Coelenterazine v 腔肠素v Aequorin 水母发光蛋白;CAS NO:55779-48-1

Coelenterazine v 腔肠素v; Coelenterazine 400 a 腔肠素400a; 海肾荧光素酶(Rluc);萤火虫荧光素酶(Fluc);Aequorin 水母发光蛋白;CAS NO:55779-48-1;

腔肠素(Coelenterazine)是在水生生物中发现的一种发光基团(luminophore),是许多荧光素酶的作用底物,包括海肾荧光素酶(Renilla reniformis luciferase, Rluc),分泌型膜锚定荧光素酶(Gaussia luciferase, Gluc)和薮枝虫荧光素酶(Obelia luciferase),和发光蛋白包括水母发光蛋白(Aequorin)的构成之一。其作用原理是以腔肠素为底物的荧光素酶,在含分子氧的条件下,氧化腔肠素产生高能量的中间产物,在此过程发射蓝色光,光波长在450~480nm【见图1】。而甲虫(或萤火虫)荧光素/荧光素酶(FLuc)系统不同,其在含分子氧的条件下,还需要ATP和Mg2+的存在才能同时发光,光波长在550-570nm。正由于生物发光信号和底物的差异,RLuc常常与FLuc联合用于多重转录报告基因研究,或用作Fluc系统内萤火虫荧光素酶转染的内参。腔肠素应用甚是广泛,包括:1)活细胞或组织的钙离子检测;2)细胞或组织的超氧化物和过氧亚硝基阴离子(活性氧,ROS)化学发光检测;3)基因报告基因检测;4)动物活体检测;5)ELISA和生物发光共振能量转移(BRET)用于蛋白相互作用研究;6)药物高通量筛选(HTS);

天然腔肠素(Coelenterazine Native,CTZ-Native)是自然界中存在最丰富的一种腔肠素,也是目前应用最普遍的一种标准底物。不仅是脱辅基水母发光蛋白(APO)的底物,也是海肾荧光素酶(Rluc)和分泌型膜锚定荧光素酶(Gluc)等荧光素酶的作用底物。前者用于检测钙离子浓度,后者用作荧光素酶的报告基因检测系统。还可用于生物共振能量转移BRET,细胞或组织内的超氧阴离子和过氧化亚硝基阴离子水平(ROS)的化学发光检测等。

腔肠素v(Coelenterazine v,CTZ-v)是天然腔肠素(CTZ-Native)的一种合成衍生物,多带一个苄基环。CTZ-v具有一独特的特性,能够将野生型海肾荧光素酶(wt RLuc),RLuc8和绿色海肾荧光素酶(Green RLuc)的发射光谱迁移到更长波长(见附录1 图1,图2)。

产品组分

编号 组分名称

产品货号(规格)

500UG     1MG     
A    Coelenterazine v (powder) 1×500μg 2×500μg
B Specialized Solvent for Coelenterazine v    2×500μl 4×500μl

产品特性

1)   CAS NO:N/A

2)   化学名:16-benzyl-5-hydroxy-13-[(4-hydroxyphenyl)methyl]-11,14,17-triazatetracyclo [8.7.0.0^{2,7}.0^{11,15}]heptadeca-1(10),2(7),3,5,8,13,15-heptaen-12-one

3)   同义名:CTZ-v; v-Coelenterazine; CLZN-v; v-腔肠素;

4)   分子式:C28H21N3O3

5)   分子量:447.48 g/mol

6)   纯度:≥93%

7)   外观:浅黄色粉末

8)   化学结构式:

保存与运输方法

保存:-20℃干燥避光保存,且保存于惰性气体内。至少一年有效。

运输:冰袋运输。

注意事项

1)   腔肠素(Coelenterazine, CTZ)及衍生物最好以完全冻干粉的状态保存在惰性气体内,密封后置于-20℃或-70℃长期避光保存。管内即使有微量空气,也会随着时间慢慢氧化腔肠素使其活性丧失,这样不同实验之间的定量结果可能很不可信。

2)   商业化腔肠素的种类繁多,有天然腔肠素,以及各种腔肠素衍生物(比如,腔肠素h,腔肠素400a,腔肠素e,腔肠素f,腔肠素hcp)。它们对钙离子的亲和力,光谱特性,以及应用倾向上会有差异,详见附录2—天然腔肠素及其衍生物的光谱特性,附录3—天然腔肠素及其衍生物的应用差异选择适当的产品。

3)   为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法

【注意】:最好在荧光计分析或实验前马上配制新鲜的腔肠素溶液。

1.       将低温保存的冻干粉置于-20℃回至室温,低温保存的溶剂用微量恒温仪(heat block)回至室温,之后进行短暂低速离心,使得管内组分都落到底部。

2.       往500μg腔肠素v内加入1ml 专用的腔肠素溶剂,可用微量恒温仪加热到70℃促进粉末完全溶解,混匀后即得到0.5mg/ml 储存液。【注意:不要用水浴锅加热,因溶液吸潮后会引起腔肠素v的快速降解】

3.       用PBS或TBS稀释储存液到所需的水溶性工作液(比如,若荧光计测定所需的浓度为50μM,加447.5μl(0.5mg/ml)到10ml PBS)。【注意:工作液现配现用,不可保存】

4.       腔肠素v储存液置于-80℃避光保存,避免反复冻融,有条件的话保存在氮气或氩气内。尽快用完。当储存液颜色变为深棕色/黑色,请勿继续使用,这表明药物完全降解(氧化)。

相关产品

名称 规格
             Coelenterazine Native天然腔肠素 2×500μg       
Injectable native Coelenterazine 注射用天然腔肠素     2×500μg
Coelenterazine h 腔肠素h 2×500μg
Injectable h-Coelenterazine 注射用腔肠素h 2×500μg
Coelenterazine 400 a 腔肠素400a 500μg
e-Coelenterazine 腔肠素e 500μg
Coelenterazine f 腔肠素f 500μg
Coelenterazine cp 腔肠素cp 250μg
Coelenterazine hcp 腔肠素hcp 250μg

 

Coelenterazine fcp 腔肠素fcp Aequorin 水母发光蛋白;CAS NO:123437-33-2

Coelenterazine n 腔肠素n;Coelenterazine 400 a 腔肠素400a; 海肾荧光素酶(Rluc);萤火虫荧光素酶(Fluc);Aequorin 水母发光蛋白;CAS NO:123437-33-2;

腔肠素(Coelenterazine)是在水生生物中发现的一种发光基团(luminophore),是许多荧光素酶的作用底物,包括海肾荧光素酶(Renilla reniformis luciferase, Rluc),分泌型膜锚定荧光素酶(Gaussia luciferase, Gluc)和薮枝虫荧光素酶(Obelia luciferase),和发光蛋白包括水母发光蛋白(Aequorin)的构成之一。其作用原理是以腔肠素为底物的荧光素酶,在含分子氧的条件下,氧化腔肠素产生高能量的中间产物,在此过程发射蓝色光,光波长在450~480nm【见图1】。而甲虫(或萤火虫)荧光素/荧光素酶(FLuc)系统不同,其在含分子氧的条件下,还需要ATP和Mg2+的存在才能同时发光,光波长在550-570nm。正由于生物发光信号和底物的差异,RLuc常常与FLuc联合用于多重转录报告基因研究,或用作Fluc系统内萤火虫荧光素酶转染的内参。腔肠素应用甚是广泛,包括:1)活细胞或组织的钙离子检测;2)细胞或组织的超氧化物和过氧亚硝基阴离子(活性氧,ROS)化学发光检测;3)基因报告基因检测;4)动物活体检测;5)ELISA和生物发光共振能量转移(BRET)用于蛋白相互作用研究;6)药物高通量筛选(HTS);

天然腔肠素(Coelenterazine Native,CTZ-Native)是自然界中存在最丰富的一种腔肠素,也是目前应用最普遍的一种标准底物。不仅是脱辅基水母发光蛋白(APO)的底物,也是海肾荧光素酶(Rluc)和分泌型膜锚定荧光素酶(Gluc)等荧光素酶的作用底物。前者用于检测钙离子浓度,后者用作荧光素酶的报告基因检测系统。还可用于生物共振能量转移BRET,细胞或组织内的超氧阴离子和过氧化亚硝基阴离子水平(ROS)的化学发光检测等。

腔肠素fcp(Coelenterazine fcp,CTZ-fcp)是一种天然腔肠素(CTZ-Native)的合成衍生物。腔肠素fcp形成的水母发光蛋白复合物的光强度是天然腔肠素复合物的135倍。最大发射波长为445nm。

产品特性

1)   CAS NO:123437-33-2

2)   化学名:8-(cyclopentylmethyl)-2-[(4-fluorophenyl)methyl]-6-(4-hydroxyphenyl)-imidazo[1,2-a]pyrazin- 3(7H)-one

3)   同义名:CTZ-fcp; fcp-Coelenterazine; CLZN-fcp; fcp-腔肠素;

4)   分子式:C25H24FN3O2

5)   分子量:417.48 g/mol

6)   纯度:≥97%

7)   Ex/Em:λexλem = 430/452 nm; Extinction coefficient: 7,500 (in MeOH)

8)   外观:黄色至棕色固体

9)   溶解性:溶于甲醇或乙醇,不要溶于DMSO

10) 化学结构式:

保存与运输方法

保存:-20℃干燥避光保存,且保存于惰性气体内。至少一年有效。

运输:冰袋运输。

注意事项

1)   腔肠素(Coelenterazine, CTZ)及衍生物最好以完全冻干粉的状态保存在惰性气体内,密封后置于-20℃或-70℃长期避光保存。管内即使有微量空气,也会随着时间慢慢氧化腔肠素使其活性丧失,这样不同实验之间的定量结果可能很不可信。

2)   腔肠素(Coelenterazine, CTZ)及衍生物不建议以储存液的形式保存,最好于实验前配制新鲜的溶液。不建议将配好的腔肠素溶液储存在-20℃或-70℃,因其具有一个高能量的二氧杂环丁酮环形结构,即使在低温条件下都会自发降解。

3)   商业化腔肠素的种类繁多,有天然腔肠素,以及各种腔肠素衍生物(比如,腔肠素h,腔肠素400a,腔肠素e,腔肠素f,腔肠素hcp)。它们对钙离子的亲和力,光谱特性,以及应用倾向上会有差异,详见附录1—天然腔肠素及其衍生物的光谱特性,附录2—天然腔肠素及其衍生物的应用差异选择适当的产品。

4)   为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法 

一、 腔肠素fcp的溶解事项

1)   腔肠素fcp不溶于水,接触到空气,水分或任何氧化剂都不稳定。千万不要溶于DMSO,因会发生未知反应引起腔肠素hcp的快速降解并生成未知的代谢产物。

2)   腔肠素fcp溶于甲醇或乙醇,毒性最小的溶剂是无水乙醇,可溶解粉末配制成0.1-1mg/ml溶液,之后加入需要的缓冲液,尽量保持缓冲液pH小于7.0,因大多数腔肠素衍生物在碱性条件会快速降解,有时会立即产生沉淀。

二、 腔肠素fcp的保存事项

最好在使用前,才用无水乙醇溶解腔肠素fcp粉末,然后用所选的缓冲液稀释并混匀。此时配好的工作缓冲液需静置20-30min使其稳定(因部分底物会发生自氧化)后才进行体外实验。该工作液能稳定保存几个小时(室温3-4h),仅微弱的信号衰减可能发生。

不建议将腔肠素fcp的乙醇溶液置于-20℃或-70℃保存,因天然腔肠素及任何衍生物含有一个高能量的二氧杂环丁酮环形结构,即使在低温条件下都会自发降解。若一定要保存乙醇溶液,请置于氮气或氩气下<-70℃避光保存,避免使用玻璃容器。

附录1天然腔肠素及其衍生物的光谱特性

附录2 天然腔肠素及其衍生物的应用差异

表2 –天然腔肠素及其衍生物的应用差异
产品名称 货号 应用特征
Coelenterazine native MX4606 应用非常广泛的标准底物。腔肠素是天然水母发光蛋白复合物的发光基团,也是海肾荧光素酶(Rluc)的底物。底物的快速再生(fast regeneration)比较重要的实验推荐使用天然腔肠素。

1)生物发光检测钙离子的灵敏度非常高,检测范围从0.1µM到>100µM;2)使用腔肠素监测报告基因表达是其主要应用;3)其他应用包括生物共振能量转移BRET,化学发光检测细胞或组织内的超氧阴离子和过氧化亚硝基阴离子水平(ROS);

Coelenterazine h MX4607 1)腔肠素h形成的水母发光蛋白复合物比天然腔肠素复合物的光强度高10倍以上;2)比天然腔肠素对钙离子敏感度更高;3)也适用报告基因分析。
Coelenterazine 400 a MX4610 也称为DeepBlue C,是一种腔肠素衍生物,用作海肾荧光素酶Rluc的底物,发射峰约400nm。含GFP受体的BRET研究是Rluc的首选底物,因其对GFP受体的发射波干扰非常小。不可用作Gluc底物。
Coelenterazine hcp MX4614 其生物发光强度最高(腔肠素hcp形成水母发光蛋白复合物的荧光强度比天然腔肠素复合物高190倍),对Ca2+反应速度快。
Coelenterazine cp MX4613 Coelenterazine cp产生水母发光蛋白复合物的光强度是天然腔肠素复合物的15倍,且具有更快的Ca2+反应性。
Coelenterazine f MX4612 腔肠素f形成的水母发光蛋白复合物的光强度是天然腔肠素复合物的20倍,最大发射波长约长8nm。具有最好的细胞渗透性。当需要具极高钙离子Ca2+灵敏度的水母发光蛋白复合物,建议用腔肠素f。
Coelenterazine n MX4615 所有的腔肠素衍生物中荧光强度最弱,对Ca2+反应时间明显慢于天然腔肠素。一种非常有用的低灵敏腔肠素。
Coelenterazine e MX4611 体外水母发光蛋白再生中腔肠素e的速度最高,具有双发射峰,分别为405nm和465nm,使其能在pCa 5-7范围内通过双发射峰荧光强度比率的方式测定Ca2+浓度,提高检测准确度。但由于渗透性差,不适合胞内应用。在溶液中稳定性差。
Coelenterazine i MX4616 体外腔肠素i水母发光蛋白复合物的荧光强度仅为天然腔肠素复合物的3%,在所有腔肠素衍生物种对钙离子的反应时间最慢。
Coelenterazine ip MX4618 体外腔肠素ip水母发光蛋白复合物的荧光强度几乎比天然腔肠素复合物高50倍,但对钙离子的反应时间比天然腔肠素慢。
Coelenterazine fcp MX4617 腔肠素fcp形成的水母发光蛋白复合物的光强度是天然腔肠素复合物的135倍。
Methyl Coelenterazine MX4619 非常优越的抗氧化剂,靶向细胞内来源于单态氧和超氧化物阴离子产生的活性氧物质(ROS)。

相关产品

名称 规格
              Coelenterazine Native 天然腔肠素 2×500μg          
Injectable native Coelenterazine 注射用天然腔肠素        2×500μg
Coelenterazine h 腔肠素h 2×500μg
Injectable h-Coelenterazine 注射用腔肠素h 2×500μg
Coelenterazine 400 a 腔肠素400a 500μg
e-Coelenterazine 腔肠素e 500μg
Coelenterazine f 腔肠素f 500μg
Coelenterazine cp 腔肠素cp 250μg
Coelenterazine hcp 腔肠素hcp 250μg

;Aequorin 水母发光蛋白;CAS NO:123437-33-2;Coelenterazine fcp 腔肠素fcp

Coelenterazine n 腔肠素n;Coelenterazine 400 a 腔肠素400a; 海肾荧光素酶(Rluc);萤火虫荧光素酶(Fluc);Aequorin 水母发光蛋白;CAS NO:123437-33-2;

产品信息

产品名称 产品编号 规格               价格(元)     
Coelenterazine fcp 腔肠素fcp     MX4617-50UG        50μg 1160
Coelenterazine fcp 腔肠素fcp MX4617-250UG 250μg 3384

腔肠素(Coelenterazine)是在水生生物中发现的一种发光基团(luminophore),是许多荧光素酶的作用底物,包括海肾荧光素酶(Renilla reniformis luciferase, Rluc),分泌型膜锚定荧光素酶(Gaussia luciferase, Gluc)和薮枝虫荧光素酶(Obelia luciferase),和发光蛋白包括水母发光蛋白(Aequorin)的构成之一。其作用原理是以腔肠素为底物的荧光素酶,在含分子氧的条件下,氧化腔肠素产生高能量的中间产物,在此过程发射蓝色光,光波长在450~480nm【见图1】。而甲虫(或萤火虫)荧光素/荧光素酶(FLuc)系统不同,其在含分子氧的条件下,还需要ATP和Mg2+的存在才能同时发光,光波长在550-570nm。正由于生物发光信号和底物的差异,RLuc常常与FLuc联合用于多重转录报告基因研究,或用作Fluc系统内萤火虫荧光素酶转染的内参。腔肠素应用甚是广泛,包括:1)活细胞或组织的钙离子检测;2)细胞或组织的超氧化物和过氧亚硝基阴离子(活性氧,ROS)化学发光检测;3)基因报告基因检测;4)动物活体检测;5)ELISA和生物发光共振能量转移(BRET)用于蛋白相互作用研究;6)药物高通量筛选(HTS);

天然腔肠素(Coelenterazine Native,CTZ-Native)是自然界中存在最丰富的一种腔肠素,也是目前应用最普遍的一种标准底物。不仅是脱辅基水母发光蛋白(APO)的底物,也是海肾荧光素酶(Rluc)和分泌型膜锚定荧光素酶(Gluc)等荧光素酶的作用底物。前者用于检测钙离子浓度,后者用作荧光素酶的报告基因检测系统。还可用于生物共振能量转移BRET,细胞或组织内的超氧阴离子和过氧化亚硝基阴离子水平(ROS)的化学发光检测等。

腔肠素fcp(Coelenterazine fcp,CTZ-fcp)是一种天然腔肠素(CTZ-Native)的合成衍生物。腔肠素fcp形成的水母发光蛋白复合物的光强度是天然腔肠素复合物的135倍。最大发射波长为445nm。

产品特性

1)   CAS NO:123437-33-2

2)   化学名:8-(cyclopentylmethyl)-2-[(4-fluorophenyl)methyl]-6-(4-hydroxyphenyl)-imidazo[1,2-a]pyrazin- 3(7H)-one

3)   同义名:CTZ-fcp; fcp-Coelenterazine; CLZN-fcp; fcp-腔肠素;

4)   分子式:C25H24FN3O2

5)   分子量:417.48 g/mol

6)   纯度:≥97%

7)   Ex/Em:λexλem = 430/452 nm; Extinction coefficient: 7,500 (in MeOH)

8)   外观:黄色至棕色固体

9)   溶解性:溶于甲醇或乙醇,不要溶于DMSO

10) 化学结构式:

保存与运输方法

保存:-20℃干燥避光保存,且保存于惰性气体内。至少一年有效。

运输:冰袋运输。

注意事项

1)   腔肠素(Coelenterazine, CTZ)及衍生物最好以完全冻干粉的状态保存在惰性气体内,密封后置于-20℃或-70℃长期避光保存。管内即使有微量空气,也会随着时间慢慢氧化腔肠素使其活性丧失,这样不同实验之间的定量结果可能很不可信。

2)   腔肠素(Coelenterazine, CTZ)及衍生物不建议以储存液的形式保存,最好于实验前配制新鲜的溶液。不建议将配好的腔肠素溶液储存在-20℃或-70℃,因其具有一个高能量的二氧杂环丁酮环形结构,即使在低温条件下都会自发降解。

3)   商业化腔肠素的种类繁多,有天然腔肠素,以及各种腔肠素衍生物(比如,腔肠素h,腔肠素400a,腔肠素e,腔肠素f,腔肠素hcp)。它们对钙离子的亲和力,光谱特性,以及应用倾向上会有差异,详见附录1—天然腔肠素及其衍生物的光谱特性,附录2—天然腔肠素及其衍生物的应用差异选择适当的产品。

4)   为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法 

一、 腔肠素fcp的溶解事项

1)   腔肠素fcp不溶于水,接触到空气,水分或任何氧化剂都不稳定。千万不要溶于DMSO,因会发生未知反应引起腔肠素hcp的快速降解并生成未知的代谢产物。

2)   腔肠素fcp溶于甲醇或乙醇,毒性最小的溶剂是无水乙醇,可溶解粉末配制成0.1-1mg/ml溶液,之后加入需要的缓冲液,尽量保持缓冲液pH小于7.0,因大多数腔肠素衍生物在碱性条件会快速降解,有时会立即产生沉淀。

二、 腔肠素fcp的保存事项

最好在使用前,才用无水乙醇溶解腔肠素fcp粉末,然后用所选的缓冲液稀释并混匀。此时配好的工作缓冲液需静置20-30min使其稳定(因部分底物会发生自氧化)后才进行体外实验。该工作液能稳定保存几个小时(室温3-4h),仅微弱的信号衰减可能发生。

不建议将腔肠素fcp的乙醇溶液置于-20℃或-70℃保存,因天然腔肠素及任何衍生物含有一个高能量的二氧杂环丁酮环形结构,即使在低温条件下都会自发降解。若一定要保存乙醇溶液,请置于氮气或氩气下<-70℃避光保存,避免使用玻璃容器。

附录1天然腔肠素及其衍生物的光谱特性

附录2 天然腔肠素及其衍生物的应用差异

表2 –天然腔肠素及其衍生物的应用差异
产品名称 货号 应用特征
Coelenterazine native MX4606 应用非常广泛的标准底物。腔肠素是天然水母发光蛋白复合物的发光基团,也是海肾荧光素酶(Rluc)的底物。底物的快速再生(fast regeneration)比较重要的实验推荐使用天然腔肠素。

1)生物发光检测钙离子的灵敏度非常高,检测范围从0.1µM到>100µM;2)使用腔肠素监测报告基因表达是其主要应用;3)其他应用包括生物共振能量转移BRET,化学发光检测细胞或组织内的超氧阴离子和过氧化亚硝基阴离子水平(ROS);

Coelenterazine h MX4607 1)腔肠素h形成的水母发光蛋白复合物比天然腔肠素复合物的光强度高10倍以上;2)比天然腔肠素对钙离子敏感度更高;3)也适用报告基因分析。
Coelenterazine 400 a MX4610 也称为DeepBlue C,是一种腔肠素衍生物,用作海肾荧光素酶Rluc的底物,发射峰约400nm。含GFP受体的BRET研究是Rluc的首选底物,因其对GFP受体的发射波干扰非常小。不可用作Gluc底物。
Coelenterazine hcp MX4614 其生物发光强度最高(腔肠素hcp形成水母发光蛋白复合物的荧光强度比天然腔肠素复合物高190倍),对Ca2+反应速度快。
Coelenterazine cp MX4613 Coelenterazine cp产生水母发光蛋白复合物的光强度是天然腔肠素复合物的15倍,且具有更快的Ca2+反应性。
Coelenterazine f MX4612 腔肠素f形成的水母发光蛋白复合物的光强度是天然腔肠素复合物的20倍,最大发射波长约长8nm。具有最好的细胞渗透性。当需要具极高钙离子Ca2+灵敏度的水母发光蛋白复合物,建议用腔肠素f。
Coelenterazine n MX4615 所有的腔肠素衍生物中荧光强度最弱,对Ca2+反应时间明显慢于天然腔肠素。一种非常有用的低灵敏腔肠素。
Coelenterazine e MX4611 体外水母发光蛋白再生中腔肠素e的速度最高,具有双发射峰,分别为405nm和465nm,使其能在pCa 5-7范围内通过双发射峰荧光强度比率的方式测定Ca2+浓度,提高检测准确度。但由于渗透性差,不适合胞内应用。在溶液中稳定性差。
Coelenterazine i MX4616 体外腔肠素i水母发光蛋白复合物的荧光强度仅为天然腔肠素复合物的3%,在所有腔肠素衍生物种对钙离子的反应时间最慢。
Coelenterazine ip MX4618 体外腔肠素ip水母发光蛋白复合物的荧光强度几乎比天然腔肠素复合物高50倍,但对钙离子的反应时间比天然腔肠素慢。
Coelenterazine fcp MX4617 腔肠素fcp形成的水母发光蛋白复合物的光强度是天然腔肠素复合物的135倍。
Methyl Coelenterazine MX4619 非常优越的抗氧化剂,靶向细胞内来源于单态氧和超氧化物阴离子产生的活性氧物质(ROS)。

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名称 规格
              Coelenterazine Native 天然腔肠素 2×500μg          
Injectable native Coelenterazine 注射用天然腔肠素        2×500μg
Coelenterazine h 腔肠素h 2×500μg
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Coelenterazine 400 a 腔肠素400a 500μg
e-Coelenterazine 腔肠素e 500μg
Coelenterazine f 腔肠素f 500μg
Coelenterazine cp 腔肠素cp 250μg
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Coelenterazine n 腔肠素n 海肾荧光素酶(Rluc);萤火虫荧光素酶(Fluc)

Coelenterazine n 腔肠素n;Coelenterazine 400 a 腔肠素400a; 海肾荧光素酶(Rluc);萤火虫荧光素酶(Fluc);Aequorin 水母发光蛋白;CAS NO:55779-48-1;

产品信息

产品名称 规格                  
Coelenterazine n 腔肠素n            50μg
Coelenterazine n 腔肠素n 250μg

腔肠素(Coelenterazine)是在水生生物中发现的一种发光基团(luminophore),是许多荧光素酶的作用底物,包括海肾荧光素酶(Renilla reniformis luciferase, Rluc),分泌型膜锚定荧光素酶(Gaussia luciferase, Gluc)和薮枝虫荧光素酶(Obelia luciferase),和发光蛋白包括水母发光蛋白(Aequorin)的构成之一。其作用原理是以腔肠素为底物的荧光素酶,在含分子氧的条件下,氧化腔肠素产生高能量的中间产物,在此过程发射蓝色光,光波长在450~480nm【见图1】。而甲虫(或萤火虫)荧光素/荧光素酶(FLuc)系统不同,其在含分子氧的条件下,还需要ATP和Mg2+的存在才能同时发光,光波长在550-570nm。正由于生物发光信号和底物的差异,RLuc常常与FLuc联合用于多重转录报告基因研究,或用作Fluc系统内萤火虫荧光素酶转染的内参。腔肠素应用甚是广泛,包括:1)活细胞或组织的钙离子检测;2)细胞或组织的超氧化物和过氧亚硝基阴离子(活性氧,ROS)化学发光检测;3)基因报告基因检测;4)动物活体检测;5)ELISA和生物发光共振能量转移(BRET)用于蛋白相互作用研究;6)药物高通量筛选(HTS);

天然腔肠素(Coelenterazine Native,CTZ-Native)是自然界中存在最丰富的一种腔肠素,也是目前应用最普遍的一种标准底物。不仅是脱辅基水母发光蛋白(APO)的底物,也是海肾荧光素酶(Rluc)和分泌型膜锚定荧光素酶(Gluc)等荧光素酶的作用底物。前者用于检测钙离子浓度,后者用作荧光素酶的报告基因检测系统。还可用于生物共振能量转移BRET,细胞或组织内的超氧阴离子和过氧化亚硝基阴离子水平(ROS)的化学发光检测等。

腔肠素n(Coelenterazine n,CTZ-n)是一种天然腔肠素(CTZ-Native)的合成衍生物。CTZ-n的水母发光蛋白复合物的荧光强度在所有腔肠素衍生物中是最弱的,其对钙离子的反应时间也远慢于天然腔肠素。CTZ-n据报道是一种非常有用的低灵敏腔肠素。最大发射波长为468nm。

产品特性

1)   CAS NO:N/A

2)   化学名:2-(beta-naphthylmethyl)-6-(p-hydroxyphenyl)-8-benzylimidazo[1,2-A]pyrazin-3-(7H)-one

3)   同义名:CTZ-n; n-Coelenterazine; CLZN-n; n-腔肠素;

4)   分子式:C30H23N3O2

5)   分子量:457.52 g/mol

6)   纯度:≥98%

7)   外观:黄色固体

8)   溶解性:溶于甲醇或乙醇,不要溶于DMSO

9)   化学结构式:

保存与运输方法

保存:-20℃干燥避光保存,且保存于惰性气体内。至少一年有效。

运输:冰袋运输。

注意事项

1)   腔肠素(Coelenterazine, CTZ)及衍生物最好以完全冻干粉的状态保存在惰性气体内,密封后置于-20℃或-70℃长期避光保存。管内即使有微量空气,也会随着时间慢慢氧化腔肠素使其活性丧失,这样不同实验之间的定量结果可能很不可信。

2)   腔肠素(Coelenterazine, CTZ)及衍生物不建议以储存液的形式保存,最好于实验前配制新鲜的溶液。不建议将配好的腔肠素溶液储存在-20℃或-70℃,因其具有一个高能量的二氧杂环丁酮环形结构,即使在低温条件下都会自发降解。

3)   商业化腔肠素的种类繁多,有天然腔肠素,以及各种腔肠素衍生物(比如,腔肠素h,腔肠素400a,腔肠素e,腔肠素f,腔肠素hcp)。它们对钙离子的亲和力,光谱特性,以及应用倾向上会有差异,详见附录1—天然腔肠素及其衍生物的光谱特性,附录2—天然腔肠素及其衍生物的应用差异选择适当的产品。

4)   为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法

一、 腔肠素n的溶解事项

1)   腔肠素n不溶于水,接触到空气,水分或任何氧化剂都不稳定。千万不要溶于DMSO,因会发生未知反应引起腔肠素n的快速降解并生成未知的代谢产物。

2)   腔肠素n溶于甲醇或乙醇,毒性最小的溶剂是无水乙醇,可溶解粉末配制成0.1-1mg/ml溶液,之后加入需要的缓冲液,尽量保持缓冲液pH小于7.0,因大多数腔肠素衍生物在碱性条件会快速降解,有时会立即产生沉淀。

二、 腔肠素n的保存事项

最好在使用前,才用无水乙醇溶解腔肠素n粉末,然后用所选的缓冲液稀释并混匀。此时配好的工作缓冲液需静置20-30min使其稳定(因部分底物会发生自氧化)后才进行体外实验。该工作液能稳定保存几个小时(室温3-4h),仅微弱的信号衰减可能发生。

不建议将腔肠素n的乙醇溶液置于-20℃或-70℃保存,因天然腔肠素及任何衍生物含有一个高能量的二氧杂环丁酮环形结构,即使在低温条件下都会自发降解。若一定要保存乙醇溶液,请置于氮气或氩气下<-70℃避光保存。

附录1天然腔肠素及其衍生物的光谱特性

附录2 天然腔肠素及其衍生物的应用差异

表2 –天然腔肠素及其衍生物的应用差异
产品名称 应用特征
Coelenterazine native 应用非常广泛的标准底物。腔肠素是天然水母发光蛋白复合物的发光基团,也是海肾荧光素酶(Rluc)的底物。底物的快速再生(fast regeneration)比较重要的实验推荐使用天然腔肠素。

1)生物发光检测钙离子的灵敏度非常高,检测范围从0.1µM到>100µM;2)使用腔肠素监测报告基因表达是其主要应用;3)其他应用包括生物共振能量转移BRET,化学发光检测细胞或组织内的超氧阴离子和过氧化亚硝基阴离子水平(ROS);

Coelenterazine h 1)腔肠素h形成的水母发光蛋白复合物比天然腔肠素复合物的光强度高10倍以上;2)比天然腔肠素对钙离子敏感度更高;3)也适用报告基因分析。
Coelenterazine 400 a 也称为DeepBlue C,是一种腔肠素衍生物,用作海肾荧光素酶Rluc的底物,发射峰约400nm。含GFP受体的BRET研究是Rluc的首选底物,因其对GFP受体的发射波干扰非常小。不可用作Gluc底物。
Coelenterazine hcp 其生物发光强度最高(腔肠素hcp形成水母发光蛋白复合物的荧光强度比天然腔肠素复合物高190倍),对Ca2+反应速度快。
Coelenterazine cp Coelenterazine cp产生水母发光蛋白复合物的光强度是天然腔肠素复合物的15倍,且具有更快的Ca2+反应性。
Coelenterazine f 腔肠素f形成的水母发光蛋白复合物的光强度是天然腔肠素复合物的20倍,最大发射波长约长8nm。具有最好的细胞渗透性。当需要具极高钙离子Ca2+灵敏度的水母发光蛋白复合物,建议用腔肠素f。
Coelenterazine n 所有的腔肠素衍生物中荧光强度最弱,对Ca2+反应时间明显慢于天然腔肠素。一种非常有用的低灵敏腔肠素。
Coelenterazine e 体外水母发光蛋白再生中腔肠素e的速度最高,具有双发射峰,分别为405nm和465nm,使其能在pCa 5-7范围内通过双发射峰荧光强度比率的方式测定Ca2+浓度,提高检测准确度。但由于渗透性差,不适合胞内应用。在溶液中稳定性差。
Coelenterazine i 体外腔肠素i水母发光蛋白复合物的荧光强度仅为天然腔肠素复合物的3%,在所有腔肠素衍生物种对钙离子的反应时间最慢。
Coelenterazine ip 体外腔肠素ip水母发光蛋白复合物的荧光强度几乎比天然腔肠素复合物高50倍,但对钙离子的反应时间比天然腔肠素慢。
Coelenterazine fcp 腔肠素fcp形成的水母发光蛋白复合物的光强度是天然腔肠素复合物的135倍。
Methyl Coelenterazine 非常优越的抗氧化剂,靶向细胞内来源于单态氧和超氧化物阴离子产生的活性氧物质(ROS)。

相关产品

名称 规格
             Coelenterazine Native 天然腔肠素 2×500μg          
Injectable native Coelenterazine 注射用天然腔肠素        2×500μg
Coelenterazine h 腔肠素h 2×500μg
Injectable h-Coelenterazine 注射用腔肠素h 2×500μg
Coelenterazine 400 a 腔肠素400a 500μg
e-Coelenterazine 腔肠素e 500μg
Coelenterazine f 腔肠素f 500μg
Coelenterazine cp 腔肠素cp 250μg
Coelenterazine hcp 腔肠素hcp 250μg

 

Coelenterazine hcp 腔肠素hcp CAS NO:123437-32-1

Coelenterazine hcp 腔肠素hcp;Coelenterazine 400 a 腔肠素400a; 海肾荧光素酶(Rluc);萤火虫荧光素酶(Fluc);Aequorin 水母发光蛋白;CAS NO:123437-32-1;

产品名称 规格                   
Coelenterazine hcp 腔肠素hcp           250μg
Coelenterazine hcp 腔肠素hcp 1mg

腔肠素(Coelenterazine)是在水生生物中发现的一种发光基团(luminophore),是许多荧光素酶的作用底物,包括海肾荧光素酶(Renilla reniformis luciferase, Rluc),分泌型膜锚定荧光素酶(Gaussia luciferase, Gluc)和薮枝虫荧光素酶(Obelia luciferase),和发光蛋白包括水母发光蛋白(Aequorin)的构成之一。其作用原理是以腔肠素为底物的荧光素酶,在含分子氧的条件下,氧化腔肠素产生高能量的中间产物,在此过程发射蓝色光,光波长在450~480nm【见图1】。而甲虫(或萤火虫)荧光素/荧光素酶(FLuc)系统不同,其在含分子氧的条件下,还需要ATP和Mg2+的存在才能同时发光,光波长在550-570nm。正由于生物发光信号和底物的差异,RLuc常常与FLuc联合用于多重转录报告基因研究,或用作Fluc系统内萤火虫荧光素酶转染的内参。腔肠素应用甚是广泛,包括:1)活细胞或组织的钙离子检测;2)细胞或组织的超氧化物和过氧亚硝基阴离子(活性氧,ROS)化学发光检测;3)基因报告基因检测;4)动物活体检测;5)ELISA和生物发光共振能量转移(BRET)用于蛋白相互作用研究;6)药物高通量筛选(HTS);

天然腔肠素(Coelenterazine Native,CTZ-Native)是自然界中存在最丰富的一种腔肠素,也是目前应用最普遍的一种标准底物。不仅是脱辅基水母发光蛋白(APO)的底物,也是海肾荧光素酶(Rluc)和分泌型膜锚定荧光素酶(Gluc)等荧光素酶的作用底物。前者用于检测钙离子浓度,后者用作荧光素酶的报告基因检测系统。还可用于生物共振能量转移BRET,细胞或组织内的超氧阴离子和过氧化亚硝基阴离子水平(ROS)的化学发光检测等。

腔肠素hcp(Coelenterazine hcp,CTZ-hcp)是一种天然腔肠素(CTZ-Native)的合成衍生物。与天然腔肠素水母发光蛋白复合物相比,CTZ-hcp复合物的荧光强度高190倍,且对钙离子有更快的反应时间。最大发射波长为445nm。

产品特性

1)   CAS NO:123437-32-1

2)   化学名:Imidazo[1,2-a]pyrazin-3(7H)-one, 8-(cyclopentylmethyl)-6-(4-hydroxyphenyl)-2-(phenylmethyl)-

3)   同义名:CTZ-hcp; hcp-Coelenterazine; CLZN-hcp; hcp-腔肠素;

4)   分子式:C25H25N3O2

5)   分子量:399.49 g/mol

6)   纯度:≥97%

7)   外观:黄色至棕色固体

8)   溶解性:溶于甲醇或乙醇,不要溶于DMSO

保存与运输方法

保存:-20℃干燥避光保存,且保存于惰性气体内。至少一年有效。

运输:冰袋运输。

注意事项

1)   腔肠素(Coelenterazine, CTZ)及衍生物最好以完全冻干粉的状态保存在惰性气体内,密封后置于-20℃或-70℃长期避光保存。管内即使有微量空气,也会随着时间慢慢氧化腔肠素使其活性丧失,这样不同实验之间的定量结果可能很不可信。

2)   腔肠素(Coelenterazine, CTZ)及衍生物不建议以储存液的形式保存,最好于实验前配制新鲜的溶液。不建议将配好的腔肠素溶液储存在-20℃或-70℃,因其具有一个高能量的二氧杂环丁酮环形结构,即使在低温条件下都会自发降解。

3)   商业化腔肠素的种类繁多,有天然腔肠素,以及各种腔肠素衍生物(比如,腔肠素h,腔肠素400a,腔肠素e,腔肠素f,腔肠素hcp)。它们对钙离子的亲和力,光谱特性,以及应用倾向上会有差异,详见附录1—天然腔肠素及其衍生物的光谱特性,附录2—天然腔肠素及其衍生物的应用差异选择适当的产品。

4)   为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法

一、 腔肠素hcp的溶解事项

1)   腔肠素hcp不溶于水,接触到空气,水分或任何氧化剂都不稳定。千万不要溶于DMSO,因会发生未知反应引起腔肠素hcp的快速降解并生成未知的代谢产物。

2)   腔肠素hcp溶于甲醇或乙醇,毒性最小的溶剂是无水乙醇,可溶解粉末配制成0.1-1mg/ml溶液,之后加入需要的缓冲液,尽量保持缓冲液pH小于7.0,因大多数腔肠素衍生物在碱性条件会快速降解,有时会立即产生沉淀。

二、 腔肠素hcp的保存事项

最好在使用前,才用无水乙醇溶解腔肠素hcp粉末,然后用所选的缓冲液稀释并混匀。此时配好的工作缓冲液需静置20-30min使其稳定(因部分底物会发生自氧化)后才进行体外实验。该工作液能稳定保存几个小时(室温3-4h),仅微弱的信号衰减可能发生。

不建议将腔肠素hcp的乙醇溶液置于-20℃或-70℃保存,因天然腔肠素及任何衍生物含有一个高能量的二氧杂环丁酮环形结构,即使在低温条件下都会自发降解。若一定要保存乙醇溶液,请置于氮气或氩气下<-70℃避光保存。

附录1天然腔肠素及其衍生物的光谱特性

附录2天然腔肠素及其衍生物的应用差异

表2 –天然腔肠素及其衍生物的应用差异
产品名称 货号 应用特征
Coelenterazine native 应用非常广泛的标准底物。腔肠素是天然水母发光蛋白复合物的发光基团,也是海肾荧光素酶(Rluc)的底物。底物的快速再生(fast regeneration)比较重要的实验推荐使用天然腔肠素。

1)生物发光检测钙离子的灵敏度非常高,检测范围从0.1µM到>100µM;2)使用腔肠素监测报告基因表达是其主要应用;3)其他应用包括生物共振能量转移BRET,化学发光检测细胞或组织内的超氧阴离子和过氧化亚硝基阴离子水平(ROS);

Coelenterazine h 1)腔肠素h形成的水母发光蛋白复合物比天然腔肠素复合物的光强度高10倍以上;2)比天然腔肠素对钙离子敏感度更高;3)也适用报告基因分析。
Coelenterazine 400 a 也称为DeepBlue C,是一种腔肠素衍生物,用作海肾荧光素酶Rluc的底物,发射峰约400nm。含GFP受体的BRET研究是Rluc的首选底物,因其对GFP受体的发射波干扰非常小。不可用作Gluc底物。
Coelenterazine hcp 其生物发光强度最高(腔肠素hcp形成水母发光蛋白复合物的荧光强度比天然腔肠素复合物高190倍),对Ca2+反应速度快。
Coelenterazine cp Coelenterazine cp产生水母发光蛋白复合物的光强度是天然腔肠素复合物的15倍,且具有更快的Ca2+反应性。
Coelenterazine f 腔肠素f形成的水母发光蛋白复合物的光强度是天然腔肠素复合物的20倍,最大发射波长约长8nm。具有最好的细胞渗透性。当需要具极高钙离子Ca2+灵敏度的水母发光蛋白复合物,建议用腔肠素f。
Coelenterazine n 所有的腔肠素衍生物中荧光强度最弱,对Ca2+反应时间明显慢于天然腔肠素。一种非常有用的低灵敏腔肠素。
Coelenterazine e 体外水母发光蛋白再生中腔肠素e的速度最高,具有双发射峰,分别为405nm和465nm,使其能在pCa 5-7范围内通过双发射峰荧光强度比率的方式测定Ca2+浓度,提高检测准确度。但由于渗透性差,不适合胞内应用。在溶液中稳定性差。
Coelenterazine i 体外腔肠素i水母发光蛋白复合物的荧光强度仅为天然腔肠素复合物的3%,在所有腔肠素衍生物种对钙离子的反应时间最慢。
Coelenterazine ip 体外腔肠素ip水母发光蛋白复合物的荧光强度几乎比天然腔肠素复合物高50倍,但对钙离子的反应时间比天然腔肠素慢。
Coelenterazine fcp 腔肠素fcp形成的水母发光蛋白复合物的光强度是天然腔肠素复合物的135倍。
Methyl Coelenterazine 非常优越的抗氧化剂,靶向细胞内来源于单态氧和超氧化物阴离子产生的活性氧物质(ROS)。

相关产品

名称 规格
              Coelenterazine Native 天然腔肠素 2×500μg          
Injectable native Coelenterazine 注射用天然腔肠素        2×500μg
Coelenterazine h 腔肠素h 2×500μg
Injectable h-Coelenterazine 注射用腔肠素h 2×500μg
Coelenterazine 400 a 腔肠素400a 500μg
e-Coelenterazine 腔肠素e 500μg
Coelenterazine f 腔肠素f 500μg
Coelenterazine cp 腔肠素cp 250μg
Coelenterazine hcp 腔肠素hcp 250μg

 

Coelenterazine 400 a 腔肠素400a BRET2 生物发光共振能量转移 70217-82-2

Coelenterazine 400 a 腔肠素400a;DeepBlue C;海肾荧光素酶(Rluc);萤火虫荧光素酶(Fluc);BRET2 生物发光共振能量转移 ;CAS NO:70217-82-2;

产品名称 产品编号 规格       
Coelenterazine 400 a 腔肠素400a      MX4610-500UG     500μg             
Coelenterazine 400 a 腔肠素400a MX4610-1MG 2×500μg
Coelenterazine 400 a 腔肠素400a MX4610-5MG 10×500μg

腔肠素(Coelenterazine)是在水生生物中发现的一种发光基团(luminophore),是许多荧光素酶的作用底物,包括海肾荧光素酶(Renilla reniformis luciferase, Rluc),分泌型膜锚定荧光素酶(Gaussia luciferase, Gluc)和薮枝虫荧光素酶(Obelia luciferase),和发光蛋白包括水母发光蛋白(Aequorin)的构成之一。其作用原理是以腔肠素为底物的荧光素酶,在含分子氧的条件下,氧化腔肠素产生高能量的中间产物,在此过程发射蓝色光,光波长在450~480nm【见图1】。而甲虫(或萤火虫)荧光素/荧光素酶(FLuc)系统不同,其在含分子氧的条件下,还需要ATP和Mg2+的存在才能同时发光,光波长在550-570nm。正由于生物发光信号和底物的差异,RLuc常常与FLuc联合用于多重转录报告基因研究,或用作Fluc系统内萤火虫荧光素酶转染的内参。腔肠素应用甚是广泛,包括:1)活细胞或组织的钙离子检测;2)细胞或组织的超氧化物和过氧亚硝基阴离子(活性氧,ROS)化学发光检测;3)基因报告基因检测;4)动物活体检测;5)ELISA和生物发光共振能量转移(BRET)用于蛋白相互作用研究;6)药物高通量筛选(HTS);

天然腔肠素(Coelenterazine Native,CTZ-Native)是自然界中存在最丰富的一种腔肠素,也是目前应用最普遍的一种标准底物。不仅是脱辅基水母发光蛋白(APO)的底物,也是海肾荧光素酶(Rluc)和分泌型膜锚定荧光素酶(Gluc)等荧光素酶的作用底物。前者用于检测钙离子浓度,后者用作荧光素酶的报告基因检测系统。还可用于生物共振能量转移BRET,细胞或组织内的超氧阴离子和过氧化亚硝基阴离子水平(ROS)的化学发光检测等。

腔肠素400a(Coelenterazine 400a,CTZ 400a),常称为DeepBlue C,是一种天然腔肠素衍生物,是一款良好的海肾荧光素酶(Rluc)底物,但不适合用作分泌型膜锚定荧光素酶(Gluc)底物。可用来实时监测钙离子浓度,报告基因分析,以及用作生物发光共振能量转移(BRET)的首选底物。腔肠素400a的最大射波峰值约在400nm,从而对GFP受体的发射峰干扰最小。腔肠素400a用在BRET2体系,该体系通常用来评估蛋白-蛋白相互作用,包括涉及G蛋白偶联受体介导的药物细胞信号通路分析,是一种有效的药物开发和筛选工具。

产品描述

1)   CAS NO:70217-82-2

2)   化学名:2,8-Dibenzyl-6-phenyl-imidazo[1,2a]pyrazin-3-(7H)-one; 6-phenyl-2,8-bis(phenylmethyl)-imidazo [1,2-a]pyrazin-3(7H)-one;

3)   同义名:CTZ 400a; 1-bisdeoxycoelenterazine; di-dehydrocoelenterazine; DeepBlueCTM; 腔肠素400a;

4)   分子式:C26H21N3O

5)   分子量:391.5 g/mol

6)   纯度:>97%

7)   外观:黄色至橙色固体

8)   溶解性:溶于甲醇或乙醇,不要溶于DMSO

9)   化学结构式:

保存与运输方法

保存:-20℃干燥避光保存,且保存于惰性气体内。至少一年有效。

运输:冰袋运输。

注意事项

1)   腔肠素(Coelenterazine, CTZ)及衍生物最好以完全冻干粉的状态保存在惰性气体内,密封后置于-20℃或-70℃长期避光保存。管内即使有微量空气,也会随着时间慢慢氧化腔肠素使其活性丧失。

2)   腔肠素(Coelenterazine, CTZ)及衍生物不建议以储存液的形式保存,最好于实验前配制新鲜的溶液。不建议将配好的腔肠素溶液储存在-20℃或-70℃,因其具有一个高能量的二氧杂环丁酮环形结构,即使在低温条件下都会自发降解。

3)   商业化腔肠素的种类繁多,有天然腔肠素,以及各种腔肠素衍生物(比如,腔肠素h,腔肠素400a,腔肠素e,腔肠素f,腔肠素hcp)。它们对钙离子的亲和力,光谱特性,以及应用倾向上会有差异,详见附录1—天然腔肠素及其衍生物的光谱特性,附录2—天然腔肠素及其衍生物的应用差异选择适当的产品。

4)   腔肠素400a(Coelenterazine 400a)的另一个通用名DeepBlueCTM是BioSignal Packard公司的商标名。

5)   不同的BRET系统对底物的选择上会有差异(附录3—用于PPI研究的BRET系统汇总表),腔肠素400a 主要用在BRET2系统。

6)   为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法

一、 腔肠素400a的溶解事项

1)   腔肠素400a不溶于水,接触到空气,水分或任何氧化剂都不稳定。溶于甲醇或乙醇,千万不要溶于DMSO,因会发生未知反应引起腔肠素400a的快速降解并生成未知的代谢产物。

2)   毒性最小的溶剂是无水乙醇,可溶解粉末配制成0.1-1mg/ml溶液,之后加入需要的缓冲液,尽量保持缓冲液pH小于7.0,因碱性条件会快速降解腔肠素400a,有时沉淀会立即产生。

二、 腔肠素400a的保存事项

最好在使用前,才用无水乙醇溶解腔肠素400a粉末,然后用所选的缓冲液稀释并混匀。此时配好的工作缓冲液需静置20-30min使其稳定(因部分底物会发生自氧化)后才进行体外实验。该工作液能稳定保存几个小时(室温3-4h),仅微弱的信号衰减可能发生。

不建议将腔肠素400a的乙醇溶液置于-20℃或-70℃保存,因天然腔肠素及任何衍生物含有一个高能量的二氧杂环丁酮环形结构,即使在低温条件下都会自发降解。

附录1 天然腔肠素及其衍生物的光谱特性

附录2 天然腔肠素及其衍生物的应用差异

表2 –天然腔肠素及其衍生物的应用差异

产品名称 货号 应用特征
Coelenterazine native MX4606     应用非常广泛的标准底物。腔肠素是天然水母发光蛋白复合物的发光基团,也是海肾荧光素酶(Rluc)的底物。底物的快速再生(fast regeneration)比较重要的实验推荐使用天然腔肠素。

1)生物发光检测钙离子的灵敏度非常高,检测范围从0.1µM到>100µM;2)使用腔肠素监测报告基因表达是其主要应用;3)其他应用包括生物共振能量转移BRET,化学发光检测细胞或组织内的超氧阴离子和过氧化亚硝基阴离子水平(ROS);

Coelenterazine h MX4607 1)腔肠素h形成的水母发光蛋白复合物比天然腔肠素复合物的光强度高10倍以上;2)比天然腔肠素对钙离子敏感度更高;3)也适用报告基因分析。
Coelenterazine 400 a MX4610 也称为DeepBlue C,是一种腔肠素衍生物,用作海肾荧光素酶Rluc的底物,发射峰约400nm。含GFP受体的BRET研究是Rluc的首选底物,因其对GFP受体的发射波干扰非常小。不可用作Gluc底物。
Coelenterazine hcp MX4614 其生物发光强度最高(腔肠素hcp形成水母发光蛋白复合物的荧光强度比天然腔肠素复合物高190倍),对Ca2+反应速度快。
Coelenterazine cp MX4613 Coelenterazine cp产生水母发光蛋白复合物的光强度是天然腔肠素复合物的15倍,且具有更快的Ca2+反应性。
Coelenterazine f MX4612 腔肠素f形成的水母发光蛋白复合物的光强度是天然腔肠素复合物的20倍,最大发射波长约长8nm。具有最好的细胞渗透性。当需要具极高钙离子Ca2+灵敏度的水母发光蛋白复合物,建议用腔肠素f。
Coelenterazine n MX4615 所有的腔肠素衍生物中荧光强度最弱,对Ca2+反应时间明显慢于天然腔肠素。一种非常有用的低灵敏腔肠素。
Coelenterazine e MX4611 体外水母发光蛋白再生中腔肠素e的速度最高,具有双发射峰,分别为405nm和465nm,使其能在pCa 5-7范围内通过双发射峰荧光强度比率的方式测定Ca2+浓度,提高检测准确度。但由于渗透性差,不适合胞内应用。在溶液中稳定性差。
Coelenterazine i MX4616 体外腔肠素i水母发光蛋白复合物的荧光强度仅为天然腔肠素复合物的3%,在所有腔肠素衍生物种对钙离子的反应时间最慢。
Coelenterazine ip MX4618 体外腔肠素ip水母发光蛋白复合物的荧光强度几乎比天然腔肠素复合物高50倍,但对钙离子的反应时间比天然腔肠素慢。
Coelenterazine fcp MX4617 腔肠素fcp形成的水母发光蛋白复合物的光强度是天然腔肠素复合物的135倍。
Methyl Coelenterazine MX4619 非常优越的抗氧化剂,靶向细胞内来源于单态氧和超氧化物阴离子产生的活性氧物质(ROS)。

 

附录3 用于PPI研究的BRET系统汇总表

名称§ 荧光素酶 荧光素酶最大发射* 荧光蛋白FP 荧光蛋白最大发射* 荧光素(底物) 文献来源
BRET1 Rluc/Rluc8 480 eYFP 530 Coelenterazine-h Xu et al.
BRET2 Rluc 395 GFP2 510 DeepBlueC Bertrand et al.
eBRET2 Rluc8 395 GFP2 510 DeepBlueC Kocan et al.
BRET3 (1) Rluc8 480 mOrange 564 Coelenterazine-h De et al.
BRET3 (2) Fluc 565 DsRed 583 d-Luciferin Gammon et al
eBRET Rluc 480 eYFP 530 EnduRen Pfleger et al.
BAF-Y Rluc 480 eYFP 530 ViviRen Hoshino et al.
BRET3.1 Rluc8 515 mOrange 564 Coelenterazine-v Dragulescu et al.
BRET4 Rluc8 480 TagRFP 584 Coelenterazine-h Dimri et al.
BRET4.1 Rluc8 515 TagRFP 584 Coelenterazine-v Dragulescu et al.
BRET5 Rluc8.6 535 TagRFP 584 Coelenterazine-h Dragulescu et al.
BRET6 Rluc8.6 535 TurboFP 635 Coelenterazine-h Dragulescu et al.
BRET6.1 Rluc8.6 570 TurboFP 635 Coelenterazine-v Dragulescu et al.
BRET7 Rluc8 515 TurboFP 635 Coelenterazine-v Dimri et al.
BRET8 Rluc8.6 535 TurboFP 635 Coelenterazine-h Dimri et al.
GlucBRET hGluc 470 tdTomato 580 Coelenterazine Li et al.
NanoBRET NLuc 460 HaloTag 618 Furimazine Machleidt et al.
LuxBRET LuxAB 490 eYFP 530 FMNH2 + Long-chain fatty aldehyde Cui et al.
VlucBRET Vluc 460 eYFP 530 Vargulin Otsuji et al.
§: These names are not absolute or exclusive, for reference only;*:Peak wavelength in nm

Adapted and extended from Borroto-Escuela et al. Bioluminescence resonance energy transfer methods to study G protein-coupled receptor-receptor tyrosine kinase heteroreceptor complexes. Methods Cell Biol. 2013; 117:141–164.

相关产品

货号 名称 规格
MX4606-1MG              Coelenterazine Native 天然腔肠素 2×500μg          
MX4607-1MG Injectable native Coelenterazine 注射用天然腔肠素        2×500μg
MX4608-1MG Coelenterazine h 腔肠素h 2×500μg
MX4609-1MG Injectable h-Coelenterazine 注射用腔肠素h 2×500μg
MX4610-500UG Coelenterazine 400 a 腔肠素400a 500μg
MX4611-500UG e-Coelenterazine 腔肠素e 500μg
MX4612-500UG Coelenterazine f 腔肠素f 500μg
MX4613-250UG Coelenterazine cp 腔肠素cp 250μg
MX4614-250UG Coelenterazine hcp 腔肠素hcp 250μg

Coelenterazine v 腔肠素v Aequorin 水母发光蛋白 CAS NO:55779-48-1

Coelenterazine v 腔肠素v; Coelenterazine 400 a 腔肠素400a; 海肾荧光素酶(Rluc);萤火虫荧光素酶(Fluc);Aequorin 水母发光蛋白;CAS NO:55779-48-1;

产品信息

产品名称 产品编号 规格                  
Coelenterazine v 腔肠素v      MX4620-500UG     500μg
Coelenterazine v 腔肠素v MX4620-1MG 2×500μg

产品描述

腔肠素(Coelenterazine)是在水生生物中发现的一种发光基团(luminophore),是许多荧光素酶的作用底物,包括海肾荧光素酶(Renilla reniformis luciferase, Rluc),分泌型膜锚定荧光素酶(Gaussia luciferase, Gluc)和薮枝虫荧光素酶(Obelia luciferase),和发光蛋白包括水母发光蛋白(Aequorin)的构成之一。其作用原理是以腔肠素为底物的荧光素酶,在含分子氧的条件下,氧化腔肠素产生高能量的中间产物,在此过程发射蓝色光,光波长在450~480nm【见图1】。而甲虫(或萤火虫)荧光素/荧光素酶(FLuc)系统不同,其在含分子氧的条件下,还需要ATP和Mg2+的存在才能同时发光,光波长在550-570nm。正由于生物发光信号和底物的差异,RLuc常常与FLuc联合用于多重转录报告基因研究,或用作Fluc系统内萤火虫荧光素酶转染的内参。腔肠素应用甚是广泛,包括:1)活细胞或组织的钙离子检测;2)细胞或组织的超氧化物和过氧亚硝基阴离子(活性氧,ROS)化学发光检测;3)基因报告基因检测;4)动物活体检测;5)ELISA和生物发光共振能量转移(BRET)用于蛋白相互作用研究;6)药物高通量筛选(HTS);

天然腔肠素(Coelenterazine Native,CTZ-Native)是自然界中存在最丰富的一种腔肠素,也是目前应用最普遍的一种标准底物。不仅是脱辅基水母发光蛋白(APO)的底物,也是海肾荧光素酶(Rluc)和分泌型膜锚定荧光素酶(Gluc)等荧光素酶的作用底物。前者用于检测钙离子浓度,后者用作荧光素酶的报告基因检测系统。还可用于生物共振能量转移BRET,细胞或组织内的超氧阴离子和过氧化亚硝基阴离子水平(ROS)的化学发光检测等。

腔肠素v(Coelenterazine v,CTZ-v)是天然腔肠素(CTZ-Native)的一种合成衍生物,多带一个苄基环。CTZ-v具有一独特的特性,能够将野生型海肾荧光素酶(wt RLuc),RLuc8和绿色海肾荧光素酶(Green RLuc)的发射光谱迁移到更长波长(见附录1 图1,图2)。

产品组分

编号 组分名称

产品货号(规格)

MX4620-500UG     MX4620-1MG     
MX4620-A    Coelenterazine v (powder) 1×500μg 2×500μg
MX4620-B Specialized Solvent for Coelenterazine v    2×500μl 4×500μl

产品特性

1)   CAS NO:N/A

2)   化学名:16-benzyl-5-hydroxy-13-[(4-hydroxyphenyl)methyl]-11,14,17-triazatetracyclo [8.7.0.0^{2,7}.0^{11,15}]heptadeca-1(10),2(7),3,5,8,13,15-heptaen-12-one

3)   同义名:CTZ-v; v-Coelenterazine; CLZN-v; v-腔肠素;

4)   分子式:C28H21N3O3

5)   分子量:447.48 g/mol

6)   纯度:≥93%

7)   外观:浅黄色粉末

8)   化学结构式:

保存与运输方法

保存:-20℃干燥避光保存,且保存于惰性气体内。至少一年有效。

运输:冰袋运输。

注意事项

1)   腔肠素(Coelenterazine, CTZ)及衍生物最好以完全冻干粉的状态保存在惰性气体内,密封后置于-20℃或-70℃长期避光保存。管内即使有微量空气,也会随着时间慢慢氧化腔肠素使其活性丧失,这样不同实验之间的定量结果可能很不可信。

2)   商业化腔肠素的种类繁多,有天然腔肠素,以及各种腔肠素衍生物(比如,腔肠素h,腔肠素400a,腔肠素e,腔肠素f,腔肠素hcp)。它们对钙离子的亲和力,光谱特性,以及应用倾向上会有差异,详见附录2—天然腔肠素及其衍生物的光谱特性,附录3—天然腔肠素及其衍生物的应用差异选择适当的产品。

3)   为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法

【注意】:最好在荧光计分析或实验前马上配制新鲜的腔肠素溶液。

1.       将低温保存的冻干粉置于-20℃回至室温,低温保存的溶剂用微量恒温仪(heat block)回至室温,之后进行短暂低速离心,使得管内组分都落到底部。

2.       往500μg腔肠素v内加入1ml 专用的腔肠素溶剂,可用微量恒温仪加热到70℃促进粉末完全溶解,混匀后即得到0.5mg/ml 储存液。【注意:不要用水浴锅加热,因溶液吸潮后会引起腔肠素v的快速降解】

3.       用PBS或TBS稀释储存液到所需的水溶性工作液(比如,若荧光计测定所需的浓度为50μM,加447.5μl(0.5mg/ml)到10ml PBS)。【注意:工作液现配现用,不可保存】

4.       腔肠素v储存液置于-80℃避光保存,避免反复冻融,有条件的话保存在氮气或氩气内。尽快用完。当储存液颜色变为深棕色/黑色,请勿继续使用,这表明药物完全降解(氧化)。

相关产品

货号 名称 规格
MX4606-1MG             Coelenterazine Native天然腔肠素 2×500μg       
MX4607-1MG Injectable native Coelenterazine 注射用天然腔肠素     2×500μg
MX4608-1MG Coelenterazine h 腔肠素h 2×500μg
MX4609-1MG Injectable h-Coelenterazine 注射用腔肠素h 2×500μg
MX4610-500UG Coelenterazine 400 a 腔肠素400a 500μg
MX4611-500UG e-Coelenterazine 腔肠素e 500μg
MX4612-500UG Coelenterazine f 腔肠素f 500μg
MX4613-250UG Coelenterazine cp 腔肠素cp 250μg
MX4614-250UG Coelenterazine hcp 腔肠素hcp 250μg

 

Aequorin 水母发光蛋白 Antioxidant 抗氧化剂 Methyl Coelenterazine 甲基腔肠素 CAS NO:55779-48-1

2-methyl Coelenterazine 2-甲基腔肠素; Coelenterazine 400 a 腔肠素400a; 海肾荧光素酶(Rluc);萤火虫荧光素酶(Fluc);Aequorin 水母发光蛋白;Antioxidant 抗氧化剂;CAS NO:55779-48-1;

产品信息

产品名称 产品编号 规格    
Methyl Coelenterazine 甲基腔肠素     MX4619-50UG      50μg             
Methyl Coelenterazine 甲基腔肠素 MX4619-250UG 5×50μg

产品描述

腔肠素(Coelenterazine)是在水生生物中发现的一种发光基团(luminophore),是许多荧光素酶的作用底物,包括海肾荧光素酶(Renilla reniformis luciferase, Rluc),分泌型膜锚定荧光素酶(Gaussia luciferase, Gluc)和薮枝虫荧光素酶(Obelia luciferase),和发光蛋白包括水母发光蛋白(Aequorin)的构成之一。其作用原理是以腔肠素为底物的荧光素酶,在含分子氧的条件下,氧化腔肠素产生高能量的中间产物,在此过程发射蓝色光,光波长在450~480nm【见图1】。而甲虫(或萤火虫)荧光素/荧光素酶(FLuc)系统不同,其在含分子氧的条件下,还需要ATP和Mg2+的存在才能同时发光,光波长在550-570nm。正由于生物发光信号和底物的差异,RLuc常常与FLuc联合用于多重转录报告基因研究,或用作Fluc系统内萤火虫荧光素酶转染的内参。腔肠素应用甚是广泛,包括:1)活细胞或组织的钙离子检测;2)细胞或组织的超氧化物和过氧亚硝基阴离子(活性氧,ROS)化学发光检测;3)基因报告基因检测;4)动物活体检测;5)ELISA和生物发光共振能量转移(BRET)用于蛋白相互作用研究;6)药物高通量筛选(HTS);

天然腔肠素(Coelenterazine Native,CTZ-Native)是自然界中存在最丰富的一种腔肠素,也是目前应用最普遍的一种标准底物。不仅是脱辅基水母发光蛋白(APO)的底物,也是海肾荧光素酶(Rluc)和分泌型膜锚定荧光素酶(Gluc)等荧光素酶的作用底物。前者用于检测钙离子浓度,后者用作荧光素酶的报告基因检测系统。还可用于生物共振能量转移BRET,细胞或组织内的超氧阴离子和过氧化亚硝基阴离子水平(ROS)的化学发光检测等。

甲基腔肠素(Methyl Coelenterazine)据报道是一种优秀的抗氧化剂,抵抗活性氧物质(ROS)比如单态氧和超氧化物阴离子对细胞造成的损伤。此天然腔肠素衍生物具细胞膜渗透性、无毒、且与ROS高度反应。由于氧化应激是凋亡调节剂,因此甲基腔肠素是凋亡研究的另一种重要工具。

产品特性

1)   CAS NO:N/A

2)   化学名:3,7-dihydro-2-methyl-6-(p-hydroxyphenyl)-8 benzylimidazolo[1,2-a]pyrazin-3-one

3)   同义名:CLZm; Coelenterazine, 2-methyl 腔肠素,2-甲基;2-methyl Coelenterazine 2-甲基腔肠素;

4)   分子式:C20H17N3O2

5)   分子量:331.37 g/mol

6)   纯度:≥96%

7)   外观:黄色固体

8)   溶解性:溶于甲醇或乙醇,不要溶于DMSO

9)   化学结构式:

保存与运输方法

保存:-20℃干燥避光保存,且保存于惰性气体内。至少一年有效。

运输:冰袋运输。

注意事项

1)   腔肠素(Coelenterazine, CTZ)及衍生物最好以完全冻干粉的状态保存在惰性气体内,密封后置于-20℃或-70℃长期避光保存。管内即使有微量空气,也会随着时间慢慢氧化腔肠素使其活性丧失,这样不同实验之间的定量结果可能很不可信。

2)   腔肠素(Coelenterazine, CTZ)及衍生物不建议以储存液的形式保存,最好于实验前配制新鲜的溶液。不建议将配好的腔肠素溶液储存在-20℃或-70℃,因其具有一个高能量的二氧杂环丁酮环形结构,即使在低温条件下都会自发降解。

3)   商业化腔肠素的种类繁多,有天然腔肠素,以及各种腔肠素衍生物(比如,腔肠素h,腔肠素400a,腔肠素e,腔肠素f,腔肠素hcp)。它们对钙离子的亲和力,光谱特性,以及应用倾向上会有差异,详见附录1—天然腔肠素及其衍生物的光谱特性,附录2—天然腔肠素及其衍生物的应用差异选择适当的产品。

4)   为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

附录1天然腔肠素及其衍生物的光谱特性

附录2 天然腔肠素及其衍生物的应用差异

表2 –天然腔肠素及其衍生物的应用差异
产品名称 货号 应用特征
Coelenterazine native MX4606 应用非常广泛的标准底物。腔肠素是天然水母发光蛋白复合物的发光基团,也是海肾荧光素酶(Rluc)的底物。底物的快速再生(fast regeneration)比较重要的实验推荐使用天然腔肠素。

1)生物发光检测钙离子的灵敏度非常高,检测范围从0.1µM到>100µM;2)使用腔肠素监测报告基因表达是其主要应用;3)其他应用包括生物共振能量转移BRET,化学发光检测细胞或组织内的超氧阴离子和过氧化亚硝基阴离子水平(ROS);

Coelenterazine h MX4607 1)腔肠素h形成的水母发光蛋白复合物比天然腔肠素复合物的光强度高10倍以上;2)比天然腔肠素对钙离子敏感度更高;3)也适用报告基因分析。
Coelenterazine 400 a MX4610 也称为DeepBlue C,是一种腔肠素衍生物,用作海肾荧光素酶Rluc的底物,发射峰约400nm。含GFP受体的BRET研究是Rluc的首选底物,因其对GFP受体的发射波干扰非常小。不可用作Gluc底物。
Coelenterazine hcp MX4614 其生物发光强度最高(腔肠素hcp形成水母发光蛋白复合物的荧光强度比天然腔肠素复合物高190倍),对Ca2+反应速度快。
Coelenterazine cp MX4613 Coelenterazine cp产生水母发光蛋白复合物的光强度是天然腔肠素复合物的15倍,且具有更快的Ca2+反应性。
Coelenterazine f MX4612 腔肠素f形成的水母发光蛋白复合物的光强度是天然腔肠素复合物的20倍,最大发射波长约长8nm。具有最好的细胞渗透性。当需要具极高钙离子Ca2+灵敏度的水母发光蛋白复合物,建议用腔肠素f。
Coelenterazine n MX4615 所有的腔肠素衍生物中荧光强度最弱,对Ca2+反应时间明显慢于天然腔肠素。一种非常有用的低灵敏腔肠素。
Coelenterazine e MX4611 体外水母发光蛋白再生中腔肠素e的速度最高,具有双发射峰,分别为405nm和465nm,使其能在pCa 5-7范围内通过双发射峰荧光强度比率的方式测定Ca2+浓度,提高检测准确度。但由于渗透性差,不适合胞内应用。在溶液中稳定性差。
Coelenterazine i MX4616 体外腔肠素i水母发光蛋白复合物的荧光强度仅为天然腔肠素复合物的3%,在所有腔肠素衍生物种对钙离子的反应时间最慢。
Coelenterazine ip MX4618 体外腔肠素ip水母发光蛋白复合物的荧光强度几乎比天然腔肠素复合物高50倍,但对钙离子的反应时间比天然腔肠素慢。
Coelenterazine fcp MX4617 腔肠素fcp形成的水母发光蛋白复合物的光强度是天然腔肠素复合物的135倍。
Methyl Coelenterazine MX4619 非常优越的抗氧化剂,靶向细胞内来源于单态氧和超氧化物阴离子产生的活性氧物质(ROS)。

相关产品

货号 名称 规格
MX4606-1MG              Coelenterazine Native 天然腔肠素 2×500μg          
MX4607-1MG Injectable native Coelenterazine 注射用天然腔肠素        2×500μg
MX4608-1MG Coelenterazine h 腔肠素h 2×500μg
MX4609-1MG Injectable h-Coelenterazine 注射用腔肠素h 2×500μg
MX4610-500UG Coelenterazine 400 a 腔肠素400a 500μg
MX4611-500UG e-Coelenterazine 腔肠素e 500μg
MX4612-500UG Coelenterazine f 腔肠素f 500μg
MX4613-250UG Coelenterazine cp 腔肠素cp 250μg
MX4614-250UG Coelenterazine hcp 腔肠素hcp 250μg

 

Methyl Coelenterazine 甲基腔肠素 Coelenterazine 400 a 腔肠素400a; 海肾荧光素酶(Rluc)

2-methyl Coelenterazine 2-甲基腔肠素; Coelenterazine 400 a 腔肠素400a; 海肾荧光素酶(Rluc);萤火虫荧光素酶(Fluc);Aequorin 水母发光蛋白;Antioxidant 抗氧化剂;CAS NO:55779-48-1;

产品信息

产品名称 产品编号 规格 价格(元)   
Methyl Coelenterazine 甲基腔肠素     MX4619-50UG      50μg              748
Methyl Coelenterazine 甲基腔肠素 MX4619-250UG 5×50μg 3680

产品描述

腔肠素(Coelenterazine)是在水生生物中发现的一种发光基团(luminophore),是许多荧光素酶的作用底物,包括海肾荧光素酶(Renilla reniformis luciferase, Rluc),分泌型膜锚定荧光素酶(Gaussia luciferase, Gluc)和薮枝虫荧光素酶(Obelia luciferase),和发光蛋白包括水母发光蛋白(Aequorin)的构成之一。其作用原理是以腔肠素为底物的荧光素酶,在含分子氧的条件下,氧化腔肠素产生高能量的中间产物,在此过程发射蓝色光,光波长在450~480nm【见图1】。而甲虫(或萤火虫)荧光素/荧光素酶(FLuc)系统不同,其在含分子氧的条件下,还需要ATP和Mg2+的存在才能同时发光,光波长在550-570nm。正由于生物发光信号和底物的差异,RLuc常常与FLuc联合用于多重转录报告基因研究,或用作Fluc系统内萤火虫荧光素酶转染的内参。腔肠素应用甚是广泛,包括:1)活细胞或组织的钙离子检测;2)细胞或组织的超氧化物和过氧亚硝基阴离子(活性氧,ROS)化学发光检测;3)基因报告基因检测;4)动物活体检测;5)ELISA和生物发光共振能量转移(BRET)用于蛋白相互作用研究;6)药物高通量筛选(HTS);

图1. 海肾荧光素酶(Rluc)催腔肠素发光的反应流程

天然腔肠素(Coelenterazine Native,CTZ-Native)是自然界中存在最丰富的一种腔肠素,也是目前应用最普遍的一种标准底物。不仅是脱辅基水母发光蛋白(APO)的底物,也是海肾荧光素酶(Rluc)和分泌型膜锚定荧光素酶(Gluc)等荧光素酶的作用底物。前者用于检测钙离子浓度,后者用作荧光素酶的报告基因检测系统。还可用于生物共振能量转移BRET,细胞或组织内的超氧阴离子和过氧化亚硝基阴离子水平(ROS)的化学发光检测等。

甲基腔肠素(Methyl Coelenterazine)据报道是一种优秀的抗氧化剂,抵抗活性氧物质(ROS)比如单态氧和超氧化物阴离子对细胞造成的损伤。此天然腔肠素衍生物具细胞膜渗透性、无毒、且与ROS高度反应。由于氧化应激是凋亡调节剂,因此甲基腔肠素是凋亡研究的另一种重要工具。

产品特性

1)   CAS NO:N/A

2)   化学名:3,7-dihydro-2-methyl-6-(p-hydroxyphenyl)-8 benzylimidazolo[1,2-a]pyrazin-3-one

3)   同义名:CLZm; Coelenterazine, 2-methyl 腔肠素,2-甲基;2-methyl Coelenterazine 2-甲基腔肠素;

4)   分子式:C20H17N3O2

5)   分子量:331.37 g/mol

6)   纯度:≥96%

7)   外观:黄色固体

8)   溶解性:溶于甲醇或乙醇,不要溶于DMSO

9)   化学结构式:

保存与运输方法

保存:-20℃干燥避光保存,且保存于惰性气体内。至少一年有效。

运输:冰袋运输。

注意事项

1)   腔肠素(Coelenterazine, CTZ)及衍生物最好以完全冻干粉的状态保存在惰性气体内,密封后置于-20℃或-70℃长期避光保存。管内即使有微量空气,也会随着时间慢慢氧化腔肠素使其活性丧失,这样不同实验之间的定量结果可能很不可信。

2)   腔肠素(Coelenterazine, CTZ)及衍生物不建议以储存液的形式保存,最好于实验前配制新鲜的溶液。不建议将配好的腔肠素溶液储存在-20℃或-70℃,因其具有一个高能量的二氧杂环丁酮环形结构,即使在低温条件下都会自发降解。

3)   商业化腔肠素的种类繁多,有天然腔肠素,以及各种腔肠素衍生物(比如,腔肠素h,腔肠素400a,腔肠素e,腔肠素f,腔肠素hcp)。它们对钙离子的亲和力,光谱特性,以及应用倾向上会有差异,详见附录1—天然腔肠素及其衍生物的光谱特性,附录2—天然腔肠素及其衍生物的应用差异选择适当的产品。

4)   为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

附录1天然腔肠素及其衍生物的光谱特性

附录2 天然腔肠素及其衍生物的应用差异

表2 –天然腔肠素及其衍生物的应用差异
产品名称 货号 应用特征
Coelenterazine native MX4606 应用非常广泛的标准底物。腔肠素是天然水母发光蛋白复合物的发光基团,也是海肾荧光素酶(Rluc)的底物。底物的快速再生(fast regeneration)比较重要的实验推荐使用天然腔肠素。

1)生物发光检测钙离子的灵敏度非常高,检测范围从0.1µM到>100µM;2)使用腔肠素监测报告基因表达是其主要应用;3)其他应用包括生物共振能量转移BRET,化学发光检测细胞或组织内的超氧阴离子和过氧化亚硝基阴离子水平(ROS);

Coelenterazine h MX4607 1)腔肠素h形成的水母发光蛋白复合物比天然腔肠素复合物的光强度高10倍以上;2)比天然腔肠素对钙离子敏感度更高;3)也适用报告基因分析。
Coelenterazine 400 a MX4610 也称为DeepBlue C,是一种腔肠素衍生物,用作海肾荧光素酶Rluc的底物,发射峰约400nm。含GFP受体的BRET研究是Rluc的首选底物,因其对GFP受体的发射波干扰非常小。不可用作Gluc底物。
Coelenterazine hcp MX4614 其生物发光强度最高(腔肠素hcp形成水母发光蛋白复合物的荧光强度比天然腔肠素复合物高190倍),对Ca2+反应速度快。
Coelenterazine cp MX4613 Coelenterazine cp产生水母发光蛋白复合物的光强度是天然腔肠素复合物的15倍,且具有更快的Ca2+反应性。
Coelenterazine f MX4612 腔肠素f形成的水母发光蛋白复合物的光强度是天然腔肠素复合物的20倍,最大发射波长约长8nm。具有最好的细胞渗透性。当需要具极高钙离子Ca2+灵敏度的水母发光蛋白复合物,建议用腔肠素f。
Coelenterazine n MX4615 所有的腔肠素衍生物中荧光强度最弱,对Ca2+反应时间明显慢于天然腔肠素。一种非常有用的低灵敏腔肠素。
Coelenterazine e MX4611 体外水母发光蛋白再生中腔肠素e的速度最高,具有双发射峰,分别为405nm和465nm,使其能在pCa 5-7范围内通过双发射峰荧光强度比率的方式测定Ca2+浓度,提高检测准确度。但由于渗透性差,不适合胞内应用。在溶液中稳定性差。
Coelenterazine i MX4616 体外腔肠素i水母发光蛋白复合物的荧光强度仅为天然腔肠素复合物的3%,在所有腔肠素衍生物种对钙离子的反应时间最慢。
Coelenterazine ip MX4618 体外腔肠素ip水母发光蛋白复合物的荧光强度几乎比天然腔肠素复合物高50倍,但对钙离子的反应时间比天然腔肠素慢。
Coelenterazine fcp MX4617 腔肠素fcp形成的水母发光蛋白复合物的光强度是天然腔肠素复合物的135倍。
Methyl Coelenterazine MX4619 非常优越的抗氧化剂,靶向细胞内来源于单态氧和超氧化物阴离子产生的活性氧物质(ROS)。

相关产品

货号 名称 规格
MX4606-1MG              Coelenterazine Native 天然腔肠素 2×500μg          
MX4607-1MG Injectable native Coelenterazine 注射用天然腔肠素        2×500μg
MX4608-1MG Coelenterazine h 腔肠素h 2×500μg
MX4609-1MG Injectable h-Coelenterazine 注射用腔肠素h 2×500μg
MX4610-500UG Coelenterazine 400 a 腔肠素400a 500μg
MX4611-500UG e-Coelenterazine 腔肠素e 500μg
MX4612-500UG Coelenterazine f 腔肠素f 500μg
MX4613-250UG Coelenterazine cp 腔肠素cp 250μg
MX4614-250UG Coelenterazine hcp 腔肠素hcp 250μg

 

 

Coelenterazine i 腔肠素 i Aequorin 水母发光蛋白 CAS NO:55779-48-1

Coelenterazine i 腔肠素i;Coelenterazine 400 a 腔肠素400a; 海肾荧光素酶(Rluc);萤火虫荧光素酶(Fluc);Aequorin 水母发光蛋白;CAS NO:55779-48-1;

产品信息

产品名称 产品编号 规格                  
Coelenterazine i 腔肠素i       MX4616-50UG      50μg
Coelenterazine i 腔肠素i   MX4616-250UG 250μg

产品描述

腔肠素(Coelenterazine)是在水生生物中发现的一种发光基团(luminophore),是许多荧光素酶的作用底物,包括海肾荧光素酶(Renilla reniformis luciferase, Rluc),分泌型膜锚定荧光素酶(Gaussia luciferase, Gluc)和薮枝虫荧光素酶(Obelia luciferase),和发光蛋白包括水母发光蛋白(Aequorin)的构成之一。其作用原理是以腔肠素为底物的荧光素酶,在含分子氧的条件下,氧化腔肠素产生高能量的中间产物,在此过程发射蓝色光,光波长在450~480nm【见图1】。而甲虫(或萤火虫)荧光素/荧光素酶(FLuc)系统不同,其在含分子氧的条件下,还需要ATP和Mg2+的存在才能同时发光,光波长在550-570nm。正由于生物发光信号和底物的差异,RLuc常常与FLuc联合用于多重转录报告基因研究,或用作Fluc系统内萤火虫荧光素酶转染的内参。腔肠素应用甚是广泛,包括:1)活细胞或组织的钙离子检测;2)细胞或组织的超氧化物和过氧亚硝基阴离子(活性氧,ROS)化学发光检测;3)基因报告基因检测;4)动物活体检测;5)ELISA和生物发光共振能量转移(BRET)用于蛋白相互作用研究;6)药物高通量筛选(HTS);

天然腔肠素(Coelenterazine Native,CTZ-Native)是自然界中存在最丰富的一种腔肠素,也是目前应用最普遍的一种标准底物。不仅是脱辅基水母发光蛋白(APO)的底物,也是海肾荧光素酶(Rluc)和分泌型膜锚定荧光素酶(Gluc)等荧光素酶的作用底物。前者用于检测钙离子浓度,后者用作荧光素酶的报告基因检测系统。还可用于生物共振能量转移BRET,细胞或组织内的超氧阴离子和过氧化亚硝基阴离子水平(ROS)的化学发光检测等。

腔肠素i(Coelenterazine i,CTZ-i)是一种天然腔肠素(CTZ-Native)的合成衍生物。CTZ-i的水母发光蛋白复合物的荧光强度仅为天然腔肠素复合物的3%,所有腔肠素衍生物种对钙离子的反应时间最慢。

产品特性 

1)   CAS NO:N/A

2)   同义名:CTZ-i; i-Coelenterazine; CLZN-i; i-腔肠素;

3)   分子式:C26H20IN3O2

4)   分子量:533.36 g/mol

5)   纯度:≥98%

6)   外观:黄色固体

7)   溶解性:溶于甲醇或乙醇,不要溶于DMSO

8)  化学结构式:

保存与运输方法

保存:-20℃干燥避光保存,且保存于惰性气体内。至少一年有效。

运输:冰袋运输。

注意事项

1)   腔肠素(Coelenterazine, CTZ)及衍生物最好以完全冻干粉的状态保存在惰性气体内,密封后置于-20℃或-70℃长期避光保存。管内即使有微量空气,也会随着时间慢慢氧化腔肠素使其活性丧失,这样不同实验之间的定量结果可能很不可信。

2)   腔肠素(Coelenterazine, CTZ)及衍生物不建议以储存液的形式保存,最好于实验前配制新鲜的溶液。不建议将配好的腔肠素溶液储存在-20℃或-70℃,因其具有一个高能量的二氧杂环丁酮环形结构,即使在低温条件下都会自发降解。

3)   商业化腔肠素的种类繁多,有天然腔肠素,以及各种腔肠素衍生物(比如,腔肠素h,腔肠素400a,腔肠素e,腔肠素f,腔肠素hcp)。它们对钙离子的亲和力,光谱特性,以及应用倾向上会有差异,详见附录1—天然腔肠素及其衍生物的光谱特性,附录2—天然腔肠素及其衍生物的应用差异选择适当的产品。

4)   为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法

一、 腔肠素i的溶解事项

1)   腔肠素i不溶于水,接触到空气,水分或任何氧化剂都不稳定。千万不要溶于DMSO,因会发生未知反应引起腔肠素i的快速降解并生成未知的代谢产物。

2)   腔肠素i溶于甲醇或乙醇,毒性最小的溶剂是无水乙醇,可溶解粉末配制成0.1-1mg/ml溶液,之后加入需要的缓冲液,尽量保持缓冲液pH小于7.0,因大多数腔肠素衍生物在碱性条件会快速降解,有时会立即产生沉淀。

二、 腔肠素i的保存事项

最好在使用前,才用无水乙醇溶解腔肠素n粉末,然后用所选的缓冲液稀释并混匀。此时配好的工作缓冲液需静置20-30min使其稳定(因部分底物会发生自氧化)后才进行体外实验。该工作液能稳定保存几个小时(室温3-4h),仅微弱的信号衰减可能发生。

不建议将腔肠素i的乙醇溶液置于-20℃或-70℃保存,因天然腔肠素及任何衍生物含有一个高能量的二氧杂环丁酮环形结构,即使在低温条件下都会自发降解。若一定要保存乙醇溶液,请置于氮气或氩气下<-70℃避光保存。

表2 –天然腔肠素及其衍生物的应用差异
产品名称 货号 应用特征
Coelenterazine native MX4606 应用非常广泛的标准底物。腔肠素是天然水母发光蛋白复合物的发光基团,也是海肾荧光素酶(Rluc)的底物。底物的快速再生(fast regeneration)比较重要的实验推荐使用天然腔肠素。

1)生物发光检测钙离子的灵敏度非常高,检测范围从0.1µM到>100µM;2)使用腔肠素监测报告基因表达是其主要应用;3)其他应用包括生物共振能量转移BRET,化学发光检测细胞或组织内的超氧阴离子和过氧化亚硝基阴离子水平(ROS);

Coelenterazine h MX4607 1)腔肠素h形成的水母发光蛋白复合物比天然腔肠素复合物的光强度高10倍以上;2)比天然腔肠素对钙离子敏感度更高;3)也适用报告基因分析。
Coelenterazine 400 a MX4610 也称为DeepBlue C,是一种腔肠素衍生物,用作海肾荧光素酶Rluc的底物,发射峰约400nm。含GFP受体的BRET研究是Rluc的首选底物,因其对GFP受体的发射波干扰非常小。不可用作Gluc底物。
Coelenterazine hcp MX4614 其生物发光强度最高(腔肠素hcp形成水母发光蛋白复合物的荧光强度比天然腔肠素复合物高190倍),对Ca2+反应速度快。
Coelenterazine cp MX4613 Coelenterazine cp产生水母发光蛋白复合物的光强度是天然腔肠素复合物的15倍,且具有更快的Ca2+反应性。
Coelenterazine f MX4612 腔肠素f形成的水母发光蛋白复合物的光强度是天然腔肠素复合物的20倍,最大发射波长约长8nm。具有最好的细胞渗透性。当需要具极高钙离子Ca2+灵敏度的水母发光蛋白复合物,建议用腔肠素f。
Coelenterazine n MX4615 所有的腔肠素衍生物中荧光强度最弱,对Ca2+反应时间明显慢于天然腔肠素。一种非常有用的低灵敏腔肠素。
Coelenterazine e MX4611 体外水母发光蛋白再生中腔肠素e的速度最高,具有双发射峰,分别为405nm和465nm,使其能在pCa 5-7范围内通过双发射峰荧光强度比率的方式测定Ca2+浓度,提高检测准确度。但由于渗透性差,不适合胞内应用。在溶液中稳定性差。
Coelenterazine i MX4616 体外腔肠素i水母发光蛋白复合物的荧光强度仅为天然腔肠素复合物的3%,在所有腔肠素衍生物种对钙离子的反应时间最慢。
Coelenterazine ip MX4618 体外腔肠素ip水母发光蛋白复合物的荧光强度几乎比天然腔肠素复合物高50倍,但对钙离子的反应时间比天然腔肠素慢。
Coelenterazine fcp MX4617 腔肠素fcp形成的水母发光蛋白复合物的光强度是天然腔肠素复合物的135倍。
Methyl Coelenterazine MX4619 非常优越的抗氧化剂,靶向细胞内来源于单态氧和超氧化物阴离子产生的活性氧物质(ROS)。

相关产品

货号 名称 规格
MX4606-1MG              Coelenterazine Native 天然腔肠素 2×500μg          
MX4607-1MG Injectable native Coelenterazine 注射用天然腔肠素        2×500μg
MX4608-1MG Coelenterazine h 腔肠素h 2×500μg
MX4609-1MG Injectable h-Coelenterazine 注射用腔肠素h 2×500μg
MX4610-500UG Coelenterazine 400 a 腔肠素400a 500μg
MX4611-500UG e-Coelenterazine 腔肠素e 500μg
MX4612-500UG Coelenterazine f 腔肠素f 500μg
MX4613-250UG Coelenterazine cp 腔肠素cp 250μg
MX4614-250UG Coelenterazine hcp 腔肠素hcp 250μg

 

Coelenterazine i 腔肠素 i CAS NO:55779-48-1

Coelenterazine i 腔肠素i;Coelenterazine 400 a 腔肠素400a; 海肾荧光素酶(Rluc);萤火虫荧光素酶(Fluc);Aequorin 水母发光蛋白;CAS NO:55779-48-1;

产品信息

产品名称 产品编号 规格                  
Coelenterazine i 腔肠素i       MX4616-50UG      50μg
Coelenterazine i 腔肠素i   MX4616-250UG 250μg

产品描述

腔肠素(Coelenterazine)是在水生生物中发现的一种发光基团(luminophore),是许多荧光素酶的作用底物,包括海肾荧光素酶(Renilla reniformis luciferase, Rluc),分泌型膜锚定荧光素酶(Gaussia luciferase, Gluc)和薮枝虫荧光素酶(Obelia luciferase),和发光蛋白包括水母发光蛋白(Aequorin)的构成之一。其作用原理是以腔肠素为底物的荧光素酶,在含分子氧的条件下,氧化腔肠素产生高能量的中间产物,在此过程发射蓝色光,光波长在450~480nm【见图1】。而甲虫(或萤火虫)荧光素/荧光素酶(FLuc)系统不同,其在含分子氧的条件下,还需要ATP和Mg2+的存在才能同时发光,光波长在550-570nm。正由于生物发光信号和底物的差异,RLuc常常与FLuc联合用于多重转录报告基因研究,或用作Fluc系统内萤火虫荧光素酶转染的内参。腔肠素应用甚是广泛,包括:1)活细胞或组织的钙离子检测;2)细胞或组织的超氧化物和过氧亚硝基阴离子(活性氧,ROS)化学发光检测;3)基因报告基因检测;4)动物活体检测;5)ELISA和生物发光共振能量转移(BRET)用于蛋白相互作用研究;6)药物高通量筛选(HTS);

天然腔肠素(Coelenterazine Native,CTZ-Native)是自然界中存在最丰富的一种腔肠素,也是目前应用最普遍的一种标准底物。不仅是脱辅基水母发光蛋白(APO)的底物,也是海肾荧光素酶(Rluc)和分泌型膜锚定荧光素酶(Gluc)等荧光素酶的作用底物。前者用于检测钙离子浓度,后者用作荧光素酶的报告基因检测系统。还可用于生物共振能量转移BRET,细胞或组织内的超氧阴离子和过氧化亚硝基阴离子水平(ROS)的化学发光检测等。

腔肠素i(Coelenterazine i,CTZ-i)是一种天然腔肠素(CTZ-Native)的合成衍生物。CTZ-i的水母发光蛋白复合物的荧光强度仅为天然腔肠素复合物的3%,所有腔肠素衍生物种对钙离子的反应时间最慢。

产品特性 

1)   CAS NO:N/A

2)   同义名:CTZ-i; i-Coelenterazine; CLZN-i; i-腔肠素;

3)   分子式:C26H20IN3O2

4)   分子量:533.36 g/mol

5)   纯度:≥98%

6)   外观:黄色固体

7)   溶解性:溶于甲醇或乙醇,不要溶于DMSO

保存与运输方法

保存:-20℃干燥避光保存,且保存于惰性气体内。至少一年有效。

运输:冰袋运输。

注意事项

1)   腔肠素(Coelenterazine, CTZ)及衍生物最好以完全冻干粉的状态保存在惰性气体内,密封后置于-20℃或-70℃长期避光保存。管内即使有微量空气,也会随着时间慢慢氧化腔肠素使其活性丧失,这样不同实验之间的定量结果可能很不可信。

2)   腔肠素(Coelenterazine, CTZ)及衍生物不建议以储存液的形式保存,最好于实验前配制新鲜的溶液。不建议将配好的腔肠素溶液储存在-20℃或-70℃,因其具有一个高能量的二氧杂环丁酮环形结构,即使在低温条件下都会自发降解。

3)   商业化腔肠素的种类繁多,有天然腔肠素,以及各种腔肠素衍生物(比如,腔肠素h,腔肠素400a,腔肠素e,腔肠素f,腔肠素hcp)。它们对钙离子的亲和力,光谱特性,以及应用倾向上会有差异,详见附录1—天然腔肠素及其衍生物的光谱特性,附录2—天然腔肠素及其衍生物的应用差异选择适当的产品。

4)   为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法

一、 腔肠素i的溶解事项

1)   腔肠素i不溶于水,接触到空气,水分或任何氧化剂都不稳定。千万不要溶于DMSO,因会发生未知反应引起腔肠素i的快速降解并生成未知的代谢产物。

2)   腔肠素i溶于甲醇或乙醇,毒性最小的溶剂是无水乙醇,可溶解粉末配制成0.1-1mg/ml溶液,之后加入需要的缓冲液,尽量保持缓冲液pH小于7.0,因大多数腔肠素衍生物在碱性条件会快速降解,有时会立即产生沉淀。

二、 腔肠素i的保存事项

最好在使用前,才用无水乙醇溶解腔肠素n粉末,然后用所选的缓冲液稀释并混匀。此时配好的工作缓冲液需静置20-30min使其稳定(因部分底物会发生自氧化)后才进行体外实验。该工作液能稳定保存几个小时(室温3-4h),仅微弱的信号衰减可能发生。

不建议将腔肠素i的乙醇溶液置于-20℃或-70℃保存,因天然腔肠素及任何衍生物含有一个高能量的二氧杂环丁酮环形结构,即使在低温条件下都会自发降解。若一定要保存乙醇溶液,请置于氮气或氩气下<-70℃避光保存。

附录1天然腔肠素及其衍生物的光谱特性

附录2 天然腔肠素及其衍生物的应用差异

表2 –天然腔肠素及其衍生物的应用差异
产品名称 货号 应用特征
Coelenterazine native MX4606 应用非常广泛的标准底物。腔肠素是天然水母发光蛋白复合物的发光基团,也是海肾荧光素酶(Rluc)的底物。底物的快速再生(fast regeneration)比较重要的实验推荐使用天然腔肠素。

1)生物发光检测钙离子的灵敏度非常高,检测范围从0.1µM到>100µM;2)使用腔肠素监测报告基因表达是其主要应用;3)其他应用包括生物共振能量转移BRET,化学发光检测细胞或组织内的超氧阴离子和过氧化亚硝基阴离子水平(ROS);

Coelenterazine h MX4607 1)腔肠素h形成的水母发光蛋白复合物比天然腔肠素复合物的光强度高10倍以上;2)比天然腔肠素对钙离子敏感度更高;3)也适用报告基因分析。
Coelenterazine 400 a MX4610 也称为DeepBlue C,是一种腔肠素衍生物,用作海肾荧光素酶Rluc的底物,发射峰约400nm。含GFP受体的BRET研究是Rluc的首选底物,因其对GFP受体的发射波干扰非常小。不可用作Gluc底物。
Coelenterazine hcp MX4614 其生物发光强度最高(腔肠素hcp形成水母发光蛋白复合物的荧光强度比天然腔肠素复合物高190倍),对Ca2+反应速度快。
Coelenterazine cp MX4613 Coelenterazine cp产生水母发光蛋白复合物的光强度是天然腔肠素复合物的15倍,且具有更快的Ca2+反应性。
Coelenterazine f MX4612 腔肠素f形成的水母发光蛋白复合物的光强度是天然腔肠素复合物的20倍,最大发射波长约长8nm。具有最好的细胞渗透性。当需要具极高钙离子Ca2+灵敏度的水母发光蛋白复合物,建议用腔肠素f。
Coelenterazine n MX4615 所有的腔肠素衍生物中荧光强度最弱,对Ca2+反应时间明显慢于天然腔肠素。一种非常有用的低灵敏腔肠素。
Coelenterazine e MX4611 体外水母发光蛋白再生中腔肠素e的速度最高,具有双发射峰,分别为405nm和465nm,使其能在pCa 5-7范围内通过双发射峰荧光强度比率的方式测定Ca2+浓度,提高检测准确度。但由于渗透性差,不适合胞内应用。在溶液中稳定性差。
Coelenterazine i MX4616 体外腔肠素i水母发光蛋白复合物的荧光强度仅为天然腔肠素复合物的3%,在所有腔肠素衍生物种对钙离子的反应时间最慢。
Coelenterazine ip MX4618 体外腔肠素ip水母发光蛋白复合物的荧光强度几乎比天然腔肠素复合物高50倍,但对钙离子的反应时间比天然腔肠素慢。
Coelenterazine fcp MX4617 腔肠素fcp形成的水母发光蛋白复合物的光强度是天然腔肠素复合物的135倍。
Methyl Coelenterazine MX4619 非常优越的抗氧化剂,靶向细胞内来源于单态氧和超氧化物阴离子产生的活性氧物质(ROS)。

相关产品

货号 名称 规格
MX4606-1MG              Coelenterazine Native 天然腔肠素 2×500μg          
MX4607-1MG Injectable native Coelenterazine 注射用天然腔肠素        2×500μg
MX4608-1MG Coelenterazine h 腔肠素h 2×500μg
MX4609-1MG Injectable h-Coelenterazine 注射用腔肠素h 2×500μg
MX4610-500UG Coelenterazine 400 a 腔肠素400a 500μg
MX4611-500UG e-Coelenterazine 腔肠素e 500μg
MX4612-500UG Coelenterazine f 腔肠素f 500μg
MX4613-250UG Coelenterazine cp 腔肠素cp 250μg
MX4614-250UG Coelenterazine hcp 腔肠素hcp 250μg

 

Coelenterazine n 腔肠素n Aequorin 水母发光蛋白 CAS NO:55779-48-1

Coelenterazine n 腔肠素n;Coelenterazine 400 a 腔肠素400a; 海肾荧光素酶(Rluc);萤火虫荧光素酶(Fluc);Aequorin 水母发光蛋白;CAS NO:55779-48-1;

产品信息

产品名称 产品编号 规格                  
Coelenterazine n 腔肠素n      MX4615-50UG      50μg
Coelenterazine n 腔肠素n MX4615-250UG 250μg

产品描述

腔肠素(Coelenterazine)是在水生生物中发现的一种发光基团(luminophore),是许多荧光素酶的作用底物,包括海肾荧光素酶(Renilla reniformis luciferase, Rluc),分泌型膜锚定荧光素酶(Gaussia luciferase, Gluc)和薮枝虫荧光素酶(Obelia luciferase),和发光蛋白包括水母发光蛋白(Aequorin)的构成之一。其作用原理是以腔肠素为底物的荧光素酶,在含分子氧的条件下,氧化腔肠素产生高能量的中间产物,在此过程发射蓝色光,光波长在450~480nm【见图1】。而甲虫(或萤火虫)荧光素/荧光素酶(FLuc)系统不同,其在含分子氧的条件下,还需要ATP和Mg2+的存在才能同时发光,光波长在550-570nm。正由于生物发光信号和底物的差异,RLuc常常与FLuc联合用于多重转录报告基因研究,或用作Fluc系统内萤火虫荧光素酶转染的内参。腔肠素应用甚是广泛,包括:1)活细胞或组织的钙离子检测;2)细胞或组织的超氧化物和过氧亚硝基阴离子(活性氧,ROS)化学发光检测;3)基因报告基因检测;4)动物活体检测;5)ELISA和生物发光共振能量转移(BRET)用于蛋白相互作用研究;6)药物高通量筛选(HTS);

天然腔肠素(Coelenterazine Native,CTZ-Native)是自然界中存在最丰富的一种腔肠素,也是目前应用最普遍的一种标准底物。不仅是脱辅基水母发光蛋白(APO)的底物,也是海肾荧光素酶(Rluc)和分泌型膜锚定荧光素酶(Gluc)等荧光素酶的作用底物。前者用于检测钙离子浓度,后者用作荧光素酶的报告基因检测系统。还可用于生物共振能量转移BRET,细胞或组织内的超氧阴离子和过氧化亚硝基阴离子水平(ROS)的化学发光检测等。

腔肠素n(Coelenterazine n,CTZ-n)是一种天然腔肠素(CTZ-Native)的合成衍生物。CTZ-n的水母发光蛋白复合物的荧光强度在所有腔肠素衍生物中是最弱的,其对钙离子的反应时间也远慢于天然腔肠素。CTZ-n据报道是一种非常有用的低灵敏腔肠素。最大发射波长为468nm。

产品特性

1)   CAS NO:N/A

2)   化学名:2-(beta-naphthylmethyl)-6-(p-hydroxyphenyl)-8-benzylimidazo[1,2-A]pyrazin-3-(7H)-one

3)   同义名:CTZ-n; n-Coelenterazine; CLZN-n; n-腔肠素;

4)   分子式:C30H23N3O2

5)   分子量:457.52 g/mol

6)   纯度:≥98%

7)   外观:黄色固体

8)   溶解性:溶于甲醇或乙醇,不要溶于DMSO

9)   化学结构式:

保存与运输方法

保存:-20℃干燥避光保存,且保存于惰性气体内。至少一年有效。

运输:冰袋运输。

注意事项

1)   腔肠素(Coelenterazine, CTZ)及衍生物最好以完全冻干粉的状态保存在惰性气体内,密封后置于-20℃或-70℃长期避光保存。管内即使有微量空气,也会随着时间慢慢氧化腔肠素使其活性丧失,这样不同实验之间的定量结果可能很不可信。

2)   腔肠素(Coelenterazine, CTZ)及衍生物不建议以储存液的形式保存,最好于实验前配制新鲜的溶液。不建议将配好的腔肠素溶液储存在-20℃或-70℃,因其具有一个高能量的二氧杂环丁酮环形结构,即使在低温条件下都会自发降解。

3)   商业化腔肠素的种类繁多,有天然腔肠素,以及各种腔肠素衍生物(比如,腔肠素h,腔肠素400a,腔肠素e,腔肠素f,腔肠素hcp)。它们对钙离子的亲和力,光谱特性,以及应用倾向上会有差异,详见附录1—天然腔肠素及其衍生物的光谱特性,附录2—天然腔肠素及其衍生物的应用差异选择适当的产品。

4)   为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法

一、 腔肠素n的溶解事项

1)   腔肠素n不溶于水,接触到空气,水分或任何氧化剂都不稳定。千万不要溶于DMSO,因会发生未知反应引起腔肠素n的快速降解并生成未知的代谢产物。

2)   腔肠素n溶于甲醇或乙醇,毒性最小的溶剂是无水乙醇,可溶解粉末配制成0.1-1mg/ml溶液,之后加入需要的缓冲液,尽量保持缓冲液pH小于7.0,因大多数腔肠素衍生物在碱性条件会快速降解,有时会立即产生沉淀。

二、 腔肠素n的保存事项

最好在使用前,才用无水乙醇溶解腔肠素n粉末,然后用所选的缓冲液稀释并混匀。此时配好的工作缓冲液需静置20-30min使其稳定(因部分底物会发生自氧化)后才进行体外实验。该工作液能稳定保存几个小时(室温3-4h),仅微弱的信号衰减可能发生。

不建议将腔肠素n的乙醇溶液置于-20℃或-70℃保存,因天然腔肠素及任何衍生物含有一个高能量的二氧杂环丁酮环形结构,即使在低温条件下都会自发降解。若一定要保存乙醇溶液,请置于氮气或氩气下<-70℃避光保存。

附录1天然腔肠素及其衍生物的光谱特性

附录2 天然腔肠素及其衍生物的应用差异

表2 –天然腔肠素及其衍生物的应用差异
产品名称 货号 应用特征
Coelenterazine native MX4606 应用非常广泛的标准底物。腔肠素是天然水母发光蛋白复合物的发光基团,也是海肾荧光素酶(Rluc)的底物。底物的快速再生(fast regeneration)比较重要的实验推荐使用天然腔肠素。

1)生物发光检测钙离子的灵敏度非常高,检测范围从0.1µM到>100µM;2)使用腔肠素监测报告基因表达是其主要应用;3)其他应用包括生物共振能量转移BRET,化学发光检测细胞或组织内的超氧阴离子和过氧化亚硝基阴离子水平(ROS);

Coelenterazine h MX4607 1)腔肠素h形成的水母发光蛋白复合物比天然腔肠素复合物的光强度高10倍以上;2)比天然腔肠素对钙离子敏感度更高;3)也适用报告基因分析。
Coelenterazine 400 a MX4610 也称为DeepBlue C,是一种腔肠素衍生物,用作海肾荧光素酶Rluc的底物,发射峰约400nm。含GFP受体的BRET研究是Rluc的首选底物,因其对GFP受体的发射波干扰非常小。不可用作Gluc底物。
Coelenterazine hcp MX4614 其生物发光强度最高(腔肠素hcp形成水母发光蛋白复合物的荧光强度比天然腔肠素复合物高190倍),对Ca2+反应速度快。
Coelenterazine cp MX4613 Coelenterazine cp产生水母发光蛋白复合物的光强度是天然腔肠素复合物的15倍,且具有更快的Ca2+反应性。
Coelenterazine f MX4612 腔肠素f形成的水母发光蛋白复合物的光强度是天然腔肠素复合物的20倍,最大发射波长约长8nm。具有最好的细胞渗透性。当需要具极高钙离子Ca2+灵敏度的水母发光蛋白复合物,建议用腔肠素f。
Coelenterazine n MX4615 所有的腔肠素衍生物中荧光强度最弱,对Ca2+反应时间明显慢于天然腔肠素。一种非常有用的低灵敏腔肠素。
Coelenterazine e MX4611 体外水母发光蛋白再生中腔肠素e的速度最高,具有双发射峰,分别为405nm和465nm,使其能在pCa 5-7范围内通过双发射峰荧光强度比率的方式测定Ca2+浓度,提高检测准确度。但由于渗透性差,不适合胞内应用。在溶液中稳定性差。
Coelenterazine i MX4616 体外腔肠素i水母发光蛋白复合物的荧光强度仅为天然腔肠素复合物的3%,在所有腔肠素衍生物种对钙离子的反应时间最慢。
Coelenterazine ip MX4618 体外腔肠素ip水母发光蛋白复合物的荧光强度几乎比天然腔肠素复合物高50倍,但对钙离子的反应时间比天然腔肠素慢。
Coelenterazine fcp MX4617 腔肠素fcp形成的水母发光蛋白复合物的光强度是天然腔肠素复合物的135倍。
Methyl Coelenterazine MX4619 非常优越的抗氧化剂,靶向细胞内来源于单态氧和超氧化物阴离子产生的活性氧物质(ROS)。

相关产品

货号 名称 规格
MX4606-1MG              Coelenterazine Native 天然腔肠素 2×500μg          
MX4607-1MG Injectable native Coelenterazine 注射用天然腔肠素        2×500μg
MX4608-1MG Coelenterazine h 腔肠素h 2×500μg
MX4609-1MG Injectable h-Coelenterazine 注射用腔肠素h 2×500μg
MX4610-500UG Coelenterazine 400 a 腔肠素400a 500μg
MX4611-500UG e-Coelenterazine 腔肠素e 500μg
MX4612-500UG Coelenterazine f 腔肠素f 500μg
MX4613-250UG Coelenterazine cp 腔肠素cp 250μg
MX4614-250UG Coelenterazine hcp 腔肠素hcp 250μg

 

Coelenterazine hcp 腔肠素hcp 腔肠素是在水生生物中发现的一种发光基团是许多荧光素酶的作用底物

Coelenterazine hcp 腔肠素hcp;Coelenterazine 400 a 腔肠素400a; 海肾荧光素酶(Rluc);萤火虫荧光素酶(Fluc);Aequorin 水母发光蛋白;CAS NO:123437-32-1;

产品信息

产品名称 产品编号 规格                  
Coelenterazine hcp 腔肠素hcp      MX4614-250UG     250μg
Coelenterazine hcp 腔肠素hcp MX4614-1MG 1mg

产品描述

腔肠素(Coelenterazine)是在水生生物中发现的一种发光基团(luminophore),是许多荧光素酶的作用底物,包括海肾荧光素酶(Renilla reniformis luciferase, Rluc),分泌型膜锚定荧光素酶(Gaussia luciferase, Gluc)和薮枝虫荧光素酶(Obelia luciferase),和发光蛋白包括水母发光蛋白(Aequorin)的构成之一。其作用原理是以腔肠素为底物的荧光素酶,在含分子氧的条件下,氧化腔肠素产生高能量的中间产物,在此过程发射蓝色光,光波长在450~480nm【见图1】。而甲虫(或萤火虫)荧光素/荧光素酶(FLuc)系统不同,其在含分子氧的条件下,还需要ATP和Mg2+的存在才能同时发光,光波长在550-570nm。正由于生物发光信号和底物的差异,RLuc常常与FLuc联合用于多重转录报告基因研究,或用作Fluc系统内萤火虫荧光素酶转染的内参。腔肠素应用甚是广泛,包括:1)活细胞或组织的钙离子检测;2)细胞或组织的超氧化物和过氧亚硝基阴离子(活性氧,ROS)化学发光检测;3)基因报告基因检测;4)动物活体检测;5)ELISA和生物发光共振能量转移(BRET)用于蛋白相互作用研究;6)药物高通量筛选(HTS);

天然腔肠素(Coelenterazine Native,CTZ-Native)是自然界中存在最丰富的一种腔肠素,也是目前应用最普遍的一种标准底物。不仅是脱辅基水母发光蛋白(APO)的底物,也是海肾荧光素酶(Rluc)和分泌型膜锚定荧光素酶(Gluc)等荧光素酶的作用底物。前者用于检测钙离子浓度,后者用作荧光素酶的报告基因检测系统。还可用于生物共振能量转移BRET,细胞或组织内的超氧阴离子和过氧化亚硝基阴离子水平(ROS)的化学发光检测等。

腔肠素hcp(Coelenterazine hcp,CTZ-hcp)是一种天然腔肠素(CTZ-Native)的合成衍生物。与天然腔肠素水母发光蛋白复合物相比,CTZ-hcp复合物的荧光强度高190倍,且对钙离子有更快的反应时间。最大发射波长为445nm。

产品特性

1)   CAS NO:123437-32-1

2)   化学名:Imidazo[1,2-a]pyrazin-3(7H)-one, 8-(cyclopentylmethyl)-6-(4-hydroxyphenyl)-2-(phenylmethyl)-

3)   同义名:CTZ-hcp; hcp-Coelenterazine; CLZN-hcp; hcp-腔肠素;

4)   分子式:C25H25N3O2

5)   分子量:399.49 g/mol

6)   纯度:≥97%

7)   外观:黄色至棕色固体

8)   溶解性:溶于甲醇或乙醇,不要溶于DMSO

保存与运输方法

保存:-20℃干燥避光保存,且保存于惰性气体内。至少一年有效。

运输:冰袋运输。

注意事项

1)   腔肠素(Coelenterazine, CTZ)及衍生物最好以完全冻干粉的状态保存在惰性气体内,密封后置于-20℃或-70℃长期避光保存。管内即使有微量空气,也会随着时间慢慢氧化腔肠素使其活性丧失,这样不同实验之间的定量结果可能很不可信。

2)   腔肠素(Coelenterazine, CTZ)及衍生物不建议以储存液的形式保存,最好于实验前配制新鲜的溶液。不建议将配好的腔肠素溶液储存在-20℃或-70℃,因其具有一个高能量的二氧杂环丁酮环形结构,即使在低温条件下都会自发降解。

3)   商业化腔肠素的种类繁多,有天然腔肠素,以及各种腔肠素衍生物(比如,腔肠素h,腔肠素400a,腔肠素e,腔肠素f,腔肠素hcp)。它们对钙离子的亲和力,光谱特性,以及应用倾向上会有差异,详见附录1—天然腔肠素及其衍生物的光谱特性,附录2—天然腔肠素及其衍生物的应用差异选择适当的产品。

4)   为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法

一、 腔肠素hcp的溶解事项

1)   腔肠素hcp不溶于水,接触到空气,水分或任何氧化剂都不稳定。千万不要溶于DMSO,因会发生未知反应引起腔肠素hcp的快速降解并生成未知的代谢产物。

2)   腔肠素hcp溶于甲醇或乙醇,毒性最小的溶剂是无水乙醇,可溶解粉末配制成0.1-1mg/ml溶液,之后加入需要的缓冲液,尽量保持缓冲液pH小于7.0,因大多数腔肠素衍生物在碱性条件会快速降解,有时会立即产生沉淀。

二、 腔肠素hcp的保存事项

最好在使用前,才用无水乙醇溶解腔肠素hcp粉末,然后用所选的缓冲液稀释并混匀。此时配好的工作缓冲液需静置20-30min使其稳定(因部分底物会发生自氧化)后才进行体外实验。该工作液能稳定保存几个小时(室温3-4h),仅微弱的信号衰减可能发生。

不建议将腔肠素hcp的乙醇溶液置于-20℃或-70℃保存,因天然腔肠素及任何衍生物含有一个高能量的二氧杂环丁酮环形结构,即使在低温条件下都会自发降解。若一定要保存乙醇溶液,请置于氮气或氩气下<-70℃避光保存。

附录1天然腔肠素及其衍生物的光谱特性

附录2天然腔肠素及其衍生物的应用差异

表2 –天然腔肠素及其衍生物的应用差异
产品名称 货号 应用特征
Coelenterazine native MX4606 应用非常广泛的标准底物。腔肠素是天然水母发光蛋白复合物的发光基团,也是海肾荧光素酶(Rluc)的底物。底物的快速再生(fast regeneration)比较重要的实验推荐使用天然腔肠素。

1)生物发光检测钙离子的灵敏度非常高,检测范围从0.1µM到>100µM;2)使用腔肠素监测报告基因表达是其主要应用;3)其他应用包括生物共振能量转移BRET,化学发光检测细胞或组织内的超氧阴离子和过氧化亚硝基阴离子水平(ROS);

Coelenterazine h MX4607 1)腔肠素h形成的水母发光蛋白复合物比天然腔肠素复合物的光强度高10倍以上;2)比天然腔肠素对钙离子敏感度更高;3)也适用报告基因分析。
Coelenterazine 400 a MX4610 也称为DeepBlue C,是一种腔肠素衍生物,用作海肾荧光素酶Rluc的底物,发射峰约400nm。含GFP受体的BRET研究是Rluc的首选底物,因其对GFP受体的发射波干扰非常小。不可用作Gluc底物。
Coelenterazine hcp MX4614 其生物发光强度最高(腔肠素hcp形成水母发光蛋白复合物的荧光强度比天然腔肠素复合物高190倍),对Ca2+反应速度快。
Coelenterazine cp MX4613 Coelenterazine cp产生水母发光蛋白复合物的光强度是天然腔肠素复合物的15倍,且具有更快的Ca2+反应性。
Coelenterazine f MX4612 腔肠素f形成的水母发光蛋白复合物的光强度是天然腔肠素复合物的20倍,最大发射波长约长8nm。具有最好的细胞渗透性。当需要具极高钙离子Ca2+灵敏度的水母发光蛋白复合物,建议用腔肠素f。
Coelenterazine n MX4615 所有的腔肠素衍生物中荧光强度最弱,对Ca2+反应时间明显慢于天然腔肠素。一种非常有用的低灵敏腔肠素。
Coelenterazine e MX4611 体外水母发光蛋白再生中腔肠素e的速度最高,具有双发射峰,分别为405nm和465nm,使其能在pCa 5-7范围内通过双发射峰荧光强度比率的方式测定Ca2+浓度,提高检测准确度。但由于渗透性差,不适合胞内应用。在溶液中稳定性差。
Coelenterazine i MX4616 体外腔肠素i水母发光蛋白复合物的荧光强度仅为天然腔肠素复合物的3%,在所有腔肠素衍生物种对钙离子的反应时间最慢。
Coelenterazine ip MX4618 体外腔肠素ip水母发光蛋白复合物的荧光强度几乎比天然腔肠素复合物高50倍,但对钙离子的反应时间比天然腔肠素慢。
Coelenterazine fcp MX4617 腔肠素fcp形成的水母发光蛋白复合物的光强度是天然腔肠素复合物的135倍。
Methyl Coelenterazine MX4619 非常优越的抗氧化剂,靶向细胞内来源于单态氧和超氧化物阴离子产生的活性氧物质(ROS)。

相关产品

货号 名称 规格
MX4606-1MG              Coelenterazine Native 天然腔肠素 2×500μg          
MX4607-1MG Injectable native Coelenterazine 注射用天然腔肠素        2×500μg
MX4608-1MG Coelenterazine h 腔肠素h 2×500μg
MX4609-1MG Injectable h-Coelenterazine 注射用腔肠素h 2×500μg
MX4610-500UG Coelenterazine 400 a 腔肠素400a 500μg
MX4611-500UG e-Coelenterazine 腔肠素e 500μg
MX4612-500UG Coelenterazine f 腔肠素f 500μg
MX4613-250UG Coelenterazine cp 腔肠素cp 250μg
MX4614-250UG Coelenterazine hcp 腔肠素hcp 250μg

 

 

Coelenterazine cp 腔肠素cp Aequorin 水母发光蛋白 CAS NO:123437-25-2

Coelenterazine cp 腔肠素cp;Coelenterazine 400 a 腔肠素400a; 海肾荧光素酶(Rluc);萤火虫荧光素酶(Fluc);Aequorin 水母发光蛋白;CAS NO:123437-25-2;

产品信息

产品名称 产品编号 规格                  
Coelenterazine cp 腔肠素cp      MX4613-250UG      250μg
Coelenterazine cp 腔肠素cp MX4613-1MG 1mg

产品描述

腔肠素(Coelenterazine)是在水生生物中发现的一种发光基团(luminophore),是许多荧光素酶的作用底物,包括海肾荧光素酶(Renilla reniformis luciferase, Rluc),分泌型膜锚定荧光素酶(Gaussia luciferase, Gluc)和薮枝虫荧光素酶(Obelia luciferase),和发光蛋白包括水母发光蛋白(Aequorin)的构成之一。其作用原理是以腔肠素为底物的荧光素酶,在含分子氧的条件下,氧化腔肠素产生高能量的中间产物,在此过程发射蓝色光,光波长在450~480nm【见图1】。而甲虫(或萤火虫)荧光素/荧光素酶(FLuc)系统不同,其在含分子氧的条件下,还需要ATP和Mg2+的存在才能同时发光,光波长在550-570nm。正由于生物发光信号和底物的差异,RLuc常常与FLuc联合用于多重转录报告基因研究,或用作Fluc系统内萤火虫荧光素酶转染的内参。腔肠素应用甚是广泛,包括:1)活细胞或组织的钙离子检测;2)细胞或组织的超氧化物和过氧亚硝基阴离子(活性氧,ROS)化学发光检测;3)基因报告基因检测;4)动物活体检测;5)ELISA和生物发光共振能量转移(BRET)用于蛋白相互作用研究;6)药物高通量筛选(HTS);

天然腔肠素(Coelenterazine Native,CTZ-Native)是自然界中存在最丰富的一种腔肠素,也是目前应用最普遍的一种标准底物。不仅是脱辅基水母发光蛋白(APO)的底物,也是海肾荧光素酶(Rluc)和分泌型膜锚定荧光素酶(Gluc)等荧光素酶的作用底物。前者用于检测钙离子浓度,后者用作荧光素酶的报告基因检测系统。还可用于生物共振能量转移BRET,细胞或组织内的超氧阴离子和过氧化亚硝基阴离子水平(ROS)的化学发光检测等。

腔肠素cp(Coelenterazine cp,CTZ-cp)是一种天然腔肠素(CTZ-Native)的合成衍生物。与天然腔肠素水母发光蛋白复合物相比,CTZ-cp复合物的荧光强度高15倍,且对钙离子有更快的反应时间。最大发射波长为442nm。

产品特性

1)   CAS NO:123437-25-2

2)   化学名:8-(cyclopentylmethyl)-6-(4-hydroxyphenyl)-2-[(4-hydroxyphenyl)methyl]-7H-imidazo[1,2- a]pyrazin-3-one

3)   同义名:CTZ-cp; cp-Coelenterazine; CLZN-cp; cp-腔肠素;

4)   分子式:C25H25N3O3

5)   分子量:415.48 g/mol

6)   纯度:≥97%

7)   外观:黄色固体

8)   溶解性:溶于甲醇或乙醇,不要溶于DMSO

9)   化学结构式:

保存与运输方法

保存:-20℃干燥避光保存,且保存于惰性气体内。至少一年有效。

运输:冰袋运输。

注意事项

1)   腔肠素(Coelenterazine, CTZ)及衍生物最好以完全冻干粉的状态保存在惰性气体内,密封后置于-20℃或-70℃长期避光保存。管内即使有微量空气,也会随着时间慢慢氧化腔肠素使其活性丧失,这样不同实验之间的定量结果可能很不可信。

2)   腔肠素(Coelenterazine, CTZ)及衍生物不建议以储存液的形式保存,最好于实验前配制新鲜的溶液。不建议将配好的腔肠素溶液储存在-20℃或-70℃,因其具有一个高能量的二氧杂环丁酮环形结构,即使在低温条件下都会自发降解。

3)   商业化腔肠素的种类繁多,有天然腔肠素,以及各种腔肠素衍生物(比如,腔肠素h,腔肠素400a,腔肠素e,腔肠素f,腔肠素hcp)。它们对钙离子的亲和力,光谱特性,以及应用倾向上会有差异,详见附录1—天然腔肠素及其衍生物的光谱特性,附录2—天然腔肠素及其衍生物的应用差异选择适当的产品。

4)   为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法

一、 腔肠素cp的溶解事项

1)   腔肠素cp不溶于水,接触到空气,水分或任何氧化剂都不稳定。千万不要溶于DMSO,因会发生未知反应引起腔肠素cp的快速降解并生成未知的代谢产物。

2)   腔肠素cp溶于甲醇或乙醇,毒性最小的溶剂是无水乙醇,可溶解粉末配制成0.1-1mg/ml溶液,之后加入需要的缓冲液,尽量保持缓冲液pH小于7.0,因大多数腔肠素衍生物在碱性条件会快速降解,有时会立即产生沉淀。

二、 腔肠素cp的保存事项

最好在使用前,才用无水乙醇溶解腔肠素cp粉末,然后用所选的缓冲液稀释并混匀。此时配好的工作缓冲液需静置20-30min使其稳定(因部分底物会发生自氧化)后才进行体外实验。该工作液能稳定保存几个小时(室温3-4h),仅微弱的信号衰减可能发生。

不建议将腔肠素cp的乙醇溶液置于-20℃或-70℃保存,因天然腔肠素及任何衍生物含有一个高能量的二氧杂环丁酮环形结构,即使在低温条件下都会自发降解。若一定要保存乙醇溶液,请置于氮气或氩气下<-70℃避光保存。

附录1天然腔肠素及其衍生物的光谱特性

附录2 天然腔肠素及其衍生物的应用差异

表2 –天然腔肠素及其衍生物的应用差异
产品名称 货号 应用特征
Coelenterazine native MX4606 应用非常广泛的标准底物。腔肠素是天然水母发光蛋白复合物的发光基团,也是海肾荧光素酶(Rluc)的底物。底物的快速再生(fast regeneration)比较重要的实验推荐使用天然腔肠素。

1)生物发光检测钙离子的灵敏度非常高,检测范围从0.1µM到>100µM;2)使用腔肠素监测报告基因表达是其主要应用;3)其他应用包括生物共振能量转移BRET,化学发光检测细胞或组织内的超氧阴离子和过氧化亚硝基阴离子水平(ROS);

Coelenterazine h MX4607 1)腔肠素h形成的水母发光蛋白复合物比天然腔肠素复合物的光强度高10倍以上;2)比天然腔肠素对钙离子敏感度更高;3)也适用报告基因分析。
Coelenterazine 400 a MX4610 也称为DeepBlue C,是一种腔肠素衍生物,用作海肾荧光素酶Rluc的底物,发射峰约400nm。含GFP受体的BRET研究是Rluc的首选底物,因其对GFP受体的发射波干扰非常小。不可用作Gluc底物。
Coelenterazine hcp MX4614 其生物发光强度最高(腔肠素hcp形成水母发光蛋白复合物的荧光强度比天然腔肠素复合物高190倍),对Ca2+反应速度快。
Coelenterazine cp MX4613 Coelenterazine cp产生水母发光蛋白复合物的光强度是天然腔肠素复合物的15倍,且具有更快的Ca2+反应性。
Coelenterazine f MX4612 腔肠素f形成的水母发光蛋白复合物的光强度是天然腔肠素复合物的20倍,最大发射波长约长8nm。具有最好的细胞渗透性。当需要具极高钙离子Ca2+灵敏度的水母发光蛋白复合物,建议用腔肠素f。
Coelenterazine n MX4615 所有的腔肠素衍生物中荧光强度最弱,对Ca2+反应时间明显慢于天然腔肠素。一种非常有用的低灵敏腔肠素。
Coelenterazine e MX4611 体外水母发光蛋白再生中腔肠素e的速度最高,具有双发射峰,分别为405nm和465nm,使其能在pCa 5-7范围内通过双发射峰荧光强度比率的方式测定Ca2+浓度,提高检测准确度。但由于渗透性差,不适合胞内应用。在溶液中稳定性差。
Coelenterazine i MX4616 体外腔肠素i水母发光蛋白复合物的荧光强度仅为天然腔肠素复合物的3%,在所有腔肠素衍生物种对钙离子的反应时间最慢。
Coelenterazine ip MX4618 体外腔肠素ip水母发光蛋白复合物的荧光强度几乎比天然腔肠素复合物高50倍,但对钙离子的反应时间比天然腔肠素慢。
Coelenterazine fcp MX4617 腔肠素fcp形成的水母发光蛋白复合物的光强度是天然腔肠素复合物的135倍。
Methyl Coelenterazine MX4619 非常优越的抗氧化剂,靶向细胞内来源于单态氧和超氧化物阴离子产生的活性氧物质(ROS)。

相关产品

货号 名称 规格
MX4606-1MG              Coelenterazine Native 天然腔肠素 2×500μg          
MX4607-1MG Injectable native Coelenterazine 注射用天然腔肠素        2×500μg
MX4608-1MG Coelenterazine h 腔肠素h 2×500μg
MX4609-1MG Injectable h-Coelenterazine 注射用腔肠素h 2×500μg
MX4610-500UG Coelenterazine 400 a 腔肠素400a 500μg
MX4611-500UG e-Coelenterazine 腔肠素e 500μg
MX4612-500UG Coelenterazine f 腔肠素f 500μg
MX4613-250UG Coelenterazine cp 腔肠素cp 250μg
MX4614-250UG Coelenterazine hcp 腔肠素hcp 250μg

 

Coelenterazine cp 腔肠素cp Aequorin 水母发光蛋白 CAS NO:123437-25-2

Coelenterazine cp 腔肠素cp;Coelenterazine 400 a 腔肠素400a; 海肾荧光素酶(Rluc);萤火虫荧光素酶(Fluc);Aequorin 水母发光蛋白;CAS NO:123437-25-2;

产品信息

产品名称 产品编号 规格                  
Coelenterazine cp 腔肠素cp      MX4613-250UG      250μg
Coelenterazine cp 腔肠素cp MX4613-1MG 1mg

产品描述

腔肠素(Coelenterazine)是在水生生物中发现的一种发光基团(luminophore),是许多荧光素酶的作用底物,包括海肾荧光素酶(Renilla reniformis luciferase, Rluc),分泌型膜锚定荧光素酶(Gaussia luciferase, Gluc)和薮枝虫荧光素酶(Obelia luciferase),和发光蛋白包括水母发光蛋白(Aequorin)的构成之一。其作用原理是以腔肠素为底物的荧光素酶,在含分子氧的条件下,氧化腔肠素产生高能量的中间产物,在此过程发射蓝色光,光波长在450~480nm【见图1】。而甲虫(或萤火虫)荧光素/荧光素酶(FLuc)系统不同,其在含分子氧的条件下,还需要ATP和Mg2+的存在才能同时发光,光波长在550-570nm。正由于生物发光信号和底物的差异,RLuc常常与FLuc联合用于多重转录报告基因研究,或用作Fluc系统内萤火虫荧光素酶转染的内参。腔肠素应用甚是广泛,包括:1)活细胞或组织的钙离子检测;2)细胞或组织的超氧化物和过氧亚硝基阴离子(活性氧,ROS)化学发光检测;3)基因报告基因检测;4)动物活体检测;5)ELISA和生物发光共振能量转移(BRET)用于蛋白相互作用研究;6)药物高通量筛选(HTS);

天然腔肠素(Coelenterazine Native,CTZ-Native)是自然界中存在最丰富的一种腔肠素,也是目前应用最普遍的一种标准底物。不仅是脱辅基水母发光蛋白(APO)的底物,也是海肾荧光素酶(Rluc)和分泌型膜锚定荧光素酶(Gluc)等荧光素酶的作用底物。前者用于检测钙离子浓度,后者用作荧光素酶的报告基因检测系统。还可用于生物共振能量转移BRET,细胞或组织内的超氧阴离子和过氧化亚硝基阴离子水平(ROS)的化学发光检测等。

腔肠素cp(Coelenterazine cp,CTZ-cp)是一种天然腔肠素(CTZ-Native)的合成衍生物。与天然腔肠素水母发光蛋白复合物相比,CTZ-cp复合物的荧光强度高15倍,且对钙离子有更快的反应时间。最大发射波长为442nm。

产品特性

1)   CAS NO:123437-25-2

2)   化学名:8-(cyclopentylmethyl)-6-(4-hydroxyphenyl)-2-[(4-hydroxyphenyl)methyl]-7H-imidazo[1,2- a]pyrazin-3-one

3)   同义名:CTZ-cp; cp-Coelenterazine; CLZN-cp; cp-腔肠素;

4)   分子式:C25H25N3O3

5)   分子量:415.48 g/mol

6)   纯度:≥97%

7)   外观:黄色固体

8)   溶解性:溶于甲醇或乙醇,不要溶于DMSO

9)   化学结构式:

保存与运输方法

保存:-20℃干燥避光保存,且保存于惰性气体内。至少一年有效。

运输:冰袋运输。

注意事项

1)   腔肠素(Coelenterazine, CTZ)及衍生物最好以完全冻干粉的状态保存在惰性气体内,密封后置于-20℃或-70℃长期避光保存。管内即使有微量空气,也会随着时间慢慢氧化腔肠素使其活性丧失,这样不同实验之间的定量结果可能很不可信。

2)   腔肠素(Coelenterazine, CTZ)及衍生物不建议以储存液的形式保存,最好于实验前配制新鲜的溶液。不建议将配好的腔肠素溶液储存在-20℃或-70℃,因其具有一个高能量的二氧杂环丁酮环形结构,即使在低温条件下都会自发降解。

3)   商业化腔肠素的种类繁多,有天然腔肠素,以及各种腔肠素衍生物(比如,腔肠素h,腔肠素400a,腔肠素e,腔肠素f,腔肠素hcp)。它们对钙离子的亲和力,光谱特性,以及应用倾向上会有差异,详见附录1—天然腔肠素及其衍生物的光谱特性,附录2—天然腔肠素及其衍生物的应用差异选择适当的产品。

4)   为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法

一、 腔肠素cp的溶解事项

1)   腔肠素cp不溶于水,接触到空气,水分或任何氧化剂都不稳定。千万不要溶于DMSO,因会发生未知反应引起腔肠素cp的快速降解并生成未知的代谢产物。

2)   腔肠素cp溶于甲醇或乙醇,毒性最小的溶剂是无水乙醇,可溶解粉末配制成0.1-1mg/ml溶液,之后加入需要的缓冲液,尽量保持缓冲液pH小于7.0,因大多数腔肠素衍生物在碱性条件会快速降解,有时会立即产生沉淀。

二、 腔肠素cp的保存事项

最好在使用前,才用无水乙醇溶解腔肠素cp粉末,然后用所选的缓冲液稀释并混匀。此时配好的工作缓冲液需静置20-30min使其稳定(因部分底物会发生自氧化)后才进行体外实验。该工作液能稳定保存几个小时(室温3-4h),仅微弱的信号衰减可能发生。

不建议将腔肠素cp的乙醇溶液置于-20℃或-70℃保存,因天然腔肠素及任何衍生物含有一个高能量的二氧杂环丁酮环形结构,即使在低温条件下都会自发降解。若一定要保存乙醇溶液,请置于氮气或氩气下<-70℃避光保存。

附录1天然腔肠素及其衍生物的光谱特性

附录2 天然腔肠素及其衍生物的应用差异

表2 –天然腔肠素及其衍生物的应用差异
产品名称 货号 应用特征
Coelenterazine native MX4606 应用非常广泛的标准底物。腔肠素是天然水母发光蛋白复合物的发光基团,也是海肾荧光素酶(Rluc)的底物。底物的快速再生(fast regeneration)比较重要的实验推荐使用天然腔肠素。

1)生物发光检测钙离子的灵敏度非常高,检测范围从0.1µM到>100µM;2)使用腔肠素监测报告基因表达是其主要应用;3)其他应用包括生物共振能量转移BRET,化学发光检测细胞或组织内的超氧阴离子和过氧化亚硝基阴离子水平(ROS);

Coelenterazine h MX4607 1)腔肠素h形成的水母发光蛋白复合物比天然腔肠素复合物的光强度高10倍以上;2)比天然腔肠素对钙离子敏感度更高;3)也适用报告基因分析。
Coelenterazine 400 a MX4610 也称为DeepBlue C,是一种腔肠素衍生物,用作海肾荧光素酶Rluc的底物,发射峰约400nm。含GFP受体的BRET研究是Rluc的首选底物,因其对GFP受体的发射波干扰非常小。不可用作Gluc底物。
Coelenterazine hcp MX4614 其生物发光强度最高(腔肠素hcp形成水母发光蛋白复合物的荧光强度比天然腔肠素复合物高190倍),对Ca2+反应速度快。
Coelenterazine cp MX4613 Coelenterazine cp产生水母发光蛋白复合物的光强度是天然腔肠素复合物的15倍,且具有更快的Ca2+反应性。
Coelenterazine f MX4612 腔肠素f形成的水母发光蛋白复合物的光强度是天然腔肠素复合物的20倍,最大发射波长约长8nm。具有最好的细胞渗透性。当需要具极高钙离子Ca2+灵敏度的水母发光蛋白复合物,建议用腔肠素f。
Coelenterazine n MX4615 所有的腔肠素衍生物中荧光强度最弱,对Ca2+反应时间明显慢于天然腔肠素。一种非常有用的低灵敏腔肠素。
Coelenterazine e MX4611 体外水母发光蛋白再生中腔肠素e的速度最高,具有双发射峰,分别为405nm和465nm,使其能在pCa 5-7范围内通过双发射峰荧光强度比率的方式测定Ca2+浓度,提高检测准确度。但由于渗透性差,不适合胞内应用。在溶液中稳定性差。
Coelenterazine i MX4616 体外腔肠素i水母发光蛋白复合物的荧光强度仅为天然腔肠素复合物的3%,在所有腔肠素衍生物种对钙离子的反应时间最慢。
Coelenterazine ip MX4618 体外腔肠素ip水母发光蛋白复合物的荧光强度几乎比天然腔肠素复合物高50倍,但对钙离子的反应时间比天然腔肠素慢。
Coelenterazine fcp MX4617 腔肠素fcp形成的水母发光蛋白复合物的光强度是天然腔肠素复合物的135倍。
Methyl Coelenterazine MX4619 非常优越的抗氧化剂,靶向细胞内来源于单态氧和超氧化物阴离子产生的活性氧物质(ROS)。

相关产品

货号 名称 规格
MX4606-1MG              Coelenterazine Native 天然腔肠素 2×500μg          
MX4607-1MG Injectable native Coelenterazine 注射用天然腔肠素        2×500μg
MX4608-1MG Coelenterazine h 腔肠素h 2×500μg
MX4609-1MG Injectable h-Coelenterazine 注射用腔肠素h 2×500μg
MX4610-500UG Coelenterazine 400 a 腔肠素400a 500μg
MX4611-500UG e-Coelenterazine 腔肠素e 500μg
MX4612-500UG Coelenterazine f 腔肠素f 500μg
MX4613-250UG Coelenterazine cp 腔肠素cp 250μg
MX4614-250UG Coelenterazine hcp 腔肠素hcp 250μg

 

Coelenterazine f 腔肠素f Aequorin 水母发光蛋白 CAS NO:123437-16-1

Coelenterazine f 腔肠素f;Coelenterazine 400 a 腔肠素400a; 海肾荧光素酶(Rluc);萤火虫荧光素酶(Fluc);Aequorin 水母发光蛋白;CAS NO:123437-16-1;

产品信息

产品名称 产品编号 规格     
Coelenterazine f 腔肠素f      MX4612-500UG    500μg             
Coelenterazine f 腔肠素f MX4612-1MG 2×500μg

产品描述

腔肠素(Coelenterazine)是在水生生物中发现的一种发光基团(luminophore),是许多荧光素酶的作用底物,包括海肾荧光素酶(Renilla reniformis luciferase, Rluc),分泌型膜锚定荧光素酶(Gaussia luciferase, Gluc)和薮枝虫荧光素酶(Obelia luciferase),和发光蛋白包括水母发光蛋白(Aequorin)的构成之一。其作用原理是以腔肠素为底物的荧光素酶,在含分子氧的条件下,氧化腔肠素产生高能量的中间产物,在此过程发射蓝色光,光波长在450~480nm【见图1】。而甲虫(或萤火虫)荧光素/荧光素酶(FLuc)系统不同,其在含分子氧的条件下,还需要ATP和Mg2+的存在才能同时发光,光波长在550-570nm。正由于生物发光信号和底物的差异,RLuc常常与FLuc联合用于多重转录报告基因研究,或用作Fluc系统内萤火虫荧光素酶转染的内参。腔肠素应用甚是广泛,包括:1)活细胞或组织的钙离子检测;2)细胞或组织的超氧化物和过氧亚硝基阴离子(活性氧,ROS)化学发光检测;3)基因报告基因检测;4)动物活体检测;5)ELISA和生物发光共振能量转移(BRET)用于蛋白相互作用研究;6)药物高通量筛选(HTS);

天然腔肠素(Coelenterazine Native,CTZ-Native)是自然界中存在最丰富的一种腔肠素,也是目前应用最普遍的一种标准底物。不仅是脱辅基水母发光蛋白(APO)的底物,也是海肾荧光素酶(Rluc)和分泌型膜锚定荧光素酶(Gluc)等荧光素酶的作用底物。前者用于检测钙离子浓度,后者用作荧光素酶的报告基因检测系统。还可用于生物共振能量转移BRET,细胞或组织内的超氧阴离子和过氧化亚硝基阴离子水平(ROS)的化学发光检测等。

腔肠素f(Coelenterazine f,CTZ-f),是一种天然腔肠素(CTZ-Native)的合成衍生物,是水母发光蛋白的首选底物。CTZ-f的水母发光蛋白复合物比CTZ-Native形成的复合物荧光强度几乎高20倍,最大发射波长为473nm。

产品描述

1)   CAS NO:123437-16-1

2)   化学名:8-benzyl-2-(4-fluorobenzyl)-6-(4-hydroxyphenyl)imidazo[1,2- a]pyrazin-3(7H)-one

3)   同义名:Coelenterazine F; CTZ-F; CLZN-f; f-腔肠素;Coelenterazine-Fluoride;

4)   分子式:C26H20FN3O2

5)   分子量:425.5 g/mol

6)   纯度:>95%

7)   外观:橙色至棕色固体

8)   溶解性:溶于甲醇或乙醇,不要溶于DMSO

9)   化学结构式:

保存与运输方法

保存:-20℃干燥避光保存,且保存于惰性气体内。至少一年有效。

运输:冰袋运输。

注意事项

1)   腔肠素(Coelenterazine, CTZ)及衍生物最好以完全冻干粉的状态保存在惰性气体内,密封后置于-20℃或-70℃长期避光保存。管内即使有微量空气,也会随着时间慢慢氧化腔肠素使其活性丧失,这样不同实验之间的定量结果可能很不可信。

2)   腔肠素(Coelenterazine, CTZ)及衍生物不建议以储存液的形式保存,最好于实验前配制新鲜的溶液。不建议将配好的腔肠素溶液储存在-20℃或-70℃,因其具有一个高能量的二氧杂环丁酮环形结构,即使在低温条件下都会自发降解。

3)   商业化腔肠素的种类繁多,有天然腔肠素,以及各种腔肠素衍生物(比如,腔肠素h,腔肠素400a,腔肠素e,腔肠素f,腔肠素hcp)。它们对钙离子的亲和力,光谱特性,以及应用倾向上会有差异,详见附录1—天然腔肠素及其衍生物的光谱特性,附录2—天然腔肠素及其衍生物的应用差异选择适当的产品。

4)   为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法

一、 腔肠素f的溶解事项

1)   腔肠素f不溶于水,接触到空气,水分或任何氧化剂都不稳定。千万不要溶于DMSO,因会发生未知反应引起腔肠素f的快速降解并生成未知的代谢产物。

2)   腔肠素f溶于甲醇或乙醇,毒性最小的溶剂是无水乙醇,可溶解粉末配制成0.1-1mg/ml溶液,之后加入需要的缓冲液,尽量保持缓冲液pH小于7.0,因大多数腔肠素衍生物在碱性条件会快速降解,有时会立即产生沉淀。

二、 腔肠素f的保存事项

最好在使用前,才用无水乙醇溶解腔肠素f粉末,然后用所选的缓冲液稀释并混匀。此时配好的工作缓冲液需静置20-30min使其稳定(因部分底物会发生自氧化)后才进行体外实验。该工作液能稳定保存几个小时(室温3-4h),仅微弱的信号衰减可能发生。

不建议将腔肠素f的乙醇溶液置于-20℃或-70℃保存,因天然腔肠素及任何衍生物含有一个高能量的二氧杂环丁酮环形结构,即使在低温条件下都会自发降解。

附录1天然腔肠素及其衍生物的光谱特性

附录2天然腔肠素及其衍生物的应用差异

表2 –天然腔肠素及其衍生物的应用差异
产品名称 货号 应用特征
Coelenterazine native MX4606 应用非常广泛的标准底物。腔肠素是天然水母发光蛋白复合物的发光基团,也是海肾荧光素酶(Rluc)的底物。底物的快速再生(fast regeneration)比较重要的实验推荐使用天然腔肠素。

1)生物发光检测钙离子的灵敏度非常高,检测范围从0.1µM到>100µM;2)使用腔肠素监测报告基因表达是其主要应用;3)其他应用包括生物共振能量转移BRET,化学发光检测细胞或组织内的超氧阴离子和过氧化亚硝基阴离子水平(ROS);

Coelenterazine h MX4607 1)腔肠素h形成的水母发光蛋白复合物比天然腔肠素复合物的光强度高10倍以上;2)比天然腔肠素对钙离子敏感度更高;3)也适用报告基因分析。
Coelenterazine 400 a MX4610 也称为DeepBlue C,是一种腔肠素衍生物,用作海肾荧光素酶Rluc的底物,发射峰约400nm。含GFP受体的BRET研究是Rluc的首选底物,因其对GFP受体的发射波干扰非常小。不可用作Gluc底物。
Coelenterazine hcp MX4614 其生物发光强度最高(腔肠素hcp形成水母发光蛋白复合物的荧光强度比天然腔肠素复合物高190倍),对Ca2+反应速度快。
Coelenterazine cp MX4613 Coelenterazine cp产生水母发光蛋白复合物的光强度是天然腔肠素复合物的15倍,且具有更快的Ca2+反应性。
Coelenterazine f MX4612 腔肠素f形成的水母发光蛋白复合物的光强度是天然腔肠素复合物的20倍,最大发射波长约长8nm。具有最好的细胞渗透性。当需要具极高钙离子Ca2+灵敏度的水母发光蛋白复合物,建议用腔肠素f。
Coelenterazine n MX4615 所有的腔肠素衍生物中荧光强度最弱,对Ca2+反应时间明显慢于天然腔肠素。一种非常有用的低灵敏腔肠素。
Coelenterazine e MX4611 体外水母发光蛋白再生中腔肠素e的速度最高,具有双发射峰,分别为405nm和465nm,使其能在pCa 5-7范围内通过双发射峰荧光强度比率的方式测定Ca2+浓度,提高检测准确度。但由于渗透性差,不适合胞内应用。在溶液中稳定性差。
Coelenterazine i MX4616 体外腔肠素i水母发光蛋白复合物的荧光强度仅为天然腔肠素复合物的3%,在所有腔肠素衍生物种对钙离子的反应时间最慢。
Coelenterazine ip MX4618 体外腔肠素ip水母发光蛋白复合物的荧光强度几乎比天然腔肠素复合物高50倍,但对钙离子的反应时间比天然腔肠素慢。
Coelenterazine fcp MX4617 腔肠素fcp形成的水母发光蛋白复合物的光强度是天然腔肠素复合物的135倍。
Methyl Coelenterazine MX4619 非常优越的抗氧化剂,靶向细胞内来源于单态氧和超氧化物阴离子产生的活性氧物质(ROS)。

相关产品

货号 名称 规格
MX4606-1MG              Coelenterazine Native 天然腔肠素 2×500μg          
MX4607-1MG Injectable native Coelenterazine 注射用天然腔肠素        2×500μg
MX4608-1MG Coelenterazine h 腔肠素h 2×500μg
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MX4610-500UG Coelenterazine 400 a 腔肠素400a 500μg
MX4611-500UG e-Coelenterazine 腔肠素e 500μg
MX4612-500UG Coelenterazine f 腔肠素f 500μg
MX4613-250UG Coelenterazine cp 腔肠素cp 250μg
MX4614-250UG Coelenterazine hcp 腔肠素hcp 250μg

 

Coelenterazine f 腔肠素f Aequorin 水母发光蛋白 CAS NO:123437-16-1

Coelenterazine f 腔肠素f;Coelenterazine 400 a 腔肠素400a; 海肾荧光素酶(Rluc);萤火虫荧光素酶(Fluc);Aequorin 水母发光蛋白;CAS NO:123437-16-1;

产品信息

产品名称 产品编号 规格
Coelenterazine f 腔肠素f      MX4612-500UG    500μg             
Coelenterazine f 腔肠素f MX4612-1MG 2×500μg

产品描述

腔肠素(Coelenterazine)是在水生生物中发现的一种发光基团(luminophore),是许多荧光素酶的作用底物,包括海肾荧光素酶(Renilla reniformis luciferase, Rluc),分泌型膜锚定荧光素酶(Gaussia luciferase, Gluc)和薮枝虫荧光素酶(Obelia luciferase),和发光蛋白包括水母发光蛋白(Aequorin)的构成之一。其作用原理是以腔肠素为底物的荧光素酶,在含分子氧的条件下,氧化腔肠素产生高能量的中间产物,在此过程发射蓝色光,光波长在450~480nm【见图1】。而甲虫(或萤火虫)荧光素/荧光素酶(FLuc)系统不同,其在含分子氧的条件下,还需要ATP和Mg2+的存在才能同时发光,光波长在550-570nm。正由于生物发光信号和底物的差异,RLuc常常与FLuc联合用于多重转录报告基因研究,或用作Fluc系统内萤火虫荧光素酶转染的内参。腔肠素应用甚是广泛,包括:1)活细胞或组织的钙离子检测;2)细胞或组织的超氧化物和过氧亚硝基阴离子(活性氧,ROS)化学发光检测;3)基因报告基因检测;4)动物活体检测;5)ELISA和生物发光共振能量转移(BRET)用于蛋白相互作用研究;6)药物高通量筛选(HTS);

图1. 海肾荧光素酶(Rluc)催腔肠素发光的反应流程

天然腔肠素(Coelenterazine Native,CTZ-Native)是自然界中存在最丰富的一种腔肠素,也是目前应用最普遍的一种标准底物。不仅是脱辅基水母发光蛋白(APO)的底物,也是海肾荧光素酶(Rluc)和分泌型膜锚定荧光素酶(Gluc)等荧光素酶的作用底物。前者用于检测钙离子浓度,后者用作荧光素酶的报告基因检测系统。还可用于生物共振能量转移BRET,细胞或组织内的超氧阴离子和过氧化亚硝基阴离子水平(ROS)的化学发光检测等。

腔肠素f(Coelenterazine f,CTZ-f),是一种天然腔肠素(CTZ-Native)的合成衍生物,是水母发光蛋白的首选底物。CTZ-f的水母发光蛋白复合物比CTZ-Native形成的复合物荧光强度几乎高20倍,最大发射波长为473nm。

产品描述

1)   CAS NO:123437-16-1

2)   化学名:8-benzyl-2-(4-fluorobenzyl)-6-(4-hydroxyphenyl)imidazo[1,2- a]pyrazin-3(7H)-one

3)   同义名:Coelenterazine F; CTZ-F; CLZN-f; f-腔肠素;Coelenterazine-Fluoride;

4)   分子式:C26H20FN3O2

5)   分子量:425.5 g/mol

6)   纯度:>95%

7)   外观:橙色至棕色固体

8)   溶解性:溶于甲醇或乙醇,不要溶于DMSO

9)   化学结构式:

保存与运输方法

保存:-20℃干燥避光保存,且保存于惰性气体内。至少一年有效。

运输:冰袋运输。

注意事项

1)   腔肠素(Coelenterazine, CTZ)及衍生物最好以完全冻干粉的状态保存在惰性气体内,密封后置于-20℃或-70℃长期避光保存。管内即使有微量空气,也会随着时间慢慢氧化腔肠素使其活性丧失,这样不同实验之间的定量结果可能很不可信。

2)   腔肠素(Coelenterazine, CTZ)及衍生物不建议以储存液的形式保存,最好于实验前配制新鲜的溶液。不建议将配好的腔肠素溶液储存在-20℃或-70℃,因其具有一个高能量的二氧杂环丁酮环形结构,即使在低温条件下都会自发降解。

3)   商业化腔肠素的种类繁多,有天然腔肠素,以及各种腔肠素衍生物(比如,腔肠素h,腔肠素400a,腔肠素e,腔肠素f,腔肠素hcp)。它们对钙离子的亲和力,光谱特性,以及应用倾向上会有差异,详见附录1—天然腔肠素及其衍生物的光谱特性,附录2—天然腔肠素及其衍生物的应用差异选择适当的产品。

4)   为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法

一、 腔肠素f的溶解事项

1)   腔肠素f不溶于水,接触到空气,水分或任何氧化剂都不稳定。千万不要溶于DMSO,因会发生未知反应引起腔肠素f的快速降解并生成未知的代谢产物。

2)   腔肠素f溶于甲醇或乙醇,毒性最小的溶剂是无水乙醇,可溶解粉末配制成0.1-1mg/ml溶液,之后加入需要的缓冲液,尽量保持缓冲液pH小于7.0,因大多数腔肠素衍生物在碱性条件会快速降解,有时会立即产生沉淀。

二、 腔肠素f的保存事项

最好在使用前,才用无水乙醇溶解腔肠素f粉末,然后用所选的缓冲液稀释并混匀。此时配好的工作缓冲液需静置20-30min使其稳定(因部分底物会发生自氧化)后才进行体外实验。该工作液能稳定保存几个小时(室温3-4h),仅微弱的信号衰减可能发生。

不建议将腔肠素f的乙醇溶液置于-20℃或-70℃保存,因天然腔肠素及任何衍生物含有一个高能量的二氧杂环丁酮环形结构,即使在低温条件下都会自发降解。

附录1天然腔肠素及其衍生物的光谱特性

附录2天然腔肠素及其衍生物的应用差异

表2 –天然腔肠素及其衍生物的应用差异
产品名称 货号 应用特征
Coelenterazine native MX4606 应用非常广泛的标准底物。腔肠素是天然水母发光蛋白复合物的发光基团,也是海肾荧光素酶(Rluc)的底物。底物的快速再生(fast regeneration)比较重要的实验推荐使用天然腔肠素。

1)生物发光检测钙离子的灵敏度非常高,检测范围从0.1µM到>100µM;2)使用腔肠素监测报告基因表达是其主要应用;3)其他应用包括生物共振能量转移BRET,化学发光检测细胞或组织内的超氧阴离子和过氧化亚硝基阴离子水平(ROS);

Coelenterazine h MX4607 1)腔肠素h形成的水母发光蛋白复合物比天然腔肠素复合物的光强度高10倍以上;2)比天然腔肠素对钙离子敏感度更高;3)也适用报告基因分析。
Coelenterazine 400 a MX4610 也称为DeepBlue C,是一种腔肠素衍生物,用作海肾荧光素酶Rluc的底物,发射峰约400nm。含GFP受体的BRET研究是Rluc的首选底物,因其对GFP受体的发射波干扰非常小。不可用作Gluc底物。
Coelenterazine hcp MX4614 其生物发光强度最高(腔肠素hcp形成水母发光蛋白复合物的荧光强度比天然腔肠素复合物高190倍),对Ca2+反应速度快。
Coelenterazine cp MX4613 Coelenterazine cp产生水母发光蛋白复合物的光强度是天然腔肠素复合物的15倍,且具有更快的Ca2+反应性。
Coelenterazine f MX4612 腔肠素f形成的水母发光蛋白复合物的光强度是天然腔肠素复合物的20倍,最大发射波长约长8nm。具有最好的细胞渗透性。当需要具极高钙离子Ca2+灵敏度的水母发光蛋白复合物,建议用腔肠素f。
Coelenterazine n MX4615 所有的腔肠素衍生物中荧光强度最弱,对Ca2+反应时间明显慢于天然腔肠素。一种非常有用的低灵敏腔肠素。
Coelenterazine e MX4611 体外水母发光蛋白再生中腔肠素e的速度最高,具有双发射峰,分别为405nm和465nm,使其能在pCa 5-7范围内通过双发射峰荧光强度比率的方式测定Ca2+浓度,提高检测准确度。但由于渗透性差,不适合胞内应用。在溶液中稳定性差。
Coelenterazine i MX4616 体外腔肠素i水母发光蛋白复合物的荧光强度仅为天然腔肠素复合物的3%,在所有腔肠素衍生物种对钙离子的反应时间最慢。
Coelenterazine ip MX4618 体外腔肠素ip水母发光蛋白复合物的荧光强度几乎比天然腔肠素复合物高50倍,但对钙离子的反应时间比天然腔肠素慢。
Coelenterazine fcp MX4617 腔肠素fcp形成的水母发光蛋白复合物的光强度是天然腔肠素复合物的135倍。
Methyl Coelenterazine MX4619 非常优越的抗氧化剂,靶向细胞内来源于单态氧和超氧化物阴离子产生的活性氧物质(ROS)。

相关产品

货号 名称 规格
MX4606-1MG              Coelenterazine Native 天然腔肠素 2×500μg          
MX4607-1MG Injectable native Coelenterazine 注射用天然腔肠素        2×500μg
MX4608-1MG Coelenterazine h 腔肠素h 2×500μg
MX4609-1MG Injectable h-Coelenterazine 注射用腔肠素h 2×500μg
MX4610-500UG Coelenterazine 400 a 腔肠素400a 500μg
MX4611-500UG e-Coelenterazine 腔肠素e 500μg
MX4612-500UG Coelenterazine f 腔肠素f 500μg
MX4613-250UG Coelenterazine cp 腔肠素cp 250μg
MX4614-250UG Coelenterazine hcp 腔肠素hcp 250μg

 

 

Coelenterazine e 腔肠素e Aequorin 水母发光蛋白 CAS NO:114496-02-5

Coelenterazine e 腔肠素e;Coelenterazine 400 a 腔肠素400a; 海肾荧光素酶(Rluc);萤火虫荧光素酶(Fluc);Aequorin 水母发光蛋白;CAS NO:114496-02-5;

产品信息

产品名称 产品编号 规格         
Coelenterazine e 腔肠素e           MX4611-500UG             500μg  
Coelenterazine e 腔肠素e MX4611-1MG 2×500μg

腔肠素(Coelenterazine)是在水生生物中发现的一种发光基团(luminophore),是许多荧光素酶的作用底物,包括海肾荧光素酶(Renilla reniformis luciferase, Rluc),分泌型膜锚定荧光素酶(Gaussia luciferase, Gluc)和薮枝虫荧光素酶(Obelia luciferase),和发光蛋白包括水母发光蛋白(Aequorin)的构成之一。其作用原理是以腔肠素为底物的荧光素酶,在含分子氧的条件下,氧化腔肠素产生高能量的中间产物,在此过程发射蓝色光,光波长在450~480nm【见图1】。而甲虫(或萤火虫)荧光素/荧光素酶(FLuc)系统不同,其在含分子氧的条件下,还需要ATP和Mg2+的存在才能同时发光,光波长在550-570nm。正由于生物发光信号和底物的差异,RLuc常常与FLuc联合用于多重转录报告基因研究,或用作Fluc系统内萤火虫荧光素酶转染的内参。腔肠素应用甚是广泛,包括:1)活细胞或组织的钙离子检测;2)细胞或组织的超氧化物和过氧亚硝基阴离子(活性氧,ROS)化学发光检测;3)基因报告基因检测;4)动物活体检测;5)ELISA和生物发光共振能量转移(BRET)用于蛋白相互作用研究;6)药物高通量筛选(HTS);

天然腔肠素(Coelenterazine Native,CTZ-Native)是自然界中存在最丰富的一种腔肠素,也是目前应用最普遍的一种标准底物。不仅是脱辅基水母发光蛋白(APO)的底物,也是海肾荧光素酶(Rluc)和分泌型膜锚定荧光素酶(Gluc)等荧光素酶的作用底物。前者用于检测钙离子浓度,后者用作荧光素酶的报告基因检测系统。还可用于生物共振能量转移BRET,细胞或组织内的超氧阴离子和过氧化亚硝基阴离子水平(ROS)的化学发光检测等。

腔肠素e(Coelenterazine e,CTZ-e),是一种天然腔肠素衍生物,带有一个额外的乙基基团,从而形成一个额外的环形结构,最早由Shimomura进行描述。CTZ-e是一款优秀的海肾荧光素酶(Rluc)底物。CTZ-e产生的荧光接近于CTZ-Native的40%以上,虽然前者的初始荧光强度比后者高7倍多。CTZ-e/海肾荧光素酶的发射光谱有两个峰值,分别为418nm和475nm。

CTZ-e也是一款良好的脱酰基水母发光蛋白(APO)底物,与CTZ-Native相比,CTZ-e形成的水母蛋白复合物具有更快的荧光上升时间,并且呈现两个发射吸收峰(分别在405nm和465nm),吸收峰高度的比值取决于pCa 5-7范围内的钙离子浓度。这一双吸收峰特征使得CTZ-e/APO通过吸收峰强度的比例来测定钙离子成为可能。

产品描述

1)   CAS NO:114496-02-5

2)   化学名:12-Benzyl-8-hydroxy-2-(4-hydroxybenzyl)-5,6-dihydrobenzo[f]imidazo[1,2-a]quinoxalin-3(11H)- one; Benz[f]imidazo[1,2-a]quinoxalin-3(6H)-one,5,11-dihydro-8-hydroxy-2-[(4-hydroxyphenyl)methyl]-12 -(phenylmethyl);

3)   同义名:e-Coelenterazine; e-CTZ; Coelenterazine-E; CTZ-E; CLZN-e; e-腔肠素;

4)   分子式:C28H23N3O3

5)   分子量:449.5 g/mol

6)   纯度:>95%

7)   外观:黄色至橙色固体

8)   溶解性:溶于甲醇或乙醇,不要溶于DMSO

9)   化学结构式:

保存与运输方法

保存:-20℃干燥避光保存,且保存于惰性气体内。至少一年有效。

运输:冰袋运输。

注意事项

1)   腔肠素(Coelenterazine, CTZ)及衍生物最好以完全冻干粉的状态保存在惰性气体内,密封后置于-20℃或-70℃长期避光保存。管内即使有微量空气,也会随着时间慢慢氧化腔肠素使其活性丧失,这样不同实验之间的定量结果可能很不可信。

2)   腔肠素(Coelenterazine, CTZ)及衍生物不建议以储存液的形式保存,最好于实验前配制新鲜的溶液。不建议将配好的腔肠素溶液储存在-20℃或-70℃,因其具有一个高能量的二氧杂环丁酮环形结构,即使在低温条件下都会自发降解。

3)   商业化腔肠素的种类繁多,有天然腔肠素,以及各种腔肠素衍生物(比如,腔肠素h,腔肠素400a,腔肠素e,腔肠素f,腔肠素hcp)。它们对钙离子的亲和力,光谱特性,以及应用倾向上会有差异,详见附录1—天然腔肠素及其衍生物的光谱特性,附录2—天然腔肠素及其衍生物的应用差异选择适当的产品。

4)   为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法

1.       实验前将CTZ-e从冰箱取出回至室温,之后低速离心使得管内固体(或粉末)落到管底。

2.       用酸化、脱气体的无水乙醇溶解固体(或粉末),混匀,使其浓度为1mg/ml。

3.       最好于实验前才对乙醇储存液进行稀释,再用于所有的鲁米诺分析或实验。根据具体的工作体系选择合适的水溶性缓冲液对乙醇储存液进行稀释。(比如,100μM 用于荧光计分析)

4.       将未用完的CTZ-e溶液保存在-80℃,尽快用完。不可将水溶性工作液进行保存(会被氧化从而降解)。

表1 腔肠素e与天然腔肠素的差异

Renilla luciferase

Oplophorus luciferase

Aequorin

Initial Intensity (%)

Total light (%)

Emission peak (nm)

Initial Intensity (%)

Total light (%)

Emission peak (nm)

Initial Intensity (%)

Total light (%)

Emission peak (nm)

CTZ 100 100 475 100 100 454 100 100 465
CTZ-e  750 137 418/475 82 54 459 0.8 50 405/465
Source: Inouye S, Shimomura O. Biochem Biophys Res Commun 233, 349-353 (1997)

附录1 天然腔肠素及其衍生物的光谱特性

附录2 天然腔肠素及其衍生物的应用差异

表2 –天然腔肠素及其衍生物的应用差异

产品名称 货号     应用特征
Coelenterazine native MX4606 应用非常广泛的标准底物。腔肠素是天然水母发光蛋白复合物的发光基团,也是海肾荧光素酶(Rluc)的底物。底物的快速再生(fast regeneration)比较重要的实验推荐使用天然腔肠素。

1)生物发光检测钙离子的灵敏度非常高,检测范围从0.1µM到>100µM;2)使用腔肠素监测报告基因表达是其主要应用;3)其他应用包括生物共振能量转移BRET,化学发光检测细胞或组织内的超氧阴离子和过氧化亚硝基阴离子水平(ROS);

Coelenterazine h MX4607 1)腔肠素h形成的水母发光蛋白复合物比天然腔肠素复合物的光强度高10倍以上;2)比天然腔肠素对钙离子敏感度更高;3)也适用报告基因分析。
Coelenterazine 400 a MX4610 也称为DeepBlue C,是一种腔肠素衍生物,用作海肾荧光素酶Rluc的底物,发射峰约400nm。含GFP受体的BRET研究是Rluc的首选底物,因其对GFP受体的发射波干扰非常小。不可用作Gluc底物。
Coelenterazine hcp MX4614 其生物发光强度最高(腔肠素hcp形成水母发光蛋白复合物的荧光强度比天然腔肠素复合物高190倍),对Ca2+反应速度快。
Coelenterazine cp MX4613 Coelenterazine cp产生水母发光蛋白复合物的光强度是天然腔肠素复合物的15倍,且具有更快的Ca2+反应性。
Coelenterazine f MX4612 腔肠素f形成的水母发光蛋白复合物的光强度是天然腔肠素复合物的20倍,最大发射波长约长8nm。具有最好的细胞渗透性。当需要具极高钙离子Ca2+灵敏度的水母发光蛋白复合物,建议用腔肠素f。
Coelenterazine n MX4615 所有的腔肠素衍生物中荧光强度最弱,对Ca2+反应时间明显慢于天然腔肠素。一种非常有用的低灵敏腔肠素。
Coelenterazine e MX4611 体外水母发光蛋白再生中腔肠素e的速度最高,具有双发射峰,分别为405nm和465nm,使其能在pCa 5-7范围内通过双发射峰荧光强度比率的方式测定Ca2+浓度,提高检测准确度。但由于渗透性差,不适合胞内应用。在溶液中稳定性差。
Coelenterazine i MX4616 体外腔肠素i水母发光蛋白复合物的荧光强度仅为天然腔肠素复合物的3%,在所有腔肠素衍生物种对钙离子的反应时间最慢。
Coelenterazine ip MX4618 体外腔肠素ip水母发光蛋白复合物的荧光强度几乎比天然腔肠素复合物高50倍,但对钙离子的反应时间比天然腔肠素慢。
Coelenterazine fcp MX4617 腔肠素fcp形成的水母发光蛋白复合物的光强度是天然腔肠素复合物的135倍。
Methyl Coelenterazine MX4619 非常优越的抗氧化剂,靶向细胞内来源于单态氧和超氧化物阴离子产生的活性氧物质(ROS)。

相关产品

货号 名称 规格
MX4606-1MG              Coelenterazine Native 天然腔肠素 2×500μg          
MX4607-1MG Injectable native Coelenterazine 注射用天然腔肠素        2×500μg
MX4608-1MG Coelenterazine h 腔肠素h 2×500μg
MX4609-1MG Injectable h-Coelenterazine 注射用腔肠素h 2×500μg
MX4610-500UG Coelenterazine 400 a 腔肠素400a 500μg
MX4611-500UG e-Coelenterazine 腔肠素e 500μg
MX4612-500UG Coelenterazine f 腔肠素f 500μg
MX4613-250UG Coelenterazine cp 腔肠素cp 250μg
MX4614-250UG Coelenterazine hcp 腔肠素hcp 250μg

 

Coelenterazine e 腔肠素e Aequorin 水母发光蛋白 CAS NO:114496-02-5

Coelenterazine e 腔肠素e;Coelenterazine 400 a 腔肠素400a; 海肾荧光素酶(Rluc);萤火虫荧光素酶(Fluc);Aequorin 水母发光蛋白;CAS NO:114496-02-5;

产品信息

产品名称 产品编号 规格          
Coelenterazine e 腔肠素e           MX4611-500UG             500μg 
Coelenterazine e 腔肠素e MX4611-1MG 2×500μg

产品描述

腔肠素(Coelenterazine)是在水生生物中发现的一种发光基团(luminophore),是许多荧光素酶的作用底物,包括海肾荧光素酶(Renilla reniformis luciferase, Rluc),分泌型膜锚定荧光素酶(Gaussia luciferase, Gluc)和薮枝虫荧光素酶(Obelia luciferase),和发光蛋白包括水母发光蛋白(Aequorin)的构成之一。其作用原理是以腔肠素为底物的荧光素酶,在含分子氧的条件下,氧化腔肠素产生高能量的中间产物,在此过程发射蓝色光,光波长在450~480nm【见图1】。而甲虫(或萤火虫)荧光素/荧光素酶(FLuc)系统不同,其在含分子氧的条件下,还需要ATP和Mg2+的存在才能同时发光,光波长在550-570nm。正由于生物发光信号和底物的差异,RLuc常常与FLuc联合用于多重转录报告基因研究,或用作Fluc系统内萤火虫荧光素酶转染的内参。腔肠素应用甚是广泛,包括:1)活细胞或组织的钙离子检测;2)细胞或组织的超氧化物和过氧亚硝基阴离子(活性氧,ROS)化学发光检测;3)基因报告基因检测;4)动物活体检测;5)ELISA和生物发光共振能量转移(BRET)用于蛋白相互作用研究;6)药物高通量筛选(HTS);

天然腔肠素(Coelenterazine Native,CTZ-Native)是自然界中存在最丰富的一种腔肠素,也是目前应用最普遍的一种标准底物。不仅是脱辅基水母发光蛋白(APO)的底物,也是海肾荧光素酶(Rluc)和分泌型膜锚定荧光素酶(Gluc)等荧光素酶的作用底物。前者用于检测钙离子浓度,后者用作荧光素酶的报告基因检测系统。还可用于生物共振能量转移BRET,细胞或组织内的超氧阴离子和过氧化亚硝基阴离子水平(ROS)的化学发光检测等。

腔肠素e(Coelenterazine e,CTZ-e),是一种天然腔肠素衍生物,带有一个额外的乙基基团,从而形成一个额外的环形结构,最早由Shimomura进行描述。CTZ-e是一款优秀的海肾荧光素酶(Rluc)底物。CTZ-e产生的荧光接近于CTZ-Native的40%以上,虽然前者的初始荧光强度比后者高7倍多。CTZ-e/海肾荧光素酶的发射光谱有两个峰值,分别为418nm和475nm。

CTZ-e也是一款良好的脱酰基水母发光蛋白(APO)底物,与CTZ-Native相比,CTZ-e形成的水母蛋白复合物具有更快的荧光上升时间,并且呈现两个发射吸收峰(分别在405nm和465nm),吸收峰高度的比值取决于pCa 5-7范围内的钙离子浓度。这一双吸收峰特征使得CTZ-e/APO通过吸收峰强度的比例来测定钙离子成为可能。

产品描述

1)   CAS NO:114496-02-5

2)   化学名:12-Benzyl-8-hydroxy-2-(4-hydroxybenzyl)-5,6-dihydrobenzo[f]imidazo[1,2-a]quinoxalin-3(11H)- one; Benz[f]imidazo[1,2-a]quinoxalin-3(6H)-one,5,11-dihydro-8-hydroxy-2-[(4-hydroxyphenyl)methyl]-12 -(phenylmethyl);

3)   同义名:e-Coelenterazine; e-CTZ; Coelenterazine-E; CTZ-E; CLZN-e; e-腔肠素;

4)   分子式:C28H23N3O3

5)   分子量:449.5 g/mol

6)   纯度:>95%

7)   外观:黄色至橙色固体

8)   溶解性:溶于甲醇或乙醇,不要溶于DMSO

9)   化学结构式:

保存与运输方法

保存:-20℃干燥避光保存,且保存于惰性气体内。至少一年有效。

运输:冰袋运输。

注意事项

1)   腔肠素(Coelenterazine, CTZ)及衍生物最好以完全冻干粉的状态保存在惰性气体内,密封后置于-20℃或-70℃长期避光保存。管内即使有微量空气,也会随着时间慢慢氧化腔肠素使其活性丧失,这样不同实验之间的定量结果可能很不可信。

2)   腔肠素(Coelenterazine, CTZ)及衍生物不建议以储存液的形式保存,最好于实验前配制新鲜的溶液。不建议将配好的腔肠素溶液储存在-20℃或-70℃,因其具有一个高能量的二氧杂环丁酮环形结构,即使在低温条件下都会自发降解。

3)   商业化腔肠素的种类繁多,有天然腔肠素,以及各种腔肠素衍生物(比如,腔肠素h,腔肠素400a,腔肠素e,腔肠素f,腔肠素hcp)。它们对钙离子的亲和力,光谱特性,以及应用倾向上会有差异,详见附录1—天然腔肠素及其衍生物的光谱特性,附录2—天然腔肠素及其衍生物的应用差异选择适当的产品。

4)   为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法

1.       实验前将CTZ-e从冰箱取出回至室温,之后低速离心使得管内固体(或粉末)落到管底。

2.       用酸化、脱气体的无水乙醇溶解固体(或粉末),混匀,使其浓度为1mg/ml。

3.       最好于实验前才对乙醇储存液进行稀释,再用于所有的鲁米诺分析或实验。根据具体的工作体系选择合适的水溶性缓冲液对乙醇储存液进行稀释。(比如,100μM 用于荧光计分析)

4.       将未用完的CTZ-e溶液保存在-80℃,尽快用完。不可将水溶性工作液进行保存(会被氧化从而降解)。

表1 腔肠素e与天然腔肠素的差异

Renilla luciferase

Oplophorus luciferase

Aequorin

Initial Intensity (%)

Total light (%)

Emission peak (nm)

Initial Intensity (%)

Total light (%)

Emission peak (nm)

Initial Intensity (%)

Total light (%)

Emission peak (nm)

CTZ 100 100 475 100 100 454 100 100 465
CTZ-e  750 137 418/475 82 54 459 0.8 50 405/465
Source: Inouye S, Shimomura O. Biochem Biophys Res Commun 233, 349-353 (1997)

附录1 天然腔肠素及其衍生物的光谱特性

附录2 天然腔肠素及其衍生物的应用差异

表2 –天然腔肠素及其衍生物的应用差异

产品名称 货号     应用特征
Coelenterazine native MX4606 应用非常广泛的标准底物。腔肠素是天然水母发光蛋白复合物的发光基团,也是海肾荧光素酶(Rluc)的底物。底物的快速再生(fast regeneration)比较重要的实验推荐使用天然腔肠素。

1)生物发光检测钙离子的灵敏度非常高,检测范围从0.1µM到>100µM;2)使用腔肠素监测报告基因表达是其主要应用;3)其他应用包括生物共振能量转移BRET,化学发光检测细胞或组织内的超氧阴离子和过氧化亚硝基阴离子水平(ROS);

Coelenterazine h MX4607 1)腔肠素h形成的水母发光蛋白复合物比天然腔肠素复合物的光强度高10倍以上;2)比天然腔肠素对钙离子敏感度更高;3)也适用报告基因分析。
Coelenterazine 400 a MX4610 也称为DeepBlue C,是一种腔肠素衍生物,用作海肾荧光素酶Rluc的底物,发射峰约400nm。含GFP受体的BRET研究是Rluc的首选底物,因其对GFP受体的发射波干扰非常小。不可用作Gluc底物。
Coelenterazine hcp MX4614 其生物发光强度最高(腔肠素hcp形成水母发光蛋白复合物的荧光强度比天然腔肠素复合物高190倍),对Ca2+反应速度快。
Coelenterazine cp MX4613 Coelenterazine cp产生水母发光蛋白复合物的光强度是天然腔肠素复合物的15倍,且具有更快的Ca2+反应性。
Coelenterazine f MX4612 腔肠素f形成的水母发光蛋白复合物的光强度是天然腔肠素复合物的20倍,最大发射波长约长8nm。具有最好的细胞渗透性。当需要具极高钙离子Ca2+灵敏度的水母发光蛋白复合物,建议用腔肠素f。
Coelenterazine n MX4615 所有的腔肠素衍生物中荧光强度最弱,对Ca2+反应时间明显慢于天然腔肠素。一种非常有用的低灵敏腔肠素。
Coelenterazine e MX4611 体外水母发光蛋白再生中腔肠素e的速度最高,具有双发射峰,分别为405nm和465nm,使其能在pCa 5-7范围内通过双发射峰荧光强度比率的方式测定Ca2+浓度,提高检测准确度。但由于渗透性差,不适合胞内应用。在溶液中稳定性差。
Coelenterazine i MX4616 体外腔肠素i水母发光蛋白复合物的荧光强度仅为天然腔肠素复合物的3%,在所有腔肠素衍生物种对钙离子的反应时间最慢。
Coelenterazine ip MX4618 体外腔肠素ip水母发光蛋白复合物的荧光强度几乎比天然腔肠素复合物高50倍,但对钙离子的反应时间比天然腔肠素慢。
Coelenterazine fcp MX4617 腔肠素fcp形成的水母发光蛋白复合物的光强度是天然腔肠素复合物的135倍。
Methyl Coelenterazine MX4619 非常优越的抗氧化剂,靶向细胞内来源于单态氧和超氧化物阴离子产生的活性氧物质(ROS)。

相关产品

货号 名称 规格
MX4606-1MG              Coelenterazine Native 天然腔肠素 2×500μg          
MX4607-1MG Injectable native Coelenterazine 注射用天然腔肠素        2×500μg
MX4608-1MG Coelenterazine h 腔肠素h 2×500μg
MX4609-1MG Injectable h-Coelenterazine 注射用腔肠素h 2×500μg
MX4610-500UG Coelenterazine 400 a 腔肠素400a 500μg
MX4611-500UG e-Coelenterazine 腔肠素e 500μg
MX4612-500UG Coelenterazine f 腔肠素f 500μg
MX4613-250UG Coelenterazine cp 腔肠素cp 250μg
MX4614-250UG Coelenterazine hcp 腔肠素hcp 250μg

 

Coelenterazine 400 a 腔肠素400a BRET2 生物发光共振能量转移 CAS NO:70217-82-2

Coelenterazine 400 a 腔肠素400a;DeepBlue C;海肾荧光素酶(Rluc);萤火虫荧光素酶(Fluc);BRET2 生物发光共振能量转移 ;CAS NO:70217-82-2;

产品信息

产品名称 产品编号 规格        
Coelenterazine 400 a 腔肠素400a      MX4610-500UG     500μg             
Coelenterazine 400 a 腔肠素400a MX4610-1MG 2×500μg
Coelenterazine 400 a 腔肠素400a MX4610-5MG 10×500μg

产品描述

腔肠素(Coelenterazine)是在水生生物中发现的一种发光基团(luminophore),是许多荧光素酶的作用底物,包括海肾荧光素酶(Renilla reniformis luciferase, Rluc),分泌型膜锚定荧光素酶(Gaussia luciferase, Gluc)和薮枝虫荧光素酶(Obelia luciferase),和发光蛋白包括水母发光蛋白(Aequorin)的构成之一。其作用原理是以腔肠素为底物的荧光素酶,在含分子氧的条件下,氧化腔肠素产生高能量的中间产物,在此过程发射蓝色光,光波长在450~480nm【见图1】。而甲虫(或萤火虫)荧光素/荧光素酶(FLuc)系统不同,其在含分子氧的条件下,还需要ATP和Mg2+的存在才能同时发光,光波长在550-570nm。正由于生物发光信号和底物的差异,RLuc常常与FLuc联合用于多重转录报告基因研究,或用作Fluc系统内萤火虫荧光素酶转染的内参。腔肠素应用甚是广泛,包括:1)活细胞或组织的钙离子检测;2)细胞或组织的超氧化物和过氧亚硝基阴离子(活性氧,ROS)化学发光检测;3)基因报告基因检测;4)动物活体检测;5)ELISA和生物发光共振能量转移(BRET)用于蛋白相互作用研究;6)药物高通量筛选(HTS);

天然腔肠素(Coelenterazine Native,CTZ-Native)是自然界中存在最丰富的一种腔肠素,也是目前应用最普遍的一种标准底物。不仅是脱辅基水母发光蛋白(APO)的底物,也是海肾荧光素酶(Rluc)和分泌型膜锚定荧光素酶(Gluc)等荧光素酶的作用底物。前者用于检测钙离子浓度,后者用作荧光素酶的报告基因检测系统。还可用于生物共振能量转移BRET,细胞或组织内的超氧阴离子和过氧化亚硝基阴离子水平(ROS)的化学发光检测等。

腔肠素400a(Coelenterazine 400a,CTZ 400a),常称为DeepBlue C,是一种天然腔肠素衍生物,是一款良好的海肾荧光素酶(Rluc)底物,但不适合用作分泌型膜锚定荧光素酶(Gluc)底物。可用来实时监测钙离子浓度,报告基因分析,以及用作生物发光共振能量转移(BRET)的首选底物。腔肠素400a的最大射波峰值约在400nm,从而对GFP受体的发射峰干扰最小。腔肠素400a用在BRET2体系,该体系通常用来评估蛋白-蛋白相互作用,包括涉及G蛋白偶联受体介导的药物细胞信号通路分析,是一种有效的药物开发和筛选工具。

产品描述

1)   CAS NO:70217-82-2

2)   化学名:2,8-Dibenzyl-6-phenyl-imidazo[1,2a]pyrazin-3-(7H)-one; 6-phenyl-2,8-bis(phenylmethyl)-imidazo [1,2-a]pyrazin-3(7H)-one;

3)   同义名:CTZ 400a; 1-bisdeoxycoelenterazine; di-dehydrocoelenterazine; DeepBlueCTM; 腔肠素400a;

4)   分子式:C26H21N3O

5)   分子量:391.5 g/mol

6)   纯度:>97%

7)   外观:黄色至橙色固体

8)   溶解性:溶于甲醇或乙醇,不要溶于DMSO

9)   化学结构式:

保存与运输方法

保存:-20℃干燥避光保存,且保存于惰性气体内。至少一年有效。

运输:冰袋运输。

注意事项

1)   腔肠素(Coelenterazine, CTZ)及衍生物最好以完全冻干粉的状态保存在惰性气体内,密封后置于-20℃或-70℃长期避光保存。管内即使有微量空气,也会随着时间慢慢氧化腔肠素使其活性丧失。

2)   腔肠素(Coelenterazine, CTZ)及衍生物不建议以储存液的形式保存,最好于实验前配制新鲜的溶液。不建议将配好的腔肠素溶液储存在-20℃或-70℃,因其具有一个高能量的二氧杂环丁酮环形结构,即使在低温条件下都会自发降解。

3)   商业化腔肠素的种类繁多,有天然腔肠素,以及各种腔肠素衍生物(比如,腔肠素h,腔肠素400a,腔肠素e,腔肠素f,腔肠素hcp)。它们对钙离子的亲和力,光谱特性,以及应用倾向上会有差异,详见附录1—天然腔肠素及其衍生物的光谱特性,附录2—天然腔肠素及其衍生物的应用差异选择适当的产品。

4)   腔肠素400a(Coelenterazine 400a)的另一个通用名DeepBlueCTM是BioSignal Packard公司的商标名。

5)   不同的BRET系统对底物的选择上会有差异(附录3—用于PPI研究的BRET系统汇总表),腔肠素400a 主要用在BRET2系统。

6)   为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法

一、 腔肠素400a的溶解事项

1)   腔肠素400a不溶于水,接触到空气,水分或任何氧化剂都不稳定。溶于甲醇或乙醇,千万不要溶于DMSO,因会发生未知反应引起腔肠素400a的快速降解并生成未知的代谢产物。

2)   毒性最小的溶剂是无水乙醇,可溶解粉末配制成0.1-1mg/ml溶液,之后加入需要的缓冲液,尽量保持缓冲液pH小于7.0,因碱性条件会快速降解腔肠素400a,有时沉淀会立即产生。

二、 腔肠素400a的保存事项

最好在使用前,才用无水乙醇溶解腔肠素400a粉末,然后用所选的缓冲液稀释并混匀。此时配好的工作缓冲液需静置20-30min使其稳定(因部分底物会发生自氧化)后才进行体外实验。该工作液能稳定保存几个小时(室温3-4h),仅微弱的信号衰减可能发生。

不建议将腔肠素400a的乙醇溶液置于-20℃或-70℃保存,因天然腔肠素及任何衍生物含有一个高能量的二氧杂环丁酮环形结构,即使在低温条件下都会自发降解。

附录1 天然腔肠素及其衍生物的光谱特性

附录2 天然腔肠素及其衍生物的应用差异

表2 –天然腔肠素及其衍生物的应用差异

产品名称 货号 应用特征
Coelenterazine native MX4606     应用非常广泛的标准底物。腔肠素是天然水母发光蛋白复合物的发光基团,也是海肾荧光素酶(Rluc)的底物。底物的快速再生(fast regeneration)比较重要的实验推荐使用天然腔肠素。

1)生物发光检测钙离子的灵敏度非常高,检测范围从0.1µM到>100µM;2)使用腔肠素监测报告基因表达是其主要应用;3)其他应用包括生物共振能量转移BRET,化学发光检测细胞或组织内的超氧阴离子和过氧化亚硝基阴离子水平(ROS);

Coelenterazine h MX4607 1)腔肠素h形成的水母发光蛋白复合物比天然腔肠素复合物的光强度高10倍以上;2)比天然腔肠素对钙离子敏感度更高;3)也适用报告基因分析。
Coelenterazine 400 a MX4610 也称为DeepBlue C,是一种腔肠素衍生物,用作海肾荧光素酶Rluc的底物,发射峰约400nm。含GFP受体的BRET研究是Rluc的首选底物,因其对GFP受体的发射波干扰非常小。不可用作Gluc底物。
Coelenterazine hcp MX4614 其生物发光强度最高(腔肠素hcp形成水母发光蛋白复合物的荧光强度比天然腔肠素复合物高190倍),对Ca2+反应速度快。
Coelenterazine cp MX4613 Coelenterazine cp产生水母发光蛋白复合物的光强度是天然腔肠素复合物的15倍,且具有更快的Ca2+反应性。
Coelenterazine f MX4612 腔肠素f形成的水母发光蛋白复合物的光强度是天然腔肠素复合物的20倍,最大发射波长约长8nm。具有最好的细胞渗透性。当需要具极高钙离子Ca2+灵敏度的水母发光蛋白复合物,建议用腔肠素f。
Coelenterazine n MX4615 所有的腔肠素衍生物中荧光强度最弱,对Ca2+反应时间明显慢于天然腔肠素。一种非常有用的低灵敏腔肠素。
Coelenterazine e MX4611 体外水母发光蛋白再生中腔肠素e的速度最高,具有双发射峰,分别为405nm和465nm,使其能在pCa 5-7范围内通过双发射峰荧光强度比率的方式测定Ca2+浓度,提高检测准确度。但由于渗透性差,不适合胞内应用。在溶液中稳定性差。
Coelenterazine i MX4616 体外腔肠素i水母发光蛋白复合物的荧光强度仅为天然腔肠素复合物的3%,在所有腔肠素衍生物种对钙离子的反应时间最慢。
Coelenterazine ip MX4618 体外腔肠素ip水母发光蛋白复合物的荧光强度几乎比天然腔肠素复合物高50倍,但对钙离子的反应时间比天然腔肠素慢。
Coelenterazine fcp MX4617 腔肠素fcp形成的水母发光蛋白复合物的光强度是天然腔肠素复合物的135倍。
Methyl Coelenterazine MX4619 非常优越的抗氧化剂,靶向细胞内来源于单态氧和超氧化物阴离子产生的活性氧物质(ROS)。

 

附录3 用于PPI研究的BRET系统汇总表

名称§ 荧光素酶 荧光素酶最大发射* 荧光蛋白FP 荧光蛋白最大发射* 荧光素(底物) 文献来源
BRET1 Rluc/Rluc8 480 eYFP 530 Coelenterazine-h Xu et al.
BRET2 Rluc 395 GFP2 510 DeepBlueC Bertrand et al.
eBRET2 Rluc8 395 GFP2 510 DeepBlueC Kocan et al.
BRET3 (1) Rluc8 480 mOrange 564 Coelenterazine-h De et al.
BRET3 (2) Fluc 565 DsRed 583 d-Luciferin Gammon et al
eBRET Rluc 480 eYFP 530 EnduRen Pfleger et al.
BAF-Y Rluc 480 eYFP 530 ViviRen Hoshino et al.
BRET3.1 Rluc8 515 mOrange 564 Coelenterazine-v Dragulescu et al.
BRET4 Rluc8 480 TagRFP 584 Coelenterazine-h Dimri et al.
BRET4.1 Rluc8 515 TagRFP 584 Coelenterazine-v Dragulescu et al.
BRET5 Rluc8.6 535 TagRFP 584 Coelenterazine-h Dragulescu et al.
BRET6 Rluc8.6 535 TurboFP 635 Coelenterazine-h Dragulescu et al.
BRET6.1 Rluc8.6 570 TurboFP 635 Coelenterazine-v Dragulescu et al.
BRET7 Rluc8 515 TurboFP 635 Coelenterazine-v Dimri et al.
BRET8 Rluc8.6 535 TurboFP 635 Coelenterazine-h Dimri et al.
GlucBRET hGluc 470 tdTomato 580 Coelenterazine Li et al.
NanoBRET NLuc 460 HaloTag 618 Furimazine Machleidt et al.
LuxBRET LuxAB 490 eYFP 530 FMNH2 + Long-chain fatty aldehyde Cui et al.
VlucBRET Vluc 460 eYFP 530 Vargulin Otsuji et al.
§: These names are not absolute or exclusive, for reference only;*:Peak wavelength in nm

Adapted and extended from Borroto-Escuela et al. Bioluminescence resonance energy transfer methods to study G protein-coupled receptor-receptor tyrosine kinase heteroreceptor complexes. Methods Cell Biol. 2013; 117:141–164.

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