[A280-(0.05×A650)]

相关产品

名称 规格
Cyanine3 NHS Ester  Cy3 NHS酯（脂溶性） 1mg
Cyanine5 NHS Ester  Cy5 NHS酯（脂溶性） 1mg
Cyanine5.5 NHS Ester  Cy5.5 NHS酯（脂溶性） 1mg
Cyanine7 NHS Ester  Cy7 NHS酯（脂溶性） 1mg
Cyanine7.5 NHS Ester  Cy7.5 NHS酯（脂溶性） 1mg
Sulfo-Cyanine3 NHS Ester磺化Cy3 NHS酯（水溶性） 1mg
Sulfo-Cyanine5 NHS Ester磺化Cy3 NHS酯（水溶性） 1mg
Sulfo-Cyanine5.5 NHS Ester磺化Cy5.5 NHS酯（水溶性） 1mg
Sulfo-Cyanine7 NHS Ester磺化Cy7 NHS酯（水溶性） 1mg
Sulfo-Cyanine7.5 NHS Ester磺化Cy7.5 NHS酯（水溶性） 1mg

Cyanine5 NHS Ester Cy5 NHS酯（脂溶性）,花菁类染料（Cyanine Dyes）

发表于由

1）吲哚啉环氮原子上取代基引入乙氧基，结构同Amershan Pharmacia的花菁类染料，应用于基因芯片的双色荧光检测。结构同美国化学会注册CAS号对应结构。乙氧基形式的花菁类染料比甲基形式（比如Lumiprobe公司）表现出更好的光稳定性，色牢度，且能更好的防止染料自聚。

2）从化学合成和分离纯化角度来看，乙氧基形式的花菁类染料比甲基形式要求更高，合成难度更大，成本也随之提高，但我司在保质的基础上仍以更有竞争力的价格提供此系列的花菁类染料，欢迎所有科研用户使用我司的产品。

3）可接受定制包装业务。25mg，100mg，500mg，1g，5g………。

产品描述

花菁类染料（Cyanine Dyes）是一种在两个氮原子间含聚亚甲基桥键且携带一非定域电荷的分子【见下图】。 

归其结构特征，花菁素具有极其高的消光系数通常高于100,000 L⋅mol-1⋅cm-1。不同的替代基允许控制发光团的性能比如吸光波长，光稳定性和荧光强度。例如，通过选择不同长度的聚亚甲基桥键能够控制吸光和荧光波长：花菁素越长，吸光和发射波长更高，高达至近红外区。

在生命科学领域广受欢迎的花菁类染料由美国卡耐基梅隆大学（CMU）的Alan Waggoner教授和同事于二十世纪90年代早期研发应用。这些染料呈现出低的生物分子非特异性结合，并由其巨大的消光系数和良好的量子产量产生明亮的荧光。目前商业化可提供各种反应性衍生物，比如点击化学用的N-羟基琥珀酰亚胺酯，马来酰亚胺，叠氮化物和其他衍生物。目前花菁染料常以两种异构体的形式供应：一种非磺化的花菁类染料和磺化的花菁类染料，对于许多应用，两种是可以互相替换的，因其光谱属性基本相同。两种染料都可用于DNA和蛋白质等生物分子的标记。两者的区别在于溶解度：磺化染料具水溶性，可以在水环境中标记，无需有机共溶剂，且在水中不易聚集。

Cyanine5是一种脂溶性的，红色发射波长的荧光染料，与各种仪器兼容，包括许多荧光显微镜、成像仪、扫描仪和荧光酶标仪。Cyanine5 NHS Ester是Cyanine5的胺反应活化酯，用于标记多肽、蛋白和寡核苷酸的氨基基团，其标记体系内需要少量的有机共溶剂（比如DMF和DMSO）。Cyanine5 NHS Ester非常适用于低成本标记可溶性蛋白以及各种多肽和寡核苷酸。也适用于有机溶剂内对小分子的标记。对于要求更严格的靶标比如易降解蛋白，当反应体系不能使用DMF或DMSO时，建议使用水溶性的Sulfo-Cyanine5 NHS Ester（Cat#：MX4657-1MG）。

产品特性

1）CAS NO：N/A
2）同义名：Cyanine5 NHS ester; Cy5 NHS ester; Cy5 SE; Cyanine5 N-hydroxysuccinimide ester; Cy5琥珀酰亚胺酯；Cy5 NHS酯；
3）纯度：≥95%
4）外观：深蓝色粉末或固体
5）溶解性：溶于DMF，DMSO，几乎不溶于水
6）Ex/Em：~646/664 nm
7）消光系数：250, 000 L⋅mol-1⋅cm-1
8）光谱相似染料：Alexa Fluor® 647, DyLight™ 649

保存与运输方法

保存：-20°C避光干燥保存，2年有效。

运输：室温运输。

注意事项

  1. Cyanine5 NHS Ester是脂溶性的，先用有机溶剂如DMSO，DMF配制成母液后，再加入水溶性反应溶液内。纯有机溶剂的母液置于-20℃避光保存，最好2周内用完，避免反复冻融。水溶性反应液必须现配现用，尽快用完。
  2. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法

【注意】：Cy染料和生物分子的比例（F/P）=4~12之间荧光强度最高。F/P过高，荧光探针会自我淬灭并且影响生物分子的活性。CyDye NHS在pH 8.5~9.4内标记抗体10min，F/P可达5~6。但在pH 7.0内几乎无反应。我司内部使用Cy3NHS标记Anti-GST抗体发现按1:1，1:5，1:10，和1:20标记得到的F/P分别为0.28:1，1.16:1，2.3:1和4.6:1。

  1. 水溶性Cy3NHS标记Anti-GST抗体【其它CyDye NHS参考此方法进行并做适当摸索】

商业化购买的抗体如果含有其他蛋白（如血清白蛋白，明胶等），或溶于带氨基的缓冲液，会影响标记。需在标记前对抗体进行纯化。

    1. 于1L 0.15M NaCl溶液中透析Anti-GST（0.5ml，3mg/ml），室温或4℃透析4h。
    2. 换用1L新鲜的0.15M NaCl溶液，4℃透析过夜。
    3. 第二天再换用1L 0.1M NaHCO3（pH 8.3），4℃透析4h。
    4. 【可选】用0.22μm低吸附滤膜过滤透析后的抗体溶液。
    5. 用0.1M NaHCO3（pH 8.3）稀释少量的抗体，于280nm测其紫外吸收值并计算标记抗体的总量（IgG抗体摩尔吸光系数为170,000 at 280nm）。
    6. 用DMSO配制Cy3 NHS（Mw:765.95），浓度为10mg/ml。根据CyDye NHS和抗体的使用比值（比如1:20）来计算所需要染料的体积。然后慢慢将其加入到抗体溶液中，同时于暗处低速搅拌，室温45min。
    7. 用1L 0.15M NaCl溶液，常温或4℃避光透析4h，以除去未标记上的Cy3 NHS。
    8. 换用新鲜的1L 0.15M NaCl溶液，4℃避光透析过夜。
    9. 换用1L 0.01M PBS/0.01% NaN3溶液室温或4℃避光透析4h，然后在4℃避光再次透析过夜。
    10. 【可选】用0.22μm低吸附滤膜过滤透析后的抗体溶液。
    11. 用0.01M PBS/0.01% NaN3溶液整数倍稀释标记抗体，测定280nm（蛋白）和552nm（Cy3）处的紫外可见吸光度。
    12. 产品冷冻干燥成粉末或置于0.01M PBS/0.01% NaN3溶液中，-20℃避光保存。

【F/P计算】：

Cy3在552nm下的摩尔吸光系数为150,000L⋅mol-1⋅cm-1，此蛋白在280nm的摩尔吸光系数为170,000 L⋅mol-1⋅cm-1，不同蛋白的摩尔吸光系数不同。Cy3本身在280nm处的吸收是552nm处的8%。按照以下公式计算F/P值。

[Cy3] = A552/150000; [Antibody] =[A280-(0.08×A552)]/170000

F/Pfinal =[Cy3]/ [Antibody]= [1.13×A552]/[A280-(0.08×A552)]

  1. 水溶性Cy5 NHS标记（D-ser2）- Leu-Enkephalin【其它CyDye NHS参考此方法进行并做适当摸索】
  1. 低温保存的Cy5 NHS置于室温回温至少20min。往1mg粉末内加入400μl高品质无水DMSO充分溶解。同样，低温保存的玻璃瓶装的（D-ser2）- Leu-Enkephalin（YSGFLT，0.75mg）室温回温后加入400μl高品质无水DMSO充分溶解。将400μl Cy5 NHS加入400μl多肽内。【染料与多肽通常质量比1:1】。
  2. 再加入15μl三乙胺，常温避光搅拌反应混合物，过夜。【若多肽稳定性较弱，则于4℃反应过夜】。
  3. 用HPLC纯度多肽。使用C18柱子（25cm×10mm），每次上样注入2×400μl，30min梯度洗脱从0.1% TFA水溶液到MeCN:H2O (0.1% TFA)=70：30，流速4ml/min。（对不同的多肽选择不同的合适HPLC梯度流动相）
  4. 收集适当的色带峰，标记多肽的保留时间比未标记的多肽长。
  5. 产品冷冻干燥成粉末或置于水溶液中，-20℃避光保存。必要时可用质谱表征。
  6. CyDye标记的蛋白/多肽稳定性取决于蛋白本身。例如标记的IgG在4℃可避光保存2月，更长保存需加入等体积甘油-20℃避光保存。

【F/P计算】：

Cy5在650nm下的摩尔吸光系数为250,000L⋅mol-1⋅cm-1，此蛋白在280nm的摩尔吸光系数为170,000 L⋅mol-1⋅cm-1，不同蛋白的摩尔吸光系数不同。Cy5本身在280nm处的吸收是650nm处的5%。按照以下公式计算F/P值。

[Cy5] = A650/250000; [Peptide] =[A280-(0.05×A650)]/170000

F/Pfinal =[Cy5]/ [Peptide]= [0.68×A650]/[A280-(0.05×A650)]

相关产品

名称 规格
Cyanine3 NHS Ester  Cy3 NHS酯（脂溶性） 1mg
Cyanine5 NHS Ester  Cy5 NHS酯（脂溶性） 1mg
Cyanine5.5 NHS Ester  Cy5.5 NHS酯（脂溶性） 1mg
Cyanine7 NHS Ester  Cy7 NHS酯（脂溶性） 1mg
Cyanine7.5 NHS Ester  Cy7.5 NHS酯（脂溶性） 1mg
Sulfo-Cyanine3 NHS Ester磺化Cy3 NHS酯（水溶性） 1mg
Sulfo-Cyanine5 NHS Ester磺化Cy3 NHS酯（水溶性） 1mg
Sulfo-Cyanine5.5 NHS Ester磺化Cy5.5 NHS酯（水溶性） 1mg
Sulfo-Cyanine7 NHS Ester磺化Cy7 NHS酯（水溶性） 1mg
Sulfo-Cyanine7.5 NHS Ester磺化Cy7.5 NHS酯（水溶性） 1mg

Cyanine3 NHS Ester Cy3 NHS酯（脂溶性）

发表于由

1）吲哚啉环氮原子上取代基引入乙氧基，结构同Amershan Pharmacia的花菁类染料，应用于基因芯片的双色荧光检测。结构同美国化学会注册CAS号对应结构。乙氧基形式的花菁类染料比甲基形式（比如Lumiprobe公司）表现出更好的光稳定性，色牢度，且能更好的防止染料自聚。

2）从化学合成和分离纯化角度来看，乙氧基形式的花菁类染料比甲基形式要求更高，合成难度更大，成本也随之提高，但我司在保质的基础上仍以更有竞争力的价格提供此系列的花菁类染料，欢迎所有科研用户使用我司的产品。

3）可接受定制包装业务。25mg，100mg，500mg，1g，5g………。

产品描述

花菁类染料（Cyanine Dyes）是一种在两个氮原子间含聚亚甲基桥键且携带一非定域电荷的分子【见下图】。 

归其结构特征，花菁素具有极其高的消光系数通常高于100,000 L⋅mol-1⋅cm-1。不同的替代基允许控制发光团的性能比如吸光波长，光稳定性和荧光强度。例如，通过选择不同长度的聚亚甲基桥键能够控制吸光和荧光波长：花菁素越长，吸光和发射波长更高，高达至近红外区。

在生命科学领域广受欢迎的花菁类染料由美国卡耐基梅隆大学（CMU）的Alan Waggoner教授和同事于二十世纪90年代早期研发应用。这些染料呈现出低的生物分子非特异性结合，并由其巨大的消光系数和良好的量子产量产生明亮的荧光。目前商业化可提供各种反应性衍生物，比如点击化学用的N-羟基琥珀酰亚胺酯，马来酰亚胺，叠氮化物和其他衍生物。目前花菁染料常以两种异构体的形式供应：一种非磺化的花菁类染料和磺化的花菁类染料，对于许多应用，两种是可以互相替换的，因其光谱属性基本相同。两种染料都可用于DNA和蛋白质等生物分子的标记。两者的区别在于溶解度：磺化染料具水溶性，可以在水环境中标记，无需有机共溶剂，且在水中不易聚集。

Cyanine3是一种脂溶性的，橘黄色发射波长的荧光染料。Cyanine3 NHS Ester是Cyanine3的胺反应性活化酯，用于标记生物分子的氨基基团。非常适合用于标记可溶性蛋白，多肽，和寡核苷酸/DNA。

产品特性

1）CAS NO：N/A
2）同义名：Cyanine3 NHS ester; Cy3 NHS ester; Cy3 SE; Cyanine3 N-hydroxysuccinimide ester; Cy3琥珀酰亚胺酯；Cy3 NHS酯；
3）分子式：C35H42IN3O4
4）分子量：695.64 g/mol
5）纯度：≥95%
6）外观：红色粉末或固体
7）溶解性：溶于DMF，DMSO，不溶于水
8）Ex/Em：~548/562 nm
9）消光系数：150, 000 L⋅mol-1⋅cm-1
10）A280/Amax：8%
11）光谱相似染料：Alexa Fluor® 555, DyLight™ 555

保存与运输方法

保存：-20°C避光干燥保存，2年有效。

运输：室温运输。

注意事项

  1. Cyanine3 NHS Ester是脂溶性的，先用有机溶剂如DMSO，DMF配制成母液后，再加入水溶性反应溶液内。纯有机溶剂的母液置于-20℃避光保存，最好2周内用完，避免反复冻融。水溶性反应液必须现配现用，尽快用完。
  2. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法

【注意】：Cy染料和生物分子的比例（F/P）=4~12之间荧光强度最高。F/P过高，荧光探针会自我淬灭并且影响生物分子的活性。CyDye NHS在pH 8.5~9.4内标记抗体10min，F/P可达5~6。但在pH 7.0内几乎无反应。我司（金畔生物）内部使用Cy3NHS标记Anti-GST抗体发现按1:1，1:5，1:10，和1:20标记得到的F/P分别为0.28:1，1.16:1，2.3:1和4.6:1。

  1. 水溶性Cy3NHS标记Anti-GST抗体【其它CyDye NHS参考此方法进行并做适当摸索】

商业化购买的抗体如果含有其他蛋白（如血清白蛋白，明胶等），或溶于带氨基的缓冲液，会影响标记。需在标记前对抗体进行纯化。

    1. 于1L 0.15M NaCl溶液中透析Anti-GST（0.5ml，3mg/ml），室温或4℃透析4h。
    2. 换用1L新鲜的0.15M NaCl溶液，4℃透析过夜。
    3. 第二天再换用1L 0.1M NaHCO3（pH 8.3），4℃透析4h。
    4. 【可选】用0.22μm低吸附滤膜过滤透析后的抗体溶液。
    5. 用0.1M NaHCO3（pH 8.3）稀释少量的抗体，于280nm测其紫外吸收值并计算标记抗体的总量（IgG抗体摩尔吸光系数为170,000 at 280nm）。
    6. 用DMSO配制Cy3 NHS（Mw:765.95），浓度为10mg/ml。根据CyDye NHS和抗体的使用比值（比如1:20）来计算所需要染料的体积。然后慢慢将其加入到抗体溶液中，同时于暗处低速搅拌，室温45min。
    7. 用1L 0.15M NaCl溶液，常温或4℃避光透析4h，以除去未标记上的Cy3 NHS。
    8. 换用新鲜的1L 0.15M NaCl溶液，4℃避光透析过夜。
    9. 换用1L 0.01M PBS/0.01% NaN3溶液室温或4℃避光透析4h，然后在4℃避光再次透析过夜。
    10. 【可选】用0.22μm低吸附滤膜过滤透析后的抗体溶液。
    11. 用0.01M PBS/0.01% NaN3溶液整数倍稀释标记抗体，测定280nm（蛋白）和552nm（Cy3）处的紫外可见吸光度。
    12. 产品冷冻干燥成粉末或置于0.01M PBS/0.01% NaN3溶液中，-20℃避光保存。

【F/P计算】：

Cy3在552nm下的摩尔吸光系数为150,000L⋅mol-1⋅cm-1，此蛋白在280nm的摩尔吸光系数为170,000 L⋅mol-1⋅cm-1，不同蛋白的摩尔吸光系数不同。Cy3本身在280nm处的吸收是552nm处的8%。按照以下公式计算F/P值。

[Cy3] = A552/150000; [Antibody] =[A280-(0.08×A552)]/170000

F/Pfinal =[Cy3]/ [Antibody]= [1.13×A552]/[A280-(0.08×A552)]

  1. 水溶性Cy5 NHS标记（D-ser2）- Leu-Enkephalin【其它CyDye NHS参考此方法进行并做适当摸索】
  1. 低温保存的Cy5 NHS置于室温回温至少20min。往1mg粉末内加入400μl高品质无水DMSO充分溶解。同样，低温保存的玻璃瓶装的（D-ser2）- Leu-Enkephalin（YSGFLT，0.75mg）室温回温后加入400μl高品质无水DMSO充分溶解。将400μl Cy5 NHS加入400μl多肽内。【染料与多肽通常质量比1:1】。
  2. 再加入15μl三乙胺，常温避光搅拌反应混合物，过夜。【若多肽稳定性较弱，则于4℃反应过夜】。
  3. 用HPLC纯度多肽。使用C18柱子（25cm×10mm），每次上样注入2×400μl，30min梯度洗脱从0.1% TFA水溶液到MeCN:H2O (0.1% TFA)=70：30，流速4ml/min。（对不同的多肽选择不同的合适HPLC梯度流动相）
  4. 收集适当的色带峰，标记多肽的保留时间比未标记的多肽长。
  5. 产品冷冻干燥成粉末或置于水溶液中，-20℃避光保存。必要时可用质谱表征。
  6. CyDye标记的蛋白/多肽稳定性取决于蛋白本身。例如标记的IgG在4℃可避光保存2月，更长保存需加入等体积甘油-20℃避光保存。

【F/P计算】：

Cy5在650nm下的摩尔吸光系数为250,000L⋅mol-1⋅cm-1，此蛋白在280nm的摩尔吸光系数为170,000 L⋅mol-1⋅cm-1，不同蛋白的摩尔吸光系数不同。Cy5本身在280nm处的吸收是650nm处的5%。按照以下公式计算F/P值。

[Cy5] = A650/250000; [Peptide] =[A280-(0.05×A650)]/170000

F/Pfinal =[Cy5]/ [Peptide]= [0.68×A650]/[A280-(0.05×A650)]

相关产品

    名称  规格  
    Cyanine3 NHS Ester  Cy3 NHS酯（脂溶性）  1mg
    Cyanine5 NHS Ester  Cy5 NHS酯（脂溶性） 1 mg
    Cyanine5.5 NHS Ester  Cy5.5 NHS酯（脂溶性）  1mg
  Cyanine7 NHS Ester  Cy7 NHS酯（脂溶性）  1mg
    Cyanine7.5 NHS Ester  Cy7.5 NHS酯（脂溶性）  1mg
    Sulfo-Cyanine3 NHS Ester磺化Cy3 NHS酯（水溶性）  1mg
    Sulfo-Cyanine5 NHS Ester磺化Cy3 NHS酯（水溶性）  1mg
    Sulfo-Cyanine5.5 NHS Ester磺化Cy5.5 NHS酯（水溶性）  1mg
    Sulfo-Cyanine7 NHS Ester磺化Cy7 NHS酯（水溶性）  1mg
        Sulfo-Cyanine7.5 NHS Ester磺化Cy7.5 NHS酯（水溶性）  1mg

Cyanine3 NHS Ester Cy3 NHS酯（脂溶性）

发表于由

1）吲哚啉环氮原子上取代基引入乙氧基，结构同Amershan Pharmacia的花菁类染料，应用于基因芯片的双色荧光检测。结构同美国化学会注册CAS号对应结构。乙氧基形式的花菁类染料比甲基形式（比如Lumiprobe公司）表现出更好的光稳定性，色牢度，且能更好的防止染料自聚。

2）从化学合成和分离纯化角度来看，乙氧基形式的花菁类染料比甲基形式要求更高，合成难度更大，成本也随之提高，但我司在保质的基础上仍以更有竞争力的价格提供此系列的花菁类染料，欢迎所有科研用户使用我司的产品。

3）可接受定制包装业务。25mg，100mg，500mg，1g，5g………。

产品描述

花菁类染料（Cyanine Dyes）是一种在两个氮原子间含聚亚甲基桥键且携带一非定域电荷的分子【见下图】。 

归其结构特征，花菁素具有极其高的消光系数通常高于100,000 L⋅mol-1⋅cm-1。不同的替代基允许控制发光团的性能比如吸光波长，光稳定性和荧光强度。例如，通过选择不同长度的聚亚甲基桥键能够控制吸光和荧光波长：花菁素越长，吸光和发射波长更高，高达至近红外区。

在生命科学领域广受欢迎的花菁类染料由美国卡耐基梅隆大学（CMU）的Alan Waggoner教授和同事于二十世纪90年代早期研发应用。这些染料呈现出低的生物分子非特异性结合，并由其巨大的消光系数和良好的量子产量产生明亮的荧光。目前商业化可提供各种反应性衍生物，比如点击化学用的N-羟基琥珀酰亚胺酯，马来酰亚胺，叠氮化物和其他衍生物。目前花菁染料常以两种异构体的形式供应：一种非磺化的花菁类染料和磺化的花菁类染料，对于许多应用，两种是可以互相替换的，因其光谱属性基本相同。两种染料都可用于DNA和蛋白质等生物分子的标记。两者的区别在于溶解度：磺化染料具水溶性，可以在水环境中标记，无需有机共溶剂，且在水中不易聚集。

Cyanine3是一种脂溶性的，橘黄色发射波长的荧光染料。Cyanine3 NHS Ester是Cyanine3的胺反应性活化酯，用于标记生物分子的氨基基团。非常适合用于标记可溶性蛋白，多肽，和寡核苷酸/DNA。

产品特性

1）CAS NO：N/A
2）同义名：Cyanine3 NHS ester; Cy3 NHS ester; Cy3 SE; Cyanine3 N-hydroxysuccinimide ester; Cy3琥珀酰亚胺酯；Cy3 NHS酯；
3）分子式：C35H42IN3O4
4）分子量：695.64 g/mol
5）纯度：≥95%
6）外观：红色粉末或固体
7）溶解性：溶于DMF，DMSO，不溶于水
8）Ex/Em：~548/562 nm
9）消光系数：150, 000 L⋅mol-1⋅cm-1
10）A280/Amax：8%
11）光谱相似染料：Alexa Fluor® 555, DyLight™ 555

保存与运输方法

保存：-20°C避光干燥保存，2年有效。

运输：室温运输。

注意事项

  1. Cyanine3 NHS Ester是脂溶性的，先用有机溶剂如DMSO，DMF配制成母液后，再加入水溶性反应溶液内。纯有机溶剂的母液置于-20℃避光保存，最好2周内用完，避免反复冻融。水溶性反应液必须现配现用，尽快用完。
  2. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法

【注意】：Cy染料和生物分子的比例（F/P）=4~12之间荧光强度最高。F/P过高，荧光探针会自我淬灭并且影响生物分子的活性。CyDye NHS在pH 8.5~9.4内标记抗体10min，F/P可达5~6。但在pH 7.0内几乎无反应。我司（金畔生物）内部使用Cy3NHS标记Anti-GST抗体发现按1:1，1:5，1:10，和1:20标记得到的F/P分别为0.28:1，1.16:1，2.3:1和4.6:1。

  1. 水溶性Cy3NHS标记Anti-GST抗体【其它CyDye NHS参考此方法进行并做适当摸索】

商业化购买的抗体如果含有其他蛋白（如血清白蛋白，明胶等），或溶于带氨基的缓冲液，会影响标记。需在标记前对抗体进行纯化。

    1. 于1L 0.15M NaCl溶液中透析Anti-GST（0.5ml，3mg/ml），室温或4℃透析4h。
    2. 换用1L新鲜的0.15M NaCl溶液，4℃透析过夜。
    3. 第二天再换用1L 0.1M NaHCO3（pH 8.3），4℃透析4h。
    4. 【可选】用0.22μm低吸附滤膜过滤透析后的抗体溶液。
    5. 用0.1M NaHCO3（pH 8.3）稀释少量的抗体，于280nm测其紫外吸收值并计算标记抗体的总量（IgG抗体摩尔吸光系数为170,000 at 280nm）。
    6. 用DMSO配制Cy3 NHS（Mw:765.95），浓度为10mg/ml。根据CyDye NHS和抗体的使用比值（比如1:20）来计算所需要染料的体积。然后慢慢将其加入到抗体溶液中，同时于暗处低速搅拌，室温45min。
    7. 用1L 0.15M NaCl溶液，常温或4℃避光透析4h，以除去未标记上的Cy3 NHS。
    8. 换用新鲜的1L 0.15M NaCl溶液，4℃避光透析过夜。
    9. 换用1L 0.01M PBS/0.01% NaN3溶液室温或4℃避光透析4h，然后在4℃避光再次透析过夜。
    10. 【可选】用0.22μm低吸附滤膜过滤透析后的抗体溶液。
    11. 用0.01M PBS/0.01% NaN3溶液整数倍稀释标记抗体，测定280nm（蛋白）和552nm（Cy3）处的紫外可见吸光度。
    12. 产品冷冻干燥成粉末或置于0.01M PBS/0.01% NaN3溶液中，-20℃避光保存。

【F/P计算】：

Cy3在552nm下的摩尔吸光系数为150,000L⋅mol-1⋅cm-1，此蛋白在280nm的摩尔吸光系数为170,000 L⋅mol-1⋅cm-1，不同蛋白的摩尔吸光系数不同。Cy3本身在280nm处的吸收是552nm处的8%。按照以下公式计算F/P值。

[Cy3] = A552/150000; [Antibody] =[A280-(0.08×A552)]/170000

F/Pfinal =[Cy3]/ [Antibody]= [1.13×A552]/[A280-(0.08×A552)]

  1. 水溶性Cy5 NHS标记（D-ser2）- Leu-Enkephalin【其它CyDye NHS参考此方法进行并做适当摸索】
  1. 低温保存的Cy5 NHS置于室温回温至少20min。往1mg粉末内加入400μl高品质无水DMSO充分溶解。同样，低温保存的玻璃瓶装的（D-ser2）- Leu-Enkephalin（YSGFLT，0.75mg）室温回温后加入400μl高品质无水DMSO充分溶解。将400μl Cy5 NHS加入400μl多肽内。【染料与多肽通常质量比1:1】。
  2. 再加入15μl三乙胺，常温避光搅拌反应混合物，过夜。【若多肽稳定性较弱，则于4℃反应过夜】。
  3. 用HPLC纯度多肽。使用C18柱子（25cm×10mm），每次上样注入2×400μl，30min梯度洗脱从0.1% TFA水溶液到MeCN:H2O (0.1% TFA)=70：30，流速4ml/min。（对不同的多肽选择不同的合适HPLC梯度流动相）
  4. 收集适当的色带峰，标记多肽的保留时间比未标记的多肽长。
  5. 产品冷冻干燥成粉末或置于水溶液中，-20℃避光保存。必要时可用质谱表征。
  6. CyDye标记的蛋白/多肽稳定性取决于蛋白本身。例如标记的IgG在4℃可避光保存2月，更长保存需加入等体积甘油-20℃避光保存。

【F/P计算】：

Cy5在650nm下的摩尔吸光系数为250,000L⋅mol-1⋅cm-1，此蛋白在280nm的摩尔吸光系数为170,000 L⋅mol-1⋅cm-1，不同蛋白的摩尔吸光系数不同。Cy5本身在280nm处的吸收是650nm处的5%。按照以下公式计算F/P值。

[Cy5] = A650/250000; [Peptide] =[A280-(0.05×A650)]/170000

F/Pfinal =[Cy5]/ [Peptide]= [0.68×A650]/[A280-(0.05×A650)]

相关产品

    名称  规格  
    Cyanine3 NHS Ester  Cy3 NHS酯（脂溶性）  1mg
    Cyanine5 NHS Ester  Cy5 NHS酯（脂溶性） 1 mg
    Cyanine5.5 NHS Ester  Cy5.5 NHS酯（脂溶性）  1mg
    Cyanine7 NHS Ester  Cy7 NHS酯（脂溶性）  1mg
    Cyanine7.5 NHS Ester  Cy7.5 NHS酯（脂溶性）  1mg
    Sulfo-Cyanine3 NHS Ester磺化Cy3 NHS酯（水溶性）  1mg
     Sulfo-Cyanine5 NHS Ester磺化Cy3 NHS酯（水溶性）  1mg
    Sulfo-Cyanine5.5 NHS Ester磺化Cy5.5 NHS酯（水溶性）  1mg
    Sulfo-Cyanine7 NHS Ester磺化Cy7 NHS酯（水溶性）  1mg
       Sulfo-Cyanine7.5 NHS Ester磺化Cy7.5 NHS酯（水溶性）  1mg

CAS NO：35013-72-0 Biotin-NHS (D-Biotin N-Succinimidyl Ester)  D-生物素 N-羟基琥珀酰亚胺酯

发表于由

Biotin-NHS；NHS-Biotin；Sulfo-NHS；Sulfo-SMCC；异型双功能交联剂；NHS酯（胺基指向）；CAS NO：35013-72-0；

产品描述

D-生物素 N-羟基琥珀酰亚胺酯（D-Biotin N-Succinimidyl Ester, Biotin-NHS）是最受欢迎的胺反应生物素衍生物，用于修饰蛋白和其它生物分子（温和条件下）。Biotin-NHS具细胞膜渗透性，可用于共价标记胞内蛋白，以及常常用于蛋白检测，当与链霉亲和素和固定化链霉亲和素联合使用，用于各种生物素-链霉亲和素结合实验。

产品特性

化学名：6aR-hexahydro-2-oxo-2,5-dioxo-1-pyrrolidinyl ester-1H-thieno[3aS,4-d]imidazole-4S-pentanoic acid
同义名：Biotin-NHS; Biotin succinimidyl ester; Biotin-N-hydroxysuccinimide ester; (+)-Biotin N-succinimidyl ester; d-Biotin NHS ester; BNHS; Biotinyl-N-hydroxy-succinimide; Succinimidobiotin; N-Hydroxysuccinimidobiotin; Succinimidyl Biotin;

生物素-N-羟基丁二酰亚胺活化酯；
CAS NO：35013-72-0
分子量：341.38 g/mol
外观：白色粉末
分子式：C14H19N3O5S
纯度：≥99% HPLC
溶解性：溶于DMSO（20mg/ml）、DMF（20mg/ml）

保存与运输方法

保存：-20℃干燥保存，至少1年稳定。

运输：冰袋运输。

注意事项

1）Biotin-NHS用DMSO或DMF重溶配制成储存液（比如：10mg/ml），若单次不能用完，置于≤-20℃保存，2周内用完。

2）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

通用操作步骤

  1. 开瓶前将本品从冰箱取出置于室温平衡至少20min。
  2. 用100mM磷酸钠，150mM NaCl，pH 7.2-7.5或其它适合的无胺缓冲液来溶解蛋白使其浓度为1-10mg/ml。

【注①】：如果蛋白内含叠氮钠或小分子稳定剂的防腐剂，则需将蛋白先透析到无胺缓冲液内去除杂质；

【注②】：如果蛋白溶于Tris或甘氨酸缓冲液，则需将蛋白先透析到无胺缓冲液内去除杂质；

  1. 3.一旦开始使用，用无水DMF或DMSO配制20mg/mlBiotin-NHS。
  2. 4. 加入足量的Biotin-NHS储存液到蛋白溶液中，使得Biotin-NHS与蛋白的过剩摩尔比达10-20倍，充分混匀。

【注①】：为了保证最佳结果，第一次实验可测试5:1; 10:1; 15:1; 20:1的过剩摩尔比，以确定最优比率。

【注②】：最终标记体系内确保DMSO或DMF的含量≤10%总体积。

  1. 5.于室温孵育30-60min，或于4℃孵育≥2h，反应过程溶液处于持续震荡中。
  2. 6.通过透析或者树脂凝胶过柱（比如：SephadexG-25）的方法脱盐纯化生物素化标记蛋白。

【注①】：生物素化标记蛋白需保存在含载体蛋白（比如：0.1% BSA）的缓冲液内，浓度＞0.5mg/ml。

【注②】：为了长期保存，生物素化标记蛋白可以冻干或分装成单次用量置于-80℃保存。

相关产品

名称 规格
SMCC 4-(N-马来酰亚胺基甲基)环己烷-1-羧酸琥珀酰亚胺酯 25mg
Sulfo-SMCC 4-(N-马来酰亚胺甲基)环己烷-1-羧酸磺酸基琥珀酰亚胺酯钠盐 25mg
NHS (N-Hydroxysuccinimide) N-羟基琥珀酰亚胺 25g
Sulfo-NHS N-羟基琥珀酰亚胺磺酸钠盐 1g
Biotin-NHS (D-Biotin N-Succinimidyl Ester) D-生物素 N-羟基琥珀酰亚胺酯 10mg
Hydroxylammonium chloride 盐酸羟胺（高纯，99.99%） 25g
DL-Dithiothreitol (DTT) 二硫苏糖醇 10g
TCEP Hydrochloride 三(2-羧乙基)膦盐酸盐 1g
β-Mercaptoethanol (β-ME) β-巯基乙醇 100ml
EDC HCl (1-ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl)carbodiimide hydrochloride) 1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐 5g
EDC (1-ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl)carbodiimide) 1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺 1g

 

CAS NO：106627-54-7；Sulfo-NHS (N-Hydroxysulfosuccinimide sodium salt) N-羟基琥珀酰亚胺磺酸钠盐

发表于由

Sulfo-NHS；NHS N-羟基琥珀酰亚胺； Sulfo-SMCC；异型双功能交联剂；NHS酯（胺基指向）；CAS NO：106627-54-7；

N-羟基琥珀酰亚胺（N-Hydroxysuccinimide, NHS）和N-羟基琥珀酰亚胺磺酸钠盐（N-Hydroxysulfosuccinimide sodium salt, Sulfo-NHS）用来制备羧基的胺反应酯，用于化学标记、交联和固相固定应用。在存在碳化二亚铵化合物（如：EDC）时，羧基（-COOH）可能与NHS或Sulfo-NHS反应生成一个半稳定的NHS酯或Sulfo-NHS酯，后者接下来可能与伯胺（-NH2）反应形成酰胺键（图1）。虽然NHS或Sulfo-NHS在碳化二亚铵反应中不是必要的，但它们的加入能大大增强偶联效率。另外，NHS或Sulfo-NHS的使用允许二步反应的开展。

NHS或Sulfo-NHS都溶于水相和有机溶剂。然而，经NHS活化会导致修饰后羧基化合物的水溶性降低，而由于磺酸基电荷的存在，经Sulfo-NHS修饰后的羧基化合物水溶性维持原状或提高。虽然制备的NHS酯或Sulfo-NHS酯足够稳定用于进行二步反应流程，但两者都有可能在数小时或分钟内水解，水解速率取决于水含量和反应溶液pH（NHS酯的半衰期在pH 7 4-5h，pH 8 1h，而在pH 8.6 10min）。萃取和纯化常用来制备稳定的NHS活化分子。最佳结果依然是NHS活化分子与含胺基分子立即反应。

同义名：Sulfo-NHS; Sulfo-N-hydroxysuccinimide; Hydroxy-2,3-dixopyrrolidine-3-sulfonic acid sodium salt;磺基-NHS；羟基-2,5-二氧代吡咯烷-3-磺酸钠盐；N-羟基硫代琥珀酰亚胺钠盐；
CAS NO：106627-54-7
分子量：217.13 g/mol
分子式：C4H4NNaO6S   
纯度：≥98% HPLC
溶解性：溶于水（5mM）和甲醇

保存与运输方法

保存：2-8℃干燥保存，至少1年稳定。

运输：冰袋运输。

注意事项

1）EDC和Sulfo-NHS的活化反应在pH 4.5-7.2范围内最有效，EDC反应通常在MES buffer（pH 4.7-6.0）内进行。

2）EDC在水溶性环境中非常不稳定，必须使用前配制。NHS和Sulfo-NHS在溶液中相对稳定，不过最佳结果还是使用新鲜配制的试剂。

3）NHS反应除掉目的化合物，反应体系内不能含有羧基或胺基化合物。因此，Tris、甘氨酸、赖氨酸、乙醇胺或者其他含胺缓冲液。

4）Sulfo-NHS是磺酸盐形式的NHS，具水溶性，但不具膜渗透性。NHS具膜渗透性和水溶性。NHS溶于有机溶剂，而Sulfo-NHS在有机溶剂内的溶解能力相对差很多。由于NHS是最终与伯胺反应的基团，所以由NHS和Sulfo-NHS反应所得的偶联产物是一致的。Sulfo-NHS被选用主要在于其能赋予活化化合物更好的水溶性和/或控制活化化合物的膜渗透性。

6）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

相关产品

名称 规格
SMCC 4-(N-马来酰亚胺基甲基)环己烷-1-羧酸琥珀酰亚胺酯 25mg
Sulfo-SMCC 4-(N-马来酰亚胺甲基)环己烷-1-羧酸磺酸基琥珀酰亚胺酯钠盐 25mg
NHS (N-Hydroxysuccinimide) N-羟基琥珀酰亚胺 25g
Sulfo-NHS N-羟基琥珀酰亚胺磺酸钠盐 1g
Biotin-NHS (D-Biotin N-Succinimidyl Ester) D-生物素 N-羟基琥珀酰亚胺酯 10mg
Hydroxylammonium chloride 盐酸羟胺（高纯，99.99%） 25g
DL-Dithiothreitol (DTT) 二硫苏糖醇 10g
TCEP Hydrochloride 三(2-羧乙基)膦盐酸盐 1g
β-Mercaptoethanol (β-ME) β-巯基乙醇 100ml
EDC HCl (1-ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl)carbodiimide hydrochloride) 1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐 5g
EDC (1-ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl)carbodiimide) 1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺 1g

 

Sulfo-SMCC；异型双功能交联剂；NHS酯（胺基指向）Sulfo-NHS-Biotin (Sulfosuccinimidyl Biotin)  磺基琥珀酰亚胺生物素

发表于由

Sulfo-NHS-Biotin；Sulfo-NHS；NHS N-羟基琥珀酰亚胺； Sulfo-SMCC；异型双功能交联剂；NHS酯（胺基指向）；CAS NO：6066-82-6；CAS NO：119616-38-5；

产品信息

产品名称

 产品编号 规格

Sulfo-NHS-Biotin磺基琥珀酰亚胺生物素

 MM3713-25MG 25mg
Sulfo-NHS-Biotin磺基琥珀酰亚胺生物素 MM3713-50MG 50mg

Sulfo-NHS-Biotin磺基琥珀酰亚胺生物素 MM3713-100MG 100mg

​产品描述

磺基琥珀酰亚胺生物素（Sulfosuccinimidyl Biotin, Sulfo-NHS-Biotin）适用于快速、有效的标记抗体、蛋白和其它含伯胺分子。Sulfo-NHS-Biotin具水溶性、膜非渗透性两大特征，特别适用于标记细胞表面蛋白。细胞表面生物素化已成为一种重要的工具，用来研究受体和转运体的表达和调控、区分细胞质膜蛋白和定位在细胞器膜上的蛋白，以及极化上皮细胞的膜蛋白分布，等等。由于Sulfo-NHS-Biotin容易溶于极性溶液，琥珀酰亚胺环上的磺酸钠基团使其带电荷从而不能穿透细胞膜。只要细胞维持完整性，则仅有暴露在细胞表面的伯胺才能与其反应，从而将蛋白生物素化。

水不溶性版的Sulfo-NHS-Biotin是NHS-Biotin（Cat#：MM3705），是广泛使用的生物素化试剂，两者的工作原理相同，：在生理至弱碱性缓冲液（pH 7-9）中，NHS-Biotin与伯胺（-NH2）反应形成稳定的酰胺键。蛋白（包括：抗体）通常含几种可作为标记靶标的伯胺，包括赖氨酸残基的侧链和每条多肽的N末端。我司提供几种不同的生物素-NHS酯，具有不同的物理特性和臂长，包括：NHS-LC-Biotin、Sulfo-NHS-LC-Biotin。

产品特性

化学名：1-[5-[(3aS,6aR)-2-oxo-1,3,3a,4,6,6a-hexahydrothieno[3,4-d]imidazol-4-yl]pentanoyloxy]-2,5- dioxopyrrolidine-3-sulfonate sodium
同义名：Sulfosuccinimidobiotin; Sulfosuccinimidyl biotin; Biotin 3-sulfo-N-hydroxysuccinimide ester sodium salt; N-hydroxysulfosuccinimidyl biotin; N-hydroxysulfosuccinimido biotin; Water-Soluble Biotin-NHS;生物素N-羟基磺基琥珀酰亚胺酯；生物素N-羟基琥珀酰亚胺磺酸钠盐；N-羟基磺酸基琥珀生物素；
CAS NO：119616-38-5 分子式：C14H18N3NaO8S2
分子量：443.4 g/mol 间隔臂长：13.5 Å
外观：粉末 纯度：≥98% HPLC
溶解性：溶于水（≥20mg/ml、需超声助溶）、DMSO（≥10mg/ml）、不溶于乙醇
化学结构式：

保存与运输方法

保存：-20℃密封干燥保存，至少2年稳定。

运输：冰袋运输。

注意事项

1） 1 Sulfo-NHS-Biotin对湿度敏感，需置于-20℃密封干燥保存。避免处理产品过程中受潮，务必开盖前将本品平衡至室温。

2） 务必于使用前在溶解粉末，由于NHS酯官能团非常容易水化，从而失去反应性。因此，不要配制用来保存的储存液，丢弃任何未用完的溶液。

3） 避免使用含伯胺的缓冲液（比如：Tris、甘氨酸），这些成分会竞争性排挤目的反应。如有必要，通过透析或脱盐的方式来更换成不含伯胺的反应缓冲液比如：PBS。

4） 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

操作步骤（溶液内生物素化蛋白）

1. 计算

生物素标记率取决于蛋白上氨基分布、蛋白浓度和试剂用量。与高浓度蛋白参与的反应相比较，低浓度蛋白参与的反应需要更高摩尔过量的生物素试剂，以达到相同的标记水平。使用20倍摩尔过量生物素试剂来标记1-10mg/ml抗体（体积：0.5-2ml）的得率，是每个抗体上标记4-6个生物素基团。使用50倍摩尔过量生物素试剂标记50-200μg抗体（0.2-0.7ml）的得率，是每个抗体上标记1-3个生物素基团。需调整Sulfo-NHS-Biotin与蛋白的摩尔比率来获取理想的插入率。

A．计算加入反应体系所需生物素试剂（如：Sulfo-NHS-Biotin）的毫摩尔（millimoles）（20倍摩尔过量）

B．计算加入反应体系得到10mM生物素试剂（如：Sulfo-NHS-Biotin）所需的微升量（μl，microliters）

2. 生物素标记反应

2.1 从冰箱取出生物素试剂（如：Sulfo-NHS-Biotin），开盖前平衡至室温。

2.2 根据1计算所得，准备溶于PBS的蛋白溶液。

2.3 使用前，配制10mM生物素试剂（如：Sulfo-NHS-Biotin）。

2.4 加入适量体积的10mM生物素试剂（如：Sulfo-NHS-Biotin）到蛋白溶液。

2.5 冰上孵育2h或室温孵育30min。

2.6 此时蛋白标记完成，溶液内虽有过量未反应和水解的生物素试剂，但通常情况下，此时标记好的蛋白可以进行后续的ELISA或WB实验。一旦确认好标记蛋白的功能，再通过脱盐或透析的方法来纯化标记蛋白。

操作步骤（生物素化细胞表面蛋白）

1. 用预冷PBS（pH 8.0）清洗细胞三次，以去除任何含胺培养基和分泌蛋白。

2. 用PBS（pH 8.0）重悬细胞使其浓度为~25×106细胞/ml。

3. 按照1ml细胞悬液加入1mg Sulfo-NHS-Biotin（得到~2mM生物素试剂）。或，按照1ml细胞悬液加入200μl 10mM生物素试剂。

4. 室温孵育30min。【注意】：4℃孵育可能减低生物素试剂的内在化反应。

5. 用PBS（pH 8.0）+100mM甘氨酸清洗细胞三次以淬灭和去除过剩的生物素试剂和副产物。

相关产品

货号 名称 规格
MM3701-25MG SMCC 4-(N-马来酰亚胺基甲基)环己烷-1-羧酸琥珀酰亚胺酯 25mg
MM3702-25MG Sulfo-SMCC 4-(N-马来酰亚胺甲基)环己烷-1-羧酸磺酸基琥珀酰亚胺酯钠盐 25mg
MM3703-25G NHS (N-Hydroxysuccinimide) N-羟基琥珀酰亚胺 25g
MM3704-1G Sulfo-NHS N-羟基琥珀酰亚胺磺酸钠盐 1g
MM3705-10MG Biotin-NHS (D-Biotin N-Succinimidyl Ester) D-生物素N-羟基琥珀酰亚胺酯 10mg
MM3713-25MG Sulfo-NHS-Biotin (Sulfosuccinimidyl Biotin)磺基琥珀酰亚胺生物素 25mg
MS5607-25G Hydroxylammonium chloride盐酸羟胺（高纯，99.99%） 25g
MS5510-10G DL-Dithiothreitol (DTT)二硫苏糖醇 10g
MS5512-1G TCEP Hydrochloride三(2-羧乙基)膦盐酸盐 1g
MP2012-100ML β-Mercaptoethanol (β-ME) β-巯基乙醇 100ml
MS0401-500G Glycine甘氨酸 500g
MP4202-5G EDC HCl (1-ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl)carbodiimide hydrochloride) 1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐 5g
MP4203-1G EDC (1-ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl)carbodiimide) 1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺 1g

 

NHS (N-Hydroxysuccinimide) N-羟基琥珀酰亚胺

发表于由

NHS N-羟基琥珀酰亚胺；Sulfo-NHS；Sulfo-SMCC；异型双功能交联剂；NHS酯（胺基指向）；CAS NO：6066-82-6；

产品信息

产品名称

 产品编号 规格

NHS (N-Hydroxysuccinimide) N-羟基琥珀酰亚胺

 MM3703-25G 25g

NHS (N-Hydroxysuccinimide) N-羟基琥珀酰亚胺 MM3703-100G 100g

NHS (N-Hydroxysuccinimide) N-羟基琥珀酰亚胺 MM3703-500G 500g

产品描述

N-羟基琥珀酰亚胺（N-Hydroxysuccinimide, NHS）和N-羟基琥珀酰亚胺磺酸钠盐（N-Hydroxysulfosuccinimide sodium salt, Sulfo-NHS）用来制备羧基的胺反应酯，用于化学标记、交联和固相固定应用。在存在碳化二亚铵化合物（如：EDC）时，羧基（-COOH）可能与NHS或Sulfo-NHS反应生成一个半稳定的NHS酯或Sulfo-NHS酯，后者接下来可能与伯胺（-NH2）反应形成酰胺键（图1）。虽然NHS或Sulfo-NHS在碳化二亚铵反应中不是必要的，但它们的加入能大大增强偶联效率。另外，NHS或Sulfo-NHS的使用允许二步反应的开展。

NHS或Sulfo-NHS都溶于水相和有机溶剂。然而，经NHS活化会导致修饰后羧基化合物的水溶性降低，而由于磺酸基电荷的存在，经Sulfo-NHS修饰后的羧基化合物水溶性维持原状或提高。虽然制备的NHS酯或Sulfo-NHS酯足够稳定用于进行二步反应流程，但两者都有可能在数小时或分钟内水解，水解速率取决于水含量和反应溶液pH（NHS酯的半衰期在pH 7 4-5h，pH 8 1h，而在pH 8.6 10min）。萃取和纯化常用来制备稳定的NHS活化分子。最佳结果依然是NHS活化分子与含胺基分子立即反应。

 产品特性

同义名：N-Hydroxysuccinimide; HOSu; NHS; N-羟基丁二酰亚胺；1-羟基-2,5-吡咯烷二酮；
CAS NO：6066-82-6
分子量：115.09 g/mol
外观：白色结晶粉末
分子式：C4H5NO3
纯度：≥99% HPLC
溶解性：溶于水（50mg/ml）

保存与运输方法

保存：2-8℃干燥保存，至少1年稳定。

运输：冰袋运输。

注意事项

1）EDC和Sulfo-NHS的活化反应在pH 4.5-7.2范围内最有效，EDC反应通常在MES buffer（pH 4.7-6.0）内进行。

2）EDC在水溶性环境中非常不稳定，必须使用前配制。NHS和Sulfo-NHS在溶液中相对稳定，不过最佳结果还是使用新鲜配制的试剂。

3）NHS反应除掉目的化合物，反应体系内不能含有羧基或胺基化合物。因此，Tris、甘氨酸、赖氨酸、乙醇胺或者其他含胺缓冲液。

4）Sulfo-NHS是磺酸盐形式的NHS，具水溶性，但不具膜渗透性。NHS具膜渗透性和水溶性。NHS溶于有机溶剂，而Sulfo-NHS在有机溶剂内的溶解能力相对差很多。由于NHS是最终与伯胺反应的基团，所以由NHS和Sulfo-NHS反应所得的偶联产物是一致的。Sulfo-NHS被选用主要在于其能赋予活化化合物更好的水溶性和/或控制活化化合物的膜渗透性。

6）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

相关产品

货号 名称 规格
MM3701-25MG SMCC 4-(N-马来酰亚胺基甲基)环己烷-1-羧酸琥珀酰亚胺酯 25mg
MM3702-25MG Sulfo-SMCC 4-(N-马来酰亚胺甲基)环己烷-1-羧酸磺酸基琥珀酰亚胺酯钠盐 25mg
MM3703-25G NHS (N-Hydroxysuccinimide) N-羟基琥珀酰亚胺 25g
MM3704-1G Sulfo-NHS N-羟基琥珀酰亚胺磺酸钠盐 1g
MM3705-10MG Biotin-NHS (D-Biotin N-Succinimidyl Ester) D-生物素 N-羟基琥珀酰亚胺酯 10mg
MS5607-25G Hydroxylammonium chloride 盐酸羟胺（高纯，99.99%） 25g
MS5510-10G DL-Dithiothreitol (DTT) 二硫苏糖醇 10g
MS5512-1G TCEP Hydrochloride 三(2-羧乙基)膦盐酸盐 1g
MP2012-100ML β-Mercaptoethanol (β-ME) β-巯基乙醇 100ml
MP4202-5G EDC HCl (1-ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl)carbodiimide hydrochloride) 1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐 5g
MP4203-1G EDC (1-ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl)carbodiimide) 1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺 1g

NHS (N-Hydroxysuccinimide) N-羟基琥珀酰亚胺

发表于由

NHS N-羟基琥珀酰亚胺；Sulfo-NHS；Sulfo-SMCC；异型双功能交联剂；NHS酯（胺基指向）；CAS NO：6066-82-6；

产品信息

产品名称

 产品编号 规格

NHS (N-Hydroxysuccinimide) N-羟基琥珀酰亚胺

 MM3703-25G 25g

NHS (N-Hydroxysuccinimide) N-羟基琥珀酰亚胺 MM3703-100G 100g

NHS (N-Hydroxysuccinimide) N-羟基琥珀酰亚胺 MM3703-500G 500g

产品描述

N-羟基琥珀酰亚胺（N-Hydroxysuccinimide, NHS）和N-羟基琥珀酰亚胺磺酸钠盐（N-Hydroxysulfosuccinimide sodium salt, Sulfo-NHS）用来制备羧基的胺反应酯，用于化学标记、交联和固相固定应用。在存在碳化二亚铵化合物（如：EDC）时，羧基（-COOH）可能与NHS或Sulfo-NHS反应生成一个半稳定的NHS酯或Sulfo-NHS酯，后者接下来可能与伯胺（-NH2）反应形成酰胺键（图1）。虽然NHS或Sulfo-NHS在碳化二亚铵反应中不是必要的，但它们的加入能大大增强偶联效率。另外，NHS或Sulfo-NHS的使用允许二步反应的开展。

NHS或Sulfo-NHS都溶于水相和有机溶剂。然而，经NHS活化会导致修饰后羧基化合物的水溶性降低，而由于磺酸基电荷的存在，经Sulfo-NHS修饰后的羧基化合物水溶性维持原状或提高。虽然制备的NHS酯或Sulfo-NHS酯足够稳定用于进行二步反应流程，但两者都有可能在数小时或分钟内水解，水解速率取决于水含量和反应溶液pH（NHS酯的半衰期在pH 7 4-5h，pH 8 1h，而在pH 8.6 10min）。萃取和纯化常用来制备稳定的NHS活化分子。最佳结果依然是NHS活化分子与含胺基分子立即反应。

 产品特性

同义名：N-Hydroxysuccinimide; HOSu; NHS; N-羟基丁二酰亚胺；1-羟基-2,5-吡咯烷二酮；
CAS NO：6066-82-6
分子量：115.09 g/mol
外观：白色结晶粉末
分子式：C4H5NO3
纯度：≥99% HPLC
溶解性：溶于水（50mg/ml）

保存与运输方法

保存：2-8℃干燥保存，至少1年稳定。

运输：冰袋运输。

注意事项

1）EDC和Sulfo-NHS的活化反应在pH 4.5-7.2范围内最有效，EDC反应通常在MES buffer（pH 4.7-6.0）内进行。

2）EDC在水溶性环境中非常不稳定，必须使用前配制。NHS和Sulfo-NHS在溶液中相对稳定，不过最佳结果还是使用新鲜配制的试剂。

3）NHS反应除掉目的化合物，反应体系内不能含有羧基或胺基化合物。因此，Tris、甘氨酸、赖氨酸、乙醇胺或者其他含胺缓冲液。

4）Sulfo-NHS是磺酸盐形式的NHS，具水溶性，但不具膜渗透性。NHS具膜渗透性和水溶性。NHS溶于有机溶剂，而Sulfo-NHS在有机溶剂内的溶解能力相对差很多。由于NHS是最终与伯胺反应的基团，所以由NHS和Sulfo-NHS反应所得的偶联产物是一致的。Sulfo-NHS被选用主要在于其能赋予活化化合物更好的水溶性和/或控制活化化合物的膜渗透性。

6）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

相关产品

货号 名称 规格
MM3701-25MG SMCC 4-(N-马来酰亚胺基甲基)环己烷-1-羧酸琥珀酰亚胺酯 25mg
MM3702-25MG Sulfo-SMCC 4-(N-马来酰亚胺甲基)环己烷-1-羧酸磺酸基琥珀酰亚胺酯钠盐 25mg
MM3703-25G NHS (N-Hydroxysuccinimide) N-羟基琥珀酰亚胺 25g
MM3704-1G Sulfo-NHS N-羟基琥珀酰亚胺磺酸钠盐 1g
MM3705-10MG Biotin-NHS (D-Biotin N-Succinimidyl Ester) D-生物素 N-羟基琥珀酰亚胺酯 10mg
MS5607-25G Hydroxylammonium chloride 盐酸羟胺（高纯，99.99%） 25g
MS5510-10G DL-Dithiothreitol (DTT) 二硫苏糖醇 10g
MS5512-1G TCEP Hydrochloride 三(2-羧乙基)膦盐酸盐 1g
MP2012-100ML β-Mercaptoethanol (β-ME) β-巯基乙醇 100ml
MP4202-5G EDC HCl (1-ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl)carbodiimide hydrochloride) 1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐 5g
MP4203-1G EDC (1-ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl)carbodiimide) 1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺 1g

NHS (N-Hydroxysuccinimide) N-羟基琥珀酰亚胺

发表于由

NHS N-羟基琥珀酰亚胺；Sulfo-NHS；Sulfo-SMCC；异型双功能交联剂；NHS酯（胺基指向）；CAS NO：6066-82-6；

产品信息

产品名称

 产品编号 规格

NHS (N-Hydroxysuccinimide) N-羟基琥珀酰亚胺

 MM3703-25G 25g

NHS (N-Hydroxysuccinimide) N-羟基琥珀酰亚胺 MM3703-100G 100g

NHS (N-Hydroxysuccinimide) N-羟基琥珀酰亚胺 MM3703-500G 500g

产品描述

N-羟基琥珀酰亚胺（N-Hydroxysuccinimide, NHS）和N-羟基琥珀酰亚胺磺酸钠盐（N-Hydroxysulfosuccinimide sodium salt, Sulfo-NHS）用来制备羧基的胺反应酯，用于化学标记、交联和固相固定应用。在存在碳化二亚铵化合物（如：EDC）时，羧基（-COOH）可能与NHS或Sulfo-NHS反应生成一个半稳定的NHS酯或Sulfo-NHS酯，后者接下来可能与伯胺（-NH2）反应形成酰胺键（图1）。虽然NHS或Sulfo-NHS在碳化二亚铵反应中不是必要的，但它们的加入能大大增强偶联效率。另外，NHS或Sulfo-NHS的使用允许二步反应的开展。

NHS或Sulfo-NHS都溶于水相和有机溶剂。然而，经NHS活化会导致修饰后羧基化合物的水溶性降低，而由于磺酸基电荷的存在，经Sulfo-NHS修饰后的羧基化合物水溶性维持原状或提高。虽然制备的NHS酯或Sulfo-NHS酯足够稳定用于进行二步反应流程，但两者都有可能在数小时或分钟内水解，水解速率取决于水含量和反应溶液pH（NHS酯的半衰期在pH 7 4-5h，pH 8 1h，而在pH 8.6 10min）。萃取和纯化常用来制备稳定的NHS活化分子。最佳结果依然是NHS活化分子与含胺基分子立即反应。

 产品特性

同义名：N-Hydroxysuccinimide; HOSu; NHS; N-羟基丁二酰亚胺；1-羟基-2,5-吡咯烷二酮；
CAS NO：6066-82-6
分子量：115.09 g/mol
外观：白色结晶粉末
分子式：C4H5NO3
纯度：≥99% HPLC
溶解性：溶于水（50mg/ml）

保存与运输方法

保存：2-8℃干燥保存，至少1年稳定。

运输：冰袋运输。

注意事项

1）EDC和Sulfo-NHS的活化反应在pH 4.5-7.2范围内最有效，EDC反应通常在MES buffer（pH 4.7-6.0）内进行。

2）EDC在水溶性环境中非常不稳定，必须使用前配制。NHS和Sulfo-NHS在溶液中相对稳定，不过最佳结果还是使用新鲜配制的试剂。

3）NHS反应除掉目的化合物，反应体系内不能含有羧基或胺基化合物。因此，Tris、甘氨酸、赖氨酸、乙醇胺或者其他含胺缓冲液。

4）Sulfo-NHS是磺酸盐形式的NHS，具水溶性，但不具膜渗透性。NHS具膜渗透性和水溶性。NHS溶于有机溶剂，而Sulfo-NHS在有机溶剂内的溶解能力相对差很多。由于NHS是最终与伯胺反应的基团，所以由NHS和Sulfo-NHS反应所得的偶联产物是一致的。Sulfo-NHS被选用主要在于其能赋予活化化合物更好的水溶性和/或控制活化化合物的膜渗透性。

6）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

相关产品

货号 名称 规格
MM3701-25MG SMCC 4-(N-马来酰亚胺基甲基)环己烷-1-羧酸琥珀酰亚胺酯 25mg
MM3702-25MG Sulfo-SMCC 4-(N-马来酰亚胺甲基)环己烷-1-羧酸磺酸基琥珀酰亚胺酯钠盐 25mg
MM3703-25G NHS (N-Hydroxysuccinimide) N-羟基琥珀酰亚胺 25g
MM3704-1G Sulfo-NHS N-羟基琥珀酰亚胺磺酸钠盐 1g
MM3705-10MG Biotin-NHS (D-Biotin N-Succinimidyl Ester) D-生物素 N-羟基琥珀酰亚胺酯 10mg
MS5607-25G Hydroxylammonium chloride 盐酸羟胺（高纯，99.99%） 25g
MS5510-10G DL-Dithiothreitol (DTT) 二硫苏糖醇 10g
MS5512-1G TCEP Hydrochloride 三(2-羧乙基)膦盐酸盐 1g
MP2012-100ML β-Mercaptoethanol (β-ME) β-巯基乙醇 100ml
MP4202-5G EDC HCl (1-ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl)carbodiimide hydrochloride) 1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐 5g
MP4203-1G EDC (1-ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl)carbodiimide) 1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺 1g

定制 Sulfo-Cyanine5.5 NHS Ester 磺化Cy5.5 NHS酯（水溶性）

发表于由
产品名称 产品编号 规格                  
Sulfo-Cyanine5.5 NHS Ester 磺化Cy5.5 NHS酯（水溶性）  MX4658-1MG      1mg
Sulfo-Cyanine5.5 NHS Ester 磺化Cy5.5 NHS酯（水溶性） MX4658-5MG 5mg

花菁类染料（Cyanine Dyes）是一种在两个氮原子间含聚亚甲基桥键且携带一非定域电荷的分子。

归其结构特征，花菁素具有极其高的消光系数通常高于100,000 L⋅mol-1⋅cm-1。不同的替代基允许控制发光团的性能比如吸光波长，光稳定性和荧光强度。例如，通过选择不同长度的聚亚甲基桥键能够控制吸光和荧光波长：花菁素越长，吸光和发射波长更高，高达至近红外区。

在生命科学领域广受欢迎的花菁类染料由美国卡耐基梅隆大学（CMU）的Alan Waggoner教授和同事于二十世纪90年代早期研发应用。这些染料呈现出低的生物分子非特异性结合，并由其巨大的消光系数和良好的量子产量产生明亮的荧光。目前商业化可提供各种反应性衍生物，比如点击化学用的N-羟基琥珀酰亚胺酯，马来酰亚胺，叠氮化物和其他衍生物。目前花菁染料常以两种异构体的形式供应：一种非磺化的花菁类染料和磺化的花菁类染料，对于许多应用，两种是可以互相替换的，因其光谱属性基本相同。两种染料都可用于DNA和蛋白质等生物分子的标记。两者的区别在于溶解度：磺化染料具水溶性，可以在水环境中标记，无需有机共溶剂，且在水中不易聚集。 

Sulfo-Cyanine5.5是一种水溶性，远红外发射的荧光团。因含4个磺基，该染料在中性pH中带负电荷，且有非常高的亲水性。

Sulfo-Cyanine5.5 NHS Ester (Sulfo-Cyanine5.5 SE)是Sulfo-Cyanine5.5的氨基反应活化酯。特别适合用于要求纯水溶性环境或无任何有机溶剂反应体内的抗体、敏感蛋白和其他物质的荧光标记。标记后的分子适用于小动物活体成像研究。

产品特性

1）   CAS NO.：N/A

2）   同义名：Sulfo-Cyanine5.5 NHS ester; Sulfo-Cy5.5 NHS ester; Sulfo-Cyanine5.5 SE; Sulfo-Cy5.5琥珀酰亚胺酯；Sulfo-Cy5.5 NHS酯；

3）   分子式：C45H44N3K3O16S4

4）   分子量：1128.40 g/mol

5）   纯度：≥95%

6）   外观：蓝色至深蓝色固体

7）   溶解性：溶于水，DMF，DMSO

8）   Ex/Em：~678/695 nm

9）   消光系数：250, 000 L⋅mol-1⋅cm-1

10）A280/Amax：18%

11）化学结构式：

保存与运输方法

保存：-20°C避光干燥保存，2年有效。

运输：室温运输。

注意事项

1）   Sulfo-Cyanine5.5 NHS Ester水溶液的稳定性很弱，建议现配现用。Sulfo-Cyanine5.5 NHS Ester DMSO溶液的稳定性相对高，建议置于-20℃避光保存，1个月内稳定。

2）   Sulfo-Cyanine5.5 NHS Ester具水溶性，除非标记实验严格要求纯水溶性环境，建议用DMSO溶解配制成母液后使用。一般情况下，Cy系列染料在含有机溶剂体系内的标记效率相对高些。

3）   为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法

【注意】：Cy染料和生物分子的比例（F/P）=4~12之间荧光强度最高。F/P过高，荧光探针会自我淬灭并且影响生物分子的活性。CyDye NHS在pH 8.5~9.4内标记抗体10min，F/P可达5~6。但在pH 7.0内几乎无反应。我司（金畔生物）内部使用Cy3 NHS标记Anti-GST抗体发现按1:1，1:5，1:10，和1:20标记得到的F/P分别为0.28:1，1.16:1，2.3:1和4.6:1。

一、 水溶性Cy3 NHS标记Anti-GST抗体【其它CyDye NHS参考此方法进行并做适当摸索】

商业化购买的抗体如果含有其他蛋白（如血清白蛋白，明胶等），或溶于带氨基的缓冲液，会影响标记。需在标记前对抗体进行纯化。

1.       于1L 0.15M NaCl溶液中透析Anti-GST（0.5ml，3mg/ml），室温或4℃透析4h。

2.       换用1L 新鲜的0.15M NaCl溶液，4℃透析过夜。

3.       第二天再换用1L 0.1M NaHCO3（pH 8.3），4℃透析4h。

4.      【可选】用0.22μm低吸附滤膜过滤透析后的抗体溶液。

5.       用0.1M NaHCO3（pH 8.3）稀释少量的抗体，于280nm测其紫外吸收值并计算标记抗体的总量（IgG抗体摩尔吸光系数为170,000 at 280nm）。

6.       用DMSO配制Cy3 NHS（Mw:765.95），浓度为10mg/ml。根据CyDye NHS和抗体的使用比值（比如1:20）来计算所需要染料的体积。然后慢慢将其加入到抗体溶液中，同时于暗处低速搅拌，室温45min。

7.       用1L 0.15M NaCl溶液，常温或4℃避光透析4h，以除去未标记上的Cy3 NHS。

8.       换用新鲜的1L 0.15M NaCl溶液，4℃避光透析过夜。

9.       换用1L 0.01M PBS/0.01% NaN3溶液室温或4℃避光透析4h，然后在4℃避光再次透析过夜。

10.   【可选】用0.22μm低吸附滤膜过滤透析后的抗体溶液。

11.    用0.01M PBS/0.01% NaN3溶液整数倍稀释标记抗体，测定280nm（蛋白）和552nm（Cy3）处的紫外可见吸光度。

12.    产品冷冻干燥成粉末或置于0.01M PBS/0.01% NaN3溶液中，-20℃避光保存。

【F/P计算】：

Cy3在552nm下的摩尔吸光系数为150,000 L⋅mol-1⋅cm-1，此蛋白在280nm的摩尔吸光系数为170,000 L⋅mol-1⋅cm-1，不同蛋白的摩尔吸光系数不同。Cy3本身在280nm处的吸收是552nm处的8%。按照以下公式计算F/P值。

[Cy3] = A552/150000; [Antibody] = [A280-(0.08×A552)]/170000

F/Pfinal= [Cy3]/ [Antibody]= [1.13×A552]/ [A280-(0.08×A552)]

二、 水溶性Cy5 NHS标记（D-ser2）-Leu-Enkephalin【其它CyDye NHS参考此方法进行并做适当摸索】

1.       低温保存的Cy5 NHS置于室温回温至少20min。往1mg粉末内加入400μl 高品质无水DMSO充分溶解。同样，低温保存的玻璃瓶装的（D-ser2）-Leu-Enkephalin（YSGFLT，0.75mg）室温回温后加入400μl 高品质无水DMSO充分溶解。将400μl Cy5 NHS加入400μl 多肽内。【染料与多肽通常质量比1:1】。

2.       再加入15μl 三乙胺，常温避光搅拌反应混合物，过夜。【若多肽稳定性较弱，则于4℃反应过夜】。

3.       用HPLC纯度多肽。使用C18柱子（25cm×10mm），每次上样注入2×400μl，30min梯度洗脱从0.1% TFA水溶液到MeCN:H2O (0.1% TFA)=70：30，流速4ml/min。（对不同的多肽选择不同的合适HPLC梯度流动相）

4.       收集适当的色带峰，标记多肽的保留时间比未标记的多肽长。

5.       产品冷冻干燥成粉末或置于水溶液中，-20℃避光保存。必要时可用质谱表征。

6.       CyDye标记的蛋白/多肽稳定性取决于蛋白本身。例如标记的IgG在4℃可避光保存2月，更长保存需加入等体积甘油-20℃避光保存。

【F/P计算】：

Cy5在650nm下的摩尔吸光系数为250,000 L⋅mol-1⋅cm-1，此蛋白在280nm的摩尔吸光系数为170,000 L⋅mol-1⋅cm-1，不同蛋白的摩尔吸光系数不同。Cy5本身在280nm处的吸收是650nm处的5%。按照以下公式计算F/P值。

[Cy5] = A650/250000; [Peptide] = [A280-(0.05×A650)]/170000

F/Pfinal= [Cy5]/ [Peptide]= [0.68×A650]/ [A280-(0.05×A650)] 

相关产品

货号 名称 规格          
MX4651-5MG         Sulfo-Cyanine3 Carboxylic Acid 磺化Cy3羧酸（水溶性） 5mg
MX4652-5MG Sulfo-Cyanine5 Carboxylic Acid 磺化Cy5羧酸（水溶性） 5mg
MX4653-5MG Sulfo-Cyanine5.5 Carboxylic Acid 磺化Cy5.5羧酸（水溶性）     5mg
MX4654-5MG Sulfo-Cyanine7 Carboxylic Acid 磺化Cy7羧酸（水溶性） 5mg
MX4656-1MG Sulfo-Cyanine3 NHS Ester 磺化Cy3 NHS酯（水溶性） 1mg
MX4657-1MG Sulfo-Cyanine5 NHS Ester 磺化Cy3 NHS酯（水溶性） 1mg
MX4658-1MG Sulfo-Cyanine5.5 NHS Ester 磺化Cy5.5 NHS酯（水溶性） 1mg
MX4659-1MG Sulfo-Cyanine7 NHS Ester 磺化Cy7 NHS酯（水溶性） 1mg

Sulfo-Cyanine3 NHS Ester 磺化Cy3 NHS酯（水溶性）Cy5羧酸（水溶性）磺化Cy7羧酸（水溶性）

发表于由

产品名称

 规格
Sulfo-Cyanine3 NHS Ester 磺化Cy3 NHS酯（水溶性） 1mg

Sulfo-Cyanine3 NHS Ester 磺化Cy3 NHS酯（水溶性） 5mg

花菁类染料（Cyanine Dyes）是一种在两个氮原子间含聚亚甲基桥键且携带一非定域电荷的分子。

归其结构特征，花菁素具有极其高的消光系数通常高于100,000 L⋅mol-1⋅cm-1。不同的替代基允许控制发光团的性能比如吸光波长，光稳定性和荧光强度。例如，通过选择不同长度的聚亚甲基桥键能够控制吸光和荧光波长：花菁素越长，吸光和发射波长更高，高达至近红外区。

在生命科学领域广受欢迎的花菁类染料由美国卡耐基梅隆大学（CMU）的Alan Waggoner教授和同事于二十世纪90年代早期研发应用。这些染料呈现出低的生物分子非特异性结合，并由其巨大的消光系数和良好的量子产量产生明亮的荧光。目前商业化可提供各种反应性衍生物，比如点击化学用的N-羟基琥珀酰亚胺酯，马来酰亚胺，叠氮化物和其他衍生物。目前花菁染料常以两种异构体的形式供应：一种非磺化的花菁类染料和磺化的花菁类染料，对于许多应用，两种是可以互相替换的，因其光谱属性基本相同。两种染料都可用于DNA和蛋白质等生物分子的标记。两者的区别在于溶解度：磺化染料具水溶性，可以在水环境中标记，无需有机共溶剂，且在水中不易聚集。

Sulfo-Cyanine3 NHS Ester (Sulfo-Cyanine3 SE)是Cyanine3的水溶性、胺反应活化酯，能够在纯水溶性环境或无任何有机溶剂反应体内进行蛋白和多肽的有效标记。非常适合具极低水溶性和易变性蛋白的标记。

产品特性

1） CAS NO.：N/A

2） 同义名：Sulfo-Cyanine3 NHS ester; Sulfo-Cy3 NHS ester; Sulfo-Cyanine3 SE; Sulfo-Cy3琥珀酰亚胺酯；Sulfo-Cy3 NHS酯；

3） 分子式：C35H40N3KO10S2

4） 分子量：765.95 g/mol

5） 纯度：≥95%

6） 外观：红色至深红色结晶粉末或固体

7） 溶解性：溶于水，DMF，DMSO 

8） Ex/Em：~548/562 nm

9） 摩尔吸光系数：150, 000 L⋅mol-1⋅cm-1

10） A280/Amax：8%

11） 光谱相似染料：Alexa Fluor® 555, DyLight™ 555

12） 化学结构式：

保存与运输方法

保存：-20°C避光干燥保存，2年有效。

运输：室温运输。

注意事项

1） Sulfo-Cyanine3 NHS Ester水溶液的稳定性很弱，建议现配现用。Sulfo-Cyanine3 NHS Ester DMSO溶液的稳定性相对高，建议置于-20℃避光保存，2周稳定。

2） Sulfo-Cyanine3 NHS Ester具水溶性，除非标记实验严格要求纯水溶性环境，建议用DMSO溶解配制成母液后使用。一般情况下，Cy系列染料在含有机溶剂体系内的标记效率相对高些。

3） 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法

【注意】：Cy染料和生物分子的比例（F/P）=4~12之间荧光强度最高。F/P过高，荧光探针会自我淬灭并且影响生物分子的活性。CyDye NHS在pH 8.5~9.4内标记抗体10min，F/P可达5~6。但在pH 7.0内几乎无反应。我司（金畔生物）内部使用Cy3 NHS标记Anti-GST抗体发现按1:1，1:5，1:10，和1:20标记得到的F/P分别为0.28:1，1.16:1，2.3:1和4.6:1。

一、 水溶性Cy3 NHS标记Anti-GST抗体【其它CyDye NHS参考此方法进行并做适当摸索】

商业化购买的抗体如果含有其他蛋白（如血清白蛋白，明胶等），或溶于带氨基的缓冲液，会影响标记。需在标记前对抗体进行纯化。

  1. 于1L 0.15M NaCl溶液中透析Anti-GST（0.5ml，3mg/ml），室温或4℃透析4h。
  2. 换用1L新鲜的0.15M NaCl溶液，4℃透析过夜。
  3. 第二天再换用1L 0.1M NaHCO3（pH 8.3），4℃透析4h。
  4. 【可选】用0.22μm低吸附滤膜过滤透析后的抗体溶液。
  5. 用0.1M NaHCO3（pH 8.3）稀释少量的抗体，于280nm测其紫外吸收值并计算标记抗体的总量（IgG抗体摩尔吸光系数为170,000 at 280nm）。
  6. 用DMSO配制Cy3 NHS（Mw:765.95），浓度为10mg/ml。根据CyDye NHS和抗体的使用比值（比如1:20）来计算所需要染料的体积。然后慢慢将其加入到抗体溶液中，同时于暗处低速搅拌，室温45min。
  7. 用1L 0.15M NaCl溶液，常温或4℃避光透析4h，以除去未标记上的Cy3 NHS。
  8. 换用新鲜的1L 0.15M NaCl溶液，4℃避光透析过夜。
  9. 换用1L 0.01M PBS/0.01% NaN3溶液室温或4℃避光透析4h，然后在4℃避光再次透析过夜。
  10. 【可选】用0.22μm低吸附滤膜过滤透析后的抗体溶液。
  11. 用0.01M PBS/0.01% NaN3溶液整数倍稀释标记抗体，测定280nm（蛋白）和552nm（Cy3）处的紫外可见吸光度。
  12. 产品冷冻干燥成粉末或置于0.01M PBS/0.01% NaN3溶液中，-20℃避光保存。

【F/P计算】：

Cy3在552nm下的摩尔吸光系数为150,000 L⋅mol-1⋅cm-1，此蛋白在280nm的摩尔吸光系数为170,000 L⋅mol-1⋅cm-1，不同蛋白的摩尔吸光系数不同。Cy3本身在280nm处的吸收是552nm处的8%。按照以下公式计算F/P值。

[Cy3] = A552/150000; [Antibody] = [A280-(0.08×A552)]/170000

F/Pfinal = [Cy3]/ [Antibody]= [1.13×A552]/ [A280-(0.08×A552)]

相关产品

货号 名称 规格
MX4651-5MG Sulfo-Cyanine3 Carboxylic Acid 磺化Cy3羧酸（水溶性） 5mg
MX4652-5MG Sulfo-Cyanine5 Carboxylic Acid 磺化Cy5羧酸（水溶性） 5mg
MX4653-5MG Sulfo-Cyanine5.5 Carboxylic Acid 磺化Cy5.5羧酸（水溶性） 5mg
MX4654-5MG Sulfo-Cyanine7 Carboxylic Acid 磺化Cy7羧酸（水溶性） 5mg
MX4656-1MG Sulfo-Cyanine3 NHS Ester 磺化Cy3 NHS酯（水溶性） 1mg
MX4657-1MG Sulfo-Cyanine5 NHS Ester 磺化Cy3 NHS酯（水溶性） 1mg
MX4658-1MG Sulfo-Cyanine5.5 NHS Ester 磺化Cy5.5 NHS酯（水溶性） 1mg
MX4659-1MG Sulfo-Cyanine7 NHS Ester 磺化Cy7 NHS酯（水溶性） 1mg

 

Sulfo-Cyanine3 NHS Ester 磺化Cy3 NHS酯（水溶性）花菁类染料（Cyanine Dyes）是一种在两个氮原子间含聚亚甲基桥键且携带一非定域电荷的分子

发表于由

产品名称

 产品编号 规格
Sulfo-Cyanine3 NHS Ester 磺化Cy3 NHS酯（水溶性） MX4656-1MG 1mg

Sulfo-Cyanine3 NHS Ester 磺化Cy3 NHS酯（水溶性） MX4656-5MG 5mg

花菁类染料（Cyanine Dyes）是一种在两个氮原子间含聚亚甲基桥键且携带一非定域电荷的分子。

归其结构特征，花菁素具有极其高的消光系数通常高于100,000 L⋅mol-1⋅cm-1。不同的替代基允许控制发光团的性能比如吸光波长，光稳定性和荧光强度。例如，通过选择不同长度的聚亚甲基桥键能够控制吸光和荧光波长：花菁素越长，吸光和发射波长更高，高达至近红外区。

在生命科学领域广受欢迎的花菁类染料由美国卡耐基梅隆大学（CMU）的Alan Waggoner教授和同事于二十世纪90年代早期研发应用。这些染料呈现出低的生物分子非特异性结合，并由其巨大的消光系数和良好的量子产量产生明亮的荧光。目前商业化可提供各种反应性衍生物，比如点击化学用的N-羟基琥珀酰亚胺酯，马来酰亚胺，叠氮化物和其他衍生物。目前花菁染料常以两种异构体的形式供应：一种非磺化的花菁类染料和磺化的花菁类染料，对于许多应用，两种是可以互相替换的，因其光谱属性基本相同。两种染料都可用于DNA和蛋白质等生物分子的标记。两者的区别在于溶解度：磺化染料具水溶性，可以在水环境中标记，无需有机共溶剂，且在水中不易聚集。

Sulfo-Cyanine3 NHS Ester (Sulfo-Cyanine3 SE)是Cyanine3的水溶性、胺反应活化酯，能够在纯水溶性环境或无任何有机溶剂反应体内进行蛋白和多肽的有效标记。非常适合具极低水溶性和易变性蛋白的标记。

产品特性

1） CAS NO.：N/A

2） 同义名：Sulfo-Cyanine3 NHS ester; Sulfo-Cy3 NHS ester; Sulfo-Cyanine3 SE; Sulfo-Cy3琥珀酰亚胺酯；Sulfo-Cy3 NHS酯；

3） 分子式：C35H40N3KO10S2

4） 分子量：765.95 g/mol

5） 纯度：≥95%

6） 外观：红色至深红色结晶粉末或固体

7） 溶解性：溶于水，DMF，DMSO 

8） Ex/Em：~548/562 nm

9） 摩尔吸光系数：150, 000 L⋅mol-1⋅cm-1

10） A280/Amax：8%

11） 光谱相似染料：Alexa Fluor® 555, DyLight™ 555

12） 化学结构式：

保存与运输方法

保存：-20°C避光干燥保存，2年有效。

运输：室温运输。

注意事项

1） Sulfo-Cyanine3 NHS Ester水溶液的稳定性很弱，建议现配现用。Sulfo-Cyanine3 NHS Ester DMSO溶液的稳定性相对高，建议置于-20℃避光保存，2周稳定。

2） Sulfo-Cyanine3 NHS Ester具水溶性，除非标记实验严格要求纯水溶性环境，建议用DMSO溶解配制成母液后使用。一般情况下，Cy系列染料在含有机溶剂体系内的标记效率相对高些。

3） 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法

【注意】：Cy染料和生物分子的比例（F/P）=4~12之间荧光强度最高。F/P过高，荧光探针会自我淬灭并且影响生物分子的活性。CyDye NHS在pH 8.5~9.4内标记抗体10min，F/P可达5~6。但在pH 7.0内几乎无反应。我司（金畔生物）内部使用Cy3 NHS标记Anti-GST抗体发现按1:1，1:5，1:10，和1:20标记得到的F/P分别为0.28:1，1.16:1，2.3:1和4.6:1。

一、 水溶性Cy3 NHS标记Anti-GST抗体【其它CyDye NHS参考此方法进行并做适当摸索】

商业化购买的抗体如果含有其他蛋白（如血清白蛋白，明胶等），或溶于带氨基的缓冲液，会影响标记。需在标记前对抗体进行纯化。

  1. 于1L 0.15M NaCl溶液中透析Anti-GST（0.5ml，3mg/ml），室温或4℃透析4h。
  2. 换用1L新鲜的0.15M NaCl溶液，4℃透析过夜。
  3. 第二天再换用1L 0.1M NaHCO3（pH 8.3），4℃透析4h。
  4. 【可选】用0.22μm低吸附滤膜过滤透析后的抗体溶液。
  5. 用0.1M NaHCO3（pH 8.3）稀释少量的抗体，于280nm测其紫外吸收值并计算标记抗体的总量（IgG抗体摩尔吸光系数为170,000 at 280nm）。
  6. 用DMSO配制Cy3 NHS（Mw:765.95），浓度为10mg/ml。根据CyDye NHS和抗体的使用比值（比如1:20）来计算所需要染料的体积。然后慢慢将其加入到抗体溶液中，同时于暗处低速搅拌，室温45min。
  7. 用1L 0.15M NaCl溶液，常温或4℃避光透析4h，以除去未标记上的Cy3 NHS。
  8. 换用新鲜的1L 0.15M NaCl溶液，4℃避光透析过夜。
  9. 换用1L 0.01M PBS/0.01% NaN3溶液室温或4℃避光透析4h，然后在4℃避光再次透析过夜。
  10. 【可选】用0.22μm低吸附滤膜过滤透析后的抗体溶液。
  11. 用0.01M PBS/0.01% NaN3溶液整数倍稀释标记抗体，测定280nm（蛋白）和552nm（Cy3）处的紫外可见吸光度。
  12. 产品冷冻干燥成粉末或置于0.01M PBS/0.01% NaN3溶液中，-20℃避光保存。

【F/P计算】：

Cy3在552nm下的摩尔吸光系数为150,000 L⋅mol-1⋅cm-1，此蛋白在280nm的摩尔吸光系数为170,000 L⋅mol-1⋅cm-1，不同蛋白的摩尔吸光系数不同。Cy3本身在280nm处的吸收是552nm处的8%。按照以下公式计算F/P值。

[Cy3] = A552/150000; [Antibody] = [A280-(0.08×A552)]/170000

F/Pfinal = [Cy3]/ [Antibody]= [1.13×A552]/ [A280-(0.08×A552)]

相关产品

货号 名称 规格
MX4651-5MG Sulfo-Cyanine3 Carboxylic Acid 磺化Cy3羧酸（水溶性） 5mg
MX4652-5MG Sulfo-Cyanine5 Carboxylic Acid 磺化Cy5羧酸（水溶性） 5mg
MX4653-5MG Sulfo-Cyanine5.5 Carboxylic Acid 磺化Cy5.5羧酸（水溶性） 5mg
MX4654-5MG Sulfo-Cyanine7 Carboxylic Acid 磺化Cy7羧酸（水溶性） 5mg
MX4656-1MG Sulfo-Cyanine3 NHS Ester 磺化Cy3 NHS酯（水溶性） 1mg
MX4657-1MG Sulfo-Cyanine5 NHS Ester 磺化Cy3 NHS酯（水溶性） 1mg
MX4658-1MG Sulfo-Cyanine5.5 NHS Ester 磺化Cy5.5 NHS酯（水溶性） 1mg
MX4659-1MG Sulfo-Cyanine7 NHS Ester 磺化Cy7 NHS酯（水溶性） 1mg

Sulfo-NHS-Biotin (Sulfosuccinimidyl Biotin)  磺基琥珀酰亚胺生物素

发表于由

描述

Sulfo-NHS-Biotin (Sulfosuccinimidyl Biotin)
磺基琥珀酰亚胺生物素

 

搜索关键词

Sulfo-NHS-Biotin；Sulfo-NHS；NHS N-羟基琥珀酰亚胺； Sulfo-SMCC；异型双功能交联剂；NHS酯（胺基指向）；CAS NO：6066-82-6；CAS NO：119616-38-5；

产品信息

产品名称

 产品编号 规格 价格（元）

Sulfo-NHS-Biotin磺基琥珀酰亚胺生物素

 MM3713-25MG 25mg 753
Sulfo-NHS-Biotin磺基琥珀酰亚胺生物素 MM3713-50MG 50mg

1153
Sulfo-NHS-Biotin磺基琥珀酰亚胺生物素 MM3713-100MG 100mg

2053

​

产品描述

磺基琥珀酰亚胺生物素（Sulfosuccinimidyl Biotin, Sulfo-NHS-Biotin）适用于快速、有效的标记抗体、蛋白和其它含伯胺分子。Sulfo-NHS-Biotin具水溶性、膜非渗透性两大特征，特别适用于标记细胞表面蛋白。细胞表面生物素化已成为一种重要的工具，用来研究受体和转运体的表达和调控、区分细胞质膜蛋白和定位在细胞器膜上的蛋白，以及极化上皮细胞的膜蛋白分布，等等。由于Sulfo-NHS-Biotin容易溶于极性溶液，琥珀酰亚胺环上的磺酸钠基团使其带电荷从而不能穿透细胞膜。只要细胞维持完整性，则仅有暴露在细胞表面的伯胺才能与其反应，从而将蛋白生物素化。

水不溶性版的Sulfo-NHS-Biotin是NHS-Biotin（Cat#：MM3705），是广泛使用的生物素化试剂，两者的工作原理相同，：在生理至弱碱性缓冲液（pH 7-9）中，NHS-Biotin与伯胺（-NH2）反应形成稳定的酰胺键。蛋白（包括：抗体）通常含几种可作为标记靶标的伯胺，包括赖氨酸残基的侧链和每条多肽的N末端。我司提供几种不同的生物素-NHS酯，具有不同的物理特性和臂长，包括：NHS-LC-Biotin、Sulfo-NHS-LC-Biotin。

产品特性

化学名：1-[5-[(3aS,6aR)-2-oxo-1,3,3a,4,6,6a-hexahydrothieno[3,4-d]imidazol-4-yl]pentanoyloxy]-2,5- dioxopyrrolidine-3-sulfonate sodium
同义名：Sulfosuccinimidobiotin; Sulfosuccinimidyl biotin; Biotin 3-sulfo-N-hydroxysuccinimide ester sodium salt; N-hydroxysulfosuccinimidyl biotin; N-hydroxysulfosuccinimido biotin; Water-Soluble Biotin-NHS;生物素N-羟基磺基琥珀酰亚胺酯；生物素N-羟基琥珀酰亚胺磺酸钠盐；N-羟基磺酸基琥珀生物素；
CAS NO：119616-38-5 分子式：C14H18N3NaO8S2
分子量：443.4 g/mol 间隔臂长：13.5 Å
外观：粉末 纯度：≥98% HPLC
溶解性：溶于水（≥20mg/ml、需超声助溶）、DMSO（≥10mg/ml）、不溶于乙醇
化学结构式：

保存与运输方法

保存：-20℃密封干燥保存，至少2年稳定。

运输：冰袋运输。

注意事项

1） 1 Sulfo-NHS-Biotin对湿度敏感，需置于-20℃密封干燥保存。避免处理产品过程中受潮，务必开盖前将本品平衡至室温。

2） 务必于使用前在溶解粉末，由于NHS酯官能团非常容易水化，从而失去反应性。因此，不要配制用来保存的储存液，丢弃任何未用完的溶液。

3） 避免使用含伯胺的缓冲液（比如：Tris、甘氨酸），这些成分会竞争性排挤目的反应。如有必要，通过透析或脱盐的方式来更换成不含伯胺的反应缓冲液比如：PBS。

4） 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

操作步骤（溶液内生物素化蛋白）

1. 计算

生物素标记率取决于蛋白上氨基分布、蛋白浓度和试剂用量。与高浓度蛋白参与的反应相比较，低浓度蛋白参与的反应需要更高摩尔过量的生物素试剂，以达到相同的标记水平。使用20倍摩尔过量生物素试剂来标记1-10mg/ml抗体（体积：0.5-2ml）的得率，是每个抗体上标记4-6个生物素基团。使用50倍摩尔过量生物素试剂标记50-200μg抗体（0.2-0.7ml）的得率，是每个抗体上标记1-3个生物素基团。需调整Sulfo-NHS-Biotin与蛋白的摩尔比率来获取理想的插入率。

A．计算加入反应体系所需生物素试剂（如：Sulfo-NHS-Biotin）的毫摩尔（millimoles）（20倍摩尔过量）

 

B．计算加入反应体系得到10mM生物素试剂（如：Sulfo-NHS-Biotin）所需的微升量（μl，microliters）

 

2. 生物素标记反应

2.1 从冰箱取出生物素试剂（如：Sulfo-NHS-Biotin），开盖前平衡至室温。

2.2 根据1计算所得，准备溶于PBS的蛋白溶液。

2.3 使用前，配制10mM生物素试剂（如：Sulfo-NHS-Biotin）。

2.4 加入适量体积的10mM生物素试剂（如：Sulfo-NHS-Biotin）到蛋白溶液。

2.5 冰上孵育2h或室温孵育30min。

2.6 此时蛋白标记完成，溶液内虽有过量未反应和水解的生物素试剂，但通常情况下，此时标记好的蛋白可以进行后续的ELISA或WB实验。一旦确认好标记蛋白的功能，再通过脱盐或透析的方法来纯化标记蛋白。

操作步骤（生物素化细胞表面蛋白）

1. 用预冷PBS（pH 8.0）清洗细胞三次，以去除任何含胺培养基和分泌蛋白。

2. 用PBS（pH 8.0）重悬细胞使其浓度为~25×106细胞/ml。

3. 按照1ml细胞悬液加入1mg Sulfo-NHS-Biotin（得到~2mM生物素试剂）。或，按照1ml细胞悬液加入200μl 10mM生物素试剂。

4. 室温孵育30min。【注意】：4℃孵育可能减低生物素试剂的内在化反应。

5. 用PBS（pH 8.0）+100mM甘氨酸清洗细胞三次以淬灭和去除过剩的生物素试剂和副产物。

相关产品

货号 名称 规格
MM3701-25MG SMCC 4-(N-马来酰亚胺基甲基)环己烷-1-羧酸琥珀酰亚胺酯 25mg
MM3702-25MG Sulfo-SMCC 4-(N-马来酰亚胺甲基)环己烷-1-羧酸磺酸基琥珀酰亚胺酯钠盐 25mg
MM3703-25G NHS (N-Hydroxysuccinimide) N-羟基琥珀酰亚胺 25g
MM3704-1G Sulfo-NHS N-羟基琥珀酰亚胺磺酸钠盐 1g
MM3705-10MG Biotin-NHS (D-Biotin N-Succinimidyl Ester) D-生物素N-羟基琥珀酰亚胺酯 10mg
MM3713-25MG Sulfo-NHS-Biotin (Sulfosuccinimidyl Biotin)磺基琥珀酰亚胺生物素 25mg
MS5607-25G Hydroxylammonium chloride盐酸羟胺（高纯，99.99%） 25g
MS5510-10G DL-Dithiothreitol (DTT)二硫苏糖醇 10g
MS5512-1G TCEP Hydrochloride三(2-羧乙基)膦盐酸盐 1g
MP2012-100ML β-Mercaptoethanol (β-ME) β-巯基乙醇 100ml
MS0401-500G Glycine甘氨酸 500g
MP4202-5G EDC HCl (1-ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl)carbodiimide hydrochloride) 1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐 5g
MP4203-1G EDC (1-ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl)carbodiimide) 1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺 1g

 

 

Sulfo-NHS-Biotin (Sulfosuccinimidyl Biotin)  磺基琥珀酰亚胺生物素

发表于由

描述

Sulfo-NHS-Biotin (Sulfosuccinimidyl Biotin)
磺基琥珀酰亚胺生物素

 

搜索关键词

Sulfo-NHS-Biotin；Sulfo-NHS；NHS N-羟基琥珀酰亚胺； Sulfo-SMCC；异型双功能交联剂；NHS酯（胺基指向）；CAS NO：6066-82-6；CAS NO：119616-38-5；

产品信息

产品名称

 产品编号 规格 价格（元）

Sulfo-NHS-Biotin磺基琥珀酰亚胺生物素

 MM3713-25MG 25mg 753
Sulfo-NHS-Biotin磺基琥珀酰亚胺生物素 MM3713-50MG 50mg

1153
Sulfo-NHS-Biotin磺基琥珀酰亚胺生物素 MM3713-100MG 100mg

2053

​

产品描述

磺基琥珀酰亚胺生物素（Sulfosuccinimidyl Biotin, Sulfo-NHS-Biotin）适用于快速、有效的标记抗体、蛋白和其它含伯胺分子。Sulfo-NHS-Biotin具水溶性、膜非渗透性两大特征，特别适用于标记细胞表面蛋白。细胞表面生物素化已成为一种重要的工具，用来研究受体和转运体的表达和调控、区分细胞质膜蛋白和定位在细胞器膜上的蛋白，以及极化上皮细胞的膜蛋白分布，等等。由于Sulfo-NHS-Biotin容易溶于极性溶液，琥珀酰亚胺环上的磺酸钠基团使其带电荷从而不能穿透细胞膜。只要细胞维持完整性，则仅有暴露在细胞表面的伯胺才能与其反应，从而将蛋白生物素化。

水不溶性版的Sulfo-NHS-Biotin是NHS-Biotin（Cat#：MM3705），是广泛使用的生物素化试剂，两者的工作原理相同，：在生理至弱碱性缓冲液（pH 7-9）中，NHS-Biotin与伯胺（-NH2）反应形成稳定的酰胺键。蛋白（包括：抗体）通常含几种可作为标记靶标的伯胺，包括赖氨酸残基的侧链和每条多肽的N末端。我司提供几种不同的生物素-NHS酯，具有不同的物理特性和臂长，包括：NHS-LC-Biotin、Sulfo-NHS-LC-Biotin。

产品特性

化学名：1-[5-[(3aS,6aR)-2-oxo-1,3,3a,4,6,6a-hexahydrothieno[3,4-d]imidazol-4-yl]pentanoyloxy]-2,5- dioxopyrrolidine-3-sulfonate sodium
同义名：Sulfosuccinimidobiotin; Sulfosuccinimidyl biotin; Biotin 3-sulfo-N-hydroxysuccinimide ester sodium salt; N-hydroxysulfosuccinimidyl biotin; N-hydroxysulfosuccinimido biotin; Water-Soluble Biotin-NHS;生物素N-羟基磺基琥珀酰亚胺酯；生物素N-羟基琥珀酰亚胺磺酸钠盐；N-羟基磺酸基琥珀生物素；
CAS NO：119616-38-5 分子式：C14H18N3NaO8S2
分子量：443.4 g/mol 间隔臂长：13.5 Å
外观：粉末 纯度：≥98% HPLC
溶解性：溶于水（≥20mg/ml、需超声助溶）、DMSO（≥10mg/ml）、不溶于乙醇
化学结构式：

保存与运输方法

保存：-20℃密封干燥保存，至少2年稳定。

运输：冰袋运输。

注意事项

1） 1 Sulfo-NHS-Biotin对湿度敏感，需置于-20℃密封干燥保存。避免处理产品过程中受潮，务必开盖前将本品平衡至室温。

2） 务必于使用前在溶解粉末，由于NHS酯官能团非常容易水化，从而失去反应性。因此，不要配制用来保存的储存液，丢弃任何未用完的溶液。

3） 避免使用含伯胺的缓冲液（比如：Tris、甘氨酸），这些成分会竞争性排挤目的反应。如有必要，通过透析或脱盐的方式来更换成不含伯胺的反应缓冲液比如：PBS。

4） 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

操作步骤（溶液内生物素化蛋白）

1. 计算

生物素标记率取决于蛋白上氨基分布、蛋白浓度和试剂用量。与高浓度蛋白参与的反应相比较，低浓度蛋白参与的反应需要更高摩尔过量的生物素试剂，以达到相同的标记水平。使用20倍摩尔过量生物素试剂来标记1-10mg/ml抗体（体积：0.5-2ml）的得率，是每个抗体上标记4-6个生物素基团。使用50倍摩尔过量生物素试剂标记50-200μg抗体（0.2-0.7ml）的得率，是每个抗体上标记1-3个生物素基团。需调整Sulfo-NHS-Biotin与蛋白的摩尔比率来获取理想的插入率。

A．计算加入反应体系所需生物素试剂（如：Sulfo-NHS-Biotin）的毫摩尔（millimoles）（20倍摩尔过量）

 

B．计算加入反应体系得到10mM生物素试剂（如：Sulfo-NHS-Biotin）所需的微升量（μl，microliters）

 

2. 生物素标记反应

2.1 从冰箱取出生物素试剂（如：Sulfo-NHS-Biotin），开盖前平衡至室温。

2.2 根据1计算所得，准备溶于PBS的蛋白溶液。

2.3 使用前，配制10mM生物素试剂（如：Sulfo-NHS-Biotin）。

2.4 加入适量体积的10mM生物素试剂（如：Sulfo-NHS-Biotin）到蛋白溶液。

2.5 冰上孵育2h或室温孵育30min。

2.6 此时蛋白标记完成，溶液内虽有过量未反应和水解的生物素试剂，但通常情况下，此时标记好的蛋白可以进行后续的ELISA或WB实验。一旦确认好标记蛋白的功能，再通过脱盐或透析的方法来纯化标记蛋白。

操作步骤（生物素化细胞表面蛋白）

1. 用预冷PBS（pH 8.0）清洗细胞三次，以去除任何含胺培养基和分泌蛋白。

2. 用PBS（pH 8.0）重悬细胞使其浓度为~25×106细胞/ml。

3. 按照1ml细胞悬液加入1mg Sulfo-NHS-Biotin（得到~2mM生物素试剂）。或，按照1ml细胞悬液加入200μl 10mM生物素试剂。

4. 室温孵育30min。【注意】：4℃孵育可能减低生物素试剂的内在化反应。

5. 用PBS（pH 8.0）+100mM甘氨酸清洗细胞三次以淬灭和去除过剩的生物素试剂和副产物。

相关产品

货号 名称 规格
MM3701-25MG SMCC 4-(N-马来酰亚胺基甲基)环己烷-1-羧酸琥珀酰亚胺酯 25mg
MM3702-25MG Sulfo-SMCC 4-(N-马来酰亚胺甲基)环己烷-1-羧酸磺酸基琥珀酰亚胺酯钠盐 25mg
MM3703-25G NHS (N-Hydroxysuccinimide) N-羟基琥珀酰亚胺 25g
MM3704-1G Sulfo-NHS N-羟基琥珀酰亚胺磺酸钠盐 1g
MM3705-10MG Biotin-NHS (D-Biotin N-Succinimidyl Ester) D-生物素N-羟基琥珀酰亚胺酯 10mg
MM3713-25MG Sulfo-NHS-Biotin (Sulfosuccinimidyl Biotin)磺基琥珀酰亚胺生物素 25mg
MS5607-25G Hydroxylammonium chloride盐酸羟胺（高纯，99.99%） 25g
MS5510-10G DL-Dithiothreitol (DTT)二硫苏糖醇 10g
MS5512-1G TCEP Hydrochloride三(2-羧乙基)膦盐酸盐 1g
MP2012-100ML β-Mercaptoethanol (β-ME) β-巯基乙醇 100ml
MS0401-500G Glycine甘氨酸 500g
MP4202-5G EDC HCl (1-ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl)carbodiimide hydrochloride) 1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐 5g
MP4203-1G EDC (1-ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl)carbodiimide) 1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺 1g

 

 

Biotin-NHS (D-Biotin N-Succinimidyl Ester)  D-生物素 N-羟基琥珀酰亚胺酯

发表于由

描述

Biotin-NHS (D-Biotin N-Succinimidyl Ester)

 D-生物素 N-羟基琥珀酰亚胺酯

 

搜索关键词

Biotin-NHS；NHS-Biotin；Sulfo-NHS；Sulfo-SMCC；异型双功能交联剂；NHS酯（胺基指向）；CAS NO：35013-72-0；

产品信息：【温馨提示：本品可接受公斤kg级询价，欢迎咨询，电话：021-54736159。】

产品名称

 产品编号 规格 价格（元）
Biotin-NHS D-生物素 N-羟基琥珀酰亚胺酯 MM3705-10MG 10mg

119

Biotin-NHS D-生物素 N-羟基琥珀酰亚胺酯

 MM3705-50MG 50mg 269
Biotin-NHS D-生物素 N-羟基琥珀酰亚胺酯 MM3705-100MG 100mg

399
Biotin-NHS D-生物素 N-羟基琥珀酰亚胺酯 MM3705-500MG 500mg

779
Biotin-NHS D-生物素 N-羟基琥珀酰亚胺酯 MM3705-1G 1g

1169

产品描述

D-生物素 N-羟基琥珀酰亚胺酯（D-Biotin N-Succinimidyl Ester, Biotin-NHS）是最受欢迎的胺反应生物素衍生物，用于修饰蛋白和其它生物分子（温和条件下）。Biotin-NHS具细胞膜渗透性，可用于共价标记胞内蛋白，以及常常用于蛋白检测，当与链霉亲和素和固定化链霉亲和素联合使用，用于各种生物素-链霉亲和素结合实验。

产品特性

化学名：6aR-hexahydro-2-oxo-2,5-dioxo-1-pyrrolidinyl ester-1H-thieno[3aS,4-d]imidazole-4S-pentanoic acid
同义名：Biotin-NHS; Biotin succinimidyl ester; Biotin-N-hydroxysuccinimide ester; (+)-Biotin N-succinimidyl ester; d-Biotin NHS ester; BNHS; Biotinyl-N-hydroxy-succinimide; Succinimidobiotin; N-Hydroxysuccinimidobiotin; Succinimidyl Biotin;

生物素-N-羟基丁二酰亚胺活化酯；
CAS NO：35013-72-0
分子量：341.38 g/mol
外观：白色粉末
分子式：C14H19N3O5S
纯度：≥99% HPLC
溶解性：溶于DMSO（20mg/ml）、DMF（20mg/ml）

保存与运输方法

保存：-20℃干燥保存，至少1年稳定。

运输：冰袋运输。

注意事项

1）Biotin-NHS用DMSO或DMF重溶配制成储存液（比如：10mg/ml），若单次不能用完，置于≤-20℃保存，2周内用完。

2）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

通用操作步骤

  1. 开瓶前将本品从冰箱取出置于室温平衡至少20min。
  2. 用100mM磷酸钠，150mM NaCl，pH 7.2-7.5或其它适合的无胺缓冲液来溶解蛋白使其浓度为1-10mg/ml。

【注①】：如果蛋白内含叠氮钠或小分子稳定剂的防腐剂，则需将蛋白先透析到无胺缓冲液内去除杂质；

【注②】：如果蛋白溶于Tris或甘氨酸缓冲液，则需将蛋白先透析到无胺缓冲液内去除杂质；

  1. 3.一旦开始使用，用无水DMF或DMSO配制20mg/mlBiotin-NHS。
  2. 4. 加入足量的Biotin-NHS储存液到蛋白溶液中，使得Biotin-NHS与蛋白的过剩摩尔比达10-20倍，充分混匀。

【注①】：为了保证最佳结果，第一次实验可测试5:1; 10:1; 15:1; 20:1的过剩摩尔比，以确定最优比率。

【注②】：最终标记体系内确保DMSO或DMF的含量≤10%总体积。

  1. 5.于室温孵育30-60min，或于4℃孵育≥2h，反应过程溶液处于持续震荡中。
  2. 6.通过透析或者树脂凝胶过柱（比如：SephadexG-25）的方法脱盐纯化生物素化标记蛋白。

【注①】：生物素化标记蛋白需保存在含载体蛋白（比如：0.1% BSA）的缓冲液内，浓度＞0.5mg/ml。

【注②】：为了长期保存，生物素化标记蛋白可以冻干或分装成单次用量置于-80℃保存。

相关产品

货号 名称 规格
MM3701-25MG SMCC 4-(N-马来酰亚胺基甲基)环己烷-1-羧酸琥珀酰亚胺酯 25mg
MM3702-25MG Sulfo-SMCC 4-(N-马来酰亚胺甲基)环己烷-1-羧酸磺酸基琥珀酰亚胺酯钠盐 25mg
MM3703-25G NHS (N-Hydroxysuccinimide) N-羟基琥珀酰亚胺 25g
MM3704-1G Sulfo-NHS N-羟基琥珀酰亚胺磺酸钠盐 1g
MM3705-10MG Biotin-NHS (D-Biotin N-Succinimidyl Ester) D-生物素 N-羟基琥珀酰亚胺酯 10mg
MS5607-25G Hydroxylammonium chloride 盐酸羟胺（高纯，99.99%） 25g
MS5510-10G DL-Dithiothreitol (DTT) 二硫苏糖醇 10g
MS5512-1G TCEP Hydrochloride 三(2-羧乙基)膦盐酸盐 1g
MP2012-100ML β-Mercaptoethanol (β-ME) β-巯基乙醇 100ml
MP4202-5G EDC HCl (1-ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl)carbodiimide hydrochloride) 1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐 5g
MP4203-1G EDC (1-ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl)carbodiimide) 1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺 1g

 

 

Biotin-NHS (D-Biotin N-Succinimidyl Ester)  D-生物素 N-羟基琥珀酰亚胺酯

发表于由

描述

Biotin-NHS (D-Biotin N-Succinimidyl Ester)

 D-生物素 N-羟基琥珀酰亚胺酯

 

搜索关键词

Biotin-NHS；NHS-Biotin；Sulfo-NHS；Sulfo-SMCC；异型双功能交联剂；NHS酯（胺基指向）；CAS NO：35013-72-0；

产品信息：【温馨提示：本品可接受公斤kg级询价，欢迎咨询，电话：021-54736159。】

产品名称

 产品编号 规格 价格（元）
Biotin-NHS D-生物素 N-羟基琥珀酰亚胺酯 MM3705-10MG 10mg

119

Biotin-NHS D-生物素 N-羟基琥珀酰亚胺酯

 MM3705-50MG 50mg 269
Biotin-NHS D-生物素 N-羟基琥珀酰亚胺酯 MM3705-100MG 100mg

399
Biotin-NHS D-生物素 N-羟基琥珀酰亚胺酯 MM3705-500MG 500mg

779
Biotin-NHS D-生物素 N-羟基琥珀酰亚胺酯 MM3705-1G 1g

1169

产品描述

D-生物素 N-羟基琥珀酰亚胺酯（D-Biotin N-Succinimidyl Ester, Biotin-NHS）是最受欢迎的胺反应生物素衍生物，用于修饰蛋白和其它生物分子（温和条件下）。Biotin-NHS具细胞膜渗透性，可用于共价标记胞内蛋白，以及常常用于蛋白检测，当与链霉亲和素和固定化链霉亲和素联合使用，用于各种生物素-链霉亲和素结合实验。

产品特性

化学名：6aR-hexahydro-2-oxo-2,5-dioxo-1-pyrrolidinyl ester-1H-thieno[3aS,4-d]imidazole-4S-pentanoic acid
同义名：Biotin-NHS; Biotin succinimidyl ester; Biotin-N-hydroxysuccinimide ester; (+)-Biotin N-succinimidyl ester; d-Biotin NHS ester; BNHS; Biotinyl-N-hydroxy-succinimide; Succinimidobiotin; N-Hydroxysuccinimidobiotin; Succinimidyl Biotin;

生物素-N-羟基丁二酰亚胺活化酯；
CAS NO：35013-72-0
分子量：341.38 g/mol
外观：白色粉末
分子式：C14H19N3O5S
纯度：≥99% HPLC
溶解性：溶于DMSO（20mg/ml）、DMF（20mg/ml）

保存与运输方法

保存：-20℃干燥保存，至少1年稳定。

运输：冰袋运输。

注意事项

1）Biotin-NHS用DMSO或DMF重溶配制成储存液（比如：10mg/ml），若单次不能用完，置于≤-20℃保存，2周内用完。

2）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

通用操作步骤

  1. 开瓶前将本品从冰箱取出置于室温平衡至少20min。
  2. 用100mM磷酸钠，150mM NaCl，pH 7.2-7.5或其它适合的无胺缓冲液来溶解蛋白使其浓度为1-10mg/ml。

【注①】：如果蛋白内含叠氮钠或小分子稳定剂的防腐剂，则需将蛋白先透析到无胺缓冲液内去除杂质；

【注②】：如果蛋白溶于Tris或甘氨酸缓冲液，则需将蛋白先透析到无胺缓冲液内去除杂质；

  1. 3.一旦开始使用，用无水DMF或DMSO配制20mg/mlBiotin-NHS。
  2. 4. 加入足量的Biotin-NHS储存液到蛋白溶液中，使得Biotin-NHS与蛋白的过剩摩尔比达10-20倍，充分混匀。

【注①】：为了保证最佳结果，第一次实验可测试5:1; 10:1; 15:1; 20:1的过剩摩尔比，以确定最优比率。

【注②】：最终标记体系内确保DMSO或DMF的含量≤10%总体积。

  1. 5.于室温孵育30-60min，或于4℃孵育≥2h，反应过程溶液处于持续震荡中。
  2. 6.通过透析或者树脂凝胶过柱（比如：SephadexG-25）的方法脱盐纯化生物素化标记蛋白。

【注①】：生物素化标记蛋白需保存在含载体蛋白（比如：0.1% BSA）的缓冲液内，浓度＞0.5mg/ml。

【注②】：为了长期保存，生物素化标记蛋白可以冻干或分装成单次用量置于-80℃保存。

相关产品

货号 名称 规格
MM3701-25MG SMCC 4-(N-马来酰亚胺基甲基)环己烷-1-羧酸琥珀酰亚胺酯 25mg
MM3702-25MG Sulfo-SMCC 4-(N-马来酰亚胺甲基)环己烷-1-羧酸磺酸基琥珀酰亚胺酯钠盐 25mg
MM3703-25G NHS (N-Hydroxysuccinimide) N-羟基琥珀酰亚胺 25g
MM3704-1G Sulfo-NHS N-羟基琥珀酰亚胺磺酸钠盐 1g
MM3705-10MG Biotin-NHS (D-Biotin N-Succinimidyl Ester) D-生物素 N-羟基琥珀酰亚胺酯 10mg
MS5607-25G Hydroxylammonium chloride 盐酸羟胺（高纯，99.99%） 25g
MS5510-10G DL-Dithiothreitol (DTT) 二硫苏糖醇 10g
MS5512-1G TCEP Hydrochloride 三(2-羧乙基)膦盐酸盐 1g
MP2012-100ML β-Mercaptoethanol (β-ME) β-巯基乙醇 100ml
MP4202-5G EDC HCl (1-ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl)carbodiimide hydrochloride) 1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐 5g
MP4203-1G EDC (1-ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl)carbodiimide) 1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺 1g