碱性磷酸酶（Alkaline phosphatase，ALP，AKP或AP）是一类磷酸酯酶，碱性条件下能够将核苷酸、蛋白、甾醇等分子去磷酸化，广泛分布于哺乳动物组织内。ALP主要存在于物质交换活跃处（细胞膜），如肠上皮和肾近曲小管的刷状缘、附睾上皮之静纤毛、肝的毛细胆管膜以及微动脉和毛细血管动脉部之内皮。还发现于内质网、高尔基复合体、吞饮小泡、肠上皮之溶酶体、中性粒细胞之中性颗粒以及平滑肌之细胞膜及吞饮小泡。

本碱性磷酸酶染色液（改良钙钴法）（Alkaline Phosphatase Stain Solution (Modified Gomori’s Method)）利用的是金属沉淀法来定性检测磷酸酶活性。检测原理是以天然存在的β-甘油磷酸钠为底物，经碱性磷酸酶水解释放出磷酸，磷酸根与钙离子结合为磷酸钙沉淀，再依次被置换为磷酸钴和硫化钴，最终产物为黑色硫化钴沉淀。

产品组成

保存与运输方法

保存：2-8℃保存，6个月稳定。

运输：冰袋运输。

注意事项

1）   ALP染色液、ALP硫化液容易失效，建议开封后根据小份保存，避免重复性开盖使用，影响性能。

2）   ALP硫化液具有腐蚀性和刺激性气味，操作需小心。

3）   样本需新鲜，取材后请立即处理，否则会影响酶活性。

4）   组织固定需在4℃进行，时间不要超过24h，否则酶活性会减弱或消失。

5）   组织在石蜡包埋时，温度不要超过56℃。应使用熔点为52-54℃的石蜡进行浸染，浸蜡时间要短，否则酶活性会减弱或消失。

6）   石蜡切片脱蜡所用的二甲苯需用AR级以上的，不纯的二甲苯会分解黑色沉淀。

7）   冰冻切片染色时，应减少切片在室温暴露的时间。

8）   为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

操作步骤

实验前准备材料：蒸馏水，温箱或水浴锅

一、 石蜡切片染色

1.1    石蜡切片脱蜡至蒸馏水；

1.2   切片入ALP染色液，37℃孵育2~12h；

【注意：若需要做阴性对照，可选一切片入ALP对照液，该对照液不含酶的反应底物。】

1.3    流动水清洗2min，入蒸馏水；

1.4    入硝酸钴染液，37℃孵育5min；

1.5    流水洗5min，入蒸馏水；

1.6    准备ALP硫化工作液：取ALP硫化液用蒸馏水或去离子水稀释50倍，混匀即得到硫化工作液，现配现用。切片放入硫化工作液，孵育1-2min；

1.7    流水洗10min，入蒸馏水；

1.8    （可选）核固红复染细胞核，用蒸馏水洗；

1.9    石蜡切片常规脱水、透明、中性树胶封片。

二、 冰冻切片染色

2.1 冰冻切片在丙酮-氯仿等量混合液内，4℃固定2-5min；

2.2  切片入ALP染色液，37℃孵育5-15min；

【注意：若需要做阴性对照，可选一切片入ALP对照液，该对照液不含酶的反应底物。】

2.3 流水洗2min，入蒸馏水；

2.4 入硝酸钴染液，37℃孵育5min；

2.5 流水洗5min，入蒸馏水；

2.6 准备ALP硫化工作液：取ALP硫化液用蒸馏水或去离子水稀释50倍，混匀即得到硫化工作液，现配现用。切片放入硫化工作液，孵育1-2min；

2.7    流水洗10min，入蒸馏水；

2.8    （可选）核固红复染细胞核，用蒸馏水洗；

2.9    冰冻切片用甘油明胶封片剂封片。

三、 染色结果

相关产品

产品内容

产品描述

碱性磷酸酶（Phosphatase, Alkaline，ALP，EC 3.1.3.1），是一种含两个相同亚基的二聚体，也是一种约含12%碳水化合物（6%己糖和6%其他中性糖）的糖蛋白，每个ALP分子含4个锌离子和4个二硫键。镁离子存在情况下，ALP可达到最高酶活。AP能催化磷酸单酯水解，比如对硝基苯酚磷酸盐（pNPP）、磷酸苯酯、酚酞磷酸、α-甘油磷酸、β-甘油磷酸、2- 磷酸甘油酸、磷酸丙糖、葡萄糖-6-磷酸、葡萄糖-1-磷酸、果糖-6-磷酸、腺苷-5-磷酸、腺苷-3-磷酸、磷酸烯醇式丙酮酸和β-烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸等。

碱性磷酸酶（ALP）常用来偶联抗体和其他蛋白，从而满足ELISA、WB和组织化学检测上的应用。通常用来蛋白的去磷酸化实验，比如酪蛋白和核酸等。当需要高检测灵敏度时也能用来蛋白标记。还可用在DNA或RNA 的5′-末端去磷酸以防止自连。经碱性磷酸酶的去磷酸化作用后，DNA 或 RNA 还可被放射性标记磷酸盐标记（通过 T4 多核苷酸激酶）。

本品来源于小牛肠（Calf Intestine），与大肠杆菌来源的酶相同，催化所有磷酸单酯的水解，不能催化磷酸二酯以及磷酸三酯的水解。达分子生物学级别，适用于去除载体DNA片段的5′-末端的磷酸基团。

活性定义

在37℃，pH9.8反应条件，每min内水解对硝基苯磷酸盐 (p-nitrophenyl phosphate,pNPP) 生成1 μmol对硝基苯酚 (p-nitrophenol) 所需的酶量定义为1个活性单位 (unit)。

保存与运输方法

保存：-20℃冻存，1年稳定。

运输：冰袋运输。

注意事项

1. 本品最佳pH 8-10，最佳酶活受底物类型、底物浓度和离子浓度影响。本品正常保存稳定性很高，在螯合剂存在条件下，经65℃,30min加热处理，99%活性不可逆失活（反应条件不同可能会有例外）。建议失活处理时使用苯酚，可使其完全失活。

2. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

产品描述

碱性磷酸酶（Phosphatase, Alkaline，ALP，EC 3.1.3.1），是一种含两个相同亚基的二聚体，也是一种约含12%碳水化合物（6%己糖和6%其他中性糖）的糖蛋白，每个ALP分子含4个锌离子和4个二硫键。镁离子存在情况下，ALP可达到最高酶活。AP能催化磷酸单酯水解，比如对硝基苯酚磷酸盐（pNPP）、磷酸苯酯、酚酞磷酸、α-甘油磷酸、β-甘油磷酸、2- 磷酸甘油酸、磷酸丙糖、葡萄糖-6-磷酸、葡萄糖-1-磷酸、果糖-6-磷酸、腺苷-5-磷酸、腺苷-3-磷酸、磷酸烯醇式丙酮酸和β-烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸等。

碱性磷酸酶（ALP）常用来偶联抗体和其他蛋白，从而满足ELISA、WB和组织化学检测上的应用。通常用来蛋白的去磷酸化实验，比如酪蛋白和核酸等。当需要高检测灵敏度时也能用来蛋白标记。还可用在DNA或RNA 的5′-末端去磷酸以防止自连。经碱性磷酸酶的去磷酸化作用后，DNA 或 RNA 还可被放射性标记磷酸盐标记（通过 T4 多核苷酸激酶）。

本品来源于小牛肠（Calf Intestine），以硫酸铵悬液形式提供，比活力~4500U/mg protein，达偶联级别。

产品特性

1）CAS NO：9001-78-9

2）英文同义名：Phosphatase, Alkaline; Orthophosphoric-monoester phosphohydrolase (alkaline optimum); Phosphomonoesterase; Alkaline Phosphomonoesterase;

3）中文同义名：磷酸酶（碱性）；碱性磷酸单酯酶；大肠杆菌来源碱性磷酸酶；碱性磷酸酶（大肠杆菌）

4）外观：硫酸铵悬液

5）比活力：3000-6000 units/mg protein

6）活性单位定义：在37℃，pH9.8反应条件，每min内水解对硝基苯磷酸盐 (p-nitrophenyl phosphate,pNPP) 生成1 μmol对硝基苯酚 (p-nitrophenol) 所需的酶量定义为1个活性单位 (unit)。

保存与运输方法

保存：2-8℃冻存，1年稳定。

运输：冰袋运输。

注意事项

1. 本品最佳pH 8-10，最佳酶活受底物类型、底物浓度和离子浓度影响。本品正常保存稳定性很高，在螯合剂存在条件下，经65℃,30min加热处理，99%活性不可逆失活（反应条件不同可能会有例外）。建议失活处理时使用苯酚，可使其完全失活。

2. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

碱性磷酸酶（Phosphatase, Alkaline，ALP，EC 3.1.3.1），是一种含两个相同亚基的二聚体，也是一种约含12%碳水化合物（6%己糖和6%其他中性糖）的糖蛋白，每个ALP分子含4个锌离子和4个二硫键。镁离子存在情况下，ALP可达到最高酶活。AP能催化磷酸单酯水解，比如对硝基苯酚磷酸盐（pNPP）、磷酸苯酯、酚酞磷酸、α-甘油磷酸、β-甘油磷酸、2- 磷酸甘油酸、磷酸丙糖、葡萄糖-6-磷酸、葡萄糖-1-磷酸、果糖-6-磷酸、腺苷-5-磷酸、腺苷-3-磷酸、磷酸烯醇式丙酮酸和β-烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸等。

碱性磷酸酶（ALP）常用来偶联抗体和其他蛋白，从而满足ELISA、WB和组织化学检测上的应用。通常用来蛋白的去磷酸化实验，比如酪蛋白和核酸等。当需要高检测灵敏度时也能用来蛋白标记。还可用在DNA或RNA 的5′-末端去磷酸以防止自连。经碱性磷酸酶的去磷酸化作用后，DNA 或 RNA 还可被放射性标记磷酸盐标记（通过 T4 多核苷酸激酶）。

本品为大肠杆菌重组表达纯化所得，以硫酸铵悬液形式提供，比活力≥10U/mg protein。

产品特性

1）CAS NO：9001-78-9

2）英文同义名：Phosphatase, Alkaline; Orthophosphoric-monoester phosphohydrolase (alkaline optimum); Phosphomonoesterase; Alkaline Phosphomonoesterase;

3）中文同义名：磷酸酶（碱性）；碱性磷酸单酯酶；大肠杆菌来源碱性磷酸酶；碱性磷酸酶（大肠杆菌）

4）来源：大肠杆菌（E. Coli）

5）纯化方式：盐分馏（Partially purified salt fraction）

6）外观：2.5M硫酸铵悬液，pH 8.0

7）抑制剂：螯合剂和无机磷酸盐

8）最佳pH：8.0

8）比活力：≥10 units/mg protein (25℃, pH 8.0)

9）活性单位定义：在25℃，pH8.0反应条件，每min内水解对硝基苯磷酸盐(p-nitrophenyl phosphate, pNPP)生成1 μmol对硝基苯酚(p-nitrophenol)所需的酶量定义为1个活性单位(unit)。 

保存与运输方法

保存：2-8℃保存，1年稳定。

运输：冰袋运输。

注意事项

1）本品稳定性高，反应需Zn²⁺，Mg²⁺可提高酶活。在螯合剂存在条件下，100℃加热可导致酶暂时性失活，但恢复至室温酶活会恢复，必须进行苯酚处理，才能引起酶完全失活。本品最适pH约8.0，Tris等醇类化合物可提高酶活。

2）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

附录1 纯化酶产品（硫酸铵悬浮液形式）使用指导

1）当硫酸铵可能会干扰酶反应，操作如下：

1.1 从冰箱内取出酶。【注：硫酸铵悬浮液产品不可冻存！！】

1.2 确保盖子拧紧，然后颠倒混匀数次得到乳白色悬浮液，此过程可能需要一分钟左右。不可涡旋或超声，因如此强烈的处理可能会引起某些酶的变性。

1.3 使用宽口枪头，吸取一部分悬浮液转移到一干净的离心管内。

1.4 约10,000~15,000x g离心10min。若是条件允许，低温（2-8℃）设置下离心。

1.5 小心吸取尽可能透明的上清液，并保留到一干净的离心管内。没有必要完全吸掉所有的硫酸铵溶液。

1.6 用适量的反应缓冲液加入沉淀中并使其溶解。

1.7 对上述得到的上清液，以及用反应缓冲液溶解的酶溶液进行蛋白含量和/或酶活力检测。

【注：具体酶的活力检测方法可见我司官网或与我们联系索取相关资料。】

2）当硫酸铵不会干扰酶反应，操作如下：

2.1 从冰箱内取出酶。【注：硫酸铵悬浮液产品不可冻存！！】

2.2 确保盖子拧紧，然后颠倒混匀数次得到乳白色悬浮液，此过程可能需要一分钟左右。不可涡旋或超声，因如此强烈的处理可能会引起某些酶的变性。

2.3 使用宽口枪头，吸取一部分悬浮液直接加入反应缓冲液中即可。

【注意：对于硫酸铵悬浮液，绝大部分的酶都是以固体形式存在。很有可能仅仅可忽略量的酶以溶于硫酸铵溶液的形式存在。】

描述

Alkaline Phosphatase Stain Solution (Coupling azo-dye Method)

碱性磷酸酶染色液（偶氮偶联法）

产品信息

【温馨提示】：见我司金畔生物整理的碱性磷酸酶（Alkaline phosphatase，ALP，AKP）产品专题。

【温馨提示】：见我司金畔生物整理的碱性磷酸酶活性检测试剂盒（定量检测）产品专题。

【温馨提示】：见我司金畔生物整理的碱性磷酸酶染色检测试剂盒（定性，干细胞检测）产品专题。

产品描述

碱性磷酸酶（Alkaline phosphatase，ALP，AKP或AP）是一类磷酸酯酶，碱性条件下能够将核苷酸、蛋白、甾醇等分子去磷酸化，广泛分布于哺乳动物组织内。ALP主要存在于物质交换活跃处（细胞膜），如肠上皮和肾近曲小管的刷状缘、附睾上皮之静纤毛、肝的毛细胆管膜以及微动脉和毛细血管动脉部之内皮。还发现于内质网、高尔基复合体、吞饮小泡、肠上皮之溶酶体、中性粒细胞之中性颗粒以及平滑肌之细胞膜及吞饮小泡。

本碱性磷酸酶染色液（偶氮偶联法）（Alkaline Phosphatase Stain Solution (Coupling azo-dye Mehod)）利用的是偶氮偶联法来定性检测磷酸酶活性。工作原理是在pH 9.2-9.8的碱性条件下，细胞内ALP可使AB-BI磷酸盐水解，释放出磷酸与萘酚，后者与偶联重氮盐生成有色产物，定位于细胞质中。该染液可用于血液、骨髓或细胞涂片、冰冻切片、石蜡切片等的ALP染色，ALP阳性反应部位呈蓝色，位于胞浆，染色结果比金属盐沉淀法相对可靠些。

产品组成

保存与运输方法

保存：按照对应组分的要求来保存，1年有效。

运输：冰袋运输。

注意事项

1）   血液、骨髓细胞涂片或其他样本均应新鲜，薄厚适宜，及时固定，否则会影响酶的活性。

2）   培养细胞染色操作过程中，清洗、染色等步骤都应轻微，以免损伤或丢失细胞。

3）   培养细胞或爬片细胞不建议采用ALP固定液，此ALP固定液适用于血液或骨髓细胞涂片的固定。

4）   为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

操作步骤

一、 ALP染色液的准备

临用前，取适量的AS-BI染色液（B1）和FBB染色液（B2）按照1：1比例混合，即得到ALP染色液，现配现用。

二、 涂片或切片染色

1.1    血液、骨髓或细胞涂片、冰冻切片、石蜡切片放入ALP固定液固定3min（注：梯度入水的石蜡切片无需固定），水洗。

1.2    滴加新鲜配制的ALP染色液，放入湿盒，避光孵育15-20min，水洗。

1.3    入核固红染色液复染3-5min。

1.4    水洗、镜检或甘油明胶封片后镜检。

三、 贴壁细胞染色

2.1 取6孔板或其他容器培养的细胞，弃培养液，PBS清洗细胞。

2.2 加入4%多聚甲醛固定10-20min，PBS清洗细胞。

2.3 滴加新鲜配制的ALP染色液，放入湿盒，避光孵育15-20min，PBS清洗。

2.4 入核固红染色液复染30s~3min。

2.5    PBS清洗、镜检。

三、染色结果

相关产品

描述

Alkaline Phosphatase Stain Solution (Coupling azo-dye Method)

碱性磷酸酶染色液（偶氮偶联法）

产品信息

【温馨提示】：见我司金畔生物整理的碱性磷酸酶（Alkaline phosphatase，ALP，AKP）产品专题。

【温馨提示】：见我司金畔生物整理的碱性磷酸酶活性检测试剂盒（定量检测）产品专题。

【温馨提示】：见我司金畔生物整理的碱性磷酸酶染色检测试剂盒（定性，干细胞检测）产品专题。

产品描述

碱性磷酸酶（Alkaline phosphatase，ALP，AKP或AP）是一类磷酸酯酶，碱性条件下能够将核苷酸、蛋白、甾醇等分子去磷酸化，广泛分布于哺乳动物组织内。ALP主要存在于物质交换活跃处（细胞膜），如肠上皮和肾近曲小管的刷状缘、附睾上皮之静纤毛、肝的毛细胆管膜以及微动脉和毛细血管动脉部之内皮。还发现于内质网、高尔基复合体、吞饮小泡、肠上皮之溶酶体、中性粒细胞之中性颗粒以及平滑肌之细胞膜及吞饮小泡。

本碱性磷酸酶染色液（偶氮偶联法）（Alkaline Phosphatase Stain Solution (Coupling azo-dye Mehod)）利用的是偶氮偶联法来定性检测磷酸酶活性。工作原理是在pH 9.2-9.8的碱性条件下，细胞内ALP可使AB-BI磷酸盐水解，释放出磷酸与萘酚，后者与偶联重氮盐生成有色产物，定位于细胞质中。该染液可用于血液、骨髓或细胞涂片、冰冻切片、石蜡切片等的ALP染色，ALP阳性反应部位呈蓝色，位于胞浆，染色结果比金属盐沉淀法相对可靠些。

产品组成

保存与运输方法

保存：按照对应组分的要求来保存，1年有效。

运输：冰袋运输。

注意事项

1）   血液、骨髓细胞涂片或其他样本均应新鲜，薄厚适宜，及时固定，否则会影响酶的活性。

2）   培养细胞染色操作过程中，清洗、染色等步骤都应轻微，以免损伤或丢失细胞。

3）   培养细胞或爬片细胞不建议采用ALP固定液，此ALP固定液适用于血液或骨髓细胞涂片的固定。

4）   为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

操作步骤

一、 ALP染色液的准备

临用前，取适量的AS-BI染色液（B1）和FBB染色液（B2）按照1：1比例混合，即得到ALP染色液，现配现用。

二、 涂片或切片染色

1.1    血液、骨髓或细胞涂片、冰冻切片、石蜡切片放入ALP固定液固定3min（注：梯度入水的石蜡切片无需固定），水洗。

1.2    滴加新鲜配制的ALP染色液，放入湿盒，避光孵育15-20min，水洗。

1.3    入核固红染色液复染3-5min。

1.4    水洗、镜检或甘油明胶封片后镜检。

三、 贴壁细胞染色

2.1 取6孔板或其他容器培养的细胞，弃培养液，PBS清洗细胞。

2.2 加入4%多聚甲醛固定10-20min，PBS清洗细胞。

2.3 滴加新鲜配制的ALP染色液，放入湿盒，避光孵育15-20min，PBS清洗。

2.4 入核固红染色液复染30s~3min。

2.5    PBS清洗、镜检。

三、染色结果

相关产品

描述

Alkaline Phosphatase Stain Solution (Modified Gomori’s Method)

碱性磷酸酶染色液（改良钙钴法）

产品信息

【温馨提示】：见我司整理的碱性磷酸酶（Alkaline phosphatase，ALP，AKP）产品专题。

【温馨提示】：见我司整理的碱性磷酸酶活性检测试剂盒（定量检测）产品专题。

【温馨提示】：见我司整理的碱性磷酸酶染色检测试剂盒（定性，干细胞检测）产品专题。

产品描述

碱性磷酸酶（Alkaline phosphatase，ALP，AKP或AP）是一类磷酸酯酶，碱性条件下能够将核苷酸、蛋白、甾醇等分子去磷酸化，广泛分布于哺乳动物组织内。ALP主要存在于物质交换活跃处（细胞膜），如肠上皮和肾近曲小管的刷状缘、附睾上皮之静纤毛、肝的毛细胆管膜以及微动脉和毛细血管动脉部之内皮。还发现于内质网、高尔基复合体、吞饮小泡、肠上皮之溶酶体、中性粒细胞之中性颗粒以及平滑肌之细胞膜及吞饮小泡。

本碱性磷酸酶染色液（改良钙钴法）（Alkaline Phosphatase Stain Solution (Modified Gomori’s Method)）利用的是金属沉淀法来定性检测磷酸酶活性。检测原理是以天然存在的β-甘油磷酸钠为底物，经碱性磷酸酶水解释放出磷酸，磷酸根与钙离子结合为磷酸钙沉淀，再依次被置换为磷酸钴和硫化钴，最终产物为黑色硫化钴沉淀。

产品组成

保存与运输方法

保存：2-8℃保存，6个月稳定。

运输：冰袋运输。

注意事项

1）   ALP染色液、ALP硫化液容易失效，建议开封后根据小份保存，避免重复性开盖使用，影响性能。

2）   ALP硫化液具有腐蚀性和刺激性气味，操作需小心。

3）   样本需新鲜，取材后请立即处理，否则会影响酶活性。

4）   组织固定需在4℃进行，时间不要超过24h，否则酶活性会减弱或消失。

5）   组织在石蜡包埋时，温度不要超过56℃。应使用熔点为52-54℃的石蜡进行浸染，浸蜡时间要短，否则酶活性会减弱或消失。

6）   石蜡切片脱蜡所用的二甲苯需用AR级以上的，不纯的二甲苯会分解黑色沉淀。

7）   冰冻切片染色时，应减少切片在室温暴露的时间。

8）   为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

操作步骤

实验前准备材料：蒸馏水，温箱或水浴锅

一、 石蜡切片染色

1.1    石蜡切片脱蜡至蒸馏水；

1.2   切片入ALP染色液，37℃孵育2~12h；

【注意：若需要做阴性对照，可选一切片入ALP对照液，该对照液不含酶的反应底物。】

1.3    流动水清洗2min，入蒸馏水；

1.4    入硝酸钴染液，37℃孵育5min；

1.5    流水洗5min，入蒸馏水；

1.6    准备ALP硫化工作液：取ALP硫化液用蒸馏水或去离子水稀释50倍，混匀即得到硫化工作液，现配现用。切片放入硫化工作液，孵育1-2min；

1.7    流水洗10min，入蒸馏水；

1.8    （可选）核固红复染细胞核，用蒸馏水洗；

1.9    石蜡切片常规脱水、透明、中性树胶封片。

二、 冰冻切片染色

2.1 冰冻切片在丙酮-氯仿等量混合液内，4℃固定2-5min；

2.2  切片入ALP染色液，37℃孵育5-15min；

【注意：若需要做阴性对照，可选一切片入ALP对照液，该对照液不含酶的反应底物。】

2.3 流水洗2min，入蒸馏水；

2.4 入硝酸钴染液，37℃孵育5min；

2.5 流水洗5min，入蒸馏水；

2.6 准备ALP硫化工作液：取ALP硫化液用蒸馏水或去离子水稀释50倍，混匀即得到硫化工作液，现配现用。切片放入硫化工作液，孵育1-2min；

2.7    流水洗10min，入蒸馏水；

2.8    （可选）核固红复染细胞核，用蒸馏水洗；

2.9    冰冻切片用甘油明胶封片剂封片。

三、 染色结果

相关产品

描述

Alkaline Phosphatase Staining Kit for Stem Cell

碱性磷酸酶染色试剂盒（干细胞专用）

产品标签：

Phosphatase, Alkaline 碱性磷酸酶；ALP/AKP；对硝基苯酚磷酸盐（pNPP）；偶氮偶联法；显色法（定量）；染色法（定性）；

产品信息

【温馨提示I】：见碱性磷酸酶产品专题，了解更多相关产品资料；

【温馨提示II】：见碱性磷酸酶染色试剂盒产品专题；

【温馨提示III】：见碱性磷酸酶活性检测试剂盒产品专题；

【温馨提示IV】：见碱性磷酸酶常用生化底物及试剂盒产品；

产品描述

处于未分化状态的胚胎干细胞（ES）和诱导多潜能干细胞（iPS）典型特征是呈高水平的碱性磷酸酶表达，同时结合其他的一些表面标志物，来显示未分化细胞具自我更新的潜能。碱性磷酸酶（ALP，或AP）是一种水解酶，碱性条件下能够将核苷酸、蛋白、甾醇等分子去磷酸化作用。固定ES或iPS用碱性磷酸酶染色试剂盒染色后，未分化细胞呈红/紫色，而分化细胞呈无色。

本碱性磷酸酶染色试剂盒特异性强，灵敏度高，可为ES/iPS细胞分化的表型评估提供可靠的依据。对于其他细胞来说，染色越深，表明细胞内ALP活性越高。以24孔板染色为例，分别可做50次和100次染色。

产品组分

保存与运输方法

保存：2-8℃保存，6个月稳定。

运输：冰袋运输。

注意事项

为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

操作步骤（以24孔板染色为例）

1. 实验前准备材料：PBST缓冲液、PBS缓冲液
2. 染色工作液准备：按照如下比例【溶液A: 溶液B: 溶液C=1:1:1】，配制适量染色工作液。请务必根据单次实验用量制备染色工作液。为了保证最佳染色结果，需在配制30min内用完染色工作液，多余染色工作液请丢弃。
3. 染色步骤

1. 吸出细胞培养液，PBST洗2~3次，用0.5ml固定液室温固定2~5min。【注意】：固定不要超过5min，过度固定会导致ALP失活）。
2. 吸出固定液，PBST洗2次；
3. 吸出PBST。加入0.6ml/孔染色工作液覆盖细胞，室温避光放置5~15min；【注意】：染色过程需密切监督颜色变化，当颜色很明亮即可终止反应，否则会引起非特异性染色。
4. 吸出染色工作液，用PBS洗2次，最后保存于PBS或封片剂内防止干燥，显微镜下观察染色结果。结果判定：未分化细胞染色呈红/紫色，分化细胞染色呈无色。
5. 将平板保存在4℃。

相关产品

描述

Alkaline Phosphatase Staining Kit for Stem Cell

碱性磷酸酶染色试剂盒（干细胞专用）

产品标签：

Phosphatase, Alkaline 碱性磷酸酶；ALP/AKP；对硝基苯酚磷酸盐（pNPP）；偶氮偶联法；显色法（定量）；染色法（定性）；

产品信息

【温馨提示I】：见碱性磷酸酶产品专题，了解更多相关产品资料；

【温馨提示II】：见碱性磷酸酶染色试剂盒产品专题；

【温馨提示III】：见碱性磷酸酶活性检测试剂盒产品专题；

【温馨提示IV】：见碱性磷酸酶常用生化底物及试剂盒产品；

产品描述

处于未分化状态的胚胎干细胞（ES）和诱导多潜能干细胞（iPS）典型特征是呈高水平的碱性磷酸酶表达，同时结合其他的一些表面标志物，来显示未分化细胞具自我更新的潜能。碱性磷酸酶（ALP，或AP）是一种水解酶，碱性条件下能够将核苷酸、蛋白、甾醇等分子去磷酸化作用。固定ES或iPS用碱性磷酸酶染色试剂盒染色后，未分化细胞呈红/紫色，而分化细胞呈无色。

本碱性磷酸酶染色试剂盒特异性强，灵敏度高，可为ES/iPS细胞分化的表型评估提供可靠的依据。对于其他细胞来说，染色越深，表明细胞内ALP活性越高。以24孔板染色为例，分别可做50次和100次染色。

产品组分

保存与运输方法

保存：2-8℃保存，6个月稳定。

运输：冰袋运输。

注意事项

为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

操作步骤（以24孔板染色为例）

1. 实验前准备材料：PBST缓冲液、PBS缓冲液
2. 染色工作液准备：按照如下比例【溶液A: 溶液B: 溶液C=1:1:1】，配制适量染色工作液。请务必根据单次实验用量制备染色工作液。为了保证最佳染色结果，需在配制30min内用完染色工作液，多余染色工作液请丢弃。
3. 染色步骤

1. 吸出细胞培养液，PBST洗2~3次，用0.5ml固定液室温固定2~5min。【注意】：固定不要超过5min，过度固定会导致ALP失活）。
2. 吸出固定液，PBST洗2次；
3. 吸出PBST。加入0.6ml/孔染色工作液覆盖细胞，室温避光放置5~15min；【注意】：染色过程需密切监督颜色变化，当颜色很明亮即可终止反应，否则会引起非特异性染色。
4. 吸出染色工作液，用PBS洗2次，最后保存于PBS或封片剂内防止干燥，显微镜下观察染色结果。结果判定：未分化细胞染色呈红/紫色，分化细胞染色呈无色。
5. 将平板保存在4℃。

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