兔源Iba1抗体,无标签 Anti Iba1, Rabbit

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兔源Iba1抗体,无标签
Anti Iba1, Rabbit

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兔源Iba1抗体,无标签                              Anti Iba1, Rabbit小胶质细胞特异性抗体

兔源Iba1抗体,无标签

 


  Iba 1是在巨噬细胞/小胶质细胞中特异性表达的分子量为17,000的钙结合蛋白。近来小胶质细胞备受关注,除了在神经营养/神经保护中起作用外,也已被证实通过产生NO,TNF-α和IL-1β对神经造成损伤。

  该产品是与小胶质细胞特异性反应的兔多克隆抗体,适用于与星形胶质细胞特异性抗GFAP单克隆抗体进行双染色。

◆特点


● 抗原:对应于Iba1的C末端的合成肽
● 形式:TBS溶液(1 mg/mL)
● 纯化:兔抗血清的抗原亲和层析纯化

● 特异性:对小胶质细胞和巨噬细胞具有特异性,但不与神经元和星形胶质细胞发生交叉反应。

       与人类,小鼠大鼠Iba1反应。
● 用法:
1. 抗Iba1,兔(免疫细胞化学)适用于免疫细胞化学。1-2 μg/mL使用

      2. 抗Iba1,兔(用于Westernblotting)适合于Western blotting(免疫印迹)。0.5-1 μg/mL使用。



应用


大鼠原代混合培养细胞双染色和相同视野的相位图像


兔源Iba1抗体,无标签                              Anti Iba1, Rabbit

免疫印迹实验


兔源Iba1抗体,无标签                              Anti Iba1, Rabbit

Lane

1. Iba1 protein (10 ng)

2. 大鼠小胶质细胞 (10 µg)

3. 大鼠神经元 (10 µg)

4. 大鼠大脑皮层 (150 µg)

■ 实验条件

SDS-PAGE:5.5 % stacking gel, 12.5 % running gel, 100V

Blocking:3 % 脱脂奶粉/TBS ,1 h,室温

一抗:抗Iba1抗体(1/1000) ,3 % 脱脂奶粉/TTBS,Overnight,4℃

二抗:过氧化物酶标记抗兔IgG(1/5000),3 % 脱脂奶粉/TTBS,1 h,室温

数据提供:国立研究开发法人 国立精神・神经医疗研究中心 佐栁老师、一戸老师、高坂老师



◆实验步骤


a)石蜡切片

1.  脱蜡
   100%二甲苯10分钟,2次
          ⇓
   100%乙醇5分钟,2次
          ⇓
   80%乙醇5分钟
          ⇓
   70%乙醇5分钟
          ⇓
   dH2O,5分钟,2次


2. 用0.01M PBS洗涤,2次

3. 在0.3%H2O2的甲醇溶液中孵育30分钟

4.  用0.01M PBS洗涤,3次

5. 室温(RT)下用封闭缓冲液(1.5%正常山羊血清和0.001M PBS的1%BSA)孵育2小时。

6. 4℃下在封闭缓冲液中与抗Iba1抗体(0.5 μg/mL)(Wako目录号019-19741)孵育过夜。

7. 用0.01M PBS洗涤,3次。

8. 与生物素化的抗兔IgG抗体(1:200)在封闭缓冲液中室温孵育1小时。

9. 用0.01M PBS洗涤,3次。

10. 室温下与Elite ABC试剂(0.01M PBS中的试剂A(1:50)和试剂B(1:50))孵育1小时。

11. 用0.01M PBS洗涤,3次

12. 在过氧化物酶溶液中孵育(0.05M Tris缓冲液的0.01%过氧化氢和0.05%DAB)

b)冰冻切片

  冷冻的小鼠脑组织或培养的细胞应用4%多聚甲醛-PBS灌注固定。然后制备组织切片。制备后,将组织切片和培养的细胞用抗Iba1抗体免疫染色。



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兔源Iba1抗体,有标签

鼠源Iba1抗体,无标签,单克隆抗体(NCNP24)


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巨噬细胞/小胶质细胞特异性蛋白抗体Iba1的应用

小胶质细胞研究动向与新型Iba1标签抗体


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Wako神经生物学抗体清单

巨噬细胞/小胶质细胞Iba1抗体

参考文献

产品编号

产品名称

2017年发表文献引用

019-19741

Anti Iba1, Rabbit 

(for   Immunocytochemistry)

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016-20001

Anti Iba1, Rabbit

 (for   Western Blotting)

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<链接>



产品列表

产品编号 产品名称 产品规格 产品等级 备注
019-19741 Anti Iba1, Rabbit(for Immunocytochemistry)
抗Iba1,兔(免疫细胞化学)
50 μg 免疫化学
016-20001 Anti Iba1, Rabbit (for Western blotting)
抗Iba1,兔(用于免疫印迹)
50 μg 免疫化学

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Iba1抗体,兔源(免疫组化用) Anti Iba1, Rabbit (for Immunocytochemistry)

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Iba1抗体,兔源(免疫组化用)
Anti Iba1, Rabbit (for Immunocytochemistry)

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Iba1抗体,兔源(免疫组化用)Iba1抗体,兔源(免疫组化用)                              Anti Iba1, Rabbit (for Immunocytochemistry)

Anti Iba1, Rabbit (for Immunocytochemistry)

Iba1(Ionized calcium-binding adapter molecule 1)是分子量约为17 kDa的钙结合蛋白。由于在中枢神经系统中,Iba1在小胶质细胞中特异性表达1),因此被用作小胶质细胞标志物。据报告称,Iba1在静息型小胶质细胞和活化型小胶质细胞中均有表达,但有报告称在活化型小胶质细胞中其表达会有所增加2)。另外,Iba1也会在外周组织的巨噬细胞中表达,被称为AIF-1(同种异体移植物炎症因子1,Allograft inflammatory factor-1)。Iba1在细胞内与F-肌动蛋白结合,发挥着形成肌动蛋白纤维束的作用。这种肌动蛋白纤维束的形成被认为是细胞迁移和吞噬过程中观察细胞膜波动结构形成所必须的3)

抗Iba1,兔源(免疫组化用)在免疫组织染色中可以对小胶质细胞包括突起一并进行染色,因此被世界各地的研究人员作为小胶质细胞标记抗体的标准来使用。

近年来,小胶质细胞因其神经营养和保护作用以及通过产生NO、TNF-α和IL-1β引起的神经损伤作用备受关注。

Iba1抗体,兔源(免疫组化用)                              Anti Iba1, Rabbit (for Immunocytochemistry)

小胶质细胞的染色图像

Anti Iba1,兔源(免疫组化用)

◆特点

● 在免疫组织染色(冰冻切片)中可染色小胶质细胞包括其突起

● 使用浓度为1︰500 – 1︰1,000,少量使用也可染色。

※ 染色程度取决于样品状况,无法保证一定能染色成功。

◆抗体信息

抗体种类

  多克隆抗体

抗原

  Iba1的合成肽(C端序列相同)

免疫动物

  兔子

交叉性

  人、小鼠、大鼠、其他

浓度

  0.5-0.7 mg/mL

应用

  免疫组织染色(冰冻切片):1︰500-1,000

  免疫细胞染色: 1︰500-1,000

储存条件

  -20℃冷冻保存(干冰运输)

抗原来源动物

  大鼠

※ 拥有犬4、猫5、猪6、狨猴7、斑马鱼8的应用实例

    点击此处查看使用论文

◆应用数据

免疫组织染色(小鼠)

Iba1抗体,兔源(免疫组化用)                              Anti Iba1, Rabbit (for Immunocytochemistry)

物种:小鼠

部位:小脑

样品:冰冻切片

抗体浓度:1︰1,000

Iba1抗体,兔源(免疫组化用)                              Anti Iba1, Rabbit (for Immunocytochemistry)

物种:小鼠

部位:伏隔核

样品:超薄切片

抗体浓度:1︰500


<数据提供>

东京理科大学生命生物科学科 萩原老师、山崎先生

Iba1抗体,兔源(免疫组化用)                              Anti Iba1, Rabbit (for Immunocytochemistry)

物种:小鼠

部位:脊髓

样品:冰冻切片

抗体浓度:1︰500


<数据提供>

东京理科大学生命生物科学科 萩原老师、山崎先生

Iba1抗体,兔源(免疫组化用)                              Anti Iba1, Rabbit (for Immunocytochemistry)

物种:小鼠

部位:视网膜

抗体浓度:1︰1,000


<数据提供>

Prof. Lieve Moons, KU Leuven, Belgium.

免疫组织染色(大鼠)

Iba1抗体,兔源(免疫组化用)                              Anti Iba1, Rabbit (for Immunocytochemistry)

物种:大鼠

部位:大脑皮层

样品:冰冻切片

抗体浓度:1︰1,000


<数据提供>

日本国立精神·神经医疗研究中心

佐柳老师、真锅老师、一户老师、高坂老师

Anti Iba1抗体系列

产品详情

产品等级 

  小胶质细胞标记物抗体——Anti   Iba1抗体

免疫化学用

   抗Iba1,   重组兔源单克隆抗体(6A4)

免疫化学用

   抗Iba1,兔(免疫细胞化学用)

免疫化学用

   抗Iba1,兔(石蜡切片用)

免疫化学用

   抗Iba1,兔 生物素结合

免疫化学用

   抗Iba1,兔源(结合488绿色荧光)(Prototype)

免疫化学用

   抗Iba1, 兔源, 结合SPICA Dye™ 568

免疫化学用

   抗   Iba1,兔源,SPICA Dye™ 594偶联

免疫化学用

   Anti-Iba1、红色荧光染料(635)结合

免疫化学用

   抗Iba1,山羊多克隆抗体

免疫化学用

   鼠源Iba1抗体,无标签,单克隆抗体(NCNP24)

免疫化学用

   抗Iba1, 兔源单克隆抗体(NCNP27)

免疫化学用

相关资料

原代小胶质细胞ICC实验方案示例


将从新生大鼠(出生0~2天)的大脑中制备和培养的原代混合胶质细胞按照1.0×105 cell/well接种至4 well-plate、13 φmm盖玻片(PLL涂层)。

固定:4% formaldehyde-PBS, 15 min

清洗:PBS

通透:0.1% TX-100 PBS, 5 min

封闭:3% BSA-3% normal goat serum-PBS (blocking buffer), >15min

一抗反应:抗Iba1抗体(1:1,000)blocking buffer, 1h

清洗

二抗反应:Alexa Fluor 488标记抗兔IgG抗体/blocking buffer, 1h

封片

在荧光显微镜下进行观察



Iba1抗体,兔源(免疫组化用)                              Anti Iba1, Rabbit (for Immunocytochemistry)

小胶质细胞产品目录


FAQ

关于抗体

Q1:抗原是什么样的?

A1:是Iba1的合成肽(C端序列相同)。具体序列未公开。

 

Q2:50 μg的使用量是多少?

A2:在免疫组织染色中,每张玻片使用200 μL抗体溶液(稀释度为 1:1,000)的情况下,可使用约500次。

◆关于实验方案

Q3:建议使用哪种二抗?

A3:FUJIFILM Wako拥有以下二抗的使用实例,可供参考。

Alexa Fluor® 488-AffiniPure Goat Anti-Rabbit IgG (H+L) (Jackson ImmunoResearch公司, 厂家编号: 111-545-144

Alexa Fluor® 647-conjugated AffiniPure Donkey anti-Rabbit IgG (H+L) (Jackson ImmunoResearch公司, 厂家编号: 711-605-152)

◆关于故障排除

Q4:WB中无法检测出条带

A4:本抗体适用于免疫组织染色(冰冻切片)以及免疫细胞染色,如需进行WB,请使用 抗Iba1,兔源(Western Blotting用) (产品编号:016-20001

 

Q5:免疫组织染色和免疫细胞染色中小胶质细胞无法染色

A5:可能导致此问题的原因有以下几种,请尝试对应的解决方案。

1. 固定不充分

有报告称,未灌注固定或固定不充分的样品染色效果会降低。请在免疫组织染色中使用4%多聚甲醛(PFA)进行灌注固定后再制备冰冻切片。

2. 抗原变性

请尝试在以下条件下进行抗原修复操作

(A)柠檬酸缓冲液(pH 6.0), 90℃, 9 min

(B)TE缓冲液(pH 9.0), 90℃, 9 min

3. 样品变质

需要重新制备样品,切片厚度约为20-50 μm。

4. 抗体量少

请提高抗体浓度,推荐浓度为1︰500~1,000。

 

Q6:免疫组织染色和免疫细胞染色的背景过高。

A6:导致此问题的可能原因有以下几种,请尝试对应的解决方案。

① 封闭不充分

请尝试延长封闭的孵育时间或更换封闭试剂。建议使用推荐Protocol中记载的1% BSA, 含0.3% TritonX-100的PBS和含1% BSA, 0.3% Tween-20的PBS,或3%二抗宿主的正常血清。

② 一抗的量过多

请降低一抗浓度,推荐浓度为1︰500~1,000。

③ 二抗的反应时间过长

请缩短反应时间。推荐反应时间为1~2 h,或增加二抗反应后的清洗次数。

④ 样品变质

需要重新制备样品,切片厚度约为20-50 μm。

⑤ 抗原变性

请尝试在以下条件下进行抗原修复操作

(A)柠檬酸缓冲液(pH 6.0), 90℃, 9 min

(B)TE缓冲液(pH 9.0), 90℃, 9 min

⑥ 内源性的过氧化物酶发生反应(使用HRP或POD作为检测酶时)

为了灭活内源性过氧化物酶,请在阻断前使用含3%过氧化氢的80%甲醇溶液,并在-20℃条件下处理20 min。

 

Q7:在免疫组织染色中,除小胶质细胞外,神经细胞也被染色。

A7:可能导致此问题的原因有以下几种,请尝试对应的解决方案。

① 抗体的量过多

请降低一抗或二抗的抗体浓度,抗Iba1抗体的推荐浓度为1︰500~1,000。

② 二抗的反应时间过长

请缩短反应时间。推荐反应时间为1~2 h,或增加二抗反应后的清洗次数。

③ 抗原变性

请尝试在以下条件下进行抗原修复操作

(A)柠檬酸缓冲液(pH 6.0), 90℃, 9 min

(B)TE缓冲液(pH 9.0), 90℃, 9 min

关于应用数据

Q8:本抗体可以用于流式细胞仪吗?

A8:FUJIFILM Wako没有使用实例,但以下论文中使用了本抗体,敬请参考。

Koh, H. S., et al.: Nat. Commun., 6(1),1(2015).
The HIF-1/glial TIM-3 axis controls inflammation-associated brain damage under hypoxia.

参考文献


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A Novel Geneiba1 in the Major Histocompatibility Complex Class III Region Encoding an EF Hand Protein Expressed in a Monocytic Lineage

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Upregulated expression of Iba1 molecules in the central nervous system of mice in response to neurovirulent influenza A virus infection

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产品列表

产品编号 产品名称 产品规格 产品等级 备注
019-19741 Anti Iba1, Rabbit (for Immunocytochemistry) 
抗Iba1,兔(免疫组化用)
50 μg 免疫化学用

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Anti Iba1兔源,抗Iba1山羊,抗Iba1小鼠单抗NCNP24,小胶质细胞标记物抗体系列产品

Iba1 (Ionized calcium-binding adapter molecule 1) 在中枢神经系统的小胶质细胞中特异性表达,因此被用作小胶质细胞的标记物。在外周组织中,它在巨噬细胞上表达,也被称为AIF-1。FUJIFILM Wako的 “兔抗Iba1(免疫细胞化学用)”(产品编号019-19741)被世界各地的研究人员用作小胶质细胞标记物抗体。

Iba1是什么?

Iba1(Ionized calcium-binding adapter molecule 1)是分子量约为17 kDa的钙结合蛋白。由于Iba1在中枢神经系统中特异性表达1),因此被用作小胶质细胞标记物。据报告称,在静息型小胶质细胞和活化型小胶质细胞中均有表达,但有报告称在活化型小胶质细胞中其表达会有所增加2)。另外,也会在外周组织的巨噬细胞中表达,被称为AIF-1(同种异体移植物炎症因子1,Allograft inflammatory factor-1)。

Iba1在细胞内与F-肌动蛋白结合,发挥着形成肌动蛋白纤维束的作用。这种肌动蛋白纤维束的形成被认为是细胞迁移和吞噬过程中观察细胞膜波动结构形成所必须的3)

富士胶片和光纯药的Anti Iba1抗体

FUJIFILM Wako的Anti Iba1,兔源(免疫组化用,产品编号:019-19741)在免疫组化染色中可以对小胶质细胞包括突起一并进行染色,因此被世界各地的研究人员作为小胶质细胞标记抗体来使用。

Anti Iba1,兔源(免疫组化用)的特点

● 在免疫组织染色(冰冻切片)中可染色小胶质细胞包括其突起

● 使用浓度为1:500 – 1:1000,少量也能达到染色效果。

※ 染色程度取决于样品状况,无法保证一定能染色成功。

产品速递

小胶质细胞的染色图像

Anti Iba1,兔源(免疫细胞化学用)

使用的参考文献和发表的期刊数量

Anti Iba1,兔源(免疫细胞化学用)在2022年发表的刊载论文数超1300篇,其中多篇发表在高影响因子的期刊中。

产品速递

各年参考文献使用数量变化图

用关键词 “Iba1 019-19741 Wako “进行谷歌学术搜索

杂志名称

文献使用数量

2021 IF影响因子

  Nature

34  

69.504

  Cell

31  

66.85

  Science

2  

63.714

  Nature Medicine

11  

87.241

  Nature Neuroscience

56  

28.771

  Nature Immunology

6  

31.25

  Nature Biotechnology

6  

68.164

  Nature Methods

3  

47.99

  Nature Biomedical Engineering

3  

29.234

  Neuron

35  

18.688

  共计

187 

◆产品系列

选择指南

产品速递

※1 有犬4)、猫5)、猪6)、狨猴7)、斑马鱼8)的应用实例

※2 简称一览→IHC(F):免疫组化染色(冰冻切片),IHC(P):免疫组化染色(石蜡切片),ICC:免疫细胞化学,WB:Western Blotting

产品概况

产品速递

※1 拥有犬4)、猫5)、猪6)、狨猴7)、斑马鱼8)的应用实例

【缩写一览】 FCM:流式细胞术;ICC:免疫细胞化学;IHC(F):免疫组化染色(冰冻切片);IHC(P):免疫组化染色(石蜡切片);WB:Western Blotting

◆应用数据

免疫组织染色

Anti Iba1,兔源(免疫细胞化学用)

产品速递

 

 

物种:大鼠

部位:大脑皮层

样品:冰冻切片

抗体浓度:1:1000

<数据提供>

日本国立精神·神经医疗研究中心

佐柳老师、真锅老师、一户老师、高坂老师

产品速递

 

 

物种:小鼠

部位:小脑

样品:冰冻切片

抗体浓度:1:1000

Anti Iba1,兔源(石蜡切片用)

Anti Iba1,兔源(生物素结合)

产品速递

 

 

物种:大鼠

部位:海马体附近

样品:石蜡切片

抗体浓度:1:1000

产品速递

 

 

物种:大鼠

部位:大脑皮层

样品:冰冻切片

抗体浓度:1:200

<数据提供>

日本国立精神·神经医疗研究中心

佐柳老师、真锅老师、一户老师、高坂老师

抗Iba1,兔源(结合488绿色荧光)(Prototype)

Anti Iba1,兔源,SPICA Dye™ 568结合

产品速递

 

物种:大鼠

部位:大脑皮层

样品:冰冻切片

抗体浓度:1:200

产品速递

 

物种:大鼠

部位:大脑皮层

样品:冰冻切片

抗体浓度:1:200

Anti-Iba1,兔,SPICA Dye™ 594 结合

Anti-Iba1、红色荧光染料(635)结合

产品速递

 

物种:大鼠

部位:大脑皮层

样品:冰冻切片

抗体浓度:1:200

产品速递

物种:大鼠

部位:大脑皮层

样品:冰冻切片

抗体浓度:1:200

抗Iba1, 山羊

抗Iba1, 小鼠单抗(NCNP24)

产品速递

物种:小鼠

部位:海马

抗体浓度:1:200

产品速递

物种:大鼠

部位:大脑皮层

样品:冰冻切片

抗体浓度:1:1000

Western Blotting

Anti-Iba1,兔源(Western Blotting用)

产品速递

1. Iba1蛋白 10 ng

2. 大鼠小胶质细胞 10 μg

3. 大鼠神经元 10 μg

4. 大鼠大脑皮层 150 μg

SDS-PAGE:5.5%浓缩胶,12.5%电泳胶,100 V

封闭:3% 脱脂牛奶/TBS,1 h,室温

一抗:1:1000浓度,3%脱脂牛奶/TTBS,过夜,4℃

二抗:过氧化物酶标记的抗兔IgG(1/5000),3%脱脂牛奶/TTBS,1 h,室温

抗Iba1, 山羊

产品速递

1. 原代培养的大鼠小胶质细胞 10 μg

2. 原代培养的大鼠神经元 10 μg

3. 原代培养的大鼠星形胶质细胞 10 μg

4. 大鼠大脑皮层 100 μg

一抗:Anti-Iba1,山羊 1:1000

二抗:Anti-Iba1 IgG, HRP标识

参考文献

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◆产品列表

Anti-Iba1, 兔 (多克隆抗体)

产品编号

产品名称

产品等级

产品规格

019-19741

Anti Iba1, Rabbit (for Immunocytochemistry)

小胶质细胞/巨噬细胞特异性蛋白抗体(免疫组化)

免疫化学用

50 μg

013-27691

Anti Iba1, Rabbit(for Paraffin Section)

小胶质细胞/巨噬细胞特异性蛋白兔源抗体(石蜡切片)

免疫化学用

50 μg

016-20001

Anti Iba1,Rabbit (for Western Blotting)

小胶质细胞/巨噬细胞特异性蛋白抗体(免疫印迹)

免疫化学用

50 μg

016-26461

Anti Iba1, Rabbit, Biotin-conjugated

小胶质细胞/巨噬细胞特异性蛋白抗体(结合生物素)

免疫化学用

100 μL

282-37691

Anti Iba1, Rabbit, Green Fluorochrome(488)-conjugated(Prototype)

抗Iba1,兔源多克隆抗体(结合488绿色荧光)(Prototype)

免疫化学用

100 μL

011-28013

Anti Iba1, Rabbit, SPICA Dye™ 568-conjugated

小胶质细胞/巨噬细胞特异性蛋白抗体(结合SPICA Dye™ 568)

免疫化学用

10 μL

015-28011

100 μL

012-28401

Anti Iba1, Rabbit, SPICA Dye™ 594-conjugated

抗Iba1,兔源多克隆抗体(结合SPICA Dye™ 594)

免疫化学用

100 μL

013-26471

Anti Iba1, Rabbit, Red   Fluorochrome(635)-conjugated

小胶质细胞/巨噬细胞特异性蛋白抗体(结合红色荧光素635)

免疫化学用

100 μL

抗Iba1,兔源(结合488绿色荧光)(Prototype)(产品编号:282-37691)为试制品,已被确认只能用于大鼠的免疫组化染色。

Anti-Iba1,山羊(多克隆抗体)

产品编号

产品名称

产品等级

产品规格

011-27991

Anti Iba1, Goat

Iba1,山羊源多克隆抗体

免疫化学用

100 μL

Anti-Iba1, 重组兔源单克隆抗体(6A4)

产品编号

产品名称

产品等级

产品规格

012-28521

Anti Iba1, Rabbit Monoclonal Antibody (6A4), recombinant

抗Iba1,重组兔源单克隆抗体(6A4)

免疫化学用

20 μL

018-28523

100 μL

Anti-Iba1, 小鼠 (单克隆抗体)

产品编号

产品名称

产品等级

产品规格

012-26723

Anti Iba1, Monoclonal Antibody(NCNP24)

抗Iba1,单克隆抗体(NCNP24)(鼠源)

免疫化学用

10 μL

016-26721

50 μL

017-27591

Anti Human Iba1, Monoclonal Antibody(NCNP27)

抗人 Iba1,单抗(NCNP27)

免疫化学用

10 μL

013-27593

50 μL

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