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产品信息

产品描述

凝胶迁移实验有称凝胶阻滞实验或电泳迁移率实验（EMSA，electrophoretic mobility shift assay），是一种用于蛋白与核算相互作用的技术。最初是用于转录因子与启动子相互作用的验证性实验，也可应用与蛋白-DNA、蛋白-RNA互作研究。

本试剂盒包括 EMSA PAGE 凝胶制备所需全套试剂，只需自备蒸馏水，即可制备高质量各种浓度的凝胶，方便、快捷。

产品组分

保存与运输方法

保存：4℃~室温避光保存，各组分保存详见瓶子标签。1年稳定。

运输：室温运输。

注意事项

1） PAGE胶凝固剂配制成10%溶液后，应分装成小份-20℃保存，通常6个月有效。同时尽量减少室温存放时间，使用完立即放回冰箱，防止失效。若发现凝胶聚合时间延长，应考虑更换，使用另一份-20℃保存的10%溶液。

2） 配制PAGE胶的过程中，尤其是液体混匀步骤，应尽量避免气泡的产生。

3） 在分离胶上层加蒸馏水时要小心操作，加水速度不能过快。

4） 30% Acr-Bis具轻微神经毒性，请小心操作，并且注意有效防护以避免直接接触人体。

5） 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

操作步骤

1） 配制10% PAGE胶凝固溶液：使用前请将0.5g PAGE胶凝固剂用5ml蒸馏水充分溶解，配制成10% PAGE胶凝固剂溶液，将溶液分装置于-20℃保存，通常半年有效。频繁使用可置于4℃保存，通常2周有效。

2） 根据目的蛋白分子量大小选择合适的凝胶浓度，凝胶浓度配制方法参考下表（表1）。

凝胶配制：

1. a)将不同体积的蒸馏水、30%acr、凝胶缓冲液和甘油加入到离心管中混合。
2. b)加入10% PAGE胶凝固溶液和PAGE胶促凝剂，立即涡旋混匀 5-10s，以使溶液充分混匀。
3. c)在凝胶模具中迅速灌入适量凝胶溶液。
4. d)将梳子插入凝胶内，避免产生气泡。
5. e)静置，等凝胶聚合后，小心地拔出梳子，以免破坏加样孔。
6. f)进行电泳操作。

3） 电泳

将电泳槽放入4℃或冰水浴中，加入电泳缓冲液，按照 10V/cm的电压预电泳60min，将样品加入点样孔后 按照 10V/cm的电压电泳。确保胶的温度不超过 30°C，在电泳槽外加上冰块进行降温。电泳至 EMSA/Gel-Shift上样缓冲液中的蓝色染料溴酚蓝至胶的下缘 1/4 处，停止电泳。

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