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抗CTGF抗体 风湿病、组织纤维化、癌症研究用

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抗CTGF抗体
风湿病、组织纤维化、癌症研究用

  • 产品特性
  • 相关资料
  • Q&A
  • 参考文献

抗CTGF抗体抗CTGF抗体 风湿病、组织纤维化、癌症研究用


风湿病、组织纤维化、癌症研究用



结缔组织生长因子CTGF（Connective Tissue Growth Factor）是脐静脉和血管内皮细胞等中产生的一种分泌蛋白，分子量约为38kDa。CTGF由Module1-4共四个部分组成，控制着软骨细胞的增殖分化和细胞粘附。有报告显示，CTGF与癌症、肾功能衰竭、肝功能衰竭、风湿等各种疾病也有所关联。


本产品是抗CTGF小鼠单克隆抗体，能够识别通过DNA免疫法建立的Native form的CTGF，具有中和活性。

抗CTGF抗体 风湿病、组织纤维化、癌症研究用

 

◆特点


●　具有CTGF中和活性

　  对风湿病模型动物（小鼠）的关节炎有抑制作用

●　4种克隆能够分别识别Module1-4

识别部位

Clone No.

种属交叉反应性

抗体亚型

适用实验

抗体浓度

（初生产批次）

Module1

30D2

人、小鼠

小鼠IgG1

in vitro中和实验

in vivo中和实验ELISA

0.8 mg/mL

Module2

2-3

人、小鼠

小鼠IgG1

in vitro中和实验

0.9 mg/mL

Module3

3-54

人、小鼠

小鼠IgG1

in vitro中和实验

1 mg/mL

Module4

4-69

人、小鼠

小鼠IgG1

in vitro中和实验

0.7 mg/mL

◆使用示例（in vitro中和实验）破骨细胞的分化诱导抑制


抗CTGF抗体 风湿病、组织纤维化、癌症研究用


实验条件


1. 从人全血中提取PBMCs，分离CD14+细胞。

2. 将CD14+细胞在α-MEM（添加10% FBS）、M-CSF（25 ng/mL）、sRANKL（40 ng/mL）中培养7天（37℃, 5% CO2），使其向破骨细胞分

    化。

3. 破骨细胞进行TRAP染色后，在光学显微镜下统计TRAP阳性细胞数。

结果


无论哪一种CTGF抗体都抑制了CTGF对破骨细胞的分化诱导。

 

本数据由顺天堂大学 环境医学研究所 宫下老师、関川老师提供。

◆使用示例（in vivo中和实验）风湿病模型动物（小鼠）的关节炎抑制


抗CTGF抗体 风湿病、组织纤维化、癌症研究用


 关节炎指标标准


POINT

观察结果

0

无变化

1

肢体局部发红。又或是1根手指的红肿。

2

手、脚关节肿胀。又或是2根以上的手指肿胀。

3

手、脚底有中度~明显的肿胀。

4

肢体明显的红肿、硬化。

　


实验条件


1. 向DBA/1J (Female, 7-8weeks) 小鼠的尾部皮内给药由胶原蛋白二型(TypeⅡ collagen) 和弗氏完全佐剂 (CFA)等量混合而成的乳状液

   （100 µL/小鼠），诱发关节炎。

2. 在免疫发生前一周开始腹腔注射抗CTGF抗体（10 mg/kg），每周1次，共8次。

3. 每周对四肢关节炎进行1次评价，直至免疫发生的第8周（评价标准参考上述表格）。

结果


通过给药抗CTGF module1抗体，风湿病模型小鼠的关节炎受到了抑制。

 

本数据由顺天堂大学 环境医学研究所 野泽老师、関川老师提供。

◆参考文献


1） Ikawa ,Y., et al.: J. Cell Physiol., 216, 3, 680(2008).

2） Nozawa, K., et al.: Arthritis Rheum., 65, 6, 1477 (2013).

3） Miyashita, T., et al.: Autoimmunity., 49, 2,109 (2016).

4） Miyazaki O, et al.: Ann. Clin. Biochem., 47, 205(2010).

◆产品列表

产品编号

产品名称

包装

018-27423

Anti CTGF Module1, Monoclonal Antibody(30D2)

抗CTGF模块1，单克隆抗体（30D2）

50 μL

016-27424

1 mL

015-27433

Anti CTGF Module2, Monoclonal Antibody(2-3)

抗CTGF模块2，单克隆抗体（2-3）

50 μL

012-27443

Anti CTGF Module3, Monoclonal Antibody(3-54)

抗CTGF模块3，单克隆抗体（3-54）

50 μL

019-27453

Anti CTGF Module4, Monoclonal Antibody(4-69)

抗CTGF模块4，单克隆抗体（4-69）

50 μL

※ 本页面产品仅供研究用，研究以外不可使用。

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CTGF ELISA 试剂盒

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CTGF ELISA 试剂盒

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CTGF ELISA 试剂盒CTGF ELISA 试剂盒


结缔组织生长因子CTGF（Connective Tissue Growth Factor）是一种由脐静脉和血管内皮细胞产生的约38 kDa的分泌蛋白。除了参与细胞粘附和软骨细胞的增殖和分化以外，它也被认为是组织纤维化的一个主要因素，还可作为纤维化疾病的候选标志物。

FUJIFILM Wako可提供用于检测CTGF全长的ELISA试剂盒以及检测全长+N末端的ELISA试剂盒，通过组合使用这两种ELISA试剂盒，能够准确检测作为特发性肺纤维化（IPF）候选生物标志物的血液N末端CTGF片段。

◆什么是CTGF？


CTGF（ Connective Tissue Growth Factor）是一种由脐静脉和血管内皮细胞产生的约38kDa的分泌蛋白。它是CCN (Cyr61/CTGF /Nov)家族的一种，亦称为CCN2。CTGF主要由Module 1 – Module 4的四个部分组成，Module 1称为IGF结合结构域，Module 2称为VWC结构域，Module 3称为TSP-1结构域，Module 4称为CT结构域。各结构域通过与不同的因子结合来发挥作用。

CTGF ELISA 试剂盒

CTGF在组织纤维化中发挥重要作用，因此可作为纤维化的候选生物标志物。CTGF由TGF-β诱导表达，通过促进产生细胞外基质的肌成纤维细胞的分化和胶原蛋白的合成，从而参与纤维化1）。在小鼠皮肤纤维化中，TGF-β和CTGF已被证明分别在纤维化的发生和持续中起重要作用2）。此外，还有报告称CTGF与软骨细胞的增殖和分化，细胞间的粘连有关。

CTGF除了全长CTGF之外，还有Module 2 － Module 3间被切断产生的N末端(Module 1-2)CTGF和C末端(Module 3-4)CTGF。由于CTGF（C末端）容易被分解，所以血液中主要以CTGF （全长）和CTGF (N末端)的形式存在。CTGF (N末端)作为特发性肺纤维化(IPF: Idiopathic Pulmonary Fibrosis)的生物标志物备受期待3)，但由于CTGF（全长)和CTGF（N末端）同时存在，所以单独检测CTGF（N末端）非常困难。


◆试剂盒组成

96次用

  抗体固相化孔板

1 plate  

  CTGF标准品

1支  

  缓冲液

20 mL  

  生物素结合抗体溶液

100 μL  

  过氧化物酶结合链霉亲和素溶液

100 μL  

  TMB溶液

12 mL  

  反应终止液

12 mL  

  清洗液（10×）

100 mL  

  标准品样品制备溶液

100 mL  

 孔板封条

4片  

◆CTGF ELISA试剂盒 Wako


FUJIFILM Wako可分别提供检测CTGF全长以及全长+N末端的ELISA试剂盒。通过组合使用两种ELISA试剂盒，可准确检测特发性肺纤维化(IPF)的生物标志物——血液中的N末端CTGF4)。

CTGF ELISA 试剂盒

产品系列

产品名称

CTGF（全长）ELISA试剂盒 Wako

CTGF（全长+N末端）ELISA试剂盒 Wako

产品编号

290-84701

292-84901

检测对象

CTGF（全长）

CTGF（全长+N末端）

检测原理

CTGF ELISA 试剂盒

CTGF ELISA 试剂盒

样品

人血清，人血浆(EDTA)

标准曲线范围

7.81-500 pM

所需样品量

人血清：5 μL，人血浆(EDTA)：10 μL

检测时间

2 h 50 min

检测法

显色法

◆性能数据

■ 全长，N末端片段，C末端片段的交叉性


分别使用各ELISA试剂盒与全长，N末端片段，C末端片段反应，确认其交叉性。

CTGF ELISA 试剂盒

【结果】


CTGF（全长）ELISA试剂盒 Wako可以特异性检测CTGF全长，CTGF（全长+N末端）ELISA试剂盒 Wako可以特异性检测CTGF全长和N末端片段。

■ 与CCN家族的交叉性


确认了包含CTGF在内的与CCN家族的交叉率（500 pM，n=8）。

CTGF ELISA（全长）

交叉率 (%)

CTGF ELISA（全长+N末端区域）

交叉率 (%)

CCN1

<0.5

N.D.

CCN2（CTGF）

100

100

CCN3

<0.5

N.D.

CCN4

<0.5

N.D.

CCN5

<0.5

N.D.

CCN6

<0.5

N.D.

N.D. = 未检出


【结果】

FUJIFIM Wako的试剂盒在CCN家族中，对CCN2(CTGF)显示高特异性。

■ 加标回收测试


CTGF(全长+N末端) ELISA试剂盒 Wako


样品ID

添加量 (pM)

检测值 (pM)

回收量 (pM)

回收率 (%)

人血清
样品No.15

0

61.5

―

―

10

71.4

9.9

99

50

110

48.5

97

100

163

102

102

150

215

154

103

300

370

309

103

平均

101

人血浆（EDTA）
样品No.15

0

71.5

―

―

10

80.8

9.3

93

50

121

49.5

99

100

174

103

103

150

227

156

104

300

380

309

103

平均

100

CTGF(全长) ELISA试剂盒 Wako


样品

添加量 (pM)

检测值 (pM)

回收量 (pM)

回收率 (%)

人血清
样品No.16

0

37.8

―

―

10

47

9.2

92

50

87.4

49.6

99.2

100

141

103

103

150

191

153

102

300

343

305

102

平均

99.6

人血浆 (EDTA)
样品No.16

0

16.9

―

―

10

26.2

9.3

93

50

65.6

48.7

97.4

100

122

105

105

150

173

156

104

300

326

309

103

平均

100

■ 稀释线性测试


CTGF(全长+N末端) ELISA试剂盒 Wako


  人血清

  人血浆

CTGF ELISA 试剂盒

CTGF ELISA 试剂盒


CTGF(全长) ELISA试剂盒 Wako


  人血清

  人血浆

CTGF ELISA 试剂盒

CTGF ELISA 试剂盒


◆应用数据


■ N末端CTGF的检测（稀释线性测试）


使用梯度稀释的人血清或人血浆(EDTA)，用CTGF（全长+N末端）ELISA试剂盒 Wako检测CTGF全长+N末端， 用CTGF（全长）ELISA试剂盒 Wako检测CTGF全长。求差值计算CTGF（N末端）量，确认稀释线性。

CTGF ELISA 试剂盒

CTGF ELISA 试剂盒

样品

稀释倍率

CTGF（全长＋N末端）（pM）

CTGF（全长）（pM）

CTGF（N末端）(pM）

人

血清

1/1

1735

952

783

1/2

875

495

380

1/4

417

237

180

人

血浆(EDTA)

1/1

684

126

558

1/2

347

66.2

281

1/4

157

34.9 * 参考值

122

【结果】


使用该方法检测定量CTGF（N末端），可观察到高稀释线性。



■ 健康者和IPF患者血浆中N末端CTGF的检测

使用CTGF（全长+N末端）ELISA试剂盒 Wako和CTGF（全长）ELISA试剂盒 Wako，检测从健康者以及特发

性肺纤维化（IPF）患者中提取的血浆（EDTA），并求出N末端CTGF的量。

CTGF ELISA 试剂盒

健康者

ID

CTGF（全长+N末端）（pM）

CTGF（全长）（pM）

CTGF（N末端）（pM）

1

494

83.4

411

2

535

116

419

3

580

155

425

4

661

129

532

5

383

63.5

319

mean

421

SD

75.6


IPF患者

ID

CTGF（全长+N末端）（pM）

CTGF（全长）（pM）

CTGF（N末端）（pM）

1

1226

213

1013

2

1004

187

817

3

432

35.4

397

4

1422

278

1144

5

938

39.9

898

6

682

73.2

609

7

1123

168

955

8

849

45.5

804

9

857

60.6

796

mean

826

SD

221


【结果】


IPF患者血浆中N末端的CTGF量明显高于健康者。

点击此处查看产品宣传页


※ 本页面产品仅供研究用，研究以外不可使用。

FAQ


◆关于样品


Q1：血液样品建议使用何种抗凝剂？

A1：参考以下文献，肝素血浆中CTGF（N末端）的值高于EDTA血浆和柠檬酸盐血浆。因此，不建议使用肝素作为抗凝剂。

A1：<参考文献> Miyazaki, O. et al.: Ann. Clin. Biochem., 47, 205(2010).

A1： Subtraction method for determination of N-terminal connective tissue growth factor


◆关于试剂盒

Q1：试剂盒中的抗体是否有销售？

A1：FUJIFILM Wako供应以下固相化抗体。

A1：抗CTGFModule 1，单克隆抗体（30D2）（产品编号：018-27423）


检测抗体不单独销售。FUJIFILM Wako可供应Module 2识别抗体（产品编号：015-27433）及Module 4识别抗体（产品编号：019-27453），但与本试剂盒使用抗体的克隆不同。

Q2：标准品是如何标价的？

A2：标准品参考以下文献进行标价。

A1：Miyazaki, O. et al.: Ann. Clin. Biochem., 47, 205(2010).



◆关于试剂盒的使用


Q1：本试剂盒进行检测时所需的试剂、器具和设备？

A1：使用本试剂盒需要以下试剂、器具和设备。

A1：●　纯净水（蒸馏水）

A1：●　标准溶液/样品稀释用试管

A1：●　清洗液稀释用玻璃器具（量筒/烧杯）

A1：●　可更换吸头的移液器（可准确移液10 μL以及 200~500 μL的一次性吸头）

A1：●　可连续分注100 μL的移液器

A1：●　具有吸水性的毛巾（清洗后去除孔板残留液体）

A1：●　涡旋振荡器

A1：●　微孔板振荡器（约500~800 rpm）

A1：●　96孔板用清洗器（建议使用）或清洗瓶

A1：●　读板器 (450±10 nm / 600~650 nm)

A1：●　数据处理软件

Q2：两个试剂盒必须配合使用吗？

A2：若检测CTGF (N末端, Module 1-2)，需两个试剂盒配合使用。

A1：若只检测CTGF（全长），只需购买CTGF(全长) ELISA试剂盒。

Q3：96次用可检测几个样品？

A3：标准品使用16孔（n=2），n=1时可检测80个样品，n=2时可检测40个样品。

 

Q4：试剂盒可分多次使用吗？

A4：可以，孔板设计为可每8个孔进行分割的样式，试剂盒包含充足数量的标准品。

A4：但是多次使用时，每次实验前都需重新绘制标准曲线，并且可检测的样品数量也会减少。另外，孔板封条只有4片，请根据需求进行使用。

参考文献


1. 

Biernacka, A., Dobaczewski, M., and Frangogiannis, N. G.: Growth Factors, 29(5), 196(2011).
TGF-β signaling in fibrosis

2. 

Mori T., et al.: J. Cell Physiol., 181(1), 153(1999).
Role and interaction of connective tissue growth factor with transforming growth factor-beta in persistent fibrosis: A mouse fibrosis model.

3.

Kono, M. et al.: Clin. Chim. Acta, 412, 2211(2011).

Plasma CCN2 (connective tissue growth factor; CTGF) is a potential biomarker in idiopathic pulmonary fibrosis (IPF)

4.

Miyazaki, O. et al.: Ann. Clin. Biochem., 47, 205(2010).
Subtraction method for determination of N-terminal connective tissue growth factor

产品列表

产品编号 产品名称 产品规格 产品等级 备注
290-84701 CTGF(Full) ELISA Kit Wako
CTGF (全长) ELISA试剂盒 Wako		 96次用 免疫化学用
292-84901 CTGF(Full+N-terminal region) ELISA Kit Wako
CTGF(全长+N末端) ELISA试剂盒 Wako		 96次用 免疫化学用
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CTGF ELISA 试剂盒

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CTGF ELISA 试剂盒

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结缔组织生长因子CTGF（Connective Tissue Growth Factor）是一种由脐静脉和血管内皮细胞产生的约38 kDa的分泌蛋白。除了参与细胞粘附和软骨细胞的增殖和分化以外，它也被认为是组织纤维化的一个主要因素，还可作为纤维化疾病的候选标志物。

FUJIFILM Wako可提供用于检测CTGF全长的ELISA试剂盒以及检测全长+N末端的ELISA试剂盒，通过组合使用这两种ELISA试剂盒，能够准确检测作为特发性肺纤维化（IPF）候选生物标志物的血液N末端CTGF片段。

◆什么是CTGF？


CTGF（ Connective Tissue Growth Factor）是一种由脐静脉和血管内皮细胞产生的约38kDa的分泌蛋白。它是CCN (Cyr61/CTGF /Nov)家族的一种，亦称为CCN2。CTGF主要由Module 1 – Module 4的四个部分组成，Module 1称为IGF结合结构域，Module 2称为VWC结构域，Module 3称为TSP-1结构域，Module 4称为CT结构域。各结构域通过与不同的因子结合来发挥作用。

CTGF ELISA 试剂盒

CTGF在组织纤维化中发挥重要作用，因此可作为纤维化的候选生物标志物。CTGF由TGF-β诱导表达，通过促进产生细胞外基质的肌成纤维细胞的分化和胶原蛋白的合成，从而参与纤维化1）。在小鼠皮肤纤维化中，TGF-β和CTGF已被证明分别在纤维化的发生和持续中起重要作用2）。此外，还有报告称CTGF与软骨细胞的增殖和分化，细胞间的粘连有关。

CTGF除了全长CTGF之外，还有Module 2 － Module 3间被切断产生的N末端(Module 1-2)CTGF和C末端(Module 3-4)CTGF。由于CTGF（C末端）容易被分解，所以血液中主要以CTGF （全长）和CTGF (N末端)的形式存在。CTGF (N末端)作为特发性肺纤维化(IPF: Idiopathic Pulmonary Fibrosis)的生物标志物备受期待3)，但由于CTGF（全长)和CTGF（N末端）同时存在，所以单独检测CTGF（N末端）非常困难。


◆试剂盒组成

96次用

  抗体固相化孔板

1 plate  

  CTGF标准品

1支  

  缓冲液

20 mL  

  生物素结合抗体溶液

100 μL  

  过氧化物酶结合链霉亲和素溶液

100 μL  

  TMB溶液

12 mL  

  反应终止液

12 mL  

  清洗液（10×）

100 mL  

  标准品样品制备溶液

100 mL  

 孔板封条

4片  

◆CTGF ELISA试剂盒 Wako


FUJIFILM Wako可分别提供检测CTGF全长以及全长+N末端的ELISA试剂盒。通过组合使用两种ELISA试剂盒，可准确检测特发性肺纤维化(IPF)的生物标志物——血液中的N末端CTGF4)。

CTGF ELISA 试剂盒

产品系列

产品名称

CTGF（全长）ELISA试剂盒 Wako

CTGF（全长+N末端）ELISA试剂盒 Wako

产品编号

290-84701

292-84901

检测对象

CTGF（全长）

CTGF（全长+N末端）

检测原理

CTGF ELISA 试剂盒

CTGF ELISA 试剂盒

样品

人血清，人血浆(EDTA)

标准曲线范围

7.81-500 pM

所需样品量

人血清：5 μL，人血浆(EDTA)：10 μL

检测时间

2 h 50 min

检测法

显色法

◆性能数据

■ 全长，N末端片段，C末端片段的交叉性


分别使用各ELISA试剂盒与全长，N末端片段，C末端片段反应，确认其交叉性。

CTGF ELISA 试剂盒

【结果】


CTGF（全长）ELISA试剂盒 Wako可以特异性检测CTGF全长，CTGF（全长+N末端）ELISA试剂盒 Wako可以特异性检测CTGF全长和N末端片段。

■ 与CCN家族的交叉性


确认了包含CTGF在内的与CCN家族的交叉率（500 pM，n=8）。

CTGF ELISA（全长）

交叉率 (%)

CTGF ELISA（全长+N末端区域）

交叉率 (%)

CCN1

<0.5

N.D.

CCN2（CTGF）

100

100

CCN3

<0.5

N.D.

CCN4

<0.5

N.D.

CCN5

<0.5

N.D.

CCN6

<0.5

N.D.

N.D. = 未检出


【结果】

FUJIFIM Wako的试剂盒在CCN家族中，对CCN2(CTGF)显示高特异性。

■ 加标回收测试


CTGF(全长+N末端) ELISA试剂盒 Wako


样品ID

添加量 (pM)

检测值 (pM)

回收量 (pM)

回收率 (%)

人血清
样品No.15

0

61.5

―

―

10

71.4

9.9

99

50

110

48.5

97

100

163

102

102

150

215

154

103

300

370

309

103

平均

101

人血浆（EDTA）
样品No.15

0

71.5

―

―

10

80.8

9.3

93

50

121

49.5

99

100

174

103

103

150

227

156

104

300

380

309

103

平均

100

CTGF(全长) ELISA试剂盒 Wako


样品

添加量 (pM)

检测值 (pM)

回收量 (pM)

回收率 (%)

人血清
样品No.16

0

37.8

―

―

10

47

9.2

92

50

87.4

49.6

99.2

100

141

103

103

150

191

153

102

300

343

305

102

平均

99.6

人血浆 (EDTA)
样品No.16

0

16.9

―

―

10

26.2

9.3

93

50

65.6

48.7

97.4

100

122

105

105

150

173

156

104

300

326

309

103

平均

100

■ 稀释线性测试


CTGF(全长+N末端) ELISA试剂盒 Wako


  人血清

  人血浆

CTGF ELISA 试剂盒

CTGF ELISA 试剂盒


CTGF(全长) ELISA试剂盒 Wako


  人血清

  人血浆

CTGF ELISA 试剂盒

CTGF ELISA 试剂盒


◆应用数据


■ N末端CTGF的检测（稀释线性测试）


使用梯度稀释的人血清或人血浆(EDTA)，用CTGF（全长+N末端）ELISA试剂盒 Wako检测CTGF全长+N末端， 用CTGF（全长）ELISA试剂盒 Wako检测CTGF全长。求差值计算CTGF（N末端）量，确认稀释线性。

CTGF ELISA 试剂盒

CTGF ELISA 试剂盒

样品

稀释倍率

CTGF（全长＋N末端）（pM）

CTGF（全长）（pM）

CTGF（N末端）(pM）

人

血清

1/1

1735

952

783

1/2

875

495

380

1/4

417

237

180

人

血浆(EDTA)

1/1

684

126

558

1/2

347

66.2

281

1/4

157

34.9 * 参考值

122

【结果】


使用该方法检测定量CTGF（N末端），可观察到高稀释线性。



■ 健康者和IPF患者血浆中N末端CTGF的检测

使用CTGF（全长+N末端）ELISA试剂盒 Wako和CTGF（全长）ELISA试剂盒 Wako，检测从健康者以及特发

性肺纤维化（IPF）患者中提取的血浆（EDTA），并求出N末端CTGF的量。

CTGF ELISA 试剂盒

健康者

ID

CTGF（全长+N末端）（pM）

CTGF（全长）（pM）

CTGF（N末端）（pM）

1

494

83.4

411

2

535

116

419

3

580

155

425

4

661

129

532

5

383

63.5

319

mean

421

SD

75.6


IPF患者

ID

CTGF（全长+N末端）（pM）

CTGF（全长）（pM）

CTGF（N末端）（pM）

1

1226

213

1013

2

1004

187

817

3

432

35.4

397

4

1422

278

1144

5

938

39.9

898

6

682

73.2

609

7

1123

168

955

8

849

45.5

804

9

857

60.6

796

mean

826

SD

221


【结果】


IPF患者血浆中N末端的CTGF量明显高于健康者。

点击此处查看产品宣传页


※ 本页面产品仅供研究用，研究以外不可使用。

FAQ


◆关于样品


Q1：血液样品建议使用何种抗凝剂？

A1：参考以下文献，肝素血浆中CTGF（N末端）的值高于EDTA血浆和柠檬酸盐血浆。因此，不建议使用肝素作为抗凝剂。

A1：<参考文献> Miyazaki, O. et al.: Ann. Clin. Biochem., 47, 205(2010).

A1： Subtraction method for determination of N-terminal connective tissue growth factor


◆关于试剂盒

Q1：试剂盒中的抗体是否有销售？

A1：FUJIFILM Wako供应以下固相化抗体。

A1：抗CTGFModule 1，单克隆抗体（30D2）（产品编号：018-27423）


检测抗体不单独销售。FUJIFILM Wako可供应Module 2识别抗体（产品编号：015-27433）及Module 4识别抗体（产品编号：019-27453），但与本试剂盒使用抗体的克隆不同。

Q2：标准品是如何标价的？

A2：标准品参考以下文献进行标价。

A1：Miyazaki, O. et al.: Ann. Clin. Biochem., 47, 205(2010).



◆关于试剂盒的使用


Q1：本试剂盒进行检测时所需的试剂、器具和设备？

A1：使用本试剂盒需要以下试剂、器具和设备。

A1：●　纯净水（蒸馏水）

A1：●　标准溶液/样品稀释用试管

A1：●　清洗液稀释用玻璃器具（量筒/烧杯）

A1：●　可更换吸头的移液器（可准确移液10 μL以及 200~500 μL的一次性吸头）

A1：●　可连续分注100 μL的移液器

A1：●　具有吸水性的毛巾（清洗后去除孔板残留液体）

A1：●　涡旋振荡器

A1：●　微孔板振荡器（约500~800 rpm）

A1：●　96孔板用清洗器（建议使用）或清洗瓶

A1：●　读板器 (450±10 nm / 600~650 nm)

A1：●　数据处理软件

Q2：两个试剂盒必须配合使用吗？

A2：若检测CTGF (N末端, Module 1-2)，需两个试剂盒配合使用。

A1：若只检测CTGF（全长），只需购买CTGF(全长) ELISA试剂盒。

Q3：96次用可检测几个样品？

A3：标准品使用16孔（n=2），n=1时可检测80个样品，n=2时可检测40个样品。

 

Q4：试剂盒可分多次使用吗？

A4：可以，孔板设计为可每8个孔进行分割的样式，试剂盒包含充足数量的标准品。

A4：但是多次使用时，每次实验前都需重新绘制标准曲线，并且可检测的样品数量也会减少。另外，孔板封条只有4片，请根据需求进行使用。

参考文献


1. 

Biernacka, A., Dobaczewski, M., and Frangogiannis, N. G.: Growth Factors, 29(5), 196(2011).
TGF-β signaling in fibrosis

2. 

Mori T., et al.: J. Cell Physiol., 181(1), 153(1999).
Role and interaction of connective tissue growth factor with transforming growth factor-beta in persistent fibrosis: A mouse fibrosis model.

3.

Kono, M. et al.: Clin. Chim. Acta, 412, 2211(2011).

Plasma CCN2 (connective tissue growth factor; CTGF) is a potential biomarker in idiopathic pulmonary fibrosis (IPF)

4.

Miyazaki, O. et al.: Ann. Clin. Biochem., 47, 205(2010).
Subtraction method for determination of N-terminal connective tissue growth factor

产品列表

产品编号 产品名称 产品规格 产品等级 备注
290-84701 CTGF(Full) ELISA Kit Wako
CTGF (全长) ELISA试剂盒 Wako		 96次用 免疫化学用
292-84901 CTGF(Full+N-terminal region) ELISA Kit Wako
CTGF(全长+N末端) ELISA试剂盒 Wako		 96次用 免疫化学用
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4. 疗，以及其他特定的用途或行为，本公司概不保证其安全性和有效性，并且不负任何相关的法律责任。

CTGF ELISA 试剂盒

发表于由
产品中心 > 生命科学 > 疾病研究 > 癌症肿瘤相关

CTGF ELISA 试剂盒

  • 产品特性
  • 相关资料
  • Q&A
  • 参考文献

CTGF ELISA 试剂盒CTGF ELISA 试剂盒


结缔组织生长因子CTGF（Connective Tissue Growth Factor）是一种由脐静脉和血管内皮细胞产生的约38 kDa的分泌蛋白。除了参与细胞粘附和软骨细胞的增殖和分化以外，它也被认为是组织纤维化的一个主要因素，还可作为纤维化疾病的候选标志物。

FUJIFILM Wako可提供用于检测CTGF全长的ELISA试剂盒以及检测全长+N末端的ELISA试剂盒，通过组合使用这两种ELISA试剂盒，能够准确检测作为特发性肺纤维化（IPF）候选生物标志物的血液N末端CTGF片段。

◆什么是CTGF？


CTGF（ Connective Tissue Growth Factor）是一种由脐静脉和血管内皮细胞产生的约38kDa的分泌蛋白。它是CCN (Cyr61/CTGF /Nov)家族的一种，亦称为CCN2。CTGF主要由Module 1 – Module 4的四个部分组成，Module 1称为IGF结合结构域，Module 2称为VWC结构域，Module 3称为TSP-1结构域，Module 4称为CT结构域。各结构域通过与不同的因子结合来发挥作用。

CTGF ELISA 试剂盒

CTGF在组织纤维化中发挥重要作用，因此可作为纤维化的候选生物标志物。CTGF由TGF-β诱导表达，通过促进产生细胞外基质的肌成纤维细胞的分化和胶原蛋白的合成，从而参与纤维化1）。在小鼠皮肤纤维化中，TGF-β和CTGF已被证明分别在纤维化的发生和持续中起重要作用2）。此外，还有报告称CTGF与软骨细胞的增殖和分化，细胞间的粘连有关。

CTGF除了全长CTGF之外，还有Module 2 － Module 3间被切断产生的N末端(Module 1-2)CTGF和C末端(Module 3-4)CTGF。由于CTGF（C末端）容易被分解，所以血液中主要以CTGF （全长）和CTGF (N末端)的形式存在。CTGF (N末端)作为特发性肺纤维化(IPF: Idiopathic Pulmonary Fibrosis)的生物标志物备受期待3)，但由于CTGF（全长)和CTGF（N末端）同时存在，所以单独检测CTGF（N末端）非常困难。


◆试剂盒组成

96次用

  抗体固相化孔板

1 plate  

  CTGF标准品

1支  

  缓冲液

20 mL  

  生物素结合抗体溶液

100 μL  

  过氧化物酶结合链霉亲和素溶液

100 μL  

  TMB溶液

12 mL  

  反应终止液

12 mL  

  清洗液（10×）

100 mL  

  标准品样品制备溶液

100 mL  

 孔板封条

4片  

◆CTGF ELISA试剂盒 Wako


FUJIFILM Wako可分别提供检测CTGF全长以及全长+N末端的ELISA试剂盒。通过组合使用两种ELISA试剂盒，可准确检测特发性肺纤维化(IPF)的生物标志物——血液中的N末端CTGF4)。

CTGF ELISA 试剂盒

产品系列

产品名称

CTGF（全长）ELISA试剂盒 Wako

CTGF（全长+N末端）ELISA试剂盒 Wako

产品编号

290-84701

292-84901

检测对象

CTGF（全长）

CTGF（全长+N末端）

检测原理

CTGF ELISA 试剂盒

CTGF ELISA 试剂盒

样品

人血清，人血浆(EDTA)

标准曲线范围

7.81-500 pM

所需样品量

人血清：5 μL，人血浆(EDTA)：10 μL

检测时间

2 h 50 min

检测法

显色法

◆性能数据

■ 全长，N末端片段，C末端片段的交叉性


分别使用各ELISA试剂盒与全长，N末端片段，C末端片段反应，确认其交叉性。

CTGF ELISA 试剂盒

【结果】


CTGF（全长）ELISA试剂盒 Wako可以特异性检测CTGF全长，CTGF（全长+N末端）ELISA试剂盒 Wako可以特异性检测CTGF全长和N末端片段。

■ 与CCN家族的交叉性


确认了包含CTGF在内的与CCN家族的交叉率（500 pM，n=8）。

CTGF ELISA（全长）

交叉率 (%)

CTGF ELISA（全长+N末端区域）

交叉率 (%)

CCN1

<0.5

N.D.

CCN2（CTGF）

100

100

CCN3

<0.5

N.D.

CCN4

<0.5

N.D.

CCN5

<0.5

N.D.

CCN6

<0.5

N.D.

N.D. = 未检出


【结果】

FUJIFIM Wako的试剂盒在CCN家族中，对CCN2(CTGF)显示高特异性。

■ 加标回收测试


CTGF(全长+N末端) ELISA试剂盒 Wako


样品ID

添加量 (pM)

检测值 (pM)

回收量 (pM)

回收率 (%)

人血清
样品No.15

0

61.5

―

―

10

71.4

9.9

99

50

110

48.5

97

100

163

102

102

150

215

154

103

300

370

309

103

平均

101

人血浆（EDTA）
样品No.15

0

71.5

―

―

10

80.8

9.3

93

50

121

49.5

99

100

174

103

103

150

227

156

104

300

380

309

103

平均

100

CTGF(全长) ELISA试剂盒 Wako


样品

添加量 (pM)

检测值 (pM)

回收量 (pM)

回收率 (%)

人血清
样品No.16

0

37.8

―

―

10

47

9.2

92

50

87.4

49.6

99.2

100

141

103

103

150

191

153

102

300

343

305

102

平均

99.6

人血浆 (EDTA)
样品No.16

0

16.9

―

―

10

26.2

9.3

93

50

65.6

48.7

97.4

100

122

105

105

150

173

156

104

300

326

309

103

平均

100

■ 稀释线性测试


CTGF(全长+N末端) ELISA试剂盒 Wako


  人血清

  人血浆

CTGF ELISA 试剂盒

CTGF ELISA 试剂盒


CTGF(全长) ELISA试剂盒 Wako


  人血清

  人血浆

CTGF ELISA 试剂盒

CTGF ELISA 试剂盒


◆应用数据


■ N末端CTGF的检测（稀释线性测试）


使用梯度稀释的人血清或人血浆(EDTA)，用CTGF（全长+N末端）ELISA试剂盒 Wako检测CTGF全长+N末端， 用CTGF（全长）ELISA试剂盒 Wako检测CTGF全长。求差值计算CTGF（N末端）量，确认稀释线性。

CTGF ELISA 试剂盒

CTGF ELISA 试剂盒

样品

稀释倍率

CTGF（全长＋N末端）（pM）

CTGF（全长）（pM）

CTGF（N末端）(pM）

人

血清

1/1

1735

952

783

1/2

875

495

380

1/4

417

237

180

人

血浆(EDTA)

1/1

684

126

558

1/2

347

66.2

281

1/4

157

34.9 * 参考值

122

【结果】


使用该方法检测定量CTGF（N末端），可观察到高稀释线性。



■ 健康者和IPF患者血浆中N末端CTGF的检测

使用CTGF（全长+N末端）ELISA试剂盒 Wako和CTGF（全长）ELISA试剂盒 Wako，检测从健康者以及特发

性肺纤维化（IPF）患者中提取的血浆（EDTA），并求出N末端CTGF的量。

CTGF ELISA 试剂盒

健康者

ID

CTGF（全长+N末端）（pM）

CTGF（全长）（pM）

CTGF（N末端）（pM）

1

494

83.4

411

2

535

116

419

3

580

155

425

4

661

129

532

5

383

63.5

319

mean

421

SD

75.6


IPF患者

ID

CTGF（全长+N末端）（pM）

CTGF（全长）（pM）

CTGF（N末端）（pM）

1

1226

213

1013

2

1004

187

817

3

432

35.4

397

4

1422

278

1144

5

938

39.9

898

6

682

73.2

609

7

1123

168

955

8

849

45.5

804

9

857

60.6

796

mean

826

SD

221


【结果】


IPF患者血浆中N末端的CTGF量明显高于健康者。

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※ 本页面产品仅供研究用，研究以外不可使用。

FAQ


◆关于样品


Q1：血液样品建议使用何种抗凝剂？

A1：参考以下文献，肝素血浆中CTGF（N末端）的值高于EDTA血浆和柠檬酸盐血浆。因此，不建议使用肝素作为抗凝剂。

A1：<参考文献> Miyazaki, O. et al.: Ann. Clin. Biochem., 47, 205(2010).

A1： Subtraction method for determination of N-terminal connective tissue growth factor


◆关于试剂盒

Q1：试剂盒中的抗体是否有销售？

A1：FUJIFILM Wako供应以下固相化抗体。

A1：抗CTGFModule 1，单克隆抗体（30D2）（产品编号：018-27423）


检测抗体不单独销售。FUJIFILM Wako可供应Module 2识别抗体（产品编号：015-27433）及Module 4识别抗体（产品编号：019-27453），但与本试剂盒使用抗体的克隆不同。

Q2：标准品是如何标价的？

A2：标准品参考以下文献进行标价。

A1：Miyazaki, O. et al.: Ann. Clin. Biochem., 47, 205(2010).



◆关于试剂盒的使用


Q1：本试剂盒进行检测时所需的试剂、器具和设备？

A1：使用本试剂盒需要以下试剂、器具和设备。

A1：●　纯净水（蒸馏水）

A1：●　标准溶液/样品稀释用试管

A1：●　清洗液稀释用玻璃器具（量筒/烧杯）

A1：●　可更换吸头的移液器（可准确移液10 μL以及 200~500 μL的一次性吸头）

A1：●　可连续分注100 μL的移液器

A1：●　具有吸水性的毛巾（清洗后去除孔板残留液体）

A1：●　涡旋振荡器

A1：●　微孔板振荡器（约500~800 rpm）

A1：●　96孔板用清洗器（建议使用）或清洗瓶

A1：●　读板器 (450±10 nm / 600~650 nm)

A1：●　数据处理软件

Q2：两个试剂盒必须配合使用吗？

A2：若检测CTGF (N末端, Module 1-2)，需两个试剂盒配合使用。

A1：若只检测CTGF（全长），只需购买CTGF(全长) ELISA试剂盒。

Q3：96次用可检测几个样品？

A3：标准品使用16孔（n=2），n=1时可检测80个样品，n=2时可检测40个样品。

 

Q4：试剂盒可分多次使用吗？

A4：可以，孔板设计为可每8个孔进行分割的样式，试剂盒包含充足数量的标准品。

A4：但是多次使用时，每次实验前都需重新绘制标准曲线，并且可检测的样品数量也会减少。另外，孔板封条只有4片，请根据需求进行使用。

参考文献


1. 

Biernacka, A., Dobaczewski, M., and Frangogiannis, N. G.: Growth Factors, 29(5), 196(2011).
TGF-β signaling in fibrosis

2. 

Mori T., et al.: J. Cell Physiol., 181(1), 153(1999).
Role and interaction of connective tissue growth factor with transforming growth factor-beta in persistent fibrosis: A mouse fibrosis model.

3.

Kono, M. et al.: Clin. Chim. Acta, 412, 2211(2011).

Plasma CCN2 (connective tissue growth factor; CTGF) is a potential biomarker in idiopathic pulmonary fibrosis (IPF)

4.

Miyazaki, O. et al.: Ann. Clin. Biochem., 47, 205(2010).
Subtraction method for determination of N-terminal connective tissue growth factor

产品列表

产品编号 产品名称 产品规格 产品等级 备注
290-84701 CTGF(Full) ELISA Kit Wako
CTGF (全长) ELISA试剂盒 Wako		 96次用 免疫化学用
292-84901 CTGF(Full+N-terminal region) ELISA Kit Wako
CTGF(全长+N末端) ELISA试剂盒 Wako		 96次用 免疫化学用
免责声明

1. 本公司密切关注本网站发布的内容，但不保证发布内容的准确性、完整性、可靠性和最新性等。

2. 本公司不保证使用本网站期间不会出现故障或计算机病毒污染的风险。

3. 无论何种原因，使用本网站时给用户或第三方造成的任何不利或损害，本公司概不负责。此外，对于用户与其他用户或第三方之间因本网站发生的任何交易、通讯

3. 或纠纷，本公司概不负责。

4. 本网站可提供的所有产品和服务均不得用于人体或动物的临床诊断或治疗，仅可用于科研等非医疗目的。如任何用户将本网站提供的产品和服务用于临床诊断或治

4. 疗，以及其他特定的用途或行为，本公司概不保证其安全性和有效性，并且不负任何相关的法律责任。