培养皿

Falcon细胞培养皿

晶体级聚苯乙烯材质

平坦透明的表面使显微镜下观察细胞无光学扭曲变形


Falcon细胞培养皿

  • 晶体级聚苯乙烯材质
  • 平坦透明的表面使显微镜下观察细胞无光学扭曲变形
  • 真空-气体血桨处理的表面化学特性一致,促进细胞贴壁
  • 专门设计的培养皿盖有利最适合气体交换
  • 叠放环使叠放和处理更加容易
  • ·γ射线灭菌,无热原
  • 撕开性医学包装

易握型平皿
独特的设计和磨砂边缘可方便拿起小平皿,并防止盖子意外打开或滑落,使您的工作更迅速,改善无菌操作。

产品编号

产品描述

实际直径*高度

生长面积

工作体积

表面处理

量/包

量/箱

353001

35*10mm易握型平皿

40.28*6.17mm

11.78cm2

2.5-3.0 ml

标准TC

20

500

353002

60*15mm标准平皿

54.81*13.26mm

21.29cm2

6.0-7.0 ml

标准TC

353004

60*15mm易握型平皿

52.10*13.13mm

19.5cm2

6.0-7.0 ml

标准TC

353003

100*20mm标准平皿

89.43*19.18mm

58.95cm2

16.0-17.5ml

标准TC

20

200

353025

150*25mm网格型平皿

142.57*24.77mm

156.36 cm2

45.0-50.0ml

标准TC

10

100

353037

60.15mm中央孔器官培养皿

52.84*13.56mm

孔内生长面积2.89 cm2

 

标准TC

20

500

353653

IVF TC

Falcon™ 细菌培养皿

  • Falcon,第一个一次性巴氏培养皿生产商,一直引领着高质量研究级巴氏平皿生产
  • 不同类型满足您常规及特殊需要
  • 35mm平皿易握的特点更方便,操作更安全
  • 紧密契合的平皿盖最大限度减少脱水

产品编号

产品描述

实际直径*高度

量/包

量/箱

351006

50*9mm紧扣盖平皿

50.25*8.26mm

20

500

351007

60*15mm标准平皿

54.81*13.26mm

20

500

351008

35*10mm易握型平皿

40.28*6.17mm

20

500

351029

100*15mm标准型平皿

87.91*13.72mm

20

500



Falcon™ 多腔平皿

  • 平皿分为2或4个隔室
  • 减少培养基用量,节约存贮空间
  • 可在同一环境下对微生物或培养基进行不同研究
  • 隔室编号和平皿底面侧壁三角形标记利于找到起始点

产品编号

产品描述

分隔

量/包

量/箱

351003

100*15mm,实际参数:86.30*12.70mm

1板(2部分)

20

500

351009

X板(4部分)

Corning® Mtrigel® 包被的细胞培养器皿

Biocoat包被的细胞培养器皿系列,将各种细胞外基质蛋白和粘附分子包被于Falcon多孔板,培养皿,培养瓶等细胞培养用品表面,能够促进多种原代细胞及细胞系的贴壁、伸展、增殖和分化。


Corning® Mtrigel® 包被的细胞培养器皿

将各种细胞外基质蛋白和粘附分子包被于FALCON多孔板、培养皿、培养瓶等细胞培养用品表面,能够促进多种原代细胞及细胞系的贴壁、伸展、增殖和分化,主要应用于:

  • 改善细胞贴壁情况,增加细胞生长/分化速率 
  • 无血清或低血清条件下培养细胞
  • 细胞的多种功能研究,包括迁移,趋药性,侵袭等

产品名称

包被物质

数量

货号

多孔培养板

6孔板

MtrigelTM

2

354432

24孔板

MtrigelTM

2

354433

6孔板

I型胶原

5

354400

24孔板

I型胶原

5

354408

96孔板,透明

I型胶原

5

354407

6孔板

IV型胶原

5

354428

24孔板

IV型胶原

5

354430

96孔板

IV型胶原

5

354429

6孔板

纤维粘连蛋白(FN

5

354402

24孔板

纤维粘连蛋白(FN

5

354411

96孔板

纤维粘连蛋白(FN

5

354409

细胞培养皿

35mm

MtrigelTM

8

354460

35mm

I型胶原

20

354456

60mm

I型胶原

20

354401

35mm

IV型胶原

20

354459

60mm

IV型胶原

20

354416

35mm

纤维粘连蛋白(FN

20

354457

60mm

纤维粘连蛋白(FN

20

354403

细胞培养瓶

25cm2通气盖

I型胶原

10

354484

75cm2通气盖

I型胶原

5

354485

25cm2塞封盖

IV型胶原

10

354534

75cm2塞封盖

IV型胶原

10

354523

25cm2塞封盖

纤维粘连蛋白(FN

10

354532

75cm2塞封盖

纤维粘连蛋白(FN

10

354521

薄层包被多孔培养板

6孔板

MtrigelTM

5

354603

24孔板

MtrigelTM

5

354605

96孔板

MtrigelTM

5

354607

薄层包被细胞培养皿

35mm

MtrigelTM

20

354602

60mm

MtrigelTM

20

354601

100mm

MtrigelTM

10

354600

肝细胞培养器皿

6孔板

MtrigelTM

5

354510

Corning 96孔和384孔球形微孔板

3D细胞培养,肿瘤实验


  基于新颖的专利设计,Corning球形微孔板非常适合用于在同一微孔板中形成和分析3D多细胞球。超低吸附表面,帮助形成大小均一、可重复的3D多细胞球。黑色不透明板壁将不同孔的圆形透明底相互屏蔽,独有的板底设计,减少孔间交叉干扰。

产品特性:

-黑色板壁、光学透明圆底

-超低吸附表面,减少细胞贴壁到培养板表面

-创新的板底几何学专利,确保细胞球形成在孔底部中心

-独特的孔间屏蔽设计,最大限度地减少交叉干扰

关键优势:

-所有孔中形成单个大小均一的细胞球

-细胞球形成在孔的中心,便于实现自动化处理和成像

-可以在同一块微孔板中进行细胞培养和检测,无需转移到新的检测板

-更换培养基或进行化合物/药物处理时操作简便

µ-Slide球体灌注通道培养载玻片80356 80350 80351,德国ibidi易比迪代理

具有3 x 7孔的可灌注通道µ-Slide,用于长期球体培养和高端显微镜观察

非常适合在Bioinert表面上长期培养和灌注3D球体或类器官

灵活的灌注准备:球体可以直接在孔中转移或产生

出色的光学质量成像室,用于高分辨率显微镜成像

应用领域:

●三维细胞聚集体(例如球体和类器官)的培养和高分辨率显微镜

●与ibidi Pump System或任何其他带Luer连接器的泵设备一起使用

●在长期培养过程中灌注球体以提供新鲜的培养基,并获得球体的生长动力学

●直接在孔中产生球体

●球体研究以用于下游处理(例如,免疫荧光,组织学和生化测定)

●细胞单层(贴壁细胞),悬浮细胞或共培养的灌注

●具有上下游代谢功能的单片器官设置

●活细胞成像和3D细胞聚集的显微镜检查

●活细胞和固定细胞以及细胞聚集的免疫荧光染色和高分辨率荧光显微镜

技术特征:

●优化的球体/类器官培养和显微镜成像孔设计

●一张载玻片最多可分析21个样品

●灌注可用于3D细胞聚集体培养过程中的最佳营养供应

●开放式孔格式可轻松进行样品制备-用盖玻片轻松封闭孔以适用于流体培养

●通道创建孔的简单流体连接

●鲁尔接头使泵连接变得容易(例如,与ibidi泵系统连接)

●提供三种表面:

●生物惰性的表面完全钝化,无细胞粘附

●无涂层,可最大程度地减少细胞粘附和悬浮细胞

●ibiTreat(经组织培养处理)可实现最佳细胞粘附

●可以通过ibidi Polymer Coverslip底部使用高分辨率荧光显微镜观察样品

●与染色和固色液兼容

●与DIC盖一起使用时兼容微分干涉对比(DIC)显微镜

●由完全生物相容的材料制成

µ-Slide球体灌注通道培养载玻片80356 80350 80351

µ-Slide球体灌注培养原理:

µ-Slide球体灌注是用于培养自由漂浮的3D聚集体的专用流动室。它由3 x 7平底孔组成,这些孔通过上方的通道连接。每个孔形成自己的壁,在此培养标本。

通过通道进行灌注时,新鲜培养基会持续扩散到样本中。这样可确保在整个实验过程中获得最佳的营养和氧气扩散,而样品不会受到明显的剪切力。

该设置可确保实现最大的生存能力,但对球体,类器官或组织的剪切应力最小。

µ-Slide球体灌注通道培养载玻片80356 80350 80351

µ-Slide球体灌注通道培养载玻片80356 80350 80351

µ-Slide球体灌注通道培养载玻片80356 80350 80351

此处显示的是µ-Slide椭球体灌注的单孔中的计算流体动力学(CFD)模拟。 针对底部壁fluid中的标本优化了每个孔的流体特性。请注意,剪切力在上部孔区占主导地位,而生态位受到保护。

µ-Slide球体灌注载玻片是一个薄的ibidi聚合物盖玻片底部,该底盖具有最高的光学质量(与玻璃相比),非常适合高分辨率显微镜检查。与油浸显微镜和荧光成像的兼容,使µ-Slide球体灌注成为理想的球体成像室。

µ-Slide球体灌注通道培养载玻片80356 80350 80351

实验工作流程

µ-Slide球体灌注是一项革命性的技术,可为球体,类器官或组织创造理想的条件。它还允许它们同时培养和成像。

优点:

●最佳营养和气体扩散

●减少细胞凋亡和坏死

●增大球体尺寸和寿命

●长期培养具有出色的生存力和增殖能力

●成熟度提高

播种预成型的球体

通过简单的工作流程,可以使用移液器轻松地将现有3D细胞聚集体放入孔中。关闭孔后,用培养基填充通道,并使用ibidi Pump System或任何其他细胞培养泵开始灌注。可以使用所有常用步骤和方法(例如,悬滴,液体覆盖,ULA平板或生物反应器)生成球体。µ-Slide球体灌注本身不需要任何嵌入的基底,支架或支撑结构。

µ-Slide球体灌注通道培养载玻片80356 80350 80351

孔内球体的形成

或者,可以在带有Bioinert表面的µ-Slide球状体灌注孔内直接生成球状体。这种自组织过程是一种简单且省时的方法,可在每个单孔中生成均质的球体。

µ-Slide球体灌注通道培养载玻片80356 80350 80351

三维细胞聚集体可以很容易地回收用于下游应用,例如组织学,蛋白质谱分析和进一步培养。

µ-Slide球体灌注的应用

µ-Slide球体灌注是一种易于使用的微流生物反应器,适用于多细胞3D聚集体的多种应用。可选择地,单个细胞在附着到孔底时可用作悬浮培养物或用作细胞单层。此外,可以将多种细胞类型组合在一个孔中,以创建长期的共培养系统。µ-Slide球体灌注的革命性技术提供了一种高效且可重现的方法,可以同时对标本进行生长和成像。

µ-Slide球体灌注通道培养载玻片80356 80350 80351

µ-Slide球体灌注通道培养载玻片80356 80350 80351

灌注培养时高度改善的球状体生长速率

µ-Slide球体灌注通道培养载玻片80356 80350 80351

L929成纤维细胞在µ-Slide球状体灌注中显示出球状体,Bioinert,第1至14天,接种浓度为5 x 10 5单细胞/ ml。左:无灌注,第二天换培养基。右:使用ibidi泵系统灌注,0.75毫升/分钟。相差显微镜,10倍物镜,孔直径800 µm。

贴壁细胞荧光成像

µ-Slide球体灌注通道培养载玻片80356 80350 80351

接种后2小时固定在µ-Slide球形灌注液ibiTreat中的L929成纤维细胞的荧光成像。绿色:F-肌动蛋白(phalloidin);蓝色:核(DAPI)。宽视野荧光显微镜,10倍物镜。

µ-Slide球体灌注通道培养载玻片80356 80350 80351

基本参数:

货号

产品名称

规格(个/盒)

80350

µ-Slide球体灌注通道培养载玻片,生物惰性表面

15

80351

µ-Slide球体灌注通道培养载玻片,无包被

15

80356

µ-Slide球体灌注通道培养载玻片,ibiTreat底部处理

15

µ-Slide球体灌注通道培养载玻片80356 80350 80351

通道数

3

孔数

3 x 7

孔直径(底部)

0.8 mm

每孔体积

3.5 μl

孔高(底部niche)

0.4 mm

每孔生长面积

0.5 mm2

孔高(总)

1.3 mm

孔包被面积(总)

9.7 mm2

每个注液孔体积

60 μl

通道总容积

45μl

通道宽度

1.0 mm

通道深度

0.2 mm

底部

ibidi标准底

顶部

ibidi标准底

外部尺寸(宽x长)

25.5 x 75.5 mm

接头

标准鲁尔接头(母)

µ-Slide球体灌注通道培养载玻片80356 80350 80351

µ-Slide球体灌注通道培养载玻片80356 80350 80351

µ-Slide球体灌注通道培养载玻片80356 80350 80351

人体血液循环模拟系统,德国ibidi易比迪代理

在生物体内,许多类型的粘附细胞都暴露于由生物流体系统(如血管)流动摩擦所产生的剪应力(shear stress)中。这些机械力对细胞的生理反应和粘附性能有很大的影响。因此,在体外如果能给细胞一个持续的剪应力,就可以模拟生物体内的流体环境,使得体外的细胞生物学研究更加接近体内的生理情况。

使用ibidi独创的人体血液循环模拟系统可以完美模拟血管内流体环境下细胞真实的生物学行为。该系统在最近的[第15届中国微循环科学大会]上得到与会专家的一致好评。 ibidi人体血液循环模拟系统是德国ibidi公司专为流体条件下的活细胞培养设计的泵系统,配合ibidi的通道载玻片可以模拟体内血液流动条件下的细胞显微成像,可模拟连续定向流动,振荡流动,脉冲式流动的物理条件。可以和培养箱一起使用,也可以单独使用。适合倒置显微镜实时观察,操作界面简单直观。

ibidi产品概况图:

人体血液循环模拟系统

模拟血管流动状态下的人体血液循环模拟系统

o很好的模拟各种生理情况,包括连续单向流,振荡流和脉冲流

o与各种显微镜和所有的细胞培养箱兼容

o完全无菌的密闭循环装置

o小的机械压力和少的细胞培养液用量

o附带泵控制软件精确控制流体参数

人体血液循环模拟系统

多种细胞生物学应用

o恒定或可变剪应力下的长时间细胞培养 (例如血管内皮细胞,肾细胞,或生物膜)

o剪应力环境下活细胞成像和免疫荧光染色

o模拟动脉,静脉,毛细管中的剪应力环

o还可用于悬浮细胞的滚动和粘附实验

o截流试验

o间质流中的3D细胞培养

o电子细胞基质阻抗判断(ECIS)流体试验

o研究在灌注实验条件下内皮细胞和悬浮细胞的相互作用

人体血液循环模拟系统

泵控制软件 

用电脑系统来完全控制ibidi泵系统,直观的界面简化了流体试验的自动流体控制设置,并可自动计算流速,剪切率和剪应力。

人体血液循环模拟系统

技术特征:

o每个ibidi泵可同时驱动四个并行的流体装置

o流体特性:所有的流体类型都是层流式

o适用于所有具鲁尔接口的u-Slides系列

o同样适用于自制的流式小室

o与所有主流细胞培养箱兼容

o通过软件控制流速和剪向压力

人体血液循环模拟系统

产品优势:

o流体装置可以被放进培养箱,而ibidi泵在培养箱外

o流体装置和ibidi泵分开离后均处于无菌状态,便于实验准备和活细胞显微镜成像观察

o和所有的培养箱兼容

o减少对对悬浮细胞例如单核细胞的机械力

o单向流模式使用试剂量小

o流体组件和鲁尔接头易操作

ibidi人体血液循环模拟系统组成部件:

1. 心泵模拟器

人体血液循环模拟系统

2.血管模拟调节器

                  (单联)                                        (四联)

人体血液循环模拟系统人体血液循环模拟系统


3.脏器模拟器

人体血液循环模拟系统

4.泵控制软件(安装在配套电脑里)

人体血液循环模拟系统

5.静脉管模拟

人体血液循环模拟系统

应用参数 :

o模拟静脉和小动脉的单向流动

o模拟血管紊流条件下的来回摆动

o模拟动脉条件下的脉冲流

o流速:0.03-35ml/min

o剪应力:0.3 – 150 dyn/cm^2

o工作体积:2.5 ~ 12 ml

货号:

货号

产品名称

规格

10902-N

ibidi人体血液循环模拟系统

1套

10906-N

ibidi人体血液循环模拟系统-四联

1套

10903

流体单元

1台

10904

四联流体单元

1台

10905

ibidi泵

1台

10964

灌流管:黄绿色,50cm管长,1.6mm内径,10ml储液管(另有多种规格,欢迎详询)

3组/包

另配

笔记本

1台

人体血液循环模拟系统

人体血液循环模拟系统

人体血液循环模拟系统

2D细胞趋化载玻片,德国ibidi易比迪代理

本产品已升级为80326 细胞趋化载玻片3D,一如既往满足各种趋化实验的要求。

趋化性(Chemotaxis,亦被称为化学趋向性)是趋向性的一种,指身体细胞、细菌及其他单细胞、多细胞生物依据环境中某些化学物质而趋向的运动。这对细菌寻找食物(如葡萄糖)十分重要,细菌以此趋进有较高食物分子浓度的地方,或远离有毒(如苯酚)的地方。在多细胞生物中,趋化性对其发展和其他正常功能一样不可或缺。正趋化性指趋向较高化学物质浓度的运动,而负趋化性则相反。

2D细胞趋化载玻片

µ-Slide Chemotaxis 2D适于分析在2D基质表面缓慢迁移的贴壁细胞的趋化性反应,例如癌细胞,内皮细胞和成纤维细胞。

可进行贴壁细胞的长时间细胞趋化性实验;

仅需搭配微量分注器使用即可简单做出线性浓度梯度;

线性浓度梯度可维持长达48小时;

可于同一玻片上同时进行三组平行对比实验;

可进行细胞实时成像观察;

实验可重复性

基本原理:

搭配微量分注器使用于两侧40μL储液槽中制造出化学物质的线性浓度梯度,此时培养于储液槽中间的观察管道中的细胞即处于一稳定的线性浓度梯度培养环境中。

2D细胞趋化载玻片

技术特征:

Ÿ   可于同一玻片上同时进行三组平行实验;

Ÿ   即时可用,不需进行组装;

Ÿ   线性浓度梯度可维持长达48小时;

Ÿ   适用于高分辨视频显微镜包括荧光显微镜

产品规格:

Chemotaxis chambers on slide                 3                 Distance between chambers                 21.5 mm
                Volume per chamber                 80 µl                 Total height with plugs                 12 mm
                Observation area                 2×1 mm2                 Volume chemoattractant                 18 µl
底部 Ibidi标准底

ibidi细胞趋化性试验 u-Slide Chemotaxis 2D

货号                 产品名称                 规格(个/盒)
80306 µ-Slide 2D细胞趋化载玻片,ibiTreat底部处理 10
                80302 µ-Slide 2D细胞趋化载玻片,Collagen IV底部处理 10

 

实验步骤

1 ) Preparation/ 实验准备

2D细胞趋化载玻片

2) Video microscopy/ 显微视频观察

2D细胞趋化载玻片

3 ) Cell tracking/ 细胞跟踪

2D细胞趋化载玻片

实验结果

µ-Slide Chemotaxis 可实时观察每个细胞的运动情况在,追踪运动轨迹,结果记录可以是视频或连续拍摄的照片。

2D细胞趋化载玻片

结果分析

Wimasis 提供全自动分析实验结果,无需其他硬件和软件,只需要上传实验数据,结果自动分析后发送到邮箱。

ibidi公司提供免费软件Chemotaxis and Migration Tool ,可手动追踪细胞运动轨迹。

细胞趋化载玻片3D,德国ibidi易比迪代理

趋化性(Chemotaxis,亦被称为化学趋向性)是趋向性的一种,指身体细胞、细菌及其他单细胞、多细胞生物依据环境中某些化学物质而趋向的运动。这对细菌寻找食物(如葡萄糖)十分重要,细菌以此趋进有较高食物分子浓度的地方,或远离有毒如苯酚)的地方。在多细胞生物中,趋化性对其发展和其他正常功能一样不可或缺。正趋化性指趋向较高化学物质浓度的运动,而负趋化性则相反。

细胞趋化载玻片3D

µ-Slide Chemotaxis 3D适于分析在基质胶中快速或缓慢迁移的非贴壁细胞的趋化性反应,例如淋巴细胞,在间质流的肿瘤细胞和内皮细胞的化学趋向性。

Ÿ   可进行贴壁或非贴壁细胞的长时间细胞趋化性实验;

Ÿ   3D的环境更好的模拟体内条件;

Ÿ   趋化性浓度梯度在基质胶中可快速建立;

Ÿ   线性浓度梯度可维持长达48小时;

Ÿ   可于同一玻片上同时进行三组平行对比实验;

Ÿ   可进行细胞实时成像观察;

Ÿ   实验可重复性

基本原理:

搭配微量分注器使用于两侧60 μL储液槽中制造出化学物质的线性浓度梯度,此时嵌入在储液槽中间观察管道基质胶中的细胞即处于一稳定的线性浓度梯度培养环境中。

细胞趋化载玻片3D

应用:

Ÿ   中性粒细胞,淋巴细胞和单核细胞的趋化性试验;

Ÿ   肿瘤细胞和内皮细胞在ECM胶中的3D趋化性试验;

Ÿ   快速或缓慢迁移细胞的趋化性试验;

Ÿ   Cell-to-cell趋化性试验(侵袭试验)

技术特征:

Ÿ   Chamber的几何特征适于3D胶中的细胞;

Ÿ   可于同一玻片上同时进行三组平行实验;

Ÿ   即时可用,不需进行组装;

Ÿ   有字母和数字标记的小室和储液槽

产品规格:

Chemotaxis chambers on slide 3 Distance between chambers 18.5 mm
Volume per chamber 120 µl Total height with plugs 12 mm
Observation area 2×1 mm² Volume chemoattractant 60 µl
底部  ibidi 标准底

ibidi细胞趋化性µ-Slide Chemotaxis 3D

货号 产品名称 规格(个/盒)
80326 µ-Slide 3D细胞趋化载玻片,ibiTreat底部处理 10
80322 µ-Slide 3D细胞趋化载玻片,Collagen IV底部处理 10
80328 3D趋化可粘载玻片 10

Experimental Workflow/实验步骤:

细胞趋化载玻片3D

Application Examples/应用实例:

细胞趋化载玻片3D

Data Analysis/数据分析:
1、  细胞趋化性和迁移分析工具
一款免费的趋化性试验软件分析工具,其原理是基于ImageJ(NIH)图形处理系统,可提供多种类型的图表和统计分析。

细胞趋化载玻片3D

2、Chemotaxis Image Analysis/趋化性成像分–WimTaxis

细胞趋化载玻片3D

划痕实验插件,德国ibidi易比迪代理

伤口愈合实验简介 

创伤愈合(Wound healing)是创伤后人体皮肤和表皮组织再生的自然过程。正常来说,皮肤的表皮(最外层)和真皮(内部或深层)存在于一个平衡的状态,以形成一个保护伤口的屏障。而当焦痂破裂,正常的伤口愈合过程便会迅速地开始。其基本过程包括以下阶段:①止血期、②炎症期、③增生期、④成熟及重塑期。 

细胞划痕实验是一种操作简单,经济实惠的研究细胞迁移/肿瘤侵袭的体外试验方法。这种方法的原理是,当细胞长到融合成单层状态时,在融合的单层细胞上人为制造一个空白区域,称为“划痕”。划痕边缘的细胞会逐渐进入空白区域使“划痕”愈合。

基本步骤:“划痕”的制造,细胞迁移期间图像的获得以及后期数据的处理。 

特点:

1,在一定程度上模拟了体内细胞迁移的过程。

2, 非常适合研究细胞与胞外基质(ECM),细胞与细胞之间相互作用引起的细胞 迁移。

3,与包括活细胞成像在内的显微镜系统兼容,可用于分析细胞间的相互作用。

4,研究细胞迁移的体外实验中简单的方法。  

传统实验方法:

细胞融合后,用枪头在细胞层表面制造划痕

实验方法缺陷:人工制造的“划痕”很难保证一致性,重复性差。  

Ibidi Culture-Insert

划痕实验插件

生物相容性硅胶制成的插件,可产生确定的500μm “划痕”区域 。

适合于伤口愈合实验,细胞迁移实验,2D侵袭和共培养。

划痕实验插件

技术参数:

材料 生物相容硅胶材料
 
规格 两孔(70μl/孔)
 
尺寸 8.4 mm x 8.4 mm x 5 mm
 
每孔生长面积 0.22 cm2
 
产生“划痕”宽度 500μm  底部 可黏附底部

货号:

货号 产品名称 规格(个/盒)
80206 µ-Dish 35 mm,低壁,预置伤口愈合插件培养皿,ibiTreat 底部处理 30
81176 µ-Dish 35 mm,高壁,预置伤口愈合插件培养皿,ibiTreat 底部处理 30
80209 伤口愈合插件 25
80241 预置伤口愈合插件24孔培养板 25

操作步骤

划痕实验插件

Ibidi Culture Insert与传统划痕实验比较 

Ibidi Culture Insert提供重复性更好的实验结果

划痕实验插件

实验结果分析
Data Acquisition/数据采集:
显微镜用于评估伤口愈合的过程。根据你的关注点和兴趣,不仅可以视频显微镜,还可以进行定点的成像观察。ibidi加热与孵育系统可以直接在培养的条件下进行活细胞成像,不用将样品反复的从孵育室移至显微镜上。
Wound Healing Image Analysis/伤口成像分析– WimScratch
是一个伤口愈合和细胞迁移实验的成像分析软件
1. 全面解决伤口愈合实验-从样品准备到成像分析只需要几步
2. 客观的和可再生分析
3. 简单并且快速的数据处理-几分钟出结果
4. 不需要额外的硬件或者软件
WimScratch 自动分析实验结果
WimScratch是基于网站的自动化分析平台,无需任何软件和硬件,只要将图片上传到数据分析平台,几分钟之后结果就可以发送到注册邮箱。
分析数据包括:
a) 细胞覆盖面积
b) 终止速度(平均≥5个图像)
c) 加速特征(平均≥5个图像)
d) 概览图
e) 中间接合处的近似值(平均≥5个图像
ibidi的伤口愈合成像分析解决方案可以评估细胞迁移,仅仅通过4步就可以得到结果。

划痕实验插件

共培养载玻片,德国ibidi易比迪代理

ibidi 细胞共培养 u-Slide 2×9 well

细胞共培养 Co-Cultivation 技术是将2种或2种以上的细胞共同培养于同一环境中,由于其具有更好地反映体内环境的优点,所以这种方法被广泛应用于现代细胞研究中。

共培养体系主要作用:诱导细胞向另一种细胞分化;诱导细胞自身分化;维持细胞功能和活力;调控细胞增殖;促进早期胚胎发育和提高代谢产物产量。

共培养载玻片

The μ-Slide 2 x 9 well allows for the cultivation of cell spheroids inside a gel matrix, in combination with feeder cells seeded in the outer wells.

产品特点:

1.细胞共享可溶性因子而不直接接触;

2.低挥发性,适合长时间的细胞实验;

3.卓越的光学性能,特别适合高分辨率荧光显微镜成像观察

应用:

1.不同细胞系或原代细胞的共培养;

2.上皮—间充质细胞相互作用;

3.体外不同种类细胞旁分泌相互作用;

4.基质胶中细胞或细胞球体培养

技术规格:

Number of major wells 2 Growth area per minor well 0.4 cm2
Volume per major well 600 µl Volume of each minor well 70 µl
Dimensions of major wells(w x l x h) in mm 21.5 x 23.6 x 6.8 Dimensions of minor wells(w x l x h) in mm 6.1 x 6.8 x 1.3
Number of minor wells 2 x 9    
底部 Ibidi标准底

 货号:

货号 产品名称 规格(个/盒)
81806 µ-Slide 2×9 细胞共培养载玻片,ibiTreat底部处理 15
81802 µ-Slide 2×9 细胞共培养载玻片,CollagenIV底部处理 15
81803 µ-Slide 2×9 细胞共培养载玻片,Fibronectin底部处理 15
81804 µ-Slide 2×9 细胞共培养载玻片,Poly-L-Lysine底部处理 15
81805 µ-Slide 2×9 细胞共培养载玻片,Poly-D-Lysine底部处理 15
81801 µ-Slide 2×9 细胞共培养载玻片,无包被 15

µ-Slide 2 x 9 well实验步骤: 

1.    将40-60ul的受体细胞悬浮液种到slide中间小室,根据你的细胞类型密度控制在5-10×104cells/ml;

2.    将40-60ul的饲养层细胞悬浮液种到slide的其他8个小室;

3.    细胞贴壁后,移去各小室培养基,并洗脱掉未贴壁细胞,再加400-600ul培养基到大well,两种细胞共享同一培养体系

共培养载玻片

µ-Slide 2 x 9 well也可以用来培养3D基质胶中的细胞球体

共培养载玻片

ibidi其他共培养产品:
1.culture-inser
Co-Cultivation in 2D with ibidi Culture-Insert 
Culture-Insert可以作为一个模型,将不同种类的细胞划分在各自特定区域内,不同种类细胞之间形成一空白区域,彼此不接触,移去insert后,细胞开始向空白区域迁移。

共培养载玻片

2.micro-insert 4 well
Co-Cultivation of Cells in a 3D Matrix 
不同种类细胞可以在micro-Insert 4 well共用同一培养体系而不直接接触,insert外的培养基可以被收集和更换,而不冲走胶内的细胞。

共培养载玻片

细胞定位格子培养皿,德国ibidi易比迪代理

直径35mm玻璃底培养皿,底部带有500um网格
用于细胞和细胞簇的重找回
便于进行固定区域的细胞计数
玻璃盖可用于TIRF和单细胞应用

细胞定位格子培养皿

应用:
重新定位细胞和细胞簇,如转染细胞的克隆挑选
对某一划定区域的细胞计数,如计算转染效率
为细胞运动提供一个参考结构
独特的单个细胞处理,如显微注射
在确定的比例尺下追踪轴突的生长

货号:

货号 产品名称 规格(个/盒)
81148 µ-Dish 35 mm,高壁,玻璃底,50微米格子培养皿 30
81168 µ-Dish 35 mm,高壁,玻璃底,500微米格子培养皿 30
80156 µ-Dish 35 mm,低壁,ibiTreat底部处理,500微米格子培养皿 60
80151 µ-Dish 35 mm,低壁,无包被,500微米格子培养皿 60
81166 µ-Dish 35 mm,高壁,ibiTreat底部处理,500微米格子培养皿 60
81161 µ-Dish 35 mm,高壁,无包被,500微米格子培养皿 60

技术特征:
底部500 µm网格
字母和数字标识的4 x 400 个方格(A-U; 1-20)
网格和细胞在一个焦面
底部为D 263 M肖特玻璃,厚度为170 µm +/- 10 µm
盖子有锁扣设计,可以减少蒸发

产品规格:

Grid repeat distance 500 µm Coating area using 400 µl 4.1 cm2
Ø µ-Dish 35 mm Ø observation area 21 mm
Volume 2 ml Height with / without lid 14/12 mm
Growth area 3.5 cm2    
底部 Glass coverslip No. 1.5, selected quality, 
170 µm +/- 10 µm

细胞定位格子培养皿

Optical properties
Refractive index (nD 589 nm) 1.52 1.52
Abbe number 56 55
Thickness #1.5 (180 µm) #1.5 (170 µm)
Material Microscopy plastic D 263M Schott borosilicate glass
Autofluorescence Low Low
Transmission Very high (even ultraviolet) High (ultraviolet restrictions)
Birefringence (DIC) Low (DIC compatible*) Low (DIC compatible*)
Other aspects
Surface modifications ibiTreat – tissue culture treated
Uncoated – hydrophobic
Only pure glass
Protein coatings Possible Possible
Gas permeable Yes No
Material flexibility High Low
Breakable No Yes
Recommended for All kinds of fluorescence microscopy TIRF and single photon

细胞定位格子培养皿,德国ibidi易比迪代理

ibidi细胞定位格子培养皿µ-Dish 35mm Grid-500 
35mm具500um网格刻度 ibidi标准底部的培养皿

细胞定位格子培养皿

 应用:
1.细胞或细胞簇的再定位
2.细胞计数,例如:细胞转染效率计算
3.细胞运动观察
4.细胞显微操作中单细胞处理
 货号:

货号 产品名称 规格(个/盒)
81148 µ-Dish 35 mm,高壁,玻璃底,50微米格子培养皿 30
81168 µ-Dish 35 mm,高壁,玻璃底,500微米格子培养皿 30
80156 µ-Dish 35 mm,低壁,ibiTreat底部处理,500微米格子培养皿 60
80151 µ-Dish 35 mm,低壁,无包被,500微米格子培养皿 60
81166 µ-Dish 35 mm,高壁,ibiTreat底部处理,500微米格子培养皿 60
81161 µ-Dish 35 mm,高壁,无包被,500微米格子培养皿 60

产品特点:
1.特别适合细胞或细胞簇的定位和重找回;
2.独特的ibidi标准底部设计,180um的盖玻片尺寸底部厚度,适合高分辨率显微观察;
3.独特的 ibiTreat 底部包被,适合大多数细胞的贴壁培养;
4.特殊盖部设计减小液体挥发。

技术特征:
1.直径为35mm标准样式的培养皿;
2.具500µm 网格刻度;
3.字母或数字标记(A-U; 1-20);
4.替代选择的玻璃底部产品:µ-Slide 35 mm, high glass bottom with Grid-50 or with Grid-500;
5.独特的 ibiTreat 组织培养处理表面适合大多数细胞的贴壁生长;
6.生物相容性材料制作,不含胶水,无细胞毒性影响;
7.特殊的盖部设计,减小液体挥发。
 

产品规格:

Grid repeat distance 500 µm Growth area 3.5 cm2
Ø µ-Dish 35 mm Growth area 21 mm
Volume high / low 2 / 0.8 ml Height with lid high / low 14 / 9 mm
底部  Ibidi标准

细胞定位格子培养皿

Lid with Lock Position

The special lock feature in all ibidi µ-Dishes enables the user to minimize evaporation. The lock position provides excellent conditions for long term studies in non humidified environments. Gas exchange (carbon dioxide, oxygen) during cell culture is maintained thanks to the gas permeable plastic material of the dish.
TIP: Use the locking feature only if minimal evaporation is 
required, i.e., outside incubators, non humidified microscopy stages, etc.

细胞定位格子培养皿

细胞定位格子培养皿

Optical properties
Refractive index (nD 589 nm) 1.52 1.52
Abbe number 56 55
Thickness #1.5 (180 µm) #1.5 (170 µm)
Material Microscopy plastic D 263M Schott borosilicate glass
Autofluorescence Low Low
Transmission Very high (even ultraviolet) High (ultraviolet restrictions)
Birefringence (DIC) Low (DIC compatible*) Low (DIC compatible*)
Other aspects
Surface modifications ibiTreat – tissue culture treated
Uncoated – hydrophobic
Only pure glass
Protein coatings Possible Possible
Gas permeable Yes No
Material flexibility High Low
Breakable No Yes
Recommended for All kinds of fluorescence microscopy TIRF and single photon

细胞定位格子培养皿,德国ibidi易比迪代理

用于细胞和细胞簇的重找回
便于进行固定区域的细胞计数
玻璃底可用于TIRF和单细胞应用

应用:
重新定位细胞和细胞簇,如转染细胞的克隆挑选
对某一划定区域的细胞计数,如计算转染效率
为细胞运动提供一个参考结构
独特的单个细胞处理,如显微注射
 细胞定位格子培养皿

货号 产品名称 规格(个/盒)
81148 µ-Dish 35 mm,高壁,玻璃底,50微米格子培养皿 30
81168 µ-Dish 35 mm,高壁,玻璃底,500微米格子培养皿 30
80156 µ-Dish 35 mm,低壁,ibiTreat底部处理,500微米格子培养皿 60
80151 µ-Dish 35 mm,低壁,无包被,500微米格子培养皿 60
81166 µ-Dish 35 mm,高壁,ibiTreat底部处理,500微米格子培养皿 60
81161 µ-Dish 35 mm,高壁,无包被,500微米格子培养皿 60

技术特征:
底部50µm网格
字母和数字标识的4 x 400 个方格(A-U; 1-20)
网格和细胞在一个焦面
底部为D 263 M肖特玻璃,厚度为170 µm +/- 10 µm
盖子有锁扣设计,可以减少蒸发
 细胞定位格子培养皿

产品规格:

Grid repeat distance 50 µm Coating area using 400 µl 4.1 cm2
Ø µ-Dish 35 mm Ø observation area 21 mm
Volume 2 ml Height with / without lid 14/12 mm
Growth area 3.5 cm2 Bottom Glass coverslip No. 1.5, selected quality, 
170 µm +/- 10 µm

细胞定位格子培养皿

Optical properties
Refractive index (nD 589 nm) 1.52 1.52
Abbe number 56 55
Thickness #1.5 (180 µm) #1.5 (170 µm)
Material Microscopy plastic D 263M Schott borosilicate glass
Autofluorescence Low Low
Transmission Very high (even ultraviolet) High (ultraviolet restrictions)
Birefringence (DIC) Low (DIC compatible*) Low (DIC compatible*)
Other aspects
Surface modifications ibiTreat – tissue culture treated
Uncoated – hydrophobic
Only pure glass
Protein coatings Possible Possible
Gas permeable Yes No
Material flexibility High Low
Breakable No Yes
Recommended for All kinds of fluorescence microscopy TIRF and single photon

 

微4孔插件,德国ibidi易比迪代理

粘附和悬浮细胞的活细胞成像,4孔硅胶插入元件

适合于单细胞的长期显微实验
进行少量细胞培养时无冷凝现象
利于高质量光学观察的锥形孔设计

 应用:
贴壁细胞和悬浮细胞的活细胞成像
免疫荧光分析
细胞固定在小的培养孔内,如3D分析
长达几周的长时程显微镜观测
细胞共培养

随时时间变化跟踪极少量细胞

细胞分化,不如单个干细胞

微4孔插件

micro-Insert 4 well Family /货号:

货号 产品名称 规格(个/盒)
80406 µ-Dish 35 mm,高壁,预置微4孔插件培养皿,ibiTreat 底部处理 30
80409 微4孔插件 25

规格:

Number of wells 4 Volume per well 10 µl
Dimensions of wells (w x l) in mm 2.0 x 1.5 (digital format 4:3) Growth area per well 0.03 cm2
Diameter of the complete insert 12 mm Material Biocompatible silicone
Height of the complete insert 4.2 mm Bottom No bottom – 
sticky underside

 

四个小的2.0 mm x 1.5 mm的显微培养孔,在4:3数字模式下,悬浮细胞逃离不了观察视野。
底部可以黏附
可转移到任何平整洁净的表面
嵌入物移除后不会残留任何物质
所含边缘,便于用镊子操作嵌入物

微4孔插件

微4孔插件

微4孔插件

微4孔插件

4孔腔室载玻片,德国ibidi易比迪代理

一体化小室,既可用于细胞培养,也可用于显微镜成像

使用高分辨率显微镜可以通过玻璃片底部进行样品观察

没有盖玻片,不会泄露,用于快速,简单的免疫荧光。

只需少量细胞和试剂,降低了实验成本

应用:

细胞培养以及细胞培养物的显微镜观察

转染分析

活细胞和固定细胞的免疫荧光显微镜观察

活细胞长时间段的成像

4孔腔室载玻片

Immunofluorescence of Human Umbilical Vein Endothelial Cells (HUVEC) in a µ-Slide 4 well
Blue: Nucleus (DAPI)
Green: VE-Cadherin (Alexa555) 
Red: F-Actin (Alexa488)

技术特征:

开放式载玻片,具有四个独立的培养孔

具备适用于高端显微镜观察的优秀光学成像特质

兼容染色,固定

采用最佳细胞粘附的表面处理Ibitreat

生物兼容性塑料生产,无胶水,不泄露

订购信息:

货号 产品名称 规格(个/盒)
80426 µ-Slide 4孔腔室载玻片,ibiTreat底部处理 15
80422 µ-Slide 4孔腔室载玻片,Collagen IV底部处理 15
80423 µ-Slide 4孔腔室载玻片,Fibronectin底部处理 15
80424 µ-Slide 4孔腔室载玻片,Poly-L-Lysine底部处理 15
80425 µ-Slide 4孔腔室载玻片,Poly-D-Lysine底部处理 15
80421 µ-Slide 4孔腔室载玻片,无包被 15
80427 µ-Slide 4孔腔室载玻片,玻璃底 15

规格:

孔数量 4 每孔包被面积 4.1 cm²
孔尺寸大小 21.2 x 11.0 x 9.3 每孔生成面积 2.2 cm²
每孔推荐体积 700 µl 底部配套的盖玻片 No. 1.5
带盖子高度 10.8 mm 底部  ibidi 标准底部

D2650-5X10ML 二甲基亚砜

商品详情:

应用

DMSO 是一种用于化学反应(如聚合酶链式反应 (PCR))的极性非质子溶剂,也可作为冷冻保护玻璃化剂用于保存细胞、组织和器官。DMSO 可在细胞冷冻培养基中用于保护细胞免受冰晶导致的机械损伤。它可用于原代、继代培养和重组的异倍体和杂交瘤细胞系、胚胎干细胞 (ESC) 以及造血干细胞的冻存。DMSO 常与 BSA 或胎牛血清 (FBS) 一同使用。

 

包装

5mL 和 10mL 火焰封口安瓿瓶包装,100mL 棕色瓶包装

 

其他说明

该产品是一种Hybri-Max产品。它经过了杂交瘤测试并对其在细胞冷冻中的适用性进行了评估。该产品经无菌过滤(0.2微米)及内毒素水平检测。

 

注意

在室温下容易过冷并缓慢重融。 固化产品可以通过加热至室温来重新液化,而不会损害产品。

Mitochondria Isolation Kit for Cell and Tissue 组织/细胞线粒体分离试剂盒

细胞线粒体分离试剂盒(Mitochondria Isolation Kit for Cultured Cells)是一款快速便捷的分离培养细胞内线粒体的试剂盒。本试剂盒在分离线粒体的同时,还能获得不含线粒体的细胞浆蛋白,可用于分析细胞色素c等线粒体蛋白向胞浆的释放。经本试剂盒获得的大部分线粒体都含有完整的内膜和外膜,且维持线粒体生理功能,因此,分离所得的线粒体可用于线粒体膜电位等生理功能相关研究。另外,分离得到的线粒体也可被线粒体裂解液或其它适当裂解液裂解后用于SDS-PAGE、Western、双向电泳等蛋白分析。

产品组分

组分编号 组分名称 保存方法 货号(规格)
MP1553-50T MP1553-100T
A Wash Buffer清洗液 -20℃ 100ml 2×100ml
B Mitochondria Lysis Buffer线粒体裂解液 -20℃ 100ml 2×100ml
C Mitochondria Stock Buffer线粒体保存液 -20℃ 10ml 2×10ml
D Protein Stock Buffer (5×)蛋白保存液(5×) RT 20ml 2×20ml
E PMSF (100×)蛋白酶抑制剂 -20℃ 1.5ml 2×1.5ml

保存与运输方法

保存:-20℃保存,1年稳定。

运输:冰袋运输。

注意事项

1)   进行实验之前务必阅读试剂盒操作流程,根据最终实验目的选择试剂盒内所要用到的试剂。

2)   若不是用于制备线粒体蛋白样品,不必往线粒体裂解液和清洗液中加PMSF。

3)   分离线粒体的所有步骤均需在冰上或4℃进行,所用溶液需冰浴或4℃预冷,全部操作时间尽量控制在1h之内。

4)   通常,在分离线粒体时前后两次离心速度选取1000g和15,000g,如果希望纯度更高,但对线粒体的得率要求不高,前后两次离心速度可以采用2000g和6000g。

5)   细胞计数(如台盼蓝染色)对于不同实验不必全部使用,实验条件成熟后可不用。

6)   为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

自备材料

1)(可选)胰酶-EDTA细胞消化液

2)(可选)台盼蓝染色液

3)(可选)BCA蛋白定量检测试剂盒

4)PBS

5)低速离心机

6)匀浆器

使用方法

1.      试剂准备:从冰箱取出所需试剂置于室温融解,之后立即置于冰上待用。需要注意,如果实验目的是为了制备线粒体蛋白样品,需在线粒体裂解缓冲液和清洗液内添加PMSF (100×),使其终浓度为PMSF (1×)。PMSF一定要在试剂加入到样品前1-2min内加入,以免PMSF在水溶液中失效。

2.      收集细胞:

2.1 对于贴壁细胞:用预冷的PBS清洗细胞1次,胰酶消化,100-200g 4℃离心5-10min收集细胞。

2.2 对于悬浮细胞:直接离心收集细胞。

3.      清洗:用预冷的PBS轻轻重悬细胞沉淀,如有必要,取少量细胞用于计数。剩余细胞600g 4℃离心5min沉淀细胞,弃上清。【注意】:单个样品细胞量≥106个,一般控制在2-5×107个。

4.      裂解:往沉淀内加入1-2ml预冷的线粒体裂解液重悬细胞,冰内孵育10-15min,可用相差显微镜检测细胞膨胀程度。

5.      匀浆:把细胞悬液转移到Dounce匀浆器中,匀浆10-20次。不同细胞或不同匀浆器所需的匀浆次数有所不同,需自行优化。【注意】:通常,可以在匀浆10次后取约2μl细胞匀浆,加入30-50μl台盼蓝染色液,混匀后显微镜下观察台盼蓝染色阳性(蓝色)细胞的比例。如果阳性细胞比例不足50%,增加5次匀浆。随后再同前取样进行台盼蓝染色鉴定。当阳性比例超过50%时即可停止匀浆进入下一步。请勿过度匀浆,过度匀浆会导致线粒体的机械损伤。同时记录对于该细胞的匀浆次数,通常在后续实验时不必再摸索匀浆次数。

6.       取匀浆液,立即加入等量清洗液,轻轻颠倒混匀数次。

7.       4℃ 1300g离心5min以去除细胞核、未破碎细胞和大的膜碎片。

8.       上清液转移至一干净离心管,4℃ 1000g离心5min,重复2次。

9.       上清液转移至一干净离心管,4℃ 12000-15000g离心15min,重复1次。

10.    弃上清,沉淀即为线粒体。需注意,如果希望获得去除线粒体后的细胞浆蛋白,应在本步骤中收集上清,且在收集上清的过程中不要触及沉淀,随后把收集的上清4℃ 12000g 离心10min,此时即得到去除线粒体的细胞浆蛋白。

11.    保存:弃上清,用适当的缓冲液悬浮沉淀。如果用于线粒体酶活性或功能分析,线粒体沉淀需重悬于线粒体保存液中;如果用于细胞浆蛋白的分析,获得的细胞浆蛋白应保存于蛋白保存液(1×),即按照:细胞浆蛋白:蛋白保存液(5×)=4:1比例混合;如果用于双向电泳,应使用其它适宜的保存液。

相关产品

名称 规格           
广谱型蛋白酶抑制剂混合物(不含EDTA,100× DMSO储液) 1ml
Mitochondria Isolation Kit for Cultured Cells细胞线粒体分离试剂盒 50T
Mitochondria Isolation Kit for Tissue组织线粒体分离试剂盒 50T
PMSF (100mM) 1ml
Enhanced BCA Protein Quantification Kit BCA蛋白浓度测定试剂盒(增强型) 500T
Bradford Protein Quantification Kit Bradford蛋白浓度测定试剂盒 500T

Mitochondria Isolation Kit for Cell and Tissue 组织/细胞线粒体分离试剂盒

细胞线粒体分离试剂盒(Mitochondria Isolation Kit for Cultured Cells)是一款快速便捷的分离培养细胞内线粒体的试剂盒。本试剂盒在分离线粒体的同时,还能获得不含线粒体的细胞浆蛋白,可用于分析细胞色素c等线粒体蛋白向胞浆的释放。经本试剂盒获得的大部分线粒体都含有完整的内膜和外膜,且维持线粒体生理功能,因此,分离所得的线粒体可用于线粒体膜电位等生理功能相关研究。另外,分离得到的线粒体也可被线粒体裂解液或其它适当裂解液裂解后用于SDS-PAGE、Western、双向电泳等蛋白分析。

产品组分

组分编号 组分名称 保存方法 货号(规格)
50T 00T
A Wash Buffer清洗液 -20℃ 100ml 2×100ml
B Mitochondria Lysis Buffer线粒体裂解液 -20℃ 100ml 2×100ml
C Mitochondria Stock Buffer线粒体保存液 -20℃ 10ml 2×10ml
D Protein Stock Buffer (5×)蛋白保存液(5×) RT 20ml 2×20ml
E PMSF (100×)蛋白酶抑制剂 -20℃ 1.5ml 2×1.5ml

保存与运输方法

保存:-20℃保存,1年稳定。

运输:冰袋运输。

注意事项

1)   进行实验之前务必阅读试剂盒操作流程,根据最终实验目的选择试剂盒内所要用到的试剂。

2)   若不是用于制备线粒体蛋白样品,不必往线粒体裂解液和清洗液中加PMSF。

3)   分离线粒体的所有步骤均需在冰上或4℃进行,所用溶液需冰浴或4℃预冷,全部操作时间尽量控制在1h之内。

4)   通常,在分离线粒体时前后两次离心速度选取1000g和15,000g,如果希望纯度更高,但对线粒体的得率要求不高,前后两次离心速度可以采用2000g和6000g。

5)   细胞计数(如台盼蓝染色)对于不同实验不必全部使用,实验条件成熟后可不用。

6)   为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

自备材料

1)(可选)胰酶-EDTA细胞消化液

2)(可选)台盼蓝染色液

3)(可选)BCA蛋白定量检测试剂盒

4)PBS

5)低速离心机

6)匀浆器

使用方法

1.      试剂准备:从冰箱取出所需试剂置于室温融解,之后立即置于冰上待用。需要注意,如果实验目的是为了制备线粒体蛋白样品,需在线粒体裂解缓冲液和清洗液内添加PMSF (100×),使其终浓度为PMSF (1×)。PMSF一定要在试剂加入到样品前1-2min内加入,以免PMSF在水溶液中失效。

2.      收集细胞:

2.1 对于贴壁细胞:用预冷的PBS清洗细胞1次,胰酶消化,100-200g 4℃离心5-10min收集细胞。

2.2 对于悬浮细胞:直接离心收集细胞。

3.      清洗:用预冷的PBS轻轻重悬细胞沉淀,如有必要,取少量细胞用于计数。剩余细胞600g 4℃离心5min沉淀细胞,弃上清。【注意】:单个样品细胞量≥106个,一般控制在2-5×107个。

4.      裂解:往沉淀内加入1-2ml预冷的线粒体裂解液重悬细胞,冰内孵育10-15min,可用相差显微镜检测细胞膨胀程度。

5.      匀浆:把细胞悬液转移到Dounce匀浆器中,匀浆10-20次。不同细胞或不同匀浆器所需的匀浆次数有所不同,需自行优化。【注意】:通常,可以在匀浆10次后取约2μl细胞匀浆,加入30-50μl台盼蓝染色液,混匀后显微镜下观察台盼蓝染色阳性(蓝色)细胞的比例。如果阳性细胞比例不足50%,增加5次匀浆。随后再同前取样进行台盼蓝染色鉴定。当阳性比例超过50%时即可停止匀浆进入下一步。请勿过度匀浆,过度匀浆会导致线粒体的机械损伤。同时记录对于该细胞的匀浆次数,通常在后续实验时不必再摸索匀浆次数。

6.       取匀浆液,立即加入等量清洗液,轻轻颠倒混匀数次。

7.       4℃ 1300g离心5min以去除细胞核、未破碎细胞和大的膜碎片。

8.       上清液转移至一干净离心管,4℃ 1000g离心5min,重复2次。

9.       上清液转移至一干净离心管,4℃ 12000-15000g离心15min,重复1次。

10.    弃上清,沉淀即为线粒体。需注意,如果希望获得去除线粒体后的细胞浆蛋白,应在本步骤中收集上清,且在收集上清的过程中不要触及沉淀,随后把收集的上清4℃ 12000g 离心10min,此时即得到去除线粒体的细胞浆蛋白。

11.    保存:弃上清,用适当的缓冲液悬浮沉淀。如果用于线粒体酶活性或功能分析,线粒体沉淀需重悬于线粒体保存液中;如果用于细胞浆蛋白的分析,获得的细胞浆蛋白应保存于蛋白保存液(1×),即按照:细胞浆蛋白:蛋白保存液(5×)=4:1比例混合;如果用于双向电泳,应使用其它适宜的保存液。

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150849-52-8 WST-1细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒

WST-1;CCK-8;WST-8;MTT 噻唑兰;Alamar Blue 阿尔玛蓝;XTT;CAS:150849-52-8;

WST-1细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒(WST-1 Cell Proliferation and Cytotoxicity Assay Kit)是一种广泛用于细胞增殖和细胞毒性检测的快速高灵敏度试剂盒。

WST-1是MTT(噻唑兰)的升级产品,检测原理为:在电子耦合试剂存在的情况下,WST-1可被线粒体内的脱氢酶还原生成水溶性的橙黄色甲臜产物(formazan)。颜色的深浅与活细胞数量(细胞增殖)成正比,与细胞毒性成反比。通过酶标仪在450nm波长处测定OD值来反映细胞增殖以及细胞毒性水平。WST-1和MTT,以及其它MTT类似产品比如:XTT、MTS相比具有明显的优势:①WST-1、XTT和MTS生成的甲臜产物是水溶的,可以省去后续的溶解步骤;不像MTT,生成的甲臜产物不是水溶的,必需用特定的溶解液来溶解;②WST-1生成的甲臜产物比XTT和MTS生成的更易溶解;③WST-1比XTT和MTS更加稳定,使结果更加稳定;④WST-1比XTT和MTS的线性范围更宽,灵敏度更高。

WST-1细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒适用于细胞因子等诱导的细胞增殖检测,也可用于小分子药物等诱导的细胞毒性或细胞生长抑制实验等。本试剂盒操作便捷,所有的检测步骤在一块96孔板内即能完成。不必洗涤细胞,不必收集细胞。也不需要额外步骤来溶解甲臜产物,可用于大批量样品的检测。酚红和血清对本试剂盒的测定无明显影响。

我司提供两种规格的试剂盒,按照96孔板来计算,分别可以做100个孔和500个孔(500T)。

产品组分

组分编号 组分名称 货号(规格)
A B
A WST-1(粉末) 1vial 1vial
B 电子耦合试剂 1ml 5ml

保存与运输方法

保存:-20℃避光保存,一年有效。

运输:冰袋运输。

注意事项

1)使用96孔板进行检测,如果细胞培养时间较长,一定要注意蒸发的问题。①由于96孔板周围一圈最容易蒸发,可以采取弃用周围一圈的办法,改加PBS、无菌水或培养液;②可以把96孔板置于靠近培养箱内水源的地方以缓解蒸发。

2)接种时注意细胞悬液一定要混匀,以避免细胞沉淀下来导致每孔中的细胞数量不等,可以每接种几个孔就混匀一下。

3)培养基内的酚红和血清不会显著干扰结果。

4)如果没有450nm的滤光片,可以使用吸光度在420-480 nm之间的滤光片。

5)如果样品为高浑浊的细胞悬液,建议设定>600nm的波长作为参比波长,扣除参比波长的OD值即可。

6)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

储存液制备

1)对于WST-1细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒(MX3007-100T):于使用前,将盒子内的1管WST-1(粉末)从冰箱取出,置于室温至少回温20min,之后加入1ml 电子耦合试剂,完全溶解即得到WST-1溶液;

2)对于WST-1细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒(MX3007-500T):于使用前,将盒子内的1管WST-1(粉末)从冰箱取出,置于室温至少回温20min,之后加入5ml 电子耦合试剂,完全溶解即得到WST-1溶液;

3)WST-1溶液于4℃保存一周,不影响使用效果。短期不用务必分装后置于-20℃保存,半年稳定。冻存的WST-1溶液融化后可能会观察到一些沉淀物,此为正常现象。可于37℃水浴2-10min,通常能完全溶解。

检测流程(96孔板)

1)收集对数期细胞,96孔平底板内接种细胞,调整细胞密度为1×104-1×105细胞/孔,每孔接种100μl(含或不含待测的化合物)。

【注】:具体每孔所用的细胞数目,需根据细胞大小,细胞增殖速度的快慢以及实验用途等因素决定。对于细胞毒性实验,建议接种更高的起始细胞,比如:5×104-1×105细胞/孔。

【注】:接种时,需注意四周孔用无菌水、无菌PBS或细胞培养基填充。

【注】:【可选】根据自身实验设计选择适宜时间加入药物,一般来说,细胞贴壁后即可加药, 或2h,或12h,每孔0-10μl,设3-5个复孔。建议设5个复孔。

【注】:需设置空白对照孔(不含细胞,仅含培养基,WST-1)。

2)5% CO2,37℃培养细胞24-96h。

3)每孔加入10μl WST-1溶液(注意不要引入气泡),继续培养0.5-4h。

【注】:若药物与 WST-1 有反应,可先离心后弃去培养液,小心用 PBS 冲2-3 遍后,再加入含 WST-1的培养液。

【注】:在细胞培养箱内继续孵育时间长短根据细胞的类型和细胞密度等实验情况而定,初次实验时可以在 0.5、1、2 和 4h后分别用酶标仪检测,然后选取吸光度范围比较适宜的一个时间点用于后续实验。

4)把 96孔板置于摇床上摇动1min,以充分混匀待检测体系。

5)在450nm处测定吸光度。如无450nm 滤光片,可以使用 420-480nm的滤光片。另外,可以使用>600nm 的波长作为参考波长进行双波长测定。

结果分析

1)细胞增殖分析

2)细胞毒性分析

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细胞取自新鲜的组织,按照标准操作流程分离培养,保证不含有HIV、HBV、HCV、支原体、真菌及其他类型的细菌。可接受定制服务。

购买细胞注意事项:

1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现象发生请及时和我们联系。

2. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等。

3. 用75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落,将细胞置于培养箱内静置培养过夜,隔天再取出观察。此时多数细胞均会贴壁,若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝染色测定细胞活力,如果证实细胞活力正常,请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养;如果染色结果显示细胞无活力,请拍下照片及时和我们联系,信息确认后我们为您再免费寄送一次。

4. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用,细胞传代时可以一定比例和客户自备的培养基混合,使细胞逐渐适应培养条件;建议直接购买提供的完全培养基。

5. 建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和技术部沟通交流。

6. 该细胞只能用于科研,不得用于临床应用。

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1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现象发生请及时和我们联系。

2. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等。

3. 用75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落,将细胞置于培养箱内静置培养过夜,隔天再取出观察。此时多数细胞均会贴壁,若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝染色测定细胞活力,如果证实细胞活力正常,请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养;如果染色结果显示细胞无活力,请拍下照片及时和我们联系,信息确认后我们为您再免费寄送一次。

4. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用,细胞传代时可以一定比例和客户自备的培养基混合,使细胞逐渐适应培养条件;建议直接购买提供的完全培养基。

5. 建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和技术部沟通交流。

6. 该细胞只能用于科研,不得用于临床应用。