Fibronectin 纤连蛋白;Laminin 层粘连蛋白;Extracellular matrix, ECM 细胞外基质;Cell adhesion 细胞粘附;Cell spreading 细胞铺展;Gelatin 明胶;CAS NO:86088-83-7
纤连蛋白(Fibronectin, FN),也称为纤维连接蛋白,是一种广谱的、天然的细胞粘附因子。纤连蛋白是一种440-500kDa的二聚体糖蛋白,由两个相似的220-250kDa的亚基通过二硫键连接而成。主要以两种形式存在,可溶形式和不可溶形式,前者以二聚体形式存在血浆中,后者以多聚体形式存在于细胞外基质(ECM)和细胞表面。纤连蛋白首要功能与细胞粘附到细胞外基质有关,通过纤连蛋白上的序列Arg-Gly-Asp-Ser(RGDS)来识别细胞相关的跨膜整合素受体从而调控粘附。纤连蛋白的其他结构域也参与这一粘附过程,可能涉及与胶原蛋白、肝素和其他细胞表面粘多糖的相互作用。粘附后纤连蛋白的构象和方向也很重要,对细胞分布和内皮细胞粘附强度上发挥作用。经纤连蛋白包被的培养器皿用来培养BHK、CHO和其他细胞系呈现出更明显的粘附效应。可以说,纤连蛋白参与体内众多生理过程,比如细胞间的粘附和迁移、细胞骨架组装、酪氨酸磷酸化以及肿瘤转移。
本品是经亲和色谱纯化所得的牛血浆来源纤连蛋白,以无菌溶液形式提供,浓度为1mg/ml,适用于细胞粘附和细胞铺展。
产品特性
1)CAS NO:86088-83-7
2)同义名:Fibronectin from Bovine Plasma;Bovine Plasma Fibronectin;Natural Bovine Fibronectin;纤连蛋白,来源于牛血浆;天然牛纤连蛋白;牛纤维连接蛋白;
3)分子量:440-500kDa
4)外观:无菌溶液(1mg/ml)
5)储存缓冲液:0.15M NaCl,20 mM Tris,pH 7.5
6)质量控制:1)通过NuPAGE 4-12% Bis-Tris凝胶电泳和考马斯亮蓝染色来验证蛋白。还原条件下,纤连蛋白在胶上显示两条亮带(230 kDa,220 kDa);2)ELISA检测显示吸附效率与纤连蛋白浓度的对数呈正比。3)细胞粘附实验表明,低至0.1μg/cm2纤连蛋白包被层能明显促进内皮细胞粘附,以非包被表面为对照。
保存与运输方法
保存:-80℃保存,1年有效。
运输:干冰运输。
使用方法
1)产品保存与处理细节
建议产品以单次用量分装后置于-80℃冻存。产品需要于37℃中缓慢融化,不可摇晃。对于瓶子不能溶解的物质可通过离心去除,不会影响产品性能。避免反复冻融。
2)产品应用
用于细胞培养包被基质(细胞培养下层)的建议浓度为1-5μg/cm2。最佳工作浓度取决于细胞类型。
3)包被步骤
1. 用不含Ca2+,Mg2+的PBS缓冲液稀释纤连蛋白原液,以最小体积完全覆盖培养表面,推荐包被浓度为1-5μg/cm2。
2. 于37℃培养箱或室温孵育至少2h。
3. 吸掉多余纤连蛋白溶液并用去离子水清洗,注意操作过程中不要刮破底层。
4. 此时的培养容器即可使用。
注意事项
1)如果操作不当,本品中的某些成分可能会导致健康风险。因此,操作本品时注意做好防护,包括穿好衣服和带上眼罩。
2)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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