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DiD Perchlorate (DiIC18(5)) 细胞膜红色荧光探针 传统细胞膜荧光探针

发表于由

细胞膜荧光探针，DiI，DiO，DiD，DiR，DiA，CM-DiI，神经示踪，传统细胞膜荧光探针

产品名称 产品编号 CAS NO 规格
DiD Perchlorate (DiIC18(5)) 细胞膜红色荧光探针 MX4004-10MG 127274-91-3 10mg
DiD Perchlorate (DiIC18(5)) 细胞膜红色荧光探针 MX4004-25MG 127274-91-3 25mg

产品描述：

DiI, DiO, DiD和DiR作为一类长链的亲脂性二烷基碳菁类染料（Dialkylcarbocyanines）荧光染料家族，用于标记细胞膜以及其他脂溶性生物结构。作为一类环境敏感型荧光染料，当它们与膜结合或者与亲脂性生物分子（例如蛋白质，虽然在水中其荧光强度很弱）结合时，其荧光强度显著增强。一旦进入细胞后，它们在细胞内质膜中逐步扩散，于最佳浓度条件下可将整个细胞均匀染色。这些染料具很高的淬灭系数，偏光依赖性和很短的激发寿命。

四种染料呈现不同的荧光颜色，DiI（橙色荧光）、DiO（绿色荧光）、DiD（红色荧光）、DiR（深红色荧光），为活细胞多色彩荧光成像分析和流式细胞术提供了一种便捷的工具。DiO和DiI分别用标准FITC和TRITC滤光器检测，可结合使用。DiD可被633 nm氦-氖（He-Ne）激光激发，具有比DiI更长的激发和发射光波长，特别适合用于标记具本底荧光的细胞和组织。而，DiR在体内活体成像或者示踪中意义非凡，因其所发射的红外光可以高效地穿过细胞和组织，并且在红外光范围内，其本底荧光水平很低。

本品以DiD的高氯酸盐形式提供，英文名：1,1′-Dioctadecyl-3,3,3′,3′-Tetramethylindodicarbocyanine Perchlorate，纯度≥95%，适用于荧光检测研究。

基本特性：

1）化学名：2-[5-(1,3-Dihydro-3,3-dimethyl-1-octadecyl-2H-indol-2-ylidene)-1,3-pentadien-1-yl]-3,3-dimethyl-1-octadecyl-3H-indolium perchlorate

2）同义名：DiD Perchlorate; DiIC18(5); 1,1′-Dioctadecyl-3,3,3′,3′-Tetramethylindodicarbocyanine Perchlorate;

3）推荐滤光器：Omega-XF110, XF47, Chroma-41008, 31023

4）分子式：C61H99ClN2O4

5）分子量：959.91g/mol

6）外观：紫色或深蓝色固体

7）纯度：≥95%

8）Ex/Em：644/665 nm（甲醇）

9）溶解性：溶于DMF，DMSO，甲醇

保存与运输方法

保存： -20ºC避光干燥保存，有效期一年。

运输：冰袋运输。

应用示例（来自文献）：

文献来源：Diao J et al. A single vesicle-vesicle fusion assay for in vitro studies of SNAREs and accessory proteins. Nat Protoc. 2012 May;7(5):921-34.

Single-vesicle lipid-mixing assay: In our vesicle-vesicle lipid-mixing assay, the v-and t-SNARE proteins (or vice versa) are reconstituted into two different groups of vesicles labeled with acceptor (DiD) and donor (DiI) fluorophores, respectively. The acceptor-labeled vesicles are immobilized on the surface and then the donor-labeled vesicles are added in order to observe the formation of a single vesicle-vesicle complex through specific SNARE interactions12 (Fig. 1).

1,1′-Dioctadecyl-3,3,3′,3′-tetramethylindodicarbocyanine perchlorate, DiIC18(5) (DiD)：DiD working solution is prepared using 100% ethanol (1 mg ml− 1). CRITICAL The solvent is subject to evaporation. An absorbance measurement may be done to verify the accuracy of the dye concentration. Store the solution at −20 °C for up to 1 month without recalibration.

1,1′-Dioctadecyl-3,3,3′,3′-tetramethylindocarbocyanine perchlorate, DiIC18(3) (DiI)：DiI working solution is prepared using 100% ethanol (1 mg ml− 1). CRITICAL The solvent is subject to evaporation. An absorbance measurement may be done to verify the accuracy of the dye concentration. Store the solution at −20 °C for up to 1 month without recalibration.

注意事项

1）荧光染料均存在淬灭问题，请尽量注意避光，以减缓荧光淬灭。

2）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法

【注意】以下使用方法仅用作参考，可根据具体的实验条件做出调整。

1. 染色液制备

1）储存液制备：用DMSO或乙醇配置浓度1～5 mM的储存液。例如，取25mg DiD（Mw：959.91g/mol）溶于5.21ml无水DMSO中，充分溶解，即得到5mM的储存液。【注意】未使用的储存液分装储存在-20℃，避免反复冻融，且要避光保存。

2）工作液制备：用合适的缓冲液（如：无血清培养基，HBSS或PBS）稀释储存液，调整到1～5 μM的工作浓度。【注意】工作液最终浓度需要根据不同细胞系和实验体系来优化。建议从推荐浓度开始，以10倍范围为区间进行最优浓度的摸索。

2. 悬浮细胞染色

1）加入适当体积的染色工作液重悬细胞，使其密度为1×106/mL。

2）37℃孵育细胞2～20min，不同的细胞最佳培养时间不同。可以20min作为起始孵育时间，之后优化以保证得到均一化的标记结果。

3）孵育结束，按1000～1500 rpm离心5min。

4）去除上清液，之后轻柔加入37℃预热的生长培养液重悬细胞。

5）再重复3），4）步骤两次。

3. 贴壁细胞染色

1）将贴壁细胞培养于无菌盖玻片上。

2）从培养基中移走盖玻片，滤掉过量培养液，将盖玻片放在潮湿的小室内。

3）在盖玻片的一角加入100μL的染色工作液，轻轻晃动使染料均匀覆盖所有细胞。

4）37℃孵育细胞2～20min，不同的细胞最佳培养时间不同。可以20min作为起始孵育时间，之后优化以保证得到均一化的标记结果。

5）吸掉染色工作液，用培养液洗盖玻片2～3次，每次用预温的培养基覆盖所有细胞，孵育5～10min，然后吸走培养基。

4. 显微镜检测

1）DiD，DiO，DiI，DiR和DiS滤光器的选择参见下表：

货号 荧光探针 最大激发/最大发射波长

（Ex/Em）

 滤光片编号
Omeaga公司 Chroma公司
MX4002-10MG DiI 549/565nm XF108, XF32 41002, 31002
MX4001-25MG DiO 484/501nm XF100,XF2341001, 31001 41001, 31001
MX4004-25MG DiD 644/665nm XF110, XF47 41008, 31023
MX4005-25MG DiR 750/780nm XF112 41009

2）多色染料的同时检测，滤光器按照以下设定：

a) DiI和DiO＝Omega XF52，Chroma 51004；

b) DiI和DiD＝Omega XF92，Chroma 51007；

c) DiI，DiO和DiD＝Omega XF93，Chroma 61005；

5. 流式细胞仪检测

经DiO，DiI，DiD和DiR染色的细胞分别用流式细胞仪的FL1，FL2，FL3或FL4通道检测。

DiIC12(3) perchlorate 细胞膜荧光探针 CAS：75664-01-6

发表于由

细胞膜荧光探针，DiI，DiO，DiD，DiR，DiA，CM-DiI，神经示踪，传统细胞膜荧光探针，CAS：75664-01-6；

订购信息：

产品名称

 产品编号 CAS NO 规格 ​
DiIC12(3) perchlorate 细胞膜荧光探针 MX4041-25MG 75664-01-6 25mg

产品描述：

橙红色荧光、亲脂性碳菁染料-DiIC12(3)，是DiI (DiIC18(3))（Cat#：MX4002-10MG）的短链类似物，能比DiI更轻易插入细胞膜。在水中呈弱荧光，一旦插入膜后发强荧光且光相对稳定。脂质环境中具极其高消光系数和短激发态寿命（~1ns）。一旦加入细胞中，染料横向扩散进入质膜。DiIC12(3)是一种亲脂性神经元示踪剂，通常用于标记神经元项目以及其它细胞（特别是内皮细胞）的脂质双分子层。

基本特性：

1）CAS NO：75664-01-6

2）化学名：3H-Indolium, 1-dodecyl-2-(3-(1-dodecyl-1,3-dihydro-3,3-dimethyl-2H-indol-2-ylidene)-1-propenyl)- 3,3-dimethyl-, perchlorate

3）同义名：1,1’-Didodecyl-3,3,3’,3’-tetramethylindocarbocyanine perchlorate 1,1′-二(十二烷基)-3,3,3′,3′-四甲基吲哚碳菁高氯酸盐

4）分子式：C47H73N2O4Cl

5）分子量：765.55

6）纯度：≥95%（HPLC）

7）外观：固体

8）溶解性：溶于DMSO

9）Ex/Em：549/565nm（in DMSO）

10）化学结构式：

保存与运输方法

保存：-20°C避光干燥保存，至少1年有效。 

运输：冰袋运输。

 

注意事项

1） 荧光染料均存在淬灭问题，请尽量注意避光，以减缓荧光淬灭。

2）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

 

使用方法

【注意】以下使用方法仅用作参考，可根据具体的实验条件做出调整。

染色液制备

1）储存液制备：用 DMSO或乙醇配置浓度1～5 mM的储存液。例如，取25mg DiIC12(3)（Mw：765.55 g/mol）溶于6.53ml 乙醇中，充分溶解，即得到5mM的储存液。【注意】未使用的储存液分装储存在-20℃，避免反复冻融，且要避光保存。

2）工作液制备：用合适的缓冲液（如：无血清培养基，HBSS或PBS）稀释储存液，调整到1～5 μM的工作浓度。【注意】工作液最终浓度需要根据不同细胞系和实验体系来优化。建议从推荐浓度开始，以10倍范围为区间进行最优浓度的摸索。

悬浮细胞染色

1）加入适当体积的染色工作液重悬细胞，使其密度为1×106/mL。

2）37℃孵育细胞2～20min，不同的细胞最佳培养时间不同。可以20min作为起始孵育时间，之后优化以保证得到均一化的标记结果。

3）孵育结束，按1000～1500 rpm离心5min。

4）去除上清液，之后轻柔加入37℃预热的生长培养液重悬细胞。

5）再重复3），4）步骤两次。

贴壁细胞染色

1）将贴壁细胞培养于无菌盖玻片上。

2）从培养基中移走盖玻片，滤掉过量培养液，将盖玻片放在潮湿的小室内。

3）在盖玻片的一角加入100μL的染色工作液，轻轻晃动使染料均匀覆盖所有细胞。

4）37℃孵育细胞2～20min，不同的细胞最佳培养时间不同。可以20min作为起始孵育时间，之后优化以保证得到均一化的标记结果。

5）吸掉染色工作液，用培养液洗盖玻片2～3次，每次用预温的培养基覆盖所有细胞，孵育5～10min，然后吸走培养基。

显微镜检测

1）DiD，DiO，DiI和DiR滤光器的选择参见下表：

货号 荧光探针 最大激发/最大发射波长

（Ex/Em）

 滤光片编号​
Omega公司 Chroma公司
MX4041-25MG DiIC12(3) 549/565 nm XF108, XF32 41002, 31002
MX4001-10MG DiO 484/501 nm XF100,XF23 41001, 31001 41001, 31001
MX4004-25MG DiD 644/663 nm XF110, XF47 41008, 31023
MX4005-5MG DiR 748/780 nm XF112 41009

2）多色染料的同时检测，滤光器按照以下设定：

  1. a) DiI和DiO＝Omega XF52，Chroma 51004；
  2. b) DiI和DiD＝Omega XF92，Chroma 51007；
  3. c) DiI，DiO和DiD＝Omega XF93，Chroma 61005；

流式细胞仪检测

经DiO，DiIC12(3)，DiD和DiR染色的细胞分别用流式细胞仪的FL1，FL2，FL3或FL4通道。

相关产品

货号 名称 规格​
MX4001-10MG DiO (DiOC18(3)) 细胞膜绿色荧光探针 10mg
MX4002-10MG DiI (DiIC18(3)) 细胞膜橙红色荧光探针 10mg
MX4003-25MG DiIC16(3) Perchlorate 细胞膜橙红色荧光探针 25mg
MX4004-10MG DiD Perchlorate (DiIC18(5)) 细胞膜红色荧光探针 10mg
MX4005-5MG DiR Iodide (DiIC18(7)) 细胞膜深红色荧光探针 5mg
MX4006-25MG DiA (4-Di-16-ASP) 细胞膜荧光探针 25mg
MX4007-50UG Celltracker CM-DiI 活细胞示踪剂CM-DiI （红色） 1×50μg
MX4008-100MG DiOC2(3) 绿色膜电位荧光探针 100mg
MX4041-25MG DiIC12(3) perchlorate 细胞膜荧光探针 25mg

DiI (DiIC18(3)) 细胞膜橙红色荧光探针

发表于由

描述

DiI (DiIC18(3)) 细胞膜橙红色荧光探针（神经元示踪研究）

 

温馨提示：见细胞膜荧光探针专题，选择你想要的最适膜标记探针。

关键词：细胞膜荧光探针，DiI，DiO，DiD，DiR，DiA，CM-DiI，神经示踪，传统细胞膜荧光探针

订购信息：

产品名称

产品编号

CAS NO

规格

价格（元）

DiI (DiIC18(3))细胞膜橙红色荧光探针

MX4002-10MG

41085-99-8

10mg

348

DiI (DiIC18(3))细胞膜橙红色荧光探针

MX4002-50MG

41085-99-8

50mg

1128

DiI (DiIC18(3))细胞膜橙红色荧光探针

MX4002-100MG

41085-99-8

100mg

1868

 

产品描述：

DiI, DiO, DiD和DiR作为一类长链的亲脂性二烷基碳菁类染料（Dialkylcarbocyanines）荧光染料家族，用于标记细胞膜以及其他脂溶性生物结构。作为一类环境敏感型荧光染料，当它们与膜结合或者与亲脂性生物分子（例如蛋白质，虽然在水中其荧光强度很弱）结合时，其荧光强度显著增强。一旦进入细胞后，它们在细胞内质膜中逐步扩散，于最佳浓度条件下可将整个细胞均匀染色。这些染料具很高的淬灭系数，偏光依赖性和很短的激发寿命。

四种染料呈现不同的荧光颜色，DiI（橙色荧光）、DiO（绿色荧光）、DiD（红色荧光）、DiR（深红色荧光），为活细胞多色彩荧光成像分析和流式细胞术提供了一种便捷的工具。DiO和DiI分别用标准FITC和TRITC滤光器检测，可结合使用。其中，DiI及其衍生物由于极其低的细胞毒性，应用最为广泛。不仅普遍用于活体和固定组织及细胞的神经元逆行性和顺行性示踪分析，还可以用于检测细胞的融合和粘附，检测发育或移植过程的细胞迁移，通过FRAP（荧光光漂白恢复技术）检测脂质在细胞膜上的扩散过程，检测细胞毒性，以及标记脂蛋白如LDL和HDL等。

本品以DiI的高氯酸盐形式提供，英文全名：1,1′-Dioctadecyl-3,3,3′,3′-tetramethylindocarbocyanine perchlorate，CAS NO.41085-99-8，纯度≥98%（TLC），适用于荧光检测研究。

 

DiI橙红色荧光探针基本特性：

1） 同义名：DiI perchlorate; DiIC18(3);1,1′-Dioctadecyl-3,3,3′,3′-tetramethylindocarbocyanine perchlorate;

2） CAS NO：41085-99-8

3） 分子式：C59H97ClN2O4

4） 分子量：933.87 g/mol

5）纯度：≥98%（TLC）
6）溶解性：溶于DMF，DMSO，甲醇
7）外观：红色至暗红色，紫色至深紫色粉末
8）Ex/Em：550/567 nm（in phosphate buffer/SDS pH 7.0）
9） 推荐滤光器：Omega- XF108, XF32, Chroma-41002, 31002
10）化学结构图：


 

 

保存与运输方法

保存：4ºC干燥避光保存，有效期一年。

运输：冰袋运输。

注意事项

1）荧光染料均存在淬灭问题，请尽量注意避光，以减缓荧光淬灭。

2）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

 使用方法

【注意】以下使用方法仅用作参考，可根据具体的实验条件做出调整。

1.染色液制备

1）储存液制备：用DMSO或乙醇配置浓度1～5 mM的储存液。例如，取5mg DiI（Mw：933.87 g/mol）溶于1.07ml无水DMSO中，充分溶解，即得到5mM的储存液。【注意】未使用的储存液分装储存在-20℃，避免反复冻融。

2）工作液制备：用合适的缓冲液（如：无血清培养基，HBSS或PBS）稀释储存液，调整到1～5 μM的工作浓度。【注意】工作液最终浓度需要根据不同细胞系和实验体系来优化。建议从推荐浓度开始，以10倍范围为区间进行最优浓度的摸索。

2.悬浮细胞染色

1）加入适当体积的染色工作液重悬细胞，使其密度为1×106/mL。

2）37℃孵育细胞2～20min，不同的细胞最佳培养时间不同。可以20min作为起始孵育时间，之后优化以保证得到均一化的标记结果。

3）孵育结束，按1000～1500 rpm离心5min。

4）去除上清液，之后轻柔加入37℃预热的生长培养液重悬细胞。

5）再重复3），4）步骤两次。

3.贴壁细胞染色

1）将贴壁细胞培养于无菌盖玻片上。

2）从培养基中移走盖玻片，滤掉过量培养液，将盖玻片放在潮湿的小室内。

3）在盖玻片的一角加入100μL的染色工作液，轻轻晃动使染料均匀覆盖所有细胞。

4）37℃孵育细胞2～20min，不同的细胞最佳培养时间不同。可以20min作为起始孵育时间，之后优化以保证得到均一化的标记结果。

5）吸掉染色工作液，用培养液洗盖玻片2～3次，每次用预温的培养基覆盖所有细胞，孵育5～10min，然后吸走培养基。

4.显微镜检测

1）DiD，DiO，DiI，DiR和DiS滤光器的选择参见下表：

货号

荧光探针

最大激发/最大发射波长

（Ex/Em）

滤光片编号

Omeaga公司

Chroma公司

MX4002-10MG

DiI

549/565 nm

XF108, XF32

41002, 31002

MX4001-25MG

DiO

484/501nm

XF100,XF23 41001, 31001

41001, 31001

MX4004-25MG

DiD

644/665 nm

XF110, XF47

41008, 31023

MX4005-25MG

DiR

750/780 nm

XF112

41009

2）多色染料的同时检测，滤光器按照以下设定：

a) DiI和DiO＝Omega XF52，Chroma 51004；

b) DiI和DiD＝Omega XF92，Chroma 51007；

c) DiI，DiO和DiD＝Omega XF93，Chroma 61005；

5.流式细胞仪检测

经DiO，DiI，DiD和DiR染色的细胞分别用流式细胞仪的FL1，FL2，FL3或FL4通道检测。

应用示例（来自文献）：

文献一、Wexler-Cohen Y et al. Membrane-Anchored HIV-1 N-Heptad Repeat Peptides Are Highly Potent Cell Fusion Inhibitors via an Altered Mode of Action. PLoS Pathog. 2009 Jul;5(7):e1000509.

使用方法（Cell-Cell Fusion Inhibition Assay）：

Jurkat E6-1 and Jurkat HXBc2 cells were labeled with DiI and DiD lipophilic fluorescent probes, respectively. The two cell populations were co-incubated, in a ratio of 1∶1, for 6 h in the presence of eight different concentrations of the inhibitory peptides.Prior to measurements the cells were washed, spinned, dissolved in PBS, and put on ice. Cells co-incubated without the presence of peptides served as an optimal fusion reference. Unlabeled cells that were handled similarly served as an intrinsic fluorescence control.

 

Cells labeled separately with DiI or DiD were used to adjust the optimal separation of fluorescent signals. Jurkat HXBc2 cells labeled with DiI were co-incubated with Jurkat HXBc2 cells labeled with DiD for a fusion background that was subtracted from the measurements of the experiment.The following alterations were applied to the original protocol: (i) 5 µL of a 1 mg/mL DiI or DiD solution in dimethylsulfoxide (DMSO) was added to 1 mL of 4×106 cells/mL Jurkat E6-1 or Jurkat HXBc2 cells, respectively.(ii) For each data point 150,000 events were collected. Measurements were performed on a FACSort machine, upgraded to a FACSCalibur cell analyzer (Becton Dickinson).

 

文献二、Mazzoni M et al. Distribution, organization and innervation of gastric MALT in conventional piglet. J Anat. 2011 Nov;219(5):611-21.

使用方法（Tissue preparation and DiI tracing in fixed tissue）：

Small crystals of DiI were diluted at 3% in 100% ethanol and evaporated onto small glass beads (about 200 μm). The glass beads were placed in the middle of the gastric folliclesto detect if neurones projecting to the follicles were present. In other samples, after gently removing the overlying epithelium by the use of entomological forceps, glass beads were inserted into the lamina propria to identify whether neurones projecting to the mucosal layers were present.

Fig 1. Tangential sections of pig gastric mucosa at the level of the diverticulum.(A) Stereomicroscopy showing DiI‐coated beads (arrow) applied to a follicle in fixed tissue after 8 months of incubation. (B,C,E) DiI crystals applied to the follicles; note that the tracer was homogeneously distributed inside the follicles. (B) Labelled neurones (arrowhead) and processes entering the labelled follicle. (C) Polyhedral‐labelled neurone (arrowhead) more than 400 μm from a labelled follicle. (D) Higher magnification of the neurone shown in (C). (E) Elongated neurone (about 400 μm from the labelled follicle) along a thin nervous fascicle (arrowhead). (F) Higher magnification of the neurone shown in (E). (G,H) Two labelled neurones with an ovoid shape. Note that the neurones showed smoothly contoured soma and an eccentrically located nucleus (D,G,H,)

DiA 细胞膜荧光探针

发表于由

描述

DiA 细胞膜荧光探针

 

温馨提示：见细胞膜荧光探针专题，选择您想要的最适膜标记探针。

搜索关键词：

细胞膜荧光探针，DiI，DiO，DiD，DiR，DiA，CM-DiI，神经示踪，传统细胞膜荧光探针

订购信息：

产品名称 产品编号 规格 价格（元）
DiA 细胞膜荧光探针 MX4006-25MG 25mg 1188.00

产品描述：

DiA为亲脂性氨基苯乙烯基染料（dialkylaminostyryl dye），扩散进入细胞膜（比DiO扩散速度快），常用于神经元的示踪。最显著的特点就是能与DiI（DiIC18(3)）联合使用进行双色标记。DiA能用于甲醛固定组织染色，研究发现某些情况下当DiO不能标记固定组织时，DiA可得到良好标记。DiA水溶液中的荧光非常弱，但与磷脂双层膜结合后，光谱迁移荧光明显加强。因其发射光谱非常广，可被绿色，橙色，甚至是红色滤片检测到。

本品以DiA的碘盐形式提供，英文名：4-(4-(Dihexadecylamino)styryl)-N-methylpyridinium iodide，纯度≥90%，适用于荧光检测研究。

基本特性：

1）同义名：4-Di-16-ASP;4-(4-(Dihexadecylamino)styryl)-N-methylpyridinium iodide;

2）分子式：C46H79IN2

3）分子量：787.04g/mol

4）外观：红色或橙色固体

5）纯度：≥90%

6）Ex/Em：490/611nm（甲醇）

7）溶解性：溶于乙醇，DMSO，甲醇

8）推荐滤光器：Omega-XF21, Chroma-31024

9）化学结构图：

保存与运输方法

保存：-20ºC避光干燥保存，有效期一年。

运输：冰袋运输。

注意事项

1）荧光染料均存在淬灭问题，请尽量注意避光，以减缓荧光淬灭。

2）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法

【注意】以下使用方法仅用作参考，可根据具体的实验条件做出调整。

1. 染色液制备

1）储存液制备：用DMSO或乙醇配置浓度1～5 mM的储存液。例如，取25mg DiA（Mw：787.04g/mol）溶于6.35ml无水DMSO中，充分溶解，即得到5mM的储存液。【注意】未使用的储存液分装储存在-20℃，避免反复冻融，且要避光保存。

2）工作液制备：用合适的缓冲液（如：无血清培养基，HBSS或PBS）稀释储存液，调整到1～5 μM的工作浓度。【注意】工作液最终浓度需要根据不同细胞系和实验体系来优化。建议从推荐浓度开始，以10倍范围为区间进行最优浓度的摸索。

2. 悬浮细胞染色

1）加入适当体积的染色工作液重悬细胞，使其密度为1×106/mL。

2）37℃孵育细胞2～20min，不同的细胞最佳培养时间不同。可以20min作为起始孵育时间，之后优化以保证得到均一化的标记结果。

3）孵育结束，按1000～1500 rpm离心5min。

4）去除上清液，之后轻柔加入37℃预热的生长培养液重悬细胞。

5）再重复3），4）步骤两次。

3. 贴壁细胞染色

1）将贴壁细胞培养于无菌盖玻片上。

2）从培养基中移走盖玻片，滤掉过量培养液，将盖玻片放在潮湿的小室内。

3）在盖玻片的一角加入100μL的染色工作液，轻轻晃动使染料均匀覆盖所有细胞。

4）37℃孵育细胞2～20min，不同的细胞最佳培养时间不同。可以20min作为起始孵育时间，之后优化以保证得到均一化的标记结果。

5）吸掉染色工作液，用培养液洗盖玻片2～3次，每次用预温的培养基覆盖所有细胞，孵育5～10min，然后吸走培养基。

附表 DiD，DiO，DiI，DiR和DiA光谱特征汇表

货号

荧光探针

最大激发/最大发射波长

（Ex/Em）

滤光片编号*

Omega公司

Chroma公司
MX4002-10MG DiI 549/565nm XF108, XF32 41002, 31002
MX4001-10MG DiO 484/501nm XF100,XF23 41001, 31001
MX4004-25MG DiD 644/663nm XF110, XF47 41008, 31023
MX4005-5MG DiR** 748/780nm XF112 41009
MX4006-25MG DiA 491/613 XF21 31024
*：滤光片编号是荧光显微镜检测的建议宽带滤片设置。

**：DiR的荧光发射肉眼不可见，必须通过CCD摄像头或其他近红外敏感检测器检测。

DiR Iodide (DiIC18(7)) 细胞膜深红色荧光探针

发表于由

描述

DiR Iodide (DiIC18(7)) 细胞膜深红色荧光探针

温馨提示：见细胞膜荧光探针专题，选择您想要的最适膜标记探针。

搜索关键词：

细胞膜荧光探针，DiI，DiO，DiD，DiR，DiA，CM-DiI，神经示踪，传统细胞膜荧光探针

订购信息：

产品名称 产品编号               规格                 价格（元）      
DiR Iodide (DiIC18(7)) 细胞膜深红色荧光探针     MX4005-5MG 5mg 398.00
DiR Iodide (DiIC18(7)) 细胞膜深红色荧光探针 MX4005-25MG 25mg 1188.00

 

产品描述：

DiI, DiO, DiD和DiR作为一类长链的亲脂性二烷基碳菁类染料（Dialkylcarbocyanines）荧光染料家族，用于标记细胞膜以及其他脂溶性生物结构。作为一类环境敏感型荧光染料，当它们与膜结合或者与亲脂性生物分子（例如蛋白质，虽然在水中其荧光强度很弱）结合时，其荧光强度显著增强。一旦进入细胞后，它们在细胞内质膜中逐步扩散，于最佳浓度条件下可将整个细胞均匀染色。这些染料具很高的淬灭系数，偏光依赖性和很短的激发寿命。

四种染料呈现不同的荧光颜色，DiI（橙色荧光）、DiO（绿色荧光）、DiD（红色荧光）、DiR（深红色荧光），为活细胞多色彩荧光成像分析和流式细胞术提供了一种便捷的工具。DiO和DiI分别用标准FITC和TRITC滤光器检测，可结合使用。DiD可被633 nm氦-氖（He-Ne）激光激发，具有比DiI更长的激发和发射光波长，特别适合用于标记具本底荧光的细胞和组织。而，DiR在体内活体成像或者示踪中意义非凡，因其所发射的红外光可以高效地穿过细胞和组织，并且在红外光范围内，其本底荧光水平很低。

本品以DiR的碘盐形式提供，英文名：1,1-dioctadecyl-3,3,3,3-tetramethylindotricarbocyaine iodide，纯度≥95%，适用于荧光检测研究。

基本特性：

1）同义名：DiR Iodide; DiIC18(7);1,1-dioctadecyl-3,3,3,3-tetramethylindotricarbocyaine iodide;

2）推荐滤光器：Omega-XF112, Chroma-41009

3）分子式：C63H101IN2

4）分子量：1013.39g/mol

5）外观：蓝色至深蓝色固体

6）纯度：≥95%（HPLC） 

7）Ex/Em：750/780 nm（甲醇）

8）溶解性：溶于DMF，DMSO，甲醇

9）化学结构图：  

    

 

保存与运输方法

保存：-20ºC避光干燥保存，有效期二年。

运输：冰袋运输。

应用示例（来自文献）

文献来源：Eisenblätter M et al. In Vivo Optical Imaging of Cellular Inflammatory Response in Granuloma Formation Using Fluorescence-Labeled Macrophages. J Nucl Med. 2009 Oct;50(10):1676-82.

 

标记方法（Labeling Protocol）：脂质示踪剂DiR（1,1-dioctadecyl-3,3,3,3-tetramethylindotricarbocyanine iodide），最大激发或者发射波长位于近红外区域（Ex/Em：750/782nm），溶于乙醇（0.98mM）。预实验中用梯度浓度的DiR（0.98~197nM）来确定标记效率。后续实验中，单核细胞（1 × 105/mL培养基）加入2ul DiR标记液（终浓度为19.7uM）孵育5min，PBS清洗3次后，重悬于细胞培养液中。流式细胞仪检测标记效率。

 

Cutaneous Granuloma (CG) Model（皮肤肉芽肿体内模型）：在小鼠侧区皮下注射1ml 聚丙烯酰胺凝胶（PAG）诱导皮肤肉芽肿形成。为了诱导炎症，向PAG内加入脂多糖LPS（10ug LPS/ml）。在凝胶移植前24h静脉注射DiR标记的巨噬细胞或对照巨噬细胞。使用FRI和FMT在注射后每日观察小鼠，持续7天。

FIG 1. FMT of mice showed distribution of Mϕs inside pellets. (A) FMT was performed 72 h after injection of labeled Mϕs (5 × 106) to resolve 3-dimensional distribution of Mϕs in target tissue (left, NIRF image; right, color-encoded FMT). FMT confirmed FRI results and showed that Mϕs distributed mainly in periphery of pellets. (B) Fluorescence quantification by FMT showed approximately 2.7 times higher signal in lipopolysaccharide-containing pellets (▪) than in controls (□).

 

文献来源：Jiang H et al. Liver-targeted liposomes for codelivery of curcumin and combretastatin A4 phosphate: preparation, characterization, and antitumor effects. Int J Nanomedicine. 2019 Mar 8;14:1789-1804.

 

DiR标记GA LPs的制备（Preparation of DiR-loaded GA LPs）:First, 120 mg l-α-phosphatidylcholine, 40 mg Chol, 20 mg DSPE-PEG2,000-GA, and 0.2 mg DiR were mixed in 5 mL Chol at a mass ratio of 600:200:100:1 in an eggplant-shaped flask, dried until a thin-lipid film had formed on the rotary evaporator under reduced pressure, and heated in a 35°C water-bath. The film was hydrated with 5 mL PBS, followed by sonication. The obtained DiR-GA LPs were filtered in a 220 nm filter device, and the final concentration of DiR was 40 µg/mL.

 

体内实时近外荧光成像（In vivo real-time near-infrared fluorescence imaging）： NIRF was used to observe the biodistribution of GA LPs formulation in vivo, and DiR-GA LPs (40 µg/mL) were prepared to monitor the fate of LPs. When tumors were 100 mm3, DiR-GA LPs were injected into tail veins of mice. Free DiR was used as control. Precisely 10 mg DiR iodide in a 10 mL volumetric bottle was dissolved in methanol at a constant volume and prepared into a 1 mg/mL drug-reserve solution, which was stored at 4°C in the refrigerator for later use. DiR iodide reserve solution diluted with normal saline to the concentration of 40 µg/mL. Mice were anesthetized with 10% chloral hydrate and real-time NIRF images obtained with excitation and emission at 745 and 835 nm, respectively.44 Results were analyzed using the Living Image 3.1 software.

FIG2. NIRF images of H22 tumor-bearing mice after injection of free DiR and DiR-GA LPs. Results showed that NIRF signals of the free-DiR group were lower than the DiR-GA LPs group from 1 to 48 hours. No fluorescence signals in the tumor regions were detected for the free-DiR group, except at 2 hours. By contrast, DiR-GA LPs increased in accumulation in tumor regions and signals were sustained at 48 hours after injection. The GA LP drug loading system increased the accumulation of DiR in tumors.

注意事项

1）荧光染料均存在淬灭问题，请尽量注意避光，以减缓荧光淬灭。

2）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法

【注意】以下使用方法仅用作参考，可根据具体的实验条件做出调整。

1. 染色液制备

1）储存液制备：用DMSO或乙醇配置浓度1～5 mM的储存液。例如，取25mg DiR（Mw：1013.39g/mol）溶于4.93ml无水DMSO中，充分溶解，即得到5mM的储存液。【注意】未使用的储存液分装储存在-20℃，避免反复冻融，且要避光保存。

2）工作液制备：用合适的缓冲液（如：无血清培养基，HBSS或PBS）稀释储存液，调整到1～5 μM的工作浓度。【注意】工作液最终浓度需要根据不同细胞系和实验体系来优化。建议从推荐浓度开始，以10倍范围为区间进行最优浓度的摸索。

2. 悬浮细胞染色

1）加入适当体积的染色工作液重悬细胞，使其密度为1×106/mL。

2）37℃孵育细胞2～20min，不同的细胞最佳培养时间不同。可以20min作为起始孵育时间，之后优化以保证得到均一化的标记结果。

3）孵育结束，按1000～1500 rpm离心5min。

4）去除上清液，之后轻柔加入37℃预热的生长培养液重悬细胞。

5）再重复3），4）步骤两次。

3. 贴壁细胞染色

1）将贴壁细胞培养于无菌盖玻片上。

2）从培养基中移走盖玻片，滤掉过量培养液，将盖玻片放在潮湿的小室内。

3）在盖玻片的一角加入100μL的染色工作液，轻轻晃动使染料均匀覆盖所有细胞。

4）37℃孵育细胞2～20min，不同的细胞最佳培养时间不同。可以20min作为起始孵育时间，之后优化以保证得到均一化的标记结果。

5）吸掉染色工作液，用培养液洗盖玻片2～3次，每次用预温的培养基覆盖所有细胞，孵育5～10min，然后吸走培养基。

4. 显微镜检测

1）DiD，DiO，DiI，DiR和DiS滤光器的选择参见下表：

货号                  荧光探针            最大激发/最大发射波长  

（Ex/Em）

 滤光片编号
Omeaga公司 Chroma公司                 
MX4002-10MG DiI 549/565nm XF108, XF32 41002, 31002
MX4001-25MG DiO 484/501nm XF100,XF2341001, 31001 41001, 31001
MX4004-25MG DiD 644/665nm XF110, XF47 41008, 31023
MX4005-25MG DiR 750/780nm XF112 41009

2）多色染料的同时检测，滤光器按照以下设定：

a) DiI和DiO＝Omega XF52，Chroma 51004；

b) DiI和DiD＝Omega XF92，Chroma 51007；

c) DiI，DiO和DiD＝Omega XF93，Chroma 61005；

5. 流式细胞仪检测

经DiO，DiI，DiD和DiR染色的细胞分别用流式细胞仪的FL1，FL2，FL3或FL4通道检测。

DiR Iodide (DiIC18(7)) 细胞膜深红色荧光探针

发表于由

描述

DiR Iodide (DiIC18(7)) 细胞膜深红色荧光探针

温馨提示：见细胞膜荧光探针专题，选择您想要的最适膜标记探针。

搜索关键词：

细胞膜荧光探针，DiI，DiO，DiD，DiR，DiA，CM-DiI，神经示踪，传统细胞膜荧光探针

订购信息：

产品名称 产品编号               规格                 价格（元）      
DiR Iodide (DiIC18(7)) 细胞膜深红色荧光探针     MX4005-5MG 5mg 398.00
DiR Iodide (DiIC18(7)) 细胞膜深红色荧光探针 MX4005-25MG 25mg 1188.00

 

产品描述：

DiI, DiO, DiD和DiR作为一类长链的亲脂性二烷基碳菁类染料（Dialkylcarbocyanines）荧光染料家族，用于标记细胞膜以及其他脂溶性生物结构。作为一类环境敏感型荧光染料，当它们与膜结合或者与亲脂性生物分子（例如蛋白质，虽然在水中其荧光强度很弱）结合时，其荧光强度显著增强。一旦进入细胞后，它们在细胞内质膜中逐步扩散，于最佳浓度条件下可将整个细胞均匀染色。这些染料具很高的淬灭系数，偏光依赖性和很短的激发寿命。

四种染料呈现不同的荧光颜色，DiI（橙色荧光）、DiO（绿色荧光）、DiD（红色荧光）、DiR（深红色荧光），为活细胞多色彩荧光成像分析和流式细胞术提供了一种便捷的工具。DiO和DiI分别用标准FITC和TRITC滤光器检测，可结合使用。DiD可被633 nm氦-氖（He-Ne）激光激发，具有比DiI更长的激发和发射光波长，特别适合用于标记具本底荧光的细胞和组织。而，DiR在体内活体成像或者示踪中意义非凡，因其所发射的红外光可以高效地穿过细胞和组织，并且在红外光范围内，其本底荧光水平很低。

本品以DiR的碘盐形式提供，英文名：1,1-dioctadecyl-3,3,3,3-tetramethylindotricarbocyaine iodide，纯度≥95%，适用于荧光检测研究。

基本特性：

1）同义名：DiR Iodide; DiIC18(7);1,1-dioctadecyl-3,3,3,3-tetramethylindotricarbocyaine iodide;

2）推荐滤光器：Omega-XF112, Chroma-41009

3）分子式：C63H101IN2

4）分子量：1013.39g/mol

5）外观：蓝色至深蓝色固体

6）纯度：≥95%（HPLC） 

7）Ex/Em：750/780 nm（甲醇）

8）溶解性：溶于DMF，DMSO，甲醇

9）化学结构图：  

    

 

保存与运输方法

保存：-20ºC避光干燥保存，有效期二年。

运输：冰袋运输。

应用示例（来自文献）

文献来源：Eisenblätter M et al. In Vivo Optical Imaging of Cellular Inflammatory Response in Granuloma Formation Using Fluorescence-Labeled Macrophages. J Nucl Med. 2009 Oct;50(10):1676-82.

 

标记方法（Labeling Protocol）：脂质示踪剂DiR（1,1-dioctadecyl-3,3,3,3-tetramethylindotricarbocyanine iodide），最大激发或者发射波长位于近红外区域（Ex/Em：750/782nm），溶于乙醇（0.98mM）。预实验中用梯度浓度的DiR（0.98~197nM）来确定标记效率。后续实验中，单核细胞（1 × 105/mL培养基）加入2ul DiR标记液（终浓度为19.7uM）孵育5min，PBS清洗3次后，重悬于细胞培养液中。流式细胞仪检测标记效率。

 

Cutaneous Granuloma (CG) Model（皮肤肉芽肿体内模型）：在小鼠侧区皮下注射1ml 聚丙烯酰胺凝胶（PAG）诱导皮肤肉芽肿形成。为了诱导炎症，向PAG内加入脂多糖LPS（10ug LPS/ml）。在凝胶移植前24h静脉注射DiR标记的巨噬细胞或对照巨噬细胞。使用FRI和FMT在注射后每日观察小鼠，持续7天。

FIG 1. FMT of mice showed distribution of Mϕs inside pellets. (A) FMT was performed 72 h after injection of labeled Mϕs (5 × 106) to resolve 3-dimensional distribution of Mϕs in target tissue (left, NIRF image; right, color-encoded FMT). FMT confirmed FRI results and showed that Mϕs distributed mainly in periphery of pellets. (B) Fluorescence quantification by FMT showed approximately 2.7 times higher signal in lipopolysaccharide-containing pellets (▪) than in controls (□).

 

文献来源：Jiang H et al. Liver-targeted liposomes for codelivery of curcumin and combretastatin A4 phosphate: preparation, characterization, and antitumor effects. Int J Nanomedicine. 2019 Mar 8;14:1789-1804.

 

DiR标记GA LPs的制备（Preparation of DiR-loaded GA LPs）:First, 120 mg l-α-phosphatidylcholine, 40 mg Chol, 20 mg DSPE-PEG2,000-GA, and 0.2 mg DiR were mixed in 5 mL Chol at a mass ratio of 600:200:100:1 in an eggplant-shaped flask, dried until a thin-lipid film had formed on the rotary evaporator under reduced pressure, and heated in a 35°C water-bath. The film was hydrated with 5 mL PBS, followed by sonication. The obtained DiR-GA LPs were filtered in a 220 nm filter device, and the final concentration of DiR was 40 µg/mL.

 

体内实时近外荧光成像（In vivo real-time near-infrared fluorescence imaging）： NIRF was used to observe the biodistribution of GA LPs formulation in vivo, and DiR-GA LPs (40 µg/mL) were prepared to monitor the fate of LPs. When tumors were 100 mm3, DiR-GA LPs were injected into tail veins of mice. Free DiR was used as control. Precisely 10 mg DiR iodide in a 10 mL volumetric bottle was dissolved in methanol at a constant volume and prepared into a 1 mg/mL drug-reserve solution, which was stored at 4°C in the refrigerator for later use. DiR iodide reserve solution diluted with normal saline to the concentration of 40 µg/mL. Mice were anesthetized with 10% chloral hydrate and real-time NIRF images obtained with excitation and emission at 745 and 835 nm, respectively.44 Results were analyzed using the Living Image 3.1 software.

FIG2. NIRF images of H22 tumor-bearing mice after injection of free DiR and DiR-GA LPs. Results showed that NIRF signals of the free-DiR group were lower than the DiR-GA LPs group from 1 to 48 hours. No fluorescence signals in the tumor regions were detected for the free-DiR group, except at 2 hours. By contrast, DiR-GA LPs increased in accumulation in tumor regions and signals were sustained at 48 hours after injection. The GA LP drug loading system increased the accumulation of DiR in tumors.

注意事项

1）荧光染料均存在淬灭问题，请尽量注意避光，以减缓荧光淬灭。

2）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法

【注意】以下使用方法仅用作参考，可根据具体的实验条件做出调整。

1. 染色液制备

1）储存液制备：用DMSO或乙醇配置浓度1～5 mM的储存液。例如，取25mg DiR（Mw：1013.39g/mol）溶于4.93ml无水DMSO中，充分溶解，即得到5mM的储存液。【注意】未使用的储存液分装储存在-20℃，避免反复冻融，且要避光保存。

2）工作液制备：用合适的缓冲液（如：无血清培养基，HBSS或PBS）稀释储存液，调整到1～5 μM的工作浓度。【注意】工作液最终浓度需要根据不同细胞系和实验体系来优化。建议从推荐浓度开始，以10倍范围为区间进行最优浓度的摸索。

2. 悬浮细胞染色

1）加入适当体积的染色工作液重悬细胞，使其密度为1×106/mL。

2）37℃孵育细胞2～20min，不同的细胞最佳培养时间不同。可以20min作为起始孵育时间，之后优化以保证得到均一化的标记结果。

3）孵育结束，按1000～1500 rpm离心5min。

4）去除上清液，之后轻柔加入37℃预热的生长培养液重悬细胞。

5）再重复3），4）步骤两次。

3. 贴壁细胞染色

1）将贴壁细胞培养于无菌盖玻片上。

2）从培养基中移走盖玻片，滤掉过量培养液，将盖玻片放在潮湿的小室内。

3）在盖玻片的一角加入100μL的染色工作液，轻轻晃动使染料均匀覆盖所有细胞。

4）37℃孵育细胞2～20min，不同的细胞最佳培养时间不同。可以20min作为起始孵育时间，之后优化以保证得到均一化的标记结果。

5）吸掉染色工作液，用培养液洗盖玻片2～3次，每次用预温的培养基覆盖所有细胞，孵育5～10min，然后吸走培养基。

4. 显微镜检测

1）DiD，DiO，DiI，DiR和DiS滤光器的选择参见下表：

货号                  荧光探针            最大激发/最大发射波长  

（Ex/Em）

 滤光片编号
Omeaga公司 Chroma公司                 
MX4002-10MG DiI 549/565nm XF108, XF32 41002, 31002
MX4001-25MG DiO 484/501nm XF100,XF2341001, 31001 41001, 31001
MX4004-25MG DiD 644/665nm XF110, XF47 41008, 31023
MX4005-25MG DiR 750/780nm XF112 41009

2）多色染料的同时检测，滤光器按照以下设定：

a) DiI和DiO＝Omega XF52，Chroma 51004；

b) DiI和DiD＝Omega XF92，Chroma 51007；

c) DiI，DiO和DiD＝Omega XF93，Chroma 61005；

5. 流式细胞仪检测

经DiO，DiI，DiD和DiR染色的细胞分别用流式细胞仪的FL1，FL2，FL3或FL4通道检测。

DiD Perchlorate (DiIC18(5)) 细胞膜红色荧光探针

发表于由

描述

DiD Perchlorate (DiIC18(5)) 细胞膜红色荧光探针

温馨提示：见细胞膜荧光探针专题，选择您想要的最适膜标记探针。

搜索关键词：

细胞膜荧光探针，DiI，DiO，DiD，DiR，DiA，CM-DiI，神经示踪，传统细胞膜荧光探针

订购信息：

产品名称 产品编号 CAS NO 规格 价格（元）
DiD Perchlorate (DiIC18(5)) 细胞膜红色荧光探针 MX4004-25MG 127274-91-3 25mg 1188.00

产品描述：

DiI, DiO, DiD和DiR作为一类长链的亲脂性二烷基碳菁类染料（Dialkylcarbocyanines）荧光染料家族，用于标记细胞膜以及其他脂溶性生物结构。作为一类环境敏感型荧光染料，当它们与膜结合或者与亲脂性生物分子（例如蛋白质，虽然在水中其荧光强度很弱）结合时，其荧光强度显著增强。一旦进入细胞后，它们在细胞内质膜中逐步扩散，于最佳浓度条件下可将整个细胞均匀染色。这些染料具很高的淬灭系数，偏光依赖性和很短的激发寿命。

四种染料呈现不同的荧光颜色，DiI（橙色荧光）、DiO（绿色荧光）、DiD（红色荧光）、DiR（深红色荧光），为活细胞多色彩荧光成像分析和流式细胞术提供了一种便捷的工具。DiO和DiI分别用标准FITC和TRITC滤光器检测，可结合使用。DiD可被633 nm氦-氖（He-Ne）激光激发，具有比DiI更长的激发和发射光波长，特别适合用于标记具本底荧光的细胞和组织。而，DiR在体内活体成像或者示踪中意义非凡，因其所发射的红外光可以高效地穿过细胞和组织，并且在红外光范围内，其本底荧光水平很低。

本品以DiD的高氯酸盐形式提供，英文名：1,1′-Dioctadecyl-3,3,3′,3′-Tetramethylindodicarbocyanine Perchlorate，纯度≥95%，适用于荧光检测研究。

基本特性：

1）化学名：2-[5-(1,3-Dihydro-3,3-dimethyl-1-octadecyl-2H-indol-2-ylidene)-1,3-pentadien-1-yl]-3,3-dimethyl-1-octadecyl-3H-indolium perchlorate

2）同义名：DiD Perchlorate; DiIC18(5); 1,1′-Dioctadecyl-3,3,3′,3′-Tetramethylindodicarbocyanine Perchlorate;

3）推荐滤光器：Omega-XF110, XF47, Chroma-41008, 31023

4）分子式：C61H99ClN2O4

5）分子量：959.91g/mol

6）外观：紫色或深蓝色固体

7）纯度：≥95%

8）Ex/Em：644/665 nm（甲醇）

9）溶解性：溶于DMF，DMSO，甲醇

10）化学结构图：

保存与运输方法

保存： -20ºC避光干燥保存，有效期一年。

运输：冰袋运输。

应用示例（来自文献）：

文献来源：Diao J et al. A single vesicle-vesicle fusion assay for in vitro studies of SNAREs and accessory proteins. Nat Protoc. 2012 May;7(5):921-34.

Single-vesicle lipid-mixing assay: In our vesicle-vesicle lipid-mixing assay, the v-and t-SNARE proteins (or vice versa) are reconstituted into two different groups of vesicles labeled with acceptor (DiD) and donor (DiI) fluorophores, respectively. The acceptor-labeled vesicles are immobilized on the surface and then the donor-labeled vesicles are added in order to observe the formation of a single vesicle-vesicle complex through specific SNARE interactions12 (Fig. 1).

1,1′-Dioctadecyl-3,3,3′,3′-tetramethylindodicarbocyanine perchlorate, DiIC18(5) (DiD)：DiD working solution is prepared using 100% ethanol (1 mg ml− 1). CRITICAL The solvent is subject to evaporation. An absorbance measurement may be done to verify the accuracy of the dye concentration. Store the solution at −20 °C for up to 1 month without recalibration.

1,1′-Dioctadecyl-3,3,3′,3′-tetramethylindocarbocyanine perchlorate, DiIC18(3) (DiI)：DiI working solution is prepared using 100% ethanol (1 mg ml− 1). CRITICAL The solvent is subject to evaporation. An absorbance measurement may be done to verify the accuracy of the dye concentration. Store the solution at −20 °C for up to 1 month without recalibration.

注意事项

1）荧光染料均存在淬灭问题，请尽量注意避光，以减缓荧光淬灭。

2）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法

【注意】以下使用方法仅用作参考，可根据具体的实验条件做出调整。

1. 染色液制备

1）储存液制备：用DMSO或乙醇配置浓度1～5 mM的储存液。例如，取25mg DiD（Mw：959.91g/mol）溶于5.21ml无水DMSO中，充分溶解，即得到5mM的储存液。【注意】未使用的储存液分装储存在-20℃，避免反复冻融，且要避光保存。

2）工作液制备：用合适的缓冲液（如：无血清培养基，HBSS或PBS）稀释储存液，调整到1～5 μM的工作浓度。【注意】工作液最终浓度需要根据不同细胞系和实验体系来优化。建议从推荐浓度开始，以10倍范围为区间进行最优浓度的摸索。

2. 悬浮细胞染色

1）加入适当体积的染色工作液重悬细胞，使其密度为1×106/mL。

2）37℃孵育细胞2～20min，不同的细胞最佳培养时间不同。可以20min作为起始孵育时间，之后优化以保证得到均一化的标记结果。

3）孵育结束，按1000～1500 rpm离心5min。

4）去除上清液，之后轻柔加入37℃预热的生长培养液重悬细胞。

5）再重复3），4）步骤两次。

3. 贴壁细胞染色

1）将贴壁细胞培养于无菌盖玻片上。

2）从培养基中移走盖玻片，滤掉过量培养液，将盖玻片放在潮湿的小室内。

3）在盖玻片的一角加入100μL的染色工作液，轻轻晃动使染料均匀覆盖所有细胞。

4）37℃孵育细胞2～20min，不同的细胞最佳培养时间不同。可以20min作为起始孵育时间，之后优化以保证得到均一化的标记结果。

5）吸掉染色工作液，用培养液洗盖玻片2～3次，每次用预温的培养基覆盖所有细胞，孵育5～10min，然后吸走培养基。

4. 显微镜检测

1）DiD，DiO，DiI，DiR和DiS滤光器的选择参见下表：

货号 荧光探针 最大激发/最大发射波长

（Ex/Em）

 滤光片编号
Omeaga公司 Chroma公司
MX4002-10MG DiI 549/565nm XF108, XF32 41002, 31002
MX4001-25MG DiO 484/501nm XF100,XF2341001, 31001 41001, 31001
MX4004-25MG DiD 644/665nm XF110, XF47 41008, 31023
MX4005-25MG DiR 750/780nm XF112 41009

2）多色染料的同时检测，滤光器按照以下设定：

a) DiI和DiO＝Omega XF52，Chroma 51004；

b) DiI和DiD＝Omega XF92，Chroma 51007；

c) DiI，DiO和DiD＝Omega XF93，Chroma 61005；

5. 流式细胞仪检测

经DiO，DiI，DiD和DiR染色的细胞分别用流式细胞仪的FL1，FL2，FL3或FL4通道检测。

DiIC16(3) Perchlorate 细胞膜橙红色荧光探针

发表于由

描述

DiIC16(3) Perchlorate 细胞膜橙红色荧光探针

温馨提示：见细胞膜荧光探针专题，选择您想要的最适膜标记探针。

搜索关键词：

细胞膜荧光探针，DiI，DiO，DiD，DiR，DiA，CM-DiI，神经示踪，传统细胞膜荧光探针

订购信息：

产品名称 产品编号 CAS NO 规格 价格（元）
DiIC16(3) Perchlorate 细胞膜橙红色荧光探针 MX4003-25MG 78566-75-3 25mg 1188.00

产品描述：

DiI, DiO, DiD和DiR作为一类长链的亲脂性二烷基碳菁类染料（Dialkylcarbocyanines）荧光染料家族，用于标记细胞膜以及其他脂溶性生物结构。作为一类环境敏感型荧光染料，当它们与膜结合或者与亲脂性生物分子（例如蛋白质，虽然在水中其荧光强度很弱）结合时，其荧光强度显著增强。一旦进入细胞后，它们在细胞内质膜中逐步扩散，于最佳浓度条件下可将整个细胞均匀染色。这些染料具很高的淬灭系数，偏光依赖性和很短的激发寿命。

四种染料呈现不同的荧光颜色，DiI（橙色荧光）、DiO（绿色荧光）、DiD（红色荧光）、DiR（深红色荧光），为活细胞多色彩荧光成像分析和流式细胞术提供了一种便捷的工具。DiO和DiI分别用标准FITC和TRITC滤光器检测，可结合使用。其中，DiI及其衍生物由于极其低的细胞毒性，应用最为广泛。不仅普遍用于活体和固定组织及细胞的神经元逆行性和顺行性示踪分析，还可以用于检测细胞的融合和粘附，检测发育或移植过程的细胞迁移，通过FRAP（荧光光漂白恢复技术）检测脂质在细胞膜上的扩散过程，检测细胞毒性，以及标记脂蛋白如LDL和HDL等。

本品为DiI（DiIC18(3)）的短链衍生物，且以高氯酸盐形式提供，即DiIC16(3) Perchlorate，能够更容易穿透进入细胞膜。CAS NO：78566-75-3，适用于荧光检测研究。

基本特性：

1）CAS NO：78566-75-3

2）同义名：DiIC16(3); 1,1′-Dihexadecyl-3,3,3′,3′-Tetramethylindocarbocyanine Perchlorate;

3）推荐滤光器：Omega-XF108, XF32, Chroma-41002, 31002

4）分子式：C55H89N2O4Cl

5）分子量：877.76g/mol

6）外观：紫色固体

7）Ex/Em：549/565 nm（甲醇）

8）溶解性：溶于DMF，DMSO，甲醇

9） 化学结构图：

保存与运输方法

保存：2-8ºC干燥避光保存，有效期一年。

运输：冰袋运输。

注意事项

1）荧光染料均存在淬灭问题，请尽量注意避光，以减缓荧光淬灭。

2）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法

【注意】以下使用方法仅用作参考，可根据具体的实验条件做出调整。

1. 染色液制备

1）储存液制备：用DMSO或乙醇配置浓度1～5 mM的储存液。例如，取25mgDiIC16(3)（Mw：933.87g/mol）溶于5.7ml无水DMSO中，充分溶解，即得到5mM的储存液。【注意】未使用的储存液分装储存在-20℃，避免反复冻融。

2）工作液制备：用合适的缓冲液（如：无血清培养基，HBSS或PBS）稀释储存液，调整到1～5 μM的工作浓度。【注意】工作液最终浓度需要根据不同细胞系和实验体系来优化。建议从推荐浓度开始，以10倍范围为区间进行最优浓度的摸索。

2. 悬浮细胞染色

1）加入适当体积的染色工作液重悬细胞，使其密度为1×106/mL。

2）37℃孵育细胞2～20min，不同的细胞最佳培养时间不同。可以20min作为起始孵育时间，之后优化以保证得到均一化的标记结果。

3）孵育结束，按1000～1500 rpm离心5min。

4）去除上清液，之后轻柔加入37℃预热的生长培养液重悬细胞。

5）再重复3），4）步骤两次。

3. 贴壁细胞染色

1）将贴壁细胞培养于无菌盖玻片上。

2）从培养基中移走盖玻片，滤掉过量培养液，将盖玻片放在潮湿的小室内。

3）在盖玻片的一角加入100μL的染色工作液，轻轻晃动使染料均匀覆盖所有细胞。

4）37℃孵育细胞2～20min，不同的细胞最佳培养时间不同。可以20min作为起始孵育时间，之后优化以保证得到均一化的标记结果。

5）吸掉染色工作液，用培养液洗盖玻片2～3次，每次用预温的培养基覆盖所有细胞，孵育5～10min，然后吸走培养基。

4. 显微镜检测

1）DiD，DiO，DiI，DiR和DiS滤光器的选择参见下表：

货号 荧光探针 最大激发/最大发射波长

（Ex/Em）

 滤光片编号
Omeaga公司 Chroma公司
MX4002-10MG DiI 549/565nm XF108, XF32 41002, 31002
MX4001-25MG DiO 484/501nm XF100,XF2341001, 31001 41001, 31001
MX4004-25MG DiD 644/665nm XF110, XF47 41008, 31023
MX4005-25MG DiR 750/780nm XF112 41009

2）多色染料的同时检测，滤光器按照以下设定：

a) DiI和DiO＝Omega XF52，Chroma 51004；

b) DiI和DiD＝Omega XF92，Chroma 51007；

c) DiI，DiO和DiD＝Omega XF93，Chroma 61005；

5. 流式细胞仪检测

经DiO，DiI，DiD和DiR染色的细胞分别用流式细胞仪的FL1，FL2，FL3或FL4通道检测。

DiI (DiIC18(3)) 细胞膜橙红色荧光探针

发表于由

描述

DiI (DiIC18(3)) 细胞膜橙红色荧光探针（神经元示踪研究）

 

温馨提示：见细胞膜荧光探针专题，选择你想要的最适膜标记探针。

关键词：细胞膜荧光探针，DiI，DiO，DiD，DiR，DiA，CM-DiI，神经示踪，传统细胞膜荧光探针

订购信息：

产品名称

产品编号

CAS NO

规格

价格（元）

DiI (DiIC18(3))细胞膜橙红色荧光探针

MX4002-10MG

41085-99-8

10mg

348

DiI (DiIC18(3))细胞膜橙红色荧光探针

MX4002-50MG

41085-99-8

50mg

1128

DiI (DiIC18(3))细胞膜橙红色荧光探针

MX4002-100MG

41085-99-8

100mg

1868

 

产品描述：

DiI, DiO, DiD和DiR作为一类长链的亲脂性二烷基碳菁类染料（Dialkylcarbocyanines）荧光染料家族，用于标记细胞膜以及其他脂溶性生物结构。作为一类环境敏感型荧光染料，当它们与膜结合或者与亲脂性生物分子（例如蛋白质，虽然在水中其荧光强度很弱）结合时，其荧光强度显著增强。一旦进入细胞后，它们在细胞内质膜中逐步扩散，于最佳浓度条件下可将整个细胞均匀染色。这些染料具很高的淬灭系数，偏光依赖性和很短的激发寿命。

四种染料呈现不同的荧光颜色，DiI（橙色荧光）、DiO（绿色荧光）、DiD（红色荧光）、DiR（深红色荧光），为活细胞多色彩荧光成像分析和流式细胞术提供了一种便捷的工具。DiO和DiI分别用标准FITC和TRITC滤光器检测，可结合使用。其中，DiI及其衍生物由于极其低的细胞毒性，应用最为广泛。不仅普遍用于活体和固定组织及细胞的神经元逆行性和顺行性示踪分析，还可以用于检测细胞的融合和粘附，检测发育或移植过程的细胞迁移，通过FRAP（荧光光漂白恢复技术）检测脂质在细胞膜上的扩散过程，检测细胞毒性，以及标记脂蛋白如LDL和HDL等。

本品以DiI的高氯酸盐形式提供，英文全名：1,1′-Dioctadecyl-3,3,3′,3′-tetramethylindocarbocyanine perchlorate，CAS NO.41085-99-8，纯度≥98%（TLC），适用于荧光检测研究。

 

DiI橙红色荧光探针基本特性：

1） 同义名：DiI perchlorate; DiIC18(3);1,1′-Dioctadecyl-3,3,3′,3′-tetramethylindocarbocyanine perchlorate;

2） CAS NO：41085-99-8

3） 分子式：C59H97ClN2O4

4） 分子量：933.87 g/mol

5）纯度：≥98%（TLC）
6）溶解性：溶于DMF，DMSO，甲醇
7）外观：红色至暗红色，紫色至深紫色粉末
8）Ex/Em：550/567 nm（in phosphate buffer/SDS pH 7.0）
9） 推荐滤光器：Omega- XF108, XF32, Chroma-41002, 31002
10）化学结构图：


 

 

保存与运输方法

保存：4ºC干燥避光保存，有效期一年。

运输：冰袋运输。

注意事项

1）荧光染料均存在淬灭问题，请尽量注意避光，以减缓荧光淬灭。

2）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

 使用方法

【注意】以下使用方法仅用作参考，可根据具体的实验条件做出调整。

1.染色液制备

1）储存液制备：用DMSO或乙醇配置浓度1～5 mM的储存液。例如，取5mg DiI（Mw：933.87 g/mol）溶于1.07ml无水DMSO中，充分溶解，即得到5mM的储存液。【注意】未使用的储存液分装储存在-20℃，避免反复冻融。

2）工作液制备：用合适的缓冲液（如：无血清培养基，HBSS或PBS）稀释储存液，调整到1～5 μM的工作浓度。【注意】工作液最终浓度需要根据不同细胞系和实验体系来优化。建议从推荐浓度开始，以10倍范围为区间进行最优浓度的摸索。

2.悬浮细胞染色

1）加入适当体积的染色工作液重悬细胞，使其密度为1×106/mL。

2）37℃孵育细胞2～20min，不同的细胞最佳培养时间不同。可以20min作为起始孵育时间，之后优化以保证得到均一化的标记结果。

3）孵育结束，按1000～1500 rpm离心5min。

4）去除上清液，之后轻柔加入37℃预热的生长培养液重悬细胞。

5）再重复3），4）步骤两次。

3.贴壁细胞染色

1）将贴壁细胞培养于无菌盖玻片上。

2）从培养基中移走盖玻片，滤掉过量培养液，将盖玻片放在潮湿的小室内。

3）在盖玻片的一角加入100μL的染色工作液，轻轻晃动使染料均匀覆盖所有细胞。

4）37℃孵育细胞2～20min，不同的细胞最佳培养时间不同。可以20min作为起始孵育时间，之后优化以保证得到均一化的标记结果。

5）吸掉染色工作液，用培养液洗盖玻片2～3次，每次用预温的培养基覆盖所有细胞，孵育5～10min，然后吸走培养基。

4.显微镜检测

1）DiD，DiO，DiI，DiR和DiS滤光器的选择参见下表：

货号

荧光探针

最大激发/最大发射波长

（Ex/Em）

滤光片编号

Omeaga公司

Chroma公司

MX4002-10MG

DiI

549/565 nm

XF108, XF32

41002, 31002

MX4001-25MG

DiO

484/501nm

XF100,XF23 41001, 31001

41001, 31001

MX4004-25MG

DiD

644/665 nm

XF110, XF47

41008, 31023

MX4005-25MG

DiR

750/780 nm

XF112

41009

2）多色染料的同时检测，滤光器按照以下设定：

a) DiI和DiO＝Omega XF52，Chroma 51004；

b) DiI和DiD＝Omega XF92，Chroma 51007；

c) DiI，DiO和DiD＝Omega XF93，Chroma 61005；

5.流式细胞仪检测

经DiO，DiI，DiD和DiR染色的细胞分别用流式细胞仪的FL1，FL2，FL3或FL4通道检测。

应用示例（来自文献）：

文献一、Wexler-Cohen Y et al. Membrane-Anchored HIV-1 N-Heptad Repeat Peptides Are Highly Potent Cell Fusion Inhibitors via an Altered Mode of Action. PLoS Pathog. 2009 Jul;5(7):e1000509.

使用方法（Cell-Cell Fusion Inhibition Assay）：

Jurkat E6-1 and Jurkat HXBc2 cells were labeled with DiI and DiD lipophilic fluorescent probes, respectively. The two cell populations were co-incubated, in a ratio of 1∶1, for 6 h in the presence of eight different concentrations of the inhibitory peptides.Prior to measurements the cells were washed, spinned, dissolved in PBS, and put on ice. Cells co-incubated without the presence of peptides served as an optimal fusion reference. Unlabeled cells that were handled similarly served as an intrinsic fluorescence control.

 

Cells labeled separately with DiI or DiD were used to adjust the optimal separation of fluorescent signals. Jurkat HXBc2 cells labeled with DiI were co-incubated with Jurkat HXBc2 cells labeled with DiD for a fusion background that was subtracted from the measurements of the experiment.The following alterations were applied to the original protocol: (i) 5 µL of a 1 mg/mL DiI or DiD solution in dimethylsulfoxide (DMSO) was added to 1 mL of 4×106 cells/mL Jurkat E6-1 or Jurkat HXBc2 cells, respectively.(ii) For each data point 150,000 events were collected. Measurements were performed on a FACSort machine, upgraded to a FACSCalibur cell analyzer (Becton Dickinson).

 

文献二、Mazzoni M et al. Distribution, organization and innervation of gastric MALT in conventional piglet. J Anat. 2011 Nov;219(5):611-21.

使用方法（Tissue preparation and DiI tracing in fixed tissue）：

Small crystals of DiI were diluted at 3% in 100% ethanol and evaporated onto small glass beads (about 200 μm). The glass beads were placed in the middle of the gastric folliclesto detect if neurones projecting to the follicles were present. In other samples, after gently removing the overlying epithelium by the use of entomological forceps, glass beads were inserted into the lamina propria to identify whether neurones projecting to the mucosal layers were present.

Fig 1. Tangential sections of pig gastric mucosa at the level of the diverticulum.(A) Stereomicroscopy showing DiI‐coated beads (arrow) applied to a follicle in fixed tissue after 8 months of incubation. (B,C,E) DiI crystals applied to the follicles; note that the tracer was homogeneously distributed inside the follicles. (B) Labelled neurones (arrowhead) and processes entering the labelled follicle. (C) Polyhedral‐labelled neurone (arrowhead) more than 400 μm from a labelled follicle. (D) Higher magnification of the neurone shown in (C). (E) Elongated neurone (about 400 μm from the labelled follicle) along a thin nervous fascicle (arrowhead). (F) Higher magnification of the neurone shown in (E). (G,H) Two labelled neurones with an ovoid shape. Note that the neurones showed smoothly contoured soma and an eccentrically located nucleus (D,G,H,)

DiI (DiIC18(3)) 细胞膜橙红色荧光探针

发表于由

描述

DiI (DiIC18(3)) 细胞膜橙红色荧光探针（神经元示踪研究）

 

温馨提示：见细胞膜荧光探针专题，选择你想要的最适膜标记探针。

关键词：细胞膜荧光探针，DiI，DiO，DiD，DiR，DiA，CM-DiI，神经示踪，传统细胞膜荧光探针

订购信息：

产品名称

产品编号

CAS NO

规格

价格（元）

DiI (DiIC18(3))细胞膜橙红色荧光探针

MX4002-10MG

41085-99-8

10mg

348

DiI (DiIC18(3))细胞膜橙红色荧光探针

MX4002-50MG

41085-99-8

50mg

1128

DiI (DiIC18(3))细胞膜橙红色荧光探针

MX4002-100MG

41085-99-8

100mg

1868

 

产品描述：

DiI, DiO, DiD和DiR作为一类长链的亲脂性二烷基碳菁类染料（Dialkylcarbocyanines）荧光染料家族，用于标记细胞膜以及其他脂溶性生物结构。作为一类环境敏感型荧光染料，当它们与膜结合或者与亲脂性生物分子（例如蛋白质，虽然在水中其荧光强度很弱）结合时，其荧光强度显著增强。一旦进入细胞后，它们在细胞内质膜中逐步扩散，于最佳浓度条件下可将整个细胞均匀染色。这些染料具很高的淬灭系数，偏光依赖性和很短的激发寿命。

四种染料呈现不同的荧光颜色，DiI（橙色荧光）、DiO（绿色荧光）、DiD（红色荧光）、DiR（深红色荧光），为活细胞多色彩荧光成像分析和流式细胞术提供了一种便捷的工具。DiO和DiI分别用标准FITC和TRITC滤光器检测，可结合使用。其中，DiI及其衍生物由于极其低的细胞毒性，应用最为广泛。不仅普遍用于活体和固定组织及细胞的神经元逆行性和顺行性示踪分析，还可以用于检测细胞的融合和粘附，检测发育或移植过程的细胞迁移，通过FRAP（荧光光漂白恢复技术）检测脂质在细胞膜上的扩散过程，检测细胞毒性，以及标记脂蛋白如LDL和HDL等。

本品以DiI的高氯酸盐形式提供，英文全名：1,1′-Dioctadecyl-3,3,3′,3′-tetramethylindocarbocyanine perchlorate，CAS NO.41085-99-8，纯度≥98%（TLC），适用于荧光检测研究。

 

DiI橙红色荧光探针基本特性：

1） 同义名：DiI perchlorate; DiIC18(3);1,1′-Dioctadecyl-3,3,3′,3′-tetramethylindocarbocyanine perchlorate;

2） CAS NO：41085-99-8

3） 分子式：C59H97ClN2O4

4） 分子量：933.87 g/mol

5）纯度：≥98%（TLC）
6）溶解性：溶于DMF，DMSO，甲醇
7）外观：红色至暗红色，紫色至深紫色粉末
8）Ex/Em：550/567 nm（in phosphate buffer/SDS pH 7.0）
9） 推荐滤光器：Omega- XF108, XF32, Chroma-41002, 31002
10）化学结构图：


 

 

保存与运输方法

保存：4ºC干燥避光保存，有效期一年。

运输：冰袋运输。

注意事项

1）荧光染料均存在淬灭问题，请尽量注意避光，以减缓荧光淬灭。

2）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

 使用方法

【注意】以下使用方法仅用作参考，可根据具体的实验条件做出调整。

1.染色液制备

1）储存液制备：用DMSO或乙醇配置浓度1～5 mM的储存液。例如，取5mg DiI（Mw：933.87 g/mol）溶于1.07ml无水DMSO中，充分溶解，即得到5mM的储存液。【注意】未使用的储存液分装储存在-20℃，避免反复冻融。

2）工作液制备：用合适的缓冲液（如：无血清培养基，HBSS或PBS）稀释储存液，调整到1～5 μM的工作浓度。【注意】工作液最终浓度需要根据不同细胞系和实验体系来优化。建议从推荐浓度开始，以10倍范围为区间进行最优浓度的摸索。

2.悬浮细胞染色

1）加入适当体积的染色工作液重悬细胞，使其密度为1×106/mL。

2）37℃孵育细胞2～20min，不同的细胞最佳培养时间不同。可以20min作为起始孵育时间，之后优化以保证得到均一化的标记结果。

3）孵育结束，按1000～1500 rpm离心5min。

4）去除上清液，之后轻柔加入37℃预热的生长培养液重悬细胞。

5）再重复3），4）步骤两次。

3.贴壁细胞染色

1）将贴壁细胞培养于无菌盖玻片上。

2）从培养基中移走盖玻片，滤掉过量培养液，将盖玻片放在潮湿的小室内。

3）在盖玻片的一角加入100μL的染色工作液，轻轻晃动使染料均匀覆盖所有细胞。

4）37℃孵育细胞2～20min，不同的细胞最佳培养时间不同。可以20min作为起始孵育时间，之后优化以保证得到均一化的标记结果。

5）吸掉染色工作液，用培养液洗盖玻片2～3次，每次用预温的培养基覆盖所有细胞，孵育5～10min，然后吸走培养基。

4.显微镜检测

1）DiD，DiO，DiI，DiR和DiS滤光器的选择参见下表：

货号

荧光探针

最大激发/最大发射波长

（Ex/Em）

滤光片编号

Omeaga公司

Chroma公司

MX4002-10MG

DiI

549/565 nm

XF108, XF32

41002, 31002

MX4001-25MG

DiO

484/501nm

XF100,XF23 41001, 31001

41001, 31001

MX4004-25MG

DiD

644/665 nm

XF110, XF47

41008, 31023

MX4005-25MG

DiR

750/780 nm

XF112

41009

2）多色染料的同时检测，滤光器按照以下设定：

a) DiI和DiO＝Omega XF52，Chroma 51004；

b) DiI和DiD＝Omega XF92，Chroma 51007；

c) DiI，DiO和DiD＝Omega XF93，Chroma 61005；

5.流式细胞仪检测

经DiO，DiI，DiD和DiR染色的细胞分别用流式细胞仪的FL1，FL2，FL3或FL4通道检测。

应用示例（来自文献）：

文献一、Wexler-Cohen Y et al. Membrane-Anchored HIV-1 N-Heptad Repeat Peptides Are Highly Potent Cell Fusion Inhibitors via an Altered Mode of Action. PLoS Pathog. 2009 Jul;5(7):e1000509.

使用方法（Cell-Cell Fusion Inhibition Assay）：

Jurkat E6-1 and Jurkat HXBc2 cells were labeled with DiI and DiD lipophilic fluorescent probes, respectively. The two cell populations were co-incubated, in a ratio of 1∶1, for 6 h in the presence of eight different concentrations of the inhibitory peptides.Prior to measurements the cells were washed, spinned, dissolved in PBS, and put on ice. Cells co-incubated without the presence of peptides served as an optimal fusion reference. Unlabeled cells that were handled similarly served as an intrinsic fluorescence control.

 

Cells labeled separately with DiI or DiD were used to adjust the optimal separation of fluorescent signals. Jurkat HXBc2 cells labeled with DiI were co-incubated with Jurkat HXBc2 cells labeled with DiD for a fusion background that was subtracted from the measurements of the experiment.The following alterations were applied to the original protocol: (i) 5 µL of a 1 mg/mL DiI or DiD solution in dimethylsulfoxide (DMSO) was added to 1 mL of 4×106 cells/mL Jurkat E6-1 or Jurkat HXBc2 cells, respectively.(ii) For each data point 150,000 events were collected. Measurements were performed on a FACSort machine, upgraded to a FACSCalibur cell analyzer (Becton Dickinson).

 

文献二、Mazzoni M et al. Distribution, organization and innervation of gastric MALT in conventional piglet. J Anat. 2011 Nov;219(5):611-21.

使用方法（Tissue preparation and DiI tracing in fixed tissue）：

Small crystals of DiI were diluted at 3% in 100% ethanol and evaporated onto small glass beads (about 200 μm). The glass beads were placed in the middle of the gastric folliclesto detect if neurones projecting to the follicles were present. In other samples, after gently removing the overlying epithelium by the use of entomological forceps, glass beads were inserted into the lamina propria to identify whether neurones projecting to the mucosal layers were present.

Fig 1. Tangential sections of pig gastric mucosa at the level of the diverticulum.(A) Stereomicroscopy showing DiI‐coated beads (arrow) applied to a follicle in fixed tissue after 8 months of incubation. (B,C,E) DiI crystals applied to the follicles; note that the tracer was homogeneously distributed inside the follicles. (B) Labelled neurones (arrowhead) and processes entering the labelled follicle. (C) Polyhedral‐labelled neurone (arrowhead) more than 400 μm from a labelled follicle. (D) Higher magnification of the neurone shown in (C). (E) Elongated neurone (about 400 μm from the labelled follicle) along a thin nervous fascicle (arrowhead). (F) Higher magnification of the neurone shown in (E). (G,H) Two labelled neurones with an ovoid shape. Note that the neurones showed smoothly contoured soma and an eccentrically located nucleus (D,G,H,)

DiD perchlorate, 127274-91-3

发表于由

DiD 染料是亲脂性荧光染料家族成员之一，它可以用来染细胞膜和其它脂溶性生物结构。当 DiD 与细胞膜结合后其荧光强度大大增强，这类染料有着很高的淬灭常数和激发态寿命。一旦对细胞染色，这类染料在整个细胞膜上扩散，最佳浓度时可以使整个细胞膜染色。

产品名称 DiD perchlorate, 127274-91-3
目录号 910PEG
中文名称 1,1′-双十八烷基-3,3,3′,3′-四甲基吲哚二碳花菁高氯酸盐
英文名称 DILC18(5);DIIC18(5)
CAS 127274-91-3
分子式 C61H99ClN2O4
分子量 959.9
存储条件 -20°干燥避光
保存时间 一年
Ex/Em(nm) 644/663

DiI perchlorate, 41085-99-8

发表于由

DiI 即 DiIC18(3)，全称为 1,1′-dioctadecyl-3,3,3′,3’tetra- methylindocarbocyanine perchlorate，是最常用的细胞膜荧光探针之一，呈现橙红色荧光。DiI 是一种亲脂性膜染料，进入细胞膜后可以侧向扩散逐渐染色整个细胞的细胞膜。DiI 在进入细胞膜之前荧光非常弱，仅当进入到细胞膜后才可以被激发出很强的荧光。

产品名称 DiI perchlorate, 41085-99-8
目录号 910808
中文名称 DiI高氯酸盐
英文名称 DiI perchlorate
CAS 41085-99-8
分子式 C59H97C1N204
分子量 933.87
存储条件 -20°干燥避光
保存时间 一年
Ex/Em(nm) 549/565

DiOC5(3) iodide，53213-81-3

发表于由

DiO染料是一族亲脂性的荧光染料，可以用来染细胞膜和其它脂溶性生物结构。该系列染料进入细胞膜后，会在整个细胞膜上侧向扩散，在最佳浓度时可以使整个细胞膜染色。当其与细胞膜结合后其荧光强度大大增强，有着很高的淬灭常数和激发态寿命。由于该类染料各具特有的荧光颜色，因此可以用来对活细胞进行多色成像和流式分析。但值得注意的是：该系列染料能标记细胞膜而不破坏其功能，并且能持续更长时间。

产品名称 DiOC5(3) iodide，53213-81-3
目录号 910812
中文名称 DiOC5(3)碘化物/3,3’-二戊基氧杂羰花青碘化物
英文名称 DiOC5(3) iodide
CAS 53213-81-3
分子式 C27H33IN2O2
分子量 544.47
存储条件 -20°干燥避光
保存时间 一年
Ex/Em(nm) 484/502