| Poduct Number | Preps | Price |
|---|---|---|
| M2563-01 | 50 | ￥1155 |
| M2563-02 | 200 | ￥4160 |
| Poduct Number | Preps | Price |
|---|---|---|
| M1259-01 | 5 | ￥3539 |
| M1259-02 | 20 | ￥12792 |
| Poduct Number | Preps | Price |
|---|---|---|
| M1257-01 | 5 | ￥621 |
| M1257-02 | 20 | ￥2049 |
| Poduct Number | Preps | Price |
|---|---|---|
| M1260-01 | 50 | ￥375 |
| M1260-02 | 200 | ￥1425 |
Streptavidin 链霉亲和素（链亲和素）；Avidin 亲和素；链霉亲和素-生物素放大系统；Streptavidin Magbeads 链霉亲和素免疫磁珠；CAS：9013-20-1
产品信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | |
| Streptavidin Magnetic Beads 5 µm 链霉亲和素免疫磁珠（5 µm） | MP3903-1ML | 1ml (10mg/ml) | |
| MP3903-10ML | 10ml (10mg/ml) |
链霉亲和素磁珠（Streptavidin Magnetic Beads）采用专利的蛋白偶联技术将链霉亲和素（SA）共价连接于固相载体表面，可高效结合生物素化抗体、核酸、蛋白等配体分子。本品采用超顺磁性微球，粒径均一，形貌规整，有利于方便快捷的捕获目标分子以及实现磁性分离。本品还能配套自动化设备进行高通量操作。
本品为结合5 µm粒径磁珠的链霉亲和素，浓度为10mg/ml，保存于1×PBS，0.1%（v/v）Tween-20，0.1%（w/v）NaN3溶液。
产品特性
1）同义名：Streptavidin Magbeads链霉亲和素免疫磁珠；链霉亲和素磁珠；
2）与游离生物素结合能力：600 pmol/mg磁珠
3）与与生物素化单链寡核苷酸（24nt）结合能力：200 pmol/mg磁珠
4）与生物素化IgG结合能力：10 pmol/mg磁珠
5）磁珠表面：亲水基团
6）保存缓冲液：10mg/ml in 1×PBS，0.1%（v/v）Tween-20，0.1%（w/v）NaN3
保存与运输方法
保存：2-8°C保存，1年有效。
运输：冰袋运输。
注意事项
操作步骤
1. 需要材料
1.1 缓冲液：以下为常用的缓冲液成分，用户可根据需要调整缓冲液的盐浓度及pH。
Buffer I（适用于结合生物素化核酸）：10 mM Tris-HCl（pH 7.5），1 mM EDTA，1 M NaCl，0.01%~0.1% Tween-20
Buffer II（适用于结合生物素化抗体/蛋白）：1×PBS，pH 7.4，含0.05% Tween-20，可根据需要添加0.01%~0.1% BSA
1.2 磁性分离器：可选用磁性分离器，适用于1.5 mL、2 mL或15 mL离心管
1.3 漩涡振荡器
1.4 旋转混合仪
1.5 移液器及吸头
1.6 合适的离心管
2. 结合生物素化核酸
2.1. 将磁珠瓶置于漩涡振荡器上20 s，振荡重悬磁珠。用移液器移取100 μl磁珠到新的离心管中。将离心管置于磁性分离器上，静置1 min（此操作后续简称为磁性分离），用移液器吸去上清液，从磁性分离器上取下离心管。
【注意】：用户可根据生物素化分子的多少，参考产品特性中磁珠的载量，计算需要取用的磁珠量。建议生物素化分子的加入量为磁珠载量的1~2倍，使磁珠饱和。
2.2. 加入1 ml Buffer I到离心管中，盖上离心管盖，充分振荡重悬磁珠。磁性分离，移去上清液。
【备注】：当步骤2.1取用磁珠体积大于1 ml时，加入与磁珠体积相同的Buffer I。
2.3. 重复“步骤2.2”一次。
2.4. 加入500 μl用Buffer I稀释的生物素化核酸（使磁珠浓度为2 mg/ml），充分振荡重悬磁珠。将离心管置于旋转混合仪上，室温旋转混合30 min。
2.5. 磁性分离，将上清液转移至新的离心管。
2.6. 按“步骤2.2”的方法洗涤磁珠三次。
2.7. 根据后续实验的要求，加入合适的低盐缓冲液，重悬磁珠。至此结合生物素化核酸步骤完成。磁珠可用于后续操作。
2.8. 用户可以通过测定反应前后核酸的浓度，计算结合到磁珠上的核酸量﹝（反应前浓度-反应后浓度）×反应溶液体积﹞。
3. 结合生物素化抗体/蛋白
3.1 将磁珠瓶置于漩涡振荡器上20 s，振荡重悬磁珠。用移液器移取100 μl磁珠到新的离心管中。磁性分离，用移液器吸去上清液，从磁性分离器上取下离心管。
【注意】：用户可根据生物素化分子的多少，参考产品特性中磁珠的载量，计算需要取用的磁珠量。建议生物素化分子的加入量为磁珠载量的1~2倍，使磁珠饱和。
3.2 加入1 ml Buffer II到离心管中，盖上离心管盖，充分振荡重悬磁珠。磁性分离，移去上清液。
【注意】：当步骤3.1取用磁珠体积大于1 ml时，加入与磁珠体积相同的Buffer II。
3.3 重复“步骤3.2”两次，共洗涤三次。
3.4 加入1 ml用Buffer II稀释的生物素化抗体/蛋白（使磁珠浓度为1 mg/ml），充分振荡重悬磁珠。将离心管置于旋转混合仪上，室温旋转混合60 min。
3.5 磁性分离，将上清液转移至新的离心管。
3.6 按“步骤3.2”的方法洗涤磁珠五次。
3.7 根据后续实验的要求，加入Buffer II或其他合适的缓冲液，重悬磁珠。至此结合生物素化抗体/蛋白步骤完成。磁珠可用于后续操作。
相关产品
1、链霉亲和素（Streptavidin），Unconjugated
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 外观 | |
| Streptavidin (1mg/ml) 链霉亲和素（1mg/ml） | MM50001-1ML | 1ml | 液体 | |
| Streptavidin (1mg/ml) 链霉亲和素（1mg/ml） | MM50001-5ML | 5ml | 液体 | |
| Streptavidin (1mg/ml) 链霉亲和素（1mg/ml） | MM50001-10ML | 10ml | 液体 | |
| Streptavidin, Recombinant 链霉亲和素（重组型） | MM50002-10MG | 10mg | 粉末 | |
| Streptavidin, Recombinant 链霉亲和素（重组型） | MM50002-50MG | 50mg | 粉末 | |
| Streptavidin, Recombinant 链霉亲和素（重组型） | MM50002-100MG | 100mg | 粉末 | |
| Streptavidin, Recombinant 链霉亲和素（重组型） | MM50002-500MG | 500mg | 粉末 | |
| Streptavidin, Recombinant 链霉亲和素（重组型） | MM50002-1000MG | 1g | 粉末 |
2、链霉亲和素（Streptavidin），Conjugated
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | Ex/Em（nm） | |
| HRP-Streptavidin | MM50101-100UL | 100µl | / | |
| Alkaline Phosphatase-Streptavidin | MM50102-100UL | 100µl | / | |
| FITC-Streptavidin | MM50103-500UG | 500µg | 488/520 | |
| PE-Streptavidin | MM50104-500UG | 500µg | 565/578 | |
| Alexa Fluor 405-Streptavidin | MM50105-200UG | 200µg | 401/420 | |
| Alexa Fluor 488-Streptavidin | MM50106-200UG | 200µg | 491/514 | |
| Alexa Fluor 555-Streptavidin | MM50107-200UG | 200µg | 559/569 | |
| Alexa Fluor 594-Streptavidin | MM50108-200UG | 200µg | 592/614 | |
| Alexa Fluor 647-Streptavidin | MM50109-200UG | 200µg | 654/674 | |
| Alexa Fluor 680-Streptavidin | MM50110-200UG | 200µg | 682/701 | |
| Alexa Fluor 750-Streptavidin | MM50111-200UG | 200µg | 753/779 | |
| Cy2-Streptavidin | MM50112-1MG | 1mg | 492/510 | |
| Cy3-Streptavidin | MM50113-1MG | 1mg | 550/570 | |
| Cy5-Streptavidin | MM50114-1MG | 1mg | 650/670 |
3、链霉亲和素免疫磁珠（Streptavidin Magbeads）
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 浓度 | |
| Streptavidin Magnetic Beads 1 µm 链霉亲和素磁珠 | MP3901-1ML | 1ml | 10mg/ml | |
| Streptavidin Magnetic Beads 1 µm 链霉亲和素磁珠 | MP3901-10ML | 10ml | 10mg/ml | |
| Streptavidin Magnetic Beads 2 µm 链霉亲和素磁珠 | MP3902-1ML | 1ml | 10mg/ml | |
| Streptavidin Magnetic Beads 2 µm 链霉亲和素磁珠 | MP3902-10ML | 10ml | 10mg/ml | |
| Streptavidin Magnetic Beads 5 µm 链霉亲和素磁珠 | MP3903-1ML | 1ml | 10mg/ml | |
| Streptavidin Magnetic Beads 5 µm 链霉亲和素磁珠 | MP3903-10ML | 10ml | 10mg/ml |
Streptavidin 链霉亲和素（链亲和素）；Avidin 亲和素；链霉亲和素-生物素放大系统；Streptavidin Magbeads 链霉亲和素免疫磁珠；CAS：9013-20-1
产品信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | |
| Streptavidin Magnetic Beads 5 µm 链霉亲和素免疫磁珠（5 µm） | MP3903-1ML | 1ml (10mg/ml) | |
| MP3903-10ML | 10ml (10mg/ml) |
产品描述
链霉亲和素磁珠（Streptavidin Magnetic Beads）采用专利的蛋白偶联技术将链霉亲和素（SA）共价连接于固相载体表面，可高效结合生物素化抗体、核酸、蛋白等配体分子。本品采用超顺磁性微球，粒径均一，形貌规整，有利于方便快捷的捕获目标分子以及实现磁性分离。本品还能配套自动化设备进行高通量操作。
本品为结合5 µm粒径磁珠的链霉亲和素，浓度为10mg/ml，保存于1×PBS，0.1%（v/v）Tween-20，0.1%（w/v）NaN3溶液。
产品特性
1）同义名：Streptavidin Magbeads链霉亲和素免疫磁珠；链霉亲和素磁珠；
2）与游离生物素结合能力：600 pmol/mg磁珠
3）与与生物素化单链寡核苷酸（24nt）结合能力：200 pmol/mg磁珠
4）与生物素化IgG结合能力：10 pmol/mg磁珠
5）磁珠表面：亲水基团
6）保存缓冲液：10mg/ml in 1×PBS，0.1%（v/v）Tween-20，0.1%（w/v）NaN3
保存与运输方法
保存：2-8°C保存，1年有效。
运输：冰袋运输。
注意事项
操作步骤
1. 需要材料
1.1 缓冲液：以下为常用的缓冲液成分，用户可根据需要调整缓冲液的盐浓度及pH。
Buffer I（适用于结合生物素化核酸）：10 mM Tris-HCl（pH 7.5），1 mM EDTA，1 M NaCl，0.01%~0.1% Tween-20
Buffer II（适用于结合生物素化抗体/蛋白）：1×PBS，pH 7.4，含0.05% Tween-20，可根据需要添加0.01%~0.1% BSA
1.2 磁性分离器：可选用磁性分离器，适用于1.5 mL、2 mL或15 mL离心管
1.3 漩涡振荡器
1.4 旋转混合仪
1.5 移液器及吸头
1.6 合适的离心管
2. 结合生物素化核酸
2.1. 将磁珠瓶置于漩涡振荡器上20 s，振荡重悬磁珠。用移液器移取100 μl磁珠到新的离心管中。将离心管置于磁性分离器上，静置1 min（此操作后续简称为磁性分离），用移液器吸去上清液，从磁性分离器上取下离心管。
【注意】：用户可根据生物素化分子的多少，参考产品特性中磁珠的载量，计算需要取用的磁珠量。建议生物素化分子的加入量为磁珠载量的1~2倍，使磁珠饱和。
2.2. 加入1 ml Buffer I到离心管中，盖上离心管盖，充分振荡重悬磁珠。磁性分离，移去上清液。
【备注】：当步骤2.1取用磁珠体积大于1 ml时，加入与磁珠体积相同的Buffer I。
2.3. 重复“步骤2.2”一次。
2.4. 加入500 μl用Buffer I稀释的生物素化核酸（使磁珠浓度为2 mg/ml），充分振荡重悬磁珠。将离心管置于旋转混合仪上，室温旋转混合30 min。
2.5. 磁性分离，将上清液转移至新的离心管。
2.6. 按“步骤2.2”的方法洗涤磁珠三次。
2.7. 根据后续实验的要求，加入合适的低盐缓冲液，重悬磁珠。至此结合生物素化核酸步骤完成。磁珠可用于后续操作。
2.8. 用户可以通过测定反应前后核酸的浓度，计算结合到磁珠上的核酸量﹝（反应前浓度-反应后浓度）×反应溶液体积﹞。
3. 结合生物素化抗体/蛋白
3.1 将磁珠瓶置于漩涡振荡器上20 s，振荡重悬磁珠。用移液器移取100 μl磁珠到新的离心管中。磁性分离，用移液器吸去上清液，从磁性分离器上取下离心管。
【注意】：用户可根据生物素化分子的多少，参考产品特性中磁珠的载量，计算需要取用的磁珠量。建议生物素化分子的加入量为磁珠载量的1~2倍，使磁珠饱和。
3.2 加入1 ml Buffer II到离心管中，盖上离心管盖，充分振荡重悬磁珠。磁性分离，移去上清液。
【注意】：当步骤3.1取用磁珠体积大于1 ml时，加入与磁珠体积相同的Buffer II。
3.3 重复“步骤3.2”两次，共洗涤三次。
3.4 加入1 ml用Buffer II稀释的生物素化抗体/蛋白（使磁珠浓度为1 mg/ml），充分振荡重悬磁珠。将离心管置于旋转混合仪上，室温旋转混合60 min。
3.5 磁性分离，将上清液转移至新的离心管。
3.6 按“步骤3.2”的方法洗涤磁珠五次。
3.7 根据后续实验的要求，加入Buffer II或其他合适的缓冲液，重悬磁珠。至此结合生物素化抗体/蛋白步骤完成。磁珠可用于后续操作。
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| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 外观 | |
| Streptavidin (1mg/ml) 链霉亲和素（1mg/ml） | MM50001-1ML | 1ml | 液体 | |
| Streptavidin (1mg/ml) 链霉亲和素（1mg/ml） | MM50001-5ML | 5ml | 液体 | |
| Streptavidin (1mg/ml) 链霉亲和素（1mg/ml） | MM50001-10ML | 10ml | 液体 | |
| Streptavidin, Recombinant 链霉亲和素（重组型） | MM50002-10MG | 10mg | 粉末 | |
| Streptavidin, Recombinant 链霉亲和素（重组型） | MM50002-50MG | 50mg | 粉末 | |
| Streptavidin, Recombinant 链霉亲和素（重组型） | MM50002-100MG | 100mg | 粉末 | |
| Streptavidin, Recombinant 链霉亲和素（重组型） | MM50002-500MG | 500mg | 粉末 | |
| Streptavidin, Recombinant 链霉亲和素（重组型） | MM50002-1000MG | 1g | 粉末 |
2、链霉亲和素（Streptavidin），Conjugated
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | Ex/Em（nm） | |
| HRP-Streptavidin | MM50101-100UL | 100µl | / | |
| Alkaline Phosphatase-Streptavidin | MM50102-100UL | 100µl | / | |
| FITC-Streptavidin | MM50103-500UG | 500µg | 488/520 | |
| PE-Streptavidin | MM50104-500UG | 500µg | 565/578 | |
| Alexa Fluor 405-Streptavidin | MM50105-200UG | 200µg | 401/420 | |
| Alexa Fluor 488-Streptavidin | MM50106-200UG | 200µg | 491/514 | |
| Alexa Fluor 555-Streptavidin | MM50107-200UG | 200µg | 559/569 | |
| Alexa Fluor 594-Streptavidin | MM50108-200UG | 200µg | 592/614 | |
| Alexa Fluor 647-Streptavidin | MM50109-200UG | 200µg | 654/674 | |
| Alexa Fluor 680-Streptavidin | MM50110-200UG | 200µg | 682/701 | |
| Alexa Fluor 750-Streptavidin | MM50111-200UG | 200µg | 753/779 | |
| Cy2-Streptavidin | MM50112-1MG | 1mg | 492/510 | |
| Cy3-Streptavidin | MM50113-1MG | 1mg | 550/570 | |
| Cy5-Streptavidin | MM50114-1MG | 1mg | 650/670 |
3、链霉亲和素免疫磁珠（Streptavidin Magbeads）
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 浓度 | |
| Streptavidin Magnetic Beads 1 µm 链霉亲和素磁珠 | MP3901-1ML | 1ml | 10mg/ml | |
| Streptavidin Magnetic Beads 1 µm 链霉亲和素磁珠 | MP3901-10ML | 10ml | 10mg/ml | |
| Streptavidin Magnetic Beads 2 µm 链霉亲和素磁珠 | MP3902-1ML | 1ml | 10mg/ml | |
| Streptavidin Magnetic Beads 2 µm 链霉亲和素磁珠 | MP3902-10ML | 10ml | 10mg/ml | |
| Streptavidin Magnetic Beads 5 µm 链霉亲和素磁珠 | MP3903-1ML | 1ml | 10mg/ml | |
| Streptavidin Magnetic Beads 5 µm 链霉亲和素磁珠 | MP3903-10ML | 10ml | 10mg/ml |
Streptavidin 链霉亲和素（链亲和素）；Avidin 亲和素；链霉亲和素-生物素放大系统；Streptavidin Magbeads 链霉亲和素免疫磁珠；CAS：9013-20-1
产品信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | |
| Streptavidin Magnetic Beads 2 µm 链霉亲和素免疫磁珠（2 µm） | MP3902-1ML | 1ml (10mg/ml) | |
| MP3902-10ML | 10ml (10mg/ml) |
链霉亲和素磁珠（Streptavidin Magnetic Beads）采用专利的蛋白偶联技术将链霉亲和素（SA）共价连接于固相载体表面，可高效结合生物素化抗体、核酸、蛋白等配体分子。本品采用超顺磁性微球，粒径均一，形貌规整，有利于方便快捷的捕获目标分子以及实现磁性分离。本品还能配套自动化设备进行高通量操作。
本品为结合2 µm粒径磁珠的链霉亲和素，浓度为10mg/ml，保存于1×PBS，0.1%（v/v）Tween-20，0.1%（w/v）NaN3溶液。
产品特性
1）同义名：Streptavidin Magbeads链霉亲和素免疫磁珠；链霉亲和素磁珠；
2）与游离生物素结合能力：1000 pmol/mg磁珠
3）与与生物素化单链寡核苷酸（24nt）结合能力：400 pmol/mg磁珠
4）与生物素化IgG结合能力：20 pmol/mg磁珠
5）磁珠表面：亲水基团
6）保存缓冲液：10mg/ml in 1×PBS，0.1%（v/v）Tween-20，0.1%（w/v）NaN3
保存与运输方法
保存：2-8°C保存，1年有效。
运输：冰袋运输。
注意事项
操作步骤
1. 需要材料
1.1 缓冲液：以下为常用的缓冲液成分，用户可根据需要调整缓冲液的盐浓度及pH。
Buffer I（适用于结合生物素化核酸）：10 mM Tris-HCl（pH 7.5），1 mM EDTA，1 M NaCl，0.01%~0.1% Tween-20
Buffer II（适用于结合生物素化抗体/蛋白）：1×PBS，pH 7.4，含0.05% Tween-20，可根据需要添加0.01%~0.1% BSA
1.2 磁性分离器：可选用磁性分离器，适用于1.5 mL、2 mL或15 mL离心管
1.3 漩涡振荡器
1.4 旋转混合仪
1.5 移液器及吸头
1.6 合适的离心管
2. 结合生物素化核酸
2.1. 将磁珠瓶置于漩涡振荡器上20 s，振荡重悬磁珠。用移液器移取100 μl磁珠到新的离心管中。将离心管置于磁性分离器上，静置1 min（此操作后续简称为磁性分离），用移液器吸去上清液，从磁性分离器上取下离心管。
【注意】：用户可根据生物素化分子的多少，参考产品特性中磁珠的载量，计算需要取用的磁珠量。建议生物素化分子的加入量为磁珠载量的1~2倍，使磁珠饱和。
2.2. 加入1 ml Buffer I到离心管中，盖上离心管盖，充分振荡重悬磁珠。磁性分离，移去上清液。
【备注】：当步骤2.1取用磁珠体积大于1 ml时，加入与磁珠体积相同的Buffer I。
2.3. 重复“步骤2.2”一次。
2.4. 加入500 μl用Buffer I稀释的生物素化核酸（使磁珠浓度为2 mg/ml），充分振荡重悬磁珠。将离心管置于旋转混合仪上，室温旋转混合30 min。
2.5. 磁性分离，将上清液转移至新的离心管。
2.6. 按“步骤2.2”的方法洗涤磁珠三次。
2.7. 根据后续实验的要求，加入合适的低盐缓冲液，重悬磁珠。至此结合生物素化核酸步骤完成。磁珠可用于后续操作。
2.8. 用户可以通过测定反应前后核酸的浓度，计算结合到磁珠上的核酸量﹝（反应前浓度-反应后浓度）×反应溶液体积﹞。
3. 结合生物素化抗体/蛋白
3.1 将磁珠瓶置于漩涡振荡器上20 s，振荡重悬磁珠。用移液器移取100 μl磁珠到新的离心管中。磁性分离，用移液器吸去上清液，从磁性分离器上取下离心管。
【注意】：用户可根据生物素化分子的多少，参考产品特性中磁珠的载量，计算需要取用的磁珠量。建议生物素化分子的加入量为磁珠载量的1~2倍，使磁珠饱和。
3.2 加入1 ml Buffer II到离心管中，盖上离心管盖，充分振荡重悬磁珠。磁性分离，移去上清液。
【注意】：当步骤3.1取用磁珠体积大于1 ml时，加入与磁珠体积相同的Buffer II。
3.3 重复“步骤3.2”两次，共洗涤三次。
3.4 加入1 ml用Buffer II稀释的生物素化抗体/蛋白（使磁珠浓度为1 mg/ml），充分振荡重悬磁珠。将离心管置于旋转混合仪上，室温旋转混合60 min。
3.5 磁性分离，将上清液转移至新的离心管。
3.6 按“步骤3.2”的方法洗涤磁珠五次。
3.7 根据后续实验的要求，加入Buffer II或其他合适的缓冲液，重悬磁珠。至此结合生物素化抗体/蛋白步骤完成。磁珠可用于后续操作。
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| Streptavidin (1mg/ml) 链霉亲和素（1mg/ml） | MM50001-5ML | 5ml | 液体 | |
| Streptavidin (1mg/ml) 链霉亲和素（1mg/ml） | MM50001-10ML | 10ml | 液体 | |
| Streptavidin, Recombinant 链霉亲和素（重组型） | MM50002-10MG | 10mg | 粉末 | |
| Streptavidin, Recombinant 链霉亲和素（重组型） | MM50002-50MG | 50mg | 粉末 | |
| Streptavidin, Recombinant 链霉亲和素（重组型） | MM50002-100MG | 100mg | 粉末 | |
| Streptavidin, Recombinant 链霉亲和素（重组型） | MM50002-500MG | 500mg | 粉末 | |
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2、链霉亲和素（Streptavidin），Conjugated
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | Ex/Em（nm） | |
| HRP-Streptavidin | MM50101-100UL | 100µl | / | |
| Alkaline Phosphatase-Streptavidin | MM50102-100UL | 100µl | / | |
| FITC-Streptavidin | MM50103-500UG | 500µg | 488/520 | |
| PE-Streptavidin | MM50104-500UG | 500µg | 565/578 | |
| Alexa Fluor 405-Streptavidin | MM50105-200UG | 200µg | 401/420 | |
| Alexa Fluor 488-Streptavidin | MM50106-200UG | 200µg | 491/514 | |
| Alexa Fluor 555-Streptavidin | MM50107-200UG | 200µg | 559/569 | |
| Alexa Fluor 594-Streptavidin | MM50108-200UG | 200µg | 592/614 | |
| Alexa Fluor 647-Streptavidin | MM50109-200UG | 200µg | 654/674 | |
| Alexa Fluor 680-Streptavidin | MM50110-200UG | 200µg | 682/701 | |
| Alexa Fluor 750-Streptavidin | MM50111-200UG | 200µg | 753/779 | |
| Cy2-Streptavidin | MM50112-1MG | 1mg | 492/510 | |
| Cy3-Streptavidin | MM50113-1MG | 1mg | 550/570 | |
| Cy5-Streptavidin | MM50114-1MG | 1mg | 650/670 |
3、链霉亲和素免疫磁珠（Streptavidin Magbeads）
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 浓度 | |
| Streptavidin Magnetic Beads 1 µm 链霉亲和素磁珠 | MP3901-1ML | 1ml | 10mg/ml | |
| Streptavidin Magnetic Beads 1 µm 链霉亲和素磁珠 | MP3901-10ML | 10ml | 10mg/ml | |
| Streptavidin Magnetic Beads 2 µm 链霉亲和素磁珠 | MP3902-1ML | 1ml | 10mg/ml | |
| Streptavidin Magnetic Beads 2 µm 链霉亲和素磁珠 | MP3902-10ML | 10ml | 10mg/ml | |
| Streptavidin Magnetic Beads 5 µm 链霉亲和素磁珠 | MP3903-1ML | 1ml | 10mg/ml | |
| Streptavidin Magnetic Beads 5 µm 链霉亲和素磁珠 | MP3903-10ML | 10ml | 10mg/ml |
Streptavidin 链霉亲和素（链亲和素）；Avidin 亲和素；链霉亲和素-生物素放大系统；Streptavidin Magbeads 链霉亲和素免疫磁珠；CAS：9013-20-1
产品信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | |
| Streptavidin Magnetic Beads 2 µm 链霉亲和素免疫磁珠（2 µm） | MP3902-1ML | 1ml (10mg/ml) | |
| MP3902-10ML | 10ml (10mg/ml) |
产品描述
链霉亲和素磁珠（Streptavidin Magnetic Beads）采用专利的蛋白偶联技术将链霉亲和素（SA）共价连接于固相载体表面，可高效结合生物素化抗体、核酸、蛋白等配体分子。本品采用超顺磁性微球，粒径均一，形貌规整，有利于方便快捷的捕获目标分子以及实现磁性分离。本品还能配套自动化设备进行高通量操作。
本品为结合2 µm粒径磁珠的链霉亲和素，浓度为10mg/ml，保存于1×PBS，0.1%（v/v）Tween-20，0.1%（w/v）NaN3溶液。
产品特性
1）同义名：Streptavidin Magbeads链霉亲和素免疫磁珠；链霉亲和素磁珠；
2）与游离生物素结合能力：1000 pmol/mg磁珠
3）与与生物素化单链寡核苷酸（24nt）结合能力：400 pmol/mg磁珠
4）与生物素化IgG结合能力：20 pmol/mg磁珠
5）磁珠表面：亲水基团
6）保存缓冲液：10mg/ml in 1×PBS，0.1%（v/v）Tween-20，0.1%（w/v）NaN3
保存与运输方法
保存：2-8°C保存，1年有效。
运输：冰袋运输。
注意事项
操作步骤
1. 需要材料
1.1 缓冲液：以下为常用的缓冲液成分，用户可根据需要调整缓冲液的盐浓度及pH。
Buffer I（适用于结合生物素化核酸）：10 mM Tris-HCl（pH 7.5），1 mM EDTA，1 M NaCl，0.01%~0.1% Tween-20
Buffer II（适用于结合生物素化抗体/蛋白）：1×PBS，pH 7.4，含0.05% Tween-20，可根据需要添加0.01%~0.1% BSA
1.2 磁性分离器：可选用磁性分离器，适用于1.5 mL、2 mL或15 mL离心管
1.3 漩涡振荡器
1.4 旋转混合仪
1.5 移液器及吸头
1.6 合适的离心管
2. 结合生物素化核酸
2.1. 将磁珠瓶置于漩涡振荡器上20 s，振荡重悬磁珠。用移液器移取100 μl磁珠到新的离心管中。将离心管置于磁性分离器上，静置1 min（此操作后续简称为磁性分离），用移液器吸去上清液，从磁性分离器上取下离心管。
【注意】：用户可根据生物素化分子的多少，参考产品特性中磁珠的载量，计算需要取用的磁珠量。建议生物素化分子的加入量为磁珠载量的1~2倍，使磁珠饱和。
2.2. 加入1 ml Buffer I到离心管中，盖上离心管盖，充分振荡重悬磁珠。磁性分离，移去上清液。
【备注】：当步骤2.1取用磁珠体积大于1 ml时，加入与磁珠体积相同的Buffer I。
2.3. 重复“步骤2.2”一次。
2.4. 加入500 μl用Buffer I稀释的生物素化核酸（使磁珠浓度为2 mg/ml），充分振荡重悬磁珠。将离心管置于旋转混合仪上，室温旋转混合30 min。
2.5. 磁性分离，将上清液转移至新的离心管。
2.6. 按“步骤2.2”的方法洗涤磁珠三次。
2.7. 根据后续实验的要求，加入合适的低盐缓冲液，重悬磁珠。至此结合生物素化核酸步骤完成。磁珠可用于后续操作。
2.8. 用户可以通过测定反应前后核酸的浓度，计算结合到磁珠上的核酸量﹝（反应前浓度-反应后浓度）×反应溶液体积﹞。
3. 结合生物素化抗体/蛋白
3.1 将磁珠瓶置于漩涡振荡器上20 s，振荡重悬磁珠。用移液器移取100 μl磁珠到新的离心管中。磁性分离，用移液器吸去上清液，从磁性分离器上取下离心管。
【注意】：用户可根据生物素化分子的多少，参考产品特性中磁珠的载量，计算需要取用的磁珠量。建议生物素化分子的加入量为磁珠载量的1~2倍，使磁珠饱和。
3.2 加入1 ml Buffer II到离心管中，盖上离心管盖，充分振荡重悬磁珠。磁性分离，移去上清液。
【注意】：当步骤3.1取用磁珠体积大于1 ml时，加入与磁珠体积相同的Buffer II。
3.3 重复“步骤3.2”两次，共洗涤三次。
3.4 加入1 ml用Buffer II稀释的生物素化抗体/蛋白（使磁珠浓度为1 mg/ml），充分振荡重悬磁珠。将离心管置于旋转混合仪上，室温旋转混合60 min。
3.5 磁性分离，将上清液转移至新的离心管。
3.6 按“步骤3.2”的方法洗涤磁珠五次。
3.7 根据后续实验的要求，加入Buffer II或其他合适的缓冲液，重悬磁珠。至此结合生物素化抗体/蛋白步骤完成。磁珠可用于后续操作。
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| Alkaline Phosphatase-Streptavidin | MM50102-100UL | 100µl | / | |
| FITC-Streptavidin | MM50103-500UG | 500µg | 488/520 | |
| PE-Streptavidin | MM50104-500UG | 500µg | 565/578 | |
| Alexa Fluor 405-Streptavidin | MM50105-200UG | 200µg | 401/420 | |
| Alexa Fluor 488-Streptavidin | MM50106-200UG | 200µg | 491/514 | |
| Alexa Fluor 555-Streptavidin | MM50107-200UG | 200µg | 559/569 | |
| Alexa Fluor 594-Streptavidin | MM50108-200UG | 200µg | 592/614 | |
| Alexa Fluor 647-Streptavidin | MM50109-200UG | 200µg | 654/674 | |
| Alexa Fluor 680-Streptavidin | MM50110-200UG | 200µg | 682/701 | |
| Alexa Fluor 750-Streptavidin | MM50111-200UG | 200µg | 753/779 | |
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磁珠型microRNA分离试剂盒
磁珠型microRNA分离试剂盒
FUJIFILM Wako提供能使从Ago 免疫沉淀到RNA 提取等一系列实验操作简化的“microRNA Isolation Kit”系列。使用本系列试剂盒能简便地从人和小鼠的细胞或组织中提取Ago蛋白结合的microRNA以及靶mRNA，还能从培养上清、血清、血浆中提取游离Ago蛋白结合的microRNA。所提取到的RNA可以应用于qPCR、微阵列检测、NGS等下游实验。本系列包括采用磁珠的MagCapture™ microRNA Isolation Kit，以及采用了硅胶珠法的microRNA Isolation Kit。
MagCapture™ microRNA Isolation Kit（磁珠法）系列产品包括含抗人Ago2抗体（4G8）、抗小鼠Ago2抗体（2D4）、抗Ago1-4抗体（1G3）固相化磁珠这三种试剂盒，以及第四种——能结合任意抗体的Protein G磁珠。上述试剂盒全部采用磁珠法，可进行简易的免疫沉淀操作并获得良好的重复性。免疫沉淀后提取的RNA可进一步使用离心柱纯化，获得高纯度的RNA；若使用含有抗Ago抗体固定化磁珠的3种试剂盒，也可使用一步法更加简便地提取RNA（备注：RNA与磁珠不分离）。
◆试剂盒组成（例：Human Ago2, 10次用）
1. Anti-Human Ago2 Magnetic Beads Solution：600 μL×1瓶
2. Cell Lysis Solution：20 mL×1瓶
3. Washing Solution for IP：40 mL×1瓶
4. Elution Solution I for IP：500 μL×1瓶
5. Elution Solution II for IP：500 μL×1瓶
6. Binding Solution for Spin Column：2 mL×1瓶
7. Binding Enhancer for Spin Column：100 μL×1瓶
8. Washing Solution I for Spin Column：3 mL×1瓶
9. Washing Solution II for Spin Column：4 mL×1瓶
10. Elution Solution for Spin Column：1 mL×1瓶
11. Spin Column/Collection Tube：10瓶
◆操作示意图
◆MagCapture™ microRNA Isolation Kit，Human Ago2 使用例子（人）
提取人细胞株中的microRNA
通过变性聚丙烯酰胺凝胶电泳（银染），检测使用本品（MagCapture™ microRNA Isolation Kit，Human Ago2）从人K562细胞（1×107 cells）中提取的microRNA（图1）。结果显示，本系列试剂盒可提取得到高纯度的microRNA。通过qPCR对miR-92a进行定量，比较使用本品和硅胶珠型产品（microRNA Isolation Kit，Human Ago2）提取的microRNA量（图2）。本系列试剂盒的离心柱法具有几乎与硅胶珠法相同的microRNA提取能力，而且一步法的microRNA提取能力比硅胶珠法更好。
图1. 对从人K562细胞中提取的microRNA的进行银染检测
图2. 比较从人K562细胞中提取的microRNA量
提取人血浆中的游离Ago2蛋白结合microRNA
以qPCR对miR-92a进行定量，比较使用磁珠型MagCapture™ microRNA Isolation Kit，Human Ago2和硅胶珠型产品从200 μL健康人混合血浆中提取的microRNA量。结果发现，本试剂盒中的离心柱法具有几乎与硅胶珠型产品相同的microRNA提取能力，而且一步法的microRNA提取量比硅胶珠型高（图3）。
图3. 比较从人血浆中提取的microRNA量
提取microRNA的靶标mRNA
向miR-122低表达的肝癌细胞株HepG2细胞（5×105 cells）导入人工合成的miR-122或调控的荧光素酶siRNA（Luc siRNA），提取了分别用磁珠型MagCapture™ microRNA Isolation Kit，Human Ago2和硅胶珠型产品制备的Ago2 IP RNA，以及用ISOGEN® 制备的total RNA。运用qPCR法比较各种RNA中含有的miR-122量（图4）与其靶标mRNA（Aldo A mRNA是miR-122靶标之一，以GAPDH内参作校正）量（图5）。与硅胶珠型产品一样，本品提取的RNA中富集了miR-122和Aldo A mRNA，因此，可以利用本品提取microRNA的靶标mRNA。另一方面，用ISOGEN® 制备的total RNA中的Aldo A mRNA会随着miR-122的增加而分解并减少。
图4. miR-122提取量的比较
图5. 靶标mRNA提取量的比较
◆MagCapture™ microRNA Isolation Kit, Mouse Ago2 使用例子（小鼠）
从小鼠细胞株中提取microRNA
通过变性聚丙烯酰胺凝胶电泳（银染），检测用本试剂盒（MagCapture™ microRNA Isolation Kit，Mouse Ago2）从小鼠P388D1细胞（2×107 cells）中提取的microRNA（图1）。结果显示，本品能提取出高纯度的microRNA。另外，以qPCR法对miR-92a进行定量，比较使用硅胶珠型产品（microRNA Isolation Kit，Mouse Ago2）提取到的microRNA量（图2）。结果发现，本品的离心柱法具有与硅胶珠型产品几乎同样的microRNA提取能力，而一步法的microRNA提取能力比硅胶珠型产品更好。
图1. 对从小鼠P388D1细胞中提取的microRNA的进行银染检测
图2. 比较从小鼠P388D1细胞中提取的microRNA量
从大鼠血浆中提取游离Ago2蛋白结合microRNA
通过qPCR对miR-92a进行定量，比较使用本品以及硅胶珠型产品从200μL大鼠血浆中提取到的microRNA量。本品的离心柱法具有与硅胶珠型产品几乎同样的microRNA提取能力，而一步法的microRNA提取能力比硅胶珠型产品更好（图3）。
图3. 比较从大鼠血浆中提取的microRNA量
◆MagCapture™ microRNA Isolation Kit, Ago 1–4 使用例子（人）
提取Ago1–4结合microRNA
用各种Ago1、Ago2、Ago3、Ago4特异性抗体进行微阵列检测分析免疫沉淀后HeLa中的各个RNA组分，结果显示，Ago2中捕获了大量miR-22和miR-16，而Ago1、Ago3、Ago4中则捕获了大量的miR-1260b和miR-4286（表1）。
|
信号强度 |
信号比 |
||||||
|
名称 |
Ago1 IP |
Ago2 IP |
Ago3 IP |
Ago4 IP |
Ago2/Ago1 |
Ago2/Ago3 |
Ago2/Ago4 |
|
hsa-miR-22 |
3521.4 |
21696.5 |
3771.2 |
292.4 |
6.16 |
5.75 |
74.2 |
|
hsa-miR-16 |
6886.3 |
28527.2 |
5013.4 |
582.5 |
4.14 |
5.69 |
48.97 |
|
hsa-miR-1260b |
2060.3 |
540.9 |
1270.6 |
1977.9 |
0.26 |
0.43 |
0.27 |
|
hsa-miR-4286 |
678.8 |
202.4 |
2019.2 |
471.2 |
0.3 |
0.1 |
0.43 |
表1. 微阵列检测分析结果
上述分析结果验证了我们可以利用MagCapture™ microRNA Isolation Kit, Ago1-4，从Ago1、Ago3、Ago4中提取硅胶珠型产品难以提取的大量microRNA。
使用本品和硅胶珠型产品，提取HeLa细胞（1×107 cells）中的microRNA，以miR-92a作为内部标准，通过qPCR检测miR-22、miR-1、miR-1260b、miR-4286的提取量。结果发现，Ago1、Ago3、Ago4中miR-1260b、miR-4286的提取量比硅胶珠型产品更高（图1）。因此，本品不仅能提取Ago2中的microRNA，还能从Ago1、Ago3、Ago4中提取硅胶珠型产品难以提取的大量microRNA。
图1. 比较从HeLa细胞中提取的各种microRNA量
提取人和小鼠细胞株中的microRNA
以qPCR对miR-92a进行定量，比较用本品和硅胶珠型产品（microRNA Isolation Kit, Human Ago2或Mouse Ago2）从人K562细胞（1×107 cells）及小鼠P388D1细胞（2×107 cells）中提取的microRNA量。结果显示，本品可提取和硅胶珠型产品相同甚至更多的microRNA（图2，3）。
图2. 比较从人K562细胞中提取的microRNA量
图3. 比较从小鼠P388D1细胞中提取的microRNA量
提取人和大鼠血浆中的游离Ago结合microRNA
以qPCR对miR-92a进行定量，比较用本品和第一代产品（microRNA Isolation Kit, Human Ago2或Mouse Ago2）从200 μL人以及大鼠血浆中提取的microRNA量。结果显示，本品可提取和硅胶珠型产品相同甚至更多的microRNA（图4,5）。
图4. 比较从人血浆中提取的microRNA量
图5. 比较从大鼠血浆中提取的microRNA量
提取各种动物细胞株中的microRNA
以qPCR对miR-92a进行定量，检测用MagCapture™ microRNA Isolation Kit, Human Ago2、Mouse Ago2、Ago1-4从2×106 cells的K562细胞（人）、COS-7细胞（猴）、MDCK细胞（狗）、P388D1细胞（小鼠）、SCC-131细胞（大鼠）中提取的免疫沉淀组分中的microRNA量，和用ISOGEN® 从各种细胞中提取的total RNA组分中的microRNA量。通过比较各种免疫沉淀所得到的RNA组分中的miR-92a量和total RNA组分中的miR-92a量的相对值，表明本品适合提取上述全部细胞中的microRNA（图6）。
图6. 比较从各种动物细胞中提取的microRNA量
◆MagCapture™ microRNA Isolation Kit, Protein G使用例子
提取人和小鼠细胞株中的microRNA（与硅胶珠型产品的比较）
以qPCR法对miR-92a进行定量，比较用本品（MagCapture™ microRNA Isolation Kit, Protein G）和抗Ago1抗体（2A7）、抗人Ago2抗体（4G8）、抗人Ago3抗体（1C12）从人K562细胞（1×107 cells）提取的microRNA量，和用硅胶珠型产品（microRNA Isolation Kit, Human/Mouse Ago1、Human Ago2、Human Ago3）提取的micro RNA量（图1,2,3,）。另外，以qPCR对miR-92a进行定量，比较用本品和抗小鼠Ago2抗体（2D4）从小鼠P388D1细胞（2×107 cells）中提取的microRNA量，和用硅胶珠型产品（microRNA Isolation Kit, Mouse Ago2）提取的microRNA量（图4）。结果发现，本品与任意抗Ago抗体结合使用，能比硅胶珠型产品提取到更多的microRNA。
图1. 比较结合了抗Ago1抗体时的microRNA提取量
图2. 比较固定抗人Ago2抗体时的microRNA提取量
图3. 比较固定抗人Ago3抗体时的microRNA提取量
图4. 比较固定抗小鼠Ago2抗体时microRNA的提取量
提取人与小鼠细胞株中各种Ago蛋白结合microRNA
通过变性聚丙烯酰胺凝胶电泳和qPCR，对用本品和抗Ago1抗体（2A7）、抗人Ago2抗体（4G8）、抗人Ago3抗体（1C12）、抗Ago4抗体（2G7)从人K562细胞（1×107 cells）中提取的miR-92a表达量进行检测（图5）。另外，通过变性聚丙烯酰胺凝胶电泳和qPCR（miR-92a量），检测用本品和抗Ago1抗体（2A7）、抗小鼠Ago2抗体（2D4）、抗小鼠Ago3抗体（S09）、抗Ago4抗体（2G7)从小鼠P388D1细胞（2×107 cells）中提取的microRNA量（图6）。结果表明，本品与任意的抗Ago抗体组合使用，能提取与各种Ago结合的microRNA。
图5. 从人K562细胞中提取的microRNA量的比较与银染检测
图6. 从小鼠P388D1细胞中提取的microRNA量的比较与银染检测
◆产品列表
|
产品编号 |
产品名称 |
使用 抗体 克隆号 |
对应 物种 |
对应样本 |
提取RNA |
IP B/F |
RNA |
|
295-74001 |
MagCapture™ microRNA Isolation Kit, Human Ago2 分离试剂盒，人Ago2 |
4G8 |
人、猴、狗 |
细胞/ 组织 血浆 |
microRNA |
磁力 分离 |
离心 柱法 一步法 |
|
297-74201 |
MagCapture™ microRNA Isolation Kit，Mouse Ago2 分离试剂盒，小鼠Ago2 |
2D4 |
小鼠、大鼠、狗 |
||||
|
293-74801 |
MagCapture™ microRNA Isolation Kit，Ago 1-4 分离试剂盒，Ago1-4 |
1G3 |
人、猴、狗、小鼠、大鼠 |
microRNA |
|||
|
299-74401 |
MagCapture™ microRNA Isolation Kit，Protein G 分离试剂盒，蛋白G |
随意 选择 |
根据使用的抗体而定 |
细胞/ 组织 |
根据使用的抗体而定 |
一步法 |
※ 本页面产品仅供研究用，研究以外不可使用。
| 产品编号 | 产品名称 | 产品规格 | 产品等级 | 备注 |
| 295-74001 | MagCapture™ microRNA Isolation Kit, Human Ago2 MagCapture™microRNA分离试剂盒，人Ago2 |
10 tests | for Genetic Research | |
| 297-74201 | MagCapture™ microRNA Isolation Kit，Mouse Ago2 MagCapture™microRNA分离试剂盒，小鼠Ago2 |
10 tests | for Genetic Research | |
| 293-74801 | MagCapture™ microRNA Isolation Kit，Ago 1-4 MagCapture™ microRNA分离试剂盒，Ago1-4 |
10 tests | for Genetic Research | |
| 299-74401 | MagCapture™ microRNA Isolation Kit，Protein G MagCapture™microRNA分离试剂盒，蛋白G |
20 tests | for Genetic Research |
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磁珠型microRNA分离试剂盒
磁珠型microRNA分离试剂盒
FUJIFILM Wako提供能使从Ago 免疫沉淀到RNA 提取等一系列实验操作简化的“microRNA Isolation Kit”系列。使用本系列试剂盒能简便地从人和小鼠的细胞或组织中提取Ago蛋白结合的microRNA以及靶mRNA，还能从培养上清、血清、血浆中提取游离Ago蛋白结合的microRNA。所提取到的RNA可以应用于qPCR、微阵列检测、NGS等下游实验。本系列包括采用磁珠的MagCapture™ microRNA Isolation Kit，以及采用了硅胶珠法的microRNA Isolation Kit。
MagCapture™ microRNA Isolation Kit（磁珠法）系列产品包括含抗人Ago2抗体（4G8）、抗小鼠Ago2抗体（2D4）、抗Ago1-4抗体（1G3）固相化磁珠这三种试剂盒，以及第四种——能结合任意抗体的Protein G磁珠。上述试剂盒全部采用磁珠法，可进行简易的免疫沉淀操作并获得良好的重复性。免疫沉淀后提取的RNA可进一步使用离心柱纯化，获得高纯度的RNA；若使用含有抗Ago抗体固定化磁珠的3种试剂盒，也可使用一步法更加简便地提取RNA（备注：RNA与磁珠不分离）。
◆试剂盒组成（例：Human Ago2, 10次用）
1. Anti-Human Ago2 Magnetic Beads Solution：600 μL×1瓶
2. Cell Lysis Solution：20 mL×1瓶
3. Washing Solution for IP：40 mL×1瓶
4. Elution Solution I for IP：500 μL×1瓶
5. Elution Solution II for IP：500 μL×1瓶
6. Binding Solution for Spin Column：2 mL×1瓶
7. Binding Enhancer for Spin Column：100 μL×1瓶
8. Washing Solution I for Spin Column：3 mL×1瓶
9. Washing Solution II for Spin Column：4 mL×1瓶
10. Elution Solution for Spin Column：1 mL×1瓶
11. Spin Column/Collection Tube：10瓶
◆操作示意图
◆MagCapture™ microRNA Isolation Kit，Human Ago2 使用例子（人）
提取人细胞株中的microRNA
通过变性聚丙烯酰胺凝胶电泳（银染），检测使用本品（MagCapture™ microRNA Isolation Kit，Human Ago2）从人K562细胞（1×107 cells）中提取的microRNA（图1）。结果显示，本系列试剂盒可提取得到高纯度的microRNA。通过qPCR对miR-92a进行定量，比较使用本品和硅胶珠型产品（microRNA Isolation Kit，Human Ago2）提取的microRNA量（图2）。本系列试剂盒的离心柱法具有几乎与硅胶珠法相同的microRNA提取能力，而且一步法的microRNA提取能力比硅胶珠法更好。
图1. 对从人K562细胞中提取的microRNA的进行银染检测
图2. 比较从人K562细胞中提取的microRNA量
提取人血浆中的游离Ago2蛋白结合microRNA
以qPCR对miR-92a进行定量，比较使用磁珠型MagCapture™ microRNA Isolation Kit，Human Ago2和硅胶珠型产品从200 μL健康人混合血浆中提取的microRNA量。结果发现，本试剂盒中的离心柱法具有几乎与硅胶珠型产品相同的microRNA提取能力，而且一步法的microRNA提取量比硅胶珠型高（图3）。
图3. 比较从人血浆中提取的microRNA量
提取microRNA的靶标mRNA
向miR-122低表达的肝癌细胞株HepG2细胞（5×105 cells）导入人工合成的miR-122或调控的荧光素酶siRNA（Luc siRNA），提取了分别用磁珠型MagCapture™ microRNA Isolation Kit，Human Ago2和硅胶珠型产品制备的Ago2 IP RNA，以及用ISOGEN® 制备的total RNA。运用qPCR法比较各种RNA中含有的miR-122量（图4）与其靶标mRNA（Aldo A mRNA是miR-122靶标之一，以GAPDH内参作校正）量（图5）。与硅胶珠型产品一样，本品提取的RNA中富集了miR-122和Aldo A mRNA，因此，可以利用本品提取microRNA的靶标mRNA。另一方面，用ISOGEN® 制备的total RNA中的Aldo A mRNA会随着miR-122的增加而分解并减少。
图4. miR-122提取量的比较
图5. 靶标mRNA提取量的比较
◆MagCapture™ microRNA Isolation Kit, Mouse Ago2 使用例子（小鼠）
从小鼠细胞株中提取microRNA
通过变性聚丙烯酰胺凝胶电泳（银染），检测用本试剂盒（MagCapture™ microRNA Isolation Kit，Mouse Ago2）从小鼠P388D1细胞（2×107 cells）中提取的microRNA（图1）。结果显示，本品能提取出高纯度的microRNA。另外，以qPCR法对miR-92a进行定量，比较使用硅胶珠型产品（microRNA Isolation Kit，Mouse Ago2）提取到的microRNA量（图2）。结果发现，本品的离心柱法具有与硅胶珠型产品几乎同样的microRNA提取能力，而一步法的microRNA提取能力比硅胶珠型产品更好。
图1. 对从小鼠P388D1细胞中提取的microRNA的进行银染检测
图2. 比较从小鼠P388D1细胞中提取的microRNA量
从大鼠血浆中提取游离Ago2蛋白结合microRNA
通过qPCR对miR-92a进行定量，比较使用本品以及硅胶珠型产品从200μL大鼠血浆中提取到的microRNA量。本品的离心柱法具有与硅胶珠型产品几乎同样的microRNA提取能力，而一步法的microRNA提取能力比硅胶珠型产品更好（图3）。
图3. 比较从大鼠血浆中提取的microRNA量
◆MagCapture™ microRNA Isolation Kit, Ago 1–4 使用例子（人）
提取Ago1–4结合microRNA
用各种Ago1、Ago2、Ago3、Ago4特异性抗体进行微阵列检测分析免疫沉淀后HeLa中的各个RNA组分，结果显示，Ago2中捕获了大量miR-22和miR-16，而Ago1、Ago3、Ago4中则捕获了大量的miR-1260b和miR-4286（表1）。
|
信号强度 |
信号比 |
||||||
|
名称 |
Ago1 IP |
Ago2 IP |
Ago3 IP |
Ago4 IP |
Ago2/Ago1 |
Ago2/Ago3 |
Ago2/Ago4 |
|
hsa-miR-22 |
3521.4 |
21696.5 |
3771.2 |
292.4 |
6.16 |
5.75 |
74.2 |
|
hsa-miR-16 |
6886.3 |
28527.2 |
5013.4 |
582.5 |
4.14 |
5.69 |
48.97 |
|
hsa-miR-1260b |
2060.3 |
540.9 |
1270.6 |
1977.9 |
0.26 |
0.43 |
0.27 |
|
hsa-miR-4286 |
678.8 |
202.4 |
2019.2 |
471.2 |
0.3 |
0.1 |
0.43 |
表1. 微阵列检测分析结果
上述分析结果验证了我们可以利用MagCapture™ microRNA Isolation Kit, Ago1-4，从Ago1、Ago3、Ago4中提取硅胶珠型产品难以提取的大量microRNA。
使用本品和硅胶珠型产品，提取HeLa细胞（1×107 cells）中的microRNA，以miR-92a作为内部标准，通过qPCR检测miR-22、miR-1、miR-1260b、miR-4286的提取量。结果发现，Ago1、Ago3、Ago4中miR-1260b、miR-4286的提取量比硅胶珠型产品更高（图1）。因此，本品不仅能提取Ago2中的microRNA，还能从Ago1、Ago3、Ago4中提取硅胶珠型产品难以提取的大量microRNA。
图1. 比较从HeLa细胞中提取的各种microRNA量
提取人和小鼠细胞株中的microRNA
以qPCR对miR-92a进行定量，比较用本品和硅胶珠型产品（microRNA Isolation Kit, Human Ago2或Mouse Ago2）从人K562细胞（1×107 cells）及小鼠P388D1细胞（2×107 cells）中提取的microRNA量。结果显示，本品可提取和硅胶珠型产品相同甚至更多的microRNA（图2，3）。
图2. 比较从人K562细胞中提取的microRNA量
图3. 比较从小鼠P388D1细胞中提取的microRNA量
提取人和大鼠血浆中的游离Ago结合microRNA
以qPCR对miR-92a进行定量，比较用本品和第一代产品（microRNA Isolation Kit, Human Ago2或Mouse Ago2）从200 μL人以及大鼠血浆中提取的microRNA量。结果显示，本品可提取和硅胶珠型产品相同甚至更多的microRNA（图4,5）。
图4. 比较从人血浆中提取的microRNA量
图5. 比较从大鼠血浆中提取的microRNA量
提取各种动物细胞株中的microRNA
以qPCR对miR-92a进行定量，检测用MagCapture™ microRNA Isolation Kit, Human Ago2、Mouse Ago2、Ago1-4从2×106 cells的K562细胞（人）、COS-7细胞（猴）、MDCK细胞（狗）、P388D1细胞（小鼠）、SCC-131细胞（大鼠）中提取的免疫沉淀组分中的microRNA量，和用ISOGEN® 从各种细胞中提取的total RNA组分中的microRNA量。通过比较各种免疫沉淀所得到的RNA组分中的miR-92a量和total RNA组分中的miR-92a量的相对值，表明本品适合提取上述全部细胞中的microRNA（图6）。
图6. 比较从各种动物细胞中提取的microRNA量
◆MagCapture™ microRNA Isolation Kit, Protein G使用例子
提取人和小鼠细胞株中的microRNA（与硅胶珠型产品的比较）
以qPCR法对miR-92a进行定量，比较用本品（MagCapture™ microRNA Isolation Kit, Protein G）和抗Ago1抗体（2A7）、抗人Ago2抗体（4G8）、抗人Ago3抗体（1C12）从人K562细胞（1×107 cells）提取的microRNA量，和用硅胶珠型产品（microRNA Isolation Kit, Human/Mouse Ago1、Human Ago2、Human Ago3）提取的micro RNA量（图1,2,3,）。另外，以qPCR对miR-92a进行定量，比较用本品和抗小鼠Ago2抗体（2D4）从小鼠P388D1细胞（2×107 cells）中提取的microRNA量，和用硅胶珠型产品（microRNA Isolation Kit, Mouse Ago2）提取的microRNA量（图4）。结果发现，本品与任意抗Ago抗体结合使用，能比硅胶珠型产品提取到更多的microRNA。
图1. 比较结合了抗Ago1抗体时的microRNA提取量
图2. 比较固定抗人Ago2抗体时的microRNA提取量
图3. 比较固定抗人Ago3抗体时的microRNA提取量
图4. 比较固定抗小鼠Ago2抗体时microRNA的提取量
提取人与小鼠细胞株中各种Ago蛋白结合microRNA
通过变性聚丙烯酰胺凝胶电泳和qPCR，对用本品和抗Ago1抗体（2A7）、抗人Ago2抗体（4G8）、抗人Ago3抗体（1C12）、抗Ago4抗体（2G7)从人K562细胞（1×107 cells）中提取的miR-92a表达量进行检测（图5）。另外，通过变性聚丙烯酰胺凝胶电泳和qPCR（miR-92a量），检测用本品和抗Ago1抗体（2A7）、抗小鼠Ago2抗体（2D4）、抗小鼠Ago3抗体（S09）、抗Ago4抗体（2G7)从小鼠P388D1细胞（2×107 cells）中提取的microRNA量（图6）。结果表明，本品与任意的抗Ago抗体组合使用，能提取与各种Ago结合的microRNA。
图5. 从人K562细胞中提取的microRNA量的比较与银染检测
图6. 从小鼠P388D1细胞中提取的microRNA量的比较与银染检测
◆产品列表
|
产品编号 |
产品名称 |
使用 抗体 克隆号 |
对应 物种 |
对应样本 |
提取RNA |
IP B/F |
RNA |
|
295-74001 |
MagCapture™ microRNA Isolation Kit, Human Ago2 分离试剂盒，人Ago2 |
4G8 |
人、猴、狗 |
细胞/ 组织 血浆 |
microRNA |
磁力 分离 |
离心 柱法 一步法 |
|
297-74201 |
MagCapture™ microRNA Isolation Kit，Mouse Ago2 分离试剂盒，小鼠Ago2 |
2D4 |
小鼠、大鼠、狗 |
||||
|
293-74801 |
MagCapture™ microRNA Isolation Kit，Ago 1-4 分离试剂盒，Ago1-4 |
1G3 |
人、猴、狗、小鼠、大鼠 |
microRNA |
|||
|
299-74401 |
MagCapture™ microRNA Isolation Kit，Protein G 分离试剂盒，蛋白G |
随意 选择 |
根据使用的抗体而定 |
细胞/ 组织 |
根据使用的抗体而定 |
一步法 |
※ 本页面产品仅供研究用，研究以外不可使用。
| 产品编号 | 产品名称 | 产品规格 | 产品等级 | 备注 |
| 295-74001 | MagCapture™ microRNA Isolation Kit, Human Ago2 MagCapture™microRNA分离试剂盒，人Ago2 |
10 tests | for Genetic Research | |
| 297-74201 | MagCapture™ microRNA Isolation Kit，Mouse Ago2 MagCapture™microRNA分离试剂盒，小鼠Ago2 |
10 tests | for Genetic Research | |
| 293-74801 | MagCapture™ microRNA Isolation Kit，Ago 1-4 MagCapture™ microRNA分离试剂盒，Ago1-4 |
10 tests | for Genetic Research | |
| 299-74401 | MagCapture™ microRNA Isolation Kit，Protein G MagCapture™microRNA分离试剂盒，蛋白G |
20 tests | for Genetic Research |
| 免责声明 |
|
1. 本公司密切关注本网站发布的内容，但不保证发布内容的准确性、完整性、可靠性和最新性等。 2. 本公司不保证使用本网站期间不会出现故障或计算机病毒污染的风险。 3. 无论何种原因，使用本网站时给用户或第三方造成的任何不利或损害，本公司概不负责。此外，对于用户与其他用户或第三方之间因本网站发生的任何交易、通讯 3. 或纠纷，本公司概不负责。 4. 本网站可提供的所有产品和服务均不得用于人体或动物的临床诊断或治疗，仅可用于科研等非医疗目的。如任何用户将本网站提供的产品和服务用于临床诊断或治 4. 疗，以及其他特定的用途或行为，本公司概不保证其安全性和有效性，并且不负任何相关的法律责任。 |
磁珠型microRNA分离试剂盒
磁珠型microRNA分离试剂盒
FUJIFILM Wako提供能使从Ago 免疫沉淀到RNA 提取等一系列实验操作简化的“microRNA Isolation Kit”系列。使用本系列试剂盒能简便地从人和小鼠的细胞或组织中提取Ago蛋白结合的microRNA以及靶mRNA，还能从培养上清、血清、血浆中提取游离Ago蛋白结合的microRNA。所提取到的RNA可以应用于qPCR、微阵列检测、NGS等下游实验。本系列包括采用磁珠的MagCapture™ microRNA Isolation Kit，以及采用了硅胶珠法的microRNA Isolation Kit。
MagCapture™ microRNA Isolation Kit（磁珠法）系列产品包括含抗人Ago2抗体（4G8）、抗小鼠Ago2抗体（2D4）、抗Ago1-4抗体（1G3）固相化磁珠这三种试剂盒，以及第四种——能结合任意抗体的Protein G磁珠。上述试剂盒全部采用磁珠法，可进行简易的免疫沉淀操作并获得良好的重复性。免疫沉淀后提取的RNA可进一步使用离心柱纯化，获得高纯度的RNA；若使用含有抗Ago抗体固定化磁珠的3种试剂盒，也可使用一步法更加简便地提取RNA（备注：RNA与磁珠不分离）。
◆试剂盒组成（例：Human Ago2, 10次用）
1. Anti-Human Ago2 Magnetic Beads Solution：600 μL×1瓶
2. Cell Lysis Solution：20 mL×1瓶
3. Washing Solution for IP：40 mL×1瓶
4. Elution Solution I for IP：500 μL×1瓶
5. Elution Solution II for IP：500 μL×1瓶
6. Binding Solution for Spin Column：2 mL×1瓶
7. Binding Enhancer for Spin Column：100 μL×1瓶
8. Washing Solution I for Spin Column：3 mL×1瓶
9. Washing Solution II for Spin Column：4 mL×1瓶
10. Elution Solution for Spin Column：1 mL×1瓶
11. Spin Column/Collection Tube：10瓶
◆操作示意图
◆MagCapture™ microRNA Isolation Kit，Human Ago2 使用例子（人）
提取人细胞株中的microRNA
通过变性聚丙烯酰胺凝胶电泳（银染），检测使用本品（MagCapture™ microRNA Isolation Kit，Human Ago2）从人K562细胞（1×107 cells）中提取的microRNA（图1）。结果显示，本系列试剂盒可提取得到高纯度的microRNA。通过qPCR对miR-92a进行定量，比较使用本品和硅胶珠型产品（microRNA Isolation Kit，Human Ago2）提取的microRNA量（图2）。本系列试剂盒的离心柱法具有几乎与硅胶珠法相同的microRNA提取能力，而且一步法的microRNA提取能力比硅胶珠法更好。
图1. 对从人K562细胞中提取的microRNA的进行银染检测
图2. 比较从人K562细胞中提取的microRNA量
提取人血浆中的游离Ago2蛋白结合microRNA
以qPCR对miR-92a进行定量，比较使用磁珠型MagCapture™ microRNA Isolation Kit，Human Ago2和硅胶珠型产品从200 μL健康人混合血浆中提取的microRNA量。结果发现，本试剂盒中的离心柱法具有几乎与硅胶珠型产品相同的microRNA提取能力，而且一步法的microRNA提取量比硅胶珠型高（图3）。
图3. 比较从人血浆中提取的microRNA量
提取microRNA的靶标mRNA
向miR-122低表达的肝癌细胞株HepG2细胞（5×105 cells）导入人工合成的miR-122或调控的荧光素酶siRNA（Luc siRNA），提取了分别用磁珠型MagCapture™ microRNA Isolation Kit，Human Ago2和硅胶珠型产品制备的Ago2 IP RNA，以及用ISOGEN® 制备的total RNA。运用qPCR法比较各种RNA中含有的miR-122量（图4）与其靶标mRNA（Aldo A mRNA是miR-122靶标之一，以GAPDH内参作校正）量（图5）。与硅胶珠型产品一样，本品提取的RNA中富集了miR-122和Aldo A mRNA，因此，可以利用本品提取microRNA的靶标mRNA。另一方面，用ISOGEN® 制备的total RNA中的Aldo A mRNA会随着miR-122的增加而分解并减少。
图4. miR-122提取量的比较
图5. 靶标mRNA提取量的比较
◆MagCapture™ microRNA Isolation Kit, Mouse Ago2 使用例子（小鼠）
从小鼠细胞株中提取microRNA
通过变性聚丙烯酰胺凝胶电泳（银染），检测用本试剂盒（MagCapture™ microRNA Isolation Kit，Mouse Ago2）从小鼠P388D1细胞（2×107 cells）中提取的microRNA（图1）。结果显示，本品能提取出高纯度的microRNA。另外，以qPCR法对miR-92a进行定量，比较使用硅胶珠型产品（microRNA Isolation Kit，Mouse Ago2）提取到的microRNA量（图2）。结果发现，本品的离心柱法具有与硅胶珠型产品几乎同样的microRNA提取能力，而一步法的microRNA提取能力比硅胶珠型产品更好。
图1. 对从小鼠P388D1细胞中提取的microRNA的进行银染检测
图2. 比较从小鼠P388D1细胞中提取的microRNA量
从大鼠血浆中提取游离Ago2蛋白结合microRNA
通过qPCR对miR-92a进行定量，比较使用本品以及硅胶珠型产品从200μL大鼠血浆中提取到的microRNA量。本品的离心柱法具有与硅胶珠型产品几乎同样的microRNA提取能力，而一步法的microRNA提取能力比硅胶珠型产品更好（图3）。
图3. 比较从大鼠血浆中提取的microRNA量
◆MagCapture™ microRNA Isolation Kit, Ago 1–4 使用例子（人）
提取Ago1–4结合microRNA
用各种Ago1、Ago2、Ago3、Ago4特异性抗体进行微阵列检测分析免疫沉淀后HeLa中的各个RNA组分，结果显示，Ago2中捕获了大量miR-22和miR-16，而Ago1、Ago3、Ago4中则捕获了大量的miR-1260b和miR-4286（表1）。
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信号强度 |
信号比 |
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名称 |
Ago1 IP |
Ago2 IP |
Ago3 IP |
Ago4 IP |
Ago2/Ago1 |
Ago2/Ago3 |
Ago2/Ago4 |
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hsa-miR-22 |
3521.4 |
21696.5 |
3771.2 |
292.4 |
6.16 |
5.75 |
74.2 |
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hsa-miR-16 |
6886.3 |
28527.2 |
5013.4 |
582.5 |
4.14 |
5.69 |
48.97 |
|
hsa-miR-1260b |
2060.3 |
540.9 |
1270.6 |
1977.9 |
0.26 |
0.43 |
0.27 |
|
hsa-miR-4286 |
678.8 |
202.4 |
2019.2 |
471.2 |
0.3 |
0.1 |
0.43 |
表1. 微阵列检测分析结果
上述分析结果验证了我们可以利用MagCapture™ microRNA Isolation Kit, Ago1-4，从Ago1、Ago3、Ago4中提取硅胶珠型产品难以提取的大量microRNA。
使用本品和硅胶珠型产品，提取HeLa细胞（1×107 cells）中的microRNA，以miR-92a作为内部标准，通过qPCR检测miR-22、miR-1、miR-1260b、miR-4286的提取量。结果发现，Ago1、Ago3、Ago4中miR-1260b、miR-4286的提取量比硅胶珠型产品更高（图1）。因此，本品不仅能提取Ago2中的microRNA，还能从Ago1、Ago3、Ago4中提取硅胶珠型产品难以提取的大量microRNA。
图1. 比较从HeLa细胞中提取的各种microRNA量
提取人和小鼠细胞株中的microRNA
以qPCR对miR-92a进行定量，比较用本品和硅胶珠型产品（microRNA Isolation Kit, Human Ago2或Mouse Ago2）从人K562细胞（1×107 cells）及小鼠P388D1细胞（2×107 cells）中提取的microRNA量。结果显示，本品可提取和硅胶珠型产品相同甚至更多的microRNA（图2，3）。
图2. 比较从人K562细胞中提取的microRNA量
图3. 比较从小鼠P388D1细胞中提取的microRNA量
提取人和大鼠血浆中的游离Ago结合microRNA
以qPCR对miR-92a进行定量，比较用本品和第一代产品（microRNA Isolation Kit, Human Ago2或Mouse Ago2）从200 μL人以及大鼠血浆中提取的microRNA量。结果显示，本品可提取和硅胶珠型产品相同甚至更多的microRNA（图4,5）。
图4. 比较从人血浆中提取的microRNA量
图5. 比较从大鼠血浆中提取的microRNA量
提取各种动物细胞株中的microRNA
以qPCR对miR-92a进行定量，检测用MagCapture™ microRNA Isolation Kit, Human Ago2、Mouse Ago2、Ago1-4从2×106 cells的K562细胞（人）、COS-7细胞（猴）、MDCK细胞（狗）、P388D1细胞（小鼠）、SCC-131细胞（大鼠）中提取的免疫沉淀组分中的microRNA量，和用ISOGEN® 从各种细胞中提取的total RNA组分中的microRNA量。通过比较各种免疫沉淀所得到的RNA组分中的miR-92a量和total RNA组分中的miR-92a量的相对值，表明本品适合提取上述全部细胞中的microRNA（图6）。
图6. 比较从各种动物细胞中提取的microRNA量
◆MagCapture™ microRNA Isolation Kit, Protein G使用例子
提取人和小鼠细胞株中的microRNA（与硅胶珠型产品的比较）
以qPCR法对miR-92a进行定量，比较用本品（MagCapture™ microRNA Isolation Kit, Protein G）和抗Ago1抗体（2A7）、抗人Ago2抗体（4G8）、抗人Ago3抗体（1C12）从人K562细胞（1×107 cells）提取的microRNA量，和用硅胶珠型产品（microRNA Isolation Kit, Human/Mouse Ago1、Human Ago2、Human Ago3）提取的micro RNA量（图1,2,3,）。另外，以qPCR对miR-92a进行定量，比较用本品和抗小鼠Ago2抗体（2D4）从小鼠P388D1细胞（2×107 cells）中提取的microRNA量，和用硅胶珠型产品（microRNA Isolation Kit, Mouse Ago2）提取的microRNA量（图4）。结果发现，本品与任意抗Ago抗体结合使用，能比硅胶珠型产品提取到更多的microRNA。
图1. 比较结合了抗Ago1抗体时的microRNA提取量
图2. 比较固定抗人Ago2抗体时的microRNA提取量
图3. 比较固定抗人Ago3抗体时的microRNA提取量
图4. 比较固定抗小鼠Ago2抗体时microRNA的提取量
提取人与小鼠细胞株中各种Ago蛋白结合microRNA
通过变性聚丙烯酰胺凝胶电泳和qPCR，对用本品和抗Ago1抗体（2A7）、抗人Ago2抗体（4G8）、抗人Ago3抗体（1C12）、抗Ago4抗体（2G7)从人K562细胞（1×107 cells）中提取的miR-92a表达量进行检测（图5）。另外，通过变性聚丙烯酰胺凝胶电泳和qPCR（miR-92a量），检测用本品和抗Ago1抗体（2A7）、抗小鼠Ago2抗体（2D4）、抗小鼠Ago3抗体（S09）、抗Ago4抗体（2G7)从小鼠P388D1细胞（2×107 cells）中提取的microRNA量（图6）。结果表明，本品与任意的抗Ago抗体组合使用，能提取与各种Ago结合的microRNA。
图5. 从人K562细胞中提取的microRNA量的比较与银染检测
图6. 从小鼠P388D1细胞中提取的microRNA量的比较与银染检测
◆产品列表
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产品编号 |
产品名称 |
使用 抗体 克隆号 |
对应 物种 |
对应样本 |
提取RNA |
IP B/F |
RNA |
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295-74001 |
MagCapture™ microRNA Isolation Kit, Human Ago2 分离试剂盒，人Ago2 |
4G8 |
人、猴、狗 |
细胞/ 组织 血浆 |
microRNA |
磁力 分离 |
离心 柱法 一步法 |
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297-74201 |
MagCapture™ microRNA Isolation Kit，Mouse Ago2 分离试剂盒，小鼠Ago2 |
2D4 |
小鼠、大鼠、狗 |
||||
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293-74801 |
MagCapture™ microRNA Isolation Kit，Ago 1-4 分离试剂盒，Ago1-4 |
1G3 |
人、猴、狗、小鼠、大鼠 |
microRNA |
|||
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299-74401 |
MagCapture™ microRNA Isolation Kit，Protein G 分离试剂盒，蛋白G |
随意 选择 |
根据使用的抗体而定 |
细胞/ 组织 |
根据使用的抗体而定 |
一步法 |
※ 本页面产品仅供研究用，研究以外不可使用。
| 产品编号 | 产品名称 | 产品规格 | 产品等级 | 备注 |
| 295-74001 | MagCapture™ microRNA Isolation Kit, Human Ago2 MagCapture™microRNA分离试剂盒，人Ago2 |
10 tests | for Genetic Research | |
| 297-74201 | MagCapture™ microRNA Isolation Kit，Mouse Ago2 MagCapture™microRNA分离试剂盒，小鼠Ago2 |
10 tests | for Genetic Research | |
| 293-74801 | MagCapture™ microRNA Isolation Kit，Ago 1-4 MagCapture™ microRNA分离试剂盒，Ago1-4 |
10 tests | for Genetic Research | |
| 299-74401 | MagCapture™ microRNA Isolation Kit，Protein G MagCapture™microRNA分离试剂盒，蛋白G |
20 tests | for Genetic Research |
| 免责声明 |
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1. 本公司密切关注本网站发布的内容，但不保证发布内容的准确性、完整性、可靠性和最新性等。 2. 本公司不保证使用本网站期间不会出现故障或计算机病毒污染的风险。 3. 无论何种原因，使用本网站时给用户或第三方造成的任何不利或损害，本公司概不负责。此外，对于用户与其他用户或第三方之间因本网站发生的任何交易、通讯 3. 或纠纷，本公司概不负责。 4. 本网站可提供的所有产品和服务均不得用于人体或动物的临床诊断或治疗，仅可用于科研等非医疗目的。如任何用户将本网站提供的产品和服务用于临床诊断或治 4. 疗，以及其他特定的用途或行为，本公司概不保证其安全性和有效性，并且不负任何相关的法律责任。 |
磁珠型microRNA分离试剂盒
磁珠型microRNA分离试剂盒
FUJIFILM Wako提供能使从Ago 免疫沉淀到RNA 提取等一系列实验操作简化的“microRNA Isolation Kit”系列。使用本系列试剂盒能简便地从人和小鼠的细胞或组织中提取Ago蛋白结合的microRNA以及靶mRNA，还能从培养上清、血清、血浆中提取游离Ago蛋白结合的microRNA。所提取到的RNA可以应用于qPCR、微阵列检测、NGS等下游实验。本系列包括采用磁珠的MagCapture™ microRNA Isolation Kit，以及采用了硅胶珠法的microRNA Isolation Kit。
MagCapture™ microRNA Isolation Kit（磁珠法）系列产品包括含抗人Ago2抗体（4G8）、抗小鼠Ago2抗体（2D4）、抗Ago1-4抗体（1G3）固相化磁珠这三种试剂盒，以及第四种——能结合任意抗体的Protein G磁珠。上述试剂盒全部采用磁珠法，可进行简易的免疫沉淀操作并获得良好的重复性。免疫沉淀后提取的RNA可进一步使用离心柱纯化，获得高纯度的RNA；若使用含有抗Ago抗体固定化磁珠的3种试剂盒，也可使用一步法更加简便地提取RNA（备注：RNA与磁珠不分离）。
◆试剂盒组成（例：Human Ago2, 10次用）
1. Anti-Human Ago2 Magnetic Beads Solution：600 μL×1瓶
2. Cell Lysis Solution：20 mL×1瓶
3. Washing Solution for IP：40 mL×1瓶
4. Elution Solution I for IP：500 μL×1瓶
5. Elution Solution II for IP：500 μL×1瓶
6. Binding Solution for Spin Column：2 mL×1瓶
7. Binding Enhancer for Spin Column：100 μL×1瓶
8. Washing Solution I for Spin Column：3 mL×1瓶
9. Washing Solution II for Spin Column：4 mL×1瓶
10. Elution Solution for Spin Column：1 mL×1瓶
11. Spin Column/Collection Tube：10瓶
◆操作示意图
◆MagCapture™ microRNA Isolation Kit，Human Ago2 使用例子（人）
提取人细胞株中的microRNA
通过变性聚丙烯酰胺凝胶电泳（银染），检测使用本品（MagCapture™ microRNA Isolation Kit，Human Ago2）从人K562细胞（1×107 cells）中提取的microRNA（图1）。结果显示，本系列试剂盒可提取得到高纯度的microRNA。通过qPCR对miR-92a进行定量，比较使用本品和硅胶珠型产品（microRNA Isolation Kit，Human Ago2）提取的microRNA量（图2）。本系列试剂盒的离心柱法具有几乎与硅胶珠法相同的microRNA提取能力，而且一步法的microRNA提取能力比硅胶珠法更好。
图1. 对从人K562细胞中提取的microRNA的进行银染检测
图2. 比较从人K562细胞中提取的microRNA量
提取人血浆中的游离Ago2蛋白结合microRNA
以qPCR对miR-92a进行定量，比较使用磁珠型MagCapture™ microRNA Isolation Kit，Human Ago2和硅胶珠型产品从200 μL健康人混合血浆中提取的microRNA量。结果发现，本试剂盒中的离心柱法具有几乎与硅胶珠型产品相同的microRNA提取能力，而且一步法的microRNA提取量比硅胶珠型高（图3）。
图3. 比较从人血浆中提取的microRNA量
提取microRNA的靶标mRNA
向miR-122低表达的肝癌细胞株HepG2细胞（5×105 cells）导入人工合成的miR-122或调控的荧光素酶siRNA（Luc siRNA），提取了分别用磁珠型MagCapture™ microRNA Isolation Kit，Human Ago2和硅胶珠型产品制备的Ago2 IP RNA，以及用ISOGEN® 制备的total RNA。运用qPCR法比较各种RNA中含有的miR-122量（图4）与其靶标mRNA（Aldo A mRNA是miR-122靶标之一，以GAPDH内参作校正）量（图5）。与硅胶珠型产品一样，本品提取的RNA中富集了miR-122和Aldo A mRNA，因此，可以利用本品提取microRNA的靶标mRNA。另一方面，用ISOGEN® 制备的total RNA中的Aldo A mRNA会随着miR-122的增加而分解并减少。
图4. miR-122提取量的比较
图5. 靶标mRNA提取量的比较
◆MagCapture™ microRNA Isolation Kit, Mouse Ago2 使用例子（小鼠）
从小鼠细胞株中提取microRNA
通过变性聚丙烯酰胺凝胶电泳（银染），检测用本试剂盒（MagCapture™ microRNA Isolation Kit，Mouse Ago2）从小鼠P388D1细胞（2×107 cells）中提取的microRNA（图1）。结果显示，本品能提取出高纯度的microRNA。另外，以qPCR法对miR-92a进行定量，比较使用硅胶珠型产品（microRNA Isolation Kit，Mouse Ago2）提取到的microRNA量（图2）。结果发现，本品的离心柱法具有与硅胶珠型产品几乎同样的microRNA提取能力，而一步法的microRNA提取能力比硅胶珠型产品更好。
图1. 对从小鼠P388D1细胞中提取的microRNA的进行银染检测
图2. 比较从小鼠P388D1细胞中提取的microRNA量
从大鼠血浆中提取游离Ago2蛋白结合microRNA
通过qPCR对miR-92a进行定量，比较使用本品以及硅胶珠型产品从200μL大鼠血浆中提取到的microRNA量。本品的离心柱法具有与硅胶珠型产品几乎同样的microRNA提取能力，而一步法的microRNA提取能力比硅胶珠型产品更好（图3）。
图3. 比较从大鼠血浆中提取的microRNA量
◆MagCapture™ microRNA Isolation Kit, Ago 1–4 使用例子（人）
提取Ago1–4结合microRNA
用各种Ago1、Ago2、Ago3、Ago4特异性抗体进行微阵列检测分析免疫沉淀后HeLa中的各个RNA组分，结果显示，Ago2中捕获了大量miR-22和miR-16，而Ago1、Ago3、Ago4中则捕获了大量的miR-1260b和miR-4286（表1）。
|
信号强度 |
信号比 |
||||||
|
名称 |
Ago1 IP |
Ago2 IP |
Ago3 IP |
Ago4 IP |
Ago2/Ago1 |
Ago2/Ago3 |
Ago2/Ago4 |
|
hsa-miR-22 |
3521.4 |
21696.5 |
3771.2 |
292.4 |
6.16 |
5.75 |
74.2 |
|
hsa-miR-16 |
6886.3 |
28527.2 |
5013.4 |
582.5 |
4.14 |
5.69 |
48.97 |
|
hsa-miR-1260b |
2060.3 |
540.9 |
1270.6 |
1977.9 |
0.26 |
0.43 |
0.27 |
|
hsa-miR-4286 |
678.8 |
202.4 |
2019.2 |
471.2 |
0.3 |
0.1 |
0.43 |
表1. 微阵列检测分析结果
上述分析结果验证了我们可以利用MagCapture™ microRNA Isolation Kit, Ago1-4，从Ago1、Ago3、Ago4中提取硅胶珠型产品难以提取的大量microRNA。
使用本品和硅胶珠型产品，提取HeLa细胞（1×107 cells）中的microRNA，以miR-92a作为内部标准，通过qPCR检测miR-22、miR-1、miR-1260b、miR-4286的提取量。结果发现，Ago1、Ago3、Ago4中miR-1260b、miR-4286的提取量比硅胶珠型产品更高（图1）。因此，本品不仅能提取Ago2中的microRNA，还能从Ago1、Ago3、Ago4中提取硅胶珠型产品难以提取的大量microRNA。
图1. 比较从HeLa细胞中提取的各种microRNA量
提取人和小鼠细胞株中的microRNA
以qPCR对miR-92a进行定量，比较用本品和硅胶珠型产品（microRNA Isolation Kit, Human Ago2或Mouse Ago2）从人K562细胞（1×107 cells）及小鼠P388D1细胞（2×107 cells）中提取的microRNA量。结果显示，本品可提取和硅胶珠型产品相同甚至更多的microRNA（图2，3）。
图2. 比较从人K562细胞中提取的microRNA量
图3. 比较从小鼠P388D1细胞中提取的microRNA量
提取人和大鼠血浆中的游离Ago结合microRNA
以qPCR对miR-92a进行定量，比较用本品和第一代产品（microRNA Isolation Kit, Human Ago2或Mouse Ago2）从200 μL人以及大鼠血浆中提取的microRNA量。结果显示，本品可提取和硅胶珠型产品相同甚至更多的microRNA（图4,5）。
图4. 比较从人血浆中提取的microRNA量
图5. 比较从大鼠血浆中提取的microRNA量
提取各种动物细胞株中的microRNA
以qPCR对miR-92a进行定量，检测用MagCapture™ microRNA Isolation Kit, Human Ago2、Mouse Ago2、Ago1-4从2×106 cells的K562细胞（人）、COS-7细胞（猴）、MDCK细胞（狗）、P388D1细胞（小鼠）、SCC-131细胞（大鼠）中提取的免疫沉淀组分中的microRNA量，和用ISOGEN® 从各种细胞中提取的total RNA组分中的microRNA量。通过比较各种免疫沉淀所得到的RNA组分中的miR-92a量和total RNA组分中的miR-92a量的相对值，表明本品适合提取上述全部细胞中的microRNA（图6）。
图6. 比较从各种动物细胞中提取的microRNA量
◆MagCapture™ microRNA Isolation Kit, Protein G使用例子
提取人和小鼠细胞株中的microRNA（与硅胶珠型产品的比较）
以qPCR法对miR-92a进行定量，比较用本品（MagCapture™ microRNA Isolation Kit, Protein G）和抗Ago1抗体（2A7）、抗人Ago2抗体（4G8）、抗人Ago3抗体（1C12）从人K562细胞（1×107 cells）提取的microRNA量，和用硅胶珠型产品（microRNA Isolation Kit, Human/Mouse Ago1、Human Ago2、Human Ago3）提取的micro RNA量（图1,2,3,）。另外，以qPCR对miR-92a进行定量，比较用本品和抗小鼠Ago2抗体（2D4）从小鼠P388D1细胞（2×107 cells）中提取的microRNA量，和用硅胶珠型产品（microRNA Isolation Kit, Mouse Ago2）提取的microRNA量（图4）。结果发现，本品与任意抗Ago抗体结合使用，能比硅胶珠型产品提取到更多的microRNA。
图1. 比较结合了抗Ago1抗体时的microRNA提取量
图2. 比较固定抗人Ago2抗体时的microRNA提取量
图3. 比较固定抗人Ago3抗体时的microRNA提取量
图4. 比较固定抗小鼠Ago2抗体时microRNA的提取量
提取人与小鼠细胞株中各种Ago蛋白结合microRNA
通过变性聚丙烯酰胺凝胶电泳和qPCR，对用本品和抗Ago1抗体（2A7）、抗人Ago2抗体（4G8）、抗人Ago3抗体（1C12）、抗Ago4抗体（2G7)从人K562细胞（1×107 cells）中提取的miR-92a表达量进行检测（图5）。另外，通过变性聚丙烯酰胺凝胶电泳和qPCR（miR-92a量），检测用本品和抗Ago1抗体（2A7）、抗小鼠Ago2抗体（2D4）、抗小鼠Ago3抗体（S09）、抗Ago4抗体（2G7)从小鼠P388D1细胞（2×107 cells）中提取的microRNA量（图6）。结果表明，本品与任意的抗Ago抗体组合使用，能提取与各种Ago结合的microRNA。
图5. 从人K562细胞中提取的microRNA量的比较与银染检测
图6. 从小鼠P388D1细胞中提取的microRNA量的比较与银染检测
◆产品列表
|
产品编号 |
产品名称 |
使用 抗体 克隆号 |
对应 物种 |
对应样本 |
提取RNA |
IP B/F |
RNA |
|
295-74001 |
MagCapture™ microRNA Isolation Kit, Human Ago2 分离试剂盒，人Ago2 |
4G8 |
人、猴、狗 |
细胞/ 组织 血浆 |
microRNA |
磁力 分离 |
离心 柱法 一步法 |
|
297-74201 |
MagCapture™ microRNA Isolation Kit，Mouse Ago2 分离试剂盒，小鼠Ago2 |
2D4 |
小鼠、大鼠、狗 |
||||
|
293-74801 |
MagCapture™ microRNA Isolation Kit，Ago 1-4 分离试剂盒，Ago1-4 |
1G3 |
人、猴、狗、小鼠、大鼠 |
microRNA |
|||
|
299-74401 |
MagCapture™ microRNA Isolation Kit，Protein G 分离试剂盒，蛋白G |
随意 选择 |
根据使用的抗体而定 |
细胞/ 组织 |
根据使用的抗体而定 |
一步法 |
※ 本页面产品仅供研究用，研究以外不可使用。
| 产品编号 | 产品名称 | 产品规格 | 产品等级 | 备注 |
| 295-74001 | MagCapture™ microRNA Isolation Kit, Human Ago2 MagCapture™microRNA分离试剂盒，人Ago2 |
10 tests | for Genetic Research | |
| 297-74201 | MagCapture™ microRNA Isolation Kit，Mouse Ago2 MagCapture™microRNA分离试剂盒，小鼠Ago2 |
10 tests | for Genetic Research | |
| 293-74801 | MagCapture™ microRNA Isolation Kit，Ago 1-4 MagCapture™ microRNA分离试剂盒，Ago1-4 |
10 tests | for Genetic Research | |
| 299-74401 | MagCapture™ microRNA Isolation Kit，Protein G MagCapture™microRNA分离试剂盒，蛋白G |
20 tests | for Genetic Research |
| 免责声明 |
|
1. 本公司密切关注本网站发布的内容，但不保证发布内容的准确性、完整性、可靠性和最新性等。 2. 本公司不保证使用本网站期间不会出现故障或计算机病毒污染的风险。 3. 无论何种原因，使用本网站时给用户或第三方造成的任何不利或损害，本公司概不负责。此外，对于用户与其他用户或第三方之间因本网站发生的任何交易、通讯 3. 或纠纷，本公司概不负责。 4. 本网站可提供的所有产品和服务均不得用于人体或动物的临床诊断或治疗，仅可用于科研等非医疗目的。如任何用户将本网站提供的产品和服务用于临床诊断或治 4. 疗，以及其他特定的用途或行为，本公司概不保证其安全性和有效性，并且不负任何相关的法律责任。 |
磁珠型microRNA分离试剂盒
磁珠型microRNA分离试剂盒
FUJIFILM Wako提供能使从Ago 免疫沉淀到RNA 提取等一系列实验操作简化的“microRNA Isolation Kit”系列。使用本系列试剂盒能简便地从人和小鼠的细胞或组织中提取Ago蛋白结合的microRNA以及靶mRNA，还能从培养上清、血清、血浆中提取游离Ago蛋白结合的microRNA。所提取到的RNA可以应用于qPCR、微阵列检测、NGS等下游实验。本系列包括采用磁珠的MagCapture™ microRNA Isolation Kit，以及采用了硅胶珠法的microRNA Isolation Kit。
MagCapture™ microRNA Isolation Kit（磁珠法）系列产品包括含抗人Ago2抗体（4G8）、抗小鼠Ago2抗体（2D4）、抗Ago1-4抗体（1G3）固相化磁珠这三种试剂盒，以及第四种——能结合任意抗体的Protein G磁珠。上述试剂盒全部采用磁珠法，可进行简易的免疫沉淀操作并获得良好的重复性。免疫沉淀后提取的RNA可进一步使用离心柱纯化，获得高纯度的RNA；若使用含有抗Ago抗体固定化磁珠的3种试剂盒，也可使用一步法更加简便地提取RNA（备注：RNA与磁珠不分离）。
◆试剂盒组成（例：Human Ago2, 10次用）
1. Anti-Human Ago2 Magnetic Beads Solution：600 μL×1瓶
2. Cell Lysis Solution：20 mL×1瓶
3. Washing Solution for IP：40 mL×1瓶
4. Elution Solution I for IP：500 μL×1瓶
5. Elution Solution II for IP：500 μL×1瓶
6. Binding Solution for Spin Column：2 mL×1瓶
7. Binding Enhancer for Spin Column：100 μL×1瓶
8. Washing Solution I for Spin Column：3 mL×1瓶
9. Washing Solution II for Spin Column：4 mL×1瓶
10. Elution Solution for Spin Column：1 mL×1瓶
11. Spin Column/Collection Tube：10瓶
◆操作示意图
◆MagCapture™ microRNA Isolation Kit，Human Ago2 使用例子（人）
提取人细胞株中的microRNA
通过变性聚丙烯酰胺凝胶电泳（银染），检测使用本品（MagCapture™ microRNA Isolation Kit，Human Ago2）从人K562细胞（1×107 cells）中提取的microRNA（图1）。结果显示，本系列试剂盒可提取得到高纯度的microRNA。通过qPCR对miR-92a进行定量，比较使用本品和硅胶珠型产品（microRNA Isolation Kit，Human Ago2）提取的microRNA量（图2）。本系列试剂盒的离心柱法具有几乎与硅胶珠法相同的microRNA提取能力，而且一步法的microRNA提取能力比硅胶珠法更好。
图1. 对从人K562细胞中提取的microRNA的进行银染检测
图2. 比较从人K562细胞中提取的microRNA量
提取人血浆中的游离Ago2蛋白结合microRNA
以qPCR对miR-92a进行定量，比较使用磁珠型MagCapture™ microRNA Isolation Kit，Human Ago2和硅胶珠型产品从200 μL健康人混合血浆中提取的microRNA量。结果发现，本试剂盒中的离心柱法具有几乎与硅胶珠型产品相同的microRNA提取能力，而且一步法的microRNA提取量比硅胶珠型高（图3）。
图3. 比较从人血浆中提取的microRNA量
提取microRNA的靶标mRNA
向miR-122低表达的肝癌细胞株HepG2细胞（5×105 cells）导入人工合成的miR-122或调控的荧光素酶siRNA（Luc siRNA），提取了分别用磁珠型MagCapture™ microRNA Isolation Kit，Human Ago2和硅胶珠型产品制备的Ago2 IP RNA，以及用ISOGEN® 制备的total RNA。运用qPCR法比较各种RNA中含有的miR-122量（图4）与其靶标mRNA（Aldo A mRNA是miR-122靶标之一，以GAPDH内参作校正）量（图5）。与硅胶珠型产品一样，本品提取的RNA中富集了miR-122和Aldo A mRNA，因此，可以利用本品提取microRNA的靶标mRNA。另一方面，用ISOGEN® 制备的total RNA中的Aldo A mRNA会随着miR-122的增加而分解并减少。
图4. miR-122提取量的比较
图5. 靶标mRNA提取量的比较
◆MagCapture™ microRNA Isolation Kit, Mouse Ago2 使用例子（小鼠）
从小鼠细胞株中提取microRNA
通过变性聚丙烯酰胺凝胶电泳（银染），检测用本试剂盒（MagCapture™ microRNA Isolation Kit，Mouse Ago2）从小鼠P388D1细胞（2×107 cells）中提取的microRNA（图1）。结果显示，本品能提取出高纯度的microRNA。另外，以qPCR法对miR-92a进行定量，比较使用硅胶珠型产品（microRNA Isolation Kit，Mouse Ago2）提取到的microRNA量（图2）。结果发现，本品的离心柱法具有与硅胶珠型产品几乎同样的microRNA提取能力，而一步法的microRNA提取能力比硅胶珠型产品更好。
图1. 对从小鼠P388D1细胞中提取的microRNA的进行银染检测
图2. 比较从小鼠P388D1细胞中提取的microRNA量
从大鼠血浆中提取游离Ago2蛋白结合microRNA
通过qPCR对miR-92a进行定量，比较使用本品以及硅胶珠型产品从200μL大鼠血浆中提取到的microRNA量。本品的离心柱法具有与硅胶珠型产品几乎同样的microRNA提取能力，而一步法的microRNA提取能力比硅胶珠型产品更好（图3）。
图3. 比较从大鼠血浆中提取的microRNA量
◆MagCapture™ microRNA Isolation Kit, Ago 1–4 使用例子（人）
提取Ago1–4结合microRNA
用各种Ago1、Ago2、Ago3、Ago4特异性抗体进行微阵列检测分析免疫沉淀后HeLa中的各个RNA组分，结果显示，Ago2中捕获了大量miR-22和miR-16，而Ago1、Ago3、Ago4中则捕获了大量的miR-1260b和miR-4286（表1）。
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信号强度 |
信号比 |
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名称 |
Ago1 IP |
Ago2 IP |
Ago3 IP |
Ago4 IP |
Ago2/Ago1 |
Ago2/Ago3 |
Ago2/Ago4 |
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hsa-miR-22 |
3521.4 |
21696.5 |
3771.2 |
292.4 |
6.16 |
5.75 |
74.2 |
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hsa-miR-16 |
6886.3 |
28527.2 |
5013.4 |
582.5 |
4.14 |
5.69 |
48.97 |
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hsa-miR-1260b |
2060.3 |
540.9 |
1270.6 |
1977.9 |
0.26 |
0.43 |
0.27 |
|
hsa-miR-4286 |
678.8 |
202.4 |
2019.2 |
471.2 |
0.3 |
0.1 |
0.43 |
表1. 微阵列检测分析结果
上述分析结果验证了我们可以利用MagCapture™ microRNA Isolation Kit, Ago1-4，从Ago1、Ago3、Ago4中提取硅胶珠型产品难以提取的大量microRNA。
使用本品和硅胶珠型产品，提取HeLa细胞（1×107 cells）中的microRNA，以miR-92a作为内部标准，通过qPCR检测miR-22、miR-1、miR-1260b、miR-4286的提取量。结果发现，Ago1、Ago3、Ago4中miR-1260b、miR-4286的提取量比硅胶珠型产品更高（图1）。因此，本品不仅能提取Ago2中的microRNA，还能从Ago1、Ago3、Ago4中提取硅胶珠型产品难以提取的大量microRNA。
图1. 比较从HeLa细胞中提取的各种microRNA量
提取人和小鼠细胞株中的microRNA
以qPCR对miR-92a进行定量，比较用本品和硅胶珠型产品（microRNA Isolation Kit, Human Ago2或Mouse Ago2）从人K562细胞（1×107 cells）及小鼠P388D1细胞（2×107 cells）中提取的microRNA量。结果显示，本品可提取和硅胶珠型产品相同甚至更多的microRNA（图2，3）。
图2. 比较从人K562细胞中提取的microRNA量
图3. 比较从小鼠P388D1细胞中提取的microRNA量
提取人和大鼠血浆中的游离Ago结合microRNA
以qPCR对miR-92a进行定量，比较用本品和第一代产品（microRNA Isolation Kit, Human Ago2或Mouse Ago2）从200 μL人以及大鼠血浆中提取的microRNA量。结果显示，本品可提取和硅胶珠型产品相同甚至更多的microRNA（图4,5）。
图4. 比较从人血浆中提取的microRNA量
图5. 比较从大鼠血浆中提取的microRNA量
提取各种动物细胞株中的microRNA
以qPCR对miR-92a进行定量，检测用MagCapture™ microRNA Isolation Kit, Human Ago2、Mouse Ago2、Ago1-4从2×106 cells的K562细胞（人）、COS-7细胞（猴）、MDCK细胞（狗）、P388D1细胞（小鼠）、SCC-131细胞（大鼠）中提取的免疫沉淀组分中的microRNA量，和用ISOGEN® 从各种细胞中提取的total RNA组分中的microRNA量。通过比较各种免疫沉淀所得到的RNA组分中的miR-92a量和total RNA组分中的miR-92a量的相对值，表明本品适合提取上述全部细胞中的microRNA（图6）。
图6. 比较从各种动物细胞中提取的microRNA量
◆MagCapture™ microRNA Isolation Kit, Protein G使用例子
提取人和小鼠细胞株中的microRNA（与硅胶珠型产品的比较）
以qPCR法对miR-92a进行定量，比较用本品（MagCapture™ microRNA Isolation Kit, Protein G）和抗Ago1抗体（2A7）、抗人Ago2抗体（4G8）、抗人Ago3抗体（1C12）从人K562细胞（1×107 cells）提取的microRNA量，和用硅胶珠型产品（microRNA Isolation Kit, Human/Mouse Ago1、Human Ago2、Human Ago3）提取的micro RNA量（图1,2,3,）。另外，以qPCR对miR-92a进行定量，比较用本品和抗小鼠Ago2抗体（2D4）从小鼠P388D1细胞（2×107 cells）中提取的microRNA量，和用硅胶珠型产品（microRNA Isolation Kit, Mouse Ago2）提取的microRNA量（图4）。结果发现，本品与任意抗Ago抗体结合使用，能比硅胶珠型产品提取到更多的microRNA。
图1. 比较结合了抗Ago1抗体时的microRNA提取量
图2. 比较固定抗人Ago2抗体时的microRNA提取量
图3. 比较固定抗人Ago3抗体时的microRNA提取量
图4. 比较固定抗小鼠Ago2抗体时microRNA的提取量
提取人与小鼠细胞株中各种Ago蛋白结合microRNA
通过变性聚丙烯酰胺凝胶电泳和qPCR，对用本品和抗Ago1抗体（2A7）、抗人Ago2抗体（4G8）、抗人Ago3抗体（1C12）、抗Ago4抗体（2G7)从人K562细胞（1×107 cells）中提取的miR-92a表达量进行检测（图5）。另外，通过变性聚丙烯酰胺凝胶电泳和qPCR（miR-92a量），检测用本品和抗Ago1抗体（2A7）、抗小鼠Ago2抗体（2D4）、抗小鼠Ago3抗体（S09）、抗Ago4抗体（2G7)从小鼠P388D1细胞（2×107 cells）中提取的microRNA量（图6）。结果表明，本品与任意的抗Ago抗体组合使用，能提取与各种Ago结合的microRNA。
图5. 从人K562细胞中提取的microRNA量的比较与银染检测
图6. 从小鼠P388D1细胞中提取的microRNA量的比较与银染检测
◆产品列表
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产品编号 |
产品名称 |
使用 抗体 克隆号 |
对应 物种 |
对应样本 |
提取RNA |
IP B/F |
RNA |
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295-74001 |
MagCapture™ microRNA Isolation Kit, Human Ago2 分离试剂盒，人Ago2 |
4G8 |
人、猴、狗 |
细胞/ 组织 血浆 |
microRNA |
磁力 分离 |
离心 柱法 一步法 |
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297-74201 |
MagCapture™ microRNA Isolation Kit，Mouse Ago2 分离试剂盒，小鼠Ago2 |
2D4 |
小鼠、大鼠、狗 |
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293-74801 |
MagCapture™ microRNA Isolation Kit，Ago 1-4 分离试剂盒，Ago1-4 |
1G3 |
人、猴、狗、小鼠、大鼠 |
microRNA |
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299-74401 |
MagCapture™ microRNA Isolation Kit，Protein G 分离试剂盒，蛋白G |
随意 选择 |
根据使用的抗体而定 |
细胞/ 组织 |
根据使用的抗体而定 |
一步法 |
※ 本页面产品仅供研究用，研究以外不可使用。
| 产品编号 | 产品名称 | 产品规格 | 产品等级 | 备注 |
| 295-74001 | MagCapture™ microRNA Isolation Kit, Human Ago2 MagCapture™microRNA分离试剂盒，人Ago2 |
10 tests | for Genetic Research | |
| 297-74201 | MagCapture™ microRNA Isolation Kit，Mouse Ago2 MagCapture™microRNA分离试剂盒，小鼠Ago2 |
10 tests | for Genetic Research | |
| 293-74801 | MagCapture™ microRNA Isolation Kit，Ago 1-4 MagCapture™ microRNA分离试剂盒，Ago1-4 |
10 tests | for Genetic Research | |
| 299-74401 | MagCapture™ microRNA Isolation Kit，Protein G MagCapture™microRNA分离试剂盒，蛋白G |
20 tests | for Genetic Research |
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1. 本公司密切关注本网站发布的内容，但不保证发布内容的准确性、完整性、可靠性和最新性等。 2. 本公司不保证使用本网站期间不会出现故障或计算机病毒污染的风险。 3. 无论何种原因，使用本网站时给用户或第三方造成的任何不利或损害，本公司概不负责。此外，对于用户与其他用户或第三方之间因本网站发生的任何交易、通讯 3. 或纠纷，本公司概不负责。 4. 本网站可提供的所有产品和服务均不得用于人体或动物的临床诊断或治疗，仅可用于科研等非医疗目的。如任何用户将本网站提供的产品和服务用于临床诊断或治 4. 疗，以及其他特定的用途或行为，本公司概不保证其安全性和有效性，并且不负任何相关的法律责任。 |
磁珠型microRNA分离试剂盒
磁珠型microRNA分离试剂盒
FUJIFILM Wako提供能使从Ago 免疫沉淀到RNA 提取等一系列实验操作简化的“microRNA Isolation Kit”系列。使用本系列试剂盒能简便地从人和小鼠的细胞或组织中提取Ago蛋白结合的microRNA以及靶mRNA，还能从培养上清、血清、血浆中提取游离Ago蛋白结合的microRNA。所提取到的RNA可以应用于qPCR、微阵列检测、NGS等下游实验。本系列包括采用磁珠的MagCapture™ microRNA Isolation Kit，以及采用了硅胶珠法的microRNA Isolation Kit。
MagCapture™ microRNA Isolation Kit（磁珠法）系列产品包括含抗人Ago2抗体（4G8）、抗小鼠Ago2抗体（2D4）、抗Ago1-4抗体（1G3）固相化磁珠这三种试剂盒，以及第四种——能结合任意抗体的Protein G磁珠。上述试剂盒全部采用磁珠法，可进行简易的免疫沉淀操作并获得良好的重复性。免疫沉淀后提取的RNA可进一步使用离心柱纯化，获得高纯度的RNA；若使用含有抗Ago抗体固定化磁珠的3种试剂盒，也可使用一步法更加简便地提取RNA（备注：RNA与磁珠不分离）。
◆试剂盒组成（例：Human Ago2, 10次用）
1. Anti-Human Ago2 Magnetic Beads Solution：600 μL×1瓶
2. Cell Lysis Solution：20 mL×1瓶
3. Washing Solution for IP：40 mL×1瓶
4. Elution Solution I for IP：500 μL×1瓶
5. Elution Solution II for IP：500 μL×1瓶
6. Binding Solution for Spin Column：2 mL×1瓶
7. Binding Enhancer for Spin Column：100 μL×1瓶
8. Washing Solution I for Spin Column：3 mL×1瓶
9. Washing Solution II for Spin Column：4 mL×1瓶
10. Elution Solution for Spin Column：1 mL×1瓶
11. Spin Column/Collection Tube：10瓶
◆操作示意图
◆MagCapture™ microRNA Isolation Kit，Human Ago2 使用例子（人）
提取人细胞株中的microRNA
通过变性聚丙烯酰胺凝胶电泳（银染），检测使用本品（MagCapture™ microRNA Isolation Kit，Human Ago2）从人K562细胞（1×107 cells）中提取的microRNA（图1）。结果显示，本系列试剂盒可提取得到高纯度的microRNA。通过qPCR对miR-92a进行定量，比较使用本品和硅胶珠型产品（microRNA Isolation Kit，Human Ago2）提取的microRNA量（图2）。本系列试剂盒的离心柱法具有几乎与硅胶珠法相同的microRNA提取能力，而且一步法的microRNA提取能力比硅胶珠法更好。
图1. 对从人K562细胞中提取的microRNA的进行银染检测
图2. 比较从人K562细胞中提取的microRNA量
提取人血浆中的游离Ago2蛋白结合microRNA
以qPCR对miR-92a进行定量，比较使用磁珠型MagCapture™ microRNA Isolation Kit，Human Ago2和硅胶珠型产品从200 μL健康人混合血浆中提取的microRNA量。结果发现，本试剂盒中的离心柱法具有几乎与硅胶珠型产品相同的microRNA提取能力，而且一步法的microRNA提取量比硅胶珠型高（图3）。
图3. 比较从人血浆中提取的microRNA量
提取microRNA的靶标mRNA
向miR-122低表达的肝癌细胞株HepG2细胞（5×105 cells）导入人工合成的miR-122或调控的荧光素酶siRNA（Luc siRNA），提取了分别用磁珠型MagCapture™ microRNA Isolation Kit，Human Ago2和硅胶珠型产品制备的Ago2 IP RNA，以及用ISOGEN® 制备的total RNA。运用qPCR法比较各种RNA中含有的miR-122量（图4）与其靶标mRNA（Aldo A mRNA是miR-122靶标之一，以GAPDH内参作校正）量（图5）。与硅胶珠型产品一样，本品提取的RNA中富集了miR-122和Aldo A mRNA，因此，可以利用本品提取microRNA的靶标mRNA。另一方面，用ISOGEN® 制备的total RNA中的Aldo A mRNA会随着miR-122的增加而分解并减少。
图4. miR-122提取量的比较
图5. 靶标mRNA提取量的比较
◆MagCapture™ microRNA Isolation Kit, Mouse Ago2 使用例子（小鼠）
从小鼠细胞株中提取microRNA
通过变性聚丙烯酰胺凝胶电泳（银染），检测用本试剂盒（MagCapture™ microRNA Isolation Kit，Mouse Ago2）从小鼠P388D1细胞（2×107 cells）中提取的microRNA（图1）。结果显示，本品能提取出高纯度的microRNA。另外，以qPCR法对miR-92a进行定量，比较使用硅胶珠型产品（microRNA Isolation Kit，Mouse Ago2）提取到的microRNA量（图2）。结果发现，本品的离心柱法具有与硅胶珠型产品几乎同样的microRNA提取能力，而一步法的microRNA提取能力比硅胶珠型产品更好。
图1. 对从小鼠P388D1细胞中提取的microRNA的进行银染检测
图2. 比较从小鼠P388D1细胞中提取的microRNA量
从大鼠血浆中提取游离Ago2蛋白结合microRNA
通过qPCR对miR-92a进行定量，比较使用本品以及硅胶珠型产品从200μL大鼠血浆中提取到的microRNA量。本品的离心柱法具有与硅胶珠型产品几乎同样的microRNA提取能力，而一步法的microRNA提取能力比硅胶珠型产品更好（图3）。
图3. 比较从大鼠血浆中提取的microRNA量
◆MagCapture™ microRNA Isolation Kit, Ago 1–4 使用例子（人）
提取Ago1–4结合microRNA
用各种Ago1、Ago2、Ago3、Ago4特异性抗体进行微阵列检测分析免疫沉淀后HeLa中的各个RNA组分，结果显示，Ago2中捕获了大量miR-22和miR-16，而Ago1、Ago3、Ago4中则捕获了大量的miR-1260b和miR-4286（表1）。
|
信号强度 |
信号比 |
||||||
|
名称 |
Ago1 IP |
Ago2 IP |
Ago3 IP |
Ago4 IP |
Ago2/Ago1 |
Ago2/Ago3 |
Ago2/Ago4 |
|
hsa-miR-22 |
3521.4 |
21696.5 |
3771.2 |
292.4 |
6.16 |
5.75 |
74.2 |
|
hsa-miR-16 |
6886.3 |
28527.2 |
5013.4 |
582.5 |
4.14 |
5.69 |
48.97 |
|
hsa-miR-1260b |
2060.3 |
540.9 |
1270.6 |
1977.9 |
0.26 |
0.43 |
0.27 |
|
hsa-miR-4286 |
678.8 |
202.4 |
2019.2 |
471.2 |
0.3 |
0.1 |
0.43 |
表1. 微阵列检测分析结果
上述分析结果验证了我们可以利用MagCapture™ microRNA Isolation Kit, Ago1-4，从Ago1、Ago3、Ago4中提取硅胶珠型产品难以提取的大量microRNA。
使用本品和硅胶珠型产品，提取HeLa细胞（1×107 cells）中的microRNA，以miR-92a作为内部标准，通过qPCR检测miR-22、miR-1、miR-1260b、miR-4286的提取量。结果发现，Ago1、Ago3、Ago4中miR-1260b、miR-4286的提取量比硅胶珠型产品更高（图1）。因此，本品不仅能提取Ago2中的microRNA，还能从Ago1、Ago3、Ago4中提取硅胶珠型产品难以提取的大量microRNA。
图1. 比较从HeLa细胞中提取的各种microRNA量
提取人和小鼠细胞株中的microRNA
以qPCR对miR-92a进行定量，比较用本品和硅胶珠型产品（microRNA Isolation Kit, Human Ago2或Mouse Ago2）从人K562细胞（1×107 cells）及小鼠P388D1细胞（2×107 cells）中提取的microRNA量。结果显示，本品可提取和硅胶珠型产品相同甚至更多的microRNA（图2，3）。
图2. 比较从人K562细胞中提取的microRNA量
图3. 比较从小鼠P388D1细胞中提取的microRNA量
提取人和大鼠血浆中的游离Ago结合microRNA
以qPCR对miR-92a进行定量，比较用本品和第一代产品（microRNA Isolation Kit, Human Ago2或Mouse Ago2）从200 μL人以及大鼠血浆中提取的microRNA量。结果显示，本品可提取和硅胶珠型产品相同甚至更多的microRNA（图4,5）。
图4. 比较从人血浆中提取的microRNA量
图5. 比较从大鼠血浆中提取的microRNA量
提取各种动物细胞株中的microRNA
以qPCR对miR-92a进行定量，检测用MagCapture™ microRNA Isolation Kit, Human Ago2、Mouse Ago2、Ago1-4从2×106 cells的K562细胞（人）、COS-7细胞（猴）、MDCK细胞（狗）、P388D1细胞（小鼠）、SCC-131细胞（大鼠）中提取的免疫沉淀组分中的microRNA量，和用ISOGEN® 从各种细胞中提取的total RNA组分中的microRNA量。通过比较各种免疫沉淀所得到的RNA组分中的miR-92a量和total RNA组分中的miR-92a量的相对值，表明本品适合提取上述全部细胞中的microRNA（图6）。
图6. 比较从各种动物细胞中提取的microRNA量
◆MagCapture™ microRNA Isolation Kit, Protein G使用例子
提取人和小鼠细胞株中的microRNA（与硅胶珠型产品的比较）
以qPCR法对miR-92a进行定量，比较用本品（MagCapture™ microRNA Isolation Kit, Protein G）和抗Ago1抗体（2A7）、抗人Ago2抗体（4G8）、抗人Ago3抗体（1C12）从人K562细胞（1×107 cells）提取的microRNA量，和用硅胶珠型产品（microRNA Isolation Kit, Human/Mouse Ago1、Human Ago2、Human Ago3）提取的micro RNA量（图1,2,3,）。另外，以qPCR对miR-92a进行定量，比较用本品和抗小鼠Ago2抗体（2D4）从小鼠P388D1细胞（2×107 cells）中提取的microRNA量，和用硅胶珠型产品（microRNA Isolation Kit, Mouse Ago2）提取的microRNA量（图4）。结果发现，本品与任意抗Ago抗体结合使用，能比硅胶珠型产品提取到更多的microRNA。
图1. 比较结合了抗Ago1抗体时的microRNA提取量
图2. 比较固定抗人Ago2抗体时的microRNA提取量
图3. 比较固定抗人Ago3抗体时的microRNA提取量
图4. 比较固定抗小鼠Ago2抗体时microRNA的提取量
提取人与小鼠细胞株中各种Ago蛋白结合microRNA
通过变性聚丙烯酰胺凝胶电泳和qPCR，对用本品和抗Ago1抗体（2A7）、抗人Ago2抗体（4G8）、抗人Ago3抗体（1C12）、抗Ago4抗体（2G7)从人K562细胞（1×107 cells）中提取的miR-92a表达量进行检测（图5）。另外，通过变性聚丙烯酰胺凝胶电泳和qPCR（miR-92a量），检测用本品和抗Ago1抗体（2A7）、抗小鼠Ago2抗体（2D4）、抗小鼠Ago3抗体（S09）、抗Ago4抗体（2G7)从小鼠P388D1细胞（2×107 cells）中提取的microRNA量（图6）。结果表明，本品与任意的抗Ago抗体组合使用，能提取与各种Ago结合的microRNA。
图5. 从人K562细胞中提取的microRNA量的比较与银染检测
图6. 从小鼠P388D1细胞中提取的microRNA量的比较与银染检测
◆产品列表
|
产品编号 |
产品名称 |
使用 抗体 克隆号 |
对应 物种 |
对应样本 |
提取RNA |
IP B/F |
RNA |
|
295-74001 |
MagCapture™ microRNA Isolation Kit, Human Ago2 分离试剂盒，人Ago2 |
4G8 |
人、猴、狗 |
细胞/ 组织 血浆 |
microRNA |
磁力 分离 |
离心 柱法 一步法 |
|
297-74201 |
MagCapture™ microRNA Isolation Kit，Mouse Ago2 分离试剂盒，小鼠Ago2 |
2D4 |
小鼠、大鼠、狗 |
||||
|
293-74801 |
MagCapture™ microRNA Isolation Kit，Ago 1-4 分离试剂盒，Ago1-4 |
1G3 |
人、猴、狗、小鼠、大鼠 |
microRNA |
|||
|
299-74401 |
MagCapture™ microRNA Isolation Kit，Protein G 分离试剂盒，蛋白G |
随意 选择 |
根据使用的抗体而定 |
细胞/ 组织 |
根据使用的抗体而定 |
一步法 |
※ 本页面产品仅供研究用，研究以外不可使用。
| 产品编号 | 产品名称 | 产品规格 | 产品等级 | 备注 |
| 295-74001 | MagCapture™ microRNA Isolation Kit, Human Ago2 MagCapture™microRNA分离试剂盒，人Ago2 |
10 tests | for Genetic Research | |
| 297-74201 | MagCapture™ microRNA Isolation Kit，Mouse Ago2 MagCapture™microRNA分离试剂盒，小鼠Ago2 |
10 tests | for Genetic Research | |
| 293-74801 | MagCapture™ microRNA Isolation Kit，Ago 1-4 MagCapture™ microRNA分离试剂盒，Ago1-4 |
10 tests | for Genetic Research | |
| 299-74401 | MagCapture™ microRNA Isolation Kit，Protein G MagCapture™microRNA分离试剂盒，蛋白G |
20 tests | for Genetic Research |
| 免责声明 |
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VAHTS CA-28 Streptavidin Beads
广泛用途的蛋白、核酸分离工具——链霉亲和素磁珠
液相杂交捕获；免疫沉淀（IP、Co-IP）；核酸蛋白互作研究（ChIP、RIP、Pull-down）等
兼容捕获试剂：N512磁珠适用于液体杂交捕获实验
高效地结合生物素修饰配体：1 mg(100 µl) N512磁珠能分别结合：游离生物素>950 pmol、约10 µg生物素修饰的dsDNA或10 µg生物素修饰的lgG
非特异性结合低：非生物素修饰的核酸结合率小于1%
操作体验感优：低吸附性，不沾壁
VAHTS CA-28 Streptavidin Beads是以亲水超顺磁性聚苯乙烯微球与高纯度链霉亲和素共价结合而成的链霉亲和素磁珠，游离生物素结合能力>950 pmol/mg。基于链霉亲和素(Streptavidin, SA)-生物素(Biotin)系统具有较高的结合亲和力的原理，本产品可快速高效地结合生物素修饰的核酸、抗体以及其他分子等，适用于核酸杂交捕获和分离。磁珠粒径均一，形态规整，具有良好的重复性和批间稳定性。
1. 高效结合生物素修饰的配体
使用N512磁珠和A公司链霉亲和素磁珠，分别检测链霉亲和素磁珠结合生物素修饰配体的能力。结果显示，1 mg N512磁珠可以分别结合：约1500 pmol的游离生物素、约10 µg 生物素修饰的dsDNA或约10 µg生物素修饰的lgG。N512链霉亲和素磁珠可以高效地结合生物素修饰的配体且结合能力优于A公司同类产品。
2. 良好的液相杂交捕获能力
以人血gDNA为模板，进行文库构建，分别使用N512磁珠和A公司同类型的磁珠搭配Vazyme全外显子捕获试剂（Vazyme#NC001，NC101，NC103）进行杂交捕获实验，结果表明，使用N512磁珠进行杂交捕获的捕获产出和中靶率与A公司磁珠基本一致。
3. 兼容广
以人血gDNA为模板，进行文库构建，使用Vazyme公司和友商D公司的人全外显子杂交捕获试剂搭配N512磁珠和A公司磁珠进行液相杂交捕获。结果表明，N512磁珠和A公司磁珠均能兼容搭配Vazyme和D公司的杂交捕获试剂盒。
2 ~ 8℃保存，运输方式根据目的地进行