Coelenterazine cp 腔肠素cp；Coelenterazine 400 a 腔肠素400a； 海肾荧光素酶（Rluc）；萤火虫荧光素酶（Fluc）；Aequorin 水母发光蛋白；CAS NO：123437-25-2；

产品信息

产品描述

腔肠素（Coelenterazine）是在水生生物中发现的一种发光基团（luminophore），是许多荧光素酶的作用底物，包括海肾荧光素酶（Renilla reniformis luciferase, Rluc），分泌型膜锚定荧光素酶（Gaussia luciferase, Gluc）和薮枝虫荧光素酶（Obelia luciferase），和发光蛋白包括水母发光蛋白（Aequorin）的构成之一。其作用原理是以腔肠素为底物的荧光素酶，在含分子氧的条件下，氧化腔肠素产生高能量的中间产物，在此过程发射蓝色光，光波长在450~480nm【见图1】。而甲虫（或萤火虫）荧光素/荧光素酶（FLuc）系统不同，其在含分子氧的条件下，还需要ATP和Mg2+的存在才能同时发光，光波长在550-570nm。正由于生物发光信号和底物的差异，RLuc常常与FLuc联合用于多重转录报告基因研究，或用作Fluc系统内萤火虫荧光素酶转染的内参。腔肠素应用甚是广泛，包括：1）活细胞或组织的钙离子检测；2）细胞或组织的超氧化物和过氧亚硝基阴离子（活性氧，ROS）化学发光检测；3）基因报告基因检测；4）动物活体检测；5）ELISA和生物发光共振能量转移（BRET）用于蛋白相互作用研究；6）药物高通量筛选（HTS）；

天然腔肠素（Coelenterazine Native，CTZ-Native）是自然界中存在最丰富的一种腔肠素，也是目前应用最普遍的一种标准底物。不仅是脱辅基水母发光蛋白（APO）的底物，也是海肾荧光素酶（Rluc）和分泌型膜锚定荧光素酶（Gluc）等荧光素酶的作用底物。前者用于检测钙离子浓度，后者用作荧光素酶的报告基因检测系统。还可用于生物共振能量转移BRET，细胞或组织内的超氧阴离子和过氧化亚硝基阴离子水平（ROS）的化学发光检测等。

腔肠素cp（Coelenterazine cp，CTZ-cp）是一种天然腔肠素（CTZ-Native）的合成衍生物。与天然腔肠素水母发光蛋白复合物相比，CTZ-cp复合物的荧光强度高15倍，且对钙离子有更快的反应时间。最大发射波长为442nm。

产品特性

1）   CAS NO：123437-25-2

2）   化学名：8-(cyclopentylmethyl)-6-(4-hydroxyphenyl)-2-[(4-hydroxyphenyl)methyl]-7H-imidazo[1,2- a]pyrazin-3-one

3）   同义名：CTZ-cp; cp-Coelenterazine; CLZN-cp; cp-腔肠素；

4）   分子式：C25H25N3O3

5）   分子量：415.48 g/mol

6）   纯度：≥97%

7）   外观：黄色固体

8）   溶解性：溶于甲醇或乙醇，不要溶于DMSO

9）   化学结构式：

保存与运输方法

保存：-20℃干燥避光保存，且保存于惰性气体内。至少一年有效。

运输：冰袋运输。

注意事项

1）   腔肠素（Coelenterazine， CTZ）及衍生物最好以完全冻干粉的状态保存在惰性气体内，密封后置于-20℃或-70℃长期避光保存。管内即使有微量空气，也会随着时间慢慢氧化腔肠素使其活性丧失，这样不同实验之间的定量结果可能很不可信。

2）   腔肠素（Coelenterazine， CTZ）及衍生物不建议以储存液的形式保存，最好于实验前配制新鲜的溶液。不建议将配好的腔肠素溶液储存在-20℃或-70℃，因其具有一个高能量的二氧杂环丁酮环形结构，即使在低温条件下都会自发降解。

3）   商业化腔肠素的种类繁多，有天然腔肠素，以及各种腔肠素衍生物（比如，腔肠素h，腔肠素400a，腔肠素e，腔肠素f，腔肠素hcp）。它们对钙离子的亲和力，光谱特性，以及应用倾向上会有差异，详见附录1—天然腔肠素及其衍生物的光谱特性，附录2—天然腔肠素及其衍生物的应用差异选择适当的产品。

4）   为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法

一、 腔肠素cp的溶解事项

1）   腔肠素cp不溶于水，接触到空气，水分或任何氧化剂都不稳定。千万不要溶于DMSO，因会发生未知反应引起腔肠素cp的快速降解并生成未知的代谢产物。

2）   腔肠素cp溶于甲醇或乙醇，毒性最小的溶剂是无水乙醇，可溶解粉末配制成0.1-1mg/ml溶液，之后加入需要的缓冲液，尽量保持缓冲液pH小于7.0，因大多数腔肠素衍生物在碱性条件会快速降解，有时会立即产生沉淀。

二、 腔肠素cp的保存事项

最好在使用前，才用无水乙醇溶解腔肠素cp粉末，然后用所选的缓冲液稀释并混匀。此时配好的工作缓冲液需静置20-30min使其稳定（因部分底物会发生自氧化）后才进行体外实验。该工作液能稳定保存几个小时（室温3-4h），仅微弱的信号衰减可能发生。

不建议将腔肠素cp的乙醇溶液置于-20℃或-70℃保存，因天然腔肠素及任何衍生物含有一个高能量的二氧杂环丁酮环形结构，即使在低温条件下都会自发降解。若一定要保存乙醇溶液，请置于氮气或氩气下＜-70℃避光保存。

附录1天然腔肠素及其衍生物的光谱特性

附录2 天然腔肠素及其衍生物的应用差异

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产品信息

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腔肠素（Coelenterazine）是在水生生物中发现的一种发光基团（luminophore），是许多荧光素酶的作用底物，包括海肾荧光素酶（Renilla reniformis luciferase, Rluc），分泌型膜锚定荧光素酶（Gaussia luciferase, Gluc）和薮枝虫荧光素酶（Obelia luciferase），和发光蛋白包括水母发光蛋白（Aequorin）的构成之一。其作用原理是以腔肠素为底物的荧光素酶，在含分子氧的条件下，氧化腔肠素产生高能量的中间产物，在此过程发射蓝色光，光波长在450~480nm【见图1】。而甲虫（或萤火虫）荧光素/荧光素酶（FLuc）系统不同，其在含分子氧的条件下，还需要ATP和Mg2+的存在才能同时发光，光波长在550-570nm。正由于生物发光信号和底物的差异，RLuc常常与FLuc联合用于多重转录报告基因研究，或用作Fluc系统内萤火虫荧光素酶转染的内参。腔肠素应用甚是广泛，包括：1）活细胞或组织的钙离子检测；2）细胞或组织的超氧化物和过氧亚硝基阴离子（活性氧，ROS）化学发光检测；3）基因报告基因检测；4）动物活体检测；5）ELISA和生物发光共振能量转移（BRET）用于蛋白相互作用研究；6）药物高通量筛选（HTS）；

天然腔肠素（Coelenterazine Native，CTZ-Native）是自然界中存在最丰富的一种腔肠素，也是目前应用最普遍的一种标准底物。不仅是脱辅基水母发光蛋白（APO）的底物，也是海肾荧光素酶（Rluc）和分泌型膜锚定荧光素酶（Gluc）等荧光素酶的作用底物。前者用于检测钙离子浓度，后者用作荧光素酶的报告基因检测系统。还可用于生物共振能量转移BRET，细胞或组织内的超氧阴离子和过氧化亚硝基阴离子水平（ROS）的化学发光检测等。

腔肠素cp（Coelenterazine cp，CTZ-cp）是一种天然腔肠素（CTZ-Native）的合成衍生物。与天然腔肠素水母发光蛋白复合物相比，CTZ-cp复合物的荧光强度高15倍，且对钙离子有更快的反应时间。最大发射波长为442nm。

产品特性

1）   CAS NO：123437-25-2

2）   化学名：8-(cyclopentylmethyl)-6-(4-hydroxyphenyl)-2-[(4-hydroxyphenyl)methyl]-7H-imidazo[1,2- a]pyrazin-3-one

3）   同义名：CTZ-cp; cp-Coelenterazine; CLZN-cp; cp-腔肠素；

4）   分子式：C25H25N3O3

5）   分子量：415.48 g/mol

6）   纯度：≥97%

7）   外观：黄色固体

8）   溶解性：溶于甲醇或乙醇，不要溶于DMSO

9）   化学结构式：

保存与运输方法

保存：-20℃干燥避光保存，且保存于惰性气体内。至少一年有效。

运输：冰袋运输。

注意事项

1）   腔肠素（Coelenterazine， CTZ）及衍生物最好以完全冻干粉的状态保存在惰性气体内，密封后置于-20℃或-70℃长期避光保存。管内即使有微量空气，也会随着时间慢慢氧化腔肠素使其活性丧失，这样不同实验之间的定量结果可能很不可信。

2）   腔肠素（Coelenterazine， CTZ）及衍生物不建议以储存液的形式保存，最好于实验前配制新鲜的溶液。不建议将配好的腔肠素溶液储存在-20℃或-70℃，因其具有一个高能量的二氧杂环丁酮环形结构，即使在低温条件下都会自发降解。

3）   商业化腔肠素的种类繁多，有天然腔肠素，以及各种腔肠素衍生物（比如，腔肠素h，腔肠素400a，腔肠素e，腔肠素f，腔肠素hcp）。它们对钙离子的亲和力，光谱特性，以及应用倾向上会有差异，详见附录1—天然腔肠素及其衍生物的光谱特性，附录2—天然腔肠素及其衍生物的应用差异选择适当的产品。

4）   为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法

一、 腔肠素cp的溶解事项

1）   腔肠素cp不溶于水，接触到空气，水分或任何氧化剂都不稳定。千万不要溶于DMSO，因会发生未知反应引起腔肠素cp的快速降解并生成未知的代谢产物。

2）   腔肠素cp溶于甲醇或乙醇，毒性最小的溶剂是无水乙醇，可溶解粉末配制成0.1-1mg/ml溶液，之后加入需要的缓冲液，尽量保持缓冲液pH小于7.0，因大多数腔肠素衍生物在碱性条件会快速降解，有时会立即产生沉淀。

二、 腔肠素cp的保存事项

最好在使用前，才用无水乙醇溶解腔肠素cp粉末，然后用所选的缓冲液稀释并混匀。此时配好的工作缓冲液需静置20-30min使其稳定（因部分底物会发生自氧化）后才进行体外实验。该工作液能稳定保存几个小时（室温3-4h），仅微弱的信号衰减可能发生。

不建议将腔肠素cp的乙醇溶液置于-20℃或-70℃保存，因天然腔肠素及任何衍生物含有一个高能量的二氧杂环丁酮环形结构，即使在低温条件下都会自发降解。若一定要保存乙醇溶液，请置于氮气或氩气下＜-70℃避光保存。

附录1天然腔肠素及其衍生物的光谱特性

附录2 天然腔肠素及其衍生物的应用差异

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