ABI A46113 PowerTrack SYBR Green Master Mix

PowerTrack SYBR Green Master Mix 是一种预先配制、优化的通用型 2X 预混液,可用于实时荧光定量 PCR 检测,并提供内置的可视的染料–指示剂,用于精确的反应设置。PowerTrack SYBR Green Master Mix 结合用户提供的引物组和模板,设计用于扩增靶标,以进行准确的基因表达分析。

PowerTrack SYBR Green Master Mix 的功能包括:
?内置的可视指示剂有助于反应设置
?较宽的引物 TM 和浓度兼容性使 qPCR 反应设置具有灵活性,并较大限度减少优化
?在较宽的动态范围内,CTs 的特异性和紧密的重现性’
?带有 UNG 和 dUTP,防止残留 PCR 产物污染

内置可视指示剂
PowerTrack SYBR Green Master Mix 包含一个不会干扰实时荧光定量 PCR 的惰性蓝色染料,可在试管或孔中提供更高的可视性。另提供一种独立的样品缓冲液,其中含有一种惰性黄色染料。选用此黄色样品缓冲液,加样后会得到从蓝色变为绿色的反应混合物,有助于避免移液错误。黄色样品缓冲液有助于反应的设置,但 PowerTrack SYBR Green Master Mix 无需获取卓越的结果。

具有较大的特异性和重现性的配方
PowerTrack SYBR Green Master Mix 包含 Taq DNA 聚合酶,并通过抗体介导的热启动机制严格控制,有助于防止聚合酶在低温下出现不需要的过早活性,从而避免非特异性扩增。PowerTrack SYBR Green Master Mix 旨在为您在较具挑战性的实时荧光定量 PCR 应用中提供卓越的性能。

广泛的仪器兼容性
PowerTrack SYBR Green Master Mix 可在标准或快速循环模式下使用,并且兼容所有 Applied Biosystems 实时荧光定量 PCR 仪器。它还兼容 Bio-Rad CFX96?、CFX384?和iQ?5;Roche LightCycler?480和 Agilent MX3005P? 系统。为获得较佳结果,引物浓度应在300–800nm的范围内。

用于残留污染控制的 UNG

在常规运行 PCR 的实验室中,针对残留污染的控制是许多研究人员较关心的问题之一,也是假阳性的主要来源。PowerTrack SYBR Green Master Mix 包含 UNG 和 dUTP,能够降解任何之前扩增的 PCR 产物,并有助于防止后续 qPCR 反应的污染。

规格

浓缩

2X

检测方法

SYBR

产品规格

管装

No. of Reactions

5000 次反应

PCR 方法

qPCR

聚合酶

Taq DNA 聚合酶

反应速度

快速或标准

样品类型

DNA

容量

1 x 50 mL

适用于(设备)

7500 Fast 系统、7500 系统、7900HT Fast 系统、7900HT 系统、QuantStudio 3、QuantStudio 5、QuantStudio 6 Flex、QuantStudio 6 Pro、QuantStudio 7 Flex、QuantStudio 7 Pro、QuantStudio 12K Flex、Bio-Rad CFX Connect?、Bio-Rad CFX384 Touch?、Bio-Rad CFX96 Touch?、BioRad CFX96?、BioRad iCycler iQ、BioRad iQ5、BioRad MyiQ、ViiA? 7 系统、StepOne? 系统、MJ Chromo4、MJ Opticon、StepOnePlus? 系统、Roche LightCycler 480、Stratagene Mx3000P、Stratagene Mx3005P、Stratagene Mx4000

产品线

Applied Biosystems?

产品类型

实时荧光定量 PCR SYBR 预混液

数量

50 mL

运输条件

干冰

储存要求

储存在 -5° 至 -30°C 下

足够用于

5000 次反应

适用于(应用)

基因表达, 病毒检测

内容与储存

?PowerTrack SYBR Green 预混液
?40 X 黄色样本缓冲液

存储在-20±5°C的黑暗中。

ABI A25777 PowerUp SYBR Green 预混液

PowerUp? SYBR? Green 预混液是一种预配制、优化的通用型 2X 预混液,适用于实时荧光定量 PCR 工作流程。与用户提供的引物组和模板相结合,PowerUp? SYBR? Green 预混液设计用于扩增靶标,以实现精确的基因表达分析。

PowerUp? SYBR? Green 预混液的特性包括:
?具有优异特异性的双重热启动机制
? 在广泛动态范围内具有高度可重现的 CT
? 含有 UDG,以帮助防止残留污染
? 预组装反应的稳定性长达72小时
? 与大多数实时 qPCR 仪器兼容

双重热启动机制的出色特异性
特异性是获取 SYBR? Green 反应的高质量数据的关键,在严格的引物结合前,可以通过在较低温度下控制 Taq DNA 聚合酶来增强特异性。PowerUp? SYBR? Green 混合液采用 Dual-Lock? Taq DNA 聚合酶,其结合了两种独特的热启动机制,有助于控制其活性,并防止聚合酶在低温下出现不需要的早期活性。在评估24种不同引物组的实验中,PowerUp? SYBR? Green 预混液生成单熔解曲线100%的时间与高特异性扩增一致

CT 在较宽的动态范围内具有严格的重现性
PowerUp? SYBR? Green 预混液在广泛动态范围内对各种受测靶标表现出了出色的重现性(如图所示)。此外,此预混液还可在6个对数级上样量下实现高效扩增。与其他竞品混合液不同,在动态范围实验中,PowerUp? SYBR? Green 预混液未在高 cDNA 上样量、低相关系数下出现抑制现象,并在全动态范围内维持了稳定的效率,极大限度确保了数据质量的可信度(如图所示)。

含有 UDG 以实现残留污染控制
在 PowerUp? SYBR? Green 预混液中加入尿嘧啶-DNA 糖基化酶 (UDG) 和 dUTP,能够降解任何先前扩增的 PCR 产物,有助于防止后续 qPCR 反应污染和可能的假阳性结果

预混反应稳定性
PowerUp? SYBR? Green 预混液中的 Dual-Lock? Taq DNA 聚合酶的严格控制使得反应可以在循环前混合长达72小时而不影响数据(如图所示)。这种一致性使用户能够在许多工作流程方案中可靠、灵活地使用 PowerUP? SYBR? Green 预混液1。

兼容多种仪器

PowerUp? SYBR? Green 预混液可在标准或快速循环模式下使用,并与所有 Applied Biosystems? 实时荧光定量 PCR 仪器兼容2。它还兼容 Bio-Rad IQ?5 和 CFX96? /CFX384? 系统、Roche LightCycler? LC480 和 Stratagene? MX3005P? 系统。为确保获得极佳结果,推荐的引物浓度为 300–800 nM。

规格
检测方法
SYBR
产品规格
管装
PCR 方法
qPCR
聚合酶
Dual-Lock Taq DNA 聚合酶
反应速度
快速或标准
适用于(设备)
7500 Fast 系统、7500 系统、7900HT 系统、QuantStudio? 12k Flex、QuantStudio? 3、QuantStudio? 5、QuantStudio? 6 Flex、QuantStudio 6 Pro、QuantStudio 7 Pro、QuantStudio? 7 Flex、StepOne?、StepOnePlus?、ViiA? 7 系统
产品线
PowerUP?,SYBR?
产品类型
实时荧光定量 PCR SYBR 预混液
数量
5 x 5 mL
运输条件
湿冰
足够用于
2500次 20 μL 反应
适用于(应用)
基因表达
浓度
2X
反应次数
2500 次反应
样品类型
DNA
容量
5 x 5 mL
内容与储存
2x 混合物包含 SYBR Green 染料、双重锁定 Taq DNA 聚合酶、含有 dUTP/dTTP 混合物的 dNTP、热不稳定 UDG、ROX 被动参比染料和优化的缓冲液组分。包含5 X 5 mL 管,足以进行2500次 20-μL 反应(每个反应 10 μL 预混液)。

储存于 2–8°C。

ABI A57156 乾坤白金 SYBR Green 预混液

乾坤? 白金? SYBR? Green 预混液是一种预配制、优化的通用型 2X 预混液,适用于实时荧光定量 PCR 工作流程。与用户提供的引物和模板相结合,设计用于扩增靶标,以实现精确的基因表达分析。该预混液包含 UNG 和 dUTP,能够降解前序反应残留的qPCR产物,并有助于防止后续 qPCR 反应的污染。有效期长达两年,能更好的满足科研实验需求。

乾坤? 白金?SYBR? Green 预混液产品特性:
? 兼顾灵敏度和特异性:保障染料法检测的特异性,同时具有更小的 Ct 值
? 高强度荧光信号:更大的扩增曲线 dRn 值,更高的平台期荧光信号
? 宽动态范围:可在跨 6 log动态范围内进行精准检测,并确保可靠的线性
? 桌面稳定性高:配置好的 qPCR 反应体系可以在室温下稳定保存72小时,便于安排上机时间
? 批间一致性高:生产过程遵循 ISO 9001 质量管理体系,保证数据的稳定性和重复性
? 抗残留污染:采用 UDG 和 dUTP 配方,杜绝残留扩增产物污染造成的假阳性结果

优异特异性和灵敏度的结合
乾坤白金 SYBR Green 预混液含有 Taq DNA 聚合酶,该聚合酶受到抗体介导的热启动机制的严格控制,有助于防止聚合酶在低温下出现不符合预期的早期活性,从而导致非特异性扩增。

乾坤? 白金? SYBR? Green 预混液专为在最具挑战性的实时 PCR 应用(如高 GC 含量,低丰度或长扩增子靶标)中实现卓越性能而设计,具有高灵敏度和特异性。

高强度的荧光信号
乾坤白金 SYBR Green 预混液持续发出强烈的荧光信号,远高于背景,从而产生背景信号更低、更加稳定的结果。扩增曲线平台期的荧光值是其他预混液的2倍以上。

宽动态范围
乾坤白金 SYBR Green 预混液可以产生多达6个动态范围的数据(见图),并且与其他预混液相比,在检测各种目标时显示出等效或更好的动态范围。

台面稳定性高
乾坤白金 SYBR Green 预混液经过设计,可在室温下配置反应体系后,放置72小时仍保持高水平的性能。
图片显示了在制备时(T0)和在室温下放置72小时后(T72)进行的反应稳定性。

批间一致性高
乾坤白金 SYBR Green 预混液遵循 ISO 9001 质量管理体系,这有助于确保生产过程的可追溯性,并建立从原材料采购到产品发布的质量控制点,有助于生产具备更高批次一致性、更高稳定性及更高重复性的预混液(见图)。

抗残留污染
乾坤白金 SYBR Green 预混液中加入了尿嘧啶脱氧核糖核酸糖苷酶 (UDG) 和 dUTP,能够降解任何先前扩增的PCR产物,有助于防止后续 qPCR 反应的污染和可能的假阳性。

?

For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.
规格
产品规格

PCR 方法
qPCR
聚合酶
Taq DNA 聚合酶
反应速度
快速,标准
适用于(设备)
7500 Fast System, 7500 System, 7900HT Fast System, 7900HT System, QuantStudio 3, QuantStudio 5, QuantStudio 6 Flex, QuantStudio 6 Pro, QuantStudio 7 Flex, QuantStudio 7 Pro, QuantStudio 12K Flex, ViiA? 7 System, StepOne? System, StepOnePlus? System
标签或染料
SYBR Green
参比荧光染料
ROX(预混)
产品线
Applied Biosystems?
产品类型
实时荧光定量 PCR SYBR 预混液
运输条件
干冰
适用于(应用)
基因表达, 病毒检测
浓度
2X
反应次数
500 次反应
样品类型
DNA、cDNA
容量
5 mL
内容与储存
此 2x 预混液包括:
? SYBR Green 染料
? Taq DNA 聚合酶
? 具有 dUTP/dTTP 混合物的 dNTP
? 热不稳定 UDG
? ROX 惰性参比染料
? 优化的缓冲液

包含 1 X 5 mL 管,可用于500次反应(20 μL反应体系,每次反应用 10 μL)

-20°C存储。
临时存储可在 4°C,最多放置4个月。

ABI A25742 PowerUp SYBR Green 预混液

PowerUp? SYBR? Green 预混液是一种预配制、优化的通用型 2X 预混液,适用于实时 PCR 工作流程。与用户提供的引物组和模板相结合,PowerUp? SYBR? Green 预混液设计用于扩增靶标,以实现精确的基因表达分析。

PowerUp? SYBR? Green 预混液的特性包括:
?双重热启动机制,可实现出色的特异性
?在广泛动态范围内具有高度可重现的 CT
?含有 UDG 以避免残留污染
?持续72小时的预混反应稳定性
?可兼容大多数实时 qPCR 仪器

双重热启动机制提供了出众的特异性
特异性是获取 SYBR? Green 反应高质量数据的关键,而在严格的引物结合前,可在较低温度下通过控制 Taq DNA 聚合酶来提高特异性。PowerUp? SYBR? Green 混合液采用 Dual-Lock? Taq DNA 聚合酶,其结合了两种独特的热启动机制,有助于控制其活性,并防止聚合酶在低温下出现不需要的早期活性。在评估24种不同引物组的实验中,PowerUp? SYBR? Green 预混液生成单熔解曲线100%的时间与高特异性扩增一致

CT 在较宽的动态范围内具有严格的重现性
PowerUp? SYBR? Green 预混液在广泛动态范围内对各种受测靶标表现出了出色的重现性(见图)。此外,此预混液还可在6个对数级样品起始量下实现高效扩增。与其他竞争产品不同,在动态范围实验中,PowerUp? SYBR? Green 预混液未在高 cDNA 起始量、低相关系数下出现抑制现象,并在全动态范围内维持了稳定的效率,较大限度确保了数据质量的可信度(参见图)。

含有 UDG 以实现残留污染控制
在 PowerUp? SYBR? Green 预混液中加入尿嘧啶-DNA 糖基化酶 (UDG) 和 dUTP,能够降解任何先前扩增的 PCR 产物,有助于防止后续 qPCR 反应污染和可能的假阳性结果

预混反应稳定性
PowerUp? SYBR? Green 预混液中的 Dual-Lock? Taq DNA 聚合酶的严格控制使得反应可以在循环前混合长达72小时而不影响数据(见图)。这种一致性使用户能够在许多工作流程方案中可靠、灵活地使用 PowerUp? SYBR? Green 预混液1。

兼容多种仪器
PowerUp? SYBR? Green 预混液可在标准或快速循环模式下使用,并与所有 Applied Biosystems? 实时 PCR 仪器兼容2。它还兼容 Bio-Rad IQ?5 和 CFX96?/CFX384? 系统、Roche LightCycler? LC480 和 Stratagene? MX3005 P? 系统。为确保获得最佳的结果,推荐的引物浓度为300–800 nM。

了解有关 PowerUp? SYBR? Green 预混液的更多信息 >

1 Pre-PCR 的稳定性不仅受预混液的影响,还受分析的靶标的影响。为确保最佳的可信度,研究人员应验证自身具体靶标的稳定性曲线。
2 为获得较佳性能,建议使用 Applied Biosystems? 7900 系统进行标准循环。

SYTO 9 Green Fluorescent Nucleic Acid Stain (5 mM in DMSO)  绿色荧光核酸染料

SYTO 9;PI 碘化丙啶;Propidium Monoazide (PMA) 叠氮溴化丙锭;SYTO 9/PI Live/Dead Bacterial Double Stain Kit 活细菌/死细菌双染试剂盒;活死细菌染色;

温馨提示1):若需做双染,可配合购买我司的碘化丙啶PI(MX4205-10MG,MX4205-1ML)。

温馨提示2):若需做双染,亦可直接购买我司的SYTO 9/PI Live/Dead Bacterial Double Stain Kit 活细菌/死细菌双染试剂盒(MX4234-40T)。

产品描述

SYTO 9绿色荧光核酸染料(SYTO 9 Green Fluorescent Nucleic Acid Stain),是一款优秀的绿色荧光细胞核和染色体复染剂,能渗透进入原核和真核细胞膜。SYTO 9高亲和结合DNA(以及RNA),一旦结合后呈现明显增强的荧光信号,最大激发和发射波长分别是483nm和503nm。SYTO 9极其适合用作细菌实验的核复染剂,因其对革兰氏阳性菌和阴性菌的活细胞和死细胞都能染色。SYTO 9常常与碘化丙啶(PI)联合使用,用于活/死细菌染色。

本品以DMSO储存液形式提供,浓度为5mM。只需用合适的生理缓冲液稀释到工作浓度进行简单孵育即可。适用于哺乳动物细胞、革兰氏阳性和革兰氏阴性菌。

产品特性

1) 同义名:SYTO 9 Green dye;SYTO 9绿色荧光染料;

2) 外观:橙色溶液

3) 荧光特征:EX/Em=485/498nm(与DNA结合);EX/Em=486/501nm(与RNA结合)

图1. SYTOX 9与核酸结合的光谱特征。A)与DNA结合的吸收光谱;B)与RNA结合的吸收光谱;C)与DNA或RNA结合后的荧光发射光谱。

4) 渗透性:细胞通透性

保存与运输方法

保存:-20℃避光保存,至少1年有效。

运输:冰袋运输。

注意事项

1)荧光探针均存在淬灭问题,请尽量注意避光,以减缓荧光淬灭。

2) 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作

将低温保存的PMA粉末置于室温回温至少20min,低速离心使粉末沉至管底。避光条件下加入98μl无菌水,充分溶解混匀,即得到20mM储存液。储存液根据单次用量分装,-20℃避光冻存,至少6个月有效。

应用示例(来自文献,仅作参考)

Ref 1)Yagüe P, Manteca A, Simon A, Diaz-Garcia ME, Sanchez J. New method for monitoring programmed cell death and differentiation in submerged Streptomyces cultures. Appl Environ Microbiol. 2010;76(10):3401-3404. doi:10.1128/AEM.00120-10

实验目的:建立一种简单和可靠得方法来监测和定量链霉素发酵物的细胞死亡过程,使用活细胞染料SYTO 9和碘化丙啶PI。使用原理在于:SYTO 9是一种细胞膜渗透性的核酸染料,能够标记所有细胞:具膜完整性和受损的细胞膜。PI只能渗透进入膜不完整的细菌。因此,在混合细菌群内,具完整细胞膜的细菌呈绿色荧光,而破损膜结构的细菌呈红色;

Fig. S. coelicolor growth curve and antibiotic (actinorhodin and undecylprodigiosin) production in submerged cultures. Confocal microscope images of key developmental stages stained with SYTO 9 and PI are shown at the top: individual hyphae of the first compartmentalized mycelium (MI; arrows indicate septation), second multinucleated mycelium hyphae (MII), and the mycelial pellet (240 μm in diameter) undergoing PCD processes in the center (red). The transitory growth arrest phase coinciding with PCD is indicated. See text for details.

Ref 2)Robertson J, McGoverin C, Vanholsbeeck F and Swift S (2019) Optimisation of the Protocol for the LIVE/DEAD® BacLightTM Bacterial Viability Kit for Rapid Determination of Bacterial Load. Front. Microbiol. 10:801. doi: 10.3389/fmicb.2019.00801

实验方法(SYTO 9+PI染色):用棕色离心管稀释SYTO 9和PI使其浓度分别为33.4和400 μM,置于冰上保存。分别加50 μl SYTO 9和50 μl PI工作液和/或0.85%生理盐水(总体积为100μl)到0.9ml培养物内,使得SYTO 9和PI 的浓度分别为1.67和20 μM。对于基本培养基的优化实验,每一组活细胞和死细胞悬液分别用SYTO 9, PI和SYTO 9+PI染色。

Fig. Live/dead spectrometry on live and dead E. coli suspensions in minimal media and saline. SYTO 9 intensity in minimal media (A), PI intensity in minimal media (B), proportion of live cells in minimal media derived from the kit ratio (C), % live cells in minimal media derived from the adjusted dye ratio (D), the proportion of live cells in saline derived from the kit ratio (E) and % live cells in saline derived from the adjusted dye ratio (F) for live and dead E. coli suspensions derived from integrating at three different wavelength ranges for each dye. An R2-value was generated from a linear regression analysis of data from each wavelength range. Data presented is the median with the range from six biological replicates.

染色流程

基于实验室经验和发表方法,建议使用广谱的染色浓度来开展使用,并且根据自身的细胞类型和实验体系来优化摸索出最佳的工作浓度(见表2)

使用塑料管来稀释SYTO 9染料,由于稀释后的染料会粘附到玻璃上。总的来说,用不含磷酸盐的缓冲液来染色能得到最好的结果。塑料或玻璃器皿上残留的去污剂也有可能影响许多细胞或有机体的真实染色,导致在含或不含细胞的溶液中都能看到发明亮荧光的材料。确保用温和去污剂来清洗玻璃器皿,用热自来水完全冲洗干净,最后用去离子水清洗数次。

表2. SYTOX 9染色不同细胞的建议工作浓度
细胞类型 SYTOX 9浓度 孵育条件
细菌细胞 50 nM-20 µM 涡旋混匀,之后孵育1-30 min
真核细胞 10 nM-5 µM 孵育10-120 min 
微阵列 (Microarrays) 50 nM in TE buffer 孵育5 min,清洗之后晾干

①离心收集细胞,用生理盐溶液或水重悬细胞。贴壁细胞(比如:哺乳动物细胞)可能在盖玻片上原位染色。使用表2内建议的工作浓度进行染色。初次实验,建议在建议浓度范围内做多个染料浓度,以确定能得到最佳染色的工作浓度。需要注意:生长培养基、细胞密度、是否存在其它细胞、和其它因素都可能影响染色。

②染色的真核细胞通常显示出弥散的细胞浆染色和细胞核染色,特别是经常看到明亮的核内小体染色。由于此染料具细胞膜渗透性,且中性pH下带净正电荷,也有可能染线粒体。活酵母菌内主要是线粒体染色。

相关产品

名称 规格
SYTOX Green Nucleic Acid Stain (5 mM in DMSO)  50µl
SYTO 9 Green Fluorescent Nucleic Acid Stain (5 mM in DMSO) 20µl
Propidium Iodide 碘化丙啶(粉末) 10mg
DAPI 细胞核探针 10mg
Ethidium Monoazide Bromide (EMA) 叠氮溴化乙锭 5mg
Propidium Monoazide (PMA) 叠氮溴化丙锭 1mg
SYTO 9/PI Live/Dead Bacterial Double Stain Kit 活细菌/死细菌双染试剂盒 40T

 

SYBR Green I Nucleic Acid Stain是一种直接与dsDNA结合的荧光染料

SYBR Green I;Evagreen;GelRed;DuRed;GelGreen;溴化乙锭(EB);qPCR;

产品信息

产品名称

规格

SYBR Green I Nucleic Acid Stain (PCR Grade, 10,000×)  

100µl

SYBR Green I Nucleic Acid Stain (PCR Grade, 10,000×)   500µl

SYBR Green I Nucleic Acid Stain (PCR Grade, 10,000×)   1ml

产品描述

SYBR Green I Nucleic Acid Stain是一种直接与dsDNA结合的荧光染料,是荧光定量PCR最常用的DNA结合染料。定量PCR中,SYBR Green I与dsDNA非特异性结合发出荧光,通过检测反应体系中的荧光强度,进而达到检测PCR产物扩增量的目的。游离状态下SYBR Green I发出微弱荧光,一旦与dsDNA结合后,荧光强度增加1000倍,一个反应发出的荧光信号与dsDNA量成比例,且随扩增产物的增加而增加。因此,通过检测PCR反应液内的荧光信号强度,实现对目的基因的准确定量,同时还能测定扩增DNA片段的熔解温度。本品为10,000×的SYBR Green I核酸染料,达PCR级别。

保存与运输方法

保存:-20°C避光干燥保存,1年有效。

运输:冰袋运输。

注意事项

1) 独立实验室进行的艾姆斯试验表明SYBR Green I的致突变性明显比EB要低很多。但是,必须警告用户注意,目前尚无关于SYBR Green I对人体的致突变性或毒性的数据。由于该染料与核酸结合,应当被看作潜在诱变剂,使用时要小心谨慎。在处理DMSO储存液时应特别小心,因DMSO能促进有机分子进入组织。染料的废弃处理应当符合当地的规定。

2) 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法

配置PCR反应混合液时,将10,000× SYBR Green I加入到PCR反应体系使其终浓度为0.5×(在0.2×~1×之间调整)。以上操作建议冰上进行。

【注意】:1)反应液配制方法和PCR扩增条件请参照DNA聚合酶使用说明;2)荧光定量扩增仪的使用方法,请参照各仪器说明。

【影响荧光定量PCR的一些小细节】:

1) SYBR Green I使用浓度对荧光定量PCR的影响

合适的SYBR Green I使用浓度是保证荧光定量PCR实验成功非常关键的因素。如果SYBR Green I浓度过低使得荧光信号的变化降低,这意味着低拷贝样品可能无法检出;而浓度过高,可能会抑制PCR反应,降低PCR反应效率。因此,初次使用SYBR Green I需根据实际情况优化工作浓度,反应终浓度可在0.2×~1×之间调整。

2) 镁离子浓度对荧光定量PCR的影响

提高镁离子浓度能降低SYBR Green I对PCR反应的抑制作用。建议用SYBR Green I进行荧光定量PCR反应时,镁离子浓度比不含SYBR Green I的普通PCR体系高出0.5~3mM。 

相关产品

产品名称 规格
SYBR Green I Nucleic Acid Gel Stain (10,000× in DMSO)核酸凝胶染料 100µl
SYBR Green II RNA Gel Stain (10,000× in DMSO) RNA凝胶染料 100µl
GoldView Nucleic Acid Gel Stain (10,000×)核酸染料(10,000×) 1ml
SYBR Green I Nucleic Acid Stain (PCR Grade, 10,000×)   100µl
SYBR Safe DNA Gel Stain  (10,000× in DMSO)  核酸凝胶染料 500µl

 

SYBR Green I Nucleic Acid Stain (PCR Grade, 10,000×)

SYBR Green I;Evagreen;GelRed;DuRed;GelGreen;溴化乙锭(EB);qPCR;

SYBR Green I Nucleic Acid Stain是一种直接与dsDNA结合的荧光染料,是荧光定量PCR最常用的DNA结合染料。定量PCR中,SYBR Green I与dsDNA非特异性结合发出荧光,通过检测反应体系中的荧光强度,进而达到检测PCR产物扩增量的目的。游离状态下SYBR Green I发出微弱荧光,一旦与dsDNA结合后,荧光强度增加1000倍,一个反应发出的荧光信号与dsDNA量成比例,且随扩增产物的增加而增加。因此,通过检测PCR反应液内的荧光信号强度,实现对目的基因的准确定量,同时还能测定扩增DNA片段的熔解温度。本品为10,000×的SYBR Green I核酸染料,达PCR级别。

保存与运输方法

保存:-20°C避光干燥保存,1年有效。

运输:冰袋运输。

注意事项

1) 独立实验室进行的艾姆斯试验表明SYBR Green I的致突变性明显比EB要低很多。但是,必须警告用户注意,目前尚无关于SYBR Green I对人体的致突变性或毒性的数据。由于该染料与核酸结合,应当被看作潜在诱变剂,使用时要小心谨慎。在处理DMSO储存液时应特别小心,因DMSO能促进有机分子进入组织。染料的废弃处理应当符合当地的规定。

2) 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法

配置PCR反应混合液时,将10,000× SYBR Green I加入到PCR反应体系使其终浓度为0.5×(在0.2×~1×之间调整)。以上操作建议冰上进行。

【注意】:1)反应液配制方法和PCR扩增条件请参照DNA聚合酶使用说明;2)荧光定量扩增仪的使用方法,请参照各仪器说明。

【影响荧光定量PCR的一些小细节】:

1) SYBR Green I使用浓度对荧光定量PCR的影响

合适的SYBR Green I使用浓度是保证荧光定量PCR实验成功非常关键的因素。如果SYBR Green I浓度过低使得荧光信号的变化降低,这意味着低拷贝样品可能无法检出;而浓度过高,可能会抑制PCR反应,降低PCR反应效率。因此,初次使用SYBR Green I需根据实际情况优化工作浓度,反应终浓度可在0.2×~1×之间调整。

2) 镁离子浓度对荧光定量PCR的影响

提高镁离子浓度能降低SYBR Green I对PCR反应的抑制作用。建议用SYBR Green I进行荧光定量PCR反应时,镁离子浓度比不含SYBR Green I的普通PCR体系高出0.5~3mM。 

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GoldView Nucleic Acid Gel Stain (10,000×)核酸染料(10,000×) 1ml
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SYBR Safe DNA Gel Stain  (10,000× in DMSO)  核酸凝胶染料 500µl

 

Light Green SF Yellowish 亮绿SF淡黄 Aniline Blue 苯胺蓝;Brilliant Blue R 亮蓝R;CAS:5141-20-8

Light Green SF Yellowish 亮绿SF淡黄;Fast Green FCF 固绿FCF;Aniline Blue 苯胺蓝;Brilliant Blue R 亮蓝R;CAS:5141-20-8;

产品订购:

产品名称 CAS NO.       规格              
       Light Green SF Yellowish 亮绿SF淡黄   5141-20-8 5g
Light Green SF Yellowish 亮绿SF淡黄 5141-20-8 25g

基本描述:

亮绿SF淡黄(Light Green SF Yellowish)是一种三芳基甲烷染料,一种细胞学复染剂,在Gomori’s一步法三色染色步骤中可替代苯胺蓝。是巴氏染色液(PAP stains)中一种重要的对比染色剂组分。

基本特性:

1)   CAS NO:5141-20-8

2)   化学名:N-Ethyl-N-[4-[[4-[ethyl[(3-sulfophenyl)methyl]amino]phenyl](4-sulfophenyl)methylene]-2,5- cyclohexadien-1-ylidene]-3-sulfobenzenemethanaminium inner salt disodium salt

3)  同义名:C.I. 42095; Light green SF (LGSF);Light Green SF (Yellowish); Fast green N; Light green 2G; Acid Green 5; 亮绿SF(淡黄);亮绿SF;亮绿S;亮绿2G;亮绿2GN;黄色浅绿SF;酸性绿5;

4)   分子式:C37H34N2Na2O9S3

5)   分子量:792.86 g/mol

6)   染料含量:≥80%

7)   外观:暗红色至紫色粉末

8)   溶解性:溶于H2O(10 mg/ml),微溶于乙醇

9)   化学结构式:

保存与运输方法

保存:室温干燥保存,5年有效。

运输:室温运输。

注意事项

1)   本品不是临床药物,只能用于科研用途,不能用于诊断或临床用途。

2)   为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

相关产品

名称 规格           
              Nile Red尼罗红 100mg
Aniline Blue (Alcohol Soluble) 苯胺蓝(醇溶) 25g
Aniline Blue (Water Soluble) 苯胺蓝(水溶) 25g
Toluidine Blue O 甲苯胺蓝O  5g
Fast Green FCF 固绿FCF 5g
Light Green SF Yellowish 亮绿SF淡黄 5g
Coomassie Brilliant Blue G250 考马斯亮蓝G250        10g
Coomassie Brilliant Blue R250 考马斯亮蓝R250 10g

Fast Green FCF 固绿FCF 亮绿SF淡黄;Brilliant Blue R 亮蓝R CAS:2353-45-9

Fast Green FCF 固绿FCF;Protein Stain 蛋白染料;Light Green SF Yellowish 亮绿SF淡黄;Brilliant Blue R 亮蓝R;CAS:2353-45-9;

 产品订购:

产品名称 CAS NO.              规格                           

          

Fast Green FCF 固绿FCF         2353-45-9 5g
Fast Green FCF 固绿FCF 2353-45-9 25g

Fast Green FCF 固绿FCF 2353-45-9 50g

Fast Green FCF 固绿FCF 2353-45-9 100g

 基本描述:

固绿FCF(Fast Green FCF,CAS NO:2353-45-9)普遍用于组织和蛋白染色。在等电聚焦电泳(IEF)、非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(Native PAGE)和变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)中用作一种蛋白染色剂。与蛋白结合后,固绿FCF在近红外区域发射荧光(最大吸收波长625nm)。在酸提取DNA后碱性pH下用作一种组蛋白的定量染色剂。也可替代亮绿SF淡黄用于Masson三色染色法,因固绿FCF颜色更明亮且更不易褪色。还是一种食品染料。另外,固绿FCF还能用于亚硫酸盐测定,配制细菌培养基,用以鉴别大肠杆菌及其他乳糖发酵菌,培养分离粪便中的伤寒杆菌。

与亮蓝R相比,固绿FCF在宽广的蛋白浓度范围内都是线性的。电泳后,建议固定蛋白在凝胶上以得到最大的检测灵敏度。之后用0.1%固绿FCF(溶于30% (v/v)乙醇、10% (v/v)醋酸或7%(v/v)醋酸)染胶,于625nm下扫描染色胶。其检测灵敏度比亮蓝R约高30%。

基本特性:

1)   CAS NO:2353-45-9

2)   化学名:N-Ethyl-N-[4-[[4-[ethyl[(3-sulfophenyl)methyl]amino]phenyl](4-hydroxy-2-sulfophenyl)methylene] -2,5-cyclohexadien-1-ylidene]-3-sulfobenzenemethanaminium inner salt disodium salt

3)  同义名:C.I. 42053, Solid Green FCF, Food green 3, FD&C Green No. 3, F D and C Green No. 3, Green No. 3, NSC 379443; 快绿FCF;坚牢绿FCF;食品绿3;食用色素绿色3号;

4)   分子式:C37H34N2O10S3Na2 

5)   分子量:808.86 g/mol

6)   外观:红色至棕栗色粉末

7)   染料含量:≥90%

8)   溶解性:溶于H2O(1 mg/ml)

9)   化学结构式:

保存与运输方法

保存:室温干燥保存,5年有效。

运输:室温运输。

注意事项

1)   本品不是临床药物,只能用于科研用途,不能用于诊断或临床用途。

2)   为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

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名称 规格             
        Nile Red 尼罗红 100mg
Aniline Blue (Alcohol Soluble) 苯胺蓝(醇溶) 25g
Aniline Blue (Water Soluble) 苯胺蓝(水溶) 25g
Toluidine Blue O 甲苯胺蓝O  5g
Fast Green FCF 固绿FCF 5g
Light Green SF Yellowish 亮绿SF淡黄 5g
Coomassie Brilliant Blue G250 考马斯亮蓝G250            10g
Coomassie Brilliant Blue R250 考马斯亮蓝R250 10g

SYTOX Green Nucleic Acid Stain (5 mM in DMSO) 死细胞绿色荧光核酸染料

SYTOX Green;SYTOX 9;碘化丙啶 PI;死细胞染料绿菁;荧光增白剂28;Calcofluor White M2R;CFW;

产品信息

产品名称

规格
SYTOX Green Nucleic Acid Stain (5 mM in DMSO) 50µl

产品描述

SYTOX Green核酸染料(SYTOX Green Nucleic Acid Stain),是一种高亲和力的核酸染料,轻易渗透进入受损的细胞质膜,但不能穿透活细胞膜。特别适用于革兰氏阳性菌(G+)和革兰氏阴性菌(G),由于它们需要极其明亮的荧光信号。探针只需简单孵育,使用氩离子激光器的488nm激光或任何其它450-490nm光源激发,死细胞的核酸则呈明亮的绿色荧光。结合以上特征,以及荧光增强>500倍(与核酸结合)的优点,使其称为一种简单、定量的一步法死细胞指示剂,当用荧光显微镜、荧光光度计、荧光酶标板和流式细胞仪检测。

SYTOX Green核酸染料可与蓝色和红色荧光的表面标记联合使用,用于多指标分析。也能将SYTOX Green与任一种具细胞渗透性的SYTO 59-64红色荧光核酸染料联合双色标记死细胞和活细胞。SYTOX Green是一种优秀的DNA复染剂,用于染色体标记以及固定细胞和组织的染色。

本品以DMSO储存液形式提供,浓度为5mM。只需用合适的生理缓冲液稀释到工作浓度进行简单孵育即可。适用于哺乳动物细胞、革兰氏阳性和革兰氏阴性菌。

产品特性

1) 同义名:SYTOX Green dye;SYTOX Green死细胞染料;死细胞染料绿菁;SYTOX Green细胞核染料;

2) 外观:橙色至红色溶液

3) 荧光特征:EX/Em=504/523nm(与DNA结合),荧光产量为0.53(图1),需注意细菌或哺乳动物细胞中SYTOX Green的光谱特征可能发生变化。

1. SYTOX Green与DNA结合的荧光激发和发射光谱。

于10mM Tris-HCl1mM EDTA, pH 7.5
的反应体系内,1个染料分子与50DNA碱基对结合之后检测所得的光谱。


保存与运输方法

保存:-20℃避光干燥保存,至少1年有效。

运输:冰袋运输。

应用示例
文献来源1A Double Staining Method Using SYTOX Green and Calcofluor White for Studying Fungal Parasites of Phytoplankton Mélanie Gerphagnon, Delphine Latour, Jonathan Colombet, Télesphore Sime-Ngando Applied and Environmental Microbiology Jun 2013, 79 (13) 3943-395
实验目的:利用二种荧光染料(CFW+ SYTOX green)双重标记来定量检测孢子囊内的游动孢子含量。
实验方法:首先,用经典的核酸染料DAPI(1 μg/ml−1)和特异性染色质荧光素增白剂(calcofluor white , CFW, 2.5% v/v)。之后,结合核酸染料SYTOX green和CFW染色。SYTOX green的不同浓度(0.1 μM, 0.2 μM, 和0.5 μM)和孵育时间(30 min,1 h)进行优化。CFW工作浓度为2.5% (vol/vol) 。CFW要么与SYTOX green同时加入样本,或观察前5min再加入样本。染色步骤和结果总结见图1。最佳的染色条件是:先用0.1 μM SYTOX green 孵育55min,再加入CFW共同孵育5min

 Fig 1. Different concentration and incubation time procedures tested for double staining method and epifluorescence microscopy observation of zoosporic content and sporangia of phytoplankton parasitic chytrid. Optimal procedures are indicated with bold characters. Bars, 10 μm.文献来源2Johnson MB, Criss AK. Fluorescence microscopy methods for determining the viability of bacteria in association with mammalian cells. J Vis Exp. 2013;(79):50729.
实验目的:使用SYTOX Green和DAPI来评估细菌活力。
实验方法:用DAPI (10 μg/ml in Morse’s Defined Medium)室温避光标记细菌20min;用标记好的细菌感染24孔板内贴壁培养的细胞,不要用醛或有机溶剂来固定细胞;用MOPS/MgCl2清洗一次;用Alexa Fluor 647结合的抗体或凝集素标记感兴趣的细菌,室温避光操作10min,来检测外部细菌;吸走细胞培养基,加入SYTOX Green(0.4 μM in MOPS/MgCl2)。室温避光孵育5minMOPS/MgCl2清洗2次;MOPS/MgCl2再清洗1次;于30min内用荧光显微镜收集图片。

Fig 2. (A-B) Mid-logarithmic phase N. gonorrhoeae was exposed to propidium iodide and SYTO9 as in protocol 1, with (A) or without (B) isopropanol treatment to kill the bacteria. Nonviable bacteria are accessible to propidium iodide and appear red. Viable bacteria are stained with SYTO9 and appear green. (C-D) Mid-logarithmic phase N. gonorrhoeae was exposed to DAPI and SYTOX Green as in protocol 2, with (C) or without (D) isopropanol treatment to kill the bacteria. Nonviable bacteria are accessible to DAPI and SYTOX Green and appear blue + green. Viable bacteria are stained with DAPI only and appear blue only.

表2. SYTOX Green染色不同细胞的建议工作浓度
细胞类型 SYTOX Green浓度 孵育条件
细菌 0.5-5.0 µM 涡旋混匀,之后孵育5min以上
酵母 1.0-50 µM 孵育10min以上,周期性摇晃管子
其它真核细胞 10 nM-1 µM 孵育10min以上,

染色流程(更多内容见说明书)

以下步骤适用于任何细胞类型,需注意不同细胞类型所需的探针工作浓度范围有差异(见表2)。生长培养基、细胞密度、是否存在其它细胞、和其它因素都可能影响染色。总的来说,不在磷酸盐的缓冲液中能得到最好的结果。玻璃器皿上残留的去污剂也有可能影响许多有机体的真实染色,导致含或不含细胞的溶液中都能发现明亮荧光的材料。确保用温和去污剂来清洗玻璃器皿,用热自来水完全冲洗干净,最后用去离子水清洗数次。

注意事项

1) 荧光染料均存在淬灭问题,请尽量注意避光,以减缓荧光淬灭。

2) 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

 相关产品

名称 规格
Ethidium Bromide (EB) 溴化乙锭(EB,粉末) 1g
Ethidium Monoazide Bromide (EMA) 叠氮溴化乙锭 5mg
Ethidium Homodimer 1 (EthD-1) 1mg
Ethidium Homodimer 3 (EthD-3) 1mg
SYBR Green I Nucleic Acid Gel Stain  (10,000× in DMSO) 核酸凝胶染料 100µl
Propidium Iodide 碘化丙啶(粉末) 10mg
DAPI 细胞核探针 10mg
SYTOX Green Nucleic Acid Stain (5 mM in DMSO) 绿色荧光核酸染料 50µl

 

SYBR Green II RNA Gel Stain (10,000× in DMSO) 核酸凝胶染料

SYBR Green II;GoldView;Acridine Orange 吖啶橙;GelRed; GelGreen;溴化乙锭(EB);SYBR Green I;

SYBR Green II是目前已知电泳凝胶中RNA检测最灵敏的染料之一,在琼脂糖或聚丙烯酰胺凝胶中最低检到100pg RNA或ssDNA的单一条带(使用254nm紫外反射光源照射,并用宝丽来667黑白胶片和SYBR滤光片拍照)。即使用300nm透射光也能检测到500pg RNA的单一条带。SYBR Green II的灵敏度明显强于溴化乙啶(EB)。标准琼脂糖迷你胶EB最低检出1.5ng单链核酸的单一条带(使用300nm透射光照射并用橙-红明胶滤光片拍照)。

SYBR Green II在变性琼脂糖/甲醛凝胶和聚丙烯酰胺/尿素凝胶中的检测灵敏度有点降低,然而仍优于EB。为了获得最大的检测灵敏度,琼脂糖/甲醛凝胶必须在EB染色前清洗数小时。相反,不做任何的清洗或脱色步骤,用SYBR Green II染色的琼脂糖/甲醛凝胶或聚丙烯酰胺/尿素凝胶能检测到1ng RNA单一条带(254nm反射照明)和4ng RNA单一条带(300nm透射照明)。SYBR Green II在RNA检测具备这一卓越灵敏度的特性归因于几个因素,包括优越的荧光量子产量、结合能力和荧光增强。

本品为溶于DMSO 的10,000×的SYBR Green II RNA核酸染料,可用于:1)Northern Blot、起始位点作图或cDNA制备前对RNA产物的小量分析;2)高分辨率变性梯度凝胶电泳(DGGE)后对5S rRNA迁移方式的观察;3)单链构象多态性(SSCP)中的DNA染色;4)PCR扩增前对DNA染色。

保存与运输方法

保存:-20°C避光干燥保存,1年有效。

运输:冰袋运输。

注意事项

1)   必须警告用户注意,目前尚无关于SYBR Green II 对人体的致突变性或毒性的数据。由于该染料与核酸结合,应当被看作潜在诱变剂,使用时要小心谨慎。在处理DMSO储存液时应特别小心,因DMSO能促进有机分子进入组织。强烈建议处理DMO储存液需戴双层手套。和所有的核酸染料一样,含SYBR Green II RNA核酸染料的溶液需先穿过活性炭再丢弃。活性炭之后必须焚烧来破坏染料。

2)   SYBR Green II可通过乙醇沉淀法从核酸中去除。异丙醇沉淀法去除效果稍差些。正丁醇萃取、氯仿萃取和酚萃取法无法有效去除该染料。

3)   先用EB染色的凝胶可接下来用SYBR Green II染色,根据电泳后染色(post-staining)的标准步骤操作。与直接用SYBR Green II染色相比较可能灵敏度有些降低。

4)   不要在玻璃器皿中稀释SYBR Green II储存液,因其会结合到玻璃上。在聚丙烯器皿中稀释储存液。

5)   SYBR Green II不会干扰酶反应。

6)   当用SYBR Green II染Northern或Southern Blot凝胶,建议在预杂交液和杂交液内加入0.1%-0.3% SDS。

7)   不建议用254nm紫外透射仪对凝胶拍照,因紫外光源的轮廓会出现在照片上。需要使用允许525nm光透过且排斥其他波长光的滤光片。

8)   为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

光谱特征

SYBR Green II RNA核酸染料可用常见的紫外反射和透射激发光源,以及手持式紫外灯检测。SYBR Green II的最大激发波长为497nm,但还有一个二级激发峰集中在254nm附近。与RNA结合的SYBR Green II的荧光发射集中在520nm。这些光谱特性让SYBR Green II适用于多种凝胶检测仪,从紫外反射(上紫外)和透射仪(下紫外)到氩离子激光器和水银灯激发的凝胶扫描仪。

使用方法

一、使用前准备工作

使用前将本品取出并回温至室温,使DMSO彻底解冻、溶液均一。于离心机上短暂离心确保所有溶液到管底。第一次使用时可将本品分装成多个小份后冻存,小份染料能更快溶解。

二、染色方法

1.电泳后染色(后染,推荐)

1)在非变性凝胶或变性聚丙烯酰胺/尿素或琼脂/甲醛凝胶上进行电泳。

【注】:其他凝胶基质未做测试,不确定染色效果如何。

2)稀释SYBR Green II储存液:对于非变性凝胶和变性聚丙烯酰胺/尿素凝胶,建议用TBE做1:10,000倍

稀释;对于变性琼脂糖/甲醛凝胶,建议用TBE做1:5,000倍稀释。

【注】:SYBR Green II染色对pH敏感,为获得最佳的灵敏度,应确认在染色温度下染色液的pH值在7.5-

8.0之间(pH8.0更佳)。

3)将凝胶小心的放入合适的容器中,比如聚丙烯容器。缓慢加入足量的SYBR Green II染色工作液浸没凝胶。用铝箔等盖住容器或将容器置于黑暗处使得染料避光。染色前没有必要洗掉凝胶上的尿素或甲醛。

4)室温轻摇凝胶。聚丙烯酰胺凝胶的最佳染色时间通常为10-40min,琼脂糖凝胶的通常为20-40min。凝胶厚度及琼脂糖或聚丙烯酰胺的比例不同,染色时间将有所不同。不需要脱色。染色液需保存在暗处(最好是冷藏)和重复使用3-4次。

【注】:用缓冲液制备的染色液置于4℃避光能放置1周或更久,置于室温避光能放3-4天。用水制备的染色液比缓冲液制备的稳定性差很多,建议24h内用完保证最大灵敏度。另外,用缓冲液(pH>8.0或pH<7.5)的缓冲液制备的染色液稳定性差很多,染色效率也会降低。

2.电泳前染色(预染)

1)配制成SYBR Green II预制凝胶

临灌胶前,按照每100ml凝胶中加入3-5µl SYBR Green II储存液(10,000× in DMSO)的比例加量。需注意到SYBR Green II热稳定性较差,不能在过热胶溶液中直接添加,需要等溶液冷却至50℃左右才能加染料。摇晃,震荡或翻转以保证染料充分混匀。

2)按照常规方法进行电泳。

三、观察和凝胶成像

3.1 使用300nm紫外透射光或254nm紫外反射光(灵敏度更高)照射染色凝胶。

3.2 为了最佳灵敏度,建议使用黑白胶片,可用专用的SYBR Green照相滤光片(Thermo fisher, #S7569)拍照。许多其他的黄色或绿色明胶或玻璃纸滤光片也能用来拍照,但绝大多数可能会减低灵敏度。EB染色凝胶拍照用的橙-红滤光片不适合于SYBR Green II染色凝胶。

3.3 用专用的SYBR Green照相滤光片(Thermo fisher, #S-7569)和Polaroid 667黑白胶片对凝胶进行拍照。染色凝胶基本无背景荧光,当检测少量RNA,允许长期胶片曝光。对于300nm透射,通常F-stop设置4.5时曝光1-2s足够。对于254nm反射(特别是手持灯),大约需要曝光1-1.5min以得到最大灵敏度。

相关产品

名称 规格         
    SYBR Green I Nucleic Acid Gel Stain (10,000× in DMSO) 核酸凝胶染料 100µl
SYBR Green II RNA Gel Stain (10,000× in DMSO) RNA凝胶染料 100µl
GoldView Nucleic Acid Gel Stain (10,000×) 核酸染料(10,000×) 1ml
MKRed Nucleic Acid Gel Stain (10,000× in Water) 核酸凝胶染料(效果同GelRed) 500µl
MKGreen Nucleic Acid Gel Stain (10,000× in Water) 核酸凝胶染料(效果同GelGreen)    500µl
Ethidium Bromide (EB)溴化乙锭(EB,粉末) 1g

SYBR Green II RNA Gel Stain (10,000× in DMSO) 核酸凝胶染料

SYBR Green II;GoldView;Acridine Orange 吖啶橙;GelRed; GelGreen;溴化乙锭(EB);SYBR Green I;

SYBR Green II是目前已知电泳凝胶中RNA检测最灵敏的染料之一,在琼脂糖或聚丙烯酰胺凝胶中最低检到100pg RNA或ssDNA的单一条带(使用254nm紫外反射光源照射,并用宝丽来667黑白胶片和SYBR滤光片拍照)。即使用300nm透射光也能检测到500pg RNA的单一条带。SYBR Green II的灵敏度明显强于溴化乙啶(EB)。标准琼脂糖迷你胶EB最低检出1.5ng单链核酸的单一条带(使用300nm透射光照射并用橙-红明胶滤光片拍照)。

SYBR Green II在变性琼脂糖/甲醛凝胶和聚丙烯酰胺/尿素凝胶中的检测灵敏度有点降低,然而仍优于EB。为了获得最大的检测灵敏度,琼脂糖/甲醛凝胶必须在EB染色前清洗数小时。相反,不做任何的清洗或脱色步骤,用SYBR Green II染色的琼脂糖/甲醛凝胶或聚丙烯酰胺/尿素凝胶能检测到1ng RNA单一条带(254nm反射照明)和4ng RNA单一条带(300nm透射照明)。SYBR Green II在RNA检测具备这一卓越灵敏度的特性归因于几个因素,包括优越的荧光量子产量、结合能力和荧光增强。

本品为溶于DMSO 的10,000×的SYBR Green II RNA核酸染料,可用于:1)Northern Blot、起始位点作图或cDNA制备前对RNA产物的小量分析;2)高分辨率变性梯度凝胶电泳(DGGE)后对5S rRNA迁移方式的观察;3)单链构象多态性(SSCP)中的DNA染色;4)PCR扩增前对DNA染色。

保存与运输方法

保存:-20°C避光干燥保存,1年有效。

运输:冰袋运输。

注意事项

1)   必须警告用户注意,目前尚无关于SYBR Green II 对人体的致突变性或毒性的数据。由于该染料与核酸结合,应当被看作潜在诱变剂,使用时要小心谨慎。在处理DMSO储存液时应特别小心,因DMSO能促进有机分子进入组织。强烈建议处理DMO储存液需戴双层手套。和所有的核酸染料一样,含SYBR Green II RNA核酸染料的溶液需先穿过活性炭再丢弃。活性炭之后必须焚烧来破坏染料。

2)   SYBR Green II可通过乙醇沉淀法从核酸中去除。异丙醇沉淀法去除效果稍差些。正丁醇萃取、氯仿萃取和酚萃取法无法有效去除该染料。

3)   先用EB染色的凝胶可接下来用SYBR Green II染色,根据电泳后染色(post-staining)的标准步骤操作。与直接用SYBR Green II染色相比较可能灵敏度有些降低。

4)   不要在玻璃器皿中稀释SYBR Green II储存液,因其会结合到玻璃上。在聚丙烯器皿中稀释储存液。

5)   SYBR Green II不会干扰酶反应。

6)   当用SYBR Green II染Northern或Southern Blot凝胶,建议在预杂交液和杂交液内加入0.1%-0.3% SDS。

7)   不建议用254nm紫外透射仪对凝胶拍照,因紫外光源的轮廓会出现在照片上。需要使用允许525nm光透过且排斥其他波长光的滤光片。

8)   为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

光谱特征

SYBR Green II RNA核酸染料可用常见的紫外反射和透射激发光源,以及手持式紫外灯检测。SYBR Green II的最大激发波长为497nm,但还有一个二级激发峰集中在254nm附近。与RNA结合的SYBR Green II的荧光发射集中在520nm。这些光谱特性让SYBR Green II适用于多种凝胶检测仪,从紫外反射(上紫外)和透射仪(下紫外)到氩离子激光器和水银灯激发的凝胶扫描仪。

使用方法

一、使用前准备工作

使用前将本品取出并回温至室温,使DMSO彻底解冻、溶液均一。于离心机上短暂离心确保所有溶液到管底。第一次使用时可将本品分装成多个小份后冻存,小份染料能更快溶解。

二、染色方法

1.电泳后染色(后染,推荐)

1)在非变性凝胶或变性聚丙烯酰胺/尿素或琼脂/甲醛凝胶上进行电泳。

【注】:其他凝胶基质未做测试,不确定染色效果如何。

2)稀释SYBR Green II储存液:对于非变性凝胶和变性聚丙烯酰胺/尿素凝胶,建议用TBE做1:10,000倍

稀释;对于变性琼脂糖/甲醛凝胶,建议用TBE做1:5,000倍稀释。

【注】:SYBR Green II染色对pH敏感,为获得最佳的灵敏度,应确认在染色温度下染色液的pH值在7.5-

8.0之间(pH8.0更佳)。

3)将凝胶小心的放入合适的容器中,比如聚丙烯容器。缓慢加入足量的SYBR Green II染色工作液浸没凝胶。用铝箔等盖住容器或将容器置于黑暗处使得染料避光。染色前没有必要洗掉凝胶上的尿素或甲醛。

4)室温轻摇凝胶。聚丙烯酰胺凝胶的最佳染色时间通常为10-40min,琼脂糖凝胶的通常为20-40min。凝胶厚度及琼脂糖或聚丙烯酰胺的比例不同,染色时间将有所不同。不需要脱色。染色液需保存在暗处(最好是冷藏)和重复使用3-4次。

【注】:用缓冲液制备的染色液置于4℃避光能放置1周或更久,置于室温避光能放3-4天。用水制备的染色液比缓冲液制备的稳定性差很多,建议24h内用完保证最大灵敏度。另外,用缓冲液(pH>8.0或pH<7.5)的缓冲液制备的染色液稳定性差很多,染色效率也会降低。

2.电泳前染色(预染)

1)配制成SYBR Green II预制凝胶

临灌胶前,按照每100ml凝胶中加入3-5µl SYBR Green II储存液(10,000× in DMSO)的比例加量。需注意到SYBR Green II热稳定性较差,不能在过热胶溶液中直接添加,需要等溶液冷却至50℃左右才能加染料。摇晃,震荡或翻转以保证染料充分混匀。

2)按照常规方法进行电泳。

三、观察和凝胶成像

3.1 使用300nm紫外透射光或254nm紫外反射光(灵敏度更高)照射染色凝胶。

3.2 为了最佳灵敏度,建议使用黑白胶片,可用专用的SYBR Green照相滤光片(Thermo fisher, #S7569)拍照。许多其他的黄色或绿色明胶或玻璃纸滤光片也能用来拍照,但绝大多数可能会减低灵敏度。EB染色凝胶拍照用的橙-红滤光片不适合于SYBR Green II染色凝胶。

3.3 用专用的SYBR Green照相滤光片(Thermo fisher, #S-7569)和Polaroid 667黑白胶片对凝胶进行拍照。染色凝胶基本无背景荧光,当检测少量RNA,允许长期胶片曝光。对于300nm透射,通常F-stop设置4.5时曝光1-2s足够。对于254nm反射(特别是手持灯),大约需要曝光1-1.5min以得到最大灵敏度。

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名称 规格         
     SYBR Green I Nucleic Acid Gel Stain (10,000× in DMSO) 核酸凝胶染料 100µl
SYBR Green II RNA Gel Stain (10,000× in DMSO) RNA凝胶染料 100µl
GoldView Nucleic Acid Gel Stain (10,000×) 核酸染料(10,000×) 1ml
MKRed Nucleic Acid Gel Stain (10,000× in Water) 核酸凝胶染料(效果同GelRed) 500µl
MKGreen Nucleic Acid Gel Stain (10,000× in Water) 核酸凝胶染料(效果同GelGreen)    500µl
Ethidium Bromide (EB)溴化乙锭(EB,粉末) 1g

7114-03-6 Methyl Green 甲基绿(乙基绿、 CI 42590)

Methyl Green甲基绿;DNA染料;Bismarck Brown俾斯麦棕;Pyronine G派诺宁G;CAS:7114-03-6;

产品名称

产品编号            CAS NO.     规格     
Methyl Green 甲基绿 MS4035-5G 7114-03-6 5g

Methyl Green 甲基绿 MS4035-25G 7114-03-6 25g

Methyl Green 甲基绿 MS4035-100G 7114-03-6 100g

甲基绿(Methyl Green)是碱性双阳离子染料,由三苯基甲烷构成。是DNA染料,选择性结合天然DNA的AT-富集区。在电泳用的酸性缓冲液中用作示踪染料。也在甲基绿-派洛宁方法中用于组织切片的DNA和RNA染色。甲基绿有助于区分细菌。也能用作一种组织染料,对组织细胞核和线粒体染色。经常与俾斯麦棕(Bismarck Brown)联合使用。

产品特性

同义名:C.I.42590; Ethyl Green; 4-[[4-(Dimethylamino) phenyl][4-(dimethyliminio) cyclohexa-2,5-dien-1- ylidene]methyl]- N-ethyl-N,N- bromide chloride, compound with zinc chloride;甲基绿氯化锌盐;乙基绿;
CAS NO:7114-03-6

EC NO:230-415-4
颜色索引:42590
级别:生物染色级(BR)
分子式:C27H35BrClN3· xZnCl2

分子量:653.24

外观:红色至极暗红色和红棕色和棕红色粉末

溶解性:溶于水、微溶于乙醇、不溶于乙醚

消光系数:E1%= 800-1100 (water)Lit.

熔点:>300°C (lit.)
λmax:629nm; 423nm (2nd);

保存与运输方法

保存:室温干燥保存,至少2年有效。

运输:室温运输。

注意事项

1)本品对光敏感,保存和使用过程中注意避光。

2)本品用作复染剂的常用工作浓度为0.1-0.5%。

3)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

甲基绿复染步骤(仅作参考)

1)0.1M醋酸钠缓冲液(pH 4.2)

称取1.36g醋酸钠三水合物(Mw 136.1)用100ml蒸馏水充分溶解,用浓冰醋酸调整pH到4.2.

2)甲基绿溶液(0.5%)

称取0.5g甲基绿用100ml 0.1M醋酸钠缓冲液(pH 4.2)充分溶解混匀。

3)染色步骤

IHC后切片入水;室温用甲基绿染色液染5min;用蒸馏水清洗(切片看起来蓝色);用95%乙醇快速脱水(10滴,切片变绿);用无水乙醇处理2次(每次10滴);用二甲苯或二甲苯替代物透明处理;用树脂封片剂封片;

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货号 名称 规格                
MS4035-1G Methyl Green 甲基绿 1g
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MS4072-1G Pyronin B 派洛宁B(吡罗红B) 1g
MS4005-25G          Crystal Violet, 90% 结晶紫 25g
MS4006-100ML Crystal Violet Stain Solution 结晶紫染色液 100ml
MM1052-50ML Methyl Green-Pyronin Staining Solution 甲基绿-派洛宁染色液    50ml

Light Green SF Yellowish 亮绿SF淡黄 Brilliant Blue R 亮蓝R CAS:5141-20-8

Light Green SF Yellowish 亮绿SF淡黄;Fast Green FCF 固绿FCF;Aniline Blue 苯胺蓝;Brilliant Blue R 亮蓝R;CAS:5141-20-8;

产品订购:

货号 产品名称 CAS NO.       规格              
MS4029-5G       Light Green SF Yellowish 亮绿SF淡黄   5141-20-8 5g
MS4029-25G Light Green SF Yellowish 亮绿SF淡黄 5141-20-8 25g

基本描述:

亮绿SF淡黄(Light Green SF Yellowish)是一种三芳基甲烷染料,一种细胞学复染剂,在Gomori’s一步法三色染色步骤中可替代苯胺蓝。是巴氏染色液(PAP stains)中一种重要的对比染色剂组分。

基本特性:

1)   CAS NO:5141-20-8

2)   化学名:N-Ethyl-N-[4-[[4-[ethyl[(3-sulfophenyl)methyl]amino]phenyl](4-sulfophenyl)methylene]-2,5- cyclohexadien-1-ylidene]-3-sulfobenzenemethanaminium inner salt disodium salt

3)  同义名:C.I. 42095; Light green SF (LGSF);Light Green SF (Yellowish); Fast green N; Light green 2G; Acid Green 5; 亮绿SF(淡黄);亮绿SF;亮绿S;亮绿2G;亮绿2GN;黄色浅绿SF;酸性绿5;

4)   分子式:C37H34N2Na2O9S3

5)   分子量:792.86 g/mol

6)   染料含量:≥80%

7)   外观:暗红色至紫色粉末

8)   溶解性:溶于H2O(10 mg/ml),微溶于乙醇

保存与运输方法

保存:室温干燥保存,5年有效。

运输:室温运输。

注意事项

1)   本品不是临床药物,只能用于科研用途,不能用于诊断或临床用途。

2)   为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

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货号 名称 规格           
MS4022-100MG              Nile Red尼罗红 100mg
MS4023-25G Aniline Blue (Alcohol Soluble) 苯胺蓝(醇溶) 25g
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MS4029-5G Light Green SF Yellowish 亮绿SF淡黄 5g
MS4002-10G Coomassie Brilliant Blue G250 考马斯亮蓝G250        10g
MS4003-10G Coomassie Brilliant Blue R250 考马斯亮蓝R250 10g

 

Fast Green FCF 固绿FCF

货号

产品名称 CAS NO.              规格                           

MS4028-5G           

Fast Green FCF 固绿FCF         2353-45-9 5g
MS4028-25G Fast Green FCF 固绿FCF 2353-45-9 25g

MS4028-50G Fast Green FCF 固绿FCF 2353-45-9 50g

MS4028-100G Fast Green FCF 固绿FCF 2353-45-9 100g

  基本描述:

固绿FCF(Fast Green FCF,CAS NO:2353-45-9)普遍用于组织和蛋白染色。在等电聚焦电泳(IEF)、非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(Native PAGE)和变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)中用作一种蛋白染色剂。与蛋白结合后,固绿FCF在近红外区域发射荧光(最大吸收波长625nm)。在酸提取DNA后碱性pH下用作一种组蛋白的定量染色剂。也可替代亮绿SF淡黄用于Masson三色染色法,因固绿FCF颜色更明亮且更不易褪色。还是一种食品染料。另外,固绿FCF还能用于亚硫酸盐测定,配制细菌培养基,用以鉴别大肠杆菌及其他乳糖发酵菌,培养分离粪便中的伤寒杆菌。

与亮蓝R相比,固绿FCF在宽广的蛋白浓度范围内都是线性的。电泳后,建议固定蛋白在凝胶上以得到最大的检测灵敏度。之后用0.1%固绿FCF(溶于30% (v/v)乙醇、10% (v/v)醋酸或7%(v/v)醋酸)染胶,于625nm下扫描染色胶。其检测灵敏度比亮蓝R约高30%。

基本特性:

1)   CAS NO:2353-45-9

2)   化学名:N-Ethyl-N-[4-[[4-[ethyl[(3-sulfophenyl)methyl]amino]phenyl](4-hydroxy-2-sulfophenyl)methylene] -2,5-cyclohexadien-1-ylidene]-3-sulfobenzenemethanaminium inner salt disodium salt

3)  同义名:C.I. 42053, Solid Green FCF, Food green 3, FD&C Green No. 3, F D and C Green No. 3, Green No. 3, NSC 379443; 快绿FCF;坚牢绿FCF;食品绿3;食用色素绿色3号;

4)   分子式:C37H34N2O10S3Na2 

5)   分子量:808.86 g/mol

6)   外观:红色至棕栗色粉末

7)   染料含量:≥90%

8)   溶解性:溶于H2O(1 mg/ml)

保存与运输方法

保存:室温干燥保存,5年有效。

运输:室温运输。

注意事项

1)   本品不是临床药物,只能用于科研用途,不能用于诊断或临床用途。

2)   为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

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货号 名称 规格             
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TO-PRO-1 Green Fluorescent Dye (5 mM in DMSO) 死细胞核染料

TO-PRO-1;TO-PRO-3; TOTO 1;TOTO 3;LDS 751;DRAQ 5™;Hexidium Iodide (HI) 碘化乙啶;核酸染色剂

产品信息

产品名称

产品编号 规格
TO-PRO-1 Green Fluorescent Dye (5 mM in DMSO) MX4226-200UL 200µl

产品描述

TO-PRO-1是一种优秀的细胞核和染色体复染剂,不能穿透活细胞,但能渗透进入具受损膜特征的死细胞,使其在细胞群内是一种有用的死细胞指示剂。TO-PRO-1在不含核酸的环境下基本无荧光,一旦与核酸结合产生明亮的绿色荧光,最大激发和发射波长分别为~515/531nm。

产品特性

1) CAS NO:157199-59-2

2) 分子量:645

3) 外观:溶液(5mM in DMSO)

4) Ex/Em:~515⁄531nm(与DNA结合)

5) 消光系数:62800 cm -1 M -1(与DNA结合)

6) 光量子产率:0.25(与DNA结合)

7) 化学结构式:

保存与运输方法

保存:≤-20°C避光干燥保存,1年有效。 

运输:冰袋运输。

注意事项

1)TO-PRO®是Thermo Fisher Scientific公司的注册商标。

2)荧光染料均存在淬灭问题,请尽量注意避光,以减缓荧光淬灭。

3)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

染色步骤

【注意】:以下步骤适用于大多数细胞类型。生长培养基、细胞密度、是否存在其它细胞类型都可能影响染色。玻璃表面残留的去污剂也可能影响许多有机体的染色结果,在含或不含细胞的溶液内都可能看到明亮的染色材料。

1)按照实验需求培养和处理细胞。

2)吸走培养基。

3)加入TO-PRO-1工作液(1-10 µM)到细胞内(或悬浮细胞,或贴壁细胞),染色15-60min。

【注①】于实验前将低温保存的储存液TO-PRO-1(5mM in DMSO)置于室温(25℃)或温育片刻使其充分融化,低速离心后,吸取适量储存液用HHBS缓冲液或其它生理缓冲液稀释到工作浓度。第一次使用储存液的时候可根据单次用量分装,≤-20°C避光干燥保存,降低反复冻融次数。

【注第一次实验务必尝试几种染色浓度,以确定最佳的工作浓度。高染料浓度很可能引起其它细胞结构的非特异染色。

4)吸走染色工作液,加入HHBS缓冲液或其它适宜的缓冲液。

5)用荧光显微镜(FITC滤片)来观察染色结果。

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货号 名称 规格​
MF0756-1G Ethidium Bromide (EB) 溴化乙锭 1g
MF0756-5ML EB (10 mg/ml in Water) EB水溶液(10 mg/ml) 5ml
MX4205-10MG Propidium Iodide 碘化丙啶(粉末) 10mg
MX4205-1ML Propidium Iodide (1mg/ml) 碘化丙啶(1mg/ml) 1ml
MX4212-5MG Ethidium Monoazide Bromide (EMA) 叠氮溴化乙锭 5mg
MX4213-1MG Ethidium Homodimer 1 (EthD-1) 溴乙啡锭二聚体1 1mg
MX4214-1MG Ethidium Homodimer 3 (EthD-3) 溴乙啡锭二聚体3 1mg
MX4215-1MG 7-AAD (7-Aminoactinomycin D) 7-氨基放线菌素 D 1mg
MX4217-1G Acridine Orange Hydrochloride 吖啶橙盐酸盐 1g
MX4220-1MG Propidium Monoazide (PMA) 叠氮溴化丙锭 1mg
MX4226-200UL TO-PRO-1 Green Fluorescent Dye (5 mM in DMSO) 200µl
MX4227-200UL TO-PRO-3 Far-red Fluorescent Dye (5 mM in DMSO) 200µl
MX4235-25MG LDS 751 Nucleic Acid Stain 核酸染色剂 25mg

TOTO 1 Green Fluorescent Dye (5 mM in DMSO) 死细胞核染料

TOTO 1;TO-PRO-3;TO-PRO-1; TOTO 3;LDS 751;DRAQ 5™;Hexidium Iodide (HI) 碘化乙啶;核酸染色剂

产品信息

产品名称

产品编号 规格
TOTO 1 Green Fluorescent Dye (5 mM in DMSO) MX4224-200UL 200µl

产品描述

TOTO 1是一种优秀的细胞核和染色体复染剂,不能穿透活细胞,但能渗透进入具受损膜特征的死细胞,使其在细胞群内是一种有用的死细胞指示剂。TOTO 1在不含核酸的环境下基本无荧光,一旦与核酸结合产生明亮的绿色荧光,最大激发和发射波长分别为~514/531nm。

产品特性

1) CAS NO:143413-84-7

2) 分子式:C49H58I4N6S2

3) 分子量:1302.78

4) 外观:溶液(5mM in DMSO)

5) Ex/Em:~514⁄531nm(与DNA结合)

6) 消光系数:117000 cm -1 M -1(与DNA结合)

7) 光量子产率:0.34(与DNA结合)

8) 化学结构式:

保存与运输方法

保存:≤-20°C避光干燥保存,1年有效。 

运输:冰袋运输。

注意事项

1)TOTO®是Thermo Fisher Scientific公司的注册商标。

2)荧光染料均存在淬灭问题,请尽量注意避光,以减缓荧光淬灭。

3)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

染色步骤

【注意】:以下步骤适用于大多数细胞类型。生长培养基、细胞密度、是否存在其它细胞类型都可能影响染色。玻璃表面残留的去污剂也可能影响许多有机体的染色结果,在含或不含细胞的溶液内都可能看到明亮的染色材料。

1)按照实验需求培养和处理细胞。

2)吸走培养基。

3)加入TOTO 1工作液(1-10 µM)到细胞内(或悬浮细胞,或贴壁细胞),染色15-60min。

【注①】于实验前将低温保存的储存液TOTO 1(5mM in DMSO)置于室温(25℃)或温育片刻使其充分融化,低速离心后,吸取适量储存液用HHBS缓冲液或其它生理缓冲液稀释到工作浓度。第一次使用储存液的时候可根据单次用量分装,≤-20°C避光干燥保存,降低反复冻融次数。

【注第一次实验务必尝试几种染色浓度,以确定最佳的工作浓度。高染料浓度很可能引起其它细胞结构的非特异染色。

4)吸走染色工作液,加入HHBS缓冲液或其它适宜的缓冲

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YOYO 1 Green Fluorescent Dye (5 mM in DMSO) 死细胞核染料

YOYO 1;TOTO 1;TO-PRO-3;TO-PRO-1; TOTO 3;LDS 751;DRAQ 5™;Hexidium Iodide (HI) 碘化乙啶;核酸染色剂

产品信息

产品名称

产品编号 规格
YOYO 1 Green Fluorescent Dye (5 mM in DMSO) MX4222-200UL 200µl

产品描述

YOYO 1是一种碳菁二聚体,发类似与FITC的绿色荧光。不具有细胞膜渗透性,与Cy5和罗丹明能明显区分开,用做细胞核复染剂和死细胞指示剂。YOYO 1在不含核酸的环境下基本无荧光,一旦与核酸结合产生明亮的绿色荧光,最大激发和发射波长分别为~491/508nm。

产品特性

1) CAS NO:143413-85-8

2) 分子式:C49H58I4N6O2

3) 分子量:1270.65

4) 外观:溶液(5mM in DMSO)

5) Ex/Em:~491⁄508nm(与DNA结合)

6) 消光系数:98900 cm -1 M -1(与DNA结合)

7) 光量子产率:0.52(与DNA结合)

8) 化学结构式:

保存与运输方法

保存:≤-20°C避光干燥保存,1年有效。 

运输:冰袋运输。

注意事项

1)YOYO®是Thermo Fisher Scientific公司的注册商标。

2)荧光染料均存在淬灭问题,请尽量注意避光,以减缓荧光淬灭。

3)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

染色步骤

【注意】:以下步骤适用于大多数细胞类型。生长培养基、细胞密度、是否存在其它细胞类型都可能影响染色。玻璃表面残留的去污剂也可能影响许多有机体的染色结果,在含或不含细胞的溶液内都可能看到明亮的染色材料。

1)按照实验需求培养和处理细胞。

2)吸走培养基和固定细胞。

3)加入YOYO 1工作液(1-10 µM)到细胞内(或悬浮细胞,或贴壁细胞),染色15-60min。

【注①】于实验前将低温保存的储存液YOYO 1(5mM in DMSO)置于室温(25℃)或温育片刻使其充分融化,低速离心后,吸取适量储存液用HHBS缓冲液或其它生理缓冲液稀释到工作浓度。第一次使用储存液的时候可根据单次用量分装,≤-20°C避光干燥保存,降低反复冻融次数。

【注第一次实验务必尝试几种染色浓度,以确定最佳的工作浓度。高染料浓度很可能引起其它细胞结构的非特异染色。

4)吸走染色工作液,加入HHBS缓冲液或其它适宜的缓冲液。

5)用荧光显微镜(FITC滤片)来观察染色结果。

相关产品

货号 名称 规格
MF0756-1G Ethidium Bromide (EB) 溴化乙锭 1g
MF0756-5ML EB (10 mg/ml in Water) EB水溶液(10 mg/ml) 5ml
MX4205-10MG Propidium Iodide 碘化丙啶(粉末) 10mg
MX4205-1ML Propidium Iodide (1mg/ml) 碘化丙啶(1mg/ml) 1ml
MX4212-5MG Ethidium Monoazide Bromide (EMA) 叠氮溴化乙锭 5mg
MX4213-1MG Ethidium Homodimer 1 (EthD-1) 溴乙啡锭二聚体1 1mg
MX4214-1MG Ethidium Homodimer 3 (EthD-3) 溴乙啡锭二聚体3 1mg
MX4215-1MG 7-AAD (7-Aminoactinomycin D) 7-氨基放线菌素 D 1mg
MX4217-1G Acridine Orange Hydrochloride 吖啶橙盐酸盐 1g
MX4220-1MG Propidium Monoazide (PMA) 叠氮溴化丙锭 1mg
MX4222-200UL YOYO 1 Green Fluorescent Dye (5 mM in DMSO) 200µl
MX4223-200UL YOYO 3 Far-red Fluorescent Dye (5 mM in DMSO) 200µl
MX4224-200UL TOTO 1 Green Fluorescent Dye (5 mM in DMSO) 200µl
MX4225-200UL TOTO 3 Far-red Fluorescent Dye (5 mM in DMSO) 200µl
MX4226-200UL TO-PRO-1 Green Fluorescent Dye (5 mM in DMSO) 200µl
MX4227-200UL TO-PRO-3 Far-red Fluorescent Dye (5 mM in DMSO) 200µl
MX4235-25MG LDS 751 Nucleic Acid Stain 核酸染色剂 25mg

Fast Green FCF 固绿FCF


描述

Fast Green FCF 固绿FCF

产品标签:Fast Green FCF 固绿FCF;Protein Stain 蛋白染料;Light Green SF Yellowish 亮绿SF淡黄;Brilliant Blue R 亮蓝R;CAS:2353-45-9;

 产品订购:

货号

产品名称 CAS NO.              规格                   价格(元)        

MS4028-5G           

Fast Green FCF 固绿FCF         2353-45-9 5g 120
MS4028-25G Fast Green FCF 固绿FCF 2353-45-9 25g

380

MS4028-50G Fast Green FCF 固绿FCF 2353-45-9 50g

720

MS4028-100G Fast Green FCF 固绿FCF 2353-45-9 100g

1400

 

基本描述:

固绿FCF(Fast Green FCF,CAS NO:2353-45-9)普遍用于组织和蛋白染色。在等电聚焦电泳(IEF)、非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(Native PAGE)和变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)中用作一种蛋白染色剂。与蛋白结合后,固绿FCF在近红外区域发射荧光(最大吸收波长625nm)。在酸提取DNA后碱性pH下用作一种组蛋白的定量染色剂。也可替代亮绿SF淡黄用于Masson三色染色法,因固绿FCF颜色更明亮且更不易褪色。还是一种食品染料。另外,固绿FCF还能用于亚硫酸盐测定,配制细菌培养基,用以鉴别大肠杆菌及其他乳糖发酵菌,培养分离粪便中的伤寒杆菌。

与亮蓝R相比,固绿FCF在宽广的蛋白浓度范围内都是线性的。电泳后,建议固定蛋白在凝胶上以得到最大的检测灵敏度。之后用0.1%固绿FCF(溶于30% (v/v)乙醇、10% (v/v)醋酸或7%(v/v)醋酸)染胶,于625nm下扫描染色胶。其检测灵敏度比亮蓝R约高30%。

 

基本特性:

1)   CAS NO:2353-45-9

2)   化学名:N-Ethyl-N-[4-[[4-[ethyl[(3-sulfophenyl)methyl]amino]phenyl](4-hydroxy-2-sulfophenyl)methylene] -2,5-cyclohexadien-1-ylidene]-3-sulfobenzenemethanaminium inner salt disodium salt

3)  同义名:C.I. 42053, Solid Green FCF, Food green 3, FD&C Green No. 3, F D and C Green No. 3, Green No. 3, NSC 379443; 快绿FCF;坚牢绿FCF;食品绿3;食用色素绿色3号;

4)   分子式:C37H34N2O10S3Na2 

5)   分子量:808.86 g/mol

6)   外观:红色至棕栗色粉末

7)   染料含量:≥90%

8)   溶解性:溶于H2O(1 mg/ml)

9)   化学结构式:

保存与运输方法

保存:室温干燥保存,5年有效。

运输:室温运输。

注意事项

1)   本品不是临床药物,只能用于科研用途,不能用于诊断或临床用途。

2)   为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

相关产品

货号 名称 规格             
MS4022-100MG        Nile Red 尼罗红 100mg
MS4023-25G Aniline Blue (Alcohol Soluble) 苯胺蓝(醇溶) 25g
MS4024-25G Aniline Blue (Water Soluble) 苯胺蓝(水溶) 25g
MS4027-5G Toluidine Blue O 甲苯胺蓝O  5g
MS4028-5G Fast Green FCF 固绿FCF 5g
MS4029-5G Light Green SF Yellowish 亮绿SF淡黄 5g
MS4002-10G Coomassie Brilliant Blue G250 考马斯亮蓝G250            10g
MS4003-10G Coomassie Brilliant Blue R250 考马斯亮蓝R250 10g

 

 

 

Fast Green FCF 固绿FCF


描述

Fast Green FCF 固绿FCF

产品标签:Fast Green FCF 固绿FCF;Protein Stain 蛋白染料;Light Green SF Yellowish 亮绿SF淡黄;Brilliant Blue R 亮蓝R;CAS:2353-45-9;

 产品订购:

货号

产品名称 CAS NO.              规格                   价格(元)        

MS4028-5G           

Fast Green FCF 固绿FCF         2353-45-9 5g 120
MS4028-25G Fast Green FCF 固绿FCF 2353-45-9 25g

380

MS4028-50G Fast Green FCF 固绿FCF 2353-45-9 50g

720

MS4028-100G Fast Green FCF 固绿FCF 2353-45-9 100g

1400

 

基本描述:

固绿FCF(Fast Green FCF,CAS NO:2353-45-9)普遍用于组织和蛋白染色。在等电聚焦电泳(IEF)、非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(Native PAGE)和变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)中用作一种蛋白染色剂。与蛋白结合后,固绿FCF在近红外区域发射荧光(最大吸收波长625nm)。在酸提取DNA后碱性pH下用作一种组蛋白的定量染色剂。也可替代亮绿SF淡黄用于Masson三色染色法,因固绿FCF颜色更明亮且更不易褪色。还是一种食品染料。另外,固绿FCF还能用于亚硫酸盐测定,配制细菌培养基,用以鉴别大肠杆菌及其他乳糖发酵菌,培养分离粪便中的伤寒杆菌。

与亮蓝R相比,固绿FCF在宽广的蛋白浓度范围内都是线性的。电泳后,建议固定蛋白在凝胶上以得到最大的检测灵敏度。之后用0.1%固绿FCF(溶于30% (v/v)乙醇、10% (v/v)醋酸或7%(v/v)醋酸)染胶,于625nm下扫描染色胶。其检测灵敏度比亮蓝R约高30%。

 

基本特性:

1)   CAS NO:2353-45-9

2)   化学名:N-Ethyl-N-[4-[[4-[ethyl[(3-sulfophenyl)methyl]amino]phenyl](4-hydroxy-2-sulfophenyl)methylene] -2,5-cyclohexadien-1-ylidene]-3-sulfobenzenemethanaminium inner salt disodium salt

3)  同义名:C.I. 42053, Solid Green FCF, Food green 3, FD&C Green No. 3, F D and C Green No. 3, Green No. 3, NSC 379443; 快绿FCF;坚牢绿FCF;食品绿3;食用色素绿色3号;

4)   分子式:C37H34N2O10S3Na2 

5)   分子量:808.86 g/mol

6)   外观:红色至棕栗色粉末

7)   染料含量:≥90%

8)   溶解性:溶于H2O(1 mg/ml)

9)   化学结构式:

保存与运输方法

保存:室温干燥保存,5年有效。

运输:室温运输。

注意事项

1)   本品不是临床药物,只能用于科研用途,不能用于诊断或临床用途。

2)   为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

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