iPSelector (Anti-LNFP Ⅰ, Human, Mouse-Mono(R-17F))
新型人iPS/ES细胞标记抗体
- 产品特性
- 相关资料
- Q&A
- 参考文献
新型人iPS/ES细胞标记抗体
iPSelector<Anti-LNFP Ⅰ, Human, Mouse-Mono(R-17F)>
iPSelector是一款使用人iPS细胞作为免疫原制备的,可识别lacto-N-fucopentaoseⅠ(LNFPⅠ)的抗体。LNFPⅠ是存在于未分化的人ES细胞、人iPS细胞表面的糖链,由于细胞分化后不再表达LNFPⅠ,因此iPSelector可作为未分化iPS/ES细胞的标记物使用。
另外,由于该产品与未分化人iPS/ES细胞结合会发挥细胞伤害作用,因此亦可用于去除未分化iPS/ES细胞。
※ 本产品仅供研究使用。研究以外不可使用。
※ 本产品基于立命馆大学 综合科学技术研究机构与药学部及(独)医药基础、健康、营养研究所的共同研究成果
※ 商品化而成。
◆关于人iPS/ES细胞标记抗体
迄今为止,iPS/ES细胞标记抗体(TRA-1-60、TRA-1-81、SSEA-3、SSEA-4抗体等)被广泛用于确认人iPS/ES细胞的未分化状态。然而,这些抗体大部分都是使用胚胎癌细胞(embryonal carcinoma细胞:EC细胞)作为免疫原开发的抗体,与EC细胞交叉性很强。而且,如TRA(tumor rejecton antigen)的名字所示,TRA抗体能够与多种癌细胞反应。综上所述,TRA-1-60、TRA-1-81、SSEA-3、SSEA-4抗体等并不能称为iPS/ES的特异性抗体。
iPSelector <Anti-LNFP I, Human, Mouse-Mono(R-17F)>来源于人iPS细胞作为免疫原制备的杂交瘤细胞,从中筛选出满足人iPS细胞阳性、人EC细胞阴性条件的单克隆抗体。由于本产品几乎不与EC细胞交叉反应,能够高选择性、特异性地识别未分化人iPS/ES细胞,因此可以用作新型人iPS/ES细胞标记抗体。
◆特点
● 特异性识别未分化人iPS/ES细胞的小鼠单克隆抗体(亚型:IgG1,克隆号:R-17F)
● 可用作识别人iPS/ES细胞的标记抗体。
● 即使是人iPS/ES细胞集落的内部,也能够均匀地染色所有人iPS / ES细胞的细胞膜。
● 与未分化人iPS/ES细胞结合时会发挥细胞伤害作用,可用于去除未分化iPS/ES细胞。
■ 比较iPSelector与现有标记抗体的细胞结合性
不同于目前常用的人多能干细胞标记抗体TRA-1-60,TRA-1-81等,iPSelector虽然与iPS细胞(Tic)以及ES细胞(KhES-3,H9)结合良好,但基本不与EC(2102Ep,NCR-G3)细胞结合。
细胞 |
本产品 |
TRA-1-60 |
TRA-1-81 |
SSEA-3 |
SSEA-4 |
SSEA-1* |
Nanog |
表位 |
糖脂质 |
硫酸角质素 |
硫酸角质素 |
球蛋白 |
球蛋白 |
LeX |
转录因子 |
Tic (iPS) |
++++ |
++++ |
++++ |
++++ |
++++ |
+ |
+++ |
KhES-3 (ES) |
+++ |
++++ |
++++ |
+++ |
++++ |
+ |
+++ |
H9 (ES) |
++++ |
++++ |
++++ |
+++ |
++++ |
+/- |
+++ |
2102Ep (EC) |
+/- |
++++ |
++++ |
+++ |
+++ |
+ |
+++ |
NCR-G3 (EC) |
++ |
++++ |
++++ |
+++ |
++++ |
++ |
++++ |
*SSEA-1小鼠ES/iPS标记抗体
◆应用实例
■ 蛋白印迹
进行5 μg细胞裂解液的蛋白印迹。 左:人iPS细胞(LNFPⅠ表达) 右:HEK293细胞(LNFPⅠ不表达) 稀释度:2,000倍(0.5 μg/mL) 二抗:Anti-Mouse IgG, Goat-Poly, HRP(KPL公司 #5220-0337) 化学发光底物:Trident plus Western HRP Substrate(GNT公司 #GTX400006) 检测:使用LuminoGraph I (ATTO)在1 min内检测
由于LNFPⅠ为糖链,可在蛋白印迹中观察到多条条带。这些条带都为未分化人iPS特异性条带,而在HEK293细胞中未检测出。 |
■ 免疫细胞染色
使用iPSelector和现存的标记抗体,染色人iPS细胞集落。在SSEA-3抗体和SSEA-4抗体中,无法染色所有人iPS细胞,但iPSelector可以均匀染色细胞集落中包含的所有人iPS细胞的细胞膜。
■ 流式细胞仪
将iPSelector用于流式细胞仪。
由图可知,阴性对照无法识别未分化人iPS细胞(仅二抗/下图紫色部分),但iPSelector可以识别(下图橙色部分)。
■ Functional Assay(对人iPS细胞的浓度依赖性细胞毒性)
iPSelector显示出较强的人iPS/ES细胞特异性细胞毒性(补体非依赖性)(左图)。通过二抗处理大幅增加了细胞毒性(右图)。
已经确认了不仅对单细胞悬液中的细胞的毒性,而且对形成细胞集落的细胞也有毒性。细胞死亡的机制是通过坏死而非凋亡。
左图:iPSelector与人iPS细胞株(Tic细胞)在4°C下孵育45 min后的活细胞数。iPSelector与同型的α-MBP抗体
左图:(对照)不同,拥有抗体浓度依赖性的细胞伤害作用。
右图:iPSelector浓度为1 μg/100 μL时添加二抗能进一步增强细胞毒性。添加0.1μg/100μL二抗时,90%以上的细
左图:胞被杀死。
■ iPSelector的人ES/iPS细胞伤害活性
除了Tic细胞株(人iPS细胞)以外,iPSelector对世界上常用的人iPS细胞株201B7和人ES细胞株H9以及KhES-3也显示相同的细胞伤害活性。将细胞和抗体在4℃下孵育45 min,活细胞数量随iPSelector浓度的增加而减少。
◆抗体信息
● 免疫原:人iPS细胞(Tic)
● 小鼠单克隆抗体(克隆号:R-17F)
● 亚型:IgG1
● 验证交叉性:人
● 表位:存在于人iPS/ES细胞膜表面的糖脂质的糖链部分lacto-N-fucopentaoseⅠ
● (LNFPⅠ: Fuc 1-2Gal 1-3GlcNAc 1-3Gal 1-4Glc)
● 应用:免疫细胞染色、蛋白印迹、流式细胞术、去除未分化人iPS/ES细胞
● 产品规格:Protein A纯化((1mg/mL,添加50%甘油,未添加防腐剂)
◆参考文献
1. Kawabe, K., et al., Glycobiology, 23, 322, (2013).
2. Matsumoto, S., et al., J. Biol. Chem., 290, 20071, (2015).
3. Nakao, H., et al., Glycoconj. J., DOI 10.1007/s10719-0169-9710-2
※ 本页面产品仅供研究用,研究以外不可使用。
产品编号 | 产品名称 | 产品规格 | 产品等级 | 备注 |
FDV-0014A | iPSelector (Anti-LNFPⅠ, Human, Mouse-Mono(R-17F)) | 25 μL | ||
FDV-0014B | iPSelector (Anti-LNFPⅠ, Human, Mouse-Mono(R-17F)) | 100 μL |
免责声明 |
1. 本公司密切关注本网站发布的内容,但不保证发布内容的准确性、完整性、可靠性和最新性等。 2. 本公司不保证使用本网站期间不会出现故障或计算机病毒污染的风险。 3. 无论何种原因,使用本网站时给用户或第三方造成的任何不利或损害,本公司概不负责。此外,对于用户与其他用户或第三方之间因本网站发生的任何交易、通讯 3. 或纠纷,本公司概不负责。 4. 本网站可提供的所有产品和服务均不得用于人体或动物的临床诊断或治疗,仅可用于科研等非医疗目的。如任何用户将本网站提供的产品和服务用于临床诊断或治 4. 疗,以及其他特定的用途或行为,本公司概不保证其安全性和有效性,并且不负任何相关的法律责任。 |