DEPC-treated Water (DNase、RNase free) DEPC水(无DNase、RNase )


描述

DEPC-treated Water (DNase、RNase free)

产品信息:

货号 产品名称 规格              价格(元) 
MF0404-100ML    DEPC-treated Water (DNase、RNase free) DEPC水(无DNase、RNase )    100ml 70
MF0404-500ML DEPC-treated Water (DNase、RNase free) DEPC水(无DNase、RNase ) 500ml 120

产品描述

DEPC水(DEPC-treated Water)是指经焦碳酸二乙酯(Diethyl Pyrocarbonate, DEPC)处理过且高压灭菌消毒的超纯去离子水,经检测不含RNase、DNase和蛋白酶。DEPC水可用于cDNA合成、体外转录、RNA提取等对核酸酶敏感的分子生物学实验。 

保存与运输方法

保存:室温保存,1年有效。

运输:室温运输。

注意事项

1)   DEPC水是经DEPC处理过的水,基本不含DEPC,99.99%以上都是水,且无RNase和DNase污染。如果要求100%不含DEPC的无RNase和DNase污染的水,可选择用中空纤维超滤柱处理得到的DNase/RNase- Free Water(货号:MF0416-100ML)。

2)   RNase无处不在,操作过程中一不小心很容易引起RNase的污染,导致RNA被降解。为此,不仅RNA实验中要对操作台面和仪器以及枪头、离心管等固相表面RNase进行清除,使用固相RNase清除剂(货号:MF0406-100ML)。而且也要对实验中用到的溶液进行RNase清除,使用液相RNase清除剂(货号:MF0407-1.5ML)。另外,操作过程中必须要戴好一次性手套和穿好实验服。

3)  为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

相关产品

货号 名称 规格        
MS5513-10ML         Diethyl Pyrocarbonate (DEPC) 焦碳酸二乙酯 10ml
MF0404-500ML DEPC-treated Water (DNase、RNase free) DEPC水(无DNase、RNase )     500ml
MF0406-100ML Surface RNase Remover固相RNase清除剂 100ml
MF0407-1.5ML Solution RNase Remover液相RNase清除剂 1.5ml
MF0409-50ML RNATector Stabilization Solution RNA稳定保存液 50ml
MF0410-100ML RNATector-ICE Frozen Tissue Transition Solution冰冻组织RNA稳定保存液 100ml
MF0416-100ML DNase/RNase-Free Water 100ml

 

 

DNase I Solution (RNase & Protease-free) 脱氧核糖核酸酶I溶液(无RNase,蛋白酶)


描述

DNase I Solution (RNase & Protease-free)

脱氧核糖核酸酶I溶液(无RNase&蛋白酶)

关键词:

Deoxyribonucleate 5 –Oligonucleotidohydrolase,5′-寡核苷酸-水解酶,Deoxyribonuclease I (DNase I) from Bovine Pancreas,EC No: 3.1.21.1,CAS NO:9003-98-9

订购信息【现货供应】

产品名称 产品编号 规格             储存           价格(元)           
  DNase I Solution (RNase & Protease-free)       

  脱氧核糖核酸酶I溶液(无RNase &蛋白酶)

MF0405-200U          200U -20ºC 198
MF0405-1000U 1000U -20ºC 848

【温馨提示】:蛋白样品制备中核酸酶的降解推荐使用全能型的全能核酸酶Benzonase Nuclease,点击此处了解全能核酸酶的亮点在哪?

产品描述

脱氧核糖核酸酶I,英文Deoxyribonuclease I,缩写DNase I,在大多数细胞和组织中都能发现的一种核酸内切酶,偏好切割邻近嘧啶的磷酸二酯键,产生5’端为磷酸基团、3’端为羟基的多聚核苷酸,平均消化产物最小为多聚四核苷酸。Mg2+存在条件下,DNase I可随机识别和切断DNA任一条链上的任意位点;而在Mn2+存在条件下,DNase I识别DNA的两条链并在几乎相同的位点进行切割。DNase I可水解多种形式DNA,如单链DNA、双链DNA,甚至染色质(其切割速率受组蛋白影响)。

脱氧核糖核酸酶I,英文Deoxyribonuclease I,缩写DNase I,最早从胰腺中分离而来,至今哺乳动物胰腺也是最主要的来源之一。DNase I以两对二硫键结合的多种糖蛋白混合形式存在。最佳的工作范围是pH 7-8,DNase的活性依赖于Ca2+,并可被二价金属离子如Co2+,Mn2+,Zn2+等激活。5mM Ca2+可保护酶使其不被水解,而0.1mM Ca2+可使酶失活速率降至原来的1/2。

本品是即用型溶液形式的DNase I,不含RNase和蛋白酶,适用于各种RNA处理。另外还提供实验所需的反应缓冲液和终止液,节省时间且用起来更方便。

产品应用

◇   制备不含DNA的RNA样本;

◇   RT-PCR反应前RNA样本内基因组DNA等可能存在DNA污染的去除;

◇   T7,T3,SP6等RNA聚合酶催化的体外RNA转录后DNA模板的去除;

◇   DNase I足迹法(DNase I footprinting)研究DNA-蛋白质相互作用;

◇   缺口平移法标记探针用;

◇   制备随机DNA片段文库;

◇   TUNEL细胞凋亡检测中用于剪切DNA制备阳性对照;

产品包装

组分编号           组分名称

货号(规格)

MF0405-200U       MF0405-1000U    
MF0405-A DNase I Solution (RNase & Protease-free)       200U 1000U
MF0405-B 10×Reaction Buffer 200μl 1ml
MF0405-C 10×Stop Solution 200μl 1ml

保存与运输方法

保存:-20℃冻存,1年稳定。

运输:冰袋运输。

注意事项

1)   本DNase I的储存缓冲液为50mM Tris-acetate(pH 7.5),10mM CaCl2,50%(v/v) glycerol。如需对其进行稀释,则使用本储存缓冲液进行稀释。

2)   酶的使用过程中需放在冰盒或冰浴内,使用结束立即放回-20℃保存。

3)  为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法

一、RT-PCR反应前RNA样本内DNA污染的去除

1.1    DNA模板经核酸内切酶线性化,用酚/氯仿和氯仿/异丙醇提取DNA,用乙醇沉淀后,溶于适量无菌去离子水中。

1.2    往一个RNase-free EP管内依次加入下列试剂:

RNA样本 1μg                
10×Reaction Buffer 1μl
用DEPC-treated Water补充    至9μl
DNase I (1U/μl) 1μl

【注意】:如果需要处理较大量的RNA样品,可按比例放大上述反应体系。条件许可下最好往体系内加入适量RNase抑制剂(货号:MF0218-2KU)以防止RNA降解。

1.3    37℃孵育30min。

1.4    往上述体系内加入1μl 10× Stop Solution使其终浓度为1×,混匀。之后65℃孵育10min使DNase I失活。【注意】:一定要先加入10× Stop Solution,然后再加热失活RNase I,否则先加热可能引起RNA被降解。

1.5    加热处理后的RNA样品即可直接用作RT-PCR反应用的模板。

二、体外RNA反转录后模板DNA的去除

2.1 每个含有0.5μg模板DNA的反转录体系中加入1U DNase I,某些情况下模板DNA完全消化所需的DNase I需通过实验来摸索。

2.2 37℃孵育15min。

2.3 酚/氯仿抽提失活DNase I。

三、其他用途请参考上述方法或参考文献等进行。

相关产品

货号 名称 规格          
MF0402-10MG       Deoxyribonuclease I (DNase I) from Bovine Pancreas, ≥500 units/mg protein       10MG
MF0401-15KU Deoxyribonuclease I (DNase I) from Bovine Pancreas, ≥2,000 units/mg protein 15KU
MF0405-200U DNase I Solution (RNase & Protease-free) 脱氧核糖核酸酶I溶液 200U
MF0203-100MG Ribonuclease A (RNase A) from Bovine Pancreas 100mg
MP1509-25KU Benzonase Nuclease 全能核酸酶 25KU
MF0201-100MG Proteinase K, Molecular Biology Grade蛋白酶K 100mg
MF0218-2KU RNase Inhibitor (40U/µl), Murine小鼠RNA酶抑制剂 2KU
MF0404-500ML DEPC-treated Water (DNase、RNase free) DEPC水(无DNase、RNase )  500ml

 

 

DNase I Solution (RNase & Protease-free) 脱氧核糖核酸酶I溶液(无RNase,蛋白酶)


描述

DNase I Solution (RNase & Protease-free)

脱氧核糖核酸酶I溶液(无RNase&蛋白酶)

关键词:

Deoxyribonucleate 5 –Oligonucleotidohydrolase,5′-寡核苷酸-水解酶,Deoxyribonuclease I (DNase I) from Bovine Pancreas,EC No: 3.1.21.1,CAS NO:9003-98-9

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  DNase I Solution (RNase & Protease-free)       

  脱氧核糖核酸酶I溶液(无RNase &蛋白酶)

MF0405-200U          200U -20ºC 198
MF0405-1000U 1000U -20ºC 848

【温馨提示】:蛋白样品制备中核酸酶的降解推荐使用全能型的全能核酸酶Benzonase Nuclease,点击此处了解全能核酸酶的亮点在哪?

产品描述

脱氧核糖核酸酶I,英文Deoxyribonuclease I,缩写DNase I,在大多数细胞和组织中都能发现的一种核酸内切酶,偏好切割邻近嘧啶的磷酸二酯键,产生5’端为磷酸基团、3’端为羟基的多聚核苷酸,平均消化产物最小为多聚四核苷酸。Mg2+存在条件下,DNase I可随机识别和切断DNA任一条链上的任意位点;而在Mn2+存在条件下,DNase I识别DNA的两条链并在几乎相同的位点进行切割。DNase I可水解多种形式DNA,如单链DNA、双链DNA,甚至染色质(其切割速率受组蛋白影响)。

脱氧核糖核酸酶I,英文Deoxyribonuclease I,缩写DNase I,最早从胰腺中分离而来,至今哺乳动物胰腺也是最主要的来源之一。DNase I以两对二硫键结合的多种糖蛋白混合形式存在。最佳的工作范围是pH 7-8,DNase的活性依赖于Ca2+,并可被二价金属离子如Co2+,Mn2+,Zn2+等激活。5mM Ca2+可保护酶使其不被水解,而0.1mM Ca2+可使酶失活速率降至原来的1/2。

本品是即用型溶液形式的DNase I,不含RNase和蛋白酶,适用于各种RNA处理。另外还提供实验所需的反应缓冲液和终止液,节省时间且用起来更方便。

产品应用

◇   制备不含DNA的RNA样本;

◇   RT-PCR反应前RNA样本内基因组DNA等可能存在DNA污染的去除;

◇   T7,T3,SP6等RNA聚合酶催化的体外RNA转录后DNA模板的去除;

◇   DNase I足迹法(DNase I footprinting)研究DNA-蛋白质相互作用;

◇   缺口平移法标记探针用;

◇   制备随机DNA片段文库;

◇   TUNEL细胞凋亡检测中用于剪切DNA制备阳性对照;

产品包装

组分编号           组分名称

货号(规格)

MF0405-200U       MF0405-1000U    
MF0405-A DNase I Solution (RNase & Protease-free)       200U 1000U
MF0405-B 10×Reaction Buffer 200μl 1ml
MF0405-C 10×Stop Solution 200μl 1ml

保存与运输方法

保存:-20℃冻存,1年稳定。

运输:冰袋运输。

注意事项

1)   本DNase I的储存缓冲液为50mM Tris-acetate(pH 7.5),10mM CaCl2,50%(v/v) glycerol。如需对其进行稀释,则使用本储存缓冲液进行稀释。

2)   酶的使用过程中需放在冰盒或冰浴内,使用结束立即放回-20℃保存。

3)  为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法

一、RT-PCR反应前RNA样本内DNA污染的去除

1.1    DNA模板经核酸内切酶线性化,用酚/氯仿和氯仿/异丙醇提取DNA,用乙醇沉淀后,溶于适量无菌去离子水中。

1.2    往一个RNase-free EP管内依次加入下列试剂:

RNA样本 1μg                
10×Reaction Buffer 1μl
用DEPC-treated Water补充    至9μl
DNase I (1U/μl) 1μl

【注意】:如果需要处理较大量的RNA样品,可按比例放大上述反应体系。条件许可下最好往体系内加入适量RNase抑制剂(货号:MF0218-2KU)以防止RNA降解。

1.3    37℃孵育30min。

1.4    往上述体系内加入1μl 10× Stop Solution使其终浓度为1×,混匀。之后65℃孵育10min使DNase I失活。【注意】:一定要先加入10× Stop Solution,然后再加热失活RNase I,否则先加热可能引起RNA被降解。

1.5    加热处理后的RNA样品即可直接用作RT-PCR反应用的模板。

二、体外RNA反转录后模板DNA的去除

2.1 每个含有0.5μg模板DNA的反转录体系中加入1U DNase I,某些情况下模板DNA完全消化所需的DNase I需通过实验来摸索。

2.2 37℃孵育15min。

2.3 酚/氯仿抽提失活DNase I。

三、其他用途请参考上述方法或参考文献等进行。

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货号 名称 规格          
MF0402-10MG       Deoxyribonuclease I (DNase I) from Bovine Pancreas, ≥500 units/mg protein       10MG
MF0401-15KU Deoxyribonuclease I (DNase I) from Bovine Pancreas, ≥2,000 units/mg protein 15KU
MF0405-200U DNase I Solution (RNase & Protease-free) 脱氧核糖核酸酶I溶液 200U
MF0203-100MG Ribonuclease A (RNase A) from Bovine Pancreas 100mg
MP1509-25KU Benzonase Nuclease 全能核酸酶 25KU
MF0201-100MG Proteinase K, Molecular Biology Grade蛋白酶K 100mg
MF0218-2KU RNase Inhibitor (40U/µl), Murine小鼠RNA酶抑制剂 2KU
MF0404-500ML DEPC-treated Water (DNase、RNase free) DEPC水(无DNase、RNase )  500ml

 

 

DEPC-treated Water (DNase、RNase free) DEPC水(无DNase、RNase )


描述

DEPC-treated Water (DNase、RNase free)

产品信息:

货号 产品名称 规格              价格(元) 
MF0404-100ML    DEPC-treated Water (DNase、RNase free) DEPC水(无DNase、RNase )    100ml 100
MF0404-500ML DEPC-treated Water (DNase、RNase free) DEPC水(无DNase、RNase ) 500ml 160

产品描述

DEPC水(DEPC-treated Water)是指经焦碳酸二乙酯(Diethyl Pyrocarbonate, DEPC)处理过且高压灭菌消毒的超纯去离子水,经检测不含RNase、DNase和蛋白酶。DEPC水可用于cDNA合成、体外转录、RNA提取等对核酸酶敏感的分子生物学实验。 

保存与运输方法

保存:室温保存,1年有效。

运输:室温运输。

注意事项

1)   DEPC水是经DEPC处理过的水,基本不含DEPC,99.99%以上都是水,且无RNase和DNase污染。如果要求100%不含DEPC的无RNase和DNase污染的水,可选择用中空纤维超滤柱处理得到的DNase/RNase- Free Water(货号:MF0416-100ML)。

2)   RNase无处不在,操作过程中一不小心很容易引起RNase的污染,导致RNA被降解。为此,不仅RNA实验中要对操作台面和仪器以及枪头、离心管等固相表面RNase进行清除,使用固相RNase清除剂(货号:MF0406-100ML)。而且也要对实验中用到的溶液进行RNase清除,使用液相RNase清除剂(货号:MF0407-1.5ML)。另外,操作过程中必须要戴好一次性手套和穿好实验服。

3)  为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

相关产品

货号 名称 规格        
MS5513-10ML         Diethyl Pyrocarbonate (DEPC) 焦碳酸二乙酯 10ml
MF0404-500ML DEPC-treated Water (DNase、RNase free) DEPC水(无DNase、RNase )     500ml
MF0406-100ML Surface RNase Remover固相RNase清除剂 100ml
MF0407-1.5ML Solution RNase Remover液相RNase清除剂 1.5ml
MF0409-50ML RNATector Stabilization Solution RNA稳定保存液 50ml
MF0410-100ML RNATector-ICE Frozen Tissue Transition Solution冰冻组织RNA稳定保存液 100ml
MF0416-100ML DNase/RNase-Free Water 100ml

 

 

Deoxyribonuclease I (DNase I) from Bovine Pancreas,≥500 units/mg protein 脱氧核糖核酸酶I,来源于牛胰腺


描述

DNase I from Bovine Pancreas, ≥500 units/mg protein

脱氧核糖核酸酶I (DNase I),来源于牛胰腺

关键词:

Deoxyribonucleate 5 –Oligonucleotidohydrolase,5′-寡核苷酸-水解酶,Deoxyribonuclease I (DNase I) from Bovine Pancreas,EC No: 3.1.21.1,CAS NO:9003-98-9

订购信息【现货供应】

产品名称 产品编号 规格 储存      价格    
Deoxyribonuclease I (DNase I) from Bovine Pancreas, ≥500 units/mg protein   

脱氧核糖核酸酶I,来源于牛胰腺

MF0402-10MG    10MG   -20ºC 250
MF0402-50MG 50MG -20ºC 680

产品描述

脱氧核糖核酸酶I,英文Deoxyribonuclease I,缩写DNase I,在大多数细胞和组织中都能发现的一种核酸内切酶,偏好切割邻近嘧啶的磷酸二酯键,产生5’端为磷酸基团、3’端为羟基的多聚核苷酸,平均消化产物最小为多聚四核苷酸。Mg2+存在条件下,DNase I可随机识别和切断DNA任一条链上的任意位点;而在Mn2+存在条件下,DNase I识别DNA的两条链并在几乎相同的位点进行切割。DNase I可水解多种形式DNA,如单链DNA、双链DNA,甚至染色质(其切割速率受组蛋白影响)。

脱氧核糖核酸酶I,英文Deoxyribonuclease I,缩写DNase I,最早从胰腺中分离而来,至今哺乳动物胰腺也是最主要的来源之一。DNase I以两对二硫键结合的多种糖蛋白混合形式存在。最佳的工作范围是pH 7-8,DNase的活性依赖于Ca2+,并可被二价金属离子如Co2+,Mn2+,Zn2+等激活。5mM Ca2+可保护酶使其不被水解,而0.1mM Ca2+可使酶失活速率降至原来的1/2。

本品来自牛胰腺,亲和色谱纯化制备所得,常用于去除蛋白或RNA样品中的DNA,或者用于向DNA中引入缺口使标记碱基插入DNA。本品以冻干粉形式供应,比活≥500 Kunit Units/mg蛋白。

产品特性

1)   CAS NO:9003-98-9

2)   分子量:~31 kDa

3)   同义名:DNase I, Deoxyribonucleate 5’-oligonucleotidohydrolase, Deoxyribonuclease A 脱氧核糖核酸 5′-寡核苷酸水解酶,脱氧核糖核酸酶A

4)   比活力:≥500 Kunit Units/mg protein

5)   活力定义:在50µl含40mM Tris-HCl, pH8.0,2.5 mM MgSO4,1mM CaCl2的反应缓冲体系中,37℃,10min内完全降解1µg λ-DNA所需的酶量即为一个活力单位。此反应条件下得到的一个单位DNase活力约等于一个Kuntiz unit。

6)   激活剂:多种二价金属离子如Mg2+、Mn2+、 Ca2+、Co2+、and Zn2+

7)   抑制剂:EGTA,EDTA,盐离子浓度(>100mM)都能降低DNase活性

8)   热失活:含终止溶液(20mM EGTA,pH 8.0)内65℃,处理10min

9)   溶解性:溶于缓冲液(≥1mg/ml in 20mM Tris-HCl(pH 7.5), 1mM MgCl2, 50% 甘油)

保存与运输方法

保存:冻干粉-20℃干燥冻存,至少3年稳定。

运输:冰袋运输。

使用方法

一、   储存液制备

将低温保存的本品置于室温回温至少20min,低速短时离心后,加入适量缓冲液配制成至少≥1mg/ml储存液(如:20mM Tris-HCl(pH 7.5), 1mM MgCl2, 50% 甘油),根据一定用量分装置于-20℃保存,至少1年稳定。

二、   反应缓冲液制备

建议1×反应缓冲液:40mM Tris-HCl(pH 8.0), 2.5mM (up to 10mM) MgSO4,1mM (up to 10mM) CaCl2

【注意】:当起始原料含EGTA,EDTA,其他螯合剂,和/或高浓度盐离子,此时反应缓冲液需更高浓度的Mg2+和Ca2+。

三、使用步骤(作为参考,具体实验可做适当调整)

2.1 往一个RNase-free PCR管内加入:1µg RNA样本;49 µl 1×反应缓冲液;1 µl DNase I, 1 unit/ml;【注意:酶的实际比活力请见产品标签】,混匀。

2.2 37℃孵育10-15min。【注意:消化时间不要超过15min或消化温度不要高于37℃,否则残留的RNase A污染可能会开始降解RNA】

2.3 加入1µl终止液(20mM EGTA,pH 8.0)结合Ca2+和Mg2+,之后于65-70℃失活10min,终止反应。【注意:必须在热失活之前加入终止液】

注意事项

1)  在不同的反应缓冲体系内,用来完全消化一定量DNA所需的DNase I量不同,请根据具体的工作体系或实验经验来决定。【注意:盐浓度>100mM会降低DNase I活性】

2)  为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

相关产品:

货号 名称 规格
MF0402-10MG      Deoxyribonuclease I (DNase I) from Bovine Pancreas, ≥500 units/mg protein 10MG       
MF0401-15KU Deoxyribonuclease I (DNase I) from Bovine Pancreas, ≥2,000 units/mg protein    15KU
MF0203-100MG Ribonuclease A (RNase A) from Bovine Pancreas 100mg
MP1509-25KU Benzonase Nuclease全能核酸酶 25KU
MF0201-100MG Proteinase K, Molecular Biology Grade蛋白酶K 100mg

注意事项

为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

 

 

Deoxyribonuclease I (DNase I) from Bovine Pancreas,≥500 uns/mg protein 脱氧核糖核酸酶I,来源于牛胰腺


描述

DNase I from Bovine Pancreas, ≥500 units/mg protein

脱氧核糖核酸酶I (DNase I),来源于牛胰腺

关键词:

Deoxyribonucleate 5 –Oligonucleotidohydrolase,5′-寡核苷酸-水解酶,Deoxyribonuclease I (DNase I) from Bovine Pancreas,EC No: 3.1.21.1,CAS NO:9003-98-9

订购信息【现货供应】

产品名称 产品编号 规格 储存      价格    
Deoxyribonuclease I (DNase I) from Bovine Pancreas, ≥500 units/mg protein   

脱氧核糖核酸酶I,来源于牛胰腺

MF0402-10MG    10MG   -20ºC 250
MF0402-50MG 50MG -20ºC 680

产品描述

脱氧核糖核酸酶I,英文Deoxyribonuclease I,缩写DNase I,在大多数细胞和组织中都能发现的一种核酸内切酶,偏好切割邻近嘧啶的磷酸二酯键,产生5’端为磷酸基团、3’端为羟基的多聚核苷酸,平均消化产物最小为多聚四核苷酸。Mg2+存在条件下,DNase I可随机识别和切断DNA任一条链上的任意位点;而在Mn2+存在条件下,DNase I识别DNA的两条链并在几乎相同的位点进行切割。DNase I可水解多种形式DNA,如单链DNA、双链DNA,甚至染色质(其切割速率受组蛋白影响)。

脱氧核糖核酸酶I,英文Deoxyribonuclease I,缩写DNase I,最早从胰腺中分离而来,至今哺乳动物胰腺也是最主要的来源之一。DNase I以两对二硫键结合的多种糖蛋白混合形式存在。最佳的工作范围是pH 7-8,DNase的活性依赖于Ca2+,并可被二价金属离子如Co2+,Mn2+,Zn2+等激活。5mM Ca2+可保护酶使其不被水解,而0.1mM Ca2+可使酶失活速率降至原来的1/2。

本品来自牛胰腺,亲和色谱纯化制备所得,常用于去除蛋白或RNA样品中的DNA,或者用于向DNA中引入缺口使标记碱基插入DNA。本品以冻干粉形式供应,比活≥500 Kunit Units/mg蛋白。

产品特性

1)   CAS NO:9003-98-9

2)   分子量:~31 kDa

3)   同义名:DNase I, Deoxyribonucleate 5’-oligonucleotidohydrolase, Deoxyribonuclease A 脱氧核糖核酸 5′-寡核苷酸水解酶,脱氧核糖核酸酶A

4)   比活力:≥500 Kunit Units/mg protein

5)   活力定义:在50µl含40mM Tris-HCl, pH8.0,2.5 mM MgSO4,1mM CaCl2的反应缓冲体系中,37℃,10min内完全降解1µg λ-DNA所需的酶量即为一个活力单位。此反应条件下得到的一个单位DNase活力约等于一个Kuntiz unit。

6)   激活剂:多种二价金属离子如Mg2+、Mn2+、 Ca2+、Co2+、and Zn2+

7)   抑制剂:EGTA,EDTA,盐离子浓度(>100mM)都能降低DNase活性

8)   热失活:含终止溶液(20mM EGTA,pH 8.0)内65℃,处理10min

9)   溶解性:溶于缓冲液(≥1mg/ml in 20mM Tris-HCl(pH 7.5), 1mM MgCl2, 50% 甘油)

保存与运输方法

保存:冻干粉-20℃干燥冻存,至少3年稳定。

运输:冰袋运输。

使用方法

一、   储存液制备

将低温保存的本品置于室温回温至少20min,低速短时离心后,加入适量缓冲液配制成至少≥1mg/ml储存液(如:20mM Tris-HCl(pH 7.5), 1mM MgCl2, 50% 甘油),根据一定用量分装置于-20℃保存,至少1年稳定。

二、   反应缓冲液制备

建议1×反应缓冲液:40mM Tris-HCl(pH 8.0), 2.5mM (up to 10mM) MgSO4,1mM (up to 10mM) CaCl2

【注意】:当起始原料含EGTA,EDTA,其他螯合剂,和/或高浓度盐离子,此时反应缓冲液需更高浓度的Mg2+和Ca2+。

三、使用步骤(作为参考,具体实验可做适当调整)

2.1 往一个RNase-free PCR管内加入:1µg RNA样本;49 µl 1×反应缓冲液;1 µl DNase I, 1 unit/ml;【注意:酶的实际比活力请见产品标签】,混匀。

2.2 37℃孵育10-15min。【注意:消化时间不要超过15min或消化温度不要高于37℃,否则残留的RNase A污染可能会开始降解RNA】

2.3 加入1µl终止液(20mM EGTA,pH 8.0)结合Ca2+和Mg2+,之后于65-70℃失活10min,终止反应。【注意:必须在热失活之前加入终止液】

注意事项

1)  在不同的反应缓冲体系内,用来完全消化一定量DNA所需的DNase I量不同,请根据具体的工作体系或实验经验来决定。【注意:盐浓度>100mM会降低DNase I活性】

2)  为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

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货号 名称 规格
MF0402-10MG      Deoxyribonuclease I (DNase I) from Bovine Pancreas, ≥500 units/mg protein 10MG       
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注意事项

为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

 

 

Deoxyribonuclease I (DNase I) from Bovine Pancreas,≥2,000 units/mg protein 脱氧核糖核酸酶I,来源于牛胰腺

Deoxyribonucleate 5 –Oligonucleotidohydrolase,5′-寡核苷酸-水解酶,Deoxyribonuclease I (DNase I) from Bovine Pancreas,EC No: 3.1.21.1,CAS NO:9003-98-9

产品描述

脱氧核糖核酸酶I,英文Deoxyribonuclease I,缩写DNase I,在大多数细胞和组织中都能发现的一种核酸内切酶,偏好切割邻近嘧啶的磷酸二酯键,产生5’端为磷酸基团、3’端为羟基的多聚核苷酸,平均消化产物最小为多聚四核苷酸。Mg2+存在条件下,DNase I可随机识别和切断DNA任一条链上的任意位点;而在Mn2+存在条件下,DNase I识别DNA的两条链并在几乎相同的位点进行切割。DNase I可水解多种形式DNA,如单链DNA、双链DNA,甚至染色质(其切割速率受组蛋白影响)。

脱氧核糖核酸酶I,英文Deoxyribonuclease I,缩写DNase I,最早从胰腺中分离而来,至今哺乳动物胰腺也是最主要的来源之一。DNase I以两对二硫键结合的多种糖蛋白混合形式存在。最佳的工作范围是pH 7-8,DNase的活性依赖于Ca2+,并可被二价金属离子如Co2+,Mn2+,Zn2+等激活。5mM Ca2+可保护酶使其不被水解,而0.1mM Ca2+可使酶失活速率降至原来的1/2。

本品来自牛胰腺,色谱纯化制备,常用于去除蛋白或RNA样品中的DNA,或者用于向DNA中引入缺口使标记碱基插入DNA。本品以含氯化钙的冻干粉形式供应,比活≥2000Kunit Units/mg蛋白。

产品特性

1)CAS NO:9003-98-9

2)蛋白纯度:≥80%(biuret),色谱纯化

3)比活力:≥2000Kunit Units/mg protein

4)活力定义:25℃,pH5.0条件下DNase催化底物DNA,使每毫升每分钟ΔA260增加0.001的变化定义为一个酶活力单位(Kunitz unit)。

5)激活剂:多种二价金属离子如Mg2+、Mn2+、Ca2+、Co2+、and Zn2+

6)抑制剂:β-巯基乙醇;螯合剂;SDS;肌动蛋白;并没有特异性抑制DNase I酶活的通用抑制剂,比如柠檬酸盐抑制Mg2+活化的DNase I,但不能影响Mn2+激活的DNase I。

7)溶解性:溶于0.15M NaCl(5mg/ml),无色透明溶液

保存与运输方法

保存:冻干粉-20℃干燥冻存,至少3年稳定。

运输:冰袋运输。

常见问题

1. 如何溶解DNase I粉末?

将本品溶解于0.15 M NaCl溶液,可配置成5-10 mg/ml的储存液,-20℃分装冻存。需要注意:本品储存液即使-20℃分装冻存,一周可能会有<10%活力损失;置于2-8℃,约会有20%活力损失。

2. 如何将本品活力换算成质量?

根据本品各批次的比活力和蛋白含量,比如当酶比活力为2000 Kunits/mg,蛋白含量为100%(biuret)也,那么15KU=15000Kunits/2000Kunits/mg/100%=7.5mg本品。

3. 使用多大浓度DNase I用来去除溶液内的DNA?

在含50mM Tris-HCl(pH7.5),10mM MgCl2的溶液体系内,加入20-50μg DNase I,并于37℃孵育60min以去除DNA污染。本用量仅作参考,具体实验请做适当调整。

订购信息【现货供应】

产品名称                                                                       产品编号                规格       储存              
Deoxyribonuclease I (DNase I) from Bovine Pancreas

脱氧核糖核酸酶I,来源于牛胰腺

MF0401-15KU 15KU -20ºC
MF0401-50KU 50KU -20ºC

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MF0203-100MG 100mg -20ºC
MF0203-500MG 500mg -20ºC
MF0203-1000MG 1g -20ºC
Proteinase K, Molecular Biology Grade

蛋白酶K

MF0201-100MG 100mg +4ºC
MF0201-500MG 500mg +4ºC
MF0201-1000MG 1g +4ºC

注意事项

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Deoxyribonuclease I (DNase I) from Bovine Pancreas,≥2,000 units/mg protein 脱氧核糖核酸酶I,来源于牛胰腺

Deoxyribonucleate 5 –Oligonucleotidohydrolase,5′-寡核苷酸-水解酶,Deoxyribonuclease I (DNase I) from Bovine Pancreas,EC No: 3.1.21.1,CAS NO:9003-98-9

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脱氧核糖核酸酶I,英文Deoxyribonuclease I,缩写DNase I,在大多数细胞和组织中都能发现的一种核酸内切酶,偏好切割邻近嘧啶的磷酸二酯键,产生5’端为磷酸基团、3’端为羟基的多聚核苷酸,平均消化产物最小为多聚四核苷酸。Mg2+存在条件下,DNase I可随机识别和切断DNA任一条链上的任意位点;而在Mn2+存在条件下,DNase I识别DNA的两条链并在几乎相同的位点进行切割。DNase I可水解多种形式DNA,如单链DNA、双链DNA,甚至染色质(其切割速率受组蛋白影响)。

脱氧核糖核酸酶I,英文Deoxyribonuclease I,缩写DNase I,最早从胰腺中分离而来,至今哺乳动物胰腺也是最主要的来源之一。DNase I以两对二硫键结合的多种糖蛋白混合形式存在。最佳的工作范围是pH 7-8,DNase的活性依赖于Ca2+,并可被二价金属离子如Co2+,Mn2+,Zn2+等激活。5mM Ca2+可保护酶使其不被水解,而0.1mM Ca2+可使酶失活速率降至原来的1/2。

本品来自牛胰腺,色谱纯化制备,常用于去除蛋白或RNA样品中的DNA,或者用于向DNA中引入缺口使标记碱基插入DNA。本品以含氯化钙的冻干粉形式供应,比活≥2000Kunit Units/mg蛋白。

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1)CAS NO:9003-98-9

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3)比活力:≥2000Kunit Units/mg protein

4)活力定义:25℃,pH5.0条件下DNase催化底物DNA,使每毫升每分钟ΔA260增加0.001的变化定义为一个酶活力单位(Kunitz unit)。

5)激活剂:多种二价金属离子如Mg2+、Mn2+、Ca2+、Co2+、and Zn2+

6)抑制剂:β-巯基乙醇;螯合剂;SDS;肌动蛋白;并没有特异性抑制DNase I酶活的通用抑制剂,比如柠檬酸盐抑制Mg2+活化的DNase I,但不能影响Mn2+激活的DNase I。

7)溶解性:溶于0.15M NaCl(5mg/ml),无色透明溶液

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保存:冻干粉-20℃干燥冻存,至少3年稳定。

运输:冰袋运输。

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2. 如何将本品活力换算成质量?

根据本品各批次的比活力和蛋白含量,比如当酶比活力为2000 Kunits/mg,蛋白含量为100%(biuret)也,那么15KU=15000Kunits/2000Kunits/mg/100%=7.5mg本品。

3. 使用多大浓度DNase I用来去除溶液内的DNA?

在含50mM Tris-HCl(pH7.5),10mM MgCl2的溶液体系内,加入20-50μg DNase I,并于37℃孵育60min以去除DNA污染。本用量仅作参考,具体实验请做适当调整。

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Deoxyribonuclease I (DNase I) from Bovine Pancreas

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