本品是在无饲养层培养条件下培养人ES/iPS继代细胞是使用的细胞分散溶液,不含动物或者人类来源物质,也未使用胰蛋白酶和胶原酶等酶。
◆特点
● 无饲养层培养用
● 不含酶
● 无动物来源成分
● 添加有 Y-27632 可用于单细胞继代培养
◆测试项目
● 无菌测试
● pH
● 渗透压
● 内毒素
● 支原体测试
◆使用方法
<在使用6孔板时>
清除培养基,用 D-PBS(-)清洗细胞
清除 D-PBS(-),将 1 mL/well 本品加进孔板
7℃,5%CO2条件下,培养5分钟
敲击剥离细胞群
加入 2 mL/well 的 ROCKi+培养基,通过移液枪吹散细胞群为单细胞。(ROCKi+培养基:指在人iPS细胞用培养基中加入 Y-27632,使最终浓度变为 10 μmol/L 的培养基。)
将分散液移至离心管,室温下 1,000 rpm 离心3分钟。
去除上清。
继代培养时,添加 2 mL/well ROCKi+培养基,悬浮,种植。
冻存时,用 StemSure® 冻存液悬浮,分装到保存用离心管,冻存。
〔使用注意事项〕
由于细胞种类和涂层剂的不同,会使培养容器中的细胞粘着性有所不同,用 hPSC 解离溶液处理至敲击能使细胞剥离。
◆人iPS细胞的细胞分散
StemSure® hPSC培养基Δ培养的人iOS细胞201B7株,添加hPSC解离溶液,观察细胞的解离状态。添加hPSC解离溶液5分钟后敲击,移液枪吹散细胞为单细胞。
人iPS细胞的继代
用 StemSure® hPSC培养基Δ和hPSC解离溶液对iPS细胞201B7株进行继代培养,细胞增殖能力可到6继代后,各种未分化Marker(Oct3/4, Nanog, rBC2LCN)的表达呈阳
产品编号 产品名称 产品规格 产品等级 备注
160-27051 hPSC Dissociation Solution 100 mL 细胞培养用 -
197-17571 StemSure hPSC Medium Δ 100 mL 细胞培养用 -
193-17573 StemSure hPSC Medium Δ 100 mL×4 细胞培养用 -
064-05381 Fibroblast Growth Factor (basic), Human, recombinant,Animal-derived-free【bFGF/FGF2】 50 μg 细胞生物学用 -
068-05384 Fibroblast Growth Factor (basic), Human, recombinant,Animal-derived-free【bFGF/FGF2】 100 μg 细胞生物学用 -
060-05383 Fibroblast Growth Factor (basic), Human, recombinant,Animal-derived-free【bFGF/FGF2】 1 mg 细胞生物学用 -
257-00511 Y-27632 1 mg 细胞生物学用 -
253-00513 Y-27632 5 mg 细胞生物学用 -
251-00514 Y-27632 25 mg 细胞生物学用 -
253-00591 5 mmol/L Y-27632 Solution 300 μL 细胞培养用 -
220-02041 Vitronectin(20-398 aa), Human, recombinant, Solution 500 μg 生化学用 -
197-16275 StemSure D-MEM (High Glucose) with Phenol Red and Sodium Pyruvate 500 mL 细胞培养用 -
197-16775 StemSure Serum Replacement (SSR) 500 mL 细胞培养用 -
198-15781 StemSure 10 mmol/L 2-Mercaptoethanol Solution ( x 100) 100 mL 细胞培养用 -
195-15791 StemSure 50 mmol/L Monothioglycerol Solution ( x 100) 100 mL 细胞培养用 -
190-15805 StemSure(R) 0.1w/v% Gelatin Solution 500 mL 细胞培养用 -
199-16051 StemSureR LIF, Mouse, recombinant, Solution 106units 细胞培养用 -
195-16053 StemSureR LIF, Mouse, recombinant, Solution 106units×10 细胞培养用 -
195-16031 StemSure Freezing Medium 100 mL 细胞培养用 -