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Aminophenyl fluorescein (APF) 氨基苯基荧光素

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Aminophenyl fluorescein (APF) 氨基苯基荧光素

产品信息

  产品名称                                                         产品编号   规格   价格（元）
  Aminophenyl fluorescein (APF) 氨基苯基荧光素   MX4804-1MG   1mg   2180

 

产品描述

氨基苯基荧光素（APF）和羟苯基荧光素（HPF）是由T. Nagano开发的两种活性氧（Reactive oxygen species, ROS）指示剂，比H2DCFDA（DCFH-DA, DCFH）具更优秀的特异性和稳定性。APF和HPF显示有限的非选择性反应，和相对较高的光诱导氧化抗性。APF和HPF具细胞膜渗透性，本身无荧光，直到与羟基自由基或过氧亚硝基阴离子反应，还能与次氯酸阴离子反应，产生强绿色荧光（Ex/Em，~490/515nm），可用荧光显微镜、高通量成像仪、荧光酶标板或流式细胞仪检测。

 

本品以粉末形式提供，可直接溶于DMF配制成5mM储存液，常用工作浓度范围1-10μM，需根据自身的实验体系或参考文献进行优化。

 

产品特性

1）同义名：3′-(p-aminophenyl) fluorescein氨基苯基荧光素

2）分子式：C26H17NO5

3）分子量：423.42

4）纯度：≥95%

5）Ex/Em：490/515nm

6）溶解性：溶于DMSO（10mM）、DMF（5mM）

7）化学结构：

 

保存与运输方法

保存：-20ºC避光干燥保存，至少1年有效。

运输：冰袋运输。

 

使用方法

一、储存液制备

将低温保存的1mg粉末置于室温回温至少20min，之后加入472μl 无水DMF配置成5mM储存液。充分溶解和混匀后，按照单次用量分装，-20ºC避光干燥保存，避免反复冻融。

【注】：APF能溶于DMSO（10mM），但有数据显示DMSO是羟基自由基的淬灭剂，会干扰检测和降低灵敏性。因此，建议用DMF作为溶剂。

二、溶液体系检测

正式实验前，取一管HPF储存液置于室温回温，使其充分融解。之后用合适的缓冲液（比如HHBS缓冲液，PBS缓冲液）稀释到所需的工作浓度。建议起始浓度为1-10μM，需根据自身的实验体系或参考文献进行优化。

三、细胞体系检测

以下实验步骤仅做参考，最佳的工作浓度、孵育时间和温度需根据实际情况进行调整。在加入APF工作液之前按需处理细胞。

1）   根据具体用量，将DMF储存液用HHBS缓冲液或其他生理缓冲液稀释成1-10μM工作液。

2）   根据实验设计处理细胞（比如，RASM细胞用50-100nM 血管紧张素II处理3-5h）。

3）   取步骤1）准备的1-10μM工作液加入细胞，37ºC孵育20-60min。

4）   吸掉染色工作液，用HHBS或其他生理缓冲液替换。

5）   用合适的荧光仪器（Ex/Em=492/515nm）来检测。

【注1】：BSA和酚红会影响荧光，需谨慎使用。

【注2】：HPF和APF能用于溶液体系或胞内ROS检测。

注意事项

1）APF和HPF仅用于科研研究，不可用于体外诊断研究。

2）APF和HPF产生的荧光相对于其他活性氧探针比如DCFH弱很多，这是探针本身的特性决定的（见附表1 活性氧探针（HPF, APF, DCFH）对各种活性氧物质的反应特异性）。

3）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。 

 

相关产品

货号 名称 规格
MX4801-1KIT Reactive Oxygen Species (ROS) Assay Kit 活 性氧（ROS）检测试剂盒 100~500T
MX4802-50MG H2DCFDA (DCFH-DA, DCFH) 活性氧（ROS）荧光探针 50mg
MX4804-1MG Aminophenyl fluorescein (APF) 氨基苯基荧光素 1mg
MX4805-1MG Hydroxyphenyl fluorescein (HPF) 羟苯基荧光素 1mg
MX4455-1MG Dihydrorhodamine 123 (DHR 123) 二氢罗丹明123 1mg
MM0706-1G Luminol 鲁米诺 1g
MX4606-500UG Coelenterazine Native 天然腔肠素 500μg

附表1 活性氧探针（HPF, APF, DCFH）对各种活性氧物质的反应特异性

ROS ROS产生方法 HPF (MX4805) APF (MX4804) DCFH (MX4802)
HO• 100 µM高氯酸亚铁(II)+1 mMH2O2 730 1200 7400
ONOO– 3 µM (终浓度) ONOO– 120 560 6600
OCl- 3 µM (终浓度) OCl- 6 3600 86
1O2 100 µM 3-(1,4-dihydro-1,4-epidioxy-1-naphthyl)

propionic acid

 5 9 26
•O2– 100 µM KO2 8 6 67
H2O2 100 µM of H2O2 2 ＜1 190
NO 100 µM NOC-7 6 ＜1 150
ROO• 100 µM AAPH 17 2 710
Autoxidation 荧光光照2.5h ＜1 ＜1 2000

 

 

 

TTC 2,3,5-氯化三苯基四氮唑

发表于由

描述

TTC 红四氮唑（2,3,5-氯化三苯基四氮唑）

 

搜索关键词：

TTC/TTZ/TPTZ红四氮唑；Redox indicator氧化还原指示剂；Cellular respiration细胞呼吸；Dehydrogenases脱氢酶；TPF (1,3,5-triphenylformazan) 1,3,5-三苯基甲臜；CAS：298-96-4；

TTC法/TTC染色实验（TTC Assay，TTC test，Tetrazolium test）

——是指氧化还原指示剂TTC（红四氮唑，2,3,5-三苯基氯化四氮唑，本身处于氧化态是无色的，活细胞（组织）内脱氢酶（特别是线粒体内的琥珀酸脱氢酶）将TTC作为受氢体使之还原生成红色的TPF（1,3,5- triphenylformazan，1,3,5-三苯基甲臜，CAS：531-52-2）（作用机理见下图），利用这一特性，使其能用来鉴别有代谢活力和无代谢活力的组织（细胞）。

 

产品应用：

1）用于植物根系活力测定；

定性检测方法：1% TTC溶液：0.4M琥珀酸：磷酸缓冲液=1:5:4混合，浸没根部，37℃暗处孵育1-3h，观察着色情况。结果：新根尖端或细侧根明显变为红色，表明这些部位有脱氢酶存在，有细胞代谢活力。

 

2）用作种子活力测定；

定性检测方法：0.5%TTC溶液，浸没剥去种皮（勿伤害种胚）的种子，恒温箱（30-35℃）暗处孵育0.5-1h左右。染色结束，倒去TTC溶液，用清水清洗种子1-2次，观察种胚染色情况。结果：凡种胚全部或大部分被染红色即为有活力种子，不被染色的为死种子。

 

3）用作花粉活力测定；

定性检测方法：0.5%TTC溶液；将花粉取少许置于干净载玻片上，加1-2滴0.5%TTC溶液，搅匀后盖上盖玻片，以清水为对照，37℃恒温箱暗处孵育0.5h左右，镜检。结果：花粉死亡不能被染色；花粉生命力衰退或部分丧失则染色较浅或局部被染色；根据花粉染色的深浅程度来鉴定花粉的生命力。

 

4）用作微生物生长测定；

定性检测方法：1%无菌TTC溶液；预热到50℃左右，按照取1ml 1%TTC溶液到100ml冷却到50-60℃的固体/液体培养基比例来使用。可用于大肠型细菌的计数和鉴定。

 

5）用作评价脑缺血损伤程度，对脑组织染色以检测梗塞面积；

Chintamani Narasinh Joshi et al. An optimized triphenyltetrazolium chloride method for identification of cerebral infarcts.Brain Research Protocols Volume 13, Issue 1, April 2004, Pages 11-17

Eric J. Goldlust et al. Automated Measurement of Infarct Size With Scanned Images of Triphenyltetrazolium Chloride–Stained Rat Brains. Stroke. 1996;27:1657-1662【2% TTC in 0.1 mol/L PBS (pH adjusted to 7.4), 37°C, 10min】

Kazuo Isayama et al. Evaluation of 2,3,5 -Triphenyltetrazolium Chloride Staining To Delineate Rat Brain Infarcts. Stroke Vol 22, No 11 November 1991【The TTC solution (2% by weight) was prepared with 37°C phosphate buffer (0.2 M Na2HPO4 and 0.2M NaH2PO4, pH 7.4-7.6) immediately before use. Because TTC is light sensitive, solutions must be masked with aluminum foil.】

Anke Popp et al. Identification of Ischemic Regions in a Rat Model of Stroke. PLoS ONE. 2009; 4(3): e4764.【2% TTC in 0.9% NaCl at 37°C for 10 min】

 

6）用作心脏组织染色以测定急性损害程度；

Hoffmann U et al. Acute Myocardial Infarction: Contrast-enhanced Multi–Detector Row CT in a Porcine Model. Radiology. 2004 Jun;231(3):697-701. Epub 2004 Apr 29.

Kirschner et al. Differentiation of acute and four-week old myocardial infarct with Gd(ABE-DTTA)-enhanced CMR. Journal of Cardiovascular Magnetic Resonance 201012:22.

Zhonglin Liu et al. Quantitative Analysis of Acute Myocardial Infarct in Rat Hearts with Ischemia-Reperfusion Using a High-Resolution Stationary SPECT System. J Nucl Med July 1, 2002 vol. 43 no. 7 933-939【1% TTC PBS solution, pH 7.4, at 37°C for 20 min】

 

产品特性

1）CAS NO：298-96-4

2）同义名：2,3,5,Triphenyl-2H-Tetrazolium Chloride 2,3,5-三苯基-2H-四唑盐酸盐；2,3,5-Triphenyltetrazolium Chloride 2,3,5-氯化三苯基四氮唑；Tetrazolium red红四氮唑，红四唑，四氮唑红；TPTZ；TTZ；

3）分子式：C19H15ClN4

4）分子量：334.8g/mol

5）外观：类白色至浅黄色结晶

6）纯度：>98%

7）溶解性：溶于水（10mg/ml），乙醇（10mg/ml）和丙酮，不溶于乙醚

8）化学结构式：

订购信息：

货号                  产品名称                                     规格           价格（元）
MS4001-5G TTC 2,3,5-氯化三苯基四氮唑 5g 155
MS4001-25G TTC 2,3,5-氯化三苯基四氮唑 25g 558

 

相关产品：

货号                  产品名称                                     规格           价格（元）
MM1504-100ML 4% Paraformaldehyde 4%多聚甲醛 100ml 60
MM1504-500ML 4% Paraformaldehyde 4%多聚甲醛 500ml 160

 

注意事项

为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

 

Hydroxyphenyl fluorescein (HPF) 羟苯基荧光素

发表于由

描述

Hydroxyphenyl fluorescein (HPF) 羟苯基荧光素

 

产品信息

产品名称                     产品编号 规格 价格（元）
Hydroxyphenyl fluorescein (HPF) 羟苯基荧光素 MX4805-1MG 1mg 2180

 

产品描述

氨基苯基荧光素（APF）和羟苯基荧光素（HPF）是由T. Nagano开发的两种活性氧（Reactive oxygen species, ROS）指示剂，比H2DCFDA（DCFH-DA, DCFH）具更优秀的特异性和稳定性。APF和HPF显示有限的非选择性反应，和相对较高的光诱导氧化抗性。APF和HPF具细胞膜渗透性，本身无荧光，直到与羟基自由基或过氧亚硝基阴离子反应，还能与次氯酸阴离子反应，产生强绿色荧光（Ex/Em，~490/515nm），可用荧光显微镜、高通量成像仪、荧光酶标板或流式细胞仪检测。

 

本品以粉末形式提供，可直接溶于DMF配制成5mM储存液，常用工作浓度范围1-10μM，需根据自身的实验体系或参考文献进行优化。

 

产品特性

1）CAS NO.：359010-69-8

2）同义名：3′-p-(hydroxyphenyl) fluorescein (HPF)羟苯基荧光素

3）分子式：C26H16O6

4）分子量：424.4

5）纯度：≥95%

6）Ex/Em：492/515nm

7）溶解性：溶于DMSO（10mM）、DMF（5mM）

8）化学结构：

保存与运输方法

保存：-20ºC避光干燥保存，至少一年有效。

运输：冰袋运输。 

使用方法

一、储存液制备

将低温保存的1mg粉末置于室温回温至少20min，之后加入471μl 无水DMF配置成5mM储存液。充分溶解和混匀后，按照单次用量分装，-20ºC避光干燥保存，避免反复冻融。

【注】：HPF能溶于DMSO（10mM），但有数据显示DMSO是羟基自由基的淬灭剂，会干扰检测和降低灵敏性。因此，建议用DMF作为溶剂。

二、溶液体系检测

正式实验前，取一管HPF储存液置于室温回温，使其充分融解。之后用合适的缓冲液（比如HHBS缓冲液，PBS缓冲液）稀释到所需的工作浓度。建议起始浓度为1-10μM，需根据自身的实验体系或参考文献进行优化。

三、细胞体系检测

以下实验步骤仅做参考，最佳的工作浓度、孵育时间和温度需根据实际情况进行调整。在加入HPF工作液之前按需处理细胞。

1）   根据具体用量，将DMF储存液用HHBS缓冲液或其他生理缓冲液稀释成1-10μM工作液。

2）   根据实验设计处理细胞（比如，RASM细胞用50-100nM 血管紧张素II处理3-5h）。

3）   取步骤1）准备的1-10μM工作液加入细胞，37ºC孵育20-60min。

4）   吸掉染色工作液，用HHBS或其他生理缓冲液替换。

5）   用合适的荧光仪器（Ex/Em=492/515nm）来检测。

【注1】：BSA和酚红会影响荧光，需谨慎使用。

【注2】：HPF和APF能用于溶液体系或胞内ROS检测。

注意事项

1）   APF和HPF仅用于科研研究，不可用于体外诊断研究。

2）   APF和HPF产生的荧光相对于其他活性氧探针比如DCFH弱很多，这是探针本身的特性决定的（见附表1 活性氧探针（HPF, APF, DCFH）对各种活性氧物质的反应特异性）。

3）   为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

相关产品

货号 名称 规格
MX4801-1KIT Reactive Oxygen Species (ROS) Assay Kit 活 性氧（ROS）检测试剂盒 100~500T
MX4802-50MG H2DCFDA (DCFH-DA, DCFH) 活性氧（ROS）荧光探针 50mg
MX4804-1MG Aminophenyl fluorescein (APF) 氨基苯基荧光素 1mg
MX4805-1MG Hydroxyphenyl fluorescein (HPF) 羟苯基荧光素 1mg
MX4455-1MG Dihydrorhodamine 123 (DHR 123) 二氢罗丹明123 1mg
MM0706-1G Luminol 鲁米诺 1g
MX4606-500UG Coelenterazine Native 天然腔肠素 500μg

附表1 活性氧探针（HPF, APF, DCFH）对各种活性氧物质的反应特异性

ROS ROS产生方法 HPF (MX4805) APF (MX4804) DCFH (MX4802)
HO• 100 µM高氯酸亚铁(II)+1 mMH2O2 730 1200 7400
ONOO– 3 µM (终浓度) ONOO– 120 560 6600
OCl- 3 µM (终浓度) OCl- 6 3600 86
1O2 100 µM 3-(1,4-dihydro-1,4-epidioxy-1-naphthyl)

propionic acid

 5 9 26
•O2– 100 µM KO2 8 6 67
H2O2 100 µM of H2O2 2 ＜1 190
NO 100 µM NOC-7 6 ＜1 150
ROO• 100 µM AAPH 17 2 710
Autoxidation 荧光光照2.5h ＜1 ＜1 2000

 

 

 

TTC 2,3,5-氯化三苯基四氮唑

发表于由

描述

TTC 红四氮唑（2,3,5-氯化三苯基四氮唑）

 

搜索关键词：

TTC/TTZ/TPTZ红四氮唑；Redox indicator氧化还原指示剂；Cellular respiration细胞呼吸；Dehydrogenases脱氢酶；TPF (1,3,5-triphenylformazan) 1,3,5-三苯基甲臜；CAS：298-96-4；

TTC法/TTC染色实验（TTC Assay，TTC test，Tetrazolium test）

——是指氧化还原指示剂TTC（红四氮唑，2,3,5-三苯基氯化四氮唑，本身处于氧化态是无色的，活细胞（组织）内脱氢酶（特别是线粒体内的琥珀酸脱氢酶）将TTC作为受氢体使之还原生成红色的TPF（1,3,5- triphenylformazan，1,3,5-三苯基甲臜，CAS：531-52-2）（作用机理见下图），利用这一特性，使其能用来鉴别有代谢活力和无代谢活力的组织（细胞）。

 

产品应用：

1）用于植物根系活力测定；

定性检测方法：1% TTC溶液：0.4M琥珀酸：磷酸缓冲液=1:5:4混合，浸没根部，37℃暗处孵育1-3h，观察着色情况。结果：新根尖端或细侧根明显变为红色，表明这些部位有脱氢酶存在，有细胞代谢活力。

 

2）用作种子活力测定；

定性检测方法：0.5%TTC溶液，浸没剥去种皮（勿伤害种胚）的种子，恒温箱（30-35℃）暗处孵育0.5-1h左右。染色结束，倒去TTC溶液，用清水清洗种子1-2次，观察种胚染色情况。结果：凡种胚全部或大部分被染红色即为有活力种子，不被染色的为死种子。

 

3）用作花粉活力测定；

定性检测方法：0.5%TTC溶液；将花粉取少许置于干净载玻片上，加1-2滴0.5%TTC溶液，搅匀后盖上盖玻片，以清水为对照，37℃恒温箱暗处孵育0.5h左右，镜检。结果：花粉死亡不能被染色；花粉生命力衰退或部分丧失则染色较浅或局部被染色；根据花粉染色的深浅程度来鉴定花粉的生命力。

 

4）用作微生物生长测定；

定性检测方法：1%无菌TTC溶液；预热到50℃左右，按照取1ml 1%TTC溶液到100ml冷却到50-60℃的固体/液体培养基比例来使用。可用于大肠型细菌的计数和鉴定。

 

5）用作评价脑缺血损伤程度，对脑组织染色以检测梗塞面积；

Chintamani Narasinh Joshi et al. An optimized triphenyltetrazolium chloride method for identification of cerebral infarcts.Brain Research Protocols Volume 13, Issue 1, April 2004, Pages 11-17

Eric J. Goldlust et al. Automated Measurement of Infarct Size With Scanned Images of Triphenyltetrazolium Chloride–Stained Rat Brains. Stroke. 1996;27:1657-1662【2% TTC in 0.1 mol/L PBS (pH adjusted to 7.4), 37°C, 10min】

Kazuo Isayama et al. Evaluation of 2,3,5 -Triphenyltetrazolium Chloride Staining To Delineate Rat Brain Infarcts. Stroke Vol 22, No 11 November 1991【The TTC solution (2% by weight) was prepared with 37°C phosphate buffer (0.2 M Na2HPO4 and 0.2M NaH2PO4, pH 7.4-7.6) immediately before use. Because TTC is light sensitive, solutions must be masked with aluminum foil.】

Anke Popp et al. Identification of Ischemic Regions in a Rat Model of Stroke. PLoS ONE. 2009; 4(3): e4764.【2% TTC in 0.9% NaCl at 37°C for 10 min】

 

6）用作心脏组织染色以测定急性损害程度；

Hoffmann U et al. Acute Myocardial Infarction: Contrast-enhanced Multi–Detector Row CT in a Porcine Model. Radiology. 2004 Jun;231(3):697-701. Epub 2004 Apr 29.

Kirschner et al. Differentiation of acute and four-week old myocardial infarct with Gd(ABE-DTTA)-enhanced CMR. Journal of Cardiovascular Magnetic Resonance 201012:22.

Zhonglin Liu et al. Quantitative Analysis of Acute Myocardial Infarct in Rat Hearts with Ischemia-Reperfusion Using a High-Resolution Stationary SPECT System. J Nucl Med July 1, 2002 vol. 43 no. 7 933-939【1% TTC PBS solution, pH 7.4, at 37°C for 20 min】

 

产品特性

1）CAS NO：298-96-4

2）同义名：2,3,5,Triphenyl-2H-Tetrazolium Chloride 2,3,5-三苯基-2H-四唑盐酸盐；2,3,5-Triphenyltetrazolium Chloride 2,3,5-氯化三苯基四氮唑；Tetrazolium red红四氮唑，红四唑，四氮唑红；TPTZ；TTZ；

3）分子式：C19H15ClN4

4）分子量：334.8g/mol

5）外观：类白色至浅黄色结晶

6）纯度：>98%

7）溶解性：溶于水（10mg/ml），乙醇（10mg/ml）和丙酮，不溶于乙醚

8）化学结构式：

订购信息：

货号                  产品名称                                     规格           价格（元）
MS4001-5G TTC 2,3,5-氯化三苯基四氮唑 5g 155
MS4001-25G TTC 2,3,5-氯化三苯基四氮唑 25g 558

 

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注意事项

为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。