硅胶珠型microRNA分离试剂盒
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硅胶珠型microRNA分离试剂盒
FUJIFILM Wako提供能使从Ago 免疫沉淀到RNA 提取等一系列实验操作简化的“microRNA Isolation Kit”系列。使用本系列试剂盒能简便地从人和小鼠的细胞或组织中提取Ago蛋白结合的microRNA以及靶mRNA,还能从培养上清、血清、血浆中提取游离Ago蛋白结合的microRNA。所提取到的RNA可以应用于qPCR、微阵列检测、NGS等下游实验。本系列包括采用磁珠的MagCapture™ microRNA Isolation Kit,以及采用了硅胶珠法的microRNA Isolation Kit。
microRNA Isolation Kit抗Ago抗体固定珠子具有非特异吸附性低的特征,它采用二氧化硅基聚合物珠粒,以离心为基础进行免疫沉淀操作。在从免疫沉淀后的硅胶珠中提取RNA的步骤时,采用苯酚/氯仿提取(P/C法)及乙醇沉淀来提取RNA。FUJIFILM Wako推出含有固定了抗Ago1抗体(2A7)、抗人Ago2抗体(4G8)、抗小鼠Ago2抗体(2D4)、抗人Ago3抗体(1C12)的硅胶珠的4种试剂盒。
◆试剂盒组成(以Human Ago2为例,10次用)
1. Anti-Human Ago2 Antibody Beads Solution:500 μL×1瓶
2. Cell Lysis Solution:50 mL×1瓶
3. Elution Solution:500 μL×1瓶
4. Ethachinmate:30 μL×1瓶
5. 3 mol/L Sodium Acetate:400 μL×1瓶
◆操作示意图
◆试剂盒使用实例
用microRNA Isolation Kit, Human Ago2通过Urea-PAGE分离从三种5×106 cells的人培养细胞株(HeLa、HepG2、HEK293),和小鼠培养细胞株(P388D1)中提取的microRNA组分,再进行银染(311-03961、CLEAR STAINAg、20 tests)检测。结果表明能从人培养细胞中特异性提取microRNA(图1)。以同样的银染试剂,检测用microRNA Isolation Kit, Mouse Ago2从5×106 cells的人培养细胞(HeLa)和啮齿动物培养细胞株(P388D1、CHO、PC-12)中提取的microRNA组分。结果表明,能从三种啮齿动物培养细胞株中特异性提取microRNA而不能从人细胞株中提取(图2)。
图1.通过用Human Ago2提取的microRNA的进行银染检测
图2. 对Mouse Ago2提取的microRNA的进行银染检测
◆产品列表
产品编号 |
产品名称 |
使用抗体克隆号 |
对应 物种 |
对应样本 |
提取RNA |
IPB/F 分离法 |
RNA 提取法 |
291-70201 |
microRNA Isolation Kit, Human/Mouse Ago1 |
2A7 |
人、小鼠 |
细胞/组织 |
microRNA |
离心 |
P/C 法 |
292-66701 |
microRNA Isolation Kit, Human Ago2 microRNA纯化试剂盒,人Ago2 |
4G8 |
人、猴、狗 |
||||
292-67301 |
microRNA Isolation Kit, Mouse Ago2 |
2D4 |
小鼠、 |
||||
297-70301 |
microRNA Isolation Kit, Human Ago3 |
1C12 |
人 |
※ 本页面产品仅供研究用,研究以外不可使用。
产品编号 | 产品名称 | 产品规格 | 产品等级 | 备注 |
291-70201 | microRNA Isolation Kit, Human/Mouse Ago1 microRNA纯化试剂盒,人/鼠Ago1 |
10 tests | for Genetic Research | |
292-66701 | microRNA Isolation Kit, Human Ago2 microRNA纯化试剂盒,人Ago2 |
10 tests | for Genetic Research | |
292-67301 | microRNA Isolation Kit, Mouse Ago2 microRNA纯化试剂盒,小鼠Ago2 |
10 tests | for Genetic Research | |
297-70301 | microRNA Isolation Kit, Human Ago3 microRNA纯化试剂盒,人Ago3 |
10 tests | for Genetic Research |
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