大鼠促黄体生成素（LH）ELISA试剂盒（S型）
LBIS® Rat LH ELISA KIT(S type)
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大鼠促黄体生成素（LH）ELISA试剂盒（S型）
LH是在垂体前叶（腺垂体）嗜碱性促性腺激素生产细胞（脑垂体）中通过与FSH共同产生、贮存、在下丘脑激素LHRH的刺激下而分泌的。精巢中也含有这类物质。在动物种类方面分布在鱼类-哺乳类的全脊椎动物。在雄性大鼠垂体中LH含量为6～7 μg/gland，雌性为3～4 μg/gland（NIH-LH1 S1 换算）。雄性较多，雌性会根据性周期而变化。
LH是分子量约29000的糖蛋白，是由TSH、FSH共同的α－亚基以及LH特有的β－亚基组成的杂二聚体。
LH的目标器官，在雌性动物中是卵泡的成熟颗粒细胞，与FSH协同促进卵细胞成熟和雌性激素的生产，诱导排卵，促进排卵后黄体化孕甾酮生产分泌。在雄性动物中是精巢的间质细胞（睾丸间质细胞），促进其雄性激素分泌，与雄性激素作用促进2次精子形成有关。受体是膜7次贯通- G蛋白共轭型PKA。
因此，LH不足会导致性类固醇分泌降低,间质细胞萎缩，排卵黄体化停止等现象。过量状态下会导致精巢间质细胞肥大而且持续萎缩，雌激素、雄激素分泌增加，早熟过排，促性成熟等现象。
LH的分泌受GnRH （LHRH）直接促进，生理状态表现为血液中性类固醇低下（间接、直接），性周期变化（特别是排卵前期），更年期-闭经后分泌增加。
男性会随着年龄的增长而增加。发情前期大量分泌的雌激素通过正反馈，在LHRH作用下引起暂时性LH大量分泌（LH波动），诱发排卵。
血液中性类固醇的增加以及阿片肽特别是β－内啡肽，在幼儿期、妊娠期、产后期等会抑制LH的分泌。
◆特点
● 测定时间短（总反应时间：3小时50分钟）。
● 微量样本（标准操作法10 μL）即可测定。
● 使用无害的防腐剂。
● 全部试剂为溶液即用类型。
● 高测定精度和高重复性。
◆试剂盒组成
|
组成品 |
状态 |
包装 |
|
（A）抗体包被96孔板 |
清洗后使用 |
96 wells（8×12）/1个 |
|
（B）标准溶液（100 ng/mL） |
稀释后使用 |
200 μL/1瓶 |
|
（C）测定用缓冲液 |
直接使用 |
60 mL/1瓶 |
|
（D）生物素结合抗GH抗体 |
稀释后使用 |
100 μL/1瓶 |
|
（E）过氧化物酶·抗生素结合物 |
稀释后使用 |
100 μL/1瓶 |
|
（F）显色液（TMB） |
直接使用 |
12 mL/1瓶 |
|
（G）样本稀释用缓冲液 |
直接使用 |
12 mL/1瓶 |
|
（H）终止液（1M H2SO4） ※小心轻放 |
直接使用 |
12 mL/1瓶 |
|
（I）浓缩清洗液（10×） |
稀释后使用 |
100 mL/1瓶 |
|
孔板密封膜 |
4个 |
|
|
产品说明书 |
1本 |
◆样本信息
● 大鼠血清·血浆
● 10 μL/well（标准操作法）
※ 样本需要用（G）样本稀释缓冲液稀释2倍，搅拌后室温下静置处理10分钟，再用（C）测定缓冲液稀释2.5倍，稀释液在测定中使用（最终稀释
率为5倍）。最终稀释倍数的极限是2.5倍。但是，需用缓冲液将板孔总量调制至 50 μL。
※ 推荐使用1 mg/mL（终浓度）EDTA-2Na作为抗凝剂，不可使用肝素Na血浆。
◆测定范围
0.313～10 ng/mL（标准曲线范围）
1.565～50 ng/mL（样本量10 μL时）
◆实验数据
精度测试（组内变异）
|
样本 |
A |
B |
|
1 |
8.74 |
1.15 |
|
2 |
8.78 |
1.03 |
|
3 |
8.79 |
1.07 |
|
4 |
8.68 |
1.06 |
|
5 |
8.03 |
1.03 |
|
6 |
8.27 |
1.13 |
|
7 |
7.94 |
1.07 |
|
8 |
7.97 |
1.05 |
|
Mean |
8.40 |
1.07 |
|
SD |
0.39 |
0.04 |
|
CV（%） |
4.6 |
3.9 |
单位：ng/mL，n=8
重复性测试（组间变异）
|
测定日/样本 |
E |
F |
G |
|
0天 |
5.01 |
1.25 |
0.328 |
|
1天 |
5.01 |
1.24 |
0.329 |
|
2天 |
5.00 |
1.27 |
0.347 |
|
3天 |
5.00 |
1.28 |
0.337 |
|
Mean |
5.00 |
1.26 |
0.335 |
|
SD |
0.0019 |
0.016 |
0.0088 |
|
CV（%） |
0.038 |
1.3 |
2.6 |
单位：ng/mL，n=4
加标回收测试
样本C
|
添加量 |
实测值 |
回收量 |
回收率（%） |
|
0.00 |
1.29 |
— |
— |
|
0.584 |
1.89 |
0.601 |
103 |
|
1.17 |
2.48 |
1.19 |
102 |
|
1.75 |
3.01 |
1.73 |
98.5 |
单位：ng/mL，n=2
样本D
|
添加量 |
实测值 |
回收量 |
回收率（%） |
|
0.00 |
2.23 |
— |
— |
|
1.36 |
3.59 |
1.35 |
100 |
|
3.39 |
5.60 |
3.36 |
99.2 |
|
4.07 |
6.21 |
3.97 |
97.7 |
单位：pg/mL，n=2
稀释直线性测试
2个血清样本连续用稀释缓冲液稀释3个梯度测定结果，直线回归值 R2=0.999。
参考文献
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1. |
Easy detection of hormone secretion from LβT2 cells by using Gaussia luciferase.Satou K, Mochimaru Y, Nakakura T, Kusada T, Negishi J, Musha S, Yoshimura N, Kato Y, Tomura H.J Reprod Dev. 2017 Apr 21;63(2):199-204. |
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4. |
Increase of kisspeptin-positive cells in the hypothalamus of a rat model of polycystic ovary syndrome. Kondo M, Osuka S, Iwase A, Nakahara T, Saito A, Bayasula, Nakamura T, Goto M, Kotani T, Kikkawa F Metab Brain Dis. 2016 Jun;31(3):673-81. |
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5. |
The combined fixed-dose antituberculous drugs alter some reproductive functions with oxidative stress involvement in wistar rats O. Awodele, B.Pharm M.Sc MPH PhD D.Sc FPCPharm FASIa, A.A. Momoha, N.A. Awololac, O.E. Kalea, b, W.O. Okunowod Toxicology Reports,Vol.3, 2016, Pages 620–627 |
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7. |
Increase of kisspeptin-positive cells in the hypothalamus of a rat model of polycystic ovary syndrome. Kondo M, Osuka S, Iwase A, Nakahara T, Saito A, Bayasula, Nakamura T, Goto M, Kotani T, Kikkawa F Metab Brain Dis. 2016 Feb 11. [Epub ahead of print |
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8. |
Oleuropein supplementation increases urinary noradrenaline and testicular testosterone levels and decreases plasma corticosterone level in rats fed high-protein diet |
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9. |
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10. |
ERα/E2 signaling suppresses the expression of steroidogenic enzyme genes via cross-talk with orphan nuclear receptor Nur77 in the testes S.-Y. Lee., E. Park., S.-C. Kim., R.-S. Ahn., C. Ko., K. Lee. Molecular and Cellular Endocrinology, 2012. |
|
11. |
Gonadotropin-Inhibitory Hormone Inhibits GnRH-Induced Gonadotropin Subunit Gene Transcriptions by Inhibiting AC/cAMP/PKA-Dependent ERK Pathway in LβT2 Cells Son YL., Ubuka T., Millar RP., Kanasaki H. and Tsutsui K. Endocrinology, Vol.153(5), p2332-2343, May 2012. |
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12. |
Anti-androgenic effects of S-40542, a novel non-steroidal selective androgen receptor modulator (SARM) for the treatment of benign prostatic hyperplasia H. Nejishima., N. Yamamoto., M. Suzuki., K. Furuya., N. Nagata., S. Yamada. The Prostate published online:16 MAR 2012 |
|
13. |
Gonadotropin-Inhibitory Hormone Inhibits GnRH-Induced Gonadotropin Subunit Gene Transcriptions by Inhibiting AC/cAMP/PKA-Dependent ERK Pathway in LβT2 Cells Y. L. Son., T. Ubuka., R. P. Millar., H. Kanasaki., and K. Tsutsui. Endocrinology, Feb 28, 2012 |
|
14. |
Neonatal immune challenge alters reproductive development in the female rat L. Sominsky., C.L. Meehan., A.K. Walker., L. Bobrovskaya., E. A. McLaughlin., D. M. Hodgson. Hormones and Behavior, 2012. |
| 产品编号 | 产品名称 | 产品规格 | 产品等级 | 备注 |
| 630-23929 | （AKRLH-010S）大鼠促黄体生成素（LH）ELISA试剂盒（S型） LBIS® Rat LH ELISA KIT(S type) |
96 tests | – | – |
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