Enhanced NaTrium Green-2 AM (Replacement of Asante NaTrium Green-2 AM) 钠离子指示探针


描述

Enhanced NaTrium Green-2 AM 钠离子指示探针

产品标签

Enhanced NaTrium Green-2 AM;Asante NaTrium Green-2 AM(ANG-2 AM);PBFI AM 钾离子指示剂;SBFI AM 钠离子指示剂/探针;Valinomycin 缬氨霉素;

产品信息

产品名称 产品编号 规格 规格
Enhanced NaTrium Green-2 AM 钠离子指示探针 MX4514-100UG 2×50μg 2258
Enhanced NaTrium Green-2 AM 钠离子指示探针 MX4514-250UG 5×50μg 5958
Enhanced NaTrium Green-2 AM 钠离子指示探针 MX4514-500UG 10×50μg 9158

产品描述

Enhanced NaTrium Green-2 AM (ENG-2 AM)是Asante NaTrium Green-2 AM(ANG-2 AM)的替代物,是一种具细胞膜渗透性的新型钠离子(Na+)荧光探针。一旦进入细胞后,经非特异性酯酶水解生成水溶性形式的探针。不同于传统Na+探针SBFI,ENG-2是一种可见光光谱范围的探针,激发波长范围是488-525nm,发射波长是545nm。

ENG-2 AM具有容易加载、缓慢泄露、良好光稳定性和宽动力学范围等理想特征,也正好弥补传统Na+荧光探针SBFI AM(#MX4509)的缺陷。

产品特性

1) 同义名:ENG-2 AM

2) 分子式:C53H60Cl2N2O18

3) 分子量:1084 g/mol

4) 纯度:≥90%(HPLC)

5) 最大激发波长:525 ± 3 nm(Methanol)

6) 最大发射波长:545 ± 3 nm(Methanol)

7) 解离常数(Kd):20mM(in the absence of K+)

8) 动力学范围(Fmax/Fmin):29

9) 溶解性:DMSO

10)化学结构式:

保存与运输方法

保存:-20ºC避光干燥保存,至少1年有效。

运输:冰袋运输。

常用操作流程(AM荧光探针)

以下步骤仅做参考,具体请根据实际情况或参考文献资料来调整。

1.1 使用无水DMSO溶解ENG-2 AM(Mw:1084 g/mol)配制成1-5mM储存液,比如往50μg ENG-2 AM冻干粉内加入23μl DMSO,充分溶解后配制成2mM储存液。-20ºC分装干燥冻存,避免反复冻融。

1.2 通常在含适当浓度AM探针的无血清培养基中实现探针加载。建议正式实验前向加载培养基内加入Pluronic F-127以促进AM探针的分散。可用DMSO配置20% Pluronic F-127储存液或其他浓度,只需在正式实验前将其与ENG-2 AM储存液混合,然后加入加载培养基,保证其终浓度<0.1%(w/v)。

1.3 室温或37℃孵育细胞(可能在室温的探针加载质量会高些),孵育浓度通常为1-10µM,孵育时间通常为30-60min,具体的请根据实际情况或参考文献资料。

1.4 【可选】对于大分子量AM探针(分子量≥1000g/mol),孵育结束,加入不含AM探针的细胞加载培养基额外孵育20-60min,以确保细胞将AM基团完全去酯化。

1.5 用不含血清和探针的培养基清洗细胞至少一次,以降低细胞外背景荧光。

1.6 最后用合适的仪器来检测荧光信号。最大激发波长525nm,最大发射波长545nm。

【注意】:

a) 如果细胞加载培养基是以碳酸氢钠为缓冲体系,那么加载需要含5% CO2的环境内进行,以防止因CO2损失引起的培养基碱化。

b) 如果细胞加载培养基含血清,那需适当提高AM探针工作浓度,以补偿因AM探针与血清蛋白结合引起的损失。

c) 某些情况下,对分子量接近或超过1000的AM探针,需用不含AM探针的细胞加载缓冲液进一步孵育20-60min,以保证细胞内酯酶能充分降解AM基团。

d) 探针的加载时间和浓度因具体的细胞类型而有差异,请根据具体的细胞类型来优化。

e) 对每一种探针有必要通过校准(calibration)来得到实际解离常数(Kd)。物理条件如温度,pH,离子强度或溶液粘度,以及探针与细胞组成成分如蛋白质的相互作用,都会影响Kd值。实际情况细胞内的Kd比体外溶液通常要高。因此,细胞水平研究有必要进行校准确认实际Kd值。

f) 对于ENG-2,虽然最大激发波长在525nm,但其极强的荧光亮度使其能够用标准的488nm滤片来激发,与Fluo系列的可见光钙离子指示探针检测手段一致。值得注意的是,488nm激发下得到的荧光强度约为最大激发波长下的40%。

注意事项

1) ENG-2 AM易受潮,粉末需干燥保存;

2) ENG-2 AM储存液可用DMSO溶解,不推荐长期保存,甚至是-20ºC。建议条件允许,最好现配现用。

3) 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

Enhanced NaTrium Green-2 AM (Replacement of Asante NaTrium Green-2 AM) 钠离子指示探针


描述

Enhanced NaTrium Green-2 AM 钠离子指示探针

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Enhanced NaTrium Green-2 AM;Asante NaTrium Green-2 AM(ANG-2 AM);PBFI AM 钾离子指示剂;SBFI AM 钠离子指示剂/探针;Valinomycin 缬氨霉素;

产品信息

产品名称 产品编号 规格 规格
Enhanced NaTrium Green-2 AM 钠离子指示探针 MX4514-100UG 2×50μg 2258
Enhanced NaTrium Green-2 AM 钠离子指示探针 MX4514-250UG 5×50μg 5958
Enhanced NaTrium Green-2 AM 钠离子指示探针 MX4514-500UG 10×50μg 9158

产品描述

Enhanced NaTrium Green-2 AM (ENG-2 AM)是Asante NaTrium Green-2 AM(ANG-2 AM)的替代物,是一种具细胞膜渗透性的新型钠离子(Na+)荧光探针。一旦进入细胞后,经非特异性酯酶水解生成水溶性形式的探针。不同于传统Na+探针SBFI,ENG-2是一种可见光光谱范围的探针,激发波长范围是488-525nm,发射波长是545nm。

ENG-2 AM具有容易加载、缓慢泄露、良好光稳定性和宽动力学范围等理想特征,也正好弥补传统Na+荧光探针SBFI AM(#MX4509)的缺陷。

产品特性

1) 同义名:ENG-2 AM

2) 分子式:C53H60Cl2N2O18

3) 分子量:1084 g/mol

4) 纯度:≥90%(HPLC)

5) 最大激发波长:525 ± 3 nm(Methanol)

6) 最大发射波长:545 ± 3 nm(Methanol)

7) 解离常数(Kd):20mM(in the absence of K+)

8) 动力学范围(Fmax/Fmin):29

9) 溶解性:DMSO

10)化学结构式:

保存与运输方法

保存:-20ºC避光干燥保存,至少1年有效。

运输:冰袋运输。

常用操作流程(AM荧光探针)

以下步骤仅做参考,具体请根据实际情况或参考文献资料来调整。

1.1 使用无水DMSO溶解ENG-2 AM(Mw:1084 g/mol)配制成1-5mM储存液,比如往50μg ENG-2 AM冻干粉内加入23μl DMSO,充分溶解后配制成2mM储存液。-20ºC分装干燥冻存,避免反复冻融。

1.2 通常在含适当浓度AM探针的无血清培养基中实现探针加载。建议正式实验前向加载培养基内加入Pluronic F-127以促进AM探针的分散。可用DMSO配置20% Pluronic F-127储存液或其他浓度,只需在正式实验前将其与ENG-2 AM储存液混合,然后加入加载培养基,保证其终浓度<0.1%(w/v)。

1.3 室温或37℃孵育细胞(可能在室温的探针加载质量会高些),孵育浓度通常为1-10µM,孵育时间通常为30-60min,具体的请根据实际情况或参考文献资料。

1.4 【可选】对于大分子量AM探针(分子量≥1000g/mol),孵育结束,加入不含AM探针的细胞加载培养基额外孵育20-60min,以确保细胞将AM基团完全去酯化。

1.5 用不含血清和探针的培养基清洗细胞至少一次,以降低细胞外背景荧光。

1.6 最后用合适的仪器来检测荧光信号。最大激发波长525nm,最大发射波长545nm。

【注意】:

a) 如果细胞加载培养基是以碳酸氢钠为缓冲体系,那么加载需要含5% CO2的环境内进行,以防止因CO2损失引起的培养基碱化。

b) 如果细胞加载培养基含血清,那需适当提高AM探针工作浓度,以补偿因AM探针与血清蛋白结合引起的损失。

c) 某些情况下,对分子量接近或超过1000的AM探针,需用不含AM探针的细胞加载缓冲液进一步孵育20-60min,以保证细胞内酯酶能充分降解AM基团。

d) 探针的加载时间和浓度因具体的细胞类型而有差异,请根据具体的细胞类型来优化。

e) 对每一种探针有必要通过校准(calibration)来得到实际解离常数(Kd)。物理条件如温度,pH,离子强度或溶液粘度,以及探针与细胞组成成分如蛋白质的相互作用,都会影响Kd值。实际情况细胞内的Kd比体外溶液通常要高。因此,细胞水平研究有必要进行校准确认实际Kd值。

f) 对于ENG-2,虽然最大激发波长在525nm,但其极强的荧光亮度使其能够用标准的488nm滤片来激发,与Fluo系列的可见光钙离子指示探针检测手段一致。值得注意的是,488nm激发下得到的荧光强度约为最大激发波长下的40%。

注意事项

1) ENG-2 AM易受潮,粉末需干燥保存;

2) ENG-2 AM储存液可用DMSO溶解,不推荐长期保存,甚至是-20ºC。建议条件允许,最好现配现用。

3) 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

Enhanced NaTrium Green-2 AM (Replacement of Asante NaTrium Green-2 AM) 钠离子指示探针


描述

Enhanced NaTrium Green-2 AM 钠离子指示探针

产品标签

Enhanced NaTrium Green-2 AM;Asante NaTrium Green-2 AM(ANG-2 AM);PBFI AM 钾离子指示剂;SBFI AM 钠离子指示剂/探针;Valinomycin 缬氨霉素;

产品信息

产品名称 产品编号 规格 规格
Enhanced NaTrium Green-2 AM 钠离子指示探针 MX4514-100UG 2×50μg 2258
Enhanced NaTrium Green-2 AM 钠离子指示探针 MX4514-250UG 5×50μg 5958
Enhanced NaTrium Green-2 AM 钠离子指示探针 MX4514-500UG 10×50μg 9158

产品描述

Enhanced NaTrium Green-2 AM (ENG-2 AM)是Asante NaTrium Green-2 AM(ANG-2 AM)的替代物,是一种具细胞膜渗透性的新型钠离子(Na+)荧光探针。一旦进入细胞后,经非特异性酯酶水解生成水溶性形式的探针。不同于传统Na+探针SBFI,ENG-2是一种可见光光谱范围的探针,激发波长范围是488-525nm,发射波长是545nm。

ENG-2 AM具有容易加载、缓慢泄露、良好光稳定性和宽动力学范围等理想特征,也正好弥补传统Na+荧光探针SBFI AM(#MX4509)的缺陷。

产品特性

1) 同义名:ENG-2 AM

2) 分子式:C53H60Cl2N2O18

3) 分子量:1084 g/mol

4) 纯度:≥90%(HPLC)

5) 最大激发波长:525 ± 3 nm(Methanol)

6) 最大发射波长:545 ± 3 nm(Methanol)

7) 解离常数(Kd):20mM(in the absence of K+)

8) 动力学范围(Fmax/Fmin):29

9) 溶解性:DMSO

10)化学结构式:

保存与运输方法

保存:-20ºC避光干燥保存,至少1年有效。

运输:冰袋运输。

常用操作流程(AM荧光探针)

以下步骤仅做参考,具体请根据实际情况或参考文献资料来调整。

1.1 使用无水DMSO溶解ENG-2 AM(Mw:1084 g/mol)配制成1-5mM储存液,比如往50μg ENG-2 AM冻干粉内加入23μl DMSO,充分溶解后配制成2mM储存液。-20ºC分装干燥冻存,避免反复冻融。

1.2 通常在含适当浓度AM探针的无血清培养基中实现探针加载。建议正式实验前向加载培养基内加入Pluronic F-127以促进AM探针的分散。可用DMSO配置20% Pluronic F-127储存液或其他浓度,只需在正式实验前将其与ENG-2 AM储存液混合,然后加入加载培养基,保证其终浓度<0.1%(w/v)。

1.3 室温或37℃孵育细胞(可能在室温的探针加载质量会高些),孵育浓度通常为1-10µM,孵育时间通常为30-60min,具体的请根据实际情况或参考文献资料。

1.4 【可选】对于大分子量AM探针(分子量≥1000g/mol),孵育结束,加入不含AM探针的细胞加载培养基额外孵育20-60min,以确保细胞将AM基团完全去酯化。

1.5 用不含血清和探针的培养基清洗细胞至少一次,以降低细胞外背景荧光。

1.6 最后用合适的仪器来检测荧光信号。最大激发波长525nm,最大发射波长545nm。

【注意】:

a) 如果细胞加载培养基是以碳酸氢钠为缓冲体系,那么加载需要含5% CO2的环境内进行,以防止因CO2损失引起的培养基碱化。

b) 如果细胞加载培养基含血清,那需适当提高AM探针工作浓度,以补偿因AM探针与血清蛋白结合引起的损失。

c) 某些情况下,对分子量接近或超过1000的AM探针,需用不含AM探针的细胞加载缓冲液进一步孵育20-60min,以保证细胞内酯酶能充分降解AM基团。

d) 探针的加载时间和浓度因具体的细胞类型而有差异,请根据具体的细胞类型来优化。

e) 对每一种探针有必要通过校准(calibration)来得到实际解离常数(Kd)。物理条件如温度,pH,离子强度或溶液粘度,以及探针与细胞组成成分如蛋白质的相互作用,都会影响Kd值。实际情况细胞内的Kd比体外溶液通常要高。因此,细胞水平研究有必要进行校准确认实际Kd值。

f) 对于ENG-2,虽然最大激发波长在525nm,但其极强的荧光亮度使其能够用标准的488nm滤片来激发,与Fluo系列的可见光钙离子指示探针检测手段一致。值得注意的是,488nm激发下得到的荧光强度约为最大激发波长下的40%。

注意事项

1) ENG-2 AM易受潮,粉末需干燥保存;

2) ENG-2 AM储存液可用DMSO溶解,不推荐长期保存,甚至是-20ºC。建议条件允许,最好现配现用。

3) 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

Asante Potassium Green-2 AM 钾离子指示探针


描述

Enhanced Potassium Green-2 AM 钾离子指示探针

产品标签

Enhanced Potassium Green-2 AM(EPG-2 AM) K+indicator;PBFI AM 钾离子指示剂/探,SBFI AM 钠离子指示剂/探针,Asante Potassium Green-2,Valinomycin缬氨霉素

产品信息

产品名称 产品编号 规格 规格
Enhanced Potassium Green-2 AM 钾离子指示探针 MX4513-100UG 2×50μg 1988
Enhanced Potassium Green-2 AM 钾离子指示探针 MX4513-250UG 5×50μg 4988
Enhanced Potassium Green-2 AM 钾离子指示探针 MX4513-500UG 10×50μg 7658

产品描述

Enhanced Potassium Green-2 AM(EPG-2 AM)是Asante Potassium Green-2 AM(APG-2 AM)的替代物,

是一种具细胞膜渗透性的新型K+荧光探针,具有容易加载、缓慢泄露、良好光稳定性和宽动力学范围等理想特征,正好弥补传统K+荧光探针PBFI AM(#MX4510)的缺陷。EPG-2 AM被可见光激发,最佳激发波长为517nm,但也能被传统波长488nm激发检测。虽然不是比率型探针,但其宽广的动力学范围使其甚至能检测到变化很小的K+浓度。EPG-2 AM用近红外波长的双光子激发下信号很强且抗荧光淬灭很好。也适用于共聚焦显微镜、流式细胞仪和高通量筛选分析。

保存与运输方法

保存:-20ºC避光干燥保存,1年有效。

运输:冰袋运输。

产品特性

1) 分子式:C55H64Cl2N2O19

2) 分子量:1128.02 g/mol

3) 纯度:> 80%(HPLC)

4) 最大激发波长:526 ± 3 nm(in methanol)

5) 最大发射波长:546 ± 3 nm(in methanol)

6) 解离常数(Kd):18mM

7) 动力学范围(Fmax/Fmin):12

8) 溶解性:溶于DMSO

9) 化学结构式:

常用操作流程(AM荧光探针)

以下步骤仅做参考,具体请根据实际情况或参考文献资料来调整。

1.1 使用无水DMSO溶解EPG-2 AM(Mw:1128.02 g/mol)配制成1-5mM储存液,比如往50μg EPG-2 AM冻干粉内加入22μl DMSO,充分溶解后配制成2mM储存液。-20ºC分装干燥冻存,避免反复冻融。

1.2 通常在含适当浓度AM探针的无血清培养基中实现探针加载。建议正式实验前向加载培养基内加入Pluronic F-127以促进AM探针的分散。可用DMSO配置20% Pluronic F-127储存液或其他浓度,只需在正式实验前将其与EPG-2 AM储存液混合,然后加入加载培养基,保证其终浓度<0.1%(w/v)。

1.3 室温或37℃孵育细胞(可能在室温的探针加载质量会高些),孵育浓度通常为1-10µM,孵育时间通常为30-60min,具体的请根据实际情况或参考文献资料。

1.4 【可选】对于大分子量AM探针(分子量≥1000g/mol),孵育结束,加入不含AM探针的细胞加载培养基额外孵育20-60min,以确保细胞将AM基团完全去酯化。

1.5 用不含血清和探针的培养基清洗细胞至少一次,以降低细胞外背景荧光。

1.6 最后用合适的仪器来检测荧光信号。检测用最大激发波长517nm,最大发射波长540nm。

【注意】:

a) 如果细胞加载培养基是以碳酸氢钠为缓冲体系,那么加载需要含5% CO2的环境内进行,以防止因CO2损失引起的培养基碱化。

b) 如果细胞加载培养基含血清,那需适当提高AM探针工作浓度,以补偿因AM探针与血清蛋白结合引起的损失。

c) 某些情况下,对分子量接近或超过1000的AM探针,需用不含AM探针的细胞加载缓冲液进一步孵育20-60min,以保证细胞内酯酶能充分降解AM基团。

d) 探针的加载时间和浓度因具体的细胞类型而有差异,请根据具体的细胞类型来优化。

e) 对每一种探针有必要通过校准(calibration)来得到实际解离常数(Kd)。物理条件如温度,pH,离子强度或溶液粘度,以及探针与细胞组成成分如蛋白质的相互作用,都会影响Kd值。实际情况细胞内的Kd比体外溶液通常要高。因此,细胞水平研究有必要进行校准确认实际Kd值。

f) 对于EPG-2,虽然最大激发波长在517m,但其极强的荧光亮度使其能够用标准的488nm滤片来激发,与Fluo系列的可见光钙离子指示探针检测手段一致。值得注意的是,488nm激发下得到的荧光强度约为最大激发波长下的40%。

注意事项

1) EPG-2 AM易受潮,粉末需干燥保存;粉末需用无水DMSO溶解,配制储存液(如10mM),置于-20℃干燥避光保存,小量分装避免反复冻融,至少3个月稳定。

2) 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

Asante Potassium Green-2 AM 钾离子指示探针


描述

Enhanced Potassium Green-2 AM 钾离子指示探针

产品标签

Enhanced Potassium Green-2 AM(EPG-2 AM) K+indicator;PBFI AM 钾离子指示剂/探,SBFI AM 钠离子指示剂/探针,Asante Potassium Green-2,Valinomycin缬氨霉素

产品信息

产品名称 产品编号 规格 规格
Enhanced Potassium Green-2 AM 钾离子指示探针 MX4513-100UG 2×50μg 1988
Enhanced Potassium Green-2 AM 钾离子指示探针 MX4513-250UG 5×50μg 4988
Enhanced Potassium Green-2 AM 钾离子指示探针 MX4513-500UG 10×50μg 7658

产品描述

Enhanced Potassium Green-2 AM(EPG-2 AM)是Asante Potassium Green-2 AM(APG-2 AM)的替代物,

是一种具细胞膜渗透性的新型K+荧光探针,具有容易加载、缓慢泄露、良好光稳定性和宽动力学范围等理想特征,正好弥补传统K+荧光探针PBFI AM(#MX4510)的缺陷。EPG-2 AM被可见光激发,最佳激发波长为517nm,但也能被传统波长488nm激发检测。虽然不是比率型探针,但其宽广的动力学范围使其甚至能检测到变化很小的K+浓度。EPG-2 AM用近红外波长的双光子激发下信号很强且抗荧光淬灭很好。也适用于共聚焦显微镜、流式细胞仪和高通量筛选分析。

保存与运输方法

保存:-20ºC避光干燥保存,1年有效。

运输:冰袋运输。

产品特性

1) 分子式:C55H64Cl2N2O19

2) 分子量:1128.02 g/mol

3) 纯度:> 80%(HPLC)

4) 最大激发波长:526 ± 3 nm(in methanol)

5) 最大发射波长:546 ± 3 nm(in methanol)

6) 解离常数(Kd):18mM

7) 动力学范围(Fmax/Fmin):12

8) 溶解性:溶于DMSO

9) 化学结构式:

常用操作流程(AM荧光探针)

以下步骤仅做参考,具体请根据实际情况或参考文献资料来调整。

1.1 使用无水DMSO溶解EPG-2 AM(Mw:1128.02 g/mol)配制成1-5mM储存液,比如往50μg EPG-2 AM冻干粉内加入22μl DMSO,充分溶解后配制成2mM储存液。-20ºC分装干燥冻存,避免反复冻融。

1.2 通常在含适当浓度AM探针的无血清培养基中实现探针加载。建议正式实验前向加载培养基内加入Pluronic F-127以促进AM探针的分散。可用DMSO配置20% Pluronic F-127储存液或其他浓度,只需在正式实验前将其与EPG-2 AM储存液混合,然后加入加载培养基,保证其终浓度<0.1%(w/v)。

1.3 室温或37℃孵育细胞(可能在室温的探针加载质量会高些),孵育浓度通常为1-10µM,孵育时间通常为30-60min,具体的请根据实际情况或参考文献资料。

1.4 【可选】对于大分子量AM探针(分子量≥1000g/mol),孵育结束,加入不含AM探针的细胞加载培养基额外孵育20-60min,以确保细胞将AM基团完全去酯化。

1.5 用不含血清和探针的培养基清洗细胞至少一次,以降低细胞外背景荧光。

1.6 最后用合适的仪器来检测荧光信号。检测用最大激发波长517nm,最大发射波长540nm。

【注意】:

a) 如果细胞加载培养基是以碳酸氢钠为缓冲体系,那么加载需要含5% CO2的环境内进行,以防止因CO2损失引起的培养基碱化。

b) 如果细胞加载培养基含血清,那需适当提高AM探针工作浓度,以补偿因AM探针与血清蛋白结合引起的损失。

c) 某些情况下,对分子量接近或超过1000的AM探针,需用不含AM探针的细胞加载缓冲液进一步孵育20-60min,以保证细胞内酯酶能充分降解AM基团。

d) 探针的加载时间和浓度因具体的细胞类型而有差异,请根据具体的细胞类型来优化。

e) 对每一种探针有必要通过校准(calibration)来得到实际解离常数(Kd)。物理条件如温度,pH,离子强度或溶液粘度,以及探针与细胞组成成分如蛋白质的相互作用,都会影响Kd值。实际情况细胞内的Kd比体外溶液通常要高。因此,细胞水平研究有必要进行校准确认实际Kd值。

f) 对于EPG-2,虽然最大激发波长在517m,但其极强的荧光亮度使其能够用标准的488nm滤片来激发,与Fluo系列的可见光钙离子指示探针检测手段一致。值得注意的是,488nm激发下得到的荧光强度约为最大激发波长下的40%。

注意事项

1) EPG-2 AM易受潮,粉末需干燥保存;粉末需用无水DMSO溶解,配制储存液(如10mM),置于-20℃干燥避光保存,小量分装避免反复冻融,至少3个月稳定。

2) 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

CoroNa Green, Cell Impermeant   钠离子指示探针


描述

CoroNa Green, Cell Impermeant

钠离子指示探针

产品关键词

CoroNa Green, AM;Sodium indicator 钠离子指示剂(荧光探针);SBFI AM;Asante NaTrium Green-2 AM;APG-2 AM;PBFI AM;Fluo-4am;钾离子荧光探针;Gramicidin短杆菌肽;

产品信息

产品名称

产品编号 规格 价格(元)
CoroNa Green钠离子指示探针 MX4586-1MG 1mg

15983

产品描述

CoroNa Green是一种钠离子指示探针,一旦与Na+结合,绿色荧光明显增强,但波长发生很少变化(见附图I)。与其他Na+指示探针SBFI(MX4533、MX4509)和ENG-2(MX4514、MX4534)一样,当存在生理浓度的其他单价阳离子时,CoroNa Green允许从时间和空间上来选择性分辨Na+浓度的变化。分子量更小的CoroNa Green(586),相比较于其他大分子量的Na+指示探针ENG-2(1087),在同等条件下,其膜渗透性的衍生物能更好的加载进入胞内。CoroNa Green能响应更广泛的Na+浓度范围(见附图II),Kd~80mM。不同于传统的SBFI,与Na+结合后的CoroNa Green的最大吸收和发射波长分别是492nm和516nm,因此,兼容于任何能检测荧光素(Fluorescein)的仪器。CoroNa Green不具有膜渗透性,可通过显微注射、膜片移液器或胞饮细胞上样剂进行上样,测定胞内的钠离子水平[1-2]。

产品特征

1) 纯度:≥90%(HPLC)

2) 外观:固体

3) 最大吸收/发射波长:492/516nm

4) 解离常数(Kd):~80mM

5) 溶解性:DMSO

保存与运输方法

保存:≤-20ºC避光干燥保存,至少1年有效。 

运输:冰袋运输。

注意事项

1) 整个染色过程中需注意避光。

2) 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

参考文献

[1] Naumann G, Lippmann K, Eilers J. Photophysical properties of Na+ -indicator dyes suitable for quantitative two-photon fluorescence-lifetime measurements. J Microsc. 2018 Nov;272(2):136-144. doi: 10.1111/jmi.12754. Epub 2018 Sep 7. PMID: 30191999.

[2] Sediqi H, Wray A, Jones C, Jones M (2018) Application of Spectral Phasor analysis to sodium microenvironments in myoblast progenitor cells. PLoS ONE 13(10): e0204611. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0204611

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货号 名称 规格
MX4509-100UG SBFI AM ( Na+ Indicator)钠离子指示探针 2×50μg
MX4514-100UG Enhanced NaTrium Green-2 AM钠离子指示探针 2×50μg
MX4533-1MG-B SBFI Potassium Salt ( Na+ Indicator)钠离子指示探针 20×50μg
MX4534-500UG-B Enhanced NaTRIUM Green-2 TMA+ Salt钠离子指示探针 10×50μg
MX4585-100UG CoroNa Green, AM, Cell Permeant钠离子指示探针 2×50μg
MX4586-1MG CoroNa Green, Cell Impermeant  钠离子指示探针 1mg
MS0078-50MG Gramicidin短杆菌肽 50mg
MS0079-1MG Gramicidin A短杆菌肽A 1mg

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CoroNa Green, AM, Cell Permeant 钠离子指示探针


描述

CoroNa Green, AM, Cell Permeant 钠离子指示探针

 

产品关键词

CoroNa Green, AM;Sodium indicator 钠离子指示剂(荧光探针);SBFI AM;Asante NaTrium Green-2 AM;APG-2 AM;PBFI AM;Fluo-4 am;钾离子荧光探针;Gramicidin 短杆菌肽;CCCP;

产品信息

产品名称

产品编号 规格            价格(元)

CoroNa Green, AM, Cell Permeant钠离子指示探针

MX4585-100UG 2×50μg 2143
CoroNa Green, AM, Cell Permeant钠离子指示探针 MX4585-250UG 5×50μg

5143

CoroNa Green, AM, Cell Permeant钠离子指示探针 MX4585-500UG 10×50μg

9143

产品描述

CoroNa Green, AM是一种具细胞膜渗透性的钠离子(Na+)指示探针。一旦进入细胞后,经非特异性酯酶水解生成不具有膜渗透性的CoroNa Green,一旦与Na+结合,绿色荧光明显增强,但波长发生很少变化(见附图I)。与其他Na+指示探针SBFI(MX4533、MX4509)和ENG-2(MX4514、MX4534)一样,当存在生理浓度的其他单价阳离子时,CoroNa Green允许从时间和空间上来选择性分辨Na+浓度的变化。分子量更小的CoroNa Green(586),相比较于其他大分子量的Na+指示探针ENG-2(1087),在同等条件下,其膜渗透性的衍生物能更好的加载进入胞内。CoroNa Green能响应更广泛的Na+浓度范围(见附图II),Kd~80mM。不同于传统的SBFI,与Na+结合后的CoroNa Green的最大吸收和发射波长分别是492nm和516nm,因此,兼容于任何能检测荧光素(Fluorescein)的仪器,包括:流式细胞仪、荧光显微镜、共聚焦显微镜、荧光酶标仪和荧光光度计。CoroNa Green是一款有价值的工具,用来分析细胞外和细胞内的钠离子水平[1-2]。

产品特征

1)   同义名:CoroNa Green acetoxymethyl (AM) ester

2)   分子量:657.62 g/mol

3)   纯度:≥90%(HPLC)

4)   外观:固体

5)   最大吸收/发射波长:492/516nm

6)   解离常数(Kd):~80mM

7)   溶解性:DMSO

保存与运输方法

保存:≤-20ºC避光干燥保存,至少1年有效。

运输:冰袋运输。

注意事项

1)   整个染色过程中需注意避光。

2)   为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法(活细胞成像分析)

以下步骤仅做参考,具体请根据实际情况或参考文献资料来调整。

1.1   储存液准备:于实验前,将低温保存的CoroNa Green AM从冰箱取出平衡至室温(至少20min),低速离心后再开盖,直接往管内加入高质量的无水DMSO配制成1-10mM储存液,比如:往50μg CoroNa Green, AM固体(Mw:657.62)加入15μl DMSO,充分溶解后配制成5mM储存液。≤-20ºC分装干燥冻存,避免反复冻融。

1.2   工作液准备:于实验前,用生理缓冲液比如:HHBS(MS3510-500ML)、HBSS(MS3505-500ML)或无血清培养基稀释一定量的储存液,使其工作浓度在0.5-10µM,初次使用务必摸索几个梯度浓度的探针,以确认适宜的工作浓度。工作液必须现配现用。

1.3   染色步骤:

1.4   荧光检测

应用示例(来自文献,仅做参考)

1)   文献来源:Fujishima A, Takahashi K, Goto M, Hirakawa T, Iwasawa T, Togashi K, Maeda E, Shirasawa H, Miura H, Sato W, Kumazawa Y, Terada Y. Live visualisation of electrolytes during mouse embryonic development using electrolyte indicators. PLoS One. 2021 Jan 29;16(1):e0246337. doi: 10.1371/journal.pone.0246337. PMID: 33513193; PMCID: PMC7845971.

实验目的(Na+imaging):胚胎(从桑椹胚至孵化期)用0.5µM CoroNa Green AM加载,37℃孵育30min。之后,用LSM780共聚焦显微镜来测定胞内和/或囊胚腔的荧光强度。激发和发射波长分别是488nm和510-520nm,相同实验至少重复3次。

2)   文献来源:Fu T, Xu C, Li H, Wu X, Tang M, Xiao B, Lv R, Zhang Z, Gao X, Liu B and Yang C (2022) Salinity Tolerance in a Synthetic Allotetraploid Wheat (SlSlAA) Is Similar to Its Higher Tolerant Parent Aegilops longissima (SlSl) and Linked to Flavonoids Metabolism. Front. Plant Sci. 13:835498. doi: 10.3389/fpls.2022.835498

实验目的(Na+imaging):小麦种子水培10天后,暴露于150mM NaCl溶液7天。之后加入CoroNa Green AM来观察小麦根部细胞内的Na+分布。小麦根部用含探针的染色工作液(20 μM CoroNa Green AM, 5 mM KCl, 5 mM Ca2+-MES, pH 6.1)避光孵育1h。用蒸馏水清洗染色部位。使用共聚焦成像仪(激发:488nm,发射:505-525nm)来观察根部的分生组织区和成熟区。

Fig. Effects of salinity stress on Na+ and K+ homeostasis in a synthetic tetraploid wheat line and its diploid parents. (A,B) Na+ distribution in root cell indicated by CoroNa Green AM under salinity stress. (C–F) Na+ and K+ concentration. The seedlings were exposed to 150 mM NaCl for 7 days. The values are the mean (± SD) of three biological replicates. Different letters above the bar showed significant differences among wheat lines and treatments according to t-test (P < 0.05).

3)   文献来源:Bortner, C.D., Oakley, R.H. & Cidlowski, J.A. Overcoming apoptotic resistance afforded by Bcl-2 in lymphoid tumor cells: a critical role for dexamethasone. Cell Death Discov. 8, 494 (2022).

实验目的(Determination of intracellular potassium, sodium, and calcium):于检测前1h,取 2 ul 的2.5 mM CoroNa Green-AM (Na+) or PBFI-AM (K+) 储存液加入1ml细胞溶液中,使其终浓度为5 uM。于检测前30min,取4 ul的1mM Fluo-4加入1ml细胞溶液中。于37 °C, 7% CO2 中孵育细胞. 于流式分析前再加入PI使其工作浓度为10 ug/ml. 用装有FACSDiVa 软件的LSRII流式细胞仪进行数据分析。仅将碘化丙啶染色阴性的细胞进行相对的胞内离子浓度分析。

参考文献

[1] Naumann G, Lippmann K, Eilers J. Photophysical properties of Na+ -indicator dyes suitable for quantitative two-photon fluorescence-lifetime measurements. J Microsc. 2018 Nov;272(2):136-144. doi: 10.1111/jmi.12754. Epub 2018 Sep 7. PMID: 30191999.

[2] Sediqi H, Wray A, Jones C, Jones M (2018) Application of Spectral Phasor analysis to sodium microenvironments in myoblast progenitor cells. PLoS ONE 13(10): e0204611. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0204611

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货号 名称 规格
MX4509-100UG SBFI AM ( Na+Indicator)钠离子指示探针 2×50μg
MX4514-100UG Enhanced NaTrium Green-2 AM钠离子指示探针 2×50μg
MX4533-1MG-B SBFI Potassium Salt ( Na+Indicator)钠离子指示探针 20×50μg
MX4534-500UG-B Enhanced NaTRIUM Green-2 TMA+ Salt钠离子指示探针 10×50μg
MX4585-100UG CoroNa Green, AM, Cell Permeant钠离子指示探针 2×50μg
MX4586-1MG CoroNa Green, Cell Impermeant 钠离子指示探针 1mg
MS0078-50MG Gramicidin短杆菌肽 50mg
MS0079-1MG Gramicidin A短杆菌肽A 1mg

 

CoroNa Green, AM, Cell Permeant 钠离子指示探针


描述

CoroNa Green, AM, Cell Permeant 钠离子指示探针

 

产品关键词

CoroNa Green, AM;Sodium indicator 钠离子指示剂(荧光探针);SBFI AM;Asante NaTrium Green-2 AM;APG-2 AM;PBFI AM;Fluo-4 am;钾离子荧光探针;Gramicidin 短杆菌肽;CCCP;

产品信息

产品名称

产品编号 规格            价格(元)

CoroNa Green, AM, Cell Permeant钠离子指示探针

MX4585-100UG 2×50μg 2143
CoroNa Green, AM, Cell Permeant钠离子指示探针 MX4585-250UG 5×50μg

5143

CoroNa Green, AM, Cell Permeant钠离子指示探针 MX4585-500UG 10×50μg

9143

产品描述

CoroNa Green, AM是一种具细胞膜渗透性的钠离子(Na+)指示探针。一旦进入细胞后,经非特异性酯酶水解生成不具有膜渗透性的CoroNa Green,一旦与Na+结合,绿色荧光明显增强,但波长发生很少变化(见附图I)。与其他Na+指示探针SBFI(MX4533、MX4509)和ENG-2(MX4514、MX4534)一样,当存在生理浓度的其他单价阳离子时,CoroNa Green允许从时间和空间上来选择性分辨Na+浓度的变化。分子量更小的CoroNa Green(586),相比较于其他大分子量的Na+指示探针ENG-2(1087),在同等条件下,其膜渗透性的衍生物能更好的加载进入胞内。CoroNa Green能响应更广泛的Na+浓度范围(见附图II),Kd~80mM。不同于传统的SBFI,与Na+结合后的CoroNa Green的最大吸收和发射波长分别是492nm和516nm,因此,兼容于任何能检测荧光素(Fluorescein)的仪器,包括:流式细胞仪、荧光显微镜、共聚焦显微镜、荧光酶标仪和荧光光度计。CoroNa Green是一款有价值的工具,用来分析细胞外和细胞内的钠离子水平[1-2]。

产品特征

1)   同义名:CoroNa Green acetoxymethyl (AM) ester

2)   分子量:657.62 g/mol

3)   纯度:≥90%(HPLC)

4)   外观:固体

5)   最大吸收/发射波长:492/516nm

6)   解离常数(Kd):~80mM

7)   溶解性:DMSO

保存与运输方法

保存:≤-20ºC避光干燥保存,至少1年有效。

运输:冰袋运输。

注意事项

1)   整个染色过程中需注意避光。

2)   为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法(活细胞成像分析)

以下步骤仅做参考,具体请根据实际情况或参考文献资料来调整。

1.1   储存液准备:于实验前,将低温保存的CoroNa Green AM从冰箱取出平衡至室温(至少20min),低速离心后再开盖,直接往管内加入高质量的无水DMSO配制成1-10mM储存液,比如:往50μg CoroNa Green, AM固体(Mw:657.62)加入15μl DMSO,充分溶解后配制成5mM储存液。≤-20ºC分装干燥冻存,避免反复冻融。

1.2   工作液准备:于实验前,用生理缓冲液比如:HHBS(MS3510-500ML)、HBSS(MS3505-500ML)或无血清培养基稀释一定量的储存液,使其工作浓度在0.5-10µM,初次使用务必摸索几个梯度浓度的探针,以确认适宜的工作浓度。工作液必须现配现用。

1.3   染色步骤:

1.4   荧光检测

应用示例(来自文献,仅做参考)

1)   文献来源:Fujishima A, Takahashi K, Goto M, Hirakawa T, Iwasawa T, Togashi K, Maeda E, Shirasawa H, Miura H, Sato W, Kumazawa Y, Terada Y. Live visualisation of electrolytes during mouse embryonic development using electrolyte indicators. PLoS One. 2021 Jan 29;16(1):e0246337. doi: 10.1371/journal.pone.0246337. PMID: 33513193; PMCID: PMC7845971.

实验目的(Na+imaging):胚胎(从桑椹胚至孵化期)用0.5µM CoroNa Green AM加载,37℃孵育30min。之后,用LSM780共聚焦显微镜来测定胞内和/或囊胚腔的荧光强度。激发和发射波长分别是488nm和510-520nm,相同实验至少重复3次。

2)   文献来源:Fu T, Xu C, Li H, Wu X, Tang M, Xiao B, Lv R, Zhang Z, Gao X, Liu B and Yang C (2022) Salinity Tolerance in a Synthetic Allotetraploid Wheat (SlSlAA) Is Similar to Its Higher Tolerant Parent Aegilops longissima (SlSl) and Linked to Flavonoids Metabolism. Front. Plant Sci. 13:835498. doi: 10.3389/fpls.2022.835498

实验目的(Na+imaging):小麦种子水培10天后,暴露于150mM NaCl溶液7天。之后加入CoroNa Green AM来观察小麦根部细胞内的Na+分布。小麦根部用含探针的染色工作液(20 μM CoroNa Green AM, 5 mM KCl, 5 mM Ca2+-MES, pH 6.1)避光孵育1h。用蒸馏水清洗染色部位。使用共聚焦成像仪(激发:488nm,发射:505-525nm)来观察根部的分生组织区和成熟区。

Fig. Effects of salinity stress on Na+ and K+ homeostasis in a synthetic tetraploid wheat line and its diploid parents. (A,B) Na+ distribution in root cell indicated by CoroNa Green AM under salinity stress. (C–F) Na+ and K+ concentration. The seedlings were exposed to 150 mM NaCl for 7 days. The values are the mean (± SD) of three biological replicates. Different letters above the bar showed significant differences among wheat lines and treatments according to t-test (P < 0.05).

3)   文献来源:Bortner, C.D., Oakley, R.H. & Cidlowski, J.A. Overcoming apoptotic resistance afforded by Bcl-2 in lymphoid tumor cells: a critical role for dexamethasone. Cell Death Discov. 8, 494 (2022).

实验目的(Determination of intracellular potassium, sodium, and calcium):于检测前1h,取 2 ul 的2.5 mM CoroNa Green-AM (Na+) or PBFI-AM (K+) 储存液加入1ml细胞溶液中,使其终浓度为5 uM。于检测前30min,取4 ul的1mM Fluo-4加入1ml细胞溶液中。于37 °C, 7% CO2 中孵育细胞. 于流式分析前再加入PI使其工作浓度为10 ug/ml. 用装有FACSDiVa 软件的LSRII流式细胞仪进行数据分析。仅将碘化丙啶染色阴性的细胞进行相对的胞内离子浓度分析。

参考文献

[1] Naumann G, Lippmann K, Eilers J. Photophysical properties of Na+ -indicator dyes suitable for quantitative two-photon fluorescence-lifetime measurements. J Microsc. 2018 Nov;272(2):136-144. doi: 10.1111/jmi.12754. Epub 2018 Sep 7. PMID: 30191999.

[2] Sediqi H, Wray A, Jones C, Jones M (2018) Application of Spectral Phasor analysis to sodium microenvironments in myoblast progenitor cells. PLoS ONE 13(10): e0204611. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0204611

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MX4509-100UG SBFI AM ( Na+Indicator)钠离子指示探针 2×50μg
MX4514-100UG Enhanced NaTrium Green-2 AM钠离子指示探针 2×50μg
MX4533-1MG-B SBFI Potassium Salt ( Na+Indicator)钠离子指示探针 20×50μg
MX4534-500UG-B Enhanced NaTRIUM Green-2 TMA+ Salt钠离子指示探针 10×50μg
MX4585-100UG CoroNa Green, AM, Cell Permeant钠离子指示探针 2×50μg
MX4586-1MG CoroNa Green, Cell Impermeant 钠离子指示探针 1mg
MS0078-50MG Gramicidin短杆菌肽 50mg
MS0079-1MG Gramicidin A短杆菌肽A 1mg

 

CoroNa Green, AM, Cell Permeant 钠离子指示探针


描述

CoroNa Green, AM, Cell Permeant 钠离子指示探针

 

产品关键词

CoroNa Green, AM;Sodium indicator 钠离子指示剂(荧光探针);SBFI AM;Asante NaTrium Green-2 AM;APG-2 AM;PBFI AM;Fluo-4 am;钾离子荧光探针;Gramicidin 短杆菌肽;CCCP;

产品信息

产品名称

产品编号 规格            价格(元)

CoroNa Green, AM, Cell Permeant钠离子指示探针

MX4585-100UG 2×50μg 2143
CoroNa Green, AM, Cell Permeant钠离子指示探针 MX4585-250UG 5×50μg

5143

CoroNa Green, AM, Cell Permeant钠离子指示探针 MX4585-500UG 10×50μg

9143

产品描述

CoroNa Green, AM是一种具细胞膜渗透性的钠离子(Na+)指示探针。一旦进入细胞后,经非特异性酯酶水解生成不具有膜渗透性的CoroNa Green,一旦与Na+结合,绿色荧光明显增强,但波长发生很少变化(见附图I)。与其他Na+指示探针SBFI(MX4533、MX4509)和ENG-2(MX4514、MX4534)一样,当存在生理浓度的其他单价阳离子时,CoroNa Green允许从时间和空间上来选择性分辨Na+浓度的变化。分子量更小的CoroNa Green(586),相比较于其他大分子量的Na+指示探针ENG-2(1087),在同等条件下,其膜渗透性的衍生物能更好的加载进入胞内。CoroNa Green能响应更广泛的Na+浓度范围(见附图II),Kd~80mM。不同于传统的SBFI,与Na+结合后的CoroNa Green的最大吸收和发射波长分别是492nm和516nm,因此,兼容于任何能检测荧光素(Fluorescein)的仪器,包括:流式细胞仪、荧光显微镜、共聚焦显微镜、荧光酶标仪和荧光光度计。CoroNa Green是一款有价值的工具,用来分析细胞外和细胞内的钠离子水平[1-2]。

产品特征

1)   同义名:CoroNa Green acetoxymethyl (AM) ester

2)   分子量:657.62 g/mol

3)   纯度:≥90%(HPLC)

4)   外观:固体

5)   最大吸收/发射波长:492/516nm

6)   解离常数(Kd):~80mM

7)   溶解性:DMSO

保存与运输方法

保存:≤-20ºC避光干燥保存,至少1年有效。

运输:冰袋运输。

注意事项

1)   整个染色过程中需注意避光。

2)   为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法(活细胞成像分析)

以下步骤仅做参考,具体请根据实际情况或参考文献资料来调整。

1.1   储存液准备:于实验前,将低温保存的CoroNa Green AM从冰箱取出平衡至室温(至少20min),低速离心后再开盖,直接往管内加入高质量的无水DMSO配制成1-10mM储存液,比如:往50μg CoroNa Green, AM固体(Mw:657.62)加入15μl DMSO,充分溶解后配制成5mM储存液。≤-20ºC分装干燥冻存,避免反复冻融。

1.2   工作液准备:于实验前,用生理缓冲液比如:HHBS(MS3510-500ML)、HBSS(MS3505-500ML)或无血清培养基稀释一定量的储存液,使其工作浓度在0.5-10µM,初次使用务必摸索几个梯度浓度的探针,以确认适宜的工作浓度。工作液必须现配现用。

1.3   染色步骤:

1.4   荧光检测

应用示例(来自文献,仅做参考)

1)   文献来源:Fujishima A, Takahashi K, Goto M, Hirakawa T, Iwasawa T, Togashi K, Maeda E, Shirasawa H, Miura H, Sato W, Kumazawa Y, Terada Y. Live visualisation of electrolytes during mouse embryonic development using electrolyte indicators. PLoS One. 2021 Jan 29;16(1):e0246337. doi: 10.1371/journal.pone.0246337. PMID: 33513193; PMCID: PMC7845971.

实验目的(Na+imaging):胚胎(从桑椹胚至孵化期)用0.5µM CoroNa Green AM加载,37℃孵育30min。之后,用LSM780共聚焦显微镜来测定胞内和/或囊胚腔的荧光强度。激发和发射波长分别是488nm和510-520nm,相同实验至少重复3次。

2)   文献来源:Fu T, Xu C, Li H, Wu X, Tang M, Xiao B, Lv R, Zhang Z, Gao X, Liu B and Yang C (2022) Salinity Tolerance in a Synthetic Allotetraploid Wheat (SlSlAA) Is Similar to Its Higher Tolerant Parent Aegilops longissima (SlSl) and Linked to Flavonoids Metabolism. Front. Plant Sci. 13:835498. doi: 10.3389/fpls.2022.835498

实验目的(Na+imaging):小麦种子水培10天后,暴露于150mM NaCl溶液7天。之后加入CoroNa Green AM来观察小麦根部细胞内的Na+分布。小麦根部用含探针的染色工作液(20 μM CoroNa Green AM, 5 mM KCl, 5 mM Ca2+-MES, pH 6.1)避光孵育1h。用蒸馏水清洗染色部位。使用共聚焦成像仪(激发:488nm,发射:505-525nm)来观察根部的分生组织区和成熟区。

Fig. Effects of salinity stress on Na+ and K+ homeostasis in a synthetic tetraploid wheat line and its diploid parents. (A,B) Na+ distribution in root cell indicated by CoroNa Green AM under salinity stress. (C–F) Na+ and K+ concentration. The seedlings were exposed to 150 mM NaCl for 7 days. The values are the mean (± SD) of three biological replicates. Different letters above the bar showed significant differences among wheat lines and treatments according to t-test (P < 0.05).

3)   文献来源:Bortner, C.D., Oakley, R.H. & Cidlowski, J.A. Overcoming apoptotic resistance afforded by Bcl-2 in lymphoid tumor cells: a critical role for dexamethasone. Cell Death Discov. 8, 494 (2022).

实验目的(Determination of intracellular potassium, sodium, and calcium):于检测前1h,取 2 ul 的2.5 mM CoroNa Green-AM (Na+) or PBFI-AM (K+) 储存液加入1ml细胞溶液中,使其终浓度为5 uM。于检测前30min,取4 ul的1mM Fluo-4加入1ml细胞溶液中。于37 °C, 7% CO2 中孵育细胞. 于流式分析前再加入PI使其工作浓度为10 ug/ml. 用装有FACSDiVa 软件的LSRII流式细胞仪进行数据分析。仅将碘化丙啶染色阴性的细胞进行相对的胞内离子浓度分析。

参考文献

[1] Naumann G, Lippmann K, Eilers J. Photophysical properties of Na+ -indicator dyes suitable for quantitative two-photon fluorescence-lifetime measurements. J Microsc. 2018 Nov;272(2):136-144. doi: 10.1111/jmi.12754. Epub 2018 Sep 7. PMID: 30191999.

[2] Sediqi H, Wray A, Jones C, Jones M (2018) Application of Spectral Phasor analysis to sodium microenvironments in myoblast progenitor cells. PLoS ONE 13(10): e0204611. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0204611

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MX4533-1MG-B SBFI Potassium Salt ( Na+Indicator)钠离子指示探针 20×50μg
MX4534-500UG-B Enhanced NaTRIUM Green-2 TMA+ Salt钠离子指示探针 10×50μg
MX4585-100UG CoroNa Green, AM, Cell Permeant钠离子指示探针 2×50μg
MX4586-1MG CoroNa Green, Cell Impermeant 钠离子指示探针 1mg
MS0078-50MG Gramicidin短杆菌肽 50mg
MS0079-1MG Gramicidin A短杆菌肽A 1mg

 

SYBR Green I Nucleic Acid Stain (PCR Grade, 10,000×)


描述

SYBR Green I Nucleic Acid Stain (PCR Grade, 10,000×)

 

产品标签

SYBR Green I;Evagreen;GelRed;DuRed;GelGreen;溴化乙锭(EB);qPCR;

产品信息

产品名称

产品编号 规格 价格(元) 促销价(元)

SYBR Green I Nucleic Acid Stain (PCR Grade, 10,000×)  

MF0759-100UL 100µl 780

700

SYBR Green I Nucleic Acid Stain (PCR Grade, 10,000×)   MF0759-500UL 500µl 3100

2790

SYBR Green I Nucleic Acid Stain (PCR Grade, 10,000×)   MF0759-1ML 1ml 5400

4860

产品描述

SYBR Green I Nucleic Acid Stain是一种直接与dsDNA结合的荧光染料,是荧光定量PCR最常用的DNA结合染料。定量PCR中,SYBR Green I与dsDNA非特异性结合发出荧光,通过检测反应体系中的荧光强度,进而达到检测PCR产物扩增量的目的。游离状态下SYBR Green I发出微弱荧光,一旦与dsDNA结合后,荧光强度增加1000倍,一个反应发出的荧光信号与dsDNA量成比例,且随扩增产物的增加而增加。因此,通过检测PCR反应液内的荧光信号强度,实现对目的基因的准确定量,同时还能测定扩增DNA片段的熔解温度。本品为10,000×的SYBR Green I核酸染料,达PCR级别。

保存与运输方法

保存:-20°C避光干燥保存,1年有效。

运输:冰袋运输。

注意事项

1) 独立实验室进行的艾姆斯试验表明SYBR Green I的致突变性明显比EB要低很多。但是,必须警告用户注意,目前尚无关于SYBR Green I对人体的致突变性或毒性的数据。由于该染料与核酸结合,应当被看作潜在诱变剂,使用时要小心谨慎。在处理DMSO储存液时应特别小心,因DMSO能促进有机分子进入组织。染料的废弃处理应当符合当地的规定。

2) 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法

配置PCR反应混合液时,将10,000× SYBR Green I加入到PCR反应体系使其终浓度为0.5×(在0.2×~1×之间调整)。以上操作建议冰上进行。

【注意】:1)反应液配制方法和PCR扩增条件请参照DNA聚合酶使用说明;2)荧光定量扩增仪的使用方法,请参照各仪器说明。

【影响荧光定量PCR的一些小细节】:

1) SYBR Green I使用浓度对荧光定量PCR的影响

合适的SYBR Green I使用浓度是保证荧光定量PCR实验成功非常关键的因素。如果SYBR Green I浓度过低使得荧光信号的变化降低,这意味着低拷贝样品可能无法检出;而浓度过高,可能会抑制PCR反应,降低PCR反应效率。因此,初次使用SYBR Green I需根据实际情况优化工作浓度,反应终浓度可在0.2×~1×之间调整。

2) 镁离子浓度对荧光定量PCR的影响

提高镁离子浓度能降低SYBR Green I对PCR反应的抑制作用。建议用SYBR Green I进行荧光定量PCR反应时,镁离子浓度比不含SYBR Green I的普通PCR体系高出0.5~3mM。 

相关产品

产品编号 产品名称 规格
MF0751-100UL SYBR Green I Nucleic Acid Gel Stain (10,000× in DMSO)核酸凝胶染料 100µl
MF0752-100UL SYBR Green II RNA Gel Stain (10,000× in DMSO) RNA凝胶染料 100µl
MF0753-1ML GoldView Nucleic Acid Gel Stain (10,000×)核酸染料(10,000×) 1ml
MF0759-100UL SYBR Green I Nucleic Acid Stain (PCR Grade, 10,000×)   100µl
MF0761-500UL SYBR Safe DNA Gel Stain  (10,000× in DMSO)  核酸凝胶染料 500µl

 

 

 

SYBR Green I Nucleic Acid Gel Stain (10,000× in DMSO) 核酸凝胶染料

GoldView;Acridine Orange 吖啶橙;GelRed;DuRed;GelGreen;溴化乙锭(EB);SYBR Green I;

产品名称                                                                  

产品编号             规格                  

SYBR Green I (10,000× in DMSO) 核酸凝胶染料

MF0751-100UL 100µl
SYBR Green I (10,000× in DMSO )核酸凝胶染料 MF0751-500UL 500µl
SYBR Green I (10,000× in DMSO )核酸凝胶染料 MF0751-1ML 1ml

产品描述

SYBR Green I,是目前检测琼脂糖凝胶和聚丙烯酰胺凝胶中dsDNA最灵敏的染料之一,最低检出限为20pg DNA(254nm紫外发射光),60pg DNA(300nm透射光);还可用于寡核苷酸检测(1-2ng,300nm透射光),比溴化乙锭EB的灵敏度高50-100倍。

SYBR Green I检测凝胶中核酸的非凡灵敏度归因其独特的染料特性:①SYBR Green I具有超强的DNA结合力,与DNA结合后荧光显著增强—至少比EB高出一个数量级;②DNA/SYBR Green I复合物的荧光量子产率(~0.8)比DNA/EB(~0.15)高5倍多;③SYBR Green I在琼脂糖和聚丙烯酰胺凝胶中迅速渗透,在缺乏DNA时背景荧光可忽略,让染色步骤快速,且成像之前无需脱色。

SYBR Green I因与DNA结合能力强,既能在电泳前(预染),也能在电泳后(后染)对DNA进行染色。还可对毛细管电泳分离的DNA进行染色。SYBR Green I与DNA的结合不会抑制多种常见的限制性内切酶活性,包括Hind III和EcoR I,可直接进行消化或连接。用于琼脂糖凝胶电泳检测DNA后,还可直接将DNA转移到膜上,进行后续的核酸印迹杂交分析。

本品为溶于DMSO的10,000×的SYBR Green I核酸染料,电泳级。

保存与运输方法

保存:-20°C避光干燥保存,1年有效。

运输:冰袋运输。

注意事项

1. 独立实验室进行的艾姆斯试验表明SYBR Green I的致突变性明显比EB要低很多。但是,必须警告用户注意,目前尚无关于SYBR Green I对人体的致突变性或毒性的数据。由于该染料与核酸结合,应当被看作潜在诱变剂,使用时要小心谨慎。在处理DMSO储存液时应特别小心,因DMSO能促进有机分子进入组织。染料的废弃处理应当符合当地的规定。

2. SYBR Green I对dsDNA的检测灵敏度非常高(20pg,254nm紫外发射光),但对ssDNA和RNA的灵敏度稍低(100-300pg,254nm紫外发射光),使之成为复杂溶液中检测dsDNA的理想选择。尤其是复杂溶液中的ssDNA和RNA可能会掩盖结果的时候,如凋亡特有的连续梯度条带apoptosis ladders。

3. SYBR Green I的最大激发波长为497nm,但在~290nm和~380nm处有二级激发峰。与DNA结合的SYBR Green I的荧光发射集中在520nm。这些光谱特性让SYBR Green I适用于多种凝胶检测仪,从紫外反射(上紫外)和透射仪(下紫外)到氩离子激光器和水银灯激发的凝胶扫描仪。

4. 预染色方法,电泳时间不要超过2h,否则SYBR Green I会从DNA上脱离出来,产生弥散状条带。

5. 紫外照射透视下,与dsDNA结合的SYBR Green I呈绿色荧光。如果胶中含ssDNA,则荧光颜色为橘黄色而不是绿色。

6. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法

一、使用前准备工作

使用前将本品取出并回温至室温,使DMSO彻底解冻、溶液均一。于离心机上短暂离心确保所有溶液到管底。第一次使用时可将本品分装成多个小份后冻存,小份染料能更快溶解。

二、染色方法

1.电泳后的DNA染色(后染)

1)在琼脂糖或非变性聚丙烯酰胺凝胶上进行电泳。

【注】:TBE和TAE缓冲液均适合于SYBR Green I染色。

2)用TE、TAE或TBE缓冲液将SYBR Green I储存液进行1:10,000倍稀释。

【注】:

①SYBR Green I染色对pH敏感,为获得最佳的灵敏度,应确认在染色温度下染色液的pH值在7.5- 8.0之间(pH8.0更佳)。

②用水配制的染色液不如用缓冲液配制的稳定,为确保最大的染色灵敏度,必须在24h内使用。此外,用pH低于7.5或高于8.0的缓冲液配制的染色液也不太稳定,染色效率有所下降。

3)染液要充分覆盖凝胶,室温轻摇孵育10-40min。

【注】:

①推荐用塑料而不是玻璃容器来储存染色液,因染料会吸附到玻璃表面。

②染色过程避光进行,建议在容器上加盖铝箔或置于暗处。

③凝胶厚度及琼脂糖或聚丙烯酰胺的比例不同,染色时间将有所不同。

④无需脱色。

⑤染色液可置暗处(最好是冷藏)放置1周或更久,重复使用最多4次。

2.电泳前的DNA染色(预染)

1)配制成SYBR Green I预制凝胶

临灌胶前将SYBR Green I储存液按照1:10,000倍稀释到凝胶溶液中,预制成含有SYBR Green I染料的琼脂糖或非变性聚丙烯酰胺凝胶。电泳结束后即可在适合的凝胶成像仪下检测。【预染推荐用此法】

预制的SYBR Green I凝胶的DNA检测下限(大约为30-40pg/条带),可能略高于电泳后染色(<20pg/条带)。此外,在SYBR Green I凝胶中的DNA片段迁移率明显比无染料凝胶中的相同片段慢。

2)作为DNA模板预染标记

一般而言,DNA在电泳前与染料工作液(1:10,000倍稀释)至少孵育15min。

三、凝胶成像(紫外或蓝光透射仪或紫外顶置光源直射)

可在紫外或蓝光光源下轻松观察到用SYBR Green I染色的DNA。

四、从dsDNA中去除SYBR Green I

使用简单的乙醇沉淀能从dsDNA中去除99%以上的SYBR Green I染料。

将SYBR Green I染色的DNA移至100mM NaCl,加入2.5倍体积的无水或95%的乙醇。在冰上孵育约20min,4℃离心至少10min。去除乙醇,并用70%乙醇洗涤沉淀。让乙醇挥发,并用TE重悬双链DNA。

Enhanced NaTRIUM Green-2 TMA+ Salt 钠离子指示探针


描述

Enhanced NaTRIUM Green-2 TMA+ Salt

钠离子指示探针

 

产品标签

Enhanced NaTrium Green-2;Asante NaTrium Green-2 AM(ANG-2 AM);PBFI AM 钾离子指示剂;SBFI AM 钠离子指示剂/探针;Valinomycin 缬氨霉素;

产品信息

产品名称

产品编号 规格 规格

Enhanced NaTRIUM Green-2 TMA+ Salt

MX4534-500UG-A 500μg

6268

Enhanced NaTRIUM Green-2 TMA+ Salt MX4534-500UG-B 10×50μg

6268

产品描述

Enhanced NaTrium Green-2 (ENG-2)是Asante NaTrium Green-2(ANG-2)的替代物,是一种黄-绿色荧光的钠离子(Na+)指示探针,与传统Na+探针-SBFI相比,具更好的细胞加载性和更强的荧光亮度。光谱特征(Ex:525nm,Em:545nm)和宽动力学范围等特征,使其成为一款优秀的Na+荧光探针,适用于钠离子通道和转运体的高通量筛选分析。兼容于装有通用荧光素、GFP或YFP(更理想)滤片的荧光显微镜、共聚焦显微镜,也兼容于荧光酶标仪、荧光光度计等。

Enhanced NaTRIUM Green-2 TMA+ Salt (ENG-2 TMA+ salt)是盐形式的ENG-2,不具膜渗透性,适用于不含脂膜系统或脂质体的Na+测定,以及通过电转、微注射或其它物理方法加载进入细胞后的胞内Na+测定。

产品特性

1) 同义名:ENG-2 tetramethylammonium salt; ENG-2 TMA+ salt; ANG-2 TMA+ salt; Asante Natrium Green-2 TMA+ salt; ING-2 TMA+ salt;

2) 分子式:C56H81Cl2N5O12

3) 分子量:1087g/mol

4) 纯度:≥90%(HPLC)

5) 最大激发波长:525 ± 3 nm

6) 最大发射波长:545 ± 3 nm

7) 解离常数(Kd):20mM(in the absence of K+

8) 溶解性:H2O

9) 外观:固体

10) 化学结构式:

保存与运输方法

保存:-20ºC避光干燥保存,至少1年有效。 

运输:冰袋运输。

注意事项

1) ENG-2 TMA+ salt易溶于水,可用水或生理缓冲液溶解配制成母液,小量分装置于-20℃干燥避光保存,避免反复冻融。

2) 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

附图I. ENG-2 TMA+ salt钠离子选择性

图. ENG-2 TMAsalt响应钠离子的发射光谱特征:A)K+-free Tris buffer;B)含K+的Tris buffer(离子总浓度=150mM)。结果表明,ENG-2具有明显更高的Na+选择性。

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货号 名称 规格
MX4510-100UG PBFI AM ( K+ Indicator) 钾离子指示探针 2×50μg
MX4513-100UG Enhanced Potassium Green-2 AM 钾离子指示探针 2×50μg
MX4514-100UG Enhanced NaTrium Green-2 AM钠离子指示探针 2×50μg
MX4521-100UG Enhanced Potassium Green-4 AM 钾离子指示探针 2×50μg
MX4522-250UG-B Enhanced Potassium Green-4 TMA+ Salt 钾离子指示探针 5×50μg
MX4520-1MG-B PBFI TMA+ Salt ( K+ Indicator) 钾离子指示探针 20×50μg
MX4509-100UG SBFI AM ( Na+ Indicator) 钠离子指示探针 2×50μg
MX4533-1MG-B SBFI Potassium Salt ( Na+ Indicator) 钠离子指示探针 20×50μg
MX4534-500UG-B Enhanced NaTRIUM Green-2 TMA+ Salt 钠离子指示探针 10×50μg

 

 

Enhanced NaTRIUM Green-2 TMA+ Salt 钠离子指示探针


描述

Enhanced NaTRIUM Green-2 TMA+ Salt

钠离子指示探针

 

产品标签

Enhanced NaTrium Green-2;Asante NaTrium Green-2 AM(ANG-2 AM);PBFI AM 钾离子指示剂;SBFI AM 钠离子指示剂/探针;Valinomycin 缬氨霉素;

产品信息

产品名称

产品编号 规格 规格

Enhanced NaTRIUM Green-2 TMA+ Salt

MX4534-500UG-A 500μg

6268

Enhanced NaTRIUM Green-2 TMA+ Salt MX4534-500UG-B 10×50μg

6268

产品描述

Enhanced NaTrium Green-2 (ENG-2)是Asante NaTrium Green-2(ANG-2)的替代物,是一种黄-绿色荧光的钠离子(Na+)指示探针,与传统Na+探针-SBFI相比,具更好的细胞加载性和更强的荧光亮度。光谱特征(Ex:525nm,Em:545nm)和宽动力学范围等特征,使其成为一款优秀的Na+荧光探针,适用于钠离子通道和转运体的高通量筛选分析。兼容于装有通用荧光素、GFP或YFP(更理想)滤片的荧光显微镜、共聚焦显微镜,也兼容于荧光酶标仪、荧光光度计等。

Enhanced NaTRIUM Green-2 TMA+ Salt (ENG-2 TMA+ salt)是盐形式的ENG-2,不具膜渗透性,适用于不含脂膜系统或脂质体的Na+测定,以及通过电转、微注射或其它物理方法加载进入细胞后的胞内Na+测定。

产品特性

1) 同义名:ENG-2 tetramethylammonium salt; ENG-2 TMA+ salt; ANG-2 TMA+ salt; Asante Natrium Green-2 TMA+ salt; ING-2 TMA+ salt;

2) 分子式:C56H81Cl2N5O12

3) 分子量:1087g/mol

4) 纯度:≥90%(HPLC)

5) 最大激发波长:525 ± 3 nm

6) 最大发射波长:545 ± 3 nm

7) 解离常数(Kd):20mM(in the absence of K+

8) 溶解性:H2O

9) 外观:固体

10) 化学结构式:

保存与运输方法

保存:-20ºC避光干燥保存,至少1年有效。 

运输:冰袋运输。

注意事项

1) ENG-2 TMA+ salt易溶于水,可用水或生理缓冲液溶解配制成母液,小量分装置于-20℃干燥避光保存,避免反复冻融。

2) 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

附图I. ENG-2 TMA+ salt钠离子选择性

图. ENG-2 TMAsalt响应钠离子的发射光谱特征:A)K+-free Tris buffer;B)含K+的Tris buffer(离子总浓度=150mM)。结果表明,ENG-2具有明显更高的Na+选择性。

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货号 名称 规格
MX4510-100UG PBFI AM ( K+ Indicator) 钾离子指示探针 2×50μg
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Indocyanine Green (ICG) 吲哚氰绿


描述

Indocyanine Green (ICG) 吲哚氰绿

产品标签

吲哚氰绿(Indocyanine Green,ICG;心脏绿(Cardiogreen);cyanine dye 花青染料;plasma protein 血浆蛋白;CAS:3599-32-4;

产品信息

产品名称

产品编号                 CAS NO.           规格                价格(元)     

Indocyanine Green (ICG) 吲哚菁绿      

MX4452-25MG 3599-32-4 25mg 275
Indocyanine Green (ICG) 吲哚菁绿 MX4452-100MG 3599-32-4 100mg

680

Indocyanine Green (ICG) 吲哚菁绿 MX4452-1G 3599-32-4 1g

3280


产品描述

吲哚氰绿(Indocyanine Green,ICG,CAS NO. 3599-32-4),也称为心脏绿(Cardiogreen),是一种带负电荷的聚甲炔染料,能够与蛋白结合形成非共价的荧光复合物,这一“假荧光(pseudofluorogenic)”特性被用在通过毛细管电泳半导体激光诱导的荧光检测法进行蛋白测定。ICG能用于几种标记蛋白的分离,包括人血清白蛋白、核酸酶A、转铁蛋白和细胞色素C。

静脉注射后,ICG与胞浆蛋白主要是白蛋白紧密结合,快速被肝脏吸收,之后无变化的分泌进入胆汁。正因如此,ICG能作为指示染料来评估心输出量和肝脏功能。ICG介导的光疗法诱导细胞质囊化、内质网、高尔基体和核周池变化,以及核染色质浓缩。ICG(1-50μM)染色后的人皮肤细胞可通过激光激发后辐射检测,并用MTT评估毒性。ICG还能与脉冲激光二极管一起使用用于组织的生物材料焊接和伤口缝合。

产品特性

1)  CAS NO:3599-32-4

2)  同义名:4,5-benzoindotricarbocyanine, Indocyanine Green, Foxgreen, IC Green, ICG

3)  分子式:C43H47N2O6S2•Na

4)  分子量:774.96 g/mol

5)  纯度:≥95%

6)  外观:暗緑青色或暗棕红色粉末

7)  溶解性:溶于水(1mg/ml),DMSO,甲醇,乙醇(微溶)

8)  化学结构式:

保存与运输方法

保存:室温保存,2年有效。

运输:室温运输。

注意事项

1)ICG需先溶于水(1mg/ml),再用生理盐水稀释以满足需要等渗溶液的生理应用。

2)ICG水溶液不稳定。0.5% ICG的pH约为6,约8h稳定。建议溶液单日现配。

3)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

 

 

 

Methyl Green 甲基绿(乙基绿、 CI 42590)


描述

Methyl Green 甲基绿

产品标签

Methyl Green甲基绿;DNA染料;Bismarck Brown俾斯麦棕;Pyronine G派诺宁G;CAS:7114-03-6;

产品信息

产品名称

产品编号            CAS NO.     规格   价格(元)  
Methyl Green 甲基绿 MS4035-5G 7114-03-6 5g

360

Methyl Green 甲基绿 MS4035-25G 7114-03-6 25g

1550

Methyl Green 甲基绿 MS4035-100G 7114-03-6 100g

4980

产品描述

甲基绿(Methyl Green)是碱性双阳离子染料,由三苯基甲烷构成。是DNA染料,选择性结合天然DNA的AT-富集区。在电泳用的酸性缓冲液中用作示踪染料。也在甲基绿-派洛宁方法中用于组织切片的DNA和RNA染色。甲基绿有助于区分细菌。也能用作一种组织染料,对组织细胞核和线粒体染色。经常与俾斯麦棕(Bismarck Brown)联合使用。

产品特性

同义名:C.I.42590; Ethyl Green; 4-[[4-(Dimethylamino) phenyl][4-(dimethyliminio) cyclohexa-2,5-dien-1- ylidene]methyl]- N-ethyl-N,N- bromide chloride, compound with zinc chloride;甲基绿氯化锌盐;乙基绿;
CAS NO:7114-03-6

EC NO:230-415-4
颜色索引:42590
级别:生物染色级(BR)
分子式:C27H35BrClN3· xZnCl2

分子量:653.24

外观:红色至极暗红色和红棕色和棕红色粉末

溶解性:溶于水、微溶于乙醇、不溶于乙醚

消光系数:E1%= 800-1100 (water)Lit.

熔点:>300°C (lit.)
λmax:629nm; 423nm (2nd);

保存与运输方法

保存:室温干燥保存,至少2年有效。

运输:室温运输。

注意事项

1)本品对光敏感,保存和使用过程中注意避光。

2)本品用作复染剂的常用工作浓度为0.1-0.5%。

3)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

 

甲基绿复染步骤(仅作参考)

1)0.1M醋酸钠缓冲液(pH 4.2)

称取1.36g醋酸钠三水合物(Mw 136.1)用100ml蒸馏水充分溶解,用浓冰醋酸调整pH到4.2.

2)甲基绿溶液(0.5%)

称取0.5g甲基绿用100ml 0.1M醋酸钠缓冲液(pH 4.2)充分溶解混匀。

3)染色步骤

IHC后切片入水;室温用甲基绿染色液染5min;用蒸馏水清洗(切片看起来蓝色);用95%乙醇快速脱水(10滴,切片变绿);用无水乙醇处理2次(每次10滴);用二甲苯或二甲苯替代物透明处理;用树脂封片剂封片;

相关产品

货号 名称 规格                
MS4035-1G Methyl Green 甲基绿 1g
MS4071-1G Pyronin Y 派洛宁Y(吡啰红G) 1g
MS4072-1G Pyronin B 派洛宁B(吡罗红B) 1g
MS4005-25G          Crystal Violet, 90% 结晶紫 25g
MS4006-100ML Crystal Violet Stain Solution 结晶紫染色液 100ml
MM1052-50ML Methyl Green-Pyronin Staining Solution 甲基绿-派洛宁染色液    50ml

 

 

Methyl Green 甲基绿(乙基绿、 CI 42590)


描述

Methyl Green 甲基绿

产品标签

Methyl Green甲基绿;DNA染料;Bismarck Brown俾斯麦棕;Pyronine G派诺宁G;CAS:7114-03-6;

产品信息

产品名称

产品编号            CAS NO.     规格   价格(元)  
Methyl Green 甲基绿 MS4035-5G 7114-03-6 5g

360

Methyl Green 甲基绿 MS4035-25G 7114-03-6 25g

1550

Methyl Green 甲基绿 MS4035-100G 7114-03-6 100g

4980

产品描述

甲基绿(Methyl Green)是碱性双阳离子染料,由三苯基甲烷构成。是DNA染料,选择性结合天然DNA的AT-富集区。在电泳用的酸性缓冲液中用作示踪染料。也在甲基绿-派洛宁方法中用于组织切片的DNA和RNA染色。甲基绿有助于区分细菌。也能用作一种组织染料,对组织细胞核和线粒体染色。经常与俾斯麦棕(Bismarck Brown)联合使用。

产品特性

同义名:C.I.42590; Ethyl Green; 4-[[4-(Dimethylamino) phenyl][4-(dimethyliminio) cyclohexa-2,5-dien-1- ylidene]methyl]- N-ethyl-N,N- bromide chloride, compound with zinc chloride;甲基绿氯化锌盐;乙基绿;
CAS NO:7114-03-6

EC NO:230-415-4
颜色索引:42590
级别:生物染色级(BR)
分子式:C27H35BrClN3· xZnCl2

分子量:653.24

外观:红色至极暗红色和红棕色和棕红色粉末

溶解性:溶于水、微溶于乙醇、不溶于乙醚

消光系数:E1%= 800-1100 (water)Lit.

熔点:>300°C (lit.)
λmax:629nm; 423nm (2nd);

保存与运输方法

保存:室温干燥保存,至少2年有效。

运输:室温运输。

注意事项

1)本品对光敏感,保存和使用过程中注意避光。

2)本品用作复染剂的常用工作浓度为0.1-0.5%。

3)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

 

甲基绿复染步骤(仅作参考)

1)0.1M醋酸钠缓冲液(pH 4.2)

称取1.36g醋酸钠三水合物(Mw 136.1)用100ml蒸馏水充分溶解,用浓冰醋酸调整pH到4.2.

2)甲基绿溶液(0.5%)

称取0.5g甲基绿用100ml 0.1M醋酸钠缓冲液(pH 4.2)充分溶解混匀。

3)染色步骤

IHC后切片入水;室温用甲基绿染色液染5min;用蒸馏水清洗(切片看起来蓝色);用95%乙醇快速脱水(10滴,切片变绿);用无水乙醇处理2次(每次10滴);用二甲苯或二甲苯替代物透明处理;用树脂封片剂封片;

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货号 名称 规格                
MS4035-1G Methyl Green 甲基绿 1g
MS4071-1G Pyronin Y 派洛宁Y(吡啰红G) 1g
MS4072-1G Pyronin B 派洛宁B(吡罗红B) 1g
MS4005-25G          Crystal Violet, 90% 结晶紫 25g
MS4006-100ML Crystal Violet Stain Solution 结晶紫染色液 100ml
MM1052-50ML Methyl Green-Pyronin Staining Solution 甲基绿-派洛宁染色液    50ml

 

 

Cell-Tracker Green CMFDA 活细胞示踪探针(绿色)


描述

Cell-Tracker Green CMFDA 活细胞示踪探针(绿色)

 

产品关键词:

Cell-Tracker Green CMFDA;Cell-Tracker Red CMTPX;Cell movement 细胞运动;Cell location 细胞定位;Cell Tracker dye 细胞示踪探针;CAS NO:136832-63-8;

 

订购信息:

产品名称

产品编号 规格  

价格(元)

Cell-Tracker Green CMFDA 活细胞示踪探针(绿色)   

MX4107-100UG 2×50μg

995

Cell-Tracker Green CMFDA 活细胞示踪探针(绿色) MX4107-250UG 5×50μg

2455

Cell-Tracker Green CMFDA 活细胞示踪探针(绿色) MX4107-1000UG 1mg

3380

产品描述

Cell-Tracker荧光探针是用来监测细胞运动、定位、增殖、迁移、趋化和侵袭的优秀工具。

Cell-Tracker Green CMFDA,英文全名:5-chloromethylfluorescein diacetate,能自由穿透细胞膜进入细胞,在胞内转化生成不具细胞膜渗透性的反应产物。该产物几次传代都能良好的保留在活细胞。在细胞群内,染料只会转移到子代细胞,不会转移到邻近细胞。

Cell-Tracker Red CMTPX特地设计使其至少72h(典型有3~6代)能展示荧光,此染料表现出理想的示踪特征:稳定、工作浓度下无毒性、良好保留在细胞,且在生理pH下呈明亮荧光。另外,Cell-Tracker Red CMTPX的激发和发射光谱(492/517nm)与红色荧光蛋白RFP很好的分开,适用于多重标记(见附表1. Cell-Tracker荧光探针的光谱特征)。

 

产品特性

1)  CAS NO.:136832-63-8

2)  同义名:CellTracker™ Green CMFDA; Spiro(isobenzofuran-1(3H),9′-(9H)xanthen)-3-one, 3′,6′-bis(acetyloxy)-5-(chloromethyl)-;

3)  分子式:C25H17ClO7

4)  分子量:464.86 g/mol

5)  外观:无色固体

6)  溶解性:溶于DMSO

7)  化学结构式:

 

保存与运输方法

保存:-20℃避光干燥保存,至少2年有效。

运输:冰袋运输。

 

注意事项

  1. 荧光染料都存在淬灭的问题,保存和操作过程中注意避光。
  2. 避免使用含氨基和巯基的缓冲液。
  3. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

应用示例

文献1)Nasir NAM et al.Fluorescent cell tracer dye permits real‐time assessment of re‐epithelialization in a serum‐free ex vivo human skin wound assay. Wound Repair Regen. 2019 Jan;27(1):126-133.

Method (Cell tracker dye uptake within human ex vivo wounds in situ):Four microliters of 25 μM CMFDA (or CMTPX) was added to the wound surface for 30 minutes, then washed dropwise with phosphate buffered saline.For cell viability studies, 1 μg/mL of propidium iodide (PI) was cotreated alongside CMFDA. Planimetric imaging was conducted using a Leica M205 FA upright Stereomicroscope using a 5x/0.50 pLANapo LWD objective at the equivalent of 64x magnification and captured using a DFC 565FX camera through LAS AF v3.1.0.8587 software. Specific band‐pass filter set for green fluorescent protein was used.

Fig. Epithelial repair of human ex vivo wounds progresses via an extending shield mechanism. Human ex vivo wounds were cultured in the presence of the fluorescent dyes. CMFDA and PI cotreatment at time of injury (D0) identifies live (CMFDA; green) and dead (PI; red) cells around the injury site (A), and these wounds traced to day 1 indicate PI‐labeled cells are no longer present (B).

文献2)Frazer J. Bye et al. Development of bilayer and trilayer nanofibrous/microfibrous scaffolds for regenerative medicine.Biomater. Sci., 2013, 1, 942-951.

Method (Cell migration into scaffolds at 7 days):CellTracker red (CMTPX) or green (CMFDA) were applied to the hESMPs and fibroblasts respectively, prior to seeding. Cells were washed 3 times with 5 ml PBS then 10 ml of serum free cell-appropriate medium containing CellTracker (10 mM) was added and the cells incubated for 45 minutes at 37 °C. After incubation, the cells were washed 3 times with 5 ml PBS following which they were seeded onto scaffolds.Scaffolds could then be imaged in an Axon ImageExpress microscope (Molecular Devices, Sunnyvale, USA) at 570 nm λex–620 nm λem (CellTracker red) and 480 nm λex–533 nm λem (CellTracker green).

Fig. Co-culture of CellTracker™ labelled fibroblasts (green) and hESMPs (red) on bilayer membranes of either PHBV–PLA or PHBV–PCL. hESMPs were seeded on day 1 (red) onto the PHBV face of each bilayer. Fibroblasts were seeded on either the PLA or PCL face of the bilayer on day 2 (green) and then cultured for a further 7 days. In A fibroblasts (green) are confined to the PLA face after 7 days with no sign of hESMPs (red). On the opposite face (B, PHBV), hESMPs (red) are also present once again with no fibroblasts.

使用方法

1.细胞准备

在合适的培养基内培养细胞。贴壁细胞可以在含盖玻片的培养皿内爬片生长,装入足量的生长培养基。

2.操作步骤

以下描述的是将染料加到培养细胞以及在荧光显微镜下成像的步骤。各种因素,比如将染料加载到细胞或组织,可能都需根据特定的细胞类型对某些条件做出修改。

探针的最佳染色浓度需根据用途来调整。建议刚开展实验需要测定至少1个10倍范围内的浓度。一般来说,长期染色(≥3天)或使用快速分裂的细胞需5-25µM的染料。对于短期实验(比如活力测定),使用低浓度染料(0.5-5µM)。为了维持正常的细胞形态和降低潜在的伪影,尽可能使用低浓度的染料。

2.1制备Cell-Tracker染色工作液

①开瓶前将产品从冰箱取出,放到室温使其回温至少20min。

②用高质量的无水DMSO溶解粉末使其浓度为10mM。例如,对1mgCell-Tracker Green CMFDA(Mw:464.86g/mol)冻干粉,加入215µlDMSO充分溶解,即得到10mM母液。

③ 用无血清培养基稀释母液到0.5-25µM的工作浓度。预热染色工作液到37℃。

2.2悬浮细胞染色步骤

① 离心收集细胞,吸掉上清液。用预热的Cell-Tracker染色工作液轻轻的重悬细胞。

② 在适合特定细胞类型的生长条件下孵育15-45min。

③ 离心细胞,吸掉Cell-Tracker染色工作液。

④ 加入选择的培养基,将标记好的细胞分配到载玻片或到选择的培养器皿内。

⑤根据附表1选择合适激发和发射波长的滤片来进行成像检测。

2.3贴壁细胞染色步骤

① 吸走培养基。

② 轻轻加入预热的Cell-Tracker染色工作液。

③ 在适合特定细胞类型的生长条件下孵育15-45min。

④吸掉Cell-Tracker染色工作液。

⑤ 加入选择的培养基。

⑥根据表1选择合适激发和发射波长的滤片来进行成像检测。

 3.荧光显微镜观察

Cell-Tracker荧光探针可用带标准光学和图像增强的各种落射荧光光学显微镜检测。根据染料选择合适的滤片。见附表1 Cell-Tracker荧光探针的光谱特征。

 

相关产品

货号 名称 规格                    
MX4107-1MG               Cell-Tracker Green CMFDA 活细胞示踪探针(绿色) 1mg
MX4108-100UG Cell-Tracker Orange CMTMR 活细胞示踪探针(橙色)        2×50μg
MX4109-100UG Cell-Tracker Red CMTPX 活细胞示踪探针(红色) 2×50μg
MX4101-1G Fluorescein diacetate (FDA) 二乙酸荧光素 1g
MX4205-10MG Propidium Iodide 碘化丙啶(粉末) 10mg

 

 

Cell-Tracker Green CMFDA 活细胞示踪探针(绿色)


描述

Cell-Tracker Green CMFDA 活细胞示踪探针(绿色)

 

产品关键词:

Cell-Tracker Green CMFDA;Cell-Tracker Red CMTPX;Cell movement 细胞运动;Cell location 细胞定位;Cell Tracker dye 细胞示踪探针;CAS NO:136832-63-8;

 

订购信息:

产品名称

产品编号 规格  

价格(元)

Cell-Tracker Green CMFDA 活细胞示踪探针(绿色)   

MX4107-100UG 2×50μg

995

Cell-Tracker Green CMFDA 活细胞示踪探针(绿色) MX4107-250UG 5×50μg

2455

Cell-Tracker Green CMFDA 活细胞示踪探针(绿色) MX4107-100UG 1mg

3380

产品描述

Cell-Tracker荧光探针是用来监测细胞运动、定位、增殖、迁移、趋化和侵袭的优秀工具。

Cell-Tracker Green CMFDA,英文全名:5-chloromethylfluorescein diacetate,能自由穿透细胞膜进入细胞,在胞内转化生成不具细胞膜渗透性的反应产物。该产物几次传代都能良好的保留在活细胞。在细胞群内,染料只会转移到子代细胞,不会转移到邻近细胞。

Cell-Tracker Red CMTPX特地设计使其至少72h(典型有3~6代)能展示荧光,此染料表现出理想的示踪特征:稳定、工作浓度下无毒性、良好保留在细胞,且在生理pH下呈明亮荧光。另外,Cell-Tracker Red CMTPX的激发和发射光谱(492/517nm)与红色荧光蛋白RFP很好的分开,适用于多重标记(见附表1. Cell-Tracker荧光探针的光谱特征)。

 

产品特性

1)  CAS NO.:136832-63-8

2)  同义名:CellTracker™ Green CMFDA; Spiro(isobenzofuran-1(3H),9′-(9H)xanthen)-3-one, 3′,6′-bis(acetyloxy)-5-(chloromethyl)-;

3)  分子式:C25H17ClO7

4)  分子量:464.86 g/mol

5)  外观:无色固体

6)  溶解性:溶于DMSO

7)  化学结构式:

 

保存与运输方法

保存:-20℃避光干燥保存,至少2年有效。

运输:冰袋运输。

 

注意事项

  1. 荧光染料都存在淬灭的问题,保存和操作过程中注意避光。
  2. 避免使用含氨基和巯基的缓冲液。
  3. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

应用示例

文献1)Nasir NAM et al.Fluorescent cell tracer dye permits real‐time assessment of re‐epithelialization in a serum‐free ex vivo human skin wound assay. Wound Repair Regen. 2019 Jan;27(1):126-133.

Method (Cell tracker dye uptake within human ex vivo wounds in situ):Four microliters of 25 μM CMFDA (or CMTPX) was added to the wound surface for 30 minutes, then washed dropwise with phosphate buffered saline.For cell viability studies, 1 μg/mL of propidium iodide (PI) was cotreated alongside CMFDA. Planimetric imaging was conducted using a Leica M205 FA upright Stereomicroscope using a 5x/0.50 pLANapo LWD objective at the equivalent of 64x magnification and captured using a DFC 565FX camera through LAS AF v3.1.0.8587 software. Specific band‐pass filter set for green fluorescent protein was used.

Fig. Epithelial repair of human ex vivo wounds progresses via an extending shield mechanism. Human ex vivo wounds were cultured in the presence of the fluorescent dyes. CMFDA and PI cotreatment at time of injury (D0) identifies live (CMFDA; green) and dead (PI; red) cells around the injury site (A), and these wounds traced to day 1 indicate PI‐labeled cells are no longer present (B).

文献2)Frazer J. Bye et al. Development of bilayer and trilayer nanofibrous/microfibrous scaffolds for regenerative medicine.Biomater. Sci., 2013, 1, 942-951.

Method (Cell migration into scaffolds at 7 days):CellTracker red (CMTPX) or green (CMFDA) were applied to the hESMPs and fibroblasts respectively, prior to seeding. Cells were washed 3 times with 5 ml PBS then 10 ml of serum free cell-appropriate medium containing CellTracker (10 mM) was added and the cells incubated for 45 minutes at 37 °C. After incubation, the cells were washed 3 times with 5 ml PBS following which they were seeded onto scaffolds.Scaffolds could then be imaged in an Axon ImageExpress microscope (Molecular Devices, Sunnyvale, USA) at 570 nm λex–620 nm λem (CellTracker red) and 480 nm λex–533 nm λem (CellTracker green).

Fig. Co-culture of CellTracker™ labelled fibroblasts (green) and hESMPs (red) on bilayer membranes of either PHBV–PLA or PHBV–PCL. hESMPs were seeded on day 1 (red) onto the PHBV face of each bilayer. Fibroblasts were seeded on either the PLA or PCL face of the bilayer on day 2 (green) and then cultured for a further 7 days. In A fibroblasts (green) are confined to the PLA face after 7 days with no sign of hESMPs (red). On the opposite face (B, PHBV), hESMPs (red) are also present once again with no fibroblasts.

使用方法

1.细胞准备

在合适的培养基内培养细胞。贴壁细胞可以在含盖玻片的培养皿内爬片生长,装入足量的生长培养基。

2.操作步骤

以下描述的是将染料加到培养细胞以及在荧光显微镜下成像的步骤。各种因素,比如将染料加载到细胞或组织,可能都需根据特定的细胞类型对某些条件做出修改。

探针的最佳染色浓度需根据用途来调整。建议刚开展实验需要测定至少1个10倍范围内的浓度。一般来说,长期染色(≥3天)或使用快速分裂的细胞需5-25µM的染料。对于短期实验(比如活力测定),使用低浓度染料(0.5-5µM)。为了维持正常的细胞形态和降低潜在的伪影,尽可能使用低浓度的染料。

2.1制备Cell-Tracker染色工作液

①开瓶前将产品从冰箱取出,放到室温使其回温至少20min。

②用高质量的无水DMSO溶解粉末使其浓度为10mM。例如,对1mgCell-Tracker Green CMFDA(Mw:464.86g/mol)冻干粉,加入215µlDMSO充分溶解,即得到10mM母液。

③ 用无血清培养基稀释母液到0.5-25µM的工作浓度。预热染色工作液到37℃。

2.2悬浮细胞染色步骤

① 离心收集细胞,吸掉上清液。用预热的Cell-Tracker染色工作液轻轻的重悬细胞。

② 在适合特定细胞类型的生长条件下孵育15-45min。

③ 离心细胞,吸掉Cell-Tracker染色工作液。

④ 加入选择的培养基,将标记好的细胞分配到载玻片或到选择的培养器皿内。

⑤根据附表1选择合适激发和发射波长的滤片来进行成像检测。

2.3贴壁细胞染色步骤

① 吸走培养基。

② 轻轻加入预热的Cell-Tracker染色工作液。

③ 在适合特定细胞类型的生长条件下孵育15-45min。

④吸掉Cell-Tracker染色工作液。

⑤ 加入选择的培养基。

⑥根据表1选择合适激发和发射波长的滤片来进行成像检测。

 3.荧光显微镜观察

Cell-Tracker荧光探针可用带标准光学和图像增强的各种落射荧光光学显微镜检测。根据染料选择合适的滤片。见附表1 Cell-Tracker荧光探针的光谱特征。

 

相关产品

货号 名称 规格                    
MX4107-1MG               Cell-Tracker Green CMFDA 活细胞示踪探针(绿色) 1mg
MX4108-100UG Cell-Tracker Orange CMTMR 活细胞示踪探针(橙色)        2×50μg
MX4109-100UG Cell-Tracker Red CMTPX 活细胞示踪探针(红色) 2×50μg
MX4101-1G Fluorescein diacetate (FDA) 二乙酸荧光素 1g
MX4205-10MG Propidium Iodide 碘化丙啶(粉末) 10mg

 

 

Cell-Tracker Green CMFDA 活细胞示踪探针(绿色)


描述

Cell-Tracker Green CMFDA 活细胞示踪探针(绿色)

 

产品关键词:

Cell-Tracker Green CMFDA;Cell-Tracker Red CMTPX;Cell movement 细胞运动;Cell location 细胞定位;Cell Tracker dye 细胞示踪探针;CAS NO:136832-63-8;

 

订购信息:

产品名称

产品编号 规格  

价格(元)

Cell-Tracker Green CMFDA 活细胞示踪探针(绿色)   

MX4107-100UG 2×50μg

995

Cell-Tracker Green CMFDA 活细胞示踪探针(绿色) MX4107-250UG 5×50μg

2455

Cell-Tracker Green CMFDA 活细胞示踪探针(绿色) MX4107-100UG 1mg

3380

产品描述

Cell-Tracker荧光探针是用来监测细胞运动、定位、增殖、迁移、趋化和侵袭的优秀工具。

Cell-Tracker Green CMFDA,英文全名:5-chloromethylfluorescein diacetate,能自由穿透细胞膜进入细胞,在胞内转化生成不具细胞膜渗透性的反应产物。该产物几次传代都能良好的保留在活细胞。在细胞群内,染料只会转移到子代细胞,不会转移到邻近细胞。

Cell-Tracker Red CMTPX特地设计使其至少72h(典型有3~6代)能展示荧光,此染料表现出理想的示踪特征:稳定、工作浓度下无毒性、良好保留在细胞,且在生理pH下呈明亮荧光。另外,Cell-Tracker Red CMTPX的激发和发射光谱(492/517nm)与红色荧光蛋白RFP很好的分开,适用于多重标记(见附表1. Cell-Tracker荧光探针的光谱特征)。

 

产品特性

1)  CAS NO.:136832-63-8

2)  同义名:CellTracker™ Green CMFDA; Spiro(isobenzofuran-1(3H),9′-(9H)xanthen)-3-one, 3′,6′-bis(acetyloxy)-5-(chloromethyl)-;

3)  分子式:C25H17ClO7

4)  分子量:464.86 g/mol

5)  外观:无色固体

6)  溶解性:溶于DMSO

7)  化学结构式:

 

保存与运输方法

保存:-20℃避光干燥保存,至少2年有效。

运输:冰袋运输。

 

注意事项

  1. 荧光染料都存在淬灭的问题,保存和操作过程中注意避光。
  2. 避免使用含氨基和巯基的缓冲液。
  3. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

应用示例

文献1)Nasir NAM et al.Fluorescent cell tracer dye permits real‐time assessment of re‐epithelialization in a serum‐free ex vivo human skin wound assay. Wound Repair Regen. 2019 Jan;27(1):126-133.

Method (Cell tracker dye uptake within human ex vivo wounds in situ):Four microliters of 25 μM CMFDA (or CMTPX) was added to the wound surface for 30 minutes, then washed dropwise with phosphate buffered saline.For cell viability studies, 1 μg/mL of propidium iodide (PI) was cotreated alongside CMFDA. Planimetric imaging was conducted using a Leica M205 FA upright Stereomicroscope using a 5x/0.50 pLANapo LWD objective at the equivalent of 64x magnification and captured using a DFC 565FX camera through LAS AF v3.1.0.8587 software. Specific band‐pass filter set for green fluorescent protein was used.

Fig. Epithelial repair of human ex vivo wounds progresses via an extending shield mechanism. Human ex vivo wounds were cultured in the presence of the fluorescent dyes. CMFDA and PI cotreatment at time of injury (D0) identifies live (CMFDA; green) and dead (PI; red) cells around the injury site (A), and these wounds traced to day 1 indicate PI‐labeled cells are no longer present (B).

文献2)Frazer J. Bye et al. Development of bilayer and trilayer nanofibrous/microfibrous scaffolds for regenerative medicine.Biomater. Sci., 2013, 1, 942-951.

Method (Cell migration into scaffolds at 7 days):CellTracker red (CMTPX) or green (CMFDA) were applied to the hESMPs and fibroblasts respectively, prior to seeding. Cells were washed 3 times with 5 ml PBS then 10 ml of serum free cell-appropriate medium containing CellTracker (10 mM) was added and the cells incubated for 45 minutes at 37 °C. After incubation, the cells were washed 3 times with 5 ml PBS following which they were seeded onto scaffolds.Scaffolds could then be imaged in an Axon ImageExpress microscope (Molecular Devices, Sunnyvale, USA) at 570 nm λex–620 nm λem (CellTracker red) and 480 nm λex–533 nm λem (CellTracker green).

Fig. Co-culture of CellTracker™ labelled fibroblasts (green) and hESMPs (red) on bilayer membranes of either PHBV–PLA or PHBV–PCL. hESMPs were seeded on day 1 (red) onto the PHBV face of each bilayer. Fibroblasts were seeded on either the PLA or PCL face of the bilayer on day 2 (green) and then cultured for a further 7 days. In A fibroblasts (green) are confined to the PLA face after 7 days with no sign of hESMPs (red). On the opposite face (B, PHBV), hESMPs (red) are also present once again with no fibroblasts.

使用方法

1.细胞准备

在合适的培养基内培养细胞。贴壁细胞可以在含盖玻片的培养皿内爬片生长,装入足量的生长培养基。

2.操作步骤

以下描述的是将染料加到培养细胞以及在荧光显微镜下成像的步骤。各种因素,比如将染料加载到细胞或组织,可能都需根据特定的细胞类型对某些条件做出修改。

探针的最佳染色浓度需根据用途来调整。建议刚开展实验需要测定至少1个10倍范围内的浓度。一般来说,长期染色(≥3天)或使用快速分裂的细胞需5-25µM的染料。对于短期实验(比如活力测定),使用低浓度染料(0.5-5µM)。为了维持正常的细胞形态和降低潜在的伪影,尽可能使用低浓度的染料。

2.1制备Cell-Tracker染色工作液

①开瓶前将产品从冰箱取出,放到室温使其回温至少20min。

②用高质量的无水DMSO溶解粉末使其浓度为10mM。例如,对1mgCell-Tracker Green CMFDA(Mw:464.86g/mol)冻干粉,加入215µlDMSO充分溶解,即得到10mM母液。

③ 用无血清培养基稀释母液到0.5-25µM的工作浓度。预热染色工作液到37℃。

2.2悬浮细胞染色步骤

① 离心收集细胞,吸掉上清液。用预热的Cell-Tracker染色工作液轻轻的重悬细胞。

② 在适合特定细胞类型的生长条件下孵育15-45min。

③ 离心细胞,吸掉Cell-Tracker染色工作液。

④ 加入选择的培养基,将标记好的细胞分配到载玻片或到选择的培养器皿内。

⑤根据附表1选择合适激发和发射波长的滤片来进行成像检测。

2.3贴壁细胞染色步骤

① 吸走培养基。

② 轻轻加入预热的Cell-Tracker染色工作液。

③ 在适合特定细胞类型的生长条件下孵育15-45min。

④吸掉Cell-Tracker染色工作液。

⑤ 加入选择的培养基。

⑥根据表1选择合适激发和发射波长的滤片来进行成像检测。

 3.荧光显微镜观察

Cell-Tracker荧光探针可用带标准光学和图像增强的各种落射荧光光学显微镜检测。根据染料选择合适的滤片。见附表1 Cell-Tracker荧光探针的光谱特征。

 

相关产品

货号 名称 规格                    
MX4107-1MG               Cell-Tracker Green CMFDA 活细胞示踪探针(绿色) 1mg
MX4108-100UG Cell-Tracker Orange CMTMR 活细胞示踪探针(橙色)        2×50μg
MX4109-100UG Cell-Tracker Red CMTPX 活细胞示踪探针(红色) 2×50μg
MX4101-1G Fluorescein diacetate (FDA) 二乙酸荧光素 1g
MX4205-10MG Propidium Iodide 碘化丙啶(粉末) 10mg

 

 

Asante Potassium Green-2 AM 钾离子指示探针


描述

Enhanced Potassium Green-2 AM 钾离子指示探针

产品标签

Enhanced Potassium Green-2 AM(EPG-2 AM) K+indicator;PBFI AM 钾离子指示剂/探,SBFI AM 钠离子指示剂/探针,Asante Potassium Green-2,Valinomycin缬氨霉素

产品信息

产品名称 产品编号 规格 规格
Enhanced Potassium Green-2 AM 钾离子指示探针 MX4513-100UG 2×50μg 1988
Enhanced Potassium Green-2 AM 钾离子指示探针 MX4513-250UG 5×50μg 4988
Enhanced Potassium Green-2 AM 钾离子指示探针 MX4513-500UG 10×50μg 7658

产品描述

Enhanced Potassium Green-2 AM(EPG-2 AM)是Asante Potassium Green-2 AM(APG-2 AM)的替代物,

是一种具细胞膜渗透性的新型K+荧光探针,具有容易加载、缓慢泄露、良好光稳定性和宽动力学范围等理想特征,正好弥补传统K+荧光探针PBFI AM(#MX4510)的缺陷。EPG-2 AM被可见光激发,最佳激发波长为517nm,但也能被传统波长488nm激发检测。虽然不是比率型探针,但其宽广的动力学范围使其甚至能检测到变化很小的K+浓度。EPG-2 AM用近红外波长的双光子激发下信号很强且抗荧光淬灭很好。也适用于共聚焦显微镜、流式细胞仪和高通量筛选分析。

保存与运输方法

保存:-20ºC避光干燥保存,1年有效。

运输:冰袋运输。

产品特性

1) 分子式:C55H64Cl2N2O19

2) 分子量:1128.02 g/mol

3) 纯度:> 80%(HPLC)

4) 最大激发波长:526 ± 3 nm(in methanol)

5) 最大发射波长:546 ± 3 nm(in methanol)

6) 解离常数(Kd):18mM

7) 动力学范围(Fmax/Fmin):12

8) 溶解性:溶于DMSO

9) 化学结构式:

常用操作流程(AM荧光探针)

以下步骤仅做参考,具体请根据实际情况或参考文献资料来调整。

1.1 使用无水DMSO溶解EPG-2 AM(Mw:1128.02 g/mol)配制成1-5mM储存液,比如往50μg EPG-2 AM冻干粉内加入22μl DMSO,充分溶解后配制成2mM储存液。-20ºC分装干燥冻存,避免反复冻融。

1.2 通常在含适当浓度AM探针的无血清培养基中实现探针加载。建议正式实验前向加载培养基内加入Pluronic F-127以促进AM探针的分散。可用DMSO配置20% Pluronic F-127储存液或其他浓度,只需在正式实验前将其与EPG-2 AM储存液混合,然后加入加载培养基,保证其终浓度<0.1%(w/v)。

1.3 室温或37℃孵育细胞(可能在室温的探针加载质量会高些),孵育浓度通常为1-10µM,孵育时间通常为30-60min,具体的请根据实际情况或参考文献资料。

1.4 【可选】对于大分子量AM探针(分子量≥1000g/mol),孵育结束,加入不含AM探针的细胞加载培养基额外孵育20-60min,以确保细胞将AM基团完全去酯化。

1.5 用不含血清和探针的培养基清洗细胞至少一次,以降低细胞外背景荧光。

1.6 最后用合适的仪器来检测荧光信号。检测用最大激发波长517nm,最大发射波长540nm。

【注意】:

a) 如果细胞加载培养基是以碳酸氢钠为缓冲体系,那么加载需要含5% CO2的环境内进行,以防止因CO2损失引起的培养基碱化。

b) 如果细胞加载培养基含血清,那需适当提高AM探针工作浓度,以补偿因AM探针与血清蛋白结合引起的损失。

c) 某些情况下,对分子量接近或超过1000的AM探针,需用不含AM探针的细胞加载缓冲液进一步孵育20-60min,以保证细胞内酯酶能充分降解AM基团。

d) 探针的加载时间和浓度因具体的细胞类型而有差异,请根据具体的细胞类型来优化。

e) 对每一种探针有必要通过校准(calibration)来得到实际解离常数(Kd)。物理条件如温度,pH,离子强度或溶液粘度,以及探针与细胞组成成分如蛋白质的相互作用,都会影响Kd值。实际情况细胞内的Kd比体外溶液通常要高。因此,细胞水平研究有必要进行校准确认实际Kd值。

f) 对于EPG-2,虽然最大激发波长在517m,但其极强的荧光亮度使其能够用标准的488nm滤片来激发,与Fluo系列的可见光钙离子指示探针检测手段一致。值得注意的是,488nm激发下得到的荧光强度约为最大激发波长下的40%。

注意事项

1) EPG-2 AM易受潮,粉末需干燥保存;粉末需用无水DMSO溶解,配制储存液(如10mM),置于-20℃干燥避光保存,小量分装避免反复冻融,至少3个月稳定。

2) 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。