Agarose 琼脂糖;低熔点琼脂糖;高分辨率琼脂糖;GelRed;DuRed;GelGreen;MKRed;琼脂糖凝胶电泳;
产品信息
产品名称 |
规格 | 价格(元) | ||
Agarose, Molecular Biology Grade 琼脂糖 |
100g | 250 |
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Agarose, Molecular Biology Grade 琼脂糖 | 5×100g | 1200 |
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Agarose, Molecular Biology Grade 琼脂糖 | 10×100g | 2300 |
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产品描述
琼脂糖(Agarose)是纯化的线性半乳聚糖亲水胶体,提取自琼脂或者含琼脂的海藻,结构上是一种线性聚合物,由β-D-吡喃半乳糖(1-4)连接3,6-脱水α-L-吡喃半乳糖基构成。作为一种凝胶试剂,琼脂糖可用于①电泳(Electrophoresis):包括核酸分离,免疫电泳(IEP)和等电聚焦(IEF)在内的各种电泳实验;②免疫扩散(Immunodiffusion):琼脂糖用作固体凝胶基质让抗体或抗原分④⑤子扩散得以测试交叉反应;③固体培养基基质:组织培养中琼脂糖用于制备细胞的凝胶平板或涂层;用于制备细菌或植物细胞生长所需的固体或半固体培养基;在空斑实验中用于覆盖病毒感染细胞;④凝胶色谱、亲和色谱和离子交换色谱;⑤蛋白结晶的生长等;
琼脂糖的基本参数,包括:
1)硫酸盐含量(sulfate content)— —纯度指标,因为硫酸根是存在琼脂糖内的主要离子基团;更低硫酸盐含量更适合用于DNA电泳。
2)凝胶强度(gel strength)— —施加于凝胶使之断裂的外力;凝胶强度取决于凝胶浓度。
3)胶凝点(Gel point)— —水溶性琼脂糖溶液冷却后形成凝胶时的温度。液体向凝胶转化的过程中,琼脂糖溶液具有滞后性,因此,胶凝点不等同于胶熔点。
4)电渗(Electroendosmosis, EEO)— —液体穿透凝胶的一种电动运动。琼脂糖凝胶内的阴离子基团吸附在基质上不会发生迁移,但是解离的阳离子就会朝负极迁移,从而产生电渗。由于生物聚合物的电泳迁移通常是朝负极运动,则EEO产生的内部对流会干扰分离效率。
本品是高纯的低电渗琼脂糖,整个生产过程中不使用有机溶剂,绿色环保,不仅减少对操作者和样本的影响,而且降低对环境的污染。本品不含核酸酶(DNA酶、RNA酶和核酸内切酶)和蛋白酶。应用非常广泛,包括DNA/RNA凝胶电泳。
产品特性
CAS NO.:9012-36-6 | 外观:白色至类白色粉末 |
凝胶温度(1.5% gel):36±1.5℃ | 融胶温度(1.5% gel):88±1.5℃ |
凝胶强度(1.0% gel):≥1200 g/cm2 | 电渗(EEO):≤ 0.13 |
水分:≤10% | 硫化物:≤ 0.15% |
灰分:≤0.5% | DNA酶& RNA酶:不得检出 |
蛋白酶:不得检出 | 核酸内切酶:不得检出 |
保存与运输方法
保存:室温干燥密封保存,至少2年有效。
运输:室温运输。
凝胶配制
1. 配制适量和合适浓度的电泳及制胶用的缓冲液。
【注意】:电泳缓冲液和制胶用缓冲液必须保持一致。
2. 根据制胶量及所需凝胶浓度,往加有一定量电泳缓冲液的三角锥瓶内,加入称量好的琼脂糖。
【注意】:总液体量不宜超过三角锥瓶的50%容量。
3. 在微波炉中加热溶解琼脂糖。设置高火加热至沸腾,保持胶液沸腾~30s,戴上防热手套,移开三角锥瓶,小心摇动三角锥瓶,重悬未融解颗粒,再次用高火加热10~30s,或直至琼脂糖完全溶解。请戴上防热手套,小心摇动三角锥瓶, 使琼脂糖胶液充分均匀。
【注意】:必须保证琼脂糖完全溶解,此时琼脂糖胶液清澈,否则会造成电泳图像模糊不清。加热时如胶液剧烈沸腾发泡,停止加热。微波炉中加热时间不宜过长。
4. 使溶液冷却至60℃左右,如需要可在此时加入核酸电泳染料,比如:溴化乙锭(EB,MF0756-1G)或MKRed无毒环保核酸染料(MF0754-500UL),充分混匀。
【注意】:EB是一种致癌物质。使用含有EB的溶液时,请戴用手套。
5. 将琼脂糖溶液倒入制胶模中,然后在适当位置处插上梳子。凝胶厚度一般在 3~5mm 之间。
6. 室温使胶凝固(约 30min~1h),然后放置于电泳槽中进行电泳。
【注意】:凝胶若不立即使用,请用保鲜膜将凝胶包好后在 放4℃保存,一般可保存 2~5天。
注意事项
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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MKGreen Nucleic Acid Gel Stain (10,000× in Water)核酸凝胶染料 | 500µl |
附表I 琼脂糖凝胶浓度与DNA分离范围
琼脂糖凝胶浓度(%) | 0.3 | 0.6 | 0.7 | 0.9 | 1.2 | 1.5 | 2.0 |
线性DNA大小(kb) | 60~5 | 20~1 | 10~0.8 | 7~0.5 | 6~0.4 | 4~0.2 | 3~0.1 |