Mature BDNF ELISA试剂盒 Wako Mature BDNF ELISA Kit Wako

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Mature BDNF ELISA试剂盒 Wako
Mature BDNF ELISA Kit Wako

  • 产品特性
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  • Q&A
  • 参考文献

Mature BDNF ELISA试剂盒 WakoMature BDNF ELISA试剂盒 Wako                              Mature BDNF ELISA Kit Wako

Mature BDNF ELISA Kit Wako

BDNF属于NGF(神经生长因子)家族,参与神经发生,神经保护,突触形成等,可作为抑郁症等精神疾病的候补标记物。另外有报告称,BDNF除神经领域以外,还与心脏病、糖尿病、痛风、牙周病、压力、运动等有关,是众多领域的研究对象。

BDNF的前体是proBDNF,通过切断proBDNF的一部分形成mBDNF (mature BDNF)。据报告,proBDNF在生物体内与p75 NTR受体结合,并有着与mBDNF不同的作用。本产品为mBDNF特异性检测ELISA试剂盒。

 

标准曲线范围: 4.1-1000 pg/mL

检测样品类型:人血清、人血浆

所需样品量 :10 μL

检测时间  :4 h

检测法   显色法

 


◆特点


● 仅需少量样品即可检测

● 高灵敏度

● mBDNF特异性检测,与proBDNF交叉率低

 

◆试剂盒组成

96次

 抗体固定化酶标板

1 plate

 Mature BDNF标准品

100 μL

 缓冲液

60 mL

 生物素结合抗体溶液

100 μL

 过氧化物酶结合链霉亲和素溶液

100 μL

 TMB溶液

6 mL

 反应终止液

6 mL

 清洗液(10×)

100 mL

 封板膜

4 张

◆试剂盒性能


标准曲线范围:4.1~1000 pg/mL

检测对象:mBDNF※1

检测对象样品:人血清、人血浆※2

所需样品量:人血清:10 μL(10倍稀释时)人血浆:5 μL(20倍稀释时)

检测时间4 h

检测法:显色法

※1:与proBDNF的交叉反应性约10%。

※2:使用可以识别人、小鼠、大鼠BDNF的抗体。

Mature BDNF ELISA试剂盒 Wako                              Mature BDNF ELISA Kit Wako

检测原理


本产品使用mBDNF的N端断面特异性单克隆抗体与mBDNF多克隆抗体组合而成的夹心法ELISA。通过使用与N段断面反应的单克隆抗体,降低与proBDNF的交叉反应性(约10%)。

Mature BDNF ELISA试剂盒 Wako                              Mature BDNF ELISA Kit Wako

本产品

A公司同等产品

B公司同等产品

C公司同等产品

proBDNF交叉率

约10%

约10%

约15%

约50%

灵敏度(标准曲线下限)

4.1 pg/mL

62.5 pg/mL

15.6 pg/mL

15.0 pg/mL

◆数据


加标回收率试验

样品

添加量(pg/mL)

检测值(pg/mL)

回收量(pg/mL)

回收率(%)

人血清①

0

330

100

423

93

93

250

581

251

100

500

817

487

97.4

人血清②

0

56.6

50

106

49.4

98.8

100

154

97.4

97.4

200

257

200

100

300

363

306

102

样品

添加量(pg/mL)

检测值(pg/mL)

回收量(pg/mL)

回收率(%)

人血浆①

0

156

100

252

96

96

250

407

251

100

500

661

505

101

人血浆②

0

66

50

115

49

98

100

164

98

98

200

276

210

105

300

369

303

101

稀释线性测试

Mature BDNF ELISA试剂盒 Wako                              Mature BDNF ELISA Kit Wako


检测案例:临床样品检测

使用本产品检测精神疾病患者(重度抑郁症、狂躁抑郁症、精神分裂症)以及健康个体血清中的mBDNF。

健康个体(n=6)

No.

性别

年龄

检测值(ng/mL)

1

F

48

14.5

2

F

50

22.8

3

F

54

20

4

F

47

18.5

5

F

42

13.8

6

F

60

19.1

重度抑郁症(n=6)

No.

性别

年龄

检测值(ng/mL)

1

F

66

15.7

2

F

38

18.1

3

F

43

10

4

F

52

16.6

5

F

41

22.3

6

F

58

15.1

狂躁抑郁症(n=4)

No.

性别

年龄

检测值(ng/mL)

1

F

46

16.5

2

F

52

20.9

3

F

52

11.5

4

F

52

11.5

精神分裂症(n=4)

No.

性别

年龄

检测值(ng/mL)

1

F

36

17.9

2

F

53

23

3

F

55

14.6

4

F

51

10.8

健康个体

重度抑郁症

狂躁抑郁症

精神分裂症

18.1 ± 3.41

16.3 ± 4.02

15.1 ± 4.53

16.6 ± 5.17

点击此处下载产品彩页

※ 本页面产品仅供研究用,研究以外不可使用。

FAQ


◆实验必要的器材、仪器


Q. 使用本产品检测时有哪些必要的器材或仪器呢?

A. ● 纯净水(蒸馏水)

A. ● 标准溶液/样品稀释用试管

A. ● 清洗液稀释用玻璃器材(量筒/烧杯)

A. ● 移液器(使用一次性吸头准确吸取50 μL以及100~1000 μL的移液器)

A. ● 多道移液器

A. ● 纸巾、擦拭布等(擦拭清洗后微孔板上残留的液体)

A. ● 混合振荡器(Vortex)

A. ● 微孔板振荡器(约600~1200 rpm)

A. ● 洗板机(建议使用)或洗瓶

A. ● 酶标仪(450±10 nm / 600~650 nm)

A. ● 数据计算用软件

 

◆试剂盒使用抗体销售


Q. 本产品的抗体可单独购买吗?

A. 不可以。

 


◆试剂盒形态


Q. 试剂盒可以拆分使用吗?

A. 可以。试剂盒使用了8联排可拆卸酶标板,并配有足够标准品。但拆分使用时,每次都需要绘制标准曲线,

A. 因此可检测样本数量会有所减少。

A. ■ 1次使用时

A.  40个样品(80孔)

A.■  ※ 标准品占用16 孔

A. ■ 分2次使用时

A.  32个样品(64 孔)

A.■  ※ 标准品占用32 孔


产品列表

产品编号 产品名称 产品规格 产品等级 备注
296-83201 Mature BDNF ELISA Kit Wako
Mature BDNF ELISA试剂盒 Wako
96次

免责声明

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wako 抗proBDNF单克隆抗体(3C10H)019-28411

BDNF(Brain-derived Neurotrophic Factor,脑源性神经营养因子) 是NGF家族所属的一种神经营养因子,参与神经发生、神经保护作用以及突触的形成,同时也被认为是抑郁症等神经精神疾病的候补标志物。BDNF里存在着的BDNF的前体proBDNF——被加工后便成为成熟的mBDNF(mature BDNF)。另一方面,proBDNF与mBDNF不同,已知proBDNF能够促进细胞死亡、生长锥的收缩、树突棘的收缩以及长时程抑制1)。本品为能够特异性识别proBDNF的小鼠单克隆抗体1)

参考文献

1. Kojima, M., et al. : Int J Mol Sci., 21, 3984 (2020).

◆产品信息

  产品编号   019-28411
  组成   PBS、0.05% 叠氮化钠
  抗体浓度   标签标注的初始生产批次:1.09   mg/mL
  克隆号   3C10H
  抗原   合成肽(KVRPNEENNKDADLY)
  免疫动物   小鼠
  抗体亚型   IgG
  种属交叉反应性   小鼠
  表位   proBDNF 76-90 a.a.
  应用   ELISA 1:100-10,000 

  免疫沉淀 1 μg/mL

产品列表

产品编号 产品名称 产品等级 包装
019-28411 Anti proBDNF, Monoclonal Antibody(3C10H)

抗proBDNF单克隆抗体(3C10H)

免疫化学用 100 μL

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抗BDNF单克隆抗体(3C8)

免疫化学用 100 μL

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BDNF ELISA试剂盒

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BDNF ELISA试剂盒

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BDNF ELISA试剂盒BDNF ELISA试剂盒


脑源性神经营养因子(BDNF)是大脑中丰富的神经营养因子之一,参与神经元存活、维持、伸长和成熟以及突触传递的长期增强等,并且有望作为抑郁症等精神疾病的生物标志物。此外,据报告,它还与心脏病、糖尿病、痛风、牙周病、应激和运动等相关,是众多领域的研究靶标。

BDNF的前体proBDNF经加工成为Mature BDNF(mBDNF)。据报告,proBDNF和mBDNF拥有不同的生理活性,因此,区分和检测每种BDNF非常重要。

 

◆BDNF的概念

脑源性神经营养因子(BDNF)是一种在神经功能的发育和维持中发挥重要作用的分子。据近年的报告,它参与多种疾病,并有望被用作生物标志物。BDNF的前体(proBDNF)经加工后成为成熟体(mBDNF: Mature BDNF),但proBDNF和mBDNF具有完全不同的作用,因此需要能准确分析mBDNF的方法。

 

◆脑源性神经营养因子(BDNF: Brain-Derived Neurotrophic Factor)

BDNF是Barde等研究人员于1982年从猪脑中分离出来的分泌蛋白,是大脑中高表达的神经营养因子之一。BDNF 是神经营养因子家族中第二个被确认的神经营养因子,在神经系统的发育和成熟期广泛分布于大脑中。它的代表性作用是通过高亲和力受体Tropomyosin related kinase B(TrkB)促进神经元的存活、维持以及突触生成1),2)。BDNF是参与神经功能形成和维持的重要因子,因此在神经科学领域备受关注。

 

◆对精神疾病生物标志物的期望

BDNF被认为与精神疾病等多种脑部疾病密切相关3)。特别是在抑郁症方面,自Karege等研究人员首次报告抑郁症患者血清中的BDNF值低于健康人后4),其作为生物标志物的作用备受期望。此外,在未服用抗抑郁药物的抑郁症患者中观察到BDNF减少,表明了BDNF的定量分析用作抑郁症治疗指标的可能性。近年来,部分荟萃分析表明,不仅是抑郁症,双相情感障碍和精神分裂症中也发现血清中的BDNF减少5)。目前,BDNF在特定精神疾病中的特征性变化尚不明确,但很可能是各种精神疾病的关键因素。

 

◆成熟体BDNF和前体BDNF

BDNF作为前体BDNF(proBDNF)表达,并被输送到分泌部位,经过加工成为成熟体BDNF(mBDNF)6)。一直以来,作为前体的proBDNF都被认为没有生理作用,但近年研究表明,它具有与mBDNF截然不同的生理作用。mBDNF通过TrkB促进突触传递的长期增强(LTP:Long-term potentiation)和神经的新生、发育。另一面,proBDNF 通过低亲和力受体p75NTR7促进突触传递的长期抑制(LTD: Long-term depression)和神经元凋亡7)(图 1)。上述不同的加工过程产生的不同效果,表明BDNF具有极其复杂的神经元调节机制。因此,为阐明各种精神疾病机制,需要能准确分析mBDNF的方法。

BDNF ELISA试剂盒

图1. BDNF的加工和功能

◆Mature BDNF检测的难题和ELISA试剂盒的研发

传统mBDNF检测中的难题是"对mBDNF的特异性"和"检测灵敏度"。传统试剂盒与proBDNF的交叉率比较高,难以区分检测proBDNF和mBDNF。此外,小鼠血清、血浆和人唾液中的mBDNF浓度低于传统试剂盒的标准曲线下限值,因此难以获得可靠的检测结果 。

在此背景下,FUJIFILM Wako研发了可特异性且高灵敏度检测mBDNF的ELISA试剂盒 “高灵敏度Mature BDNF ELISA试剂盒”(产品编号:290-85801)。本试剂盒使用mBDNF的N端断面识别抗体作为捕获抗体,可降低与proBDNF的交叉率。并且,与传统试剂盒相比,通过使用发光底物大幅提高灵敏度(图2)。除上述试剂盒外,FUJIFILM Wako还提供可使用吸光读取器进行检测的“Mature BDNF ELISA试剂盒Wako”(产品编号:296-83201)。

本试剂盒的不仅可以用于更详细地分析mBDNF和proBDNF的不同作用,还能用于以往难以实现的模型小鼠中的验证和唾液中生物标志物的开发等,期待BDNF研究在未来得到发展。

BDNF ELISA试剂盒

图2. 高灵敏度Mature BDNF ELISA试剂盒Wako的检测原理

表1 FUJIFILM Wako试剂盒和传统试剂盒的对比

FUJIFILM Wako

(发光系统)

FUJIFILM Wako
(显色系统)

A公司试剂盒

B公司试剂盒

C公司试剂盒

标准曲线下限值

0.116 pg/mL

4.1 pg/mL

62.5 pg/mL

15.6 pg/mL

15.0 pg/mL

与人proBDNF的交叉率

1.30%

约10 %

约10 %

约15 %

约50 %

◆产品系列

产品名称

高灵敏度Mature BDNF ELISA试剂盒Wako

Mature BDNF ELISA试剂盒Wako

产品编号

290-85801

296-83201

标准曲线范围

0.116-50 pg/mL

4.1-1,000 pg/mL

检测对象

mBDNF

mBDNF

与人proBDNF的交叉率

1.30%

约10%

检测对象样品

小鼠:血清/血浆/脑匀浆

大鼠:血清/血浆

人:血清/血浆/唾液

人:血清/血浆

所需样品量

13 μL

血清:10 μL

浆:5 μL

检测时间

约4 h

约4 h

检测法

发光系统(需要发光检测用读取器)

显色系统

◆高灵敏度Mature BDNF ELISA试剂盒

高灵敏度Mature BDNF ELISA试剂盒是使用mBDNF的N端断面特异性单克隆抗体与BDNF单克隆抗体组合而成的夹心法ELISA。通过使用断面抗体,与proBDNF的交叉性(与人proBDNF的交叉率:1.30%),并使用发光底物提高灵敏度(标准曲线下限值:0.116 pg/mL)。

试剂盒性能

  标准曲线范围

  0.116-50 pg/mL

  与人proBDNF的交叉率

  1.30%

  检测对象样品

  小鼠:血清/血浆/脑匀浆
  大鼠:血清/血浆
  人:血清/血浆/唾液

  所需样品量

  13 μL(4倍稀释时)

  检测时间

  约4 h

  检测法

  发光系统(需要发光检测用读取器)

稀释线性测试

人 ————————————————————————————————————————————————————————

BDNF ELISA试剂盒

小鼠————————————————————————————————————————————————————————

BDNF ELISA试剂盒

与其他相似蛋白的交叉率

蛋白

交叉率(%)

蛋白

交叉率(%)

人proBDNF

1.3

小鼠proBDNF

0.328

人NGF- β

<0.232

小鼠NGF-β

<0.232

人NT-3

<0.232

小鼠NT-3

<0.232

人NT-4

<0.232

小鼠NT-4

<0.232

【结果】

可以确认与proBDNF神经营养因子家族(NGF、NT-3和NT-4)几乎没有交叉。

野生型和BDNF敲除小鼠脑匀浆的检测

为确认对BDNF的特异性,使用本试剂盒检测野生型小鼠和BDNF敲除小鼠脑匀浆中的mBDNF。

BDNF ELISA试剂盒

【结果】

BDNF敲除小鼠的检测值非常低,可确认对BDNF的特异性。

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◆Mature BDNF ELISA试剂盒Wako

Mature BDNF ELISA试剂盒Wako是使用mBDNF的N端断面特异性单克隆抗体与BDNF多克隆抗体组合而成的夹心法ELISA。采用了显色系统,因此可使用吸光读取器进行检测。

试剂盒性能

  标准曲线范围

  4.1 – 1,000 pg/mL

  与人proBDNF的交叉率

  约10%

  检测对象样品

  人:血清/血浆

  所需样品量

  血清:10 μL(10倍稀释时)
  血浆:5 μL(20倍稀释时)

  检测时间

  约4 h

  检测法

  显色系统

应用数据

—精神病患者临床样品(血清)的检测

使用本试剂盒检测精神疾病患者(重度抑郁症,躁狂抑郁症、精神分裂症)和健康人血清中的mBDNF。

健康人(n=6)

重度抑郁症(n=6)

躁狂抑郁症(n=6)

精神分裂症(n=6)

18.1 ± 3.41 ng/mL

16.3 ± 4.02 ng/mL

15.1 ± 4.53 ng/mL

16.6 ± 5.17 ng/mL

【结果】

可分别在精神疾病患者(重度抑郁症、躁狂抑郁症、精神分裂症)和健康人的血清中定量mBDNF。

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参考文献

1)

Schinder, A.F. and Poo, M.: Trends Neurosci ., 23(12), 639(2000).

The neurotrophin hypothesis for synaptic plasticity

2)

Huang, E. J. and Reichardt, L. F.: Annu. Rev. Neurosci ., 24, 677(2001).

Neurotrophins: roles in neuronal development and function

3)

Hempstead, B. L. : Trans. Am. Clin. Climatol. Assoc .,126, 9(2015).

Brain-Derived Neurotrophic Factor: Three Ligands, Many Actions

4)

Karege, F. et al .: Psychiatry Res ., 1s09(2), 143(2002).

Decreased serum brain-derived neurotrophic factor levels in major depressed patients

5)

Cattaneo, A. et al .: Translational Psychiatry , 6, e958(2016).

The human BDNF gene: peripheral gene expression and protein levels as biomarkers for psychiatric disorders

6)

 Lessmann, V. and Brigadski, T.: Neurosci. Res ., 65(1), 11(2009).

Mechanisms, locations, and kinetics of synaptic BDNF secretion: an update

7)

Barker, P.A.: Nat. Neurosci ., 12(2), 105(2009).

Whither proBDNF?


产品列表
高灵敏度Mature BDNF ELISA试剂盒Wako(发光系统)

产品编号 产品名称 产品规格 产品等级 备注
290-85801 Mature BDNF ELISA Kit Wako, High Sensitive
高灵敏度Mature BDNF ELISA试剂盒
96次 免疫化学用
*以上产品仅供实验研究用
Mature BDNF ELISA试剂盒Wako(显色系统)

产品编号 产品名称 产品规格 产品等级 备注
296-83201 Mature BDNF ELISA Kit Wako 
Mature BDNF ELISA试剂盒Wako
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抗proBDNF单抗(3C10H)
100 μL 免疫化学用
*以上产品仅供实验研究用
BDNF(蛋白)

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028-16451 Brain Derived Neurotrophic Factor(BDNF), Human, recombinant, Animal-derived-free
重组人脑源性神经营养因子,无动物源
10 μg 细胞生物学用
022-16454 Brain Derived Neurotrophic Factor(BDNF), Human, recombinant, Animal-derived-free
重组人脑源性神经营养因子,无动物源
100 μg 细胞生物学用
028-16456 Brain Derived Neurotrophic Factor(BDNF), Human, recombinant, Animal-derived-free
重组人脑源性神经营养因子,无动物源
250 μg 细胞生物学用
*以上产品仅供实验研究用

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BDNF ELISA试剂盒

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BDNF ELISA试剂盒

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BDNF ELISA试剂盒BDNF ELISA试剂盒


脑源性神经营养因子(BDNF)是大脑中丰富的神经营养因子之一,参与神经元存活、维持、伸长和成熟以及突触传递的长期增强等,并且有望作为抑郁症等精神疾病的生物标志物。此外,据报告,它还与心脏病、糖尿病、痛风、牙周病、应激和运动等相关,是众多领域的研究靶标。

BDNF的前体proBDNF经加工成为Mature BDNF(mBDNF)。据报告,proBDNF和mBDNF拥有不同的生理活性,因此,区分和检测每种BDNF非常重要。

 

◆BDNF的概念

脑源性神经营养因子(BDNF)是一种在神经功能的发育和维持中发挥重要作用的分子。据近年的报告,它参与多种疾病,并有望被用作生物标志物。BDNF的前体(proBDNF)经加工后成为成熟体(mBDNF: Mature BDNF),但proBDNF和mBDNF具有完全不同的作用,因此需要能准确分析mBDNF的方法。

 

◆脑源性神经营养因子(BDNF: Brain-Derived Neurotrophic Factor)

BDNF是Barde等研究人员于1982年从猪脑中分离出来的分泌蛋白,是大脑中高表达的神经营养因子之一。BDNF 是神经营养因子家族中第二个被确认的神经营养因子,在神经系统的发育和成熟期广泛分布于大脑中。它的代表性作用是通过高亲和力受体Tropomyosin related kinase B(TrkB)促进神经元的存活、维持以及突触生成1),2)。BDNF是参与神经功能形成和维持的重要因子,因此在神经科学领域备受关注。

 

◆对精神疾病生物标志物的期望

BDNF被认为与精神疾病等多种脑部疾病密切相关3)。特别是在抑郁症方面,自Karege等研究人员首次报告抑郁症患者血清中的BDNF值低于健康人后4),其作为生物标志物的作用备受期望。此外,在未服用抗抑郁药物的抑郁症患者中观察到BDNF减少,表明了BDNF的定量分析用作抑郁症治疗指标的可能性。近年来,部分荟萃分析表明,不仅是抑郁症,双相情感障碍和精神分裂症中也发现血清中的BDNF减少5)。目前,BDNF在特定精神疾病中的特征性变化尚不明确,但很可能是各种精神疾病的关键因素。

 

◆成熟体BDNF和前体BDNF

BDNF作为前体BDNF(proBDNF)表达,并被输送到分泌部位,经过加工成为成熟体BDNF(mBDNF)6)。一直以来,作为前体的proBDNF都被认为没有生理作用,但近年研究表明,它具有与mBDNF截然不同的生理作用。mBDNF通过TrkB促进突触传递的长期增强(LTP:Long-term potentiation)和神经的新生、发育。另一面,proBDNF 通过低亲和力受体p75NTR7促进突触传递的长期抑制(LTD: Long-term depression)和神经元凋亡7)(图 1)。上述不同的加工过程产生的不同效果,表明BDNF具有极其复杂的神经元调节机制。因此,为阐明各种精神疾病机制,需要能准确分析mBDNF的方法。

BDNF ELISA试剂盒

图1. BDNF的加工和功能

◆Mature BDNF检测的难题和ELISA试剂盒的研发

传统mBDNF检测中的难题是"对mBDNF的特异性"和"检测灵敏度"。传统试剂盒与proBDNF的交叉率比较高,难以区分检测proBDNF和mBDNF。此外,小鼠血清、血浆和人唾液中的mBDNF浓度低于传统试剂盒的标准曲线下限值,因此难以获得可靠的检测结果 。

在此背景下,FUJIFILM Wako研发了可特异性且高灵敏度检测mBDNF的ELISA试剂盒 “高灵敏度Mature BDNF ELISA试剂盒”(产品编号:290-85801)。本试剂盒使用mBDNF的N端断面识别抗体作为捕获抗体,可降低与proBDNF的交叉率。并且,与传统试剂盒相比,通过使用发光底物大幅提高灵敏度(图2)。除上述试剂盒外,FUJIFILM Wako还提供可使用吸光读取器进行检测的“Mature BDNF ELISA试剂盒Wako”(产品编号:296-83201)。

本试剂盒的不仅可以用于更详细地分析mBDNF和proBDNF的不同作用,还能用于以往难以实现的模型小鼠中的验证和唾液中生物标志物的开发等,期待BDNF研究在未来得到发展。

BDNF ELISA试剂盒

图2. 高灵敏度Mature BDNF ELISA试剂盒Wako的检测原理

表1 FUJIFILM Wako试剂盒和传统试剂盒的对比

FUJIFILM Wako

(发光系统)

FUJIFILM Wako
(显色系统)

A公司试剂盒

B公司试剂盒

C公司试剂盒

标准曲线下限值

0.116 pg/mL

4.1 pg/mL

62.5 pg/mL

15.6 pg/mL

15.0 pg/mL

与人proBDNF的交叉率

1.30%

约10 %

约10 %

约15 %

约50 %

◆产品系列

产品名称

高灵敏度Mature BDNF ELISA试剂盒Wako

Mature BDNF ELISA试剂盒Wako

产品编号

290-85801

296-83201

标准曲线范围

0.116-50 pg/mL

4.1-1,000 pg/mL

检测对象

mBDNF

mBDNF

与人proBDNF的交叉率

1.30%

约10%

检测对象样品

小鼠:血清/血浆/脑匀浆

大鼠:血清/血浆

人:血清/血浆/唾液

人:血清/血浆

所需样品量

13 μL

血清:10 μL

浆:5 μL

检测时间

约4 h

约4 h

检测法

发光系统(需要发光检测用读取器)

显色系统

◆高灵敏度Mature BDNF ELISA试剂盒

高灵敏度Mature BDNF ELISA试剂盒是使用mBDNF的N端断面特异性单克隆抗体与BDNF单克隆抗体组合而成的夹心法ELISA。通过使用断面抗体,与proBDNF的交叉性(与人proBDNF的交叉率:1.30%),并使用发光底物提高灵敏度(标准曲线下限值:0.116 pg/mL)。

试剂盒性能

  标准曲线范围

  0.116-50 pg/mL

  与人proBDNF的交叉率

  1.30%

  检测对象样品

  小鼠:血清/血浆/脑匀浆
  大鼠:血清/血浆
  人:血清/血浆/唾液

  所需样品量

  13 μL(4倍稀释时)

  检测时间

  约4 h

  检测法

  发光系统(需要发光检测用读取器)

稀释线性测试

人 ————————————————————————————————————————————————————————

BDNF ELISA试剂盒

小鼠————————————————————————————————————————————————————————

BDNF ELISA试剂盒

与其他相似蛋白的交叉率

蛋白

交叉率(%)

蛋白

交叉率(%)

人proBDNF

1.3

小鼠proBDNF

0.328

人NGF- β

<0.232

小鼠NGF-β

<0.232

人NT-3

<0.232

小鼠NT-3

<0.232

人NT-4

<0.232

小鼠NT-4

<0.232

【结果】

可以确认与proBDNF神经营养因子家族(NGF、NT-3和NT-4)几乎没有交叉。

野生型和BDNF敲除小鼠脑匀浆的检测

为确认对BDNF的特异性,使用本试剂盒检测野生型小鼠和BDNF敲除小鼠脑匀浆中的mBDNF。

BDNF ELISA试剂盒

【结果】

BDNF敲除小鼠的检测值非常低,可确认对BDNF的特异性。

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◆Mature BDNF ELISA试剂盒Wako

Mature BDNF ELISA试剂盒Wako是使用mBDNF的N端断面特异性单克隆抗体与BDNF多克隆抗体组合而成的夹心法ELISA。采用了显色系统,因此可使用吸光读取器进行检测。

试剂盒性能

  标准曲线范围

  4.1 – 1,000 pg/mL

  与人proBDNF的交叉率

  约10%

  检测对象样品

  人:血清/血浆

  所需样品量

  血清:10 μL(10倍稀释时)
  血浆:5 μL(20倍稀释时)

  检测时间

  约4 h

  检测法

  显色系统

应用数据

—精神病患者临床样品(血清)的检测

使用本试剂盒检测精神疾病患者(重度抑郁症,躁狂抑郁症、精神分裂症)和健康人血清中的mBDNF。

健康人(n=6)

重度抑郁症(n=6)

躁狂抑郁症(n=6)

精神分裂症(n=6)

18.1 ± 3.41 ng/mL

16.3 ± 4.02 ng/mL

15.1 ± 4.53 ng/mL

16.6 ± 5.17 ng/mL

【结果】

可分别在精神疾病患者(重度抑郁症、躁狂抑郁症、精神分裂症)和健康人的血清中定量mBDNF。

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参考文献

1)

Schinder, A.F. and Poo, M.: Trends Neurosci ., 23(12), 639(2000).

The neurotrophin hypothesis for synaptic plasticity

2)

Huang, E. J. and Reichardt, L. F.: Annu. Rev. Neurosci ., 24, 677(2001).

Neurotrophins: roles in neuronal development and function

3)

Hempstead, B. L. : Trans. Am. Clin. Climatol. Assoc .,126, 9(2015).

Brain-Derived Neurotrophic Factor: Three Ligands, Many Actions

4)

Karege, F. et al .: Psychiatry Res ., 1s09(2), 143(2002).

Decreased serum brain-derived neurotrophic factor levels in major depressed patients

5)

Cattaneo, A. et al .: Translational Psychiatry , 6, e958(2016).

The human BDNF gene: peripheral gene expression and protein levels as biomarkers for psychiatric disorders

6)

 Lessmann, V. and Brigadski, T.: Neurosci. Res ., 65(1), 11(2009).

Mechanisms, locations, and kinetics of synaptic BDNF secretion: an update

7)

Barker, P.A.: Nat. Neurosci ., 12(2), 105(2009).

Whither proBDNF?


产品列表
高灵敏度Mature BDNF ELISA试剂盒Wako(发光系统)

产品编号 产品名称 产品规格 产品等级 备注
290-85801 Mature BDNF ELISA Kit Wako, High Sensitive
高灵敏度Mature BDNF ELISA试剂盒
96次 免疫化学用
*以上产品仅供实验研究用
Mature BDNF ELISA试剂盒Wako(显色系统)

产品编号 产品名称 产品规格 产品等级 备注
296-83201 Mature BDNF ELISA Kit Wako 
Mature BDNF ELISA试剂盒Wako
96次 免疫化学用
*以上产品仅供实验研究用

相关产品
抗BDNF抗体

产品编号 产品名称 产品规格 产品等级 备注
017-28071 Anti BDNF, Monoclonal Antibody(2D7)
抗BDNF单抗(2D7)
100 μL 免疫化学用
014-28081 Monoclonal Antibody(3C8) 
抗BDNF单抗(3C8)
100 μL 免疫化学用
019-28411 Anti proBDNF, Monoclonal Antibody(3C10H) 
抗proBDNF单抗(3C10H)
100 μL 免疫化学用
*以上产品仅供实验研究用
BDNF(蛋白)

产品编号 产品名称 产品规格 产品等级 备注
028-12914 Brain Derived Neurotrophic Factor(BDNF), Human, recombinant
重组人脑源性神经营养因子
1 mg 生化学用
020-12913 Brain Derived Neurotrophic Factor(BDNF), Human, recombinant
重组人脑源性神经营养因子
10 μg 生化学用
024-16453 Brain Derived Neurotrophic Factor(BDNF), Human, recombinant, Animal-derived-free
重组人脑源性神经营养因子,无动物源
1 mg 细胞生物学用
028-16451 Brain Derived Neurotrophic Factor(BDNF), Human, recombinant, Animal-derived-free
重组人脑源性神经营养因子,无动物源
10 μg 细胞生物学用
022-16454 Brain Derived Neurotrophic Factor(BDNF), Human, recombinant, Animal-derived-free
重组人脑源性神经营养因子,无动物源
100 μg 细胞生物学用
028-16456 Brain Derived Neurotrophic Factor(BDNF), Human, recombinant, Animal-derived-free
重组人脑源性神经营养因子,无动物源
250 μg 细胞生物学用
*以上产品仅供实验研究用

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高灵敏度Mature BDNF ELISA试剂盒 Mature BDNF ELISA Kit Wako, High Sensitive

产品中心 > 生命科学 > 疾病研究 > 神经相关疾病

高灵敏度Mature BDNF ELISA试剂盒
Mature BDNF ELISA Kit Wako, High Sensitive

  • 产品特性
  • 相关资料
  • Q&A
  • 参考文献

高灵敏度Mature BDNF ELISA试剂盒高灵敏度Mature BDNF ELISA试剂盒                              Mature BDNF ELISA Kit Wako, High Sensitive

Mature BDNF ELISA Kit Wako, High Sensitive

脑源性神经营养因子(BDNF: Brain-derived neurotrophic factor)是大脑中丰富的神经营养因子之一,参与神经发生、神经保护和突触形成等。此外,它还有望作为抑郁症等精神疾病的生物标志物。

BDNF的前体proBDNF经加工,成为Mature BDNF(mBDNF)。据报告,proBDNF和mBDNF拥有不同的生理活性,因此,区分和检测每种BDNF非常重要。

高灵敏度Mature BDNF ELISA试剂盒Wako可高灵敏度检测样品中的mBDNF。采用发光检测系统,灵敏度是显色检测系统mBDNF ELISA试剂盒(产品编号:296-83201)的约35倍。因此,可以检测传统试剂盒难以检测的小鼠血清、血浆和人唾液中的mBDNF。此外,与proBDNF的交叉性也比现有产品低,可特异性检测mBDNF。

高灵敏度Mature BDNF ELISA试剂盒                              Mature BDNF ELISA Kit Wako, High Sensitive

通知

  本试剂盒为“高灵敏度Mature BDNF ELISA试剂盒(产品编号:298-83901,以下称旧款试剂盒)”的改良试剂盒。旧款产品已于2023年6月

  30日终止销售。

  相比旧款试剂盒,本产品可更高灵敏度地检测mBDNF,并且两款试剂盒的检测值具有相关性。推荐使用过旧款试剂盒的客户继续使用本试剂

  盒。

◆特点

● 高灵敏度检测mBDNF

     标准曲线的下限值为0.116 pg/mL,可检测传统试剂盒难以检测的小鼠血清、血浆和人唾液中的mBDNF。

● 与proBDNF几乎无交叉,可特异性检测mBDNF

     与人proBDNF的交叉率为1.30%,与小鼠proBDNF的交叉率为0.328%。

表1 比较FUJIFILM Wako试剂盒和传统试剂盒


本试剂盒
(发光系统)

FUJIFILM Wako
(显色系统)

A公司试剂盒

B公司试剂盒

C公司试剂盒

标准曲线下限值

0.116 pg/mL

4.1 pg/mL

62.5 pg/mL

15.6 pg/mL

15.0 pg/mL

与人proBDNF的交叉率

1.30 %

约10 %

约10 %

约15 %

约50 %

◆试剂盒组成

96次用

  抗体包被酶标板

1 plate 

  Mature BDNF标准品 (冻干品)

1支

  缓冲液

60 mL

  生物素标记抗体(冻干品)

1支

   HRP-Streptavidin溶液

100 μL

  发光试剂 1

6 mL

  发光试剂 2

6 mL

  清洗液(10x)

100 mL

  封板膜

4 张

◆检测原理

高灵敏度Mature BDNF ELISA试剂盒                              Mature BDNF ELISA Kit Wako, High Sensitive

本试剂盒使用mBDNF的N端断面特异性单克隆抗体与BDNF单克隆抗体组合而成的夹心法ELISA。通过使用Mature BDNF的N端断面识别抗体,抑制与proBDNF的交叉反应性,并使用发光底物提高了灵敏度。

◆试剂盒性能


  标准曲线范围   0.116 – 50 pg/mL
  检测对象   Mature BDNF
  检测对象样品   人:血清/血浆/唾液
  小鼠:血清/血浆/脑匀浆
  大鼠:血清/血浆
  所需样品量   13 μL(4倍稀释时)
  检测时间   约4 h
  检测法   发光系统(需要发光检测用读取器)

◆标准曲线示例

高灵敏度Mature BDNF ELISA试剂盒                              Mature BDNF ELISA Kit Wako, High Sensitive

◆检测数据

加标回收测试

样品

添加量
    (pg/mL)

检测值
    (pg/mL)

回收量
    (pg/mL)

回收率(%)

唾液

0

0.386

0.5

0.875

0.489

97.8

5

5.47

5.08

102

30

30.1

29.7

99

平均  

99.6

血清

0

5.74

0.5

6.21

0.47

94

5

10.9

5.16

103

30

35.7

30

100

平均  

99

血浆

0

4.27

0.5

4.78

0.51

102

5

9.53

5.26

105

30

34.4

30.1

100

平均  

102

小鼠

样品

添加量
    (pg/mL)

检测值
    (pg/mL)

回收量
    (pg/mL)

回收率(%)

血清

0

0.646

0.5

1.11

0.464

92.8

5

5.38

4.73

94.6

30

30.7

30.1

100

平均  

95.8

血浆

0

0.116

0.5

0.614

0.498

99.6

5

4.78

4.66

93.2

30

32.2

32.1

107

平均  

99.9

大鼠

样品

添加量
(pg/mL)

检测值
(pg/mL)

回收量
(pg/mL)

回收率(%)

血清

0

0.86

0.5

1.33

0.47

94

5

6.03

5.17

103

30

28.5

27.6

92

平均  

96.3

血浆

0

0.767

0.5

1.26

0.493

98.6

5

5.95

5.18

104

30

28.4

27.6

92

平均  

98.2

稀释线性测试

高灵敏度Mature BDNF ELISA试剂盒                              Mature BDNF ELISA Kit Wako, High Sensitive

高灵敏度Mature BDNF ELISA试剂盒                              Mature BDNF ELISA Kit Wako, High Sensitive

高灵敏度Mature BDNF ELISA试剂盒                              Mature BDNF ELISA Kit Wako, High Sensitive

小鼠

高灵敏度Mature BDNF ELISA试剂盒                              Mature BDNF ELISA Kit Wako, High Sensitive

高灵敏度Mature BDNF ELISA试剂盒                              Mature BDNF ELISA Kit Wako, High Sensitive

大鼠

高灵敏度Mature BDNF ELISA试剂盒                              Mature BDNF ELISA Kit Wako, High Sensitive

高灵敏度Mature BDNF ELISA试剂盒                              Mature BDNF ELISA Kit Wako, High Sensitive

与其他相似蛋白的交叉率


确认与proBDNF和神经营养因子家族(NGF、NT-3和NT-4)之间的交叉性。

生物种类

蛋白

交叉率(%)

proBDNF

1.3

NGFβ

< 0.232

NT-3

< 0.232

NT-4

< 0.232

小鼠

proBDNF

0.328

NGFβ

< 0.232

NT-3

< 0.232

NT-4

< 0.232

【结果】

可以确认与proBDNF和神经营养因子家族(NGF、NT-3和NT-4)几乎没有交叉。

野生型和BDNF敲除小鼠脑匀浆的检测

为确认对BDNF的特异性,使用本试剂盒检测野生型小鼠和BDNF敲除小鼠脑匀浆中的mBDNF。

高灵敏度Mature BDNF ELISA试剂盒                              Mature BDNF ELISA Kit Wako, High Sensitive

【结果】

BDNF敲除小鼠的检测值非常低,可确认对BDNF的特异性高。

◆产品列表

产品编号

产品名称

产品规格

产品等级

290-85801

Mature BDNF ELISA Kit Wako, High Sensitive
高灵敏度Mature BDNF ELISA试剂盒

96次

免疫化学用

相关产品

产品编号

产品名称

产品规格

产品等级

296-83201

Mature BDNF ELISA Kit Wako
Mature BDNF ELISA试剂盒Wako

96次

免疫化学用

017-28071

Anti BDNF, Monoclonal Antibody(2D7)
抗BDNF,单克隆抗体(2D7)

100 μL

免疫化学用

014-28081

Anti BDNF, Monoclonal Antibody(3C8)
抗BDNF,单克隆抗体(3C8)

100 μL

免疫化学用

019-28411

Anti proBDNF, Monoclonal Antibody(3C10H)
抗proBDNF,单克隆抗体(3C10H)

100 μL

免疫化学用

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FAQ


◆关于样品

Q1. 

如何储存样品?

A1. 

长期存储样品建议在-80℃以下冻存。

Q2.

采集唾液样品的推荐方法?

A2. 

采集检测用的唾液推荐使用流涏法。流涏法是通过将唾液滴入小瓶或试管来收集样品的方法。

已确认使用棉花和灭活的聚合物材料制的棉签采集的样品,检测结果与流涏法相当。但需注意,不同的棉签材质,可能会吸附待测物质。


Q3.

若唾液样品的检测效果不好,应如何解决?

A3.

使用粘稠的唾液可能会无法得到预期的检测值。这时,可先将采集的唾液进行冻融,去除粘蛋白等不溶物,然后使用离心分离(例如:1500×g,15 min)后的上清液作为样品进行检测。


Q4. 

检测小鼠脑匀浆时推荐使用何种提取Buffer?

A4. 

请使用添加了Protease Inhibitor的RIPA Buffer。为了避免Buffer中表面活性剂成分的影响,请使用试剂盒随附的Buffer稀释2倍以上后使用。


Q5. 

请问各样品的推荐稀释倍率是多少?

A5. 

稀释倍率的标准如下所示。实验前,请在标准曲线范围内选择合适的稀释倍率。

样品

稀释倍率

  小鼠血清和血浆 

4倍

  小鼠脑匀浆
  (提取缓冲液: RIPA Buffer+Protease Inhibitor)

2~320倍

  大鼠血清

50倍(标准)

  大鼠血浆

30倍(标准)

  人血清

10~800倍(标准)

  人血浆

10~80倍(标准)

  人唾液

2~8倍

◆关于本试剂盒

Q1.

使用本产品进行检测时需要哪些器具和设备?

A1.

● 纯净水(蒸馏水)

● 标准溶液/样品稀释用试管

● 清洗液稀释用玻璃器皿(量筒、烧杯)

● 可更换吸头的移液器(可准确吸取10 µL和200-500 µL的一次性吸头)

● 多道移液器(可连续分液100 µL)

● 纸巾等吸水性材料(擦拭清洗后微孔板上残留的液体)

● 混合振荡器(Vortex型)

● 微孔板振荡器(约600~800 rpm)

● 96孔板用洗板机(建议使用)或洗瓶

● 96孔板用读取器(发光检测用)

● 数据处理软件

Q2. 

试剂盒中的抗体可单独购买吗?

A2.

不可以。

Q3. 

试剂盒可以拆分使用吗?

A3. 

可以。试剂盒使用了8联排可拆卸酶标板,并配有足够标准品。但拆分使用时,每次都需要绘制标准曲线,因此可检测的样品数量会减少。

单次使用 → 40个样品(80孔)*标准品占用16孔

分两次使用 → 32 个样品(64 孔) *标准品占用32孔


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PLGA-PEG-BDNF; BDNF-PEG-PLGA

现货产品:PLGA10000(50:50)-PEG5000-BDNF

产品名称 PLGA-PEG-BDNF; BDNF-PEG-PLGA
目录号 914201
中文名称 载BDNF基因的聚乙二醇-聚乳酸-羟基乙酸纳米材料
英文名称 PLGA-PEG-BNDF
分子量 PEG PLGA根据要求定制
溶解度 溶于部分有机溶剂
存储条件 -20°密闭保存,干燥避光
保存时间 一年
序列号 Ac-cys-ile-lys-arg-gly-NH2