描述

PEI 25K Transfection Reagent

线性化聚乙烯亚胺转染试剂

搜索关键词：

PEI25K;PEI 25000;PEI 40K;线性化聚乙烯亚胺PEI；PEI转染试剂；PEI 25000；CAS：9002-98-6, 26913-06-4；Polysciences;

产品信息

【温馨提示】：见我司整理的线性化聚乙烯亚胺PEI 25000/ PEI40000转染试剂专题。

产品描述

线性化聚乙烯亚胺PEI 25，000，一种高电荷阳离子聚合物，非常容易结合于高电荷阴离子基质。工业应用上，线性化PEI可改善负电荷染料的物理外观，以调整染料的化学特性和增强染料与固相基质的黏附能力，常用作黏附增强剂，作用同多聚赖氨酸（poly-lysine）；科研应用上，线性化PEI能与DNA或其他负电荷生物大分子简单结合，正是这一特性，使得成为一种非常行之有效的载体运输介质（Vector carrier），即转染试剂。

线性化聚乙烯亚胺PEI 25000（Polyethylenimine Linear, MW 25000）是一款优秀、低成本、值得信赖的瞬时性转染试剂。在HEK293和CHO表达系统中，PEI在宽广的生产规模内（从96孔板到100L生物反应器）能提供连续性的高基因表达。

本品是PEI25K的无菌溶液，浓度为1mg/ml，直接使用即可。按照DNA：PEI25K=1：3的比例来操作，1ml本品足以用来转染330μg DNA，或者，6孔板内约做80-160次转染。

保存与运输方法

保存：-20℃保存，1年有效。

运输：冰袋运输。

注意事项

1）收到本品或第一次使用，请根据单次用量分装后置于-20℃冻存，尽量降低反复冻融次数。

2）本品为无菌溶液，请操作过程中执行无菌操作。

3）请务必使用高质量的无内毒素质粒。通过260 nm光吸收测定DNA浓度，260nm / 280nm比值确定DNA纯度（比值应该在1.8～2.0的范围之内）。如有可能，请通过琼脂糖凝胶电泳检测质粒的完整性。

4）使用适当保存和经常传代的健康细胞。确保培养基没有被细菌、真菌或支原体污染。如果细胞是近期复苏的液氮冻存细胞，请在转染前至少传代两次。

5）对于某些类型的细胞如HEK-293、HEK293T、NIH/3T3和COS细胞，在转染前两天铺板可显著提高重组蛋白的表达水平。如果选择转染前两天铺板，可适当降低铺板密度，以确保转染时细胞的汇合度仍为60-80%。

6）对于接触抑制敏感的细胞，可适当降低铺板密度。

7）推荐用商业化的无血清培养基比如Opti-MEM I来稀释DNA和PEI25K，制备转染复合物。

8）转染过程请不要使用抗生素。

9）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

一、操作方法（贴壁细胞）

1.1铺板

a）转染前18-24h进行铺板，调整合适的细胞密度（参考表1），使其在转染时细胞密度达60-80%。

【注意】：高血清水平会抑制转染效率，大多数情况，低血清水平（≤5%）能产生最高的转染效率。

1.2转染步骤（以6孔板的单孔为例）

a）转染前1-2h，每孔替换为3ml含2%血清的新鲜生长培养基。

b）制备PEI25K-DNA转染复合物（严格按照以下步骤进行）：①往300μl无血清培养基（比如：Opti-MEM I）加入2μg质粒DNA,低速混合/涡旋均匀；②往混合物内加入6μl PEI25K（1mg/ml）（DNA/PEI25K=1：3），低速涡旋5s；③无菌环境，室温静置30min以形成PEI25K-DNA转染复合物。④用移液枪上下吹打3次，轻轻混匀。

c）将PEI25K-DNA转染复合物转到孔内。轻轻晃动培养皿或轻微涡旋，使得复合物分散均匀。

【注意】：以上步骤可通过调整PEI25K-DNA复合物在无血清培养基内的体积（为培养总体积的10%）来进行放大或缩小（可参考表2）。

1.3 孵育

a）37℃，5% CO2培养箱内培养细胞，转染后12-18h，去除含PEI25K-DNA复合物的培养液，更换新鲜的生长培养基。

b）通常，转染后36-48h能检测到重组蛋白表达。一般在转染后72-96h能观察到最大水平的表达。

PEI25K客户使用案例（逐步增加中）

图片描述：以人结肠癌细胞（HCT116）为对象，按照质粒DNA：PEI 2,5000（MX2202-250MG）=1:4的比例制备转染混合物并转染进入HCT116细胞，36h后于荧光显微镜下观察转染效率（GFP，绿色荧光蛋白）。

【数据来源：厦门大学 于老师】

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PEI 25K Transfection Reagent

线性化聚乙烯亚胺转染试剂

搜索关键词：

PEI25K;PEI 25000;PEI 40K;线性化聚乙烯亚胺PEI；PEI转染试剂；PEI 25000；CAS：9002-98-6, 26913-06-4；Polysciences;

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【温馨提示】：见我司整理的线性化聚乙烯亚胺PEI 25000/ PEI40000转染试剂专题。

产品描述

线性化聚乙烯亚胺PEI 25，000，一种高电荷阳离子聚合物，非常容易结合于高电荷阴离子基质。工业应用上，线性化PEI可改善负电荷染料的物理外观，以调整染料的化学特性和增强染料与固相基质的黏附能力，常用作黏附增强剂，作用同多聚赖氨酸（poly-lysine）；科研应用上，线性化PEI能与DNA或其他负电荷生物大分子简单结合，正是这一特性，使得成为一种非常行之有效的载体运输介质（Vector carrier），即转染试剂。

线性化聚乙烯亚胺PEI 25000（Polyethylenimine Linear, MW 25000）是一款优秀、低成本、值得信赖的瞬时性转染试剂。在HEK293和CHO表达系统中，PEI在宽广的生产规模内（从96孔板到100L生物反应器）能提供连续性的高基因表达。

本品是PEI25K的无菌溶液，浓度为1mg/ml，直接使用即可。按照DNA：PEI25K=1：3的比例来操作，1ml本品足以用来转染330μg DNA，或者，6孔板内约做80-160次转染。

保存与运输方法

保存：-20℃保存，1年有效。

运输：冰袋运输。

注意事项

1）收到本品或第一次使用，请根据单次用量分装后置于-20℃冻存，尽量降低反复冻融次数。

2）本品为无菌溶液，请操作过程中执行无菌操作。

3）请务必使用高质量的无内毒素质粒。通过260 nm光吸收测定DNA浓度，260nm / 280nm比值确定DNA纯度（比值应该在1.8～2.0的范围之内）。如有可能，请通过琼脂糖凝胶电泳检测质粒的完整性。

4）使用适当保存和经常传代的健康细胞。确保培养基没有被细菌、真菌或支原体污染。如果细胞是近期复苏的液氮冻存细胞，请在转染前至少传代两次。

5）对于某些类型的细胞如HEK-293、HEK293T、NIH/3T3和COS细胞，在转染前两天铺板可显著提高重组蛋白的表达水平。如果选择转染前两天铺板，可适当降低铺板密度，以确保转染时细胞的汇合度仍为60-80%。

6）对于接触抑制敏感的细胞，可适当降低铺板密度。

7）推荐用商业化的无血清培养基比如Opti-MEM I来稀释DNA和PEI25K，制备转染复合物。

8）转染过程请不要使用抗生素。

9）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

一、操作方法（贴壁细胞）

1.1铺板

a）转染前18-24h进行铺板，调整合适的细胞密度（参考表1），使其在转染时细胞密度达60-80%。

【注意】：高血清水平会抑制转染效率，大多数情况，低血清水平（≤5%）能产生最高的转染效率。

1.2转染步骤（以6孔板的单孔为例）

a）转染前1-2h，每孔替换为3ml含2%血清的新鲜生长培养基。

b）制备PEI25K-DNA转染复合物（严格按照以下步骤进行）：①往300μl无血清培养基（比如：Opti-MEM I）加入2μg质粒DNA,低速混合/涡旋均匀；②往混合物内加入6μl PEI25K（1mg/ml）（DNA/PEI25K=1：3），低速涡旋5s；③无菌环境，室温静置30min以形成PEI25K-DNA转染复合物。④用移液枪上下吹打3次，轻轻混匀。

c）将PEI25K-DNA转染复合物转到孔内。轻轻晃动培养皿或轻微涡旋，使得复合物分散均匀。

【注意】：以上步骤可通过调整PEI25K-DNA复合物在无血清培养基内的体积（为培养总体积的10%）来进行放大或缩小（可参考表2）。

1.3 孵育

a）37℃，5% CO2培养箱内培养细胞，转染后12-18h，去除含PEI25K-DNA复合物的培养液，更换新鲜的生长培养基。

b）通常，转染后36-48h能检测到重组蛋白表达。一般在转染后72-96h能观察到最大水平的表达。

PEI25K客户使用案例（逐步增加中）

图片描述：以人结肠癌细胞（HCT116）为对象，按照质粒DNA：PEI 2,5000（MX2202-250MG）=1:4的比例制备转染混合物并转染进入HCT116细胞，36h后于荧光显微镜下观察转染效率（GFP，绿色荧光蛋白）。

【数据来源：厦门大学 于老师】

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PEI 25K Transfection Reagent

线性化聚乙烯亚胺转染试剂

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PEI25K;PEI 25000;PEI 40K;线性化聚乙烯亚胺PEI；PEI转染试剂；PEI 25000；CAS：9002-98-6, 26913-06-4；Polysciences;

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【温馨提示】：见我司整理的线性化聚乙烯亚胺PEI 25000/ PEI40000转染试剂专题。

产品描述

线性化聚乙烯亚胺PEI 25，000，一种高电荷阳离子聚合物，非常容易结合于高电荷阴离子基质。工业应用上，线性化PEI可改善负电荷染料的物理外观，以调整染料的化学特性和增强染料与固相基质的黏附能力，常用作黏附增强剂，作用同多聚赖氨酸（poly-lysine）；科研应用上，线性化PEI能与DNA或其他负电荷生物大分子简单结合，正是这一特性，使得成为一种非常行之有效的载体运输介质（Vector carrier），即转染试剂。

线性化聚乙烯亚胺PEI 25000（Polyethylenimine Linear, MW 25000）是一款优秀、低成本、值得信赖的瞬时性转染试剂。在HEK293和CHO表达系统中，PEI在宽广的生产规模内（从96孔板到100L生物反应器）能提供连续性的高基因表达。

本品是PEI25K的无菌溶液，浓度为1mg/ml，直接使用即可。按照DNA：PEI25K=1：3的比例来操作，1ml本品足以用来转染330μg DNA，或者，6孔板内约做80-160次转染。

保存与运输方法

保存：-20℃保存，1年有效。

运输：冰袋运输。

注意事项

1）收到本品或第一次使用，请根据单次用量分装后置于-20℃冻存，尽量降低反复冻融次数。

2）本品为无菌溶液，请操作过程中执行无菌操作。

3）请务必使用高质量的无内毒素质粒。通过260 nm光吸收测定DNA浓度，260nm / 280nm比值确定DNA纯度（比值应该在1.8～2.0的范围之内）。如有可能，请通过琼脂糖凝胶电泳检测质粒的完整性。

4）使用适当保存和经常传代的健康细胞。确保培养基没有被细菌、真菌或支原体污染。如果细胞是近期复苏的液氮冻存细胞，请在转染前至少传代两次。

5）对于某些类型的细胞如HEK-293、HEK293T、NIH/3T3和COS细胞，在转染前两天铺板可显著提高重组蛋白的表达水平。如果选择转染前两天铺板，可适当降低铺板密度，以确保转染时细胞的汇合度仍为60-80%。

6）对于接触抑制敏感的细胞，可适当降低铺板密度。

7）推荐用商业化的无血清培养基比如Opti-MEM I来稀释DNA和PEI25K，制备转染复合物。

8）转染过程请不要使用抗生素。

9）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

一、操作方法（贴壁细胞）

1.1铺板

a）转染前18-24h进行铺板，调整合适的细胞密度（参考表1），使其在转染时细胞密度达60-80%。

【注意】：高血清水平会抑制转染效率，大多数情况，低血清水平（≤5%）能产生最高的转染效率。

1.2转染步骤（以6孔板的单孔为例）

a）转染前1-2h，每孔替换为3ml含2%血清的新鲜生长培养基。

b）制备PEI25K-DNA转染复合物（严格按照以下步骤进行）：①往300μl无血清培养基（比如：Opti-MEM I）加入2μg质粒DNA,低速混合/涡旋均匀；②往混合物内加入6μl PEI25K（1mg/ml）（DNA/PEI25K=1：3），低速涡旋5s；③无菌环境，室温静置30min以形成PEI25K-DNA转染复合物。④用移液枪上下吹打3次，轻轻混匀。

c）将PEI25K-DNA转染复合物转到孔内。轻轻晃动培养皿或轻微涡旋，使得复合物分散均匀。

【注意】：以上步骤可通过调整PEI25K-DNA复合物在无血清培养基内的体积（为培养总体积的10%）来进行放大或缩小（可参考表2）。

1.3 孵育

a）37℃，5% CO2培养箱内培养细胞，转染后12-18h，去除含PEI25K-DNA复合物的培养液，更换新鲜的生长培养基。

b）通常，转染后36-48h能检测到重组蛋白表达。一般在转染后72-96h能观察到最大水平的表达。

PEI25K客户使用案例（逐步增加中）

图片描述：以人结肠癌细胞（HCT116）为对象，按照质粒DNA：PEI 2,5000（MX2202-250MG）=1:4的比例制备转染混合物并转染进入HCT116细胞，36h后于荧光显微镜下观察转染效率（GFP，绿色荧光蛋白）。

【数据来源：厦门大学 于老师】

相关产品

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PEI 40K Transfection Reagent

线性化聚乙烯亚胺转染试剂

产品标签

PEI 40K转染试剂，PEI 25K转染试剂；线性化聚乙烯亚胺；PEI 40000；PEI25000；Lipofectamine 2000；Lipofectamine 3000；

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线性化聚乙烯亚胺PEI 40000（Polyethylenimine Linear, MW 40000; PEI 40K）是一款优秀和低成本的瞬时性转染试剂。在HEK293和CHO表达系统中，PEI在宽广的生产规模内（从96孔板到100L生物反应器）能提供连续性的高基因表达。

作为线性化聚乙烯亚胺PEI25000（PEI 25K）的升级产品，操作更简单，且具有连续性的更高表达滴度，优势在于：1）PEI 25K转染溶液通常需几个小时来配置，然而，PEI 40K在2个小时内即可转化为即用型的溶液；2）PEI 25K含4-11%残留的丙酰基基团，该基团阻止聚合物骨架紧密结合到DNA。然而，PEI 40K完全去丙酰化结构，意味着每个批次保持连续性更高转化效率。

本品是PEI 40K的无菌溶液，浓度为1mg/ml，直接使用即可。1ml本品足以用来转染250μg DNA，或者，6孔板内约做60-120次转染。

保存与运输方法

保存：+4℃保存，1年有效。

运输：室温运输。

注意事项

1）请务必使用高质量的无内毒素质粒。通过260 nm光吸收测定DNA浓度，260nm/280nm比值确定DNA纯度（比值应该在1.8～2.0的范围之内）。如有可能，请通过琼脂糖凝胶电泳检测质粒的完整性。

2）使用适当保存和经常传代的健康细胞。确保培养基没有被细菌、真菌或支原体污染。如果细胞是近期复苏的液氮冻存细胞，请在转染前至少传代两次。

3）对于某些类型的细胞如HEK-293、HEK293T、NIH/3T3和COS细胞，在转染前两天铺板可显著提高重组蛋白的表达水平。如果选择转染前两天铺板，可适当降低铺板密度，以确保转染时细胞的汇合度仍为60-80%。

4）对于接触抑制敏感的细胞，可适当降低铺板密度。

5）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

试剂准备

稀释液准备：用细胞培养级水来制备150mM NaCl（比如：称取876.6mg高纯NaCl加入80ml细胞培养级水，充分溶解后，定容到100ml，经0.1或0.2μm滤膜过滤除菌。）

【注意】：也可使用商业化的无血清培养基（比如Opti-MEM I）来制备转染复合物。

一、操作方法（贴壁细胞）

1.1铺板

a）转染前18-24h进行铺板，调整合适的细胞密度（参考表1），使其在转染时细胞密度达60-80%。

【注意】：高血清水平会抑制转染效率，大多数情况，低血清水平（≤5%）能产生最高的转染效率。

1.2转染步骤（以6孔板的单孔为例）

a）转染前1-2h，每孔替换为3ml含2%血清的新鲜生长培养基。

b）制备PEI 40K-DNA转染复合物（严格按照顺序进行）：①往300μl稀释液内加入2μg质粒DNA,低速混合/涡旋均匀；②往混合物内加入8μl PEI 40K（1mg/ml）（DNA/PEI 40K=1：4），低速涡旋5s；③无菌环境，室温静置20min以形成PEI 40K-DNA转染复合物。④用移液枪上下吹打3次，轻轻混匀。

c）将PEI 40K-DNA转染复合物转到孔内。轻轻晃动培养皿或轻微涡旋，使得复合物分散均匀。

【注意】：以上步骤可通过调整PEI 40K-DNA复合物在稀释液内的体积（稀释液为培养总体积的10%）来进行放大或缩小（可参考表2）。确保DNA/PEI 40K=1：4！

1.3 孵育

a）37℃，5% CO2培养箱内培养细胞，转染后12-18h，去除含PEI 40K-DNA复合物的培养液，更换新鲜的生长培养基。

b）通常，转染后36-48h能检测到重组蛋白表达。一般在转染后72-96h能观察到最大水平的表达。

二、操作方法（悬浮细胞）

2.1接种准备

于转染前2-3h，按照1.0×106/ml培养接种细胞。

2.2 转染步骤（以：50ml培养物/250ml摇瓶为例）

a）制备PEI 40K-DNA转染复合物（严格按照顺序进行）：①往2.5ml稀释液内加入50μg质粒DNA,低速混合/涡旋均匀；②往混合物内加入200μl PEI 40K（1mg/ml）（DNA/PEI 40K=1：4），低速涡旋5s；③无菌环境，室温静置20min以形成PEI 40K-DNA转染复合物。④用移液枪上下吹打3次，轻轻混匀。

b）将全部转染溶液加入25ml悬浮细胞内。

c）将悬浮细胞放回培养箱内。

2.3 孵育

a）在培养箱内摇动培养2-3h，之后加入25ml新鲜生长培养基。重新放回培养箱。

b）通常，转染后36-48h能检测到重组蛋白表达。一般在转染后72-96h能观察到最大水平的表达。

相关产品

描述

PEI 40K Transfection Reagent

线性化聚乙烯亚胺转染试剂

产品标签

PEI 40K转染试剂，PEI 25K转染试剂；线性化聚乙烯亚胺；PEI 40000；PEI25000；Lipofectamine 2000；Lipofectamine 3000；

产品信息

产品描述

线性化聚乙烯亚胺PEI 40000（Polyethylenimine Linear, MW 40000; PEI 40K）是一款优秀和低成本的瞬时性转染试剂。在HEK293和CHO表达系统中，PEI在宽广的生产规模内（从96孔板到100L生物反应器）能提供连续性的高基因表达。

作为线性化聚乙烯亚胺PEI25000（PEI 25K）的升级产品，操作更简单，且具有连续性的更高表达滴度，优势在于：1）PEI 25K转染溶液通常需几个小时来配置，然而，PEI 40K在2个小时内即可转化为即用型的溶液；2）PEI 25K含4-11%残留的丙酰基基团，该基团阻止聚合物骨架紧密结合到DNA。然而，PEI 40K完全去丙酰化结构，意味着每个批次保持连续性更高转化效率。

本品是PEI 40K的无菌溶液，浓度为1mg/ml，直接使用即可。1ml本品足以用来转染250μg DNA，或者，6孔板内约做60-120次转染。

保存与运输方法

保存：+4℃保存，1年有效。

运输：室温运输。

注意事项

1）请务必使用高质量的无内毒素质粒。通过260 nm光吸收测定DNA浓度，260nm/280nm比值确定DNA纯度（比值应该在1.8～2.0的范围之内）。如有可能，请通过琼脂糖凝胶电泳检测质粒的完整性。

2）使用适当保存和经常传代的健康细胞。确保培养基没有被细菌、真菌或支原体污染。如果细胞是近期复苏的液氮冻存细胞，请在转染前至少传代两次。

3）对于某些类型的细胞如HEK-293、HEK293T、NIH/3T3和COS细胞，在转染前两天铺板可显著提高重组蛋白的表达水平。如果选择转染前两天铺板，可适当降低铺板密度，以确保转染时细胞的汇合度仍为60-80%。

4）对于接触抑制敏感的细胞，可适当降低铺板密度。

5）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

试剂准备

稀释液准备：用细胞培养级水来制备150mM NaCl（比如：称取876.6mg高纯NaCl加入80ml细胞培养级水，充分溶解后，定容到100ml，经0.1或0.2μm滤膜过滤除菌。）

【注意】：也可使用商业化的无血清培养基（比如Opti-MEM I）来制备转染复合物。

一、操作方法（贴壁细胞）

1.1铺板

a）转染前18-24h进行铺板，调整合适的细胞密度（参考表1），使其在转染时细胞密度达60-80%。

【注意】：高血清水平会抑制转染效率，大多数情况，低血清水平（≤5%）能产生最高的转染效率。

1.2转染步骤（以6孔板的单孔为例）

a）转染前1-2h，每孔替换为3ml含2%血清的新鲜生长培养基。

b）制备PEI 40K-DNA转染复合物（严格按照顺序进行）：①往300μl稀释液内加入2μg质粒DNA,低速混合/涡旋均匀；②往混合物内加入8μl PEI 40K（1mg/ml）（DNA/PEI 40K=1：4），低速涡旋5s；③无菌环境，室温静置20min以形成PEI 40K-DNA转染复合物。④用移液枪上下吹打3次，轻轻混匀。

c）将PEI 40K-DNA转染复合物转到孔内。轻轻晃动培养皿或轻微涡旋，使得复合物分散均匀。

【注意】：以上步骤可通过调整PEI 40K-DNA复合物在稀释液内的体积（稀释液为培养总体积的10%）来进行放大或缩小（可参考表2）。确保DNA/PEI 40K=1：4！

1.3 孵育

a）37℃，5% CO2培养箱内培养细胞，转染后12-18h，去除含PEI 40K-DNA复合物的培养液，更换新鲜的生长培养基。

b）通常，转染后36-48h能检测到重组蛋白表达。一般在转染后72-96h能观察到最大水平的表达。

二、操作方法（悬浮细胞）

2.1接种准备

于转染前2-3h，按照1.0×106/ml培养接种细胞。

2.2 转染步骤（以：50ml培养物/250ml摇瓶为例）

a）制备PEI 40K-DNA转染复合物（严格按照顺序进行）：①往2.5ml稀释液内加入50μg质粒DNA,低速混合/涡旋均匀；②往混合物内加入200μl PEI 40K（1mg/ml）（DNA/PEI 40K=1：4），低速涡旋5s；③无菌环境，室温静置20min以形成PEI 40K-DNA转染复合物。④用移液枪上下吹打3次，轻轻混匀。

b）将全部转染溶液加入25ml悬浮细胞内。

c）将悬浮细胞放回培养箱内。

2.3 孵育

a）在培养箱内摇动培养2-3h，之后加入25ml新鲜生长培养基。重新放回培养箱。

b）通常，转染后36-48h能检测到重组蛋白表达。一般在转染后72-96h能观察到最大水平的表达。

相关产品

描述

PEI 40K Transfection Reagent

线性化聚乙烯亚胺转染试剂

产品标签

PEI 40K转染试剂，PEI 25K转染试剂；线性化聚乙烯亚胺；PEI 40000；PEI25000；Lipofectamine 2000；Lipofectamine 3000；

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线性化聚乙烯亚胺PEI 40000（Polyethylenimine Linear, MW 40000; PEI 40K）是一款优秀和低成本的瞬时性转染试剂。在HEK293和CHO表达系统中，PEI在宽广的生产规模内（从96孔板到100L生物反应器）能提供连续性的高基因表达。

作为线性化聚乙烯亚胺PEI25000（PEI 25K）的升级产品，操作更简单，且具有连续性的更高表达滴度，优势在于：1）PEI 25K转染溶液通常需几个小时来配置，然而，PEI 40K在2个小时内即可转化为即用型的溶液；2）PEI 25K含4-11%残留的丙酰基基团，该基团阻止聚合物骨架紧密结合到DNA。然而，PEI 40K完全去丙酰化结构，意味着每个批次保持连续性更高转化效率。

本品是PEI 40K的无菌溶液，浓度为1mg/ml，直接使用即可。1ml本品足以用来转染250μg DNA，或者，6孔板内约做60-120次转染。

保存与运输方法

保存：+4℃保存，1年有效。

运输：室温运输。

注意事项

1）请务必使用高质量的无内毒素质粒。通过260 nm光吸收测定DNA浓度，260nm/280nm比值确定DNA纯度（比值应该在1.8～2.0的范围之内）。如有可能，请通过琼脂糖凝胶电泳检测质粒的完整性。

2）使用适当保存和经常传代的健康细胞。确保培养基没有被细菌、真菌或支原体污染。如果细胞是近期复苏的液氮冻存细胞，请在转染前至少传代两次。

3）对于某些类型的细胞如HEK-293、HEK293T、NIH/3T3和COS细胞，在转染前两天铺板可显著提高重组蛋白的表达水平。如果选择转染前两天铺板，可适当降低铺板密度，以确保转染时细胞的汇合度仍为60-80%。

4）对于接触抑制敏感的细胞，可适当降低铺板密度。

5）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

试剂准备

稀释液准备：用细胞培养级水来制备150mM NaCl（比如：称取876.6mg高纯NaCl加入80ml细胞培养级水，充分溶解后，定容到100ml，经0.1或0.2μm滤膜过滤除菌。）

【注意】：也可使用商业化的无血清培养基（比如Opti-MEM I）来制备转染复合物。

一、操作方法（贴壁细胞）

1.1铺板

a）转染前18-24h进行铺板，调整合适的细胞密度（参考表1），使其在转染时细胞密度达60-80%。

【注意】：高血清水平会抑制转染效率，大多数情况，低血清水平（≤5%）能产生最高的转染效率。

1.2转染步骤（以6孔板的单孔为例）

a）转染前1-2h，每孔替换为3ml含2%血清的新鲜生长培养基。

b）制备PEI 40K-DNA转染复合物（严格按照顺序进行）：①往300μl稀释液内加入2μg质粒DNA,低速混合/涡旋均匀；②往混合物内加入8μl PEI 40K（1mg/ml）（DNA/PEI 40K=1：4），低速涡旋5s；③无菌环境，室温静置20min以形成PEI 40K-DNA转染复合物。④用移液枪上下吹打3次，轻轻混匀。

c）将PEI 40K-DNA转染复合物转到孔内。轻轻晃动培养皿或轻微涡旋，使得复合物分散均匀。

【注意】：以上步骤可通过调整PEI 40K-DNA复合物在稀释液内的体积（稀释液为培养总体积的10%）来进行放大或缩小（可参考表2）。确保DNA/PEI 40K=1：4！

1.3 孵育

a）37℃，5% CO2培养箱内培养细胞，转染后12-18h，去除含PEI 40K-DNA复合物的培养液，更换新鲜的生长培养基。

b）通常，转染后36-48h能检测到重组蛋白表达。一般在转染后72-96h能观察到最大水平的表达。

二、操作方法（悬浮细胞）

2.1接种准备

于转染前2-3h，按照1.0×106/ml培养接种细胞。

2.2 转染步骤（以：50ml培养物/250ml摇瓶为例）

a）制备PEI 40K-DNA转染复合物（严格按照顺序进行）：①往2.5ml稀释液内加入50μg质粒DNA,低速混合/涡旋均匀；②往混合物内加入200μl PEI 40K（1mg/ml）（DNA/PEI 40K=1：4），低速涡旋5s；③无菌环境，室温静置20min以形成PEI 40K-DNA转染复合物。④用移液枪上下吹打3次，轻轻混匀。

b）将全部转染溶液加入25ml悬浮细胞内。

c）将悬浮细胞放回培养箱内。

2.3 孵育

a）在培养箱内摇动培养2-3h，之后加入25ml新鲜生长培养基。重新放回培养箱。

b）通常，转染后36-48h能检测到重组蛋白表达。一般在转染后72-96h能观察到最大水平的表达。

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描述

Polyethylenimine Linear, MW 40000 (PEI 40K)

线性化聚乙烯亚胺PEI 40000

搜索关键词：

PEI 40K; PEI40000；线性化聚乙烯亚胺PEI；PEI转染试剂；PEI 25000；CAS：49553-93-7；Polysciences;

产品信息

产品描述

线性化聚乙烯亚胺PEI 40000（Polyethylenimine Linear, MW 40000; PEI 40K）是一款优秀和低成本的瞬时性转染试剂。在HEK293和CHO表达系统中，PEI在宽广的生产规模内（从96孔板到100L生物反应器）能提供连续性的高基因表达。

作为线性化聚乙烯亚胺PEI25000（PEI 25K）的升级产品，操作更简单，且具有连续性的更高表达滴度，优势在于：1）PEI 25K转染溶液通常需几个小时来配置，然而，PEI 40K在2个小时内即可转化为即用型的溶液；2）PEI 25K含4-11%残留的丙酰基基团，该基团阻止聚合物骨架紧密结合到DNA。然而，PEI 40K完全去丙酰化结构，意味着每个批次保持连续性更高转化效率。

产品特性

1）CAS NO.：49553-93-7

2）分子量：40,000

3）外观：白色至类白色自由流动固体

4）溶解性：溶于冷水和室温水，不溶于通用有机溶剂（乙醇、丙酮和四氢呋喃）

5）化学结构式：

保存与运输方法

保存：室温保存，或可置于4℃延长保存周期，2年有效。

运输：室温运输。

储存液配制

1）于1L玻璃烧杯，将1g PEI 40K粉末加入900ml Milli-Q®超纯水或其他相当级别的生物用水内。

2）将磁性转子放入烧杯内，打开搅拌模式使产生小型漩涡，直至PEI 40K完全溶解，通常5min内能完成溶解。

3）用25ml移液枪逐滴加入1N NaOH调整溶液pH，直至6.90~7.10之间。如果pH突然超过7.10，使用1N盐酸重新调整pH回落至6.90~7.10之间。

4）将溶液从烧杯转移到1L量筒内，之后补水定容至1L终体积。

5）用0.1μm或0.2μm PES滤膜真空过滤器来过滤除菌。

6）根据单次用量分装，置于4℃密封保存，至少6个月稳定。

注意事项

1）对于本品的转染方法，可参考我司提供的PEI 40K Transfection Reagent线性化聚乙烯亚胺转染试剂（货号：MX2205-1ML），或参考以下几篇文献：①Delafosse, L., Xu, P. & Durocher, Y. Comparative study of polyethylenimines for transient gene expression in mammalian HEK293 and CHO cells. Journal of Biotechnology 227, 103–111 (2016).② Longo, P. a, Kavran, J. M., Kim, M. & Leahy, D. J. Transient Mammalian Cell Transfection wtih Polyethylenimine (PEI). Methods Enzymology 529, 227–240 (2013).③ Stuible, M. et al. Optimization of a high-cell-density polyethylenimine transfection method for rapid protein production in CHO-EBNA1 cells. Journal of Biotechnology 281, 39–47 (2018).

2）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

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线性化聚乙烯亚胺PEI 40000

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4）溶解性：溶于冷水和室温水，不溶于通用有机溶剂（乙醇、丙酮和四氢呋喃）

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保存与运输方法

保存：室温保存，或可置于4℃延长保存周期，2年有效。

运输：室温运输。

储存液配制

1）于1L玻璃烧杯，将1g PEI 40K粉末加入900ml Milli-Q®超纯水或其他相当级别的生物用水内。

2）将磁性转子放入烧杯内，打开搅拌模式使产生小型漩涡，直至PEI 40K完全溶解，通常5min内能完成溶解。

3）用25ml移液枪逐滴加入1N NaOH调整溶液pH，直至6.90~7.10之间。如果pH突然超过7.10，使用1N盐酸重新调整pH回落至6.90~7.10之间。

4）将溶液从烧杯转移到1L量筒内，之后补水定容至1L终体积。

5）用0.1μm或0.2μm PES滤膜真空过滤器来过滤除菌。

6）根据单次用量分装，置于4℃密封保存，至少6个月稳定。

注意事项

1）对于本品的转染方法，可参考我司提供的PEI 40K Transfection Reagent线性化聚乙烯亚胺转染试剂（货号：MX2205-1ML），或参考以下几篇文献：①Delafosse, L., Xu, P. & Durocher, Y. Comparative study of polyethylenimines for transient gene expression in mammalian HEK293 and CHO cells. Journal of Biotechnology 227, 103–111 (2016).② Longo, P. a, Kavran, J. M., Kim, M. & Leahy, D. J. Transient Mammalian Cell Transfection wtih Polyethylenimine (PEI). Methods Enzymology 529, 227–240 (2013).③ Stuible, M. et al. Optimization of a high-cell-density polyethylenimine transfection method for rapid protein production in CHO-EBNA1 cells. Journal of Biotechnology 281, 39–47 (2018).

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2）将磁性转子放入烧杯内，打开搅拌模式使产生小型漩涡，直至PEI 40K完全溶解，通常5min内能完成溶解。

3）用25ml移液枪逐滴加入1N NaOH调整溶液pH，直至6.90~7.10之间。如果pH突然超过7.10，使用1N盐酸重新调整pH回落至6.90~7.10之间。

4）将溶液从烧杯转移到1L量筒内，之后补水定容至1L终体积。

5）用0.1μm或0.2μm PES滤膜真空过滤器来过滤除菌。

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1）CAS NO.：49553-93-7

2）分子量：40,000

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2）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

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