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LabAssay™ Cholestrol
LabAssay™ 胆固醇检测试剂盒
LabAssay™ Cholesterol
LabAssay™ 胆固醇检测试剂盒
血清中的胆固醇浓度与肝脏和肠道中的胆固醇生成、吸收、分解代谢及血液中的脂蛋白代谢密切相关。本产品为基于N-乙基-N-(2-羟基-3-磺丙基)-3,5-二甲氧基苯胺钠(DAOS)的蓝色显色酶法试剂。微孔板法可用于测定小鼠、人血清中的总胆固醇。
◆检测原理
显色试剂作用于样品后,样品中的胆固醇酯类被胆固醇酯酶分解为游离的胆固醇和脂肪酸。生成的胆固醇与原有的游离胆固醇共同被胆固醇氧化酶氧化,同时产生过氧化氢。生成的过氧化氢在过氧化物酶(HRP)的作用下,使得DAOS和4-氨基安替比林进行定量氧化缩合,生成蓝色色素。通过测定这种蓝色色素的吸光度,可计算出样品中总胆固醇的浓度。
◆试剂盒组成
1.缓冲液——150 mL×1瓶
2.显色剂——150 mL用×1瓶
3.标准液——5 mL×1瓶
◆试剂盒性能
● 标准曲线范围:50~592.2 mg/dL(mg/100 mL)
● 测定时间:约10 min
● 样品:血清、血浆(小鼠、大鼠、人)
● 所需样品量:2 μL
● 测定波长:主波长600 nm、副波长700 nm
◆标准曲线示例
◆检测操作方法
微孔板法
根据下表条件,在孔板内进行反应。
|
Tests
|
标准
|
空白
|
显色剂
|
300 μL
|
300 μL
|
300 μL
|
待测物
|
样品 2 μL
|
标准溶液 2 μL
|
-
|
|
充分混合,在37℃加热5min。以空白为对照,测定样品和标准溶液的吸光度。 主波长600 nm/副波长700 nm
|
◆加标回收测试
胆固醇的加标回收测试,将已知含量的标准品加标到人、小鼠、大鼠样品中,n=2。
人样品
人样品
|
添加量(mg/dL)
|
测定值(mg/dL)
|
回收量(mg/dL)
|
回收率(%)
|
血清样品
|
0
|
166.4
|
|
|
47.6
|
219.1
|
52.6
|
110.60%
|
99.7
|
276.2
|
109.7
|
110.00%
|
150.4
|
326.3
|
159.9
|
106.30%
|
201.3
|
378.3
|
211.9
|
105.20%
|
血浆样品(EDTA)
|
0
|
130.2
|
|
|
47.6
|
181
|
50.8
|
106.60%
|
99.7
|
237.8
|
107.6
|
107.90%
|
150.4
|
280.5
|
150.3
|
100.00%
|
201.3
|
343.2
|
213
|
105.80%
|
小鼠样品
小鼠样品
|
添加量(mg/dL)
|
测定值(mg/dL)
|
回收量(mg/dL)
|
回收率(%)
|
血清样品
|
0
|
86.1
|
|
|
47.6
|
136.1
|
50
|
105.00%
|
99.7
|
188.6
|
102.5
|
102.80%
|
150.4
|
239.3
|
153.2
|
101.90%
|
201.3
|
288.1
|
202
|
100.30%
|
血浆样品(EDTA)
|
0
|
35.5
|
|
|
47.6
|
84.5
|
49.1
|
103.10%
|
99.7
|
134.4
|
98.9
|
99.20%
|
150.4
|
188.9
|
153.5
|
102.10%
|
201.3
|
230.6
|
195.1
|
96.90%
|
大鼠样品
大鼠样品
|
添加量(mg/dL)
|
测定值(mg/dL)
|
回收量(mg/dL)
|
回收率(%)
|
血清样品
|
0
|
69.9
|
|
|
47.6
|
121.5
|
51.6
|
108.30%
|
99.7
|
161.8
|
91.9
|
92.10%
|
150.4
|
220.8
|
150.8
|
100.30%
|
201.3
|
276.8
|
206.9
|
102.70%
|
血浆样品(EDTA)
|
0
|
42.6
|
|
|
47.6
|
91.8
|
49.2
|
103.30%
|
99.7
|
137.6
|
95
|
95.30%
|
150.4
|
180.1
|
137.5
|
91.50%
|
201.3
|
235.8
|
193.2
|
96.00%
|
◆样品检测示例
人血清样品
样品批次
|
测定值(mg/dL)
|
平均值(mg/dL)
|
SD
|
CV(%)
|
人血清
|
191.7
|
173.6
|
182.7
|
12.8
|
7
|
人血浆(EDTA)
|
143.2
|
143.1
|
143.2
|
0.02
|
0
|
混合人血清,男性
|
序号
|
平均值
|
SD
|
CV(%)
|
1
|
0.687
|
0.001
|
0.2
|
混合人K2EDTA血浆,男性
|
序号
|
平均值
|
SD
|
CV(%)
|
1
|
※0.352
|
0.003
|
0.8
|
大鼠血清(10%稀释)
序号
|
测定值(mg/dL)
|
平均值(mg/dL)
|
SD
|
CV(%)
|
1
|
60
|
67.1
|
63.6
|
5.03
|
7.9
|
2
|
84.6
|
89
|
86.8
|
3.12
|
3.6
|
3
|
90.7
|
80.8
|
85.8
|
7
|
8.2
|
4
|
82.1
|
72.3
|
77.2
|
6.88
|
8.9
|
5
|
89.3
|
93.9
|
91.6
|
3.24
|
3.5
|
大鼠血浆(EDTA)
序号
|
测定值(mg/dL)
|
平均值(mg/dL)
|
SD
|
CV(%)
|
1
|
42.9
|
38.6
|
40.8
|
3.03
|
7.4
|
2
|
59.3
|
54.3
|
56.8
|
3.56
|
6.3
|
3
|
51.1
|
46.3
|
48.7
|
3.38
|
6.9
|
4
|
45.2
|
40.2
|
42.7
|
3.58
|
8.4
|
5
|
59.2
|
63.7
|
61.5
|
3.15
|
5.1
|
20% 稀释健康大鼠血清, Sprague Dawley,雄性
|
序号
|
平均值
|
SD
|
CV(%)
|
1
|
※0.300
|
0
|
0
|
2
|
※0.371
|
0.004
|
1.1
|
3
|
※0.289
|
0.017
|
5.8
|
4
|
※0.365
|
0
|
0.1
|
5
|
※0.382
|
0.029
|
7.6
|
健康大鼠K2EDTA血浆,Sprague Dawley,雄性
|
序号
|
平均值
|
SD
|
CV(%)
|
1
|
※0.333
|
0.004
|
1.2
|
2
|
※0.356
|
0.003
|
0.8
|
3
|
※0.325
|
0.02
|
6
|
4
|
※0.218
|
0.005
|
2.6
|
5
|
0.515
|
0.01
|
1.9
|
小鼠血清(20%稀释)
序号
|
测定值(mg/dL)
|
平均值(mg/dL)
|
SD
|
CV(%)
|
1
|
95.4
|
89.3
|
92.4
|
4.31
|
4.7
|
2
|
85.3
|
84.5
|
84.9
|
0.58
|
0.7
|
3
|
68.6
|
71
|
69.8
|
1.71
|
2.5
|
4
|
80.9
|
73.6
|
77.3
|
5.22
|
6.8
|
5
|
64.8
|
66.8
|
65.8
|
1.45
|
2.2
|
小鼠血浆(EDTA)
序号
|
测定值(mg/dL)
|
平均值(mg/dL)
|
SD
|
CV(%)
|
1
|
41.2
|
39.1
|
40.1
|
1.51
|
3.8
|
2
|
43.7
|
40.8
|
42.2
|
2.01
|
4.8
|
3
|
35.8
|
38.7
|
37.2
|
2.08
|
5.6
|
4
|
43.1
|
41.4
|
42.2
|
1.23
|
2.9
|
5
|
39.3
|
40.7
|
40
|
0.99
|
2.5
|
20% 稀释健康小鼠血清,CD-1(ICR),雄性 |
序号
|
平均值(mEq/L)
|
SD
|
CV(%)
|
1
|
1.118
|
0.001
|
0.1
|
2
|
0.788
|
0.007
|
0.9
|
3
|
0.715
|
0.022
|
3.1
|
4
|
0.794
|
0.002
|
0.2
|
5
|
0.829
|
0.005
|
0.6
|
健康小鼠血浆K2EDTA, CD-1(ICR),雄性
|
序号
|
平均值
|
SD
|
CV(%)
|
1
|
※0.309
|
0.002
|
0.6
|
2
|
※0.320
|
0.002
|
0.6
|
3
|
※0.205
|
0.004
|
2
|
4
|
※0.179
|
0.008
|
4.6
|
5
|
※0.305
|
0.017
|
5.6
|
健康比格犬EDTA血浆,雄性
|
序号
|
平均值(mEq/L)
|
SD
|
CV(%)
|
年龄
|
1
|
0.442
|
0.0033
|
0.7
|
4
|
2
|
0.427
|
0.011
|
2.6
|
6
|
3
|
※0.308
|
0.0037
|
1.2
|
10
|
4
|
0.478
|
0.0123
|
2.6
|
12
|
5
|
0.473
|
0.005
|
1
|
6
|
6
|
※0.367
|
0.0047
|
1.2
|
11
|
7
|
0.78
|
0.0133
|
1.7
|
10
|
8
|
0.411
|
0.0387
|
9.4
|
12
|
健康比格犬血清,雄性
|
序号
|
平均值(mEq/L)
|
SD
|
CV(%)
|
年龄
|
1
|
0.656
|
0.0027
|
0.4
|
4
|
2
|
0.665
|
0.032
|
4.8
|
6
|
3
|
0.425
|
0.009
|
2
|
6
|
4
|
※0.38
|
0.0057
|
1.5
|
11
|
5
|
0.882
|
0.007
|
0.8
|
12
|
6
|
0.599
|
0.006
|
1.1
|
6
|
7
|
1.006
|
0.0267
|
2.7
|
10
|
8
|
0.506
|
0.006
|
1.2
|
4
|
健康短毛猫EDTA血浆,雄性
|
序号
|
平均值(mEq/L)
|
SD
|
CV(%)
|
年龄
|
1
|
1.099
|
0.0103
|
0.9
|
0.5
|
2
|
※0.174
|
0.0033
|
2
|
1
|
3
|
※0.241
|
0.0043
|
1.7
|
3
|
4
|
※0.320
|
0.0067
|
2.2
|
0.5
|
5
|
※0.359
|
0.006
|
1.7
|
3
|
6
|
※0.197
|
0.012
|
6.2
|
3
|
7
|
※0.215
|
0.024
|
11.1
|
0.5
|
8
|
※0.131
|
0.016
|
12.3
|
1
|
健康短毛猫血清,雄性
|
序号
|
平均值(mEq/L)
|
SD
|
CV(%)
|
年龄
|
1
|
0.717
|
0.0117
|
1.6
|
3
|
2
|
0.635
|
0.01
|
1.6
|
3
|
3
|
1.004
|
0.0053
|
0.5
|
6
|
4
|
0.981
|
0.0093
|
0.9
|
4
|
5
|
0.636
|
0.017
|
2.7
|
6
|
6
|
1.193
|
0.0267
|
2.3
|
6
|
7
|
1.022
|
0.0893
|
8.8
|
1
|
8
|
※0.382
|
0.0157
|
4.1
|
1
|
◆稀释线性度测试
点击此处了解LabAssay™系列试剂盒
※ 产品已更新,旧编号为:294-65801
参考文献
1.
|
Kobayashi, Y. et al. : J. Pharmacogn. Nat. Prod., online (2015). Effects of Morus alba L. (Mulberry) Leaf Extract in Hypercholesterolemic Mice on Suppression of Cholesterol Synthesis ※小鼠肝脏提取物
|
2.
|
Gao, F. et al. : Evid. Based Complement. Alternat. Med., 2015, 801291(2015). Effect of Keishibukuryogan on Genetic and Dietary Obesity Models ※大鼠肝组织提取物
|
3.
|
Yoshioka, H. and Onosaka, S. : Fundam. Toxicol. Sci., 3, 151(2016). Zinc sulfate pretreatment prevents carbon tetrachloride-induced lethal toxicity through metallothionein-mediated suppression of lipid peroxidation in mice ※小鼠血浆
|
4.
|
Fujii, N. et al. : Aging Cell, 16, 508 (2017). Sterol regulatory element-binding protein-1c orchestrates metabolic remodeling of white adipose tissue by caloric restriction※大鼠血浆
|
5.
|
Ushio, M. et al. : Am. J. Physiol. Endocrinol. Metab., 305, E293 (2013). Ezetimibe prevents hepatic steatosis induced by a high-fat but not a high-fructose diet ※小鼠组织提取物
|
6.
|
Kobayashi, Y. et al. : Biosci. Biotechnol. Biochem., 74, 2385 (2010). Ameliorative Effects of Mulberry (Morus alba L.) Leaves on Hyperlipidemia in Rats Fed a High-Fat Diet: Induction of Fatty Acid Oxidation, Inhibition of Lipogenesis, and Suppression of Oxidative Stress ※大鼠组织提取物
|
产品编号 |
产品名称 |
产品规格 |
产品等级 |
备注 |
635-50981 |
LabAssay™ Cholestrol LabAssay™ 胆固醇检测试剂盒 |
500 tests |
for Cellbiology |
– |
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|