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Abcam ab102890 HRP偶联试剂盒 – Lightning-Link

发表于由

产品名称

HRP偶联试剂盒?- Lightning-Link?

产品概述

HRP Conjugation Kit / HRP Labeling Kit ab102890 uses a simple and quick process for?HRP?labeling / conjugation of antibodies. It can also be used to conjugate other proteins or peptides.?Learn about our antibody labeling kits and their advantages.

To conjugate an antibody to HRP using this kit:
– add modifier to antibody and incubate for 3 hrs
– add quencher and incubate for 30 mins
The HRP conjugated antibody can be used immediately in WB, ELISA, IHC etc. No further purification is required and 100% of the antibody is recovered for use.

Learn about buffer compatibility below; for incompatible buffers and low antibody concentrations, use our rapid antibody purification and concentration kits. Use the FAQ to learn more about the technology, or about conjugating other proteins and peptides to HRP.

Custom size conjugation kits up to 100 mg are available on demand. Please contact us to discuss your requirements.

说明

This product is manufactured by Expedeon, an Abcam company, and was previously called Lightning-Link? HRP Labeling Kit. 701-0004 is the same as the 5 mg size. 701-0003 is the same as the 5 x 1 mg size. 701-0000 is the same as the 3 x 100 ug size. 701-0030 is the same as the 3 x 10 ug size. 701-0010 is the same as the 100 μg size. 701-0002 is the same as the 1 mg size.

Amount and volume of antibody for conjugation to HRP

Kit size

Recommended
amount of antibody1

Maximum
amount of antibody

Maximum antibody
volume2

3 x 10 μg

3 x 10 μg

3 x?40 μg

3 x 10 μL

100 μg

1 x 100 μg

1 x 400 μg

1 x 100 μL

3 x 100 μg

3 x 100 μg

3 x 400 μg

3 x 100 μL

1 mg

1 x 1 mg

1 x 4 mg

1 x 1 mL

5 x 1 mg

5 x 1 mg

5 x 4 mg

5 x 1 mL

5 mg

1 x?5 mg

1 x 20 mg

1 x 5 mL

1 Recommended amount of antibody will give an HRP:antibody molar ratio of 4:1. Antibodies often also perform well at the maximum amount of antibody which is 1:1 molar ratio.

2 Ideal?antibody concentration is 1mg/ml. 0.5 – 1 mg/ml can be used if the maximum antibody volume is not exceeded. Antibodies > 4 mg/ml or < 0.5 mg/ml should be diluted /concentrated. Buffer Requirements for Conjugation Buffer should be?pH 6.5-8.5. Buffer constituent compatibility If a concentration is shown, then the constituent should be no more than the concentration shown. If several constituents are close to the limit of acceptable concentration, then this can inhibit conjugation. Compatible buffer constituents 50mM / 0.6% Tris1 0.1% BSA 50% glycerol 0.1% sodium azide2 PBS Potassium phosphate Sodium chloride HEPES Sucrose Sodium citrate EDTA Trehalose 1 Tris buffered saline is almost always ≤ 50 mM / 0.6% 2 Sodium azide irreversibly inhibits HRP; antibodies with azide should be purified before using the HRP conjugation kit. Incompatible buffer constituents Thiomerosal Proclin Glycine Arginine Glutathione DTT If a constituent of the buffer containing your antibody or protein is not listed above, please check the FAQ or contact us. Only purified antibodies are suitable for use, ie. where other proteins, peptides, or amino acids?are not present: antibodies in ascites fluid, serum or hybridoma culture media are incompatible. Storing and handling conjugation kits Lyophilized Lightning-Link? components are hygroscopic. Kits are intentionally shipped at ambient temperature with silica gel to avoid exposure to moisture. Upon receipt, store the kit frozen and protect from moisture. Before opening the outer container, allow the lyophilized components to reach room temperature to minimize condensation. 性能 存放说明 Store at -20°C. Please refer to protocols. 组件 100 μg 1 mg 3 x 10 μg 5 x 1 mg 3 x 100 μg 1 x 5 mg ab274112 - HRP mix 1 x 100μg 1 x 1mg 3 x 10μg 5 x 1mg 3 x 100μg 1 x 5mg ab274106 - Modifier reagent 1 x 200μl 1 x 200μl 1 x 200μl 1 x 1200μl 1 x 200μl 1 x 1200μl ab274296 - Quencher reagent 1 x 200μl 1 x 200μl 1 x 200μl 1 x 1200μl 1 x 200μl 1 x 1200μl

Abcam ab6789 山羊抗小鼠IgG H&L (HRP)

发表于由

产品名称

山羊抗小鼠IgG H&L (HRP)
参阅全部 IgG 二抗

宿主

Goat

靶标种属

Mouse

经测试应用

适用于: ICC, IP, Dot blot, ELISA, IHC-P, IHC-Fr, Immunomicroscopy, WBmore details

免疫原

mouse IgG whole molecule

偶联物

HRP

性能

形式

Liquid

存放说明

Shipped at 4°C. Store at +4°C. Store In the Dark.

存储溶液

Preservative: 0.01% Gentamicin sulphate
Constituents: 0.878% Sodium chloride, 1% BSA, 0.424% Potassium phosphate

浓度

1 mg 浓度为 2 mg/ml

64285-73-0 TMB One Solution (HRP-based ELISA) 单组分TMB显色液（ELISA，HRP显色用）

发表于由

TMB One Solution 单组份TMB溶液；ELISA；HRP (Horseradish Peroxidas) 辣根过氧化物酶；DAB；CAS NO:64285-73-0；

酶联免疫分析技术（ELISA）广泛用于抗原、半抗原或抗体的定量或定性分析，辣根过氧化物酶（HRP）及其偶联物是ELISA技术常用的一种酶，能催化底物如3,3’5,5′-四甲基联苯胺（TMB）发生显色反应，从而进行定量或定性分析。由于TMB比其他显色底物具更高的灵敏度且无致癌性被广泛使用，TMB主要用于ELISA，免疫斑点杂交或免疫组化等实验，也有报道将其用于氯的检测分析。

通常TMB显色试剂由多个组分构成，必须在使用前进行配制，并且容易产生沉淀，使用相对不便且容易导致检测结果不稳定。本品采用全新的TMB显色技术，将所有相关试剂全部配在一个溶液，即仅由单一溶液组成，不仅简化了操作步骤，而且使检测结果更加稳定可靠。

本品专门为ELISA实验而设计。检测原理在于HRP或其他适当过氧化物酶能催化生成可溶的蓝色产物，此时通常可在370nm测定吸光度。当显色反应被酸性溶液（如0.5-2M H2SO4，0.5M HCl，1M H3PO4）终止后，产物由蓝色转为黄色，此时可在450nm测定吸光度。由于本品显色敏感度高，线性浓度范围较宽，极其适合用于定量ELISA分析。

本品用于ELISA检测，每个样品通常使用0.1ml显色液，则100ml本品约检测1000个样品，500ml本品约检测5000个样品。

保存与运输方法

保存：2-8℃避光保存，2年有效。

运输：冰袋运输。

注意事项

1) 本品含TMB和H2O2，对人体有刺激性，请注意防护。

2) 如发现本品出现浑浊或颜色变为蓝色，请停止使用。

3) 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法（ELISA）

1) 使用之前，取出适量单组份TMB显色液，使其回到室温再开始使用；

2) 参考ELISA检测试剂盒的实验步骤，当与HRP标记抗体孵育一段时间后，用适当洗涤液洗涤3-5次，每次3-5min。

3) 洗涤完毕后，去除洗涤液，加入100μl单组份TMB显色液。

4) 室温避光孵育5-30min或更长时间（可长达24h），直至显色到预期深浅。【注意】：建议根据实验需求选择最佳试剂用量、显色时间和反应温度。

5) 直接在370nm测定吸光度。或者加入100μl 0.5-2M H2SO4终止反应，随后在450nm测定吸光度。

常用问题

1. 背景显色太深

1）如果背景（没有样品的对照）显色太深，一方面需考虑使用适当的封闭液进行封闭，如商业化封闭液或者和一抗相同来源的血清（10%）进行封闭。另一方面，使用经过适当吸附的二抗，以减小二抗的非特异性吸附。

2）可以考虑缩短显色时间，或降低二抗浓度。另外，选择适当强度的洗涤液，或延长洗涤时间也会有所帮助。

2. 没有显色或显色太弱

1）适当提高一抗或二抗的浓度。检测二抗效果，滴一滴稀释二抗在离心管内，检测二抗是否被正常显色。

2）可以考虑使用更加灵敏的放大检测体系，例如生物素检测体系。

3）可以适当延长显色时间。

4）如果上述改进不能获得预期效果，可以考虑更换效果更好的一抗或ELISA试剂盒。

相关产品

产品名称    

产品编号     

规格            

   

TMB ( 3,3’,5,5’-Tetramethyl Benzidine Dihydrochloride)

3,3’5,5′-四甲基联苯胺二盐酸

MM2006-250MG

250mg

MM2006-1000MG

1g

TMB One Solution (HRP-based Blotting)

单组分TMB显色液（膜印迹，HRP显色用）

MM0719-100ML

100ml

MM0719-500ML 500ml

64285-73-0 TMB One Solution (HRP-based ELISA) 单组分TMB显色液（ELISA，HRP显色用）

发表于由

TMB One Solution 单组份TMB溶液；ELISA；HRP (Horseradish Peroxidas) 辣根过氧化物酶；DAB；CAS NO:64285-73-0；

酶联免疫分析技术（ELISA）广泛用于抗原、半抗原或抗体的定量或定性分析，辣根过氧化物酶（HRP）及其偶联物是ELISA技术常用的一种酶，能催化底物如3,3’5,5′-四甲基联苯胺（TMB）发生显色反应，从而进行定量或定性分析。由于TMB比其他显色底物具更高的灵敏度且无致癌性被广泛使用，TMB主要用于ELISA，免疫斑点杂交或免疫组化等实验，也有报道将其用于氯的检测分析。

通常TMB显色试剂由多个组分构成，必须在使用前进行配制，并且容易产生沉淀，使用相对不便且容易导致检测结果不稳定。本品采用全新的TMB显色技术，将所有相关试剂全部配在一个溶液，即仅由单一溶液组成，不仅简化了操作步骤，而且使检测结果更加稳定可靠。

本品专门为ELISA实验而设计。检测原理在于HRP或其他适当过氧化物酶能催化生成可溶的蓝色产物，此时通常可在370nm测定吸光度。当显色反应被酸性溶液（如0.5-2M H2SO4，0.5M HCl，1M H3PO4）终止后，产物由蓝色转为黄色，此时可在450nm测定吸光度。由于本品显色敏感度高，线性浓度范围较宽，极其适合用于定量ELISA分析。

本品用于ELISA检测，每个样品通常使用0.1ml显色液，则100ml本品约检测1000个样品，500ml本品约检测5000个样品。

保存与运输方法

保存：2-8℃避光保存，2年有效。

运输：冰袋运输。

注意事项

1) 本品含TMB和H2O2，对人体有刺激性，请注意防护。

2) 如发现本品出现浑浊或颜色变为蓝色，请停止使用。

3) 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法（ELISA）

1) 使用之前，取出适量单组份TMB显色液，使其回到室温再开始使用；

2) 参考ELISA检测试剂盒的实验步骤，当与HRP标记抗体孵育一段时间后，用适当洗涤液洗涤3-5次，每次3-5min。

3) 洗涤完毕后，去除洗涤液，加入100μl单组份TMB显色液。

4) 室温避光孵育5-30min或更长时间（可长达24h），直至显色到预期深浅。【注意】：建议根据实验需求选择最佳试剂用量、显色时间和反应温度。

5) 直接在370nm测定吸光度。或者加入100μl 0.5-2M H2SO4终止反应，随后在450nm测定吸光度。

常用问题

1. 背景显色太深

1）如果背景（没有样品的对照）显色太深，一方面需考虑使用适当的封闭液进行封闭，如商业化封闭液或者和一抗相同来源的血清（10%）进行封闭。另一方面，使用经过适当吸附的二抗，以减小二抗的非特异性吸附。

2）可以考虑缩短显色时间，或降低二抗浓度。另外，选择适当强度的洗涤液，或延长洗涤时间也会有所帮助。

2. 没有显色或显色太弱

1）适当提高一抗或二抗的浓度。检测二抗效果，滴一滴稀释二抗在离心管内，检测二抗是否被正常显色。

2）可以考虑使用更加灵敏的放大检测体系，例如生物素检测体系。

3）可以适当延长显色时间。

4）如果上述改进不能获得预期效果，可以考虑更换效果更好的一抗或ELISA试剂盒。

相关产品

产品名称    

     

规格            

   

TMB ( 3,3’,5,5’-Tetramethyl Benzidine Dihydrochloride)

3,3’5,5′-四甲基联苯胺二盐酸

250mg

1g

TMB One Solution (HRP-based Blotting)

单组分TMB显色液（膜印迹，HRP显色用）

100ml

500ml

链霉亲和素免疫磁珠 9013-20-1,HRP-Streptavidin 辣根过氧化物酶标记链霉亲和素

发表于由

Streptavidin 链霉亲和素（链亲和素）；Avidin 亲和素；链霉亲和素-生物素放大系统；Streptavidin Magbeads 链霉亲和素免疫磁珠；CAS：9013-20-1

产品信息

产品名称         

 产品编号             规格            
HRP-Streptavidin 辣根过氧化物酶标记链霉亲和素 MM50101-100UL 100µl

 

链霉亲和素（Streptavidin），分子量约为60kDa，来源于阿维丁链霉菌（Streptomyces avidinii）的一种细菌蛋白，高度特异性结合生物素（biotin），亲和常数（Kd）为10-15M。作为一种四聚体蛋白，可同时结合4个生物素分子，该功能与鸡蛋清来源的亲和素（avidin）具很高的相似性。然而，不同于亲和素，链霉亲和素是一种非糖基化蛋白，基本不带电荷，而亲和素在中性pH条件下呈碱性，比较而言链霉亲和素的非特异性结合远低于亲和素，这样检测时链霉亲和素的非特异性背景明显低很多。目前，生物素检测通常用链霉亲和素替代亲和素。

辣根过氧化物酶（Horseradish peroxidase，HRP，EC 1.11.1.7），普遍用于标记许多不同免疫化学实验用的免疫球蛋白，包括ELISA，免疫印迹，免疫组化。HRP能够催化DAB等显色底物显色，或催化化学发光底物如ECL产生化学荧光。

本品为辣根过氧化物酶HRP标记的链霉亲和素（HRP-conjugated Streptavidin），可用于生物素标记的抗体、核酸、蛋白或其他生物素标记分子的检测。

本品以液体形式供货，浓度1mg/ml，推荐稀释倍数参考下表1。实际操作需根据具体情况做适当调整。

推荐使用浓度

Western Blot        ELISA                IHC/ICC/ISH          Southern/Northern Blot     
1:2000-10000 1:2000-10000 1:200-500 1:2000-5000

保存与运输方法

保存：-20℃保存，一年有效。

运输：冰袋运输。

注意事项

1）本品不含叠氮钠，因叠氮钠会抑制辣根过氧化物酶HRP的活性。

2）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

相关产品

1、链霉亲和素（Streptavidin），Unconjugated

产品名称                                                                 产品编号                   规格             外观             
Streptavidin (1mg/ml) 链霉亲和素（1mg/ml） MM50001-1ML 1ml 液体
Streptavidin (1mg/ml) 链霉亲和素（1mg/ml） MM50001-5ML 5ml 液体
Streptavidin (1mg/ml) 链霉亲和素（1mg/ml） MM50001-10ML 10ml 液体
Streptavidin, Recombinant 链霉亲和素（重组型） MM50002-10MG 10mg 粉末
Streptavidin, Recombinant 链霉亲和素（重组型） MM50002-50MG 50mg 粉末
Streptavidin, Recombinant 链霉亲和素（重组型） MM50002-100MG 100mg 粉末
Streptavidin, Recombinant 链霉亲和素（重组型） MM50002-500MG 500mg 粉末
Streptavidin, Recombinant 链霉亲和素（重组型） MM50002-1000MG 1g 粉末

2、链霉亲和素（Streptavidin），Conjugated

产品名称                                                          产品编号                     规格             Ex/Em（nm） 
HRP-Streptavidin MM50101-100UL 100µl /
Alkaline Phosphatase-Streptavidin MM50102-100UL 100µl /
FITC-Streptavidin MM50103-500UG 500µg 488/520
PE-Streptavidin MM50104-500UG 500µg 565/578
Alexa Fluor 405-Streptavidin MM50105-200UG 200µg 401/420
Alexa Fluor 488-Streptavidin MM50106-200UG 200µg 491/514
Alexa Fluor 555-Streptavidin MM50107-200UG 200µg 559/569
Alexa Fluor 594-Streptavidin MM50108-200UG 200µg 592/614
Alexa Fluor 647-Streptavidin MM50109-200UG 200µg 654/674
Alexa Fluor 680-Streptavidin MM50110-200UG 200µg 682/701
Alexa Fluor 750-Streptavidin MM50111-200UG 200µg 753/779
Cy2-Streptavidin Cy2 MM50112-1MG 1mg 492/510
Cy3-Streptavidin MM50113-1MG 1mg 550/570
Cy5-Streptavidin MM50114-1MG 1mg 650/670

3、链霉亲和素免疫磁珠（Streptavidin Magbeads）

产品名称                                                                     产品编号              规格           浓度                
Streptavidin Magnetic Beads 1 µm 链霉亲和素磁珠 MP3901-1ML 1ml 10mg/ml
Streptavidin Magnetic Beads 1 µm 链霉亲和素磁珠 MP3901-10ML 10ml 10mg/ml
Streptavidin Magnetic Beads 2 µm 链霉亲和素磁珠 MP3902-1ML 1ml 10mg/ml
Streptavidin Magnetic Beads 2 µm 链霉亲和素磁珠 MP3902-10ML 10ml 10mg/ml
Streptavidin Magnetic Beads 5 µm 链霉亲和素磁珠 MP3903-1ML 1ml 10mg/ml
Streptavidin Magnetic Beads 5 µm 链霉亲和素磁珠 MP3903-10ML 10ml 10mg/ml

TMB One Solution (HRP-based Blotting) 单组分TMB显色液（膜印迹，HRP显色用）

发表于由

描述

TMB One Solution (HRP-based Blotting)

单组分TMB显色液（膜印迹，HRP显色用）

产品标签

TMB One Solution 单组份TMB溶液；ELISA；HRP (Horseradish Peroxidas) 辣根过氧化物酶；DAB；CAS NO:64285-73-0；

产品信息

  产品名称                                                   产品编号               规格             价格（元）  
  TMB One Solution (HRP-based Blotting)

  单组分TMB显色液（膜印迹，HRP显色用）

 MM0719-100ML 100ml 220
MM0719-500ML 500ml 790

产品描述

酶联免疫分析技术（ELISA）广泛用于抗原、半抗原或抗体的定量或定性分析，辣根过氧化物酶（HRP）及其偶联物是ELISA技术常用的一种酶，能催化底物如3,3’5,5′-四甲基联苯胺（TMB）发生显色反应，从而进行定量或定性分析。由于TMB比其他显色底物具更高的灵敏度且无致癌性被广泛使用，TMB主要用于ELISA，免疫斑点杂交或免疫组化等实验，也有报道将其用于氯的检测分析。

通常TMB显色试剂由多个组分构成，必须在使用前进行配制，并且容易产生沉淀，使用相对不便且容易导致检测结果不稳定。本品采用全新的TMB显色技术，将所有相关试剂全部配在一个溶液，即仅由单一溶液组成，不仅简化了操作步骤，而且使检测结果更加稳定可靠。

本品专门为免疫印迹实验而设计，其在反应位点处产生紫色不可溶物，背景很少或几乎无背景，用水可终止显色反应。适合用于膜印迹免疫实验，包括WB，斑点杂交，Southern Blot和Northern Blot等HRP的膜显色检测。

保存与运输方法

保存：2-8℃避光保存，2年有效。

运输：冰袋运输。

注意事项

1）  本品含TMB和H2O2，对人体有刺激性，请注意防护。

2）  如发现本品出现浑浊或颜色变为蓝色，请停止使用。

3）  为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法（膜的HRP显色检测）

1）  使用之前，取出适量单组份TMB显色液，使其回到室温再开始使用；

2）  参考相应实验步骤，在与HRP标记的抗体孵育一段时间后，用适当洗涤液洗涤3-5次，每次3-5min。

3）  洗涤完毕后，去除洗涤液，滴加适量单组份TMB显色液充分覆盖膜。

4）  室温避光孵育5-30min或更长时间（可长达数小时），直至显色到预期深浅。【注意】：建议根据实验需求选择显色时间。

5）  直接拍照记录。

 

常用问题

1. 背景显色太深

1）如果背景（没有样品的对照）显色太深，一方面需考虑使用适当的封闭液进行封闭，如商业化封闭液或者和一抗相同来源的血清（10%）进行封闭。另一方面，使用经过适当吸附的二抗，以减小二抗的非特异性吸附。

2）可以考虑缩短显色时间，或降低二抗浓度。另外，选择适当强度的洗涤液，或延长洗涤时间也会有所帮助。

2. 没有显色或显色太弱

1）适当提高一抗或二抗的浓度。检测二抗效果，滴一滴稀释二抗在离心管内，检测二抗是否被正常显色。

2）可以考虑使用更加灵敏的放大检测体系，例如生物素检测体系。

3）可以适当延长显色时间。

4）如果上述改进不能获得预期效果，对于WB，可以考虑更换效果更好的一抗；对于Southern、Northern Blot等可考虑更换探针。

 

相关产品

产品名称                                                                       产品编号                    规格             价格（元）  
TMB ( 3,3’,5,5’-Tetramethyl Benzidine Dihydrochloride)

 3,3’5,5′-四甲基联苯胺二盐酸

MM2006-250MG 250mg 145
MM2006-1000MG 1g 345
TMB One Solution (HRP-based ELISA)

单组分TMB显色液（ELISA，HRP显色用）

MM2001-100ML 100ml 210
MM2001-500ML 500ml 735

 

 

 

TMB One Solution (HRP-based Blotting) 单组分TMB显色液（膜印迹，HRP显色用）

发表于由

描述

TMB One Solution (HRP-based Blotting)

单组分TMB显色液（膜印迹，HRP显色用）

产品标签

TMB One Solution 单组份TMB溶液；ELISA；HRP (Horseradish Peroxidas) 辣根过氧化物酶；DAB；CAS NO:64285-73-0；

产品信息

  产品名称                                                   产品编号               规格             价格（元）  
  TMB One Solution (HRP-based Blotting)

  单组分TMB显色液（膜印迹，HRP显色用）

 MM0719-100ML 100ml 220
MM0719-500ML 500ml 790

产品描述

酶联免疫分析技术（ELISA）广泛用于抗原、半抗原或抗体的定量或定性分析，辣根过氧化物酶（HRP）及其偶联物是ELISA技术常用的一种酶，能催化底物如3,3’5,5′-四甲基联苯胺（TMB）发生显色反应，从而进行定量或定性分析。由于TMB比其他显色底物具更高的灵敏度且无致癌性被广泛使用，TMB主要用于ELISA，免疫斑点杂交或免疫组化等实验，也有报道将其用于氯的检测分析。

通常TMB显色试剂由多个组分构成，必须在使用前进行配制，并且容易产生沉淀，使用相对不便且容易导致检测结果不稳定。本品采用全新的TMB显色技术，将所有相关试剂全部配在一个溶液，即仅由单一溶液组成，不仅简化了操作步骤，而且使检测结果更加稳定可靠。

本品专门为免疫印迹实验而设计，其在反应位点处产生紫色不可溶物，背景很少或几乎无背景，用水可终止显色反应。适合用于膜印迹免疫实验，包括WB，斑点杂交，Southern Blot和Northern Blot等HRP的膜显色检测。

保存与运输方法

保存：2-8℃避光保存，2年有效。

运输：冰袋运输。

注意事项

1）  本品含TMB和H2O2，对人体有刺激性，请注意防护。

2）  如发现本品出现浑浊或颜色变为蓝色，请停止使用。

3）  为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法（膜的HRP显色检测）

1）  使用之前，取出适量单组份TMB显色液，使其回到室温再开始使用；

2）  参考相应实验步骤，在与HRP标记的抗体孵育一段时间后，用适当洗涤液洗涤3-5次，每次3-5min。

3）  洗涤完毕后，去除洗涤液，滴加适量单组份TMB显色液充分覆盖膜。

4）  室温避光孵育5-30min或更长时间（可长达数小时），直至显色到预期深浅。【注意】：建议根据实验需求选择显色时间。

5）  直接拍照记录。

 

常用问题

1. 背景显色太深

1）如果背景（没有样品的对照）显色太深，一方面需考虑使用适当的封闭液进行封闭，如商业化封闭液或者和一抗相同来源的血清（10%）进行封闭。另一方面，使用经过适当吸附的二抗，以减小二抗的非特异性吸附。

2）可以考虑缩短显色时间，或降低二抗浓度。另外，选择适当强度的洗涤液，或延长洗涤时间也会有所帮助。

2. 没有显色或显色太弱

1）适当提高一抗或二抗的浓度。检测二抗效果，滴一滴稀释二抗在离心管内，检测二抗是否被正常显色。

2）可以考虑使用更加灵敏的放大检测体系，例如生物素检测体系。

3）可以适当延长显色时间。

4）如果上述改进不能获得预期效果，对于WB，可以考虑更换效果更好的一抗；对于Southern、Northern Blot等可考虑更换探针。

 

相关产品

产品名称                                                                       产品编号                    规格             价格（元）  
TMB ( 3,3’,5,5’-Tetramethyl Benzidine Dihydrochloride)

 3,3’5,5′-四甲基联苯胺二盐酸

MM2006-250MG 250mg 145
MM2006-1000MG 1g 345
TMB One Solution (HRP-based ELISA)

单组分TMB显色液（ELISA，HRP显色用）

MM2001-100ML 100ml 210
MM2001-500ML 500ml 735

 

 

 

抗体/试剂/诊断抗体原料,辣根过氧化物酶标记的羊抗兔IgG H&L

发表于由

品牌：Bioss/博奥森 | 货号：JP-0295G-HRP

产品编号 JP-0295G-HRP
英文名称 Goat Anti-Rabbit IgG H&L / HRP
中文名称 辣根过氧化物酶标记的羊抗兔IgG H&L
别    名 Goat Anti-Rabbit IgG H&L (HRP); Immunoglobulin G;   
Specific References  (703)     |     JP-0295G-HRP has been referenced in 703 publications.
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111 [IF=3.39] Qiao, Hui, et al. “Progressive alterations of hippocampal CA3-CA1 synapses in an animal model of depression.” Behavioural Brain Research (2014).  WB ;  Rabbit.  222

抗体来源 Goat
克隆类型 Polyclonal
交叉反应 Rabbit, 
产品应用 WB=1:10000-50000 ELISA=1:50000-200000 IHC-P=1:200 
not yet tested in other applications.
optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.
性    状 Liquid
浓    度 2.0 mg/ml
免 疫 原 Native rabbit IgG 
亚    型 IgG
纯化方法 affinity purified by Protein G, nonspecific adsorbed
缓 冲 液 10 mM TBS (pH=7.4) with 1% BSA, 0.03% Proclin300 and 50% glycerol.
保存条件 Store at -20℃ for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles.
注意事项 This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
产品介绍 Immunoglobulin G (IgG), is one of the most abundant proteins in serum with normal levels between 8-17 mg/mL in adult blood. IgG is important for our defence against microorganisms and the molecules are produced by B lymphocytes as a part of our adaptive immune response. The IgG molecule has two separate functions; to bind to the pathogen that elicited the response and to recruit other cells and molecules to destroy the antigen. The variability of the IgG pool is generated by somatic recombination and the number of specificities in an individual at a given time point is estimated to be 1011 variants.
产品图片
Paraformaldehyde-fixed, paraffin embedded (Human kidney); Antigen retrieval by boiling in sodium citrate buffer (pH6.0) for 15min; Block endogenous peroxidase by 3% hydrogen peroxide for 20 minutes; Blocking buffer (normal goat serum) at 37°C for 30min; Antibody incubation with (Histone H3 (Nuclear Loading Control)) Polyclonal Antibody, Unconjugated (JP-0349R) at 1:200 overnight at 4°C, followed by operating according to SP Kit(Rabbit) (sp-0023 JP-0295G-HRP 1:100) instructionsand DAB staining.

Paraformaldehyde-fixed, paraffin embedded (human laryngeal carcinoma); Antigen retrieval by boiling in sodium citrate buffer (pH6.0) for 15min; Block endogenous peroxidase by 3% hydrogen peroxide for 20 minutes; Blocking buffer (normal goat serum) at 37°C for 30min; Antibody incubation with (Histone H3 (Nuclear Loading Control)) Polyclonal Antibody, Unconjugated (JP-0349R) at 1:200 overnight at 4°C, followed by operating according to SP Kit(Rabbit) (sp-0023 JP-0295G-HRP 1:100) instructionsand DAB staining.

Paraformaldehyde-fixed, paraffin embedded (mouse colon); Antigen retrieval by boiling in sodium citrate buffer (pH6.0) for 15min; Block endogenous peroxidase by 3% hydrogen peroxide for 20 minutes; Blocking buffer (normal goat serum) at 37°C for 30min; Antibody incubation with (Histone H3 (Nuclear Loading Control)) Polyclonal Antibody, Unconjugated (JP-0349R) at 1:200 overnight at 4°C, followed by operating according to SP Kit(Rabbit) (sp-0023 JP-0295G-HRP 1:100) instructionsand DAB staining.

Paraformaldehyde-fixed, paraffin embedded (mouse liver); Antigen retrieval by boiling in sodium citrate buffer (pH6.0) for 15min; Block endogenous peroxidase by 3% hydrogen peroxide for 20 minutes; Blocking buffer (normal goat serum) at 37°C for 30min; Antibody incubation with (Histone H3 (Nuclear Loading Control)) Polyclonal Antibody, Unconjugated (JP-0349R) at 1:200 overnight at 4°C, followed by operating according to SP Kit(Rabbit) (sp-0023 JP-0295G-HRP 1:100) instructionsand DAB staining.

Paraformaldehyde-fixed, paraffin embedded (rat pancreas); Antigen retrieval by boiling in sodium citrate buffer (pH6.0) for 15min; Block endogenous peroxidase by 3% hydrogen peroxide for 20 minutes; Blocking buffer (normal goat serum) at 37°C for 30min; Antibody incubation with (Glucagon) Polyclonal Antibody, Unconjugated (JP-3796R) at 1:200 overnight at 4°C, followed by operating according to SP Kit(Rabbit) (sp-0023 JP-0295G-HRP 1:300) instructionsand DAB staining.

Paraformaldehyde-fixed, paraffin embedded (rat brain); Antigen retrieval by boiling in sodium citrate buffer (pH6.0) for 15min; Block endogenous peroxidase by 3% hydrogen peroxide for 20 minutes; Blocking buffer (normal goat serum) at 37°C for 30min; Antibody incubation with (GFAP) Polyclonal Antibody, Unconjugated (JP-0199R) at 1:200 overnight at 4°C, followed by operating according to SP Kit(Rabbit) (sp-0023 JP-0295G-HRP 1:300) instructionsand DAB staining.

Immobilized rabbit IgG (JP-0295P, nothing else) at 0.2μg/well can bind Goat Anti-Rabbit IgG H&L/HRP antibody (Cat. No. JP-0295G-HRP).

本网站可提供的所有产品和服务均不得用于人体或动物的临床诊断或治疗，仅可用于科研等非医疗目的。

MerckMillipore西方化学发光HRP底物试剂

发表于由
产品简介
级别 化学纯CP

MerckMillipore西方化学发光HRP底物试剂，密理博的HRP和AP底物在所有西方和墨点/狭线/斑点印迹应用中都表现出色。除此之外，它们与PVDF和硝化纤维素滤膜都相容，而且与所有常用的缓冲液和封膜试剂都相容。

详情介绍

MerckMillipore西方化学发光HRP底物试剂

概述

如想进行简单、经济有效的蛋白检测，使用密理博的西方蛋白印迹试剂可以达到z高敏感度，背景噪音低。

Bløk™ 消噪试剂

Bløk试剂大程度地降低了西方蛋白印迹检测中的背景噪音，提高了敏感度，能够出色地检测甚至分布稀少的蛋白质。Bløk试剂完全不含蛋白，因此减少了非特异性结合，特别是在使用磷光抗体或亲和素-*系统时。

尽管Bløk试剂专门设计用于密理博的SNAP i.d.检测系统，它们也可以用来在传统的西方蛋白印迹检测实验方案中减小背景噪音。

有3种Bløk试剂可供选用

  • Bløk-CH缓冲液，用于HRP化学发光或呈色检测

  • Bløk-FL缓冲液，用于荧光检测

  • Bløk-PO缓冲液，用于化学发光或荧光磷酸*检测

Bløk缓冲液的特点：

  • 随时可用

  • 不含蛋白

  • 自由地流过SNAP i.d.转印膜

  • 可以储存于室温下

  • 保质期长：

• Bløk-CH/FL可保质2年

• Bløk-PO可保质1年

  • 有500 mL瓶装

  • 与PVDF（Immobilon P、Immobilon FL）和硝化纤维素滤膜相容

  • Bløk-CH试剂与Immobilon HRP底物相容

  • 与链霉亲和素抗体相容

  • 能用Bløk试剂稀释一抗和二抗

  • 足够19个小型转印膜使用的试剂（对于SNAP i.d.，每个8 x 7 cm转印膜至少需要26 mL）

为什么用合成封膜剂？

  • 减少蛋白类缓冲液可能发生的交叉反应

  • 减小背景噪音，特别是在检测分布稀少的蛋白质的情况下

  • 如果您正在研究蛋白磷酸化

  • 如果您正在使用亲和素-*系统

简化排错

Bløk试剂让您在免疫检测之后对滤膜进行染色，因此您可以看到蛋白转印是否有问题，或者了解每一条上是否含有相同数量的蛋白。

Luminata西方HRP底物

新系列Luminata西方HRP底物是一系列预混的即用型化学发光试剂，用于基于HRP的西方检测。可直接倒在西方转印膜上，不必担心移液出错。Luminata™ Classico、Crescendo和Forte底物适合范围广泛的敏感度，在4 °C或室温下保持稳定，因此您可以将其储存在自己的工作台上。

Immobilion® 西方HRP和AP化学发光底物

密理博的HRP和AP底物在所有西方和墨点/狭线/斑点印迹应用中都表现出色。除此之外，它们与PVDF和硝化纤维素滤膜都相容，而且与所有常用的缓冲液和封膜试剂都相容。

Spray and Glow检测试剂

Visualizer™ Spray & Glow™ 系统是一种非放射性发光检测方法，在化学发光西方蛋白印迹检测中，通过HRP标记的抗体检测固着的特异性抗原。Spray & Glow的敏感度与日常使用的“主力”ECL检测试剂相媲美，适合于常规至高含量蛋白检测。Spray & Glow的一个额外优点是易于使用，不需要混合或移液！

其较低的背景噪音和较高的信噪比，使其成为您研究工作的理想选择。您或许知道，低背景噪音印迹被认为是较高质量的数据，更易于分析，而且更可能被出版物接受。

如想进行简单、经济有效的蛋白检测，使用我们的西方蛋白印迹试剂可以达到z高敏感度，背景噪音低。富有特点的西方蛋白印迹工具包括用于化学发光、荧光和磷蛋白检测的不含蛋白、室温下稳定的封膜试剂，以及预混的、室温下稳定的HRP底物。

特点及优点

  • 预先优化协同作用，能产生强大的特异性的信号，而且背景噪音低

  • 信号增强试剂放大了信号，因此您可以更快地获得数据，花更少时间在排错上

  • 我们还提供易于使用的试剂，用于从化学发光底物上产生的西方蛋白印迹上去除抗体

应用

使用硝化纤维素或PVDF滤膜进行西方蛋白印迹检测；与放射、呈色、化学发光、荧光和化学荧光检测法兼容

MerckMillipore西方化学发光HRP底物试剂 订购信息

Immobilon西方化学发光HRP底物
产品目录编号 描述 体积 膜覆盖范围
WBKLS0050 Immobilon Western HRP 底物，2 x 25 mL Luminol (25 mL)
Peroxide solution (25 mL)		 500 cm²
WBKLS0100 Immobilon Western HRP 底物，2 x 50 mL Luminol (50 mL)
Peroxide solution (50 mL)		 1000 cm²
WBKLS0500 Immobilon Western HRP 底物，2 x 250 mL Luminol (250 mL)
Peroxide solution (250 mL)		 5000 cm²