Coelenterazine v 腔肠素v Aequorin 水母发光蛋白;CAS NO:55779-48-1

Coelenterazine v 腔肠素v; Coelenterazine 400 a 腔肠素400a; 海肾荧光素酶(Rluc);萤火虫荧光素酶(Fluc);Aequorin 水母发光蛋白;CAS NO:55779-48-1;

腔肠素(Coelenterazine)是在水生生物中发现的一种发光基团(luminophore),是许多荧光素酶的作用底物,包括海肾荧光素酶(Renilla reniformis luciferase, Rluc),分泌型膜锚定荧光素酶(Gaussia luciferase, Gluc)和薮枝虫荧光素酶(Obelia luciferase),和发光蛋白包括水母发光蛋白(Aequorin)的构成之一。其作用原理是以腔肠素为底物的荧光素酶,在含分子氧的条件下,氧化腔肠素产生高能量的中间产物,在此过程发射蓝色光,光波长在450~480nm【见图1】。而甲虫(或萤火虫)荧光素/荧光素酶(FLuc)系统不同,其在含分子氧的条件下,还需要ATP和Mg2+的存在才能同时发光,光波长在550-570nm。正由于生物发光信号和底物的差异,RLuc常常与FLuc联合用于多重转录报告基因研究,或用作Fluc系统内萤火虫荧光素酶转染的内参。腔肠素应用甚是广泛,包括:1)活细胞或组织的钙离子检测;2)细胞或组织的超氧化物和过氧亚硝基阴离子(活性氧,ROS)化学发光检测;3)基因报告基因检测;4)动物活体检测;5)ELISA和生物发光共振能量转移(BRET)用于蛋白相互作用研究;6)药物高通量筛选(HTS);

天然腔肠素(Coelenterazine Native,CTZ-Native)是自然界中存在最丰富的一种腔肠素,也是目前应用最普遍的一种标准底物。不仅是脱辅基水母发光蛋白(APO)的底物,也是海肾荧光素酶(Rluc)和分泌型膜锚定荧光素酶(Gluc)等荧光素酶的作用底物。前者用于检测钙离子浓度,后者用作荧光素酶的报告基因检测系统。还可用于生物共振能量转移BRET,细胞或组织内的超氧阴离子和过氧化亚硝基阴离子水平(ROS)的化学发光检测等。

腔肠素v(Coelenterazine v,CTZ-v)是天然腔肠素(CTZ-Native)的一种合成衍生物,多带一个苄基环。CTZ-v具有一独特的特性,能够将野生型海肾荧光素酶(wt RLuc),RLuc8和绿色海肾荧光素酶(Green RLuc)的发射光谱迁移到更长波长(见附录1 图1,图2)。

产品组分

编号 组分名称

产品货号(规格)

500UG     1MG     
A    Coelenterazine v (powder) 1×500μg 2×500μg
B Specialized Solvent for Coelenterazine v    2×500μl 4×500μl

产品特性

1)   CAS NO:N/A

2)   化学名:16-benzyl-5-hydroxy-13-[(4-hydroxyphenyl)methyl]-11,14,17-triazatetracyclo [8.7.0.0^{2,7}.0^{11,15}]heptadeca-1(10),2(7),3,5,8,13,15-heptaen-12-one

3)   同义名:CTZ-v; v-Coelenterazine; CLZN-v; v-腔肠素;

4)   分子式:C28H21N3O3

5)   分子量:447.48 g/mol

6)   纯度:≥93%

7)   外观:浅黄色粉末

8)   化学结构式:

保存与运输方法

保存:-20℃干燥避光保存,且保存于惰性气体内。至少一年有效。

运输:冰袋运输。

注意事项

1)   腔肠素(Coelenterazine, CTZ)及衍生物最好以完全冻干粉的状态保存在惰性气体内,密封后置于-20℃或-70℃长期避光保存。管内即使有微量空气,也会随着时间慢慢氧化腔肠素使其活性丧失,这样不同实验之间的定量结果可能很不可信。

2)   商业化腔肠素的种类繁多,有天然腔肠素,以及各种腔肠素衍生物(比如,腔肠素h,腔肠素400a,腔肠素e,腔肠素f,腔肠素hcp)。它们对钙离子的亲和力,光谱特性,以及应用倾向上会有差异,详见附录2—天然腔肠素及其衍生物的光谱特性,附录3—天然腔肠素及其衍生物的应用差异选择适当的产品。

3)   为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法

【注意】:最好在荧光计分析或实验前马上配制新鲜的腔肠素溶液。

1.       将低温保存的冻干粉置于-20℃回至室温,低温保存的溶剂用微量恒温仪(heat block)回至室温,之后进行短暂低速离心,使得管内组分都落到底部。

2.       往500μg腔肠素v内加入1ml 专用的腔肠素溶剂,可用微量恒温仪加热到70℃促进粉末完全溶解,混匀后即得到0.5mg/ml 储存液。【注意:不要用水浴锅加热,因溶液吸潮后会引起腔肠素v的快速降解】

3.       用PBS或TBS稀释储存液到所需的水溶性工作液(比如,若荧光计测定所需的浓度为50μM,加447.5μl(0.5mg/ml)到10ml PBS)。【注意:工作液现配现用,不可保存】

4.       腔肠素v储存液置于-80℃避光保存,避免反复冻融,有条件的话保存在氮气或氩气内。尽快用完。当储存液颜色变为深棕色/黑色,请勿继续使用,这表明药物完全降解(氧化)。

相关产品

名称 规格
             Coelenterazine Native天然腔肠素 2×500μg       
Injectable native Coelenterazine 注射用天然腔肠素     2×500μg
Coelenterazine h 腔肠素h 2×500μg
Injectable h-Coelenterazine 注射用腔肠素h 2×500μg
Coelenterazine 400 a 腔肠素400a 500μg
e-Coelenterazine 腔肠素e 500μg
Coelenterazine f 腔肠素f 500μg
Coelenterazine cp 腔肠素cp 250μg
Coelenterazine hcp 腔肠素hcp 250μg

 

Coelenterazine n 腔肠素n 海肾荧光素酶(Rluc);萤火虫荧光素酶(Fluc)

Coelenterazine n 腔肠素n;Coelenterazine 400 a 腔肠素400a; 海肾荧光素酶(Rluc);萤火虫荧光素酶(Fluc);Aequorin 水母发光蛋白;CAS NO:55779-48-1;

产品信息

产品名称 规格                  
Coelenterazine n 腔肠素n            50μg
Coelenterazine n 腔肠素n 250μg

腔肠素(Coelenterazine)是在水生生物中发现的一种发光基团(luminophore),是许多荧光素酶的作用底物,包括海肾荧光素酶(Renilla reniformis luciferase, Rluc),分泌型膜锚定荧光素酶(Gaussia luciferase, Gluc)和薮枝虫荧光素酶(Obelia luciferase),和发光蛋白包括水母发光蛋白(Aequorin)的构成之一。其作用原理是以腔肠素为底物的荧光素酶,在含分子氧的条件下,氧化腔肠素产生高能量的中间产物,在此过程发射蓝色光,光波长在450~480nm【见图1】。而甲虫(或萤火虫)荧光素/荧光素酶(FLuc)系统不同,其在含分子氧的条件下,还需要ATP和Mg2+的存在才能同时发光,光波长在550-570nm。正由于生物发光信号和底物的差异,RLuc常常与FLuc联合用于多重转录报告基因研究,或用作Fluc系统内萤火虫荧光素酶转染的内参。腔肠素应用甚是广泛,包括:1)活细胞或组织的钙离子检测;2)细胞或组织的超氧化物和过氧亚硝基阴离子(活性氧,ROS)化学发光检测;3)基因报告基因检测;4)动物活体检测;5)ELISA和生物发光共振能量转移(BRET)用于蛋白相互作用研究;6)药物高通量筛选(HTS);

天然腔肠素(Coelenterazine Native,CTZ-Native)是自然界中存在最丰富的一种腔肠素,也是目前应用最普遍的一种标准底物。不仅是脱辅基水母发光蛋白(APO)的底物,也是海肾荧光素酶(Rluc)和分泌型膜锚定荧光素酶(Gluc)等荧光素酶的作用底物。前者用于检测钙离子浓度,后者用作荧光素酶的报告基因检测系统。还可用于生物共振能量转移BRET,细胞或组织内的超氧阴离子和过氧化亚硝基阴离子水平(ROS)的化学发光检测等。

腔肠素n(Coelenterazine n,CTZ-n)是一种天然腔肠素(CTZ-Native)的合成衍生物。CTZ-n的水母发光蛋白复合物的荧光强度在所有腔肠素衍生物中是最弱的,其对钙离子的反应时间也远慢于天然腔肠素。CTZ-n据报道是一种非常有用的低灵敏腔肠素。最大发射波长为468nm。

产品特性

1)   CAS NO:N/A

2)   化学名:2-(beta-naphthylmethyl)-6-(p-hydroxyphenyl)-8-benzylimidazo[1,2-A]pyrazin-3-(7H)-one

3)   同义名:CTZ-n; n-Coelenterazine; CLZN-n; n-腔肠素;

4)   分子式:C30H23N3O2

5)   分子量:457.52 g/mol

6)   纯度:≥98%

7)   外观:黄色固体

8)   溶解性:溶于甲醇或乙醇,不要溶于DMSO

9)   化学结构式:

保存与运输方法

保存:-20℃干燥避光保存,且保存于惰性气体内。至少一年有效。

运输:冰袋运输。

注意事项

1)   腔肠素(Coelenterazine, CTZ)及衍生物最好以完全冻干粉的状态保存在惰性气体内,密封后置于-20℃或-70℃长期避光保存。管内即使有微量空气,也会随着时间慢慢氧化腔肠素使其活性丧失,这样不同实验之间的定量结果可能很不可信。

2)   腔肠素(Coelenterazine, CTZ)及衍生物不建议以储存液的形式保存,最好于实验前配制新鲜的溶液。不建议将配好的腔肠素溶液储存在-20℃或-70℃,因其具有一个高能量的二氧杂环丁酮环形结构,即使在低温条件下都会自发降解。

3)   商业化腔肠素的种类繁多,有天然腔肠素,以及各种腔肠素衍生物(比如,腔肠素h,腔肠素400a,腔肠素e,腔肠素f,腔肠素hcp)。它们对钙离子的亲和力,光谱特性,以及应用倾向上会有差异,详见附录1—天然腔肠素及其衍生物的光谱特性,附录2—天然腔肠素及其衍生物的应用差异选择适当的产品。

4)   为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法

一、 腔肠素n的溶解事项

1)   腔肠素n不溶于水,接触到空气,水分或任何氧化剂都不稳定。千万不要溶于DMSO,因会发生未知反应引起腔肠素n的快速降解并生成未知的代谢产物。

2)   腔肠素n溶于甲醇或乙醇,毒性最小的溶剂是无水乙醇,可溶解粉末配制成0.1-1mg/ml溶液,之后加入需要的缓冲液,尽量保持缓冲液pH小于7.0,因大多数腔肠素衍生物在碱性条件会快速降解,有时会立即产生沉淀。

二、 腔肠素n的保存事项

最好在使用前,才用无水乙醇溶解腔肠素n粉末,然后用所选的缓冲液稀释并混匀。此时配好的工作缓冲液需静置20-30min使其稳定(因部分底物会发生自氧化)后才进行体外实验。该工作液能稳定保存几个小时(室温3-4h),仅微弱的信号衰减可能发生。

不建议将腔肠素n的乙醇溶液置于-20℃或-70℃保存,因天然腔肠素及任何衍生物含有一个高能量的二氧杂环丁酮环形结构,即使在低温条件下都会自发降解。若一定要保存乙醇溶液,请置于氮气或氩气下<-70℃避光保存。

附录1天然腔肠素及其衍生物的光谱特性

附录2 天然腔肠素及其衍生物的应用差异

表2 –天然腔肠素及其衍生物的应用差异
产品名称 应用特征
Coelenterazine native 应用非常广泛的标准底物。腔肠素是天然水母发光蛋白复合物的发光基团,也是海肾荧光素酶(Rluc)的底物。底物的快速再生(fast regeneration)比较重要的实验推荐使用天然腔肠素。

1)生物发光检测钙离子的灵敏度非常高,检测范围从0.1µM到>100µM;2)使用腔肠素监测报告基因表达是其主要应用;3)其他应用包括生物共振能量转移BRET,化学发光检测细胞或组织内的超氧阴离子和过氧化亚硝基阴离子水平(ROS);

Coelenterazine h 1)腔肠素h形成的水母发光蛋白复合物比天然腔肠素复合物的光强度高10倍以上;2)比天然腔肠素对钙离子敏感度更高;3)也适用报告基因分析。
Coelenterazine 400 a 也称为DeepBlue C,是一种腔肠素衍生物,用作海肾荧光素酶Rluc的底物,发射峰约400nm。含GFP受体的BRET研究是Rluc的首选底物,因其对GFP受体的发射波干扰非常小。不可用作Gluc底物。
Coelenterazine hcp 其生物发光强度最高(腔肠素hcp形成水母发光蛋白复合物的荧光强度比天然腔肠素复合物高190倍),对Ca2+反应速度快。
Coelenterazine cp Coelenterazine cp产生水母发光蛋白复合物的光强度是天然腔肠素复合物的15倍,且具有更快的Ca2+反应性。
Coelenterazine f 腔肠素f形成的水母发光蛋白复合物的光强度是天然腔肠素复合物的20倍,最大发射波长约长8nm。具有最好的细胞渗透性。当需要具极高钙离子Ca2+灵敏度的水母发光蛋白复合物,建议用腔肠素f。
Coelenterazine n 所有的腔肠素衍生物中荧光强度最弱,对Ca2+反应时间明显慢于天然腔肠素。一种非常有用的低灵敏腔肠素。
Coelenterazine e 体外水母发光蛋白再生中腔肠素e的速度最高,具有双发射峰,分别为405nm和465nm,使其能在pCa 5-7范围内通过双发射峰荧光强度比率的方式测定Ca2+浓度,提高检测准确度。但由于渗透性差,不适合胞内应用。在溶液中稳定性差。
Coelenterazine i 体外腔肠素i水母发光蛋白复合物的荧光强度仅为天然腔肠素复合物的3%,在所有腔肠素衍生物种对钙离子的反应时间最慢。
Coelenterazine ip 体外腔肠素ip水母发光蛋白复合物的荧光强度几乎比天然腔肠素复合物高50倍,但对钙离子的反应时间比天然腔肠素慢。
Coelenterazine fcp 腔肠素fcp形成的水母发光蛋白复合物的光强度是天然腔肠素复合物的135倍。
Methyl Coelenterazine 非常优越的抗氧化剂,靶向细胞内来源于单态氧和超氧化物阴离子产生的活性氧物质(ROS)。

相关产品

名称 规格
             Coelenterazine Native 天然腔肠素 2×500μg          
Injectable native Coelenterazine 注射用天然腔肠素        2×500μg
Coelenterazine h 腔肠素h 2×500μg
Injectable h-Coelenterazine 注射用腔肠素h 2×500μg
Coelenterazine 400 a 腔肠素400a 500μg
e-Coelenterazine 腔肠素e 500μg
Coelenterazine f 腔肠素f 500μg
Coelenterazine cp 腔肠素cp 250μg
Coelenterazine hcp 腔肠素hcp 250μg

 

D-荧光素(D-Luciferin)是荧光素酶(Luciferase)的常用底物

Luc reporter gene 报告基因;In vivo imaging 活体成像研究;转录水平研究;荧光素酶/ATP水平研究;报告基因质粒;报告基因病毒颗粒;萤火虫荧光素;甲虫荧光素;CAS:115144-35-9;

D-荧光素(D-Luciferin)是荧光素酶(Luciferase)的常用底物,普遍用于整个生物技术领域,特别是体内活体成像技术。作用机制是在ATP和荧光素酶的作用下,D-荧光素(底物)被氧化发光。当荧光素过量时,产生的光量子数与荧光素酶的浓度呈正相关性(见下图)。将携带荧光素酶编码基因(Luc)的质粒转染进入细胞后,导入研究动物如大小鼠体内,之后注入荧光素,通过生物发光成像技术(BLI)来检测光强度变化,从而实时监测疾病发展状态或药物的治疗功效等。也可以利用ATP对此反应体系的影响,根据生物发光强度的变化来指示能量或生命体征。

基本应用:

D-荧光素也常用于体外研究,包括荧光素酶和ATP水平分析;报告基因分析;高通量测序和各种污染检测。

常见商业化类型的差异(荧光素钾,钠,游离酸):

目前市场上有三种产品形式,D-荧光素(游离酸),D-荧光素(钠盐),和D-荧光素(钾盐)。这三种产品主要差别在于溶解特性。

1)D-荧光素(游离酸)在水以及缓冲体系内的溶解性都很弱,除非溶于弱碱如NaOH和KOH溶液。溶于甲醇(10 mg/ml)和DMSO(50 mg/ml)。

2)D-荧光素(钠盐)和D-荧光素(钾盐)能够非常容易且快速的溶入水或者缓冲液中,使用方便,溶剂无毒性,特别适合体内实验。配成溶液后的三种产品,在绝大多数应用上都没有实质性的差别。

3)D-荧光素(钠盐)和D-荧光素(钾盐)基本上没有差别,主要是使用习惯等因素影响。整体来看,钾盐的应用文献明显多于钠盐。

D-荧光素钾盐基本特性:

1)CAS NO:115144-35-9

2)化学名:4,5-Dihydro-2-(6-hydroxy-2-benzothiazolyl)-4-thiazolecarboxylic acid potassium salt,D-Luciferin firefly, potassium salt

3)分子式:C11H7N2O3S2K

4)分子量:318.42 g/mol

5)纯度:>99% (HPLC),分子生物学级(超纯)

6)外观:浅黄色至黄色粉末

7)溶解性:溶于水(60 mg/ml)

使用方法:

A.体外生物发光检测

1)储存液制备

用蒸馏水溶解D-荧光素(钾盐),配制成15mg/ml的储存液(100×),混匀后立即使用或分装于-20℃或-80℃冻存,避免反复冻融。建议使用的工作液浓度为150µg/ml(相当于468µM)。

2)荧光素酶反应缓冲液制备

配方【1×,参考Yuichi Oba, et al., 2003】:100mM Tris-HCl(pH 7.8),5mM MgCl2,250µM CoA,150µM ATP。具体缓冲液组成可参考其他文献资料来调整。按照以上配方制备荧光素酶反应缓冲液(2×)。

3)收集细胞裂解上清(荧光素酶表达)

根据需要检测的细胞类型,选择合适的裂解液进行细胞裂解,离心收集上清后续检测待用。

4)萤火虫荧光信号检测

【注①】:萤火虫荧光信号的检测方法大体上取决于冷光测定仪(luminometer)类型(是手动型荧光计、单管注射型或者酶标板读数型荧光计)。根据特定发光测定仪,来考虑注射用量和程序设置。

Coelenterazine v 腔肠素v Aequorin 水母发光蛋白 CAS NO:55779-48-1

Coelenterazine v 腔肠素v; Coelenterazine 400 a 腔肠素400a; 海肾荧光素酶(Rluc);萤火虫荧光素酶(Fluc);Aequorin 水母发光蛋白;CAS NO:55779-48-1;

产品信息

产品名称 产品编号 规格                  
Coelenterazine v 腔肠素v      MX4620-500UG     500μg
Coelenterazine v 腔肠素v MX4620-1MG 2×500μg

产品描述

腔肠素(Coelenterazine)是在水生生物中发现的一种发光基团(luminophore),是许多荧光素酶的作用底物,包括海肾荧光素酶(Renilla reniformis luciferase, Rluc),分泌型膜锚定荧光素酶(Gaussia luciferase, Gluc)和薮枝虫荧光素酶(Obelia luciferase),和发光蛋白包括水母发光蛋白(Aequorin)的构成之一。其作用原理是以腔肠素为底物的荧光素酶,在含分子氧的条件下,氧化腔肠素产生高能量的中间产物,在此过程发射蓝色光,光波长在450~480nm【见图1】。而甲虫(或萤火虫)荧光素/荧光素酶(FLuc)系统不同,其在含分子氧的条件下,还需要ATP和Mg2+的存在才能同时发光,光波长在550-570nm。正由于生物发光信号和底物的差异,RLuc常常与FLuc联合用于多重转录报告基因研究,或用作Fluc系统内萤火虫荧光素酶转染的内参。腔肠素应用甚是广泛,包括:1)活细胞或组织的钙离子检测;2)细胞或组织的超氧化物和过氧亚硝基阴离子(活性氧,ROS)化学发光检测;3)基因报告基因检测;4)动物活体检测;5)ELISA和生物发光共振能量转移(BRET)用于蛋白相互作用研究;6)药物高通量筛选(HTS);

天然腔肠素(Coelenterazine Native,CTZ-Native)是自然界中存在最丰富的一种腔肠素,也是目前应用最普遍的一种标准底物。不仅是脱辅基水母发光蛋白(APO)的底物,也是海肾荧光素酶(Rluc)和分泌型膜锚定荧光素酶(Gluc)等荧光素酶的作用底物。前者用于检测钙离子浓度,后者用作荧光素酶的报告基因检测系统。还可用于生物共振能量转移BRET,细胞或组织内的超氧阴离子和过氧化亚硝基阴离子水平(ROS)的化学发光检测等。

腔肠素v(Coelenterazine v,CTZ-v)是天然腔肠素(CTZ-Native)的一种合成衍生物,多带一个苄基环。CTZ-v具有一独特的特性,能够将野生型海肾荧光素酶(wt RLuc),RLuc8和绿色海肾荧光素酶(Green RLuc)的发射光谱迁移到更长波长(见附录1 图1,图2)。

产品组分

编号 组分名称

产品货号(规格)

MX4620-500UG     MX4620-1MG     
MX4620-A    Coelenterazine v (powder) 1×500μg 2×500μg
MX4620-B Specialized Solvent for Coelenterazine v    2×500μl 4×500μl

产品特性

1)   CAS NO:N/A

2)   化学名:16-benzyl-5-hydroxy-13-[(4-hydroxyphenyl)methyl]-11,14,17-triazatetracyclo [8.7.0.0^{2,7}.0^{11,15}]heptadeca-1(10),2(7),3,5,8,13,15-heptaen-12-one

3)   同义名:CTZ-v; v-Coelenterazine; CLZN-v; v-腔肠素;

4)   分子式:C28H21N3O3

5)   分子量:447.48 g/mol

6)   纯度:≥93%

7)   外观:浅黄色粉末

8)   化学结构式:

保存与运输方法

保存:-20℃干燥避光保存,且保存于惰性气体内。至少一年有效。

运输:冰袋运输。

注意事项

1)   腔肠素(Coelenterazine, CTZ)及衍生物最好以完全冻干粉的状态保存在惰性气体内,密封后置于-20℃或-70℃长期避光保存。管内即使有微量空气,也会随着时间慢慢氧化腔肠素使其活性丧失,这样不同实验之间的定量结果可能很不可信。

2)   商业化腔肠素的种类繁多,有天然腔肠素,以及各种腔肠素衍生物(比如,腔肠素h,腔肠素400a,腔肠素e,腔肠素f,腔肠素hcp)。它们对钙离子的亲和力,光谱特性,以及应用倾向上会有差异,详见附录2—天然腔肠素及其衍生物的光谱特性,附录3—天然腔肠素及其衍生物的应用差异选择适当的产品。

3)   为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法

【注意】:最好在荧光计分析或实验前马上配制新鲜的腔肠素溶液。

1.       将低温保存的冻干粉置于-20℃回至室温,低温保存的溶剂用微量恒温仪(heat block)回至室温,之后进行短暂低速离心,使得管内组分都落到底部。

2.       往500μg腔肠素v内加入1ml 专用的腔肠素溶剂,可用微量恒温仪加热到70℃促进粉末完全溶解,混匀后即得到0.5mg/ml 储存液。【注意:不要用水浴锅加热,因溶液吸潮后会引起腔肠素v的快速降解】

3.       用PBS或TBS稀释储存液到所需的水溶性工作液(比如,若荧光计测定所需的浓度为50μM,加447.5μl(0.5mg/ml)到10ml PBS)。【注意:工作液现配现用,不可保存】

4.       腔肠素v储存液置于-80℃避光保存,避免反复冻融,有条件的话保存在氮气或氩气内。尽快用完。当储存液颜色变为深棕色/黑色,请勿继续使用,这表明药物完全降解(氧化)。

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货号 名称 规格
MX4606-1MG             Coelenterazine Native天然腔肠素 2×500μg       
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Coelenterazine i 腔肠素 i Aequorin 水母发光蛋白 CAS NO:55779-48-1

Coelenterazine i 腔肠素i;Coelenterazine 400 a 腔肠素400a; 海肾荧光素酶(Rluc);萤火虫荧光素酶(Fluc);Aequorin 水母发光蛋白;CAS NO:55779-48-1;

产品信息

产品名称 产品编号 规格                  
Coelenterazine i 腔肠素i       MX4616-50UG      50μg
Coelenterazine i 腔肠素i   MX4616-250UG 250μg

产品描述

腔肠素(Coelenterazine)是在水生生物中发现的一种发光基团(luminophore),是许多荧光素酶的作用底物,包括海肾荧光素酶(Renilla reniformis luciferase, Rluc),分泌型膜锚定荧光素酶(Gaussia luciferase, Gluc)和薮枝虫荧光素酶(Obelia luciferase),和发光蛋白包括水母发光蛋白(Aequorin)的构成之一。其作用原理是以腔肠素为底物的荧光素酶,在含分子氧的条件下,氧化腔肠素产生高能量的中间产物,在此过程发射蓝色光,光波长在450~480nm【见图1】。而甲虫(或萤火虫)荧光素/荧光素酶(FLuc)系统不同,其在含分子氧的条件下,还需要ATP和Mg2+的存在才能同时发光,光波长在550-570nm。正由于生物发光信号和底物的差异,RLuc常常与FLuc联合用于多重转录报告基因研究,或用作Fluc系统内萤火虫荧光素酶转染的内参。腔肠素应用甚是广泛,包括:1)活细胞或组织的钙离子检测;2)细胞或组织的超氧化物和过氧亚硝基阴离子(活性氧,ROS)化学发光检测;3)基因报告基因检测;4)动物活体检测;5)ELISA和生物发光共振能量转移(BRET)用于蛋白相互作用研究;6)药物高通量筛选(HTS);

天然腔肠素(Coelenterazine Native,CTZ-Native)是自然界中存在最丰富的一种腔肠素,也是目前应用最普遍的一种标准底物。不仅是脱辅基水母发光蛋白(APO)的底物,也是海肾荧光素酶(Rluc)和分泌型膜锚定荧光素酶(Gluc)等荧光素酶的作用底物。前者用于检测钙离子浓度,后者用作荧光素酶的报告基因检测系统。还可用于生物共振能量转移BRET,细胞或组织内的超氧阴离子和过氧化亚硝基阴离子水平(ROS)的化学发光检测等。

腔肠素i(Coelenterazine i,CTZ-i)是一种天然腔肠素(CTZ-Native)的合成衍生物。CTZ-i的水母发光蛋白复合物的荧光强度仅为天然腔肠素复合物的3%,所有腔肠素衍生物种对钙离子的反应时间最慢。

产品特性 

1)   CAS NO:N/A

2)   同义名:CTZ-i; i-Coelenterazine; CLZN-i; i-腔肠素;

3)   分子式:C26H20IN3O2

4)   分子量:533.36 g/mol

5)   纯度:≥98%

6)   外观:黄色固体

7)   溶解性:溶于甲醇或乙醇,不要溶于DMSO

8)  化学结构式:

保存与运输方法

保存:-20℃干燥避光保存,且保存于惰性气体内。至少一年有效。

运输:冰袋运输。

注意事项

1)   腔肠素(Coelenterazine, CTZ)及衍生物最好以完全冻干粉的状态保存在惰性气体内,密封后置于-20℃或-70℃长期避光保存。管内即使有微量空气,也会随着时间慢慢氧化腔肠素使其活性丧失,这样不同实验之间的定量结果可能很不可信。

2)   腔肠素(Coelenterazine, CTZ)及衍生物不建议以储存液的形式保存,最好于实验前配制新鲜的溶液。不建议将配好的腔肠素溶液储存在-20℃或-70℃,因其具有一个高能量的二氧杂环丁酮环形结构,即使在低温条件下都会自发降解。

3)   商业化腔肠素的种类繁多,有天然腔肠素,以及各种腔肠素衍生物(比如,腔肠素h,腔肠素400a,腔肠素e,腔肠素f,腔肠素hcp)。它们对钙离子的亲和力,光谱特性,以及应用倾向上会有差异,详见附录1—天然腔肠素及其衍生物的光谱特性,附录2—天然腔肠素及其衍生物的应用差异选择适当的产品。

4)   为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法

一、 腔肠素i的溶解事项

1)   腔肠素i不溶于水,接触到空气,水分或任何氧化剂都不稳定。千万不要溶于DMSO,因会发生未知反应引起腔肠素i的快速降解并生成未知的代谢产物。

2)   腔肠素i溶于甲醇或乙醇,毒性最小的溶剂是无水乙醇,可溶解粉末配制成0.1-1mg/ml溶液,之后加入需要的缓冲液,尽量保持缓冲液pH小于7.0,因大多数腔肠素衍生物在碱性条件会快速降解,有时会立即产生沉淀。

二、 腔肠素i的保存事项

最好在使用前,才用无水乙醇溶解腔肠素n粉末,然后用所选的缓冲液稀释并混匀。此时配好的工作缓冲液需静置20-30min使其稳定(因部分底物会发生自氧化)后才进行体外实验。该工作液能稳定保存几个小时(室温3-4h),仅微弱的信号衰减可能发生。

不建议将腔肠素i的乙醇溶液置于-20℃或-70℃保存,因天然腔肠素及任何衍生物含有一个高能量的二氧杂环丁酮环形结构,即使在低温条件下都会自发降解。若一定要保存乙醇溶液,请置于氮气或氩气下<-70℃避光保存。

表2 –天然腔肠素及其衍生物的应用差异
产品名称 货号 应用特征
Coelenterazine native MX4606 应用非常广泛的标准底物。腔肠素是天然水母发光蛋白复合物的发光基团,也是海肾荧光素酶(Rluc)的底物。底物的快速再生(fast regeneration)比较重要的实验推荐使用天然腔肠素。

1)生物发光检测钙离子的灵敏度非常高,检测范围从0.1µM到>100µM;2)使用腔肠素监测报告基因表达是其主要应用;3)其他应用包括生物共振能量转移BRET,化学发光检测细胞或组织内的超氧阴离子和过氧化亚硝基阴离子水平(ROS);

Coelenterazine h MX4607 1)腔肠素h形成的水母发光蛋白复合物比天然腔肠素复合物的光强度高10倍以上;2)比天然腔肠素对钙离子敏感度更高;3)也适用报告基因分析。
Coelenterazine 400 a MX4610 也称为DeepBlue C,是一种腔肠素衍生物,用作海肾荧光素酶Rluc的底物,发射峰约400nm。含GFP受体的BRET研究是Rluc的首选底物,因其对GFP受体的发射波干扰非常小。不可用作Gluc底物。
Coelenterazine hcp MX4614 其生物发光强度最高(腔肠素hcp形成水母发光蛋白复合物的荧光强度比天然腔肠素复合物高190倍),对Ca2+反应速度快。
Coelenterazine cp MX4613 Coelenterazine cp产生水母发光蛋白复合物的光强度是天然腔肠素复合物的15倍,且具有更快的Ca2+反应性。
Coelenterazine f MX4612 腔肠素f形成的水母发光蛋白复合物的光强度是天然腔肠素复合物的20倍,最大发射波长约长8nm。具有最好的细胞渗透性。当需要具极高钙离子Ca2+灵敏度的水母发光蛋白复合物,建议用腔肠素f。
Coelenterazine n MX4615 所有的腔肠素衍生物中荧光强度最弱,对Ca2+反应时间明显慢于天然腔肠素。一种非常有用的低灵敏腔肠素。
Coelenterazine e MX4611 体外水母发光蛋白再生中腔肠素e的速度最高,具有双发射峰,分别为405nm和465nm,使其能在pCa 5-7范围内通过双发射峰荧光强度比率的方式测定Ca2+浓度,提高检测准确度。但由于渗透性差,不适合胞内应用。在溶液中稳定性差。
Coelenterazine i MX4616 体外腔肠素i水母发光蛋白复合物的荧光强度仅为天然腔肠素复合物的3%,在所有腔肠素衍生物种对钙离子的反应时间最慢。
Coelenterazine ip MX4618 体外腔肠素ip水母发光蛋白复合物的荧光强度几乎比天然腔肠素复合物高50倍,但对钙离子的反应时间比天然腔肠素慢。
Coelenterazine fcp MX4617 腔肠素fcp形成的水母发光蛋白复合物的光强度是天然腔肠素复合物的135倍。
Methyl Coelenterazine MX4619 非常优越的抗氧化剂,靶向细胞内来源于单态氧和超氧化物阴离子产生的活性氧物质(ROS)。

相关产品

货号 名称 规格
MX4606-1MG              Coelenterazine Native 天然腔肠素 2×500μg          
MX4607-1MG Injectable native Coelenterazine 注射用天然腔肠素        2×500μg
MX4608-1MG Coelenterazine h 腔肠素h 2×500μg
MX4609-1MG Injectable h-Coelenterazine 注射用腔肠素h 2×500μg
MX4610-500UG Coelenterazine 400 a 腔肠素400a 500μg
MX4611-500UG e-Coelenterazine 腔肠素e 500μg
MX4612-500UG Coelenterazine f 腔肠素f 500μg
MX4613-250UG Coelenterazine cp 腔肠素cp 250μg
MX4614-250UG Coelenterazine hcp 腔肠素hcp 250μg

 

Firefly Luciferase, Recombinant 重组萤火虫荧光素酶 


描述

Firefly Luciferase, Recombinant 重组萤火虫荧光素酶 

 

产品标签

Firefly Luciferase萤火虫荧光素酶;Photinus pyralis;报告基因检测;D-luciferin sodium D-荧光素钠盐;ATP生物发光检测;CAS:61970-00-1;

产品信息

产品名称 产品编号 规格 价格(元)
Firefly Luciferase, Recombinant 重组萤火虫荧光素酶 MF4021-1MG 1mg 1596

 

产品描述

萤火虫萤光素酶(Firefly Luciferase)是一种分子量~60kD的蛋白,在ATP、镁离子和氧气存在的条件下,可以催化萤光素(Luciferin)氧化成氧化荧光素(Oxyluciferin),在此氧化过程中释放出生物萤光(Bioluminescence)。这一荧光可通过化学发光仪(Luminometer)或液闪测定仪进行测定【见图.萤火虫荧光素酶的生物发光原理】。

 

本品是北美萤火虫(Photinus pyralis)来源的荧光素酶基因进行克隆表达得到的重组酶,提供一种可靠且可依赖的工具进行研究或配制ATP或荧光素底物检测用的生物发光检测试剂盒。重组荧光素酶能避免天然纯化荧光素酶可能存在的季节和区域变化。

萤火虫荧光素酶是最常用的报告基因之一,用来研究基因调控和功能,以及药物筛选实验。还能用于微量ATP的检测。荧光素酶催化的生物发光反应是基因表达测定最灵敏的分析工具之一。

 

产品特性

1) CAS NO:61970-00-1

2) EC NO:1.13.12.7

3) 同义名:Recombinant Firefly Luciferase; Firefly luciferin luciferase; Photinus pyralis luciferase; Luciferase from Photinus pyralis (firefly), Recombinant; Luciferin 4-monooxygenase;萤光素4-单加氧酶;

4) 分子量:~60kDa

5) 外观:液体(1mg/ml)

6) 检测范围:≤1 femtomole ATP(0.2μg luciferase)

 

保存与运输方法

保存:-20℃保存,1年有效。 

运输:冰袋运输。

注意事项

为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

 

相关产品

货号 名称 规格
MF4001-100T Firefly Luciferase Reporter Gene Assay Kit萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂 100T
MF4006-100T Renilla Luciferase Reporter Gene Assay Kit海肾萤光素酶报告基因检测试剂 100T
MF4010-100T Dual Luciferase Reporter Gene Assay Kit双荧光素酶报告基因检测试剂盒 100T
MF4021-1MG Firefly Luciferase, Recombinant重组萤火虫荧光素酶 1mg
MX4602-100MG D-Luciferin, Sodium Salt D-荧光素钠盐 100mg
MX4603-100MG D-Luciferin, Potassium Salt D-荧光素钾盐 100mg

 

 

 

Coelenterazine i 腔肠素 i CAS NO:55779-48-1

Coelenterazine i 腔肠素i;Coelenterazine 400 a 腔肠素400a; 海肾荧光素酶(Rluc);萤火虫荧光素酶(Fluc);Aequorin 水母发光蛋白;CAS NO:55779-48-1;

产品信息

产品名称 产品编号 规格                  
Coelenterazine i 腔肠素i       MX4616-50UG      50μg
Coelenterazine i 腔肠素i   MX4616-250UG 250μg

产品描述

腔肠素(Coelenterazine)是在水生生物中发现的一种发光基团(luminophore),是许多荧光素酶的作用底物,包括海肾荧光素酶(Renilla reniformis luciferase, Rluc),分泌型膜锚定荧光素酶(Gaussia luciferase, Gluc)和薮枝虫荧光素酶(Obelia luciferase),和发光蛋白包括水母发光蛋白(Aequorin)的构成之一。其作用原理是以腔肠素为底物的荧光素酶,在含分子氧的条件下,氧化腔肠素产生高能量的中间产物,在此过程发射蓝色光,光波长在450~480nm【见图1】。而甲虫(或萤火虫)荧光素/荧光素酶(FLuc)系统不同,其在含分子氧的条件下,还需要ATP和Mg2+的存在才能同时发光,光波长在550-570nm。正由于生物发光信号和底物的差异,RLuc常常与FLuc联合用于多重转录报告基因研究,或用作Fluc系统内萤火虫荧光素酶转染的内参。腔肠素应用甚是广泛,包括:1)活细胞或组织的钙离子检测;2)细胞或组织的超氧化物和过氧亚硝基阴离子(活性氧,ROS)化学发光检测;3)基因报告基因检测;4)动物活体检测;5)ELISA和生物发光共振能量转移(BRET)用于蛋白相互作用研究;6)药物高通量筛选(HTS);

天然腔肠素(Coelenterazine Native,CTZ-Native)是自然界中存在最丰富的一种腔肠素,也是目前应用最普遍的一种标准底物。不仅是脱辅基水母发光蛋白(APO)的底物,也是海肾荧光素酶(Rluc)和分泌型膜锚定荧光素酶(Gluc)等荧光素酶的作用底物。前者用于检测钙离子浓度,后者用作荧光素酶的报告基因检测系统。还可用于生物共振能量转移BRET,细胞或组织内的超氧阴离子和过氧化亚硝基阴离子水平(ROS)的化学发光检测等。

腔肠素i(Coelenterazine i,CTZ-i)是一种天然腔肠素(CTZ-Native)的合成衍生物。CTZ-i的水母发光蛋白复合物的荧光强度仅为天然腔肠素复合物的3%,所有腔肠素衍生物种对钙离子的反应时间最慢。

产品特性 

1)   CAS NO:N/A

2)   同义名:CTZ-i; i-Coelenterazine; CLZN-i; i-腔肠素;

3)   分子式:C26H20IN3O2

4)   分子量:533.36 g/mol

5)   纯度:≥98%

6)   外观:黄色固体

7)   溶解性:溶于甲醇或乙醇,不要溶于DMSO

保存与运输方法

保存:-20℃干燥避光保存,且保存于惰性气体内。至少一年有效。

运输:冰袋运输。

注意事项

1)   腔肠素(Coelenterazine, CTZ)及衍生物最好以完全冻干粉的状态保存在惰性气体内,密封后置于-20℃或-70℃长期避光保存。管内即使有微量空气,也会随着时间慢慢氧化腔肠素使其活性丧失,这样不同实验之间的定量结果可能很不可信。

2)   腔肠素(Coelenterazine, CTZ)及衍生物不建议以储存液的形式保存,最好于实验前配制新鲜的溶液。不建议将配好的腔肠素溶液储存在-20℃或-70℃,因其具有一个高能量的二氧杂环丁酮环形结构,即使在低温条件下都会自发降解。

3)   商业化腔肠素的种类繁多,有天然腔肠素,以及各种腔肠素衍生物(比如,腔肠素h,腔肠素400a,腔肠素e,腔肠素f,腔肠素hcp)。它们对钙离子的亲和力,光谱特性,以及应用倾向上会有差异,详见附录1—天然腔肠素及其衍生物的光谱特性,附录2—天然腔肠素及其衍生物的应用差异选择适当的产品。

4)   为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法

一、 腔肠素i的溶解事项

1)   腔肠素i不溶于水,接触到空气,水分或任何氧化剂都不稳定。千万不要溶于DMSO,因会发生未知反应引起腔肠素i的快速降解并生成未知的代谢产物。

2)   腔肠素i溶于甲醇或乙醇,毒性最小的溶剂是无水乙醇,可溶解粉末配制成0.1-1mg/ml溶液,之后加入需要的缓冲液,尽量保持缓冲液pH小于7.0,因大多数腔肠素衍生物在碱性条件会快速降解,有时会立即产生沉淀。

二、 腔肠素i的保存事项

最好在使用前,才用无水乙醇溶解腔肠素n粉末,然后用所选的缓冲液稀释并混匀。此时配好的工作缓冲液需静置20-30min使其稳定(因部分底物会发生自氧化)后才进行体外实验。该工作液能稳定保存几个小时(室温3-4h),仅微弱的信号衰减可能发生。

不建议将腔肠素i的乙醇溶液置于-20℃或-70℃保存,因天然腔肠素及任何衍生物含有一个高能量的二氧杂环丁酮环形结构,即使在低温条件下都会自发降解。若一定要保存乙醇溶液,请置于氮气或氩气下<-70℃避光保存。

附录1天然腔肠素及其衍生物的光谱特性

附录2 天然腔肠素及其衍生物的应用差异

表2 –天然腔肠素及其衍生物的应用差异
产品名称 货号 应用特征
Coelenterazine native MX4606 应用非常广泛的标准底物。腔肠素是天然水母发光蛋白复合物的发光基团,也是海肾荧光素酶(Rluc)的底物。底物的快速再生(fast regeneration)比较重要的实验推荐使用天然腔肠素。

1)生物发光检测钙离子的灵敏度非常高,检测范围从0.1µM到>100µM;2)使用腔肠素监测报告基因表达是其主要应用;3)其他应用包括生物共振能量转移BRET,化学发光检测细胞或组织内的超氧阴离子和过氧化亚硝基阴离子水平(ROS);

Coelenterazine h MX4607 1)腔肠素h形成的水母发光蛋白复合物比天然腔肠素复合物的光强度高10倍以上;2)比天然腔肠素对钙离子敏感度更高;3)也适用报告基因分析。
Coelenterazine 400 a MX4610 也称为DeepBlue C,是一种腔肠素衍生物,用作海肾荧光素酶Rluc的底物,发射峰约400nm。含GFP受体的BRET研究是Rluc的首选底物,因其对GFP受体的发射波干扰非常小。不可用作Gluc底物。
Coelenterazine hcp MX4614 其生物发光强度最高(腔肠素hcp形成水母发光蛋白复合物的荧光强度比天然腔肠素复合物高190倍),对Ca2+反应速度快。
Coelenterazine cp MX4613 Coelenterazine cp产生水母发光蛋白复合物的光强度是天然腔肠素复合物的15倍,且具有更快的Ca2+反应性。
Coelenterazine f MX4612 腔肠素f形成的水母发光蛋白复合物的光强度是天然腔肠素复合物的20倍,最大发射波长约长8nm。具有最好的细胞渗透性。当需要具极高钙离子Ca2+灵敏度的水母发光蛋白复合物,建议用腔肠素f。
Coelenterazine n MX4615 所有的腔肠素衍生物中荧光强度最弱,对Ca2+反应时间明显慢于天然腔肠素。一种非常有用的低灵敏腔肠素。
Coelenterazine e MX4611 体外水母发光蛋白再生中腔肠素e的速度最高,具有双发射峰,分别为405nm和465nm,使其能在pCa 5-7范围内通过双发射峰荧光强度比率的方式测定Ca2+浓度,提高检测准确度。但由于渗透性差,不适合胞内应用。在溶液中稳定性差。
Coelenterazine i MX4616 体外腔肠素i水母发光蛋白复合物的荧光强度仅为天然腔肠素复合物的3%,在所有腔肠素衍生物种对钙离子的反应时间最慢。
Coelenterazine ip MX4618 体外腔肠素ip水母发光蛋白复合物的荧光强度几乎比天然腔肠素复合物高50倍,但对钙离子的反应时间比天然腔肠素慢。
Coelenterazine fcp MX4617 腔肠素fcp形成的水母发光蛋白复合物的光强度是天然腔肠素复合物的135倍。
Methyl Coelenterazine MX4619 非常优越的抗氧化剂,靶向细胞内来源于单态氧和超氧化物阴离子产生的活性氧物质(ROS)。

相关产品

货号 名称 规格
MX4606-1MG              Coelenterazine Native 天然腔肠素 2×500μg          
MX4607-1MG Injectable native Coelenterazine 注射用天然腔肠素        2×500μg
MX4608-1MG Coelenterazine h 腔肠素h 2×500μg
MX4609-1MG Injectable h-Coelenterazine 注射用腔肠素h 2×500μg
MX4610-500UG Coelenterazine 400 a 腔肠素400a 500μg
MX4611-500UG e-Coelenterazine 腔肠素e 500μg
MX4612-500UG Coelenterazine f 腔肠素f 500μg
MX4613-250UG Coelenterazine cp 腔肠素cp 250μg
MX4614-250UG Coelenterazine hcp 腔肠素hcp 250μg

 

Coelenterazine n 腔肠素n Aequorin 水母发光蛋白 CAS NO:55779-48-1

Coelenterazine n 腔肠素n;Coelenterazine 400 a 腔肠素400a; 海肾荧光素酶(Rluc);萤火虫荧光素酶(Fluc);Aequorin 水母发光蛋白;CAS NO:55779-48-1;

产品信息

产品名称 产品编号 规格                  
Coelenterazine n 腔肠素n      MX4615-50UG      50μg
Coelenterazine n 腔肠素n MX4615-250UG 250μg

产品描述

腔肠素(Coelenterazine)是在水生生物中发现的一种发光基团(luminophore),是许多荧光素酶的作用底物,包括海肾荧光素酶(Renilla reniformis luciferase, Rluc),分泌型膜锚定荧光素酶(Gaussia luciferase, Gluc)和薮枝虫荧光素酶(Obelia luciferase),和发光蛋白包括水母发光蛋白(Aequorin)的构成之一。其作用原理是以腔肠素为底物的荧光素酶,在含分子氧的条件下,氧化腔肠素产生高能量的中间产物,在此过程发射蓝色光,光波长在450~480nm【见图1】。而甲虫(或萤火虫)荧光素/荧光素酶(FLuc)系统不同,其在含分子氧的条件下,还需要ATP和Mg2+的存在才能同时发光,光波长在550-570nm。正由于生物发光信号和底物的差异,RLuc常常与FLuc联合用于多重转录报告基因研究,或用作Fluc系统内萤火虫荧光素酶转染的内参。腔肠素应用甚是广泛,包括:1)活细胞或组织的钙离子检测;2)细胞或组织的超氧化物和过氧亚硝基阴离子(活性氧,ROS)化学发光检测;3)基因报告基因检测;4)动物活体检测;5)ELISA和生物发光共振能量转移(BRET)用于蛋白相互作用研究;6)药物高通量筛选(HTS);

天然腔肠素(Coelenterazine Native,CTZ-Native)是自然界中存在最丰富的一种腔肠素,也是目前应用最普遍的一种标准底物。不仅是脱辅基水母发光蛋白(APO)的底物,也是海肾荧光素酶(Rluc)和分泌型膜锚定荧光素酶(Gluc)等荧光素酶的作用底物。前者用于检测钙离子浓度,后者用作荧光素酶的报告基因检测系统。还可用于生物共振能量转移BRET,细胞或组织内的超氧阴离子和过氧化亚硝基阴离子水平(ROS)的化学发光检测等。

腔肠素n(Coelenterazine n,CTZ-n)是一种天然腔肠素(CTZ-Native)的合成衍生物。CTZ-n的水母发光蛋白复合物的荧光强度在所有腔肠素衍生物中是最弱的,其对钙离子的反应时间也远慢于天然腔肠素。CTZ-n据报道是一种非常有用的低灵敏腔肠素。最大发射波长为468nm。

产品特性

1)   CAS NO:N/A

2)   化学名:2-(beta-naphthylmethyl)-6-(p-hydroxyphenyl)-8-benzylimidazo[1,2-A]pyrazin-3-(7H)-one

3)   同义名:CTZ-n; n-Coelenterazine; CLZN-n; n-腔肠素;

4)   分子式:C30H23N3O2

5)   分子量:457.52 g/mol

6)   纯度:≥98%

7)   外观:黄色固体

8)   溶解性:溶于甲醇或乙醇,不要溶于DMSO

9)   化学结构式:

保存与运输方法

保存:-20℃干燥避光保存,且保存于惰性气体内。至少一年有效。

运输:冰袋运输。

注意事项

1)   腔肠素(Coelenterazine, CTZ)及衍生物最好以完全冻干粉的状态保存在惰性气体内,密封后置于-20℃或-70℃长期避光保存。管内即使有微量空气,也会随着时间慢慢氧化腔肠素使其活性丧失,这样不同实验之间的定量结果可能很不可信。

2)   腔肠素(Coelenterazine, CTZ)及衍生物不建议以储存液的形式保存,最好于实验前配制新鲜的溶液。不建议将配好的腔肠素溶液储存在-20℃或-70℃,因其具有一个高能量的二氧杂环丁酮环形结构,即使在低温条件下都会自发降解。

3)   商业化腔肠素的种类繁多,有天然腔肠素,以及各种腔肠素衍生物(比如,腔肠素h,腔肠素400a,腔肠素e,腔肠素f,腔肠素hcp)。它们对钙离子的亲和力,光谱特性,以及应用倾向上会有差异,详见附录1—天然腔肠素及其衍生物的光谱特性,附录2—天然腔肠素及其衍生物的应用差异选择适当的产品。

4)   为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法

一、 腔肠素n的溶解事项

1)   腔肠素n不溶于水,接触到空气,水分或任何氧化剂都不稳定。千万不要溶于DMSO,因会发生未知反应引起腔肠素n的快速降解并生成未知的代谢产物。

2)   腔肠素n溶于甲醇或乙醇,毒性最小的溶剂是无水乙醇,可溶解粉末配制成0.1-1mg/ml溶液,之后加入需要的缓冲液,尽量保持缓冲液pH小于7.0,因大多数腔肠素衍生物在碱性条件会快速降解,有时会立即产生沉淀。

二、 腔肠素n的保存事项

最好在使用前,才用无水乙醇溶解腔肠素n粉末,然后用所选的缓冲液稀释并混匀。此时配好的工作缓冲液需静置20-30min使其稳定(因部分底物会发生自氧化)后才进行体外实验。该工作液能稳定保存几个小时(室温3-4h),仅微弱的信号衰减可能发生。

不建议将腔肠素n的乙醇溶液置于-20℃或-70℃保存,因天然腔肠素及任何衍生物含有一个高能量的二氧杂环丁酮环形结构,即使在低温条件下都会自发降解。若一定要保存乙醇溶液,请置于氮气或氩气下<-70℃避光保存。

附录1天然腔肠素及其衍生物的光谱特性

附录2 天然腔肠素及其衍生物的应用差异

表2 –天然腔肠素及其衍生物的应用差异
产品名称 货号 应用特征
Coelenterazine native MX4606 应用非常广泛的标准底物。腔肠素是天然水母发光蛋白复合物的发光基团,也是海肾荧光素酶(Rluc)的底物。底物的快速再生(fast regeneration)比较重要的实验推荐使用天然腔肠素。

1)生物发光检测钙离子的灵敏度非常高,检测范围从0.1µM到>100µM;2)使用腔肠素监测报告基因表达是其主要应用;3)其他应用包括生物共振能量转移BRET,化学发光检测细胞或组织内的超氧阴离子和过氧化亚硝基阴离子水平(ROS);

Coelenterazine h MX4607 1)腔肠素h形成的水母发光蛋白复合物比天然腔肠素复合物的光强度高10倍以上;2)比天然腔肠素对钙离子敏感度更高;3)也适用报告基因分析。
Coelenterazine 400 a MX4610 也称为DeepBlue C,是一种腔肠素衍生物,用作海肾荧光素酶Rluc的底物,发射峰约400nm。含GFP受体的BRET研究是Rluc的首选底物,因其对GFP受体的发射波干扰非常小。不可用作Gluc底物。
Coelenterazine hcp MX4614 其生物发光强度最高(腔肠素hcp形成水母发光蛋白复合物的荧光强度比天然腔肠素复合物高190倍),对Ca2+反应速度快。
Coelenterazine cp MX4613 Coelenterazine cp产生水母发光蛋白复合物的光强度是天然腔肠素复合物的15倍,且具有更快的Ca2+反应性。
Coelenterazine f MX4612 腔肠素f形成的水母发光蛋白复合物的光强度是天然腔肠素复合物的20倍,最大发射波长约长8nm。具有最好的细胞渗透性。当需要具极高钙离子Ca2+灵敏度的水母发光蛋白复合物,建议用腔肠素f。
Coelenterazine n MX4615 所有的腔肠素衍生物中荧光强度最弱,对Ca2+反应时间明显慢于天然腔肠素。一种非常有用的低灵敏腔肠素。
Coelenterazine e MX4611 体外水母发光蛋白再生中腔肠素e的速度最高,具有双发射峰,分别为405nm和465nm,使其能在pCa 5-7范围内通过双发射峰荧光强度比率的方式测定Ca2+浓度,提高检测准确度。但由于渗透性差,不适合胞内应用。在溶液中稳定性差。
Coelenterazine i MX4616 体外腔肠素i水母发光蛋白复合物的荧光强度仅为天然腔肠素复合物的3%,在所有腔肠素衍生物种对钙离子的反应时间最慢。
Coelenterazine ip MX4618 体外腔肠素ip水母发光蛋白复合物的荧光强度几乎比天然腔肠素复合物高50倍,但对钙离子的反应时间比天然腔肠素慢。
Coelenterazine fcp MX4617 腔肠素fcp形成的水母发光蛋白复合物的光强度是天然腔肠素复合物的135倍。
Methyl Coelenterazine MX4619 非常优越的抗氧化剂,靶向细胞内来源于单态氧和超氧化物阴离子产生的活性氧物质(ROS)。

相关产品

货号 名称 规格
MX4606-1MG              Coelenterazine Native 天然腔肠素 2×500μg          
MX4607-1MG Injectable native Coelenterazine 注射用天然腔肠素        2×500μg
MX4608-1MG Coelenterazine h 腔肠素h 2×500μg
MX4609-1MG Injectable h-Coelenterazine 注射用腔肠素h 2×500μg
MX4610-500UG Coelenterazine 400 a 腔肠素400a 500μg
MX4611-500UG e-Coelenterazine 腔肠素e 500μg
MX4612-500UG Coelenterazine f 腔肠素f 500μg
MX4613-250UG Coelenterazine cp 腔肠素cp 250μg
MX4614-250UG Coelenterazine hcp 腔肠素hcp 250μg

 

Coelenterazine f 腔肠素f Aequorin 水母发光蛋白 CAS NO:123437-16-1

Coelenterazine f 腔肠素f;Coelenterazine 400 a 腔肠素400a; 海肾荧光素酶(Rluc);萤火虫荧光素酶(Fluc);Aequorin 水母发光蛋白;CAS NO:123437-16-1;

产品信息

产品名称 产品编号 规格     
Coelenterazine f 腔肠素f      MX4612-500UG    500μg             
Coelenterazine f 腔肠素f MX4612-1MG 2×500μg

产品描述

腔肠素(Coelenterazine)是在水生生物中发现的一种发光基团(luminophore),是许多荧光素酶的作用底物,包括海肾荧光素酶(Renilla reniformis luciferase, Rluc),分泌型膜锚定荧光素酶(Gaussia luciferase, Gluc)和薮枝虫荧光素酶(Obelia luciferase),和发光蛋白包括水母发光蛋白(Aequorin)的构成之一。其作用原理是以腔肠素为底物的荧光素酶,在含分子氧的条件下,氧化腔肠素产生高能量的中间产物,在此过程发射蓝色光,光波长在450~480nm【见图1】。而甲虫(或萤火虫)荧光素/荧光素酶(FLuc)系统不同,其在含分子氧的条件下,还需要ATP和Mg2+的存在才能同时发光,光波长在550-570nm。正由于生物发光信号和底物的差异,RLuc常常与FLuc联合用于多重转录报告基因研究,或用作Fluc系统内萤火虫荧光素酶转染的内参。腔肠素应用甚是广泛,包括:1)活细胞或组织的钙离子检测;2)细胞或组织的超氧化物和过氧亚硝基阴离子(活性氧,ROS)化学发光检测;3)基因报告基因检测;4)动物活体检测;5)ELISA和生物发光共振能量转移(BRET)用于蛋白相互作用研究;6)药物高通量筛选(HTS);

天然腔肠素(Coelenterazine Native,CTZ-Native)是自然界中存在最丰富的一种腔肠素,也是目前应用最普遍的一种标准底物。不仅是脱辅基水母发光蛋白(APO)的底物,也是海肾荧光素酶(Rluc)和分泌型膜锚定荧光素酶(Gluc)等荧光素酶的作用底物。前者用于检测钙离子浓度,后者用作荧光素酶的报告基因检测系统。还可用于生物共振能量转移BRET,细胞或组织内的超氧阴离子和过氧化亚硝基阴离子水平(ROS)的化学发光检测等。

腔肠素f(Coelenterazine f,CTZ-f),是一种天然腔肠素(CTZ-Native)的合成衍生物,是水母发光蛋白的首选底物。CTZ-f的水母发光蛋白复合物比CTZ-Native形成的复合物荧光强度几乎高20倍,最大发射波长为473nm。

产品描述

1)   CAS NO:123437-16-1

2)   化学名:8-benzyl-2-(4-fluorobenzyl)-6-(4-hydroxyphenyl)imidazo[1,2- a]pyrazin-3(7H)-one

3)   同义名:Coelenterazine F; CTZ-F; CLZN-f; f-腔肠素;Coelenterazine-Fluoride;

4)   分子式:C26H20FN3O2

5)   分子量:425.5 g/mol

6)   纯度:>95%

7)   外观:橙色至棕色固体

8)   溶解性:溶于甲醇或乙醇,不要溶于DMSO

9)   化学结构式:

保存与运输方法

保存:-20℃干燥避光保存,且保存于惰性气体内。至少一年有效。

运输:冰袋运输。

注意事项

1)   腔肠素(Coelenterazine, CTZ)及衍生物最好以完全冻干粉的状态保存在惰性气体内,密封后置于-20℃或-70℃长期避光保存。管内即使有微量空气,也会随着时间慢慢氧化腔肠素使其活性丧失,这样不同实验之间的定量结果可能很不可信。

2)   腔肠素(Coelenterazine, CTZ)及衍生物不建议以储存液的形式保存,最好于实验前配制新鲜的溶液。不建议将配好的腔肠素溶液储存在-20℃或-70℃,因其具有一个高能量的二氧杂环丁酮环形结构,即使在低温条件下都会自发降解。

3)   商业化腔肠素的种类繁多,有天然腔肠素,以及各种腔肠素衍生物(比如,腔肠素h,腔肠素400a,腔肠素e,腔肠素f,腔肠素hcp)。它们对钙离子的亲和力,光谱特性,以及应用倾向上会有差异,详见附录1—天然腔肠素及其衍生物的光谱特性,附录2—天然腔肠素及其衍生物的应用差异选择适当的产品。

4)   为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法

一、 腔肠素f的溶解事项

1)   腔肠素f不溶于水,接触到空气,水分或任何氧化剂都不稳定。千万不要溶于DMSO,因会发生未知反应引起腔肠素f的快速降解并生成未知的代谢产物。

2)   腔肠素f溶于甲醇或乙醇,毒性最小的溶剂是无水乙醇,可溶解粉末配制成0.1-1mg/ml溶液,之后加入需要的缓冲液,尽量保持缓冲液pH小于7.0,因大多数腔肠素衍生物在碱性条件会快速降解,有时会立即产生沉淀。

二、 腔肠素f的保存事项

最好在使用前,才用无水乙醇溶解腔肠素f粉末,然后用所选的缓冲液稀释并混匀。此时配好的工作缓冲液需静置20-30min使其稳定(因部分底物会发生自氧化)后才进行体外实验。该工作液能稳定保存几个小时(室温3-4h),仅微弱的信号衰减可能发生。

不建议将腔肠素f的乙醇溶液置于-20℃或-70℃保存,因天然腔肠素及任何衍生物含有一个高能量的二氧杂环丁酮环形结构,即使在低温条件下都会自发降解。

附录1天然腔肠素及其衍生物的光谱特性

附录2天然腔肠素及其衍生物的应用差异

表2 –天然腔肠素及其衍生物的应用差异
产品名称 货号 应用特征
Coelenterazine native MX4606 应用非常广泛的标准底物。腔肠素是天然水母发光蛋白复合物的发光基团,也是海肾荧光素酶(Rluc)的底物。底物的快速再生(fast regeneration)比较重要的实验推荐使用天然腔肠素。

1)生物发光检测钙离子的灵敏度非常高,检测范围从0.1µM到>100µM;2)使用腔肠素监测报告基因表达是其主要应用;3)其他应用包括生物共振能量转移BRET,化学发光检测细胞或组织内的超氧阴离子和过氧化亚硝基阴离子水平(ROS);

Coelenterazine h MX4607 1)腔肠素h形成的水母发光蛋白复合物比天然腔肠素复合物的光强度高10倍以上;2)比天然腔肠素对钙离子敏感度更高;3)也适用报告基因分析。
Coelenterazine 400 a MX4610 也称为DeepBlue C,是一种腔肠素衍生物,用作海肾荧光素酶Rluc的底物,发射峰约400nm。含GFP受体的BRET研究是Rluc的首选底物,因其对GFP受体的发射波干扰非常小。不可用作Gluc底物。
Coelenterazine hcp MX4614 其生物发光强度最高(腔肠素hcp形成水母发光蛋白复合物的荧光强度比天然腔肠素复合物高190倍),对Ca2+反应速度快。
Coelenterazine cp MX4613 Coelenterazine cp产生水母发光蛋白复合物的光强度是天然腔肠素复合物的15倍,且具有更快的Ca2+反应性。
Coelenterazine f MX4612 腔肠素f形成的水母发光蛋白复合物的光强度是天然腔肠素复合物的20倍,最大发射波长约长8nm。具有最好的细胞渗透性。当需要具极高钙离子Ca2+灵敏度的水母发光蛋白复合物,建议用腔肠素f。
Coelenterazine n MX4615 所有的腔肠素衍生物中荧光强度最弱,对Ca2+反应时间明显慢于天然腔肠素。一种非常有用的低灵敏腔肠素。
Coelenterazine e MX4611 体外水母发光蛋白再生中腔肠素e的速度最高,具有双发射峰,分别为405nm和465nm,使其能在pCa 5-7范围内通过双发射峰荧光强度比率的方式测定Ca2+浓度,提高检测准确度。但由于渗透性差,不适合胞内应用。在溶液中稳定性差。
Coelenterazine i MX4616 体外腔肠素i水母发光蛋白复合物的荧光强度仅为天然腔肠素复合物的3%,在所有腔肠素衍生物种对钙离子的反应时间最慢。
Coelenterazine ip MX4618 体外腔肠素ip水母发光蛋白复合物的荧光强度几乎比天然腔肠素复合物高50倍,但对钙离子的反应时间比天然腔肠素慢。
Coelenterazine fcp MX4617 腔肠素fcp形成的水母发光蛋白复合物的光强度是天然腔肠素复合物的135倍。
Methyl Coelenterazine MX4619 非常优越的抗氧化剂,靶向细胞内来源于单态氧和超氧化物阴离子产生的活性氧物质(ROS)。

相关产品

货号 名称 规格
MX4606-1MG              Coelenterazine Native 天然腔肠素 2×500μg          
MX4607-1MG Injectable native Coelenterazine 注射用天然腔肠素        2×500μg
MX4608-1MG Coelenterazine h 腔肠素h 2×500μg
MX4609-1MG Injectable h-Coelenterazine 注射用腔肠素h 2×500μg
MX4610-500UG Coelenterazine 400 a 腔肠素400a 500μg
MX4611-500UG e-Coelenterazine 腔肠素e 500μg
MX4612-500UG Coelenterazine f 腔肠素f 500μg
MX4613-250UG Coelenterazine cp 腔肠素cp 250μg
MX4614-250UG Coelenterazine hcp 腔肠素hcp 250μg

 

Coelenterazine f 腔肠素f Aequorin 水母发光蛋白 CAS NO:123437-16-1

Coelenterazine f 腔肠素f;Coelenterazine 400 a 腔肠素400a; 海肾荧光素酶(Rluc);萤火虫荧光素酶(Fluc);Aequorin 水母发光蛋白;CAS NO:123437-16-1;

产品信息

产品名称 产品编号 规格
Coelenterazine f 腔肠素f      MX4612-500UG    500μg             
Coelenterazine f 腔肠素f MX4612-1MG 2×500μg

产品描述

腔肠素(Coelenterazine)是在水生生物中发现的一种发光基团(luminophore),是许多荧光素酶的作用底物,包括海肾荧光素酶(Renilla reniformis luciferase, Rluc),分泌型膜锚定荧光素酶(Gaussia luciferase, Gluc)和薮枝虫荧光素酶(Obelia luciferase),和发光蛋白包括水母发光蛋白(Aequorin)的构成之一。其作用原理是以腔肠素为底物的荧光素酶,在含分子氧的条件下,氧化腔肠素产生高能量的中间产物,在此过程发射蓝色光,光波长在450~480nm【见图1】。而甲虫(或萤火虫)荧光素/荧光素酶(FLuc)系统不同,其在含分子氧的条件下,还需要ATP和Mg2+的存在才能同时发光,光波长在550-570nm。正由于生物发光信号和底物的差异,RLuc常常与FLuc联合用于多重转录报告基因研究,或用作Fluc系统内萤火虫荧光素酶转染的内参。腔肠素应用甚是广泛,包括:1)活细胞或组织的钙离子检测;2)细胞或组织的超氧化物和过氧亚硝基阴离子(活性氧,ROS)化学发光检测;3)基因报告基因检测;4)动物活体检测;5)ELISA和生物发光共振能量转移(BRET)用于蛋白相互作用研究;6)药物高通量筛选(HTS);

图1. 海肾荧光素酶(Rluc)催腔肠素发光的反应流程

天然腔肠素(Coelenterazine Native,CTZ-Native)是自然界中存在最丰富的一种腔肠素,也是目前应用最普遍的一种标准底物。不仅是脱辅基水母发光蛋白(APO)的底物,也是海肾荧光素酶(Rluc)和分泌型膜锚定荧光素酶(Gluc)等荧光素酶的作用底物。前者用于检测钙离子浓度,后者用作荧光素酶的报告基因检测系统。还可用于生物共振能量转移BRET,细胞或组织内的超氧阴离子和过氧化亚硝基阴离子水平(ROS)的化学发光检测等。

腔肠素f(Coelenterazine f,CTZ-f),是一种天然腔肠素(CTZ-Native)的合成衍生物,是水母发光蛋白的首选底物。CTZ-f的水母发光蛋白复合物比CTZ-Native形成的复合物荧光强度几乎高20倍,最大发射波长为473nm。

产品描述

1)   CAS NO:123437-16-1

2)   化学名:8-benzyl-2-(4-fluorobenzyl)-6-(4-hydroxyphenyl)imidazo[1,2- a]pyrazin-3(7H)-one

3)   同义名:Coelenterazine F; CTZ-F; CLZN-f; f-腔肠素;Coelenterazine-Fluoride;

4)   分子式:C26H20FN3O2

5)   分子量:425.5 g/mol

6)   纯度:>95%

7)   外观:橙色至棕色固体

8)   溶解性:溶于甲醇或乙醇,不要溶于DMSO

9)   化学结构式:

保存与运输方法

保存:-20℃干燥避光保存,且保存于惰性气体内。至少一年有效。

运输:冰袋运输。

注意事项

1)   腔肠素(Coelenterazine, CTZ)及衍生物最好以完全冻干粉的状态保存在惰性气体内,密封后置于-20℃或-70℃长期避光保存。管内即使有微量空气,也会随着时间慢慢氧化腔肠素使其活性丧失,这样不同实验之间的定量结果可能很不可信。

2)   腔肠素(Coelenterazine, CTZ)及衍生物不建议以储存液的形式保存,最好于实验前配制新鲜的溶液。不建议将配好的腔肠素溶液储存在-20℃或-70℃,因其具有一个高能量的二氧杂环丁酮环形结构,即使在低温条件下都会自发降解。

3)   商业化腔肠素的种类繁多,有天然腔肠素,以及各种腔肠素衍生物(比如,腔肠素h,腔肠素400a,腔肠素e,腔肠素f,腔肠素hcp)。它们对钙离子的亲和力,光谱特性,以及应用倾向上会有差异,详见附录1—天然腔肠素及其衍生物的光谱特性,附录2—天然腔肠素及其衍生物的应用差异选择适当的产品。

4)   为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法

一、 腔肠素f的溶解事项

1)   腔肠素f不溶于水,接触到空气,水分或任何氧化剂都不稳定。千万不要溶于DMSO,因会发生未知反应引起腔肠素f的快速降解并生成未知的代谢产物。

2)   腔肠素f溶于甲醇或乙醇,毒性最小的溶剂是无水乙醇,可溶解粉末配制成0.1-1mg/ml溶液,之后加入需要的缓冲液,尽量保持缓冲液pH小于7.0,因大多数腔肠素衍生物在碱性条件会快速降解,有时会立即产生沉淀。

二、 腔肠素f的保存事项

最好在使用前,才用无水乙醇溶解腔肠素f粉末,然后用所选的缓冲液稀释并混匀。此时配好的工作缓冲液需静置20-30min使其稳定(因部分底物会发生自氧化)后才进行体外实验。该工作液能稳定保存几个小时(室温3-4h),仅微弱的信号衰减可能发生。

不建议将腔肠素f的乙醇溶液置于-20℃或-70℃保存,因天然腔肠素及任何衍生物含有一个高能量的二氧杂环丁酮环形结构,即使在低温条件下都会自发降解。

附录1天然腔肠素及其衍生物的光谱特性

附录2天然腔肠素及其衍生物的应用差异

表2 –天然腔肠素及其衍生物的应用差异
产品名称 货号 应用特征
Coelenterazine native MX4606 应用非常广泛的标准底物。腔肠素是天然水母发光蛋白复合物的发光基团,也是海肾荧光素酶(Rluc)的底物。底物的快速再生(fast regeneration)比较重要的实验推荐使用天然腔肠素。

1)生物发光检测钙离子的灵敏度非常高,检测范围从0.1µM到>100µM;2)使用腔肠素监测报告基因表达是其主要应用;3)其他应用包括生物共振能量转移BRET,化学发光检测细胞或组织内的超氧阴离子和过氧化亚硝基阴离子水平(ROS);

Coelenterazine h MX4607 1)腔肠素h形成的水母发光蛋白复合物比天然腔肠素复合物的光强度高10倍以上;2)比天然腔肠素对钙离子敏感度更高;3)也适用报告基因分析。
Coelenterazine 400 a MX4610 也称为DeepBlue C,是一种腔肠素衍生物,用作海肾荧光素酶Rluc的底物,发射峰约400nm。含GFP受体的BRET研究是Rluc的首选底物,因其对GFP受体的发射波干扰非常小。不可用作Gluc底物。
Coelenterazine hcp MX4614 其生物发光强度最高(腔肠素hcp形成水母发光蛋白复合物的荧光强度比天然腔肠素复合物高190倍),对Ca2+反应速度快。
Coelenterazine cp MX4613 Coelenterazine cp产生水母发光蛋白复合物的光强度是天然腔肠素复合物的15倍,且具有更快的Ca2+反应性。
Coelenterazine f MX4612 腔肠素f形成的水母发光蛋白复合物的光强度是天然腔肠素复合物的20倍,最大发射波长约长8nm。具有最好的细胞渗透性。当需要具极高钙离子Ca2+灵敏度的水母发光蛋白复合物,建议用腔肠素f。
Coelenterazine n MX4615 所有的腔肠素衍生物中荧光强度最弱,对Ca2+反应时间明显慢于天然腔肠素。一种非常有用的低灵敏腔肠素。
Coelenterazine e MX4611 体外水母发光蛋白再生中腔肠素e的速度最高,具有双发射峰,分别为405nm和465nm,使其能在pCa 5-7范围内通过双发射峰荧光强度比率的方式测定Ca2+浓度,提高检测准确度。但由于渗透性差,不适合胞内应用。在溶液中稳定性差。
Coelenterazine i MX4616 体外腔肠素i水母发光蛋白复合物的荧光强度仅为天然腔肠素复合物的3%,在所有腔肠素衍生物种对钙离子的反应时间最慢。
Coelenterazine ip MX4618 体外腔肠素ip水母发光蛋白复合物的荧光强度几乎比天然腔肠素复合物高50倍,但对钙离子的反应时间比天然腔肠素慢。
Coelenterazine fcp MX4617 腔肠素fcp形成的水母发光蛋白复合物的光强度是天然腔肠素复合物的135倍。
Methyl Coelenterazine MX4619 非常优越的抗氧化剂,靶向细胞内来源于单态氧和超氧化物阴离子产生的活性氧物质(ROS)。

相关产品

货号 名称 规格
MX4606-1MG              Coelenterazine Native 天然腔肠素 2×500μg          
MX4607-1MG Injectable native Coelenterazine 注射用天然腔肠素        2×500μg
MX4608-1MG Coelenterazine h 腔肠素h 2×500μg
MX4609-1MG Injectable h-Coelenterazine 注射用腔肠素h 2×500μg
MX4610-500UG Coelenterazine 400 a 腔肠素400a 500μg
MX4611-500UG e-Coelenterazine 腔肠素e 500μg
MX4612-500UG Coelenterazine f 腔肠素f 500μg
MX4613-250UG Coelenterazine cp 腔肠素cp 250μg
MX4614-250UG Coelenterazine hcp 腔肠素hcp 250μg

 

 

Coelenterazine e 腔肠素e Aequorin 水母发光蛋白 CAS NO:114496-02-5

Coelenterazine e 腔肠素e;Coelenterazine 400 a 腔肠素400a; 海肾荧光素酶(Rluc);萤火虫荧光素酶(Fluc);Aequorin 水母发光蛋白;CAS NO:114496-02-5;

产品信息

产品名称 产品编号 规格         
Coelenterazine e 腔肠素e           MX4611-500UG             500μg  
Coelenterazine e 腔肠素e MX4611-1MG 2×500μg

腔肠素(Coelenterazine)是在水生生物中发现的一种发光基团(luminophore),是许多荧光素酶的作用底物,包括海肾荧光素酶(Renilla reniformis luciferase, Rluc),分泌型膜锚定荧光素酶(Gaussia luciferase, Gluc)和薮枝虫荧光素酶(Obelia luciferase),和发光蛋白包括水母发光蛋白(Aequorin)的构成之一。其作用原理是以腔肠素为底物的荧光素酶,在含分子氧的条件下,氧化腔肠素产生高能量的中间产物,在此过程发射蓝色光,光波长在450~480nm【见图1】。而甲虫(或萤火虫)荧光素/荧光素酶(FLuc)系统不同,其在含分子氧的条件下,还需要ATP和Mg2+的存在才能同时发光,光波长在550-570nm。正由于生物发光信号和底物的差异,RLuc常常与FLuc联合用于多重转录报告基因研究,或用作Fluc系统内萤火虫荧光素酶转染的内参。腔肠素应用甚是广泛,包括:1)活细胞或组织的钙离子检测;2)细胞或组织的超氧化物和过氧亚硝基阴离子(活性氧,ROS)化学发光检测;3)基因报告基因检测;4)动物活体检测;5)ELISA和生物发光共振能量转移(BRET)用于蛋白相互作用研究;6)药物高通量筛选(HTS);

天然腔肠素(Coelenterazine Native,CTZ-Native)是自然界中存在最丰富的一种腔肠素,也是目前应用最普遍的一种标准底物。不仅是脱辅基水母发光蛋白(APO)的底物,也是海肾荧光素酶(Rluc)和分泌型膜锚定荧光素酶(Gluc)等荧光素酶的作用底物。前者用于检测钙离子浓度,后者用作荧光素酶的报告基因检测系统。还可用于生物共振能量转移BRET,细胞或组织内的超氧阴离子和过氧化亚硝基阴离子水平(ROS)的化学发光检测等。

腔肠素e(Coelenterazine e,CTZ-e),是一种天然腔肠素衍生物,带有一个额外的乙基基团,从而形成一个额外的环形结构,最早由Shimomura进行描述。CTZ-e是一款优秀的海肾荧光素酶(Rluc)底物。CTZ-e产生的荧光接近于CTZ-Native的40%以上,虽然前者的初始荧光强度比后者高7倍多。CTZ-e/海肾荧光素酶的发射光谱有两个峰值,分别为418nm和475nm。

CTZ-e也是一款良好的脱酰基水母发光蛋白(APO)底物,与CTZ-Native相比,CTZ-e形成的水母蛋白复合物具有更快的荧光上升时间,并且呈现两个发射吸收峰(分别在405nm和465nm),吸收峰高度的比值取决于pCa 5-7范围内的钙离子浓度。这一双吸收峰特征使得CTZ-e/APO通过吸收峰强度的比例来测定钙离子成为可能。

产品描述

1)   CAS NO:114496-02-5

2)   化学名:12-Benzyl-8-hydroxy-2-(4-hydroxybenzyl)-5,6-dihydrobenzo[f]imidazo[1,2-a]quinoxalin-3(11H)- one; Benz[f]imidazo[1,2-a]quinoxalin-3(6H)-one,5,11-dihydro-8-hydroxy-2-[(4-hydroxyphenyl)methyl]-12 -(phenylmethyl);

3)   同义名:e-Coelenterazine; e-CTZ; Coelenterazine-E; CTZ-E; CLZN-e; e-腔肠素;

4)   分子式:C28H23N3O3

5)   分子量:449.5 g/mol

6)   纯度:>95%

7)   外观:黄色至橙色固体

8)   溶解性:溶于甲醇或乙醇,不要溶于DMSO

9)   化学结构式:

保存与运输方法

保存:-20℃干燥避光保存,且保存于惰性气体内。至少一年有效。

运输:冰袋运输。

注意事项

1)   腔肠素(Coelenterazine, CTZ)及衍生物最好以完全冻干粉的状态保存在惰性气体内,密封后置于-20℃或-70℃长期避光保存。管内即使有微量空气,也会随着时间慢慢氧化腔肠素使其活性丧失,这样不同实验之间的定量结果可能很不可信。

2)   腔肠素(Coelenterazine, CTZ)及衍生物不建议以储存液的形式保存,最好于实验前配制新鲜的溶液。不建议将配好的腔肠素溶液储存在-20℃或-70℃,因其具有一个高能量的二氧杂环丁酮环形结构,即使在低温条件下都会自发降解。

3)   商业化腔肠素的种类繁多,有天然腔肠素,以及各种腔肠素衍生物(比如,腔肠素h,腔肠素400a,腔肠素e,腔肠素f,腔肠素hcp)。它们对钙离子的亲和力,光谱特性,以及应用倾向上会有差异,详见附录1—天然腔肠素及其衍生物的光谱特性,附录2—天然腔肠素及其衍生物的应用差异选择适当的产品。

4)   为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法

1.       实验前将CTZ-e从冰箱取出回至室温,之后低速离心使得管内固体(或粉末)落到管底。

2.       用酸化、脱气体的无水乙醇溶解固体(或粉末),混匀,使其浓度为1mg/ml。

3.       最好于实验前才对乙醇储存液进行稀释,再用于所有的鲁米诺分析或实验。根据具体的工作体系选择合适的水溶性缓冲液对乙醇储存液进行稀释。(比如,100μM 用于荧光计分析)

4.       将未用完的CTZ-e溶液保存在-80℃,尽快用完。不可将水溶性工作液进行保存(会被氧化从而降解)。

表1 腔肠素e与天然腔肠素的差异

Renilla luciferase

Oplophorus luciferase

Aequorin

Initial Intensity (%)

Total light (%)

Emission peak (nm)

Initial Intensity (%)

Total light (%)

Emission peak (nm)

Initial Intensity (%)

Total light (%)

Emission peak (nm)

CTZ 100 100 475 100 100 454 100 100 465
CTZ-e  750 137 418/475 82 54 459 0.8 50 405/465
Source: Inouye S, Shimomura O. Biochem Biophys Res Commun 233, 349-353 (1997)

附录1 天然腔肠素及其衍生物的光谱特性

附录2 天然腔肠素及其衍生物的应用差异

表2 –天然腔肠素及其衍生物的应用差异

产品名称 货号     应用特征
Coelenterazine native MX4606 应用非常广泛的标准底物。腔肠素是天然水母发光蛋白复合物的发光基团,也是海肾荧光素酶(Rluc)的底物。底物的快速再生(fast regeneration)比较重要的实验推荐使用天然腔肠素。

1)生物发光检测钙离子的灵敏度非常高,检测范围从0.1µM到>100µM;2)使用腔肠素监测报告基因表达是其主要应用;3)其他应用包括生物共振能量转移BRET,化学发光检测细胞或组织内的超氧阴离子和过氧化亚硝基阴离子水平(ROS);

Coelenterazine h MX4607 1)腔肠素h形成的水母发光蛋白复合物比天然腔肠素复合物的光强度高10倍以上;2)比天然腔肠素对钙离子敏感度更高;3)也适用报告基因分析。
Coelenterazine 400 a MX4610 也称为DeepBlue C,是一种腔肠素衍生物,用作海肾荧光素酶Rluc的底物,发射峰约400nm。含GFP受体的BRET研究是Rluc的首选底物,因其对GFP受体的发射波干扰非常小。不可用作Gluc底物。
Coelenterazine hcp MX4614 其生物发光强度最高(腔肠素hcp形成水母发光蛋白复合物的荧光强度比天然腔肠素复合物高190倍),对Ca2+反应速度快。
Coelenterazine cp MX4613 Coelenterazine cp产生水母发光蛋白复合物的光强度是天然腔肠素复合物的15倍,且具有更快的Ca2+反应性。
Coelenterazine f MX4612 腔肠素f形成的水母发光蛋白复合物的光强度是天然腔肠素复合物的20倍,最大发射波长约长8nm。具有最好的细胞渗透性。当需要具极高钙离子Ca2+灵敏度的水母发光蛋白复合物,建议用腔肠素f。
Coelenterazine n MX4615 所有的腔肠素衍生物中荧光强度最弱,对Ca2+反应时间明显慢于天然腔肠素。一种非常有用的低灵敏腔肠素。
Coelenterazine e MX4611 体外水母发光蛋白再生中腔肠素e的速度最高,具有双发射峰,分别为405nm和465nm,使其能在pCa 5-7范围内通过双发射峰荧光强度比率的方式测定Ca2+浓度,提高检测准确度。但由于渗透性差,不适合胞内应用。在溶液中稳定性差。
Coelenterazine i MX4616 体外腔肠素i水母发光蛋白复合物的荧光强度仅为天然腔肠素复合物的3%,在所有腔肠素衍生物种对钙离子的反应时间最慢。
Coelenterazine ip MX4618 体外腔肠素ip水母发光蛋白复合物的荧光强度几乎比天然腔肠素复合物高50倍,但对钙离子的反应时间比天然腔肠素慢。
Coelenterazine fcp MX4617 腔肠素fcp形成的水母发光蛋白复合物的光强度是天然腔肠素复合物的135倍。
Methyl Coelenterazine MX4619 非常优越的抗氧化剂,靶向细胞内来源于单态氧和超氧化物阴离子产生的活性氧物质(ROS)。

相关产品

货号 名称 规格
MX4606-1MG              Coelenterazine Native 天然腔肠素 2×500μg          
MX4607-1MG Injectable native Coelenterazine 注射用天然腔肠素        2×500μg
MX4608-1MG Coelenterazine h 腔肠素h 2×500μg
MX4609-1MG Injectable h-Coelenterazine 注射用腔肠素h 2×500μg
MX4610-500UG Coelenterazine 400 a 腔肠素400a 500μg
MX4611-500UG e-Coelenterazine 腔肠素e 500μg
MX4612-500UG Coelenterazine f 腔肠素f 500μg
MX4613-250UG Coelenterazine cp 腔肠素cp 250μg
MX4614-250UG Coelenterazine hcp 腔肠素hcp 250μg

 

Coelenterazine e 腔肠素e Aequorin 水母发光蛋白 CAS NO:114496-02-5

Coelenterazine e 腔肠素e;Coelenterazine 400 a 腔肠素400a; 海肾荧光素酶(Rluc);萤火虫荧光素酶(Fluc);Aequorin 水母发光蛋白;CAS NO:114496-02-5;

产品信息

产品名称 产品编号 规格          
Coelenterazine e 腔肠素e           MX4611-500UG             500μg 
Coelenterazine e 腔肠素e MX4611-1MG 2×500μg

产品描述

腔肠素(Coelenterazine)是在水生生物中发现的一种发光基团(luminophore),是许多荧光素酶的作用底物,包括海肾荧光素酶(Renilla reniformis luciferase, Rluc),分泌型膜锚定荧光素酶(Gaussia luciferase, Gluc)和薮枝虫荧光素酶(Obelia luciferase),和发光蛋白包括水母发光蛋白(Aequorin)的构成之一。其作用原理是以腔肠素为底物的荧光素酶,在含分子氧的条件下,氧化腔肠素产生高能量的中间产物,在此过程发射蓝色光,光波长在450~480nm【见图1】。而甲虫(或萤火虫)荧光素/荧光素酶(FLuc)系统不同,其在含分子氧的条件下,还需要ATP和Mg2+的存在才能同时发光,光波长在550-570nm。正由于生物发光信号和底物的差异,RLuc常常与FLuc联合用于多重转录报告基因研究,或用作Fluc系统内萤火虫荧光素酶转染的内参。腔肠素应用甚是广泛,包括:1)活细胞或组织的钙离子检测;2)细胞或组织的超氧化物和过氧亚硝基阴离子(活性氧,ROS)化学发光检测;3)基因报告基因检测;4)动物活体检测;5)ELISA和生物发光共振能量转移(BRET)用于蛋白相互作用研究;6)药物高通量筛选(HTS);

天然腔肠素(Coelenterazine Native,CTZ-Native)是自然界中存在最丰富的一种腔肠素,也是目前应用最普遍的一种标准底物。不仅是脱辅基水母发光蛋白(APO)的底物,也是海肾荧光素酶(Rluc)和分泌型膜锚定荧光素酶(Gluc)等荧光素酶的作用底物。前者用于检测钙离子浓度,后者用作荧光素酶的报告基因检测系统。还可用于生物共振能量转移BRET,细胞或组织内的超氧阴离子和过氧化亚硝基阴离子水平(ROS)的化学发光检测等。

腔肠素e(Coelenterazine e,CTZ-e),是一种天然腔肠素衍生物,带有一个额外的乙基基团,从而形成一个额外的环形结构,最早由Shimomura进行描述。CTZ-e是一款优秀的海肾荧光素酶(Rluc)底物。CTZ-e产生的荧光接近于CTZ-Native的40%以上,虽然前者的初始荧光强度比后者高7倍多。CTZ-e/海肾荧光素酶的发射光谱有两个峰值,分别为418nm和475nm。

CTZ-e也是一款良好的脱酰基水母发光蛋白(APO)底物,与CTZ-Native相比,CTZ-e形成的水母蛋白复合物具有更快的荧光上升时间,并且呈现两个发射吸收峰(分别在405nm和465nm),吸收峰高度的比值取决于pCa 5-7范围内的钙离子浓度。这一双吸收峰特征使得CTZ-e/APO通过吸收峰强度的比例来测定钙离子成为可能。

产品描述

1)   CAS NO:114496-02-5

2)   化学名:12-Benzyl-8-hydroxy-2-(4-hydroxybenzyl)-5,6-dihydrobenzo[f]imidazo[1,2-a]quinoxalin-3(11H)- one; Benz[f]imidazo[1,2-a]quinoxalin-3(6H)-one,5,11-dihydro-8-hydroxy-2-[(4-hydroxyphenyl)methyl]-12 -(phenylmethyl);

3)   同义名:e-Coelenterazine; e-CTZ; Coelenterazine-E; CTZ-E; CLZN-e; e-腔肠素;

4)   分子式:C28H23N3O3

5)   分子量:449.5 g/mol

6)   纯度:>95%

7)   外观:黄色至橙色固体

8)   溶解性:溶于甲醇或乙醇,不要溶于DMSO

9)   化学结构式:

保存与运输方法

保存:-20℃干燥避光保存,且保存于惰性气体内。至少一年有效。

运输:冰袋运输。

注意事项

1)   腔肠素(Coelenterazine, CTZ)及衍生物最好以完全冻干粉的状态保存在惰性气体内,密封后置于-20℃或-70℃长期避光保存。管内即使有微量空气,也会随着时间慢慢氧化腔肠素使其活性丧失,这样不同实验之间的定量结果可能很不可信。

2)   腔肠素(Coelenterazine, CTZ)及衍生物不建议以储存液的形式保存,最好于实验前配制新鲜的溶液。不建议将配好的腔肠素溶液储存在-20℃或-70℃,因其具有一个高能量的二氧杂环丁酮环形结构,即使在低温条件下都会自发降解。

3)   商业化腔肠素的种类繁多,有天然腔肠素,以及各种腔肠素衍生物(比如,腔肠素h,腔肠素400a,腔肠素e,腔肠素f,腔肠素hcp)。它们对钙离子的亲和力,光谱特性,以及应用倾向上会有差异,详见附录1—天然腔肠素及其衍生物的光谱特性,附录2—天然腔肠素及其衍生物的应用差异选择适当的产品。

4)   为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法

1.       实验前将CTZ-e从冰箱取出回至室温,之后低速离心使得管内固体(或粉末)落到管底。

2.       用酸化、脱气体的无水乙醇溶解固体(或粉末),混匀,使其浓度为1mg/ml。

3.       最好于实验前才对乙醇储存液进行稀释,再用于所有的鲁米诺分析或实验。根据具体的工作体系选择合适的水溶性缓冲液对乙醇储存液进行稀释。(比如,100μM 用于荧光计分析)

4.       将未用完的CTZ-e溶液保存在-80℃,尽快用完。不可将水溶性工作液进行保存(会被氧化从而降解)。

表1 腔肠素e与天然腔肠素的差异

Renilla luciferase

Oplophorus luciferase

Aequorin

Initial Intensity (%)

Total light (%)

Emission peak (nm)

Initial Intensity (%)

Total light (%)

Emission peak (nm)

Initial Intensity (%)

Total light (%)

Emission peak (nm)

CTZ 100 100 475 100 100 454 100 100 465
CTZ-e  750 137 418/475 82 54 459 0.8 50 405/465
Source: Inouye S, Shimomura O. Biochem Biophys Res Commun 233, 349-353 (1997)

附录1 天然腔肠素及其衍生物的光谱特性

附录2 天然腔肠素及其衍生物的应用差异

表2 –天然腔肠素及其衍生物的应用差异

产品名称 货号     应用特征
Coelenterazine native MX4606 应用非常广泛的标准底物。腔肠素是天然水母发光蛋白复合物的发光基团,也是海肾荧光素酶(Rluc)的底物。底物的快速再生(fast regeneration)比较重要的实验推荐使用天然腔肠素。

1)生物发光检测钙离子的灵敏度非常高,检测范围从0.1µM到>100µM;2)使用腔肠素监测报告基因表达是其主要应用;3)其他应用包括生物共振能量转移BRET,化学发光检测细胞或组织内的超氧阴离子和过氧化亚硝基阴离子水平(ROS);

Coelenterazine h MX4607 1)腔肠素h形成的水母发光蛋白复合物比天然腔肠素复合物的光强度高10倍以上;2)比天然腔肠素对钙离子敏感度更高;3)也适用报告基因分析。
Coelenterazine 400 a MX4610 也称为DeepBlue C,是一种腔肠素衍生物,用作海肾荧光素酶Rluc的底物,发射峰约400nm。含GFP受体的BRET研究是Rluc的首选底物,因其对GFP受体的发射波干扰非常小。不可用作Gluc底物。
Coelenterazine hcp MX4614 其生物发光强度最高(腔肠素hcp形成水母发光蛋白复合物的荧光强度比天然腔肠素复合物高190倍),对Ca2+反应速度快。
Coelenterazine cp MX4613 Coelenterazine cp产生水母发光蛋白复合物的光强度是天然腔肠素复合物的15倍,且具有更快的Ca2+反应性。
Coelenterazine f MX4612 腔肠素f形成的水母发光蛋白复合物的光强度是天然腔肠素复合物的20倍,最大发射波长约长8nm。具有最好的细胞渗透性。当需要具极高钙离子Ca2+灵敏度的水母发光蛋白复合物,建议用腔肠素f。
Coelenterazine n MX4615 所有的腔肠素衍生物中荧光强度最弱,对Ca2+反应时间明显慢于天然腔肠素。一种非常有用的低灵敏腔肠素。
Coelenterazine e MX4611 体外水母发光蛋白再生中腔肠素e的速度最高,具有双发射峰,分别为405nm和465nm,使其能在pCa 5-7范围内通过双发射峰荧光强度比率的方式测定Ca2+浓度,提高检测准确度。但由于渗透性差,不适合胞内应用。在溶液中稳定性差。
Coelenterazine i MX4616 体外腔肠素i水母发光蛋白复合物的荧光强度仅为天然腔肠素复合物的3%,在所有腔肠素衍生物种对钙离子的反应时间最慢。
Coelenterazine ip MX4618 体外腔肠素ip水母发光蛋白复合物的荧光强度几乎比天然腔肠素复合物高50倍,但对钙离子的反应时间比天然腔肠素慢。
Coelenterazine fcp MX4617 腔肠素fcp形成的水母发光蛋白复合物的光强度是天然腔肠素复合物的135倍。
Methyl Coelenterazine MX4619 非常优越的抗氧化剂,靶向细胞内来源于单态氧和超氧化物阴离子产生的活性氧物质(ROS)。

相关产品

货号 名称 规格
MX4606-1MG              Coelenterazine Native 天然腔肠素 2×500μg          
MX4607-1MG Injectable native Coelenterazine 注射用天然腔肠素        2×500μg
MX4608-1MG Coelenterazine h 腔肠素h 2×500μg
MX4609-1MG Injectable h-Coelenterazine 注射用腔肠素h 2×500μg
MX4610-500UG Coelenterazine 400 a 腔肠素400a 500μg
MX4611-500UG e-Coelenterazine 腔肠素e 500μg
MX4612-500UG Coelenterazine f 腔肠素f 500μg
MX4613-250UG Coelenterazine cp 腔肠素cp 250μg
MX4614-250UG Coelenterazine hcp 腔肠素hcp 250μg

 

Coelenterazine h 腔肠素h CTZ h 天然腔肠素h 海肾荧光素酶(Rluc)

Coelenterazine (CTZ) 腔肠素;CTZ h 天然腔肠素h;海肾荧光素酶(Rluc);分泌型膜锚定荧光素酶(Gluc);萤火虫荧光素酶(Fluc);In vivo bioluminescence imaging 活体动物体内成像技术;CAS NO:50909-86-9;

产品信息

产品名称

产品编号                   规格                             

Coelenterazine h 腔肠素h

MX4608-500UG 500μg

Coelenterazine h 腔肠素h

MX4608-1MG-A 2×500μg

Coelenterazine h 腔肠素h MX4608-5MG 10×500μg

产品描述

腔肠素(Coelenterazine)是在水生生物中发现的一种发光基团(luminophore),是许多荧光素酶的作用底物,包括海肾荧光素酶(Renilla reniformis luciferase, Rluc),分泌型膜锚定荧光素酶(Gaussia luciferase, Gluc)和薮枝虫荧光素酶(Obelia luciferase),和发光蛋白包括水母发光蛋白(Aequorin)的构成之一。其作用原理是以腔肠素为底物的荧光素酶,在含分子氧的条件下,氧化腔肠素产生高能量的中间产物,在此过程中发射蓝色光,光波长在450~480nm【见图1】。而甲虫(或萤火虫)荧光素/荧光素酶(FLuc)系统不同,其在含分子氧的条件下,还需要ATP和Mg2+的存在才能同时发光,光波长在550-570nm。正由于生物发光信号和底物的差异,RLuc常常与FLuc联合用于多重转录报告基因研究,或用作Fluc系统内萤火虫荧光素酶转染的内参。腔肠素应用甚是广泛,包括:1)活细胞或组织的钙离子检测;2)细胞或组织的超氧化物和过氧亚硝基阴离子(活性氧,ROS)化学发光检测;3)基因报告基因检测;4)动物活体检测;5)ELISA和生物发光共振能量转移(BRET)用于蛋白相互作用研究;6)药物高通量筛选(HTS);

腔肠素h(Coelenterazine h,CTZ-h)是天然腔肠素(Coelenterazine native,CTZ-native)的脱羟基衍生物。CTZ-h形成的水母发光蛋白复合物比CTZ-native形成的水母发光蛋白复合物的荧光强度高10倍以上(最大发射波长~466nm,半衰期为0.6-1.2sec)。CTZ-h形成的水母发光蛋白复合物比天然发光复合物对钙离子灵敏度更高,是一种检测钙离子浓度微小变化的实用探针。另外,CTZ-h是海肾荧光素酶(Renilla luciferase,Rluc)的底物,适用于体内外报告基因分析。

产品特性

1)   CAS NO:50909-86-9

2)   化学名:2,8-dibenzyl-6-(4-hydroxyphenyl)imidazo[1,2-a]pyrazin-3(7H)-one; Imidazo[1,2-a]pyrazin-3(7H)-one, 6-(4-hydroxyphenol)-2,8-bis(phenylmethyl);

3)   同义名:h-Coelenterazine; h-CTZ; 2-Deoxycoelenterazine 2-脱氧腔肠素; 2-(4-Dehydroxy) coelenterazine;

Luciferin (Renilla) 海肾荧光素;

4)   分子式:C26H21N3O2

5)   分子量:407.5 g/mol

6)   纯度:>98%

7)   外观:黄色固体

8)   溶解性:溶于甲醇或乙醇,不要溶于DMSO

9)   化学结构式:

保存与运输方法

保存:-20℃干燥避光保存,且保存于惰性气体内。至少一年有效。

运输:冰袋运输。

注意事项

1)   腔肠素h(Coelenterazine h, CTZ-h)最好以完全冻干粉的状态保存在惰性气体内,密封后置于-20℃或-70℃长期避光保存。管内即使有微量空气,也会随着时间慢慢氧化腔肠素使其活性丧失。由此,导致不同组间的定量结果可能显得不可靠,数据可比性不高。

2)   腔肠素h(Coelenterazine h, CTZ-h)不建议以储存液的形式保存,最好于实验前配制新鲜的溶液。不建议将配好的腔肠素h溶液储存在-20℃或-70℃,因其具有一个高能量的二氧杂环丁酮环形结构,即使在低温条件下都会自发降解。若是必须配成液体储存液,请按照操作步骤一、腔肠素工作液制备执行。

3)   体内动物实验,推荐使用我司(金畔生物)特别开发和优化的注射用腔肠素h(Injectable h-Coelenterazine)(#MX4609-1MG)或注射用天然腔肠素(Injectable native Coelenterazine)(#MX4607-1MG)。

4)   发光蛋白与荧光素酶是完全不同的,比如腔肠素h(CTZ-h)适合用作海肾荧光素酶(Rluc)的底物,但不适合用作分泌型膜锚定荧光素酶(Gluc)的底物。天然腔肠素(CTZ-native)是唯一适合分泌型膜锚定荧光素酶的一种报告基因底物。

5)   商业化腔肠素的种类繁多,有天然腔肠素,以及各种腔肠素衍生物(比如,腔肠素h,腔肠素400a,腔肠素e,腔肠素f,腔肠素hcp)。它们对钙离子的亲和力,光谱特性,以及应用倾向上会有差异,详见附录1—天然腔肠素及其衍生物的光谱特性,附录2—天然腔肠素及其衍生物的应用差异选择适当的产品。

6)   为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

操作步骤

一、 腔肠素工作液制备

【有关腔肠素溶解的注意事项】:

1)   腔肠素溶于甲醇或乙醇,不可溶于DMSO。腔肠素的水溶性相对比较低,一般情况需先将腔肠素溶于酸化的醇类溶剂配成相对高浓度的母液,然后再用水溶性缓冲液稀释到需要的工作浓度,现配现用。

2)   腔肠素在溶液中的稳定性比较低,最好于正式实验前才配制溶液(包括高浓度母液)。但若实际要求,必须保存母液,目前来说最稳定的溶剂是丙二醇,往内加入少量L-抗坏血酸,β-巯基乙醇,DTT,DTE,或少量HCl能维持其还原态。不过,还原剂可能会减低氧化腔肠素(氧化为Coelenteramide)的动力学速率。也有可能破坏荧光素酶活性。而冻存在醇类溶剂中可能引起腔肠素沉淀,实际取决于溶液浓度。当然,可通过加热50-60℃,使得沉淀重新溶解。必须确保无可见沉淀,或在实验前(特别是活体动物实验)离心去沉淀。

1.1   腔肠素母液制备

将低温保存的腔肠素粉末置于室温回温至少20min,低速离心后。往500µg腔肠素h内加入102µl 酸化的醇溶液(100%甲醇或100%乙醇中含有20µl/ml 3N或6N HCl),配制成12mM(~5mg/ml)腔肠素母液。也可根据下游应用配制成适宜浓度的腔肠素母液(1~5mg/ml)。≤-20℃(最好-80℃)分装避光保存,可能会有少量活性的丧失,约保存1~3周。若存放在惰性气体内可相对延长保存周期。

1.2   腔肠素工作液制备

直接用去气蒸馏水(degased distilled water),PBS或者其他类型生理缓冲液(pH 6.6-7.2)稀释,选择的稀释缓冲液需考虑到与酶系统配合。工作液需现配现用。比如,可直接用不含Ca2+/Mg2+的PBS将12 mM的储存液稀释到2mM(~1 mg/ml)的工作液,+4°C避光短暂存放。最佳反应液浓度请根据下游应用来调整。

相关产品

货号 名称 规格
MX4606-1MG          Coelenterazine Native天 然腔肠素 2×500μg       
MX4607-1MG Injectable native Coelenterazine 注射用天然腔肠素    2×500μg
MX4608-1MG Coelenterazine h 腔肠素h 2×500μg
MX4609-1MG Injectable h-Coelenterazine 注射用腔肠素h 2×500μg
MX4610-500UG Coelenterazine 400 a 腔肠素400a 500μg
MX4611-500UG e-Coelenterazine 腔肠素e 500μg
MX4612-500UG Coelenterazine f 腔肠素f 500μg
MX4613-250UG Coelenterazine cp 腔肠素cp 250μg
MX4614-250UG Coelenterazine hcp 腔肠素hcp 250μg

 

Coelenterazine h 腔肠素h 萤火虫荧光素酶(Fluc) 分泌型膜锚定荧光素酶(Gluc)

Coelenterazine (CTZ) 腔肠素;CTZ h 天然腔肠素h;海肾荧光素酶(Rluc);分泌型膜锚定荧光素酶(Gluc);萤火虫荧光素酶(Fluc);In vivo bioluminescence imaging 活体动物体内成像技术;CAS NO:50909-86-9;

产品信息

产品名称

产品编号                   规格                             

Coelenterazine h 腔肠素h

MX4608-500UG 500μg

Coelenterazine h 腔肠素h

MX4608-1MG-A 2×500μg

Coelenterazine h 腔肠素h MX4608-5MG 10×500μg

产品描述

腔肠素(Coelenterazine)是在水生生物中发现的一种发光基团(luminophore),是许多荧光素酶的作用底物,包括海肾荧光素酶(Renilla reniformis luciferase, Rluc),分泌型膜锚定荧光素酶(Gaussia luciferase, Gluc)和薮枝虫荧光素酶(Obelia luciferase),和发光蛋白包括水母发光蛋白(Aequorin)的构成之一。其作用原理是以腔肠素为底物的荧光素酶,在含分子氧的条件下,氧化腔肠素产生高能量的中间产物,在此过程中发射蓝色光,光波长在450~480nm【见图1】。而甲虫(或萤火虫)荧光素/荧光素酶(FLuc)系统不同,其在含分子氧的条件下,还需要ATP和Mg2+的存在才能同时发光,光波长在550-570nm。正由于生物发光信号和底物的差异,RLuc常常与FLuc联合用于多重转录报告基因研究,或用作Fluc系统内萤火虫荧光素酶转染的内参。腔肠素应用甚是广泛,包括:1)活细胞或组织的钙离子检测;2)细胞或组织的超氧化物和过氧亚硝基阴离子(活性氧,ROS)化学发光检测;3)基因报告基因检测;4)动物活体检测;5)ELISA和生物发光共振能量转移(BRET)用于蛋白相互作用研究;6)药物高通量筛选(HTS);

腔肠素h(Coelenterazine h,CTZ-h)是天然腔肠素(Coelenterazine native,CTZ-native)的脱羟基衍生物。CTZ-h形成的水母发光蛋白复合物比CTZ-native形成的水母发光蛋白复合物的荧光强度高10倍以上(最大发射波长~466nm,半衰期为0.6-1.2sec)。CTZ-h形成的水母发光蛋白复合物比天然发光复合物对钙离子灵敏度更高,是一种检测钙离子浓度微小变化的实用探针。另外,CTZ-h是海肾荧光素酶(Renilla luciferase,Rluc)的底物,适用于体内外报告基因分析。

产品特性

1)   CAS NO:50909-86-9

2)   化学名:2,8-dibenzyl-6-(4-hydroxyphenyl)imidazo[1,2-a]pyrazin-3(7H)-one; Imidazo[1,2-a]pyrazin-3(7H)-one, 6-(4-hydroxyphenol)-2,8-bis(phenylmethyl);

3)   同义名:h-Coelenterazine; h-CTZ; 2-Deoxycoelenterazine 2-脱氧腔肠素; 2-(4-Dehydroxy) coelenterazine;

Luciferin (Renilla) 海肾荧光素;

4)   分子式:C26H21N3O2

5)   分子量:407.5 g/mol

6)   纯度:>98%

7)   外观:黄色固体

8)   溶解性:溶于甲醇或乙醇,不要溶于DMSO

9)   化学结构式:

保存与运输方法

保存:-20℃干燥避光保存,且保存于惰性气体内。至少一年有效。

运输:冰袋运输。

注意事项

1)   腔肠素h(Coelenterazine h, CTZ-h)最好以完全冻干粉的状态保存在惰性气体内,密封后置于-20℃或-70℃长期避光保存。管内即使有微量空气,也会随着时间慢慢氧化腔肠素使其活性丧失。由此,导致不同组间的定量结果可能显得不可靠,数据可比性不高。

2)   腔肠素h(Coelenterazine h, CTZ-h)不建议以储存液的形式保存,最好于实验前配制新鲜的溶液。不建议将配好的腔肠素h溶液储存在-20℃或-70℃,因其具有一个高能量的二氧杂环丁酮环形结构,即使在低温条件下都会自发降解。若是必须配成液体储存液,请按照操作步骤一、腔肠素工作液制备执行。

3)   体内动物实验,推荐使用我司(金畔生物)特别开发和优化的注射用腔肠素h(Injectable h-Coelenterazine)(#MX4609-1MG)或注射用天然腔肠素(Injectable native Coelenterazine)(#MX4607-1MG)。

4)   发光蛋白与荧光素酶是完全不同的,比如腔肠素h(CTZ-h)适合用作海肾荧光素酶(Rluc)的底物,但不适合用作分泌型膜锚定荧光素酶(Gluc)的底物。天然腔肠素(CTZ-native)是唯一适合分泌型膜锚定荧光素酶的一种报告基因底物。

5)   商业化腔肠素的种类繁多,有天然腔肠素,以及各种腔肠素衍生物(比如,腔肠素h,腔肠素400a,腔肠素e,腔肠素f,腔肠素hcp)。它们对钙离子的亲和力,光谱特性,以及应用倾向上会有差异,详见附录1—天然腔肠素及其衍生物的光谱特性,附录2—天然腔肠素及其衍生物的应用差异选择适当的产品。

6)   为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

操作步骤

一、 腔肠素工作液制备

【有关腔肠素溶解的注意事项】:

1)   腔肠素溶于甲醇或乙醇,不可溶于DMSO。腔肠素的水溶性相对比较低,一般情况需先将腔肠素溶于酸化的醇类溶剂配成相对高浓度的母液,然后再用水溶性缓冲液稀释到需要的工作浓度,现配现用。

2)   腔肠素在溶液中的稳定性比较低,最好于正式实验前才配制溶液(包括高浓度母液)。但若实际要求,必须保存母液,目前来说最稳定的溶剂是丙二醇,往内加入少量L-抗坏血酸,β-巯基乙醇,DTT,DTE,或少量HCl能维持其还原态。不过,还原剂可能会减低氧化腔肠素(氧化为Coelenteramide)的动力学速率。也有可能破坏荧光素酶活性。而冻存在醇类溶剂中可能引起腔肠素沉淀,实际取决于溶液浓度。当然,可通过加热50-60℃,使得沉淀重新溶解。必须确保无可见沉淀,或在实验前(特别是活体动物实验)离心去沉淀。

1.1   腔肠素母液制备

将低温保存的腔肠素粉末置于室温回温至少20min,低速离心后。往500µg腔肠素h内加入102µl 酸化的醇溶液(100%甲醇或100%乙醇中含有20µl/ml 3N或6N HCl),配制成12mM(~5mg/ml)腔肠素母液。也可根据下游应用配制成适宜浓度的腔肠素母液(1~5mg/ml)。≤-20℃(最好-80℃)分装避光保存,可能会有少量活性的丧失,约保存1~3周。若存放在惰性气体内可相对延长保存周期。

1.2   腔肠素工作液制备

直接用去气蒸馏水(degased distilled water),PBS或者其他类型生理缓冲液(pH 6.6-7.2)稀释,选择的稀释缓冲液需考虑到与酶系统配合。工作液需现配现用。比如,可直接用不含Ca2+/Mg2+的PBS将12 mM的储存液稀释到2mM(~1 mg/ml)的工作液,+4°C避光短暂存放。最佳反应液浓度请根据下游应用来调整。

相关产品

货号 名称 规格
MX4606-1MG          Coelenterazine Native天 然腔肠素 2×500μg       
MX4607-1MG Injectable native Coelenterazine 注射用天然腔肠素    2×500μg
MX4608-1MG Coelenterazine h 腔肠素h 2×500μg
MX4609-1MG Injectable h-Coelenterazine 注射用腔肠素h 2×500μg
MX4610-500UG Coelenterazine 400 a 腔肠素400a 500μg
MX4611-500UG e-Coelenterazine 腔肠素e 500μg
MX4612-500UG Coelenterazine f 腔肠素f 500μg
MX4613-250UG Coelenterazine cp 腔肠素cp 250μg
MX4614-250UG Coelenterazine hcp 腔肠素hcp 250μg

 

萤火虫荧光素酶(Fluc) Coelenterazine h 腔肠素h CAS NO:50909-86-9

Coelenterazine (CTZ) 腔肠素;CTZ h 天然腔肠素h;海肾荧光素酶(Rluc);分泌型膜锚定荧光素酶(Gluc);萤火虫荧光素酶(Fluc);In vivo bioluminescence imaging 活体动物体内成像技术;CAS NO:50909-86-9;

产品信息

产品名称

产品编号                   规格                            

Coelenterazine h 腔肠素h

MX4608-500UG 500μg

Coelenterazine h 腔肠素h

MX4608-1MG-A 2×500μg

Coelenterazine h 腔肠素h MX4608-5MG 10×500μg

产品描述

腔肠素(Coelenterazine)是在水生生物中发现的一种发光基团(luminophore),是许多荧光素酶的作用底物,包括海肾荧光素酶(Renilla reniformis luciferase, Rluc),分泌型膜锚定荧光素酶(Gaussia luciferase, Gluc)和薮枝虫荧光素酶(Obelia luciferase),和发光蛋白包括水母发光蛋白(Aequorin)的构成之一。其作用原理是以腔肠素为底物的荧光素酶,在含分子氧的条件下,氧化腔肠素产生高能量的中间产物,在此过程中发射蓝色光,光波长在450~480nm【见图1】。而甲虫(或萤火虫)荧光素/荧光素酶(FLuc)系统不同,其在含分子氧的条件下,还需要ATP和Mg2+的存在才能同时发光,光波长在550-570nm。正由于生物发光信号和底物的差异,RLuc常常与FLuc联合用于多重转录报告基因研究,或用作Fluc系统内萤火虫荧光素酶转染的内参。腔肠素应用甚是广泛,包括:1)活细胞或组织的钙离子检测;2)细胞或组织的超氧化物和过氧亚硝基阴离子(活性氧,ROS)化学发光检测;3)基因报告基因检测;4)动物活体检测;5)ELISA和生物发光共振能量转移(BRET)用于蛋白相互作用研究;6)药物高通量筛选(HTS);

腔肠素h(Coelenterazine h,CTZ-h)是天然腔肠素(Coelenterazine native,CTZ-native)的脱羟基衍生物。CTZ-h形成的水母发光蛋白复合物比CTZ-native形成的水母发光蛋白复合物的荧光强度高10倍以上(最大发射波长~466nm,半衰期为0.6-1.2sec)。CTZ-h形成的水母发光蛋白复合物比天然发光复合物对钙离子灵敏度更高,是一种检测钙离子浓度微小变化的实用探针。另外,CTZ-h是海肾荧光素酶(Renilla luciferase,Rluc)的底物,适用于体内外报告基因分析。

产品特性

1)   CAS NO:50909-86-9

2)   化学名:2,8-dibenzyl-6-(4-hydroxyphenyl)imidazo[1,2-a]pyrazin-3(7H)-one; Imidazo[1,2-a]pyrazin-3(7H)-one, 6-(4-hydroxyphenol)-2,8-bis(phenylmethyl);

3)   同义名:h-Coelenterazine; h-CTZ; 2-Deoxycoelenterazine 2-脱氧腔肠素; 2-(4-Dehydroxy) coelenterazine;

Luciferin (Renilla) 海肾荧光素;

4)   分子式:C26H21N3O2

5)   分子量:407.5 g/mol

6)   纯度:>98%

7)   外观:黄色固体

8)   溶解性:溶于甲醇或乙醇,不要溶于DMSO

9)   化学结构式:

保存与运输方法

保存:-20℃干燥避光保存,且保存于惰性气体内。至少一年有效。

运输:冰袋运输。

注意事项

1)   腔肠素h(Coelenterazine h, CTZ-h)最好以完全冻干粉的状态保存在惰性气体内,密封后置于-20℃或-70℃长期避光保存。管内即使有微量空气,也会随着时间慢慢氧化腔肠素使其活性丧失。由此,导致不同组间的定量结果可能显得不可靠,数据可比性不高。

2)   腔肠素h(Coelenterazine h, CTZ-h)不建议以储存液的形式保存,最好于实验前配制新鲜的溶液。不建议将配好的腔肠素h溶液储存在-20℃或-70℃,因其具有一个高能量的二氧杂环丁酮环形结构,即使在低温条件下都会自发降解。若是必须配成液体储存液,请按照操作步骤一、腔肠素工作液制备执行。

3)   体内动物实验,推荐使用我司(金畔生物)特别开发和优化的注射用腔肠素h(Injectable h-Coelenterazine)(#MX4609-1MG)或注射用天然腔肠素(Injectable native Coelenterazine)(#MX4607-1MG)。

4)   发光蛋白与荧光素酶是完全不同的,比如腔肠素h(CTZ-h)适合用作海肾荧光素酶(Rluc)的底物,但不适合用作分泌型膜锚定荧光素酶(Gluc)的底物。天然腔肠素(CTZ-native)是唯一适合分泌型膜锚定荧光素酶的一种报告基因底物。

5)   商业化腔肠素的种类繁多,有天然腔肠素,以及各种腔肠素衍生物(比如,腔肠素h,腔肠素400a,腔肠素e,腔肠素f,腔肠素hcp)。它们对钙离子的亲和力,光谱特性,以及应用倾向上会有差异,详见附录1—天然腔肠素及其衍生物的光谱特性,附录2—天然腔肠素及其衍生物的应用差异选择适当的产品。

6)   为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

操作步骤

一、 腔肠素工作液制备

【有关腔肠素溶解的注意事项】:

1)   腔肠素溶于甲醇或乙醇,不可溶于DMSO。腔肠素的水溶性相对比较低,一般情况需先将腔肠素溶于酸化的醇类溶剂配成相对高浓度的母液,然后再用水溶性缓冲液稀释到需要的工作浓度,现配现用。

2)   腔肠素在溶液中的稳定性比较低,最好于正式实验前才配制溶液(包括高浓度母液)。但若实际要求,必须保存母液,目前来说最稳定的溶剂是丙二醇,往内加入少量L-抗坏血酸,β-巯基乙醇,DTT,DTE,或少量HCl能维持其还原态。不过,还原剂可能会减低氧化腔肠素(氧化为Coelenteramide)的动力学速率。也有可能破坏荧光素酶活性。而冻存在醇类溶剂中可能引起腔肠素沉淀,实际取决于溶液浓度。当然,可通过加热50-60℃,使得沉淀重新溶解。必须确保无可见沉淀,或在实验前(特别是活体动物实验)离心去沉淀。

1.1   腔肠素母液制备

将低温保存的腔肠素粉末置于室温回温至少20min,低速离心后。往500µg腔肠素h内加入102µl 酸化的醇溶液(100%甲醇或100%乙醇中含有20µl/ml 3N或6N HCl),配制成12mM(~5mg/ml)腔肠素母液。也可根据下游应用配制成适宜浓度的腔肠素母液(1~5mg/ml)。≤-20℃(最好-80℃)分装避光保存,可能会有少量活性的丧失,约保存1~3周。若存放在惰性气体内可相对延长保存周期。

1.2   腔肠素工作液制备

直接用去气蒸馏水(degased distilled water),PBS或者其他类型生理缓冲液(pH 6.6-7.2)稀释,选择的稀释缓冲液需考虑到与酶系统配合。工作液需现配现用。比如,可直接用不含Ca2+/Mg2+的PBS将12 mM的储存液稀释到2mM(~1 mg/ml)的工作液,+4°C避光短暂存放。最佳反应液浓度请根据下游应用来调整。

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货号 名称 规格
MX4606-1MG          Coelenterazine Native天 然腔肠素 2×500μg       
MX4607-1MG Injectable native Coelenterazine 注射用天然腔肠素    2×500μg
MX4608-1MG Coelenterazine h 腔肠素h 2×500μg
MX4609-1MG Injectable h-Coelenterazine 注射用腔肠素h 2×500μg
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MX4611-500UG e-Coelenterazine 腔肠素e 500μg
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MX4613-250UG Coelenterazine cp 腔肠素cp 250μg
MX4614-250UG Coelenterazine hcp 腔肠素hcp 250μg

 

D-Luciferin, Potassium Salt D-荧光素钾盐 D-荧光素(D-Luciferin)是荧光素酶(Luciferase)的常用底物

Luc reporter gene 报告基因;In vivo imaging 活体成像研究;转录水平研究;荧光素酶/ATP水平研究;报告基因质粒;报告基因病毒颗粒;萤火虫荧光素;甲虫荧光素;CAS:115144-35-9;

基本描述:

D-荧光素(D-Luciferin)是荧光素酶(Luciferase)的常用底物,普遍用于整个生物技术领域,特别是体内活体成像技术。作用机制是在ATP和荧光素酶的作用下,D-荧光素(底物)被氧化发光。当荧光素过量时,产生的光量子数与荧光素酶的浓度呈正相关性(见下图)。将携带荧光素酶编码基因(Luc)的质粒转染进入细胞后,导入研究动物如大小鼠体内,之后注入荧光素,通过生物发光成像技术(BLI)来检测光强度变化,从而实时监测疾病发展状态或药物的治疗功效等。也可以利用ATP对此反应体系的影响,根据生物发光强度的变化来指示能量或生命体征。

基本应用:

D-荧光素也常用于体外研究,包括荧光素酶和ATP水平分析;报告基因分析;高通量测序和各种污染检测。

常见商业化类型的差异(荧光素钾,钠,游离酸):

目前市场上有三种产品形式,D-荧光素(游离酸),D-荧光素(钠盐),和D-荧光素(钾盐)。这三种产品主要差别在于溶解特性。

1)D-荧光素(游离酸)在水以及缓冲体系内的溶解性都很弱,除非溶于弱碱如NaOH和KOH溶液。溶于甲醇(10 mg/ml)和DMSO(50 mg/ml)。

2)D-荧光素(钠盐)和D-荧光素(钾盐)能够非常容易且快速的溶入水或者缓冲液中,使用方便,溶剂无毒性,特别适合体内实验。配成溶液后的三种产品,在绝大多数应用上都没有实质性的差别。

3)D-荧光素(钠盐)和D-荧光素(钾盐)基本上没有差别,主要是使用习惯等因素影响。整体来看,钾盐的应用文献明显多于钠盐。

D-荧光素钾盐基本特性:

1)CAS NO:115144-35-9

2)化学名:4,5-Dihydro-2-(6-hydroxy-2-benzothiazolyl)-4-thiazolecarboxylic acid potassium salt,D-Luciferin firefly, potassium salt

3)分子式:C11H7N2O3S2K

4)分子量:318.42 g/mol

5)纯度:>99% (HPLC),分子生物学级(超纯)

6)外观:浅黄色至黄色粉末

7)溶解性:溶于水(60 mg/ml)

使用方法:

A.体外生物发光检测

1)储存液制备

用蒸馏水溶解D-荧光素(钾盐),配制成15mg/ml的储存液(100×),混匀后立即使用或分装于-20℃或-80℃冻存,避免反复冻融。建议使用的工作液浓度为150µg/ml(相当于468µM)。

2)荧光素酶反应缓冲液制备

配方【1×,参考Yuichi Oba, et al., 2003】:100mM Tris-HCl(pH 7.8),5mM MgCl2,250µM CoA,150µM ATP。具体缓冲液组成可参考其他文献资料来调整。按照以上配方制备荧光素酶反应缓冲液(2×)。

3)收集细胞裂解上清(荧光素酶表达)

根据需要检测的细胞类型,选择合适的裂解液进行细胞裂解,离心收集上清后续检测待用。

4)萤火虫荧光信号检测

【注①】:萤火虫荧光信号的检测方法大体上取决于冷光测定仪(luminometer)类型(是手动型荧光计、单管注射型或者酶标板读数型荧光计)。根据特定发光测定仪,来考虑注射用量和程序设置。

【注②】:需设置不含荧光素酶的孔(用作阴性对照),以测定背景荧光。

例:注射式冷光测定仪(injectible luminometer,单样或微孔板,200µl终体积)

a)吸取100µl荧光素酶反应缓冲液(2×)到一干净的冷光测定仪比色皿或96孔板的各孔(最好使用全白平底的96孔板);

b)吸取50~98µl裂解上清到皿或孔内;

c) 如果有需要,用水来补足使得总体积到198µl;

d)设置程序注射2µl荧光素储存液(使工作浓度150µg/ml),程序:2~5秒延迟(delay),之后10s测定。

B.活体成像分析

1)用无菌的PBS(w/o Mg2+)或者DPBS(w/o Mg2+)配制D-荧光素(钾盐)工作液(15mg/ml),0.2µm滤膜过滤除菌。混匀后立即使用或分装于-20℃或-80℃冻存,避免反复冻融。一旦使用,放到4℃解冻,保持冰冷且避光。

2)注射量取决于注射方式,具体如下:

注射方式 剂量
 静脉注射(25-27 gauge针头)     按10µl/g体重浓度,加入相应体积的15mg/ml荧光素工作液    
 腹腔注射(25-27 gauge针头) 按10µl/g体重浓度,加入相应体积的15mg/ml荧光素工作液
 肌肉注射(27 gauge针头) 50µl,浓度为1-2mg/ml荧光素工作液
 鼻内注射(pipette) 50µl,浓度为3mg/ml荧光素工作液

3)注射入体内10-20 min(待光信号达到最强稳定平台期),再进行成像分析。

注:建议对每只动物模型都需要建立荧光素酶动力学曲线,从而确定最高信号检测时间和信号平台期。

产品订购:

货号

产品名称 规格      货期            
MX4603-100MG       D-Luciferin, Potassium Salt  D-荧光素(钾盐)      100mg          

现货

MX4603-500MG

D-Luciferin, Potassium Salt  D-荧光素(钾盐) 500mg

现货

MX4603-1G D-Luciferin, Potassium Salt  D-荧光素(钾盐) 1g

现货

MX4603-5G D-Luciferin, Potassium Salt  D-荧光素(钾盐) 5×1g

现货

MX4603-10G D-Luciferin, Potassium Salt  D-荧光素(钾盐) 10×1g

现货

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MX4602-500MG D-Luciferin, Sodium Salt D-荧光素(钠盐) 500mg 现货
MX4601-250MG D-Luciferin Firefly, Free Acid D-萤火虫荧光素(游离酸)  250mg 现货
MX4604-10MG DMNPE-caged Luciferin D-荧光素(DMNPE笼闭) 10mg 现货

注意事项

为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。 

D-Luciferin, Potassium Salt D-荧光素钾盐 在ATP和荧光素酶的作用下,D-荧光素(底物)被氧化发光

Luc reporter gene 报告基因;In vivo imaging 活体成像研究;转录水平研究;荧光素酶/ATP水平研究;报告基因质粒;报告基因病毒颗粒;萤火虫荧光素;甲虫荧光素;CAS:115144-35-9;

基本描述:

D-荧光素(D-Luciferin)是荧光素酶(Luciferase)的常用底物,普遍用于整个生物技术领域,特别是体内活体成像技术。作用机制是在ATP和荧光素酶的作用下,D-荧光素(底物)被氧化发光。当荧光素过量时,产生的光量子数与荧光素酶的浓度呈正相关性(见下图)。将携带荧光素酶编码基因(Luc)的质粒转染进入细胞后,导入研究动物如大小鼠体内,之后注入荧光素,通过生物发光成像技术(BLI)来检测光强度变化,从而实时监测疾病发展状态或药物的治疗功效等。也可以利用ATP对此反应体系的影响,根据生物发光强度的变化来指示能量或生命体征。

基本应用:

D-荧光素也常用于体外研究,包括荧光素酶和ATP水平分析;报告基因分析;高通量测序和各种污染检测。

常见商业化类型的差异(荧光素钾,钠,游离酸):

目前市场上有三种产品形式,D-荧光素(游离酸),D-荧光素(钠盐),和D-荧光素(钾盐)。这三种产品主要差别在于溶解特性。

1)D-荧光素(游离酸)在水以及缓冲体系内的溶解性都很弱,除非溶于弱碱如NaOH和KOH溶液。溶于甲醇(10 mg/ml)和DMSO(50 mg/ml)。

2)D-荧光素(钠盐)和D-荧光素(钾盐)能够非常容易且快速的溶入水或者缓冲液中,使用方便,溶剂无毒性,特别适合体内实验。配成溶液后的三种产品,在绝大多数应用上都没有实质性的差别。

3)D-荧光素(钠盐)和D-荧光素(钾盐)基本上没有差别,主要是使用习惯等因素影响。整体来看,钾盐的应用文献明显多于钠盐。

D-荧光素钾盐基本特性:

1)CAS NO:115144-35-9

2)化学名:4,5-Dihydro-2-(6-hydroxy-2-benzothiazolyl)-4-thiazolecarboxylic acid potassium salt,D-Luciferin firefly, potassium salt

3)分子式:C11H7N2O3S2K

4)分子量:318.42 g/mol

5)纯度:>99% (HPLC),分子生物学级(超纯)

6)外观:浅黄色至黄色粉末

7)溶解性:溶于水(60 mg/ml)

使用方法:

A.体外生物发光检测

1)储存液制备

用蒸馏水溶解D-荧光素(钾盐),配制成15mg/ml的储存液(100×),混匀后立即使用或分装于-20℃或-80℃冻存,避免反复冻融。建议使用的工作液浓度为150µg/ml(相当于468µM)。

2)荧光素酶反应缓冲液制备

配方【1×,参考Yuichi Oba, et al., 2003】:100mM Tris-HCl(pH 7.8),5mM MgCl2,250µM CoA,150µM ATP。具体缓冲液组成可参考其他文献资料来调整。按照以上配方制备荧光素酶反应缓冲液(2×)。

3)收集细胞裂解上清(荧光素酶表达)

根据需要检测的细胞类型,选择合适的裂解液进行细胞裂解,离心收集上清后续检测待用。

4)萤火虫荧光信号检测

【注①】:萤火虫荧光信号的检测方法大体上取决于冷光测定仪(luminometer)类型(是手动型荧光计、单管注射型或者酶标板读数型荧光计)。根据特定发光测定仪,来考虑注射用量和程序设置。

【注②】:需设置不含荧光素酶的孔(用作阴性对照),以测定背景荧光。

例:注射式冷光测定仪(injectible luminometer,单样或微孔板,200µl终体积)

a)吸取100µl荧光素酶反应缓冲液(2×)到一干净的冷光测定仪比色皿或96孔板的各孔(最好使用全白平底的96孔板);

b)吸取50~98µl裂解上清到皿或孔内;

c) 如果有需要,用水来补足使得总体积到198µl;

d)设置程序注射2µl荧光素储存液(使工作浓度150µg/ml),程序:2~5秒延迟(delay),之后10s测定。

B.活体成像分析

1)用无菌的PBS(w/o Mg2+)或者DPBS(w/o Mg2+)配制D-荧光素(钾盐)工作液(15mg/ml),0.2µm滤膜过滤除菌。混匀后立即使用或分装于-20℃或-80℃冻存,避免反复冻融。一旦使用,放到4℃解冻,保持冰冷且避光。

2)注射量取决于注射方式,具体如下:

注射方式 剂量
 静脉注射(25-27 gauge针头)     按10µl/g体重浓度,加入相应体积的15mg/ml荧光素工作液    
 腹腔注射(25-27 gauge针头) 按10µl/g体重浓度,加入相应体积的15mg/ml荧光素工作液
 肌肉注射(27 gauge针头) 50µl,浓度为1-2mg/ml荧光素工作液
 鼻内注射(pipette) 50µl,浓度为3mg/ml荧光素工作液

3)注射入体内10-20 min(待光信号达到最强稳定平台期),再进行成像分析。

注:建议对每只动物模型都需要建立荧光素酶动力学曲线,从而确定最高信号检测时间和信号平台期。

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注意事项

为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。 

D-Luciferin, Potassium Salt D-荧光素钾盐 萤火虫荧光素 甲虫荧光素 CAS:115144-35-9

Luc reporter gene 报告基因;In vivo imaging 活体成像研究;转录水平研究;荧光素酶/ATP水平研究;报告基因质粒;报告基因病毒颗粒;萤火虫荧光素;甲虫荧光素;CAS:115144-35-9;

基本描述:

D-荧光素(D-Luciferin)是荧光素酶(Luciferase)的常用底物,普遍用于整个生物技术领域,特别是体内活体成像技术。作用机制是在ATP和荧光素酶的作用下,D-荧光素(底物)被氧化发光。当荧光素过量时,产生的光量子数与荧光素酶的浓度呈正相关性(见下图)。将携带荧光素酶编码基因(Luc)的质粒转染进入细胞后,导入研究动物如大小鼠体内,之后注入荧光素,通过生物发光成像技术(BLI)来检测光强度变化,从而实时监测疾病发展状态或药物的治疗功效等。也可以利用ATP对此反应体系的影响,根据生物发光强度的变化来指示能量或生命体征。

基本应用:

D-荧光素也常用于体外研究,包括荧光素酶和ATP水平分析;报告基因分析;高通量测序和各种污染检测。

常见商业化类型的差异(荧光素钾,钠,游离酸):

目前市场上有三种产品形式,D-荧光素(游离酸),D-荧光素(钠盐),和D-荧光素(钾盐)。这三种产品主要差别在于溶解特性。

1)D-荧光素(游离酸)在水以及缓冲体系内的溶解性都很弱,除非溶于弱碱如NaOH和KOH溶液。溶于甲醇(10 mg/ml)和DMSO(50 mg/ml)。

2)D-荧光素(钠盐)和D-荧光素(钾盐)能够非常容易且快速的溶入水或者缓冲液中,使用方便,溶剂无毒性,特别适合体内实验。配成溶液后的三种产品,在绝大多数应用上都没有实质性的差别。

3)D-荧光素(钠盐)和D-荧光素(钾盐)基本上没有差别,主要是使用习惯等因素影响。整体来看,钾盐的应用文献明显多于钠盐。

D-荧光素钾盐基本特性:

1)CAS NO:115144-35-9

2)化学名:4,5-Dihydro-2-(6-hydroxy-2-benzothiazolyl)-4-thiazolecarboxylic acid potassium salt,D-Luciferin firefly, potassium salt

3)分子式:C11H7N2O3S2K

4)分子量:318.42 g/mol

5)纯度:>99% (HPLC),分子生物学级(超纯)

6)外观:浅黄色至黄色粉末

7)溶解性:溶于水(60 mg/ml)

使用方法:

A.体外生物发光检测

1)储存液制备

用蒸馏水溶解D-荧光素(钾盐),配制成15mg/ml的储存液(100×),混匀后立即使用或分装于-20℃或-80℃冻存,避免反复冻融。建议使用的工作液浓度为150µg/ml(相当于468µM)。

2)荧光素酶反应缓冲液制备

配方【1×,参考Yuichi Oba, et al., 2003】:100mM Tris-HCl(pH 7.8),5mM MgCl2,250µM CoA,150µM ATP。具体缓冲液组成可参考其他文献资料来调整。按照以上配方制备荧光素酶反应缓冲液(2×)。

3)收集细胞裂解上清(荧光素酶表达)

根据需要检测的细胞类型,选择合适的裂解液进行细胞裂解,离心收集上清后续检测待用。

4)萤火虫荧光信号检测

【注①】:萤火虫荧光信号的检测方法大体上取决于冷光测定仪(luminometer)类型(是手动型荧光计、单管注射型或者酶标板读数型荧光计)。根据特定发光测定仪,来考虑注射用量和程序设置。

【注②】:需设置不含荧光素酶的孔(用作阴性对照),以测定背景荧光。

例:注射式冷光测定仪(injectible luminometer,单样或微孔板,200µl终体积)

a)吸取100µl荧光素酶反应缓冲液(2×)到一干净的冷光测定仪比色皿或96孔板的各孔(最好使用全白平底的96孔板);

b)吸取50~98µl裂解上清到皿或孔内;

c) 如果有需要,用水来补足使得总体积到198µl;

d)设置程序注射2µl荧光素储存液(使工作浓度150µg/ml),程序:2~5秒延迟(delay),之后10s测定。

B.活体成像分析

1)用无菌的PBS(w/o Mg2+)或者DPBS(w/o Mg2+)配制D-荧光素(钾盐)工作液(15mg/ml),0.2µm滤膜过滤除菌。混匀后立即使用或分装于-20℃或-80℃冻存,避免反复冻融。一旦使用,放到4℃解冻,保持冰冷且避光。

2)注射量取决于注射方式,具体如下:

注射方式 剂量
 静脉注射(25-27 gauge针头)     按10µl/g体重浓度,加入相应体积的15mg/ml荧光素工作液    
 腹腔注射(25-27 gauge针头) 按10µl/g体重浓度,加入相应体积的15mg/ml荧光素工作液
 肌肉注射(27 gauge针头) 50µl,浓度为1-2mg/ml荧光素工作液
 鼻内注射(pipette) 50µl,浓度为3mg/ml荧光素工作液

3)注射入体内10-20 min(待光信号达到最强稳定平台期),再进行成像分析。

注:建议对每只动物模型都需要建立荧光素酶动力学曲线,从而确定最高信号检测时间和信号平台期。

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注意事项

为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。 

CAS:115144-35-9 D-Luciferin, Potassium Salt D-荧光素钾盐

Luc reporter gene 报告基因;In vivo imaging 活体成像研究;转录水平研究;荧光素酶/ATP水平研究;报告基因质粒;报告基因病毒颗粒;萤火虫荧光素;甲虫荧光素;CAS:115144-35-9;

基本描述:

D-荧光素(D-Luciferin)是荧光素酶(Luciferase)的常用底物,普遍用于整个生物技术领域,特别是体内活体成像技术。作用机制是在ATP和荧光素酶的作用下,D-荧光素(底物)被氧化发光。当荧光素过量时,产生的光量子数与荧光素酶的浓度呈正相关性(见下图)。将携带荧光素酶编码基因(Luc)的质粒转染进入细胞后,导入研究动物如大小鼠体内,之后注入荧光素,通过生物发光成像技术(BLI)来检测光强度变化,从而实时监测疾病发展状态或药物的治疗功效等。也可以利用ATP对此反应体系的影响,根据生物发光强度的变化来指示能量或生命体征。

基本应用:

D-荧光素也常用于体外研究,包括荧光素酶和ATP水平分析;报告基因分析;高通量测序和各种污染检测。

常见商业化类型的差异(荧光素钾,钠,游离酸):

目前市场上有三种产品形式,D-荧光素(游离酸),D-荧光素(钠盐),和D-荧光素(钾盐)。这三种产品主要差别在于溶解特性。

1)D-荧光素(游离酸)在水以及缓冲体系内的溶解性都很弱,除非溶于弱碱如NaOH和KOH溶液。溶于甲醇(10 mg/ml)和DMSO(50 mg/ml)。

2)D-荧光素(钠盐)和D-荧光素(钾盐)能够非常容易且快速的溶入水或者缓冲液中,使用方便,溶剂无毒性,特别适合体内实验。配成溶液后的三种产品,在绝大多数应用上都没有实质性的差别。

3)D-荧光素(钠盐)和D-荧光素(钾盐)基本上没有差别,主要是使用习惯等因素影响。整体来看,钾盐的应用文献明显多于钠盐。

D-荧光素钾盐基本特性:

1)CAS NO:115144-35-9

2)化学名:4,5-Dihydro-2-(6-hydroxy-2-benzothiazolyl)-4-thiazolecarboxylic acid potassium salt,D-Luciferin firefly, potassium salt

3)分子式:C11H7N2O3S2K

4)分子量:318.42 g/mol

5)纯度:>99% (HPLC),分子生物学级(超纯)

6)外观:浅黄色至黄色粉末

7)溶解性:溶于水(60 mg/ml)

使用方法:

A.体外生物发光检测

1)储存液制备

用蒸馏水溶解D-荧光素(钾盐),配制成15mg/ml的储存液(100×),混匀后立即使用或分装于-20℃或-80℃冻存,避免反复冻融。建议使用的工作液浓度为150µg/ml(相当于468µM)。

2)荧光素酶反应缓冲液制备

配方【1×,参考Yuichi Oba, et al., 2003】:100mM Tris-HCl(pH 7.8),5mM MgCl2,250µM CoA,150µM ATP。具体缓冲液组成可参考其他文献资料来调整。按照以上配方制备荧光素酶反应缓冲液(2×)。

3)收集细胞裂解上清(荧光素酶表达)

根据需要检测的细胞类型,选择合适的裂解液进行细胞裂解,离心收集上清后续检测待用。

4)萤火虫荧光信号检测

【注①】:萤火虫荧光信号的检测方法大体上取决于冷光测定仪(luminometer)类型(是手动型荧光计、单管注射型或者酶标板读数型荧光计)。根据特定发光测定仪,来考虑注射用量和程序设置。

【注②】:需设置不含荧光素酶的孔(用作阴性对照),以测定背景荧光。

例:注射式冷光测定仪(injectible luminometer,单样或微孔板,200µl终体积)

a)吸取100µl荧光素酶反应缓冲液(2×)到一干净的冷光测定仪比色皿或96孔板的各孔(最好使用全白平底的96孔板);

b)吸取50~98µl裂解上清到皿或孔内;

c) 如果有需要,用水来补足使得总体积到198µl;

d)设置程序注射2µl荧光素储存液(使工作浓度150µg/ml),程序:2~5秒延迟(delay),之后10s测定。

B.活体成像分析

1)用无菌的PBS(w/o Mg2+)或者DPBS(w/o Mg2+)配制D-荧光素(钾盐)工作液(15mg/ml),0.2µm滤膜过滤除菌。混匀后立即使用或分装于-20℃或-80℃冻存,避免反复冻融。一旦使用,放到4℃解冻,保持冰冷且避光。

2)注射量取决于注射方式,具体如下:

注射方式 剂量
 静脉注射(25-27 gauge针头)     按10µl/g体重浓度,加入相应体积的15mg/ml荧光素工作液    
 腹腔注射(25-27 gauge针头) 按10µl/g体重浓度,加入相应体积的15mg/ml荧光素工作液
 肌肉注射(27 gauge针头) 50µl,浓度为1-2mg/ml荧光素工作液
 鼻内注射(pipette) 50µl,浓度为3mg/ml荧光素工作液

3)注射入体内10-20 min(待光信号达到最强稳定平台期),再进行成像分析。

注:建议对每只动物模型都需要建立荧光素酶动力学曲线,从而确定最高信号检测时间和信号平台期。

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注意事项

为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。 

D-Luciferin, Sodium Salt D-荧光素钠盐 D-荧光素(D-Luciferin)是荧光素酶(Luciferase)的常用底物

Luc reporter gene 报告基因;In vivo imaging 活体成像研究;转录水平研究;荧光素酶/ATP水平研究;报告基因质粒;报告基因病毒颗粒;萤火虫荧光素;甲虫荧光素;CAS:103404-75-7;

D-荧光素(D-Luciferin)是荧光素酶(Luciferase)的常用底物,普遍用于整个生物技术领域,特别是体内活体成像技术。作用机制是在ATP和荧光素酶的作用下,D-荧光素(底物)被氧化发光。当荧光素过量时,产生的光量子数与荧光素酶的浓度呈正相关性(见下图)。将携带荧光素酶编码基因(Luc)的质粒转染进入细胞后,导入研究动物如大小鼠体内,之后注入荧光素,通过生物发光成像技术(BLI)来检测光强度变化,从而实时监测疾病发展状态或药物的治疗功效等。也可以利用ATP对此反应体系的影响,根据生物发光强度的变化来指示能量或生命体征。

基本应用:

D-荧光素也常用于体外研究,包括荧光素酶和ATP水平分析;报告基因分析;高通量测序和各种污染检测。

常见商业化类型的差异(荧光素钾,钠,游离酸):

目前市场上有三种产品形式,D-荧光素(游离酸),D-荧光素(钠盐),和D-荧光素(钾盐)。这三种产品主要差别在于溶解特性。

1)D-荧光素(游离酸)在水以及缓冲体系内的溶解性都很弱,除非溶于弱碱如NaOH和KOH溶液。溶于甲醇(10 mg/ml)和DMSO(50 mg/ml)。

2)D-荧光素(钠盐)和D-荧光素(钾盐)能够非常容易且快速的溶入水或者缓冲液中,使用方便,溶剂无毒性,特别适合体内实验。配成溶液后的三种产品,在绝大多数应用上都没有实质性的差别。

3)D-荧光素(钠盐)和D-荧光素(钾盐)基本上没有差别,主要是使用习惯等因素影响。整体来看,钾盐的应用文献明显多于钠盐。

基本特性:

1)CAS NO:103404-75-7

2)化学名:(S)-4,5-Dihydro-2-(6-hydroxy-2-benzothiazolyl)-4-thiazolecarboxylic acid sodium salt; D-Luciferin firefly, sodium salt monohydrate;

3)分子式:NaC11H7N2O3S2· H2O

4)分子量:320.32 g/mol

5)纯度:>99% (HPLC),分子生物学级(超纯)

6)外观:浅黄色至黄色粉末

7)溶解性:溶于水(高达100 mg/ml)

使用方法:

A.体外生物发光检测

1)  储存液制备

用蒸馏水溶解D-荧光素(钠盐),配制成15mg/ml的储存液(100×),混匀后立即使用或分装于-20℃或-80℃冻存,避免反复冻融。建议使用的工作液浓度为150µg/ml(相当于468µM)。

2)  荧光素酶反应缓冲液制备

配方【1×,参考Yuichi Oba, et al., 2003】:100mM Tris-HCl(pH 7.8),5mM MgCl2,250µM CoA,150µM ATP。具体缓冲液组成可参考其他文献资料来调整。按照以上配方制备荧光素酶反应缓冲液(2×)。

3)  收集细胞裂解上清(荧光素酶表达)

根据需要检测的细胞类型,选择合适的裂解液进行细胞裂解,离心收集上清后续检测待用。

4)  萤火虫荧光信号检测

【注①】:萤火虫荧光信号的检测方法大体上取决于冷光测定仪(luminometer)类型(是手动型荧光计、单管注射型或者酶标板读数型荧光计)。根据特定发光测定仪,来考虑注射用量和程序设置。

【注②】:需设置不含荧光素酶的孔(用作阴性对照),以测定背景荧光。

例:注射式冷光测定仪(injectible luminometer,单样或微孔板,200µl终体积)

a)吸取100µl荧光素酶反应缓冲液(2×)到一干净的冷光测定仪比色皿或96孔板的各孔(最好使用全白平底的96孔板);

b)吸取50~98µl裂解上清到皿或孔内;

c)如果有需要,用水来补足使得总体积到198µl;

d)设置程序注射2µl荧光素储存液(使工作浓度150µg/ml),程序:2~5秒延迟(delay),之后10s测定。

B.活体成像分析

1)用无菌的PBS(w/o Mg2+)或者DPBS(w/o Mg2+)配制D-荧光素(钠盐)工作液(15mg/ml),0.2µm滤膜过滤除菌。混匀后立即使用或分装于-20℃或-80℃冻存,避免反复冻融。一旦使用,放到4℃解冻,保持冰冷且避光。

2)注射量取决于注射方式,具体如下:

注射方式

剂量

静脉注射(25-27 gauge针头)

按10µl/g体重浓度,加入相应体积的15mg/ml荧光素工作液                      

腹腔注射(25-27 gauge针头)

按10µl/g体重浓度,加入相应体积的15mg/ml荧光素工作液

肌肉注射(27 gauge针头)

50µl,浓度为1-2mg/ml荧光素工作液

鼻内注射(pipette)

50µl,浓度为3mg/ml荧光素工作液

3)注射入体内10-20 min(待光信号达到最强稳定平台期),再进行成像分析。

注:建议对每只动物模型都需要建立荧光素酶动力学曲线,从而确定最高信号检测时间和信号平台期。

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D-Luciferin, Potassium Salt  D-荧光素(钾盐)

100mg

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