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Hyclone胎牛血清使用与保存方法

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Hyclone胎牛血清使用方法

上海金畔生物代理Hyclone品牌产品，我们将竭诚为您服务，欢迎访问Hyclone官网或者咨询我们获取更多相关Hyclone品牌产品信息。

在细胞培养过程中，经常加入5%-20%的Hyclone胎牛血清澳洲，最常使用的Hyclone澳洲胎牛血清浓度是10%。高浓度的血清可能改变细胞的基因表达谱，影响后续实验的结果，我们在实验中使用10%的Hyclone澳洲胎牛血清培养293T细胞，效果非常好。但是有些细胞也会使用5%的Hyclone FBS或者20%的Hyclone胎牛血清，要根据具体细胞选择合适的胎牛血清浓度。
Hyclone胎牛血清保存方法
1、需要长期保存的血清必须储存于-20℃ – 70℃ 低温冰箱中。4℃冰箱中保存时间切勿超过1个月。切勿将血清在37℃放置太久,否则血清会变得浑浊,同时血清中的有效成分会被破坏，而影响血清质量。如果一次无法用完一瓶,可将40～45ml分装于无菌50ml离心管中。由于血清结冰时体积会增加约10%,因此,血清在冻入低温冰箱前，必须预留一定体积空间,否则易发生污染或玻璃瓶冻裂。

2、一般厂商提供的血清为无菌,无需再过滤除菌。如发现Hyclone牛血清有悬浮物,则可将Hyclone牛血清加入培养液内一起过滤,切勿直接过滤Hyclone牛血清。

3、瓶装Hyclone胎牛血清解冻需采用逐步解冻法:-20℃ 至 -70℃ 低温冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天.然后移入室温,待全部溶解后再分装,一般以50ml无菌离心管可分装40～45ml。在溶解过程中须规则摇晃均匀(小心勿造成气泡),使温度与成分均一,减少沈淀的发生。.切勿直接将血清从-20℃进入37℃解冻,这样因温度改变太大,容易造成蛋白质凝集而出现沉淀。

4、热灭活是指56℃, 30分钟加热已完全解冻的血清.加热过程中须规则摇晃均匀.此热处理的目的是使血清中的补体成分灭活.除非必须,一般不建议作此热处理,因为热处理会造成血清沉淀物显著增多,而且还会影响血清的质量.补体参与反应有:细胞毒作用, 平滑肌细胞收缩, 肥大细胞和血小板释放组胺, 增强吞噬作用, 促进淋巴细胞和巨噬细胞发生化学趋化和活化。

5、血清（例如：Hyclone南美血清）中的沉淀物絮状物:主要是Hyclone牛血清中的脂蛋白变性及解冻后Hyclone牛血清中纤维蛋白造成,这些絮状物不会影响血清本身的质量.可用离心3000rpm,5分钟去除,也可不用处理。 显微镜下”小黑点”:经过热处理过的血清,沉淀物的形成会显著增多。有些沉淀物在显微镜下观察象”小黑点”,常误认为血清受污染。一般情况下,此小黑点不会影响细胞生长,但如果怀疑血清（例如：Hyclone南美血清）质量,则应立即停止使用,更换另一批号的血清。

Hyclone胎牛血清产品目录

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Hyclone胎牛血清产品目录

养过细胞的童鞋大都有着这样的共识：血清，由于其复杂的内在成分和难以控制的外界因素，它既是细胞生长的*营养，也是细胞死亡的致命原因，当我们废寝忘食的，呕心沥血的，鞠躬尽瘁的养着细胞同时，也极有可能因为一时的疏忽和大意选错了血清，导致珍贵的细胞意外身外，一切归零，不得不洗心革面重头开始！

冻融说明：

●将血清从冷冻箱取出后，先置于2-8℃冰箱12-24小时左右使之溶解，然后在室温下使之全溶。但必须注意的是，溶解过程中必须规则地摇晃均匀。

●切勿将刚刚从-20℃冰箱里拿出来的血清直接放在水浴中，无论室温的水或者37℃的水，因为在水浴中血清迅速熔化，很大的温差（-20℃到37℃，温差为57℃）极其容易造成血清产生沉淀。

●直接放65℃水浴中更是极其不好的做法，是对血清的亵玩，对科学规则的粗暴践踏！

●血清应该在-10 ℃以下保存。若一次无法用完一瓶，应该无菌分装，再冷冻保存。

解冻后发现有絮状沉淀物出现，该如何处理？

●若您欲去除这些絮状沉淀物，可以将血清分装至无菌离心管内，以400g稍微离心,上清液即可接着加入培养基内一起培养。

●我们不建议您以过滤的方法去除这些絮状沉淀物，因为它可能会阻塞您的过滤膜。

血清应该是什么颜色的？

血清的颜色受多种因素影响，不用批次的血清的颜色很有可能有较大差异。颜色可能是金黄色、红色、琥珀棕色或者是介于三者之间。血清的颜色与产品的品质没有直接的关系。

保存血清的方法？

血清应该保存在-15℃至-25℃。因为多数状况下，一瓶500毫升的血清不能够一次使用完毕，所以建议一次性将血清分装成一次性能够能够试用完毕的体积（如50毫升）。若存放于4℃时，不建议超过一个月。

如何解冻血清才不会使产品质量受损？

我们建议血清在2-8℃的冰箱过夜融解。融解过程中规则地轻微地摇晃能够保证化冻的均匀，防止出现沉淀。

1、为什么储存在冰箱中的胎牛血清会出现沉淀？

胎牛血清没有预老化，储存在2-8℃时，血清中的各种蛋白（如冷凝集素、纤维蛋白原、玻粘连蛋白等）和脂蛋白可能聚集而形成沉淀或可见的混浊物。这些沉淀的产生不会影响血清的质量。

2、如何避免血清中沉淀物的产生？

我们建议您在使用血清的时候，注意下列操作：

解冻血清时，请按照上述逐步解冻法（-20℃至4℃至室温）。不建议直接将血清放在37℃水浴里解冻。温度的变化过快会导致沉淀物和黑点的产生。

解冻血清时，请随时轻轻地将之摇晃均匀，使温度及成分均一，减少沉淀的发生。

请勿将血清置于37℃太久。若在37℃放置太久，血清会变得混浊，同时血清中许多较不稳定的成分也会因此受到损害，影响血清的质量。

血清的热灭活非常容易造成沉淀物的增多，若非必要，无需做此步骤。

若必须做血清的热灭活，请遵守56℃、30分钟的原则，并且随时摇晃均匀。温度过高，时间过久或摇晃不均匀，都会造成沉淀物的增多。

Hyclone胎牛血清产品目录

特级胎牛血清（Defined FBS）
产品描述 规格 货号
HyClone胎牛牛血清（Defined FBS）, 美国血源
40 nm无菌过滤
内毒素≤10 EU/mL，血红素≤10 mg/dL		 500 mL SH30070.03
优级胎牛血清（Characterized FBS）
产品描述 规格 货号
HyClone胎牛血清（Characterized FBS）, 美国血源
3 x 100 nm无菌过滤
内毒素≤25 EU/mL，血红素≤25 mg/dL		 500 mL SH30071.03
HyClone胎牛血清，USDA验证（USDA Tested FBS）
3 x 100 nm无菌过滤
内毒素≤25 EU/mL，血红素≤25 mg/dL
通过牛腹泻病毒检测，血源来自哥斯达黎加，洪都拉斯，巴拿马，尼加拉瓜，萨尔瓦多和危地马拉		 500 mL SH30910.03
HyClone胎牛血清（Characterized FBS）, 加拿大血源
3 x 100 nm无菌过滤
内毒素≤25 EU/mL，血红素≤25 mg/dL		 500 mL SH30396.03
HyClone胎牛血清（Characterized FBS）, 新西兰血源
3 x 100 nm无菌过滤
内毒素≤20 EU/mL，血红素≤25 mg/dL		 500 mL SH30406.02
HyClone胎牛血清（Characterized FBS）, 澳洲血源
3 x 100 nm无菌过滤
内毒素≤25 EU/mL，血红素≤25 mg/dL		 500 mL SH30084.03
HyClone胎牛血清（Characterized FBS）, 南美血源
3 x 100 nm无菌过滤
内毒素≤10 EU/mL，血红素≤25 mg/dL		 500 mL SV30160.03
标准级胎牛血清（Standard FBS）
产品描述 规格 货号
HyClone胎牛血清（Standard FBS）, 美国血源
3 x 100 nm无菌过滤
内毒素和血红素做过检测，有记录
通过牛腹泻病毒（BVD）检测		 500 mL SH30088.03
特殊用途胎牛血清（Specialty FBS）
产品描述 规格 货号
HyClone活性炭处理胎牛血清（Charcoal/Dextran Treated FBS）, 美国血源
3 x 100 nm无菌过滤
内毒素≤10 EU/mL，血红素≤20 mg/dL		 500 mL SH30068.03
HyClone透析型胎牛血清（Dialyzed FBS）， 美国血源
3 x 100 nm无菌过滤
内毒素≤10 EU/mL，血红素≤10 mg/dL
≤ Mr 10 000		 500 mL SH30079.03
HyClone超低IgG胎牛血清（Super Low IgG FBS）, 美国血源
40 nm无菌过滤
内毒素≤10 EU/mL，血红素≤10 mg/dL
IgG: ≤ 5 μg/mL		 500 mL SH30898.03
专用胎牛血清（Screened FBS）
产品描述 规格 货号
HyClone ES细胞专用胎牛血清（ES Cell Screened FBS）, 美国血源
40 nm无菌过滤
内毒素≤10 EU/mL，血红素≤10 mg/dL		 500 mL SH30070.03E
HyClone人骨髓间充质干细胞专用胎牛血清（Human Mesenchymal Stem Cell Screened FBS），美国血源
40 nm无菌过滤
内毒素≤10 EU/mL，血红素≤10 mg/dL		 500 mL SH30070.03M
HyClone四环素阴性胎牛血清（Tetracycline Screened FBS）, 美国血源
40 nm无菌过滤
内毒素≤10 EU/mL，血红素≤10 mg/dL		 500 mL SH30070.03T
HyClone昆虫细胞专用胎牛血清（Insect Cell Screened FBS）, 美国血源
40 nm无菌过滤
内毒素≤10 EU/mL，血红素≤10 mg/dL		 500 mL SH30070.03I
小牛血清（Bovine Calf Sera）
产品描述 规格 货号
HyClone小牛血清（Bovine Calf Serum）, 美国血源
3 x 100 nm无菌过滤
内毒素≤10 EU/mL，血红素≤10mg/dL
采自16-22周小牛		 500 mL SH30073.03
HyClone补充铁离子小牛血清（Iron-Supplemented Bovine Calf Serum），美国血源
3 x 100 nm无菌过滤
内毒素≤10 EU/mL，血红素≤10 mg/dL
采自16-22周小牛		 500 mL SH30072.03
HyClone新生牛血清（Newborn Calf Serum）, 美国血源
3 x 100 nm无菌过滤
内毒素≤50 EU/mL，血红素≤25 mg/dL
采自出生10天内的新生牛		 500 mL SH30118.03
新西兰新生牛血清（New Zealand Newborn Bovine Calf Serum）
3 x 100 nm无菌过滤
内毒素≤25 EU/mL，血红素≤25 mg/dL
采自出生天数小于10天的新生牛		 500 mL SH30401.01
HyClone新西兰补充铁离子小牛血清 (New Zealand Iron Supplemented Newborn Serum)
3 x 100 nm无菌过滤
内毒素≤25 EU/mL，血红素≤25 mg/dL
采自出生天数小于10天的新生牛		 500 mL SH30626.02
工程血清（Engineered sera）
产品描述 规格 货号
HyClone阿尔法牛血清（Alpha Calf Fraction）, 美国血源
3 x 100 nm无菌过滤
内毒素≤10 EU/mL，血红素≤20 mg/dL		 500 mL SH30212.03
HyClone FetalClone I 血清（FetalClone I），美国血源
3 x 100 nm无菌过滤
内毒素≤10 EU/mL，血红素≤20 mg/dL
针对杂交瘤细胞（hybridoma cells）做了优化。		 500 mL SH30080.03
HyClone FetalClone II 血清（FetalClone II），美国血源
3 x 100 nm无菌过滤
内毒素≤10 EU/mL，血红素≤20 mg/dL
针对CHO-K1和CHO系列细胞的培养做了优化。		 500 mL SH30066.03
HyClone FetalClone III 血清（FetalClone III），美国血源
3 x 100 nm无菌过滤
内毒素≤10 EU/mL，血红素≤20 mg/dL
适用于大部分细胞，但是针对成纤维细胞（fibroblasts ells）做了优化。		 500 mL SH30109.03
更多种类牛血清（Alternatives）
产品描述 规格 货号
HyClone促生长型小牛血清（Bovine Growth Serum）, 美国血源
3 x 100 nm无菌过滤
内毒素≤10 EU/mL，血红素≤10 mg/dL
采自16-22周小牛		 500 mL SH30541.03
HyClone加强型小牛血清（Cosmic Calf Serum）, 美国血源
3 x 100 nm无菌过滤
内毒素≤10 EU/mL，血红素≤10 mg/dL
采自16-22周小牛		 500 mL SH30087.03
HyClone新西兰加强型新生牛血清（New Zealand Cosmic Calf Serum）
3 x 100 nm无菌过滤
内毒素≤25 EU/mL，血红素≤25 mg/dL
采自出生天数小于10天的新生牛		 500 mL SH30413.02
物种特异性血清（Species-specific sera）
产品描述 规格 货号
HyClone供体成年牛血清（Donor Adult Bovine Serum）, 美国血源
3 x 100 nm无菌过滤
内毒素≤50 EU/mL，血红素≤25 mg/dL
采自出生天数小于36个月的成年牛		 500 mL SH30075.03
HyClone供体马血清（Donor Equine Serum，Donor Horse Serum）, 美国血源
3 x 100 nm无菌过滤
内毒素≤10 EU/mL，血红素≤10 mg/dL
采自出生天数大于6个月的成年马		 500 mL SH30074.03
HyClone新西兰猪血清（New Zealand Porcine Serum）
3 x 200 nm无菌过滤和辐射除菌
内毒素≤100 EU/mL，血红素≤50 mg/dL
采自出生天数大于6个月的成年猪		 1000 mL SH30908.04
细胞培养基（Media）
产品描述 规格 货号
RPMI 1640 Medium
with 25 mM Hepes and L-glutamine		 500 mL SH30255
DMEM
with high glucose, 4.0 mM L-glutamine, and sodium pyruvate		 500 mL SH30243
DMEM
with high glucose and 4.0 mM L-glutamine • without sodium pyruvate		 500 mL SH30022
DMEM
with high glucose • without L-glutamine and sodium pyruvate		 500 mL SH30081
DMEM
with high glucose and L-glutamine • without sodium pyruvate		 500 mL SH30003
IMDM
with L-glutamine and HEPES • without alpha-thioglycerol		 500 mL SH30228
MEM
with Earle’s balanced salt solution (EBSS) and 2.0 mM L-glutamine		 500 mL SH30024
HyQTase
Cell detachment solution，细胞消化液，细胞分散液		 100 mL SV30030
Trypan Blue Solution（台盼蓝染色液）
0.4% in phosphate buffered saline		 100 mL SV30084
Gentamicin Solution（庆大霉素溶液）
50 mg/mL		 10 x 10 mL SV30080
Antibiotic Antimycotic Solution（抗生素抗真菌液）
(Pen/strep/fungizone), 100×		 100 mL SV30079
Phosphate Buffered Saline (PBS，磷酸盐缓冲液) 500 mL SH30256
Dulbecco’s Phosphate Buffered Saline (DPBS) 500 mL SH30264
HEPES
1 M solution		 100 mL SH30237
Earle’s Balanced Salt Solution (EBSS溶液)
1×, with calcium, magnesium, phenol red		 500 mL SH30029
Hank’s Balanced Salt Solution (HBSS溶液)
1×, with calcium, magnesium, phenol red		 500 mL SH30030
L-Glutamine
0.25%		 500 mL SH30034
NEAA 100 mL SH30238
Cell Culture Grade Water
无内毒素(< 0.005 EU/mL), 无离子, 超纯水, 100 nm无菌过滤。		 500 mL SH30529