Ar Qual Chemically Competent Cell 农杆菌化学感受态细胞

Ar Qual;MSU440;K599;Agrobacterium rhizogenes发根农杆菌;pCAMBIA2301;Streptomycin 链霉素;Rifampicin利福平;

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货号 产品名称 规格            
MF2459-1000UL   Ar Qual Chemically Competent Cell农杆菌化学感受态细胞    10×100μl
MF2459-5000UL Ar Qual Chemically Competent Cell农杆菌化学感受态细胞 50×100μl

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组分名称

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MF2459-1000UL    

MF2459-5000UL   

MF2459-A Ar QualChemically Competent Cell 10×100μl 50×100μl
MF2459-B pCAMBIA2301 Control Vector (10ng/μl)     10μl 10μl

产品描述

发根农杆菌(Agrobacterium rhizogenes)是根瘤菌科农杆属的一种革兰氏阴性土壤细菌,能够侵染大多数双子叶植物和少数单子叶植物以及个别裸子植物。起关键作用的是其携带的Ri质粒,含有负责发根自主性生长和冠瘿碱合成的基因。结构上与Ti质粒类似,主要有致毒区(Vir),T-DNA区以及冠瘿碱合成功能区等。

根据合成冠瘿碱的不同,Ri质粒分为4种类型:1)甘露碱型;2)黄瓜碱型;3)农杆碱型;4)米奇矛型。

发根农杆菌菌株Ar Qual含天然农杆碱型Ri质粒,具有广泛的宿主范围(玉米,烟草,番茄、柑橘等),同时具有链霉素、氯霉素抗性。

我司(金畔生物)提供的Ar Qual化学转化感受态细胞经特殊工艺制作,基因型为Agrobacterium rhizogenes (strR,CamR) Ar Qual Ri (agropine type),经pCAMBIA2301质粒(卡那霉素抗性)检测转化效率>104cfu/μg DNA。

保存与运输条件:

保存:-80℃保存,一年有效。

运输:干冰运输。

注意事项

1)   感受态细胞应保存在-80℃,不可反复冻融和放置时间过长,以免降低感受态细胞的转化效率。

2)   整个转化操作,严格根据相应温度及无菌条件要求进行。

3)   加入质粒的体积不应大于感受态体积的1/10。质粒不纯或存在乙醇等有机物污染,会导致转化效率急剧下降。质粒增大一倍,转化效率下降一个数量级。

4)   混匀质粒时应用手指快速拨打管底或用枪吹吸混匀,务必使质粒快速、均匀分散开,与感受态细胞充分接触。

5)   转化高浓度的质粒可相应减少最终涂板用量。

6)   平板上克隆密度过大时,由于营养不足,克隆生长变慢,菌落变小。为获得大菌落,应减少质粒用量或降低涂板的菌量。

7)   Ar Qual具有链霉素、氯霉素抗性,不可用于具链霉素或氯霉素抗性质粒的转化。

8)   为了保证最佳的转化效率,发根农杆菌的培养务必使用TY培养基(配方见附表1)。

9)   为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法

1)        取-80℃保存的感受态细胞于室温或手心片刻待其部分融化,达到冰水混合状态时插入冰浴中使其完全融化。

2)        往100μl感受态细胞悬液中加入0.01~1μg质粒DNA(转化效率较高,第一次使用前最好做预实验确定所加质粒的量),用手快速、剧烈拨打管底混匀或用枪吹吸混匀,依次放于冰中间静置5min,液氮5min,37℃水浴5min,冰浴5min。

3)        冰浴中拿出放室温,加入700μl无抗生素的TY液体培养基,于28℃振荡培养2h。

4)        6,000rpm离心1min,吸掉600ul上清,之后用枪轻轻吹打重悬菌体。之后加到含相应抗生素的TY平板上,用无菌玻棒轻轻的将细胞均匀涂开。室温正置10 min,待液体被吸收后,倒置平板,28℃培养2-3天。

附表1 固体和液体TY培养基配方

附表2 常见发根农杆菌对抗生素敏感性总表

农杆菌菌株  羧苄(carb) 链霉素(strep) 利福平(rif) 庆大霉素(gent) 卡那霉素(kan)
Ar A4 S S S S R
Ar Qual S R S R S
Ar 1193 R R R S S
K599 S R S S S
C58C1 S R R S S
MSU440 S R S S S
【备注】:S代表敏感,R代表抗性。

附表3 常见农杆菌抗生素配制方法

抗生素 配方 母液              工作液       
羧苄青霉素 去离子水溶解,0.22μm滤膜除菌 50mg/ml 50μg/ml
硫酸卡那霉素          去离子水溶解,0.22μm滤膜除菌 50mg/ml 50μg/ml
链霉素 去离子水溶解,0.22μm滤膜除菌 10mg/ml 50μg/ml
庆大霉素 去离子水溶解,0.22μm滤膜除菌 20mg/ml 40μg/ml
利福平 DMSO溶解,0.22μm有机相滤膜除菌 10mg/ml 20μg/ml
氯霉素 无水乙醇溶解,0.22μm有机相滤膜除菌           34mg/ml 34μg/ml

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MF2459-1000UL Ar Qual Chemically Competent Cell农杆菌化学感受态细胞 10×100μl
MF2461-1000UL Ar 1193 Chemically Competent Cell农杆菌化学感受态细胞 10×100μl
MS0021-10G Chloramphenicol, USP Grade氯霉素 10g
MS0018-10G Ampicillin, Sodium Salt氨苄青霉素钠 10g
MS0017-5G Carbenicillin, Disodium Salt羧苄青霉素二钠盐 5g
MS0019-10G Kanamycin Sulfate硫酸卡那霉素 10g
MS0014-1G Rifampicin, USP Grade利福平 1g

 

Ar Qual Chemically Competent Cell 农杆菌化学感受态细胞

Ar Qual;MSU440;K599;Agrobacterium rhizogenes发根农杆菌;pCAMBIA2301;Streptomycin 链霉素;Rifampicin利福平;

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货号 产品名称 规格               
MF2459-1000UL   Ar Qual Chemically Competent Cell农杆菌化学感受态细胞    10×100μl
MF2459-5000UL Ar Qual Chemically Competent Cell农杆菌化学感受态细胞 50×100μl

产品组分:

组分编号     

组分名称

货号(规格)

MF2459-1000UL    

MF2459-5000UL   

MF2459-A Ar QualChemically Competent Cell 10×100μl 50×100μl
MF2459-B pCAMBIA2301 Control Vector (10ng/μl)     10μl 10μl

产品描述

发根农杆菌(Agrobacterium rhizogenes)是根瘤菌科农杆属的一种革兰氏阴性土壤细菌,能够侵染大多数双子叶植物和少数单子叶植物以及个别裸子植物。起关键作用的是其携带的Ri质粒,含有负责发根自主性生长和冠瘿碱合成的基因。结构上与Ti质粒类似,主要有致毒区(Vir),T-DNA区以及冠瘿碱合成功能区等。

根据合成冠瘿碱的不同,Ri质粒分为4种类型:1)甘露碱型;2)黄瓜碱型;3)农杆碱型;4)米奇矛型。

发根农杆菌菌株Ar Qual含天然农杆碱型Ri质粒,具有广泛的宿主范围(玉米,烟草,番茄、柑橘等),同时具有链霉素、氯霉素抗性。

我司(金畔生物)提供的Ar Qual化学转化感受态细胞经特殊工艺制作,基因型为Agrobacterium rhizogenes (strR,CamR) Ar Qual Ri (agropine type),经pCAMBIA2301质粒(卡那霉素抗性)检测转化效率>104cfu/μg DNA。

保存与运输条件:

保存:-80℃保存,一年有效。

运输:干冰运输。

注意事项

1)   感受态细胞应保存在-80℃,不可反复冻融和放置时间过长,以免降低感受态细胞的转化效率。

2)   整个转化操作,严格根据相应温度及无菌条件要求进行。

3)   加入质粒的体积不应大于感受态体积的1/10。质粒不纯或存在乙醇等有机物污染,会导致转化效率急剧下降。质粒增大一倍,转化效率下降一个数量级。

4)   混匀质粒时应用手指快速拨打管底或用枪吹吸混匀,务必使质粒快速、均匀分散开,与感受态细胞充分接触。

5)   转化高浓度的质粒可相应减少最终涂板用量。

6)   平板上克隆密度过大时,由于营养不足,克隆生长变慢,菌落变小。为获得大菌落,应减少质粒用量或降低涂板的菌量。

7)   Ar Qual具有链霉素、氯霉素抗性,不可用于具链霉素或氯霉素抗性质粒的转化。

8)   为了保证最佳的转化效率,发根农杆菌的培养务必使用TY培养基(配方见附表1)。

9)   为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法

1)        取-80℃保存的感受态细胞于室温或手心片刻待其部分融化,达到冰水混合状态时插入冰浴中使其完全融化。

2)        往100μl感受态细胞悬液中加入0.01~1μg质粒DNA(转化效率较高,第一次使用前最好做预实验确定所加质粒的量),用手快速、剧烈拨打管底混匀或用枪吹吸混匀,依次放于冰中间静置5min,液氮5min,37℃水浴5min,冰浴5min。

3)        冰浴中拿出放室温,加入700μl无抗生素的TY液体培养基,于28℃振荡培养2h。

4)        6,000rpm离心1min,吸掉600ul上清,之后用枪轻轻吹打重悬菌体。之后加到含相应抗生素的TY平板上,用无菌玻棒轻轻的将细胞均匀涂开。室温正置10 min,待液体被吸收后,倒置平板,28℃培养2-3天。

附表1 固体和液体TY培养基配方

附表2 常见发根农杆菌对抗生素敏感性总表

农杆菌菌株  羧苄(carb) 链霉素(strep) 利福平(rif) 庆大霉素(gent) 卡那霉素(kan)
Ar A4 S S S S R
Ar Qual S R S R S
Ar 1193 R R R S S
K599 S R S S S
C58C1 S R R S S
MSU440 S R S S S
【备注】:S代表敏感,R代表抗性。

附表3 常见农杆菌抗生素配制方法

抗生素 配方 母液              工作液       
羧苄青霉素 去离子水溶解,0.22μm滤膜除菌 50mg/ml 50μg/ml
硫酸卡那霉素          去离子水溶解,0.22μm滤膜除菌 50mg/ml 50μg/ml
链霉素 去离子水溶解,0.22μm滤膜除菌 10mg/ml 50μg/ml
庆大霉素 去离子水溶解,0.22μm滤膜除菌 20mg/ml 40μg/ml
利福平 DMSO溶解,0.22μm有机相滤膜除菌 10mg/ml 20μg/ml
氯霉素 无水乙醇溶解,0.22μm有机相滤膜除菌           34mg/ml 34μg/ml

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MS0021-10G Chloramphenicol, USP Grade氯霉素 10g
MS0018-10G Ampicillin, Sodium Salt氨苄青霉素钠 10g
MS0017-5G Carbenicillin, Disodium Salt羧苄青霉素二钠盐 5g
MS0019-10G Kanamycin Sulfate硫酸卡那霉素 10g
MS0014-1G Rifampicin, USP Grade利福平 1g

 

K599 Electrocompetent Cell 农杆菌电转感受态细胞 发根农杆菌(Agrobacterium rhizogenes)

K599;C58C1;MSU440;Agrobacterium rhizogenes发根农杆菌;pCAMBIA2301;Streptomycin链霉素;Rifampicin利福平;

货号 产品名称 规格
MF2456-0500UL K599 Electrocompetent Cell农杆菌电转感受态细胞 10×50μl
MF2456-2500UL K599 Electrocompetent Cell农杆菌电转感受态细胞 50×50μl

菌株描述

发根农杆菌(Agrobacterium rhizogenes)是根瘤菌科农杆属的一种革兰氏阴性土壤细菌,能够侵染大多数双子叶植物和少数单子叶植物以及个别裸子植物。起关键作用的是其携带的Ri质粒,含有负责发根自主性生长和冠瘿碱合成的基因。结构上于Ti质粒类似,主要有致毒区(Vir),T-DNA区以及冠瘿碱合成功能区等。

根据合成冠瘿碱的不同,Ri质粒分为4种类型:1)甘露碱型;2)黄瓜碱型;3)农杆碱型;4)米奇矛型。

发根农杆菌菌株K599(NCPPB2659)含有pRi2659农杆碱型Ri质粒,具有广泛的宿主范围(葫芦科,豆科,茄科等),同时具有链霉素抗性。

我司金畔生物提供的K599电转感受态细胞经特殊工艺制作,特别适合大质粒的转化。基因型为Agrobacterium rhizogenes (strR ) pRi2659 (agropine type),经pCAMBIA2301质粒(卡那霉素抗性)检测转化效率>105 cfu/μg DNA。

产品包装

组分编号 组分名称 货号(规格)
MF2456-0500UL MF2456-2500UL
MF2456-A K599 Electrocompetent Cell 10×50μl 50×50μl
MF2456-B pCAMBIA2301 Control Vector (10ng/μl) 10μl 10μl

保存与运输条件:

保存:-80℃保存,1年有效。 

运输:干冰运输。

注意事项

1) 感受态细胞应保存在-80℃,不可反复冻融和放置时间过长,以免降低感受态细胞的转化效率。

2) 整个转化操作,严格根据相应温度及无菌条件要求进行。

3) 加入质粒的体积不应大于感受态体积的1/10。质粒不纯或存在乙醇等有机物污染,会导致转化效率急剧下降。质粒增大一倍,转化效率下降一个数量级。

4) 为确保最高转化效率,整个操作过程应尽量轻柔,并保持低温。

5) 电转感受态细胞中不可混入气泡,转化高浓度的质粒可相应减少最终涂板用量。

6) 平板上克隆密度过大时,由于营养不足,克隆生长变慢,菌落变小。为获得大菌落,应减少质粒用量。

7) K599具链霉素抗性,不可用于具链霉素抗性质粒的转化。

8) 为了保证最佳的转化效率,发根农杆菌的培养务必使用TY培养基(配方见附表1)。

9) 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法

1) 将0.1 cm电击杯和杯盖从储存液中拿出倒置于干净吸水纸上5min,待其沥干水分,正置5min,使乙醇充分挥发干净,立即插入冰中,压实冰面,电极杯顶离冰面0.5cm以方便盖上杯盖,冰中静置5min使其充分降温。

2) 取-80℃保存的农杆菌感受态细胞插入冰中5min,待其完全融化。

3) 往50μl感受态细胞悬液中加入0.01~1μg(体积不大于6μl)质粒DNA,用手拨打管底使其混匀,立即插入冰中。用枪轻轻吹打混匀感受态细胞-质粒之后快速转移到电击杯中,盖上杯盖,空管保留待用【注意:质粒DNA最好用试剂盒抽提,且用双蒸水溶解。由于感受态转化效率较高,第一次使用最好做预试验确定最佳的质粒用量】。

4) 启动电转仪,设置参数:C=25 μF,PC=200 ohm,V=2400 V(此参数参考Bio-rad,具体使用请参考电转仪推荐步骤来操作),将电击杯快速放入电转槽中,电击完成快速插入冰中。

5) 加入1ml无抗生素的TY并转移到感受态空管中,于28℃振荡培养2~3h。

6) 6,000rpm离心1min,留取100ul左右上清,之后用枪轻轻吹打重悬菌体。之后加到含相应抗生素的TY平板上,用无菌玻棒轻轻的将细胞均匀涂开。室温正置10 min,待液体被吸收后,倒置平板,28℃培养2-3天。

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附表1固体和液体TY培养基配方

组分Component TY(液体)/升 TY(固体)/升
胰蛋白胨Tryptone 5g 5g
酵母提取物Yeast extract 3g 3g
琼脂Agar / 15g
补水到1L,121℃,20min高压灭菌 补水到1L,121℃,20min高压灭菌
氯化钙CaCl2 配制1M CaCl2水溶液,121℃,20min高压灭菌。之后按照10ml/L加入上方灭菌的液体营养液。 配制1M CaCl2水溶液,121℃,20min高压灭菌。之后按照10ml/L加入上方灭菌的液体营养液。

附表2常见发根农杆菌对抗生素敏感性总表

农杆菌菌株 羧苄(carb) 链霉素(strep) 利福平(rif) 庆大霉素(gent) 卡那霉素(kan)
Ar A4 S S S S R
Ar Qual S R S R S
Ar 1193 R R R S S
K599 S R S S S
C58C1 S R R S S
MSU440 S R S S S
【备注】:S代表敏感,R代表抗性。

附表3常见农杆菌抗生素配制方法

抗生素 配方 母液 工作液
羧苄青霉素 去离子水溶解,0.22μm滤膜除菌 50mg/ml 50μg/ml
硫酸卡那霉素 去离子水溶解,0.22μm滤膜除菌 50mg/ml 50μg/ml
链霉素 去离子水溶解,0.22μm滤膜除菌 10mg/ml 50μg/ml
庆大霉素 去离子水溶解,0.22μm滤膜除菌 20mg/ml 40μg/ml
利福平 DMSO溶解,0.22μm有机相滤膜除菌 10mg/ml 20μg/ml
氯霉素 无水乙醇溶解,0.22μm有机相滤膜除菌 34mg/ml 34μg/ml

 

K599 Chemically Competent Cell 农杆菌化学感受态细胞 Agrobacterium rhizogenes发根农杆菌

Agrobacterium rhizogenes发根农杆菌;Ri质粒;K599感受态细胞;C58C1;Ar Qual;GV3101根癌农杆菌;特美汀 Timentin;

货号 产品名称 规格   
MF2455-1000UL    K599 Chemically Competent Cell农杆菌化学感受态细胞    10×100μ    l
MF2455-5000UL K599 Chemically Competent Cell农杆菌化学感受态细胞 50×100μl

产品组分:

组分编号 组分名称

货号(规格)

MF2455-1000UL     MF2455-5000UL  
MF2455-A         K599 Chemically Competent Cell 10×100μl 50×100μl
MF2455-B pCAMBIA2301 Control Vector (10ng/μl)     10μl 10μl

产品描述

发根农杆菌(Agrobacterium rhizogenes)是根瘤菌科农杆属的一种革兰氏阴性土壤细菌,能够侵染大多数双子叶植物和少数单子叶植物以及个别裸子植物。起关键作用的是其携带的Ri质粒,含有负责发根自主性生长和冠瘿碱合成的基因。结构上于Ti质粒类似,主要有致毒区(Vir),T-DNA区以及冠瘿碱合成功能区等。根据合成冠瘿碱的不同,Ri质粒分为4种类型:1)甘露碱型;2)黄瓜碱型;3)农杆碱型;4)米奇矛型。

发根农杆菌菌株K599(NCPPB2659)含有pRi2659农杆碱型Ri质粒,具有广泛的宿主范围(葫芦科,豆科,茄科等),同时具有链霉素抗性。

我司(金畔生物)提供的K599化学转化感受态细胞经特殊工艺制作,基因型为Agrobacterium rhizogenes (strR) pRi2659 (agropine type),经pCAMBIA2301质粒(卡那霉素抗性)检测转化效率>103cfu/μg DNA。

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保存:-80℃保存,一年有效。

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注意事项

1)   感受态细胞应保存在-80℃,不可反复冻融和放置时间过长,以免降低感受态细胞的转化效率。

2)   整个转化操作,严格根据相应温度及无菌条件要求进行。

3)   加入质粒的体积不应大于感受态体积的1/10。质粒不纯或存在乙醇等有机物污染,会导致转化效率急剧下降。质粒增大一倍,转化效率下降一个数量级。

4)   混匀质粒时应用手指快速拨打管底或用枪吹吸混匀,务必使质粒快速、均匀分散开,与感受态细胞充分接触。

5)   转化高浓度的质粒可相应减少最终涂板用量。

6)   平板上克隆密度过大时,由于营养不足,克隆生长变慢,菌落变小。为获得大菌落,应减少质粒用量或降低涂板的菌量。

7)   K599具有链霉素抗性,不可用于具链霉素抗性质粒的转化。

8)   为了保证最佳的转化效率,发根农杆菌的培养务必使用TY培养基(配方见附表1)。

9)   为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法

1)        取-80℃保存的感受态细胞于室温或手心片刻待其部分融化,达到冰水混合状态时插入冰浴中使其完全融化。

2)        往100μl感受态细胞悬液中加入0.01~1μg质粒DNA(转化效率较高,第一次使用前最好做预实验确定所加质粒的量),用手快速、剧烈拨打管底混匀或用枪吹吸混匀,依次放于冰中间静置5min,液氮5min,37℃水浴5min,冰浴5min。

3)        冰浴中拿出放室温,加入700μl无抗生素的TY液体培养基,于28℃振荡培养2h。

4)        6,000rpm离心1min,吸掉600ul上清,之后用枪轻轻吹打重悬菌体。之后加到含相应抗生素的TY平板上,用无菌玻棒轻轻的将细胞均匀涂开。室温正置10 min,待液体被吸收后,倒置平板,28℃培养2-3天。

附表1 固体和液体TY培养基配方

附表2 常见发根农杆菌对抗生素敏感性总表

农杆菌菌株  羧苄(carb) 链霉素(strep) 利福平(rif) 庆大霉素(gent) 卡那霉素(kan)
Ar A4 S S S S R
Ar Qual S R S R S
Ar 1193 R R R S S
K599 S R S S S
C58C1 S R R S S
MSU440 S R S S S
【备注】:S代表敏感,R代表抗性。

附表3 常见农杆菌抗生素配制方法

抗生素 配方 母液              工作液       
羧苄青霉素 去离子水溶解,0.22μm滤膜除菌 50mg/ml 50μg/ml
硫酸卡那霉素          去离子水溶解,0.22μm滤膜除菌 50mg/ml 50μg/ml
链霉素 去离子水溶解,0.22μm滤膜除菌 10mg/ml 50μg/ml
庆大霉素 去离子水溶解,0.22μm滤膜除菌 20mg/ml 40μg/ml
利福平 DMSO溶解,0.22μm有机相滤膜除菌 10mg/ml 20μg/ml
氯霉素 无水乙醇溶解,0.22μm有机相滤膜除菌           34mg/ml 34μg/ml

相关产品

货号 名称 规格             
MF2451-1000UL     MSU440 Chemically Competent Cell农杆菌化学感受态细胞     10×100μl
MF2453-1000UL C58C1 Chemically Competent Cell农杆菌化学感受态细胞 10×100μl
MF2455-1000UL K599 Chemically Competent Cell农杆菌化学感受态细胞 10×100μl
MF2457-1000UL Ar A4 Chemically Competent Cell农杆菌化学感受态细胞 10×100μl
MF2459-1000UL Ar Qual Chemically Competent Cell农杆菌化学感受态细胞 10×100μl
MF2461-1000UL Ar 1193 Chemically Competent Cell农杆菌化学感受态细胞 10×100μl
MS0021-10G Chloramphenicol, USP Grade氯霉素 10g
MS0018-10G Ampicillin, Sodium Salt氨苄青霉素钠 10g
MS0017-5G Carbenicillin, Disodium Salt羧苄青霉素二钠盐 5g
MS0019-10G Kanamycin Sulfate硫酸卡那霉素 10g
MS0014-1G Rifampicin, USP Grade利福平 1g

 

特美汀 Timentin K599 Chemically Competent Cell 农杆菌化学感受态细胞

Agrobacterium rhizogenes发根农杆菌;Ri质粒;K599感受态细胞;C58C1;Ar Qual;GV3101根癌农杆菌;特美汀 Timentin;

产品订购:

货号 产品名称 规格   
MF2455-1000UL    K599 Chemically Competent Cell农杆菌化学感受态细胞    10×100μ    l
MF2455-5000UL K599 Chemically Competent Cell农杆菌化学感受态细胞 50×100μl

产品组分:

组分编号 组分名称

货号(规格)

MF2455-1000UL     MF2455-5000UL  
MF2455-A         K599 Chemically Competent Cell 10×100μl 50×100μl
MF2455-B pCAMBIA2301 Control Vector (10ng/μl)     10μl 10μl

产品描述

发根农杆菌(Agrobacterium rhizogenes)是根瘤菌科农杆属的一种革兰氏阴性土壤细菌,能够侵染大多数双子叶植物和少数单子叶植物以及个别裸子植物。起关键作用的是其携带的Ri质粒,含有负责发根自主性生长和冠瘿碱合成的基因。结构上于Ti质粒类似,主要有致毒区(Vir),T-DNA区以及冠瘿碱合成功能区等。根据合成冠瘿碱的不同,Ri质粒分为4种类型:1)甘露碱型;2)黄瓜碱型;3)农杆碱型;4)米奇矛型。

发根农杆菌菌株K599(NCPPB2659)含有pRi2659农杆碱型Ri质粒,具有广泛的宿主范围(葫芦科,豆科,茄科等),同时具有链霉素抗性。

我司(金畔生物)提供的K599化学转化感受态细胞经特殊工艺制作,基因型为Agrobacterium rhizogenes (strR) pRi2659 (agropine type),经pCAMBIA2301质粒(卡那霉素抗性)检测转化效率>103cfu/μg DNA。

保存与运输条件:

保存:-80℃保存,一年有效。

运输:干冰运输。

注意事项

1)   感受态细胞应保存在-80℃,不可反复冻融和放置时间过长,以免降低感受态细胞的转化效率。

2)   整个转化操作,严格根据相应温度及无菌条件要求进行。

3)   加入质粒的体积不应大于感受态体积的1/10。质粒不纯或存在乙醇等有机物污染,会导致转化效率急剧下降。质粒增大一倍,转化效率下降一个数量级。

4)   混匀质粒时应用手指快速拨打管底或用枪吹吸混匀,务必使质粒快速、均匀分散开,与感受态细胞充分接触。

5)   转化高浓度的质粒可相应减少最终涂板用量。

6)   平板上克隆密度过大时,由于营养不足,克隆生长变慢,菌落变小。为获得大菌落,应减少质粒用量或降低涂板的菌量。

7)   K599具有链霉素抗性,不可用于具链霉素抗性质粒的转化。

8)   为了保证最佳的转化效率,发根农杆菌的培养务必使用TY培养基(配方见附表1)。

9)   为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法

1)        取-80℃保存的感受态细胞于室温或手心片刻待其部分融化,达到冰水混合状态时插入冰浴中使其完全融化。

2)        往100μl感受态细胞悬液中加入0.01~1μg质粒DNA(转化效率较高,第一次使用前最好做预实验确定所加质粒的量),用手快速、剧烈拨打管底混匀或用枪吹吸混匀,依次放于冰中间静置5min,液氮5min,37℃水浴5min,冰浴5min。

3)        冰浴中拿出放室温,加入700μl无抗生素的TY液体培养基,于28℃振荡培养2h。

4)        6,000rpm离心1min,吸掉600ul上清,之后用枪轻轻吹打重悬菌体。之后加到含相应抗生素的TY平板上,用无菌玻棒轻轻的将细胞均匀涂开。室温正置10 min,待液体被吸收后,倒置平板,28℃培养2-3天。

附表1 固体和液体TY培养基配方

附表2 常见发根农杆菌对抗生素敏感性总表

农杆菌菌株  羧苄(carb) 链霉素(strep) 利福平(rif) 庆大霉素(gent) 卡那霉素(kan)
Ar A4 S S S S R
Ar Qual S R S R S
Ar 1193 R R R S S
K599 S R S S S
C58C1 S R R S S
MSU440 S R S S S
【备注】:S代表敏感,R代表抗性。

附表3 常见农杆菌抗生素配制方法

抗生素 配方 母液              工作液       
羧苄青霉素 去离子水溶解,0.22μm滤膜除菌 50mg/ml 50μg/ml
硫酸卡那霉素          去离子水溶解,0.22μm滤膜除菌 50mg/ml 50μg/ml
链霉素 去离子水溶解,0.22μm滤膜除菌 10mg/ml 50μg/ml
庆大霉素 去离子水溶解,0.22μm滤膜除菌 20mg/ml 40μg/ml
利福平 DMSO溶解,0.22μm有机相滤膜除菌 10mg/ml 20μg/ml
氯霉素 无水乙醇溶解,0.22μm有机相滤膜除菌           34mg/ml 34μg/ml

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货号 名称 规格             
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MF2457-1000UL Ar A4 Chemically Competent Cell农杆菌化学感受态细胞 10×100μl
MF2459-1000UL Ar Qual Chemically Competent Cell农杆菌化学感受态细胞 10×100μl
MF2461-1000UL Ar 1193 Chemically Competent Cell农杆菌化学感受态细胞 10×100μl
MS0021-10G Chloramphenicol, USP Grade氯霉素 10g
MS0018-10G Ampicillin, Sodium Salt氨苄青霉素钠 10g
MS0017-5G Carbenicillin, Disodium Salt羧苄青霉素二钠盐 5g
MS0019-10G Kanamycin Sulfate硫酸卡那霉素 10g
MS0014-1G Rifampicin, USP Grade利福平 1g

 

C58C1/MSU440/K599/C58C1 Chemically Competent Cell 农杆菌化学感受态细胞

C58C1;MSU440;K599;Agrobacterium rhizogenes发根农杆菌;pCAMBIA2301;Streptomycin 链霉素;Rifampicin利福平;

货号 产品名称 规格    
MF2453-1000UL   C58C1 Chemically Competent Cell农杆菌化学感受态细胞    10×100μl     
MF2453-5000UL C58C1 Chemically Competent Cell农杆菌化学感受态细胞 50×100μl

产品组分 

组分编号 组分名称 货号(规格)
MF2453-1000UL     MF2453-1000UL   
MF2453-A    C58C1Chemically Competent Cell 10×100μl 50×100μl
MF2453-B pCAMBIA2301 Control Vector (10ng/μl)     10μl 10μl

产品描述

发根农杆菌(Agrobacterium rhizogenes)是根瘤菌科农杆属的一种革兰氏阴性土壤细菌,能够侵染大多数双子叶植物和少数单子叶植物以及个别裸子植物。起关键作用的是其携带的Ri质粒,含有负责发根自主性生长和冠瘿碱合成的基因。结构上与Ti质粒类似,主要有致毒区(Vir),T-DNA区以及冠瘿碱合成功能区等。

根据合成冠瘿碱的不同,Ri质粒分为4种类型:1)甘露碱型;2)黄瓜碱型;3)农杆碱型;4)米奇矛型。

发根农杆菌菌株C58C1含pRiA4b农杆碱型Ri质粒,具有广泛的宿主范围(蔷薇科,夹竹桃科,豆科,茄科,黄芩,烟草等),同时具有链霉素、利福平抗性。

我司(金畔生物)提供的C58C1化学转化感受态细胞经特殊工艺制作,基因型为Agrobacterium rhizogenes (strR,rifR) pRiA4b (agropine type),经pCAMBIA2301质粒(卡那霉素抗性)检测转化效率>104cfu/μg DNA。

保存与运输条件:

保存:-80℃保存,一年有效。

运输:干冰运输。

注意事项

1)   感受态细胞应保存在-80℃,不可反复冻融和放置时间过长,以免降低感受态细胞的转化效率。

2)   整个转化操作,严格根据相应温度及无菌条件要求进行。

3)   加入质粒的体积不应大于感受态体积的1/10。质粒不纯或存在乙醇等有机物污染,会导致转化效率急剧下降。质粒增大一倍,转化效率下降一个数量级。

4)   混匀质粒时应用手指快速拨打管底或用枪吹吸混匀,务必使质粒快速、均匀分散开,与感受态细胞充分接触。

5)   转化高浓度的质粒可相应减少最终涂板用量。

6)   平板上克隆密度过大时,由于营养不足,克隆生长变慢,菌落变小。为获得大菌落,应减少质粒用量或降低涂板的菌量。

7)   C58C1具有链霉素、利福平抗性,不可用于具链霉素或者利福平抗性质粒的转化。

8)   为了保证最佳的转化效率,发根农杆菌的培养务必使用TY培养基(配方见附表1)。

9)   为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法

1)        取-80℃保存的感受态细胞于室温或手心片刻待其部分融化,达到冰水混合状态时插入冰浴中使其完全融化。

2)        往100μl感受态细胞悬液中加入0.01~1μg质粒DNA(转化效率较高,第一次使用前最好做预实验确定所加质粒的量),用手快速、剧烈拨打管底混匀或用枪吹吸混匀,依次放于冰中间静置5min,液氮5min,37℃水浴5min,冰浴5min。

3)        冰浴中拿出放室温,加入700μl无抗生素的TY液体培养基,于28℃振荡培养2h。

4)        6,000rpm离心1min,吸掉600ul上清,之后用枪轻轻吹打重悬菌体。之后加到含相应抗生素的TY平板上,用无菌玻棒轻轻的将细胞均匀涂开。室温正置10 min,待液体被吸收后,倒置平板,28℃培养2-3天。

附表1 固体和液体TY培养基配方

附表2 常见发根农杆菌对抗生素敏感性总表

农杆菌菌株  羧苄(carb) 链霉素(strep) 利福平(rif) 庆大霉素(gent) 卡那霉素(kan)
Ar A4 S S S S R
Ar Qual S R S R S
Ar 1193 R R R S S
K599 S R S S S
C58C1 S R R S S
MSU440 S R S S S
【备注】:S代表敏感,R代表抗性。

附表3 常见农杆菌抗生素配制方法

抗生素 配方 母液              工作液       
羧苄青霉素 去离子水溶解,0.22μm滤膜除菌 50mg/ml 50μg/ml
硫酸卡那霉素          去离子水溶解,0.22μm滤膜除菌 50mg/ml 50μg/ml
链霉素 去离子水溶解,0.22μm滤膜除菌 10mg/ml 50μg/ml
庆大霉素 去离子水溶解,0.22μm滤膜除菌 20mg/ml 40μg/ml
利福平 DMSO溶解,0.22μm有机相滤膜除菌 10mg/ml 20μg/ml
氯霉素 无水乙醇溶解,0.22μm有机相滤膜除菌           34mg/ml 34μg/ml

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MF2457-1000UL Ar A4 Chemically Competent Cell农杆菌化学感受态细胞 10×100μl
MF2459-1000UL Ar Qual Chemically Competent Cell农杆菌化学感受态细胞 10×100μl
MF2461-1000UL Ar 1193 Chemically Competent Cell农杆菌化学感受态细胞 10×100μl
MS0021-10G Chloramphenicol, USP Grade氯霉素 10g
MS0018-10G Ampicillin, Sodium Salt氨苄青霉素钠 10g
MS0017-5G Carbenicillin, Disodium Salt羧苄青霉素二钠盐 5g
MS0019-10G Kanamycin Sulfate硫酸卡那霉素 10g
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C58C1 Chemically Competent Cell 农杆菌化学感受态细胞

C58C1;MSU440;K599;Agrobacterium rhizogenes发根农杆菌;pCAMBIA2301;Streptomycin 链霉素;Rifampicin利福平;

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货号 产品名称 规格    
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产品组分 

组分编号 组分名称 货号(规格)
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MF2453-A    C58C1Chemically Competent Cell 10×100μl 50×100μl
MF2453-B pCAMBIA2301 Control Vector (10ng/μl)     10μl 10μl

产品描述

发根农杆菌(Agrobacterium rhizogenes)是根瘤菌科农杆属的一种革兰氏阴性土壤细菌,能够侵染大多数双子叶植物和少数单子叶植物以及个别裸子植物。起关键作用的是其携带的Ri质粒,含有负责发根自主性生长和冠瘿碱合成的基因。结构上与Ti质粒类似,主要有致毒区(Vir),T-DNA区以及冠瘿碱合成功能区等。

根据合成冠瘿碱的不同,Ri质粒分为4种类型:1)甘露碱型;2)黄瓜碱型;3)农杆碱型;4)米奇矛型。

发根农杆菌菌株C58C1含pRiA4b农杆碱型Ri质粒,具有广泛的宿主范围(蔷薇科,夹竹桃科,豆科,茄科,黄芩,烟草等),同时具有链霉素、利福平抗性。

我司(金畔生物)提供的C58C1化学转化感受态细胞经特殊工艺制作,基因型为Agrobacterium rhizogenes (strR,rifR) pRiA4b (agropine type),经pCAMBIA2301质粒(卡那霉素抗性)检测转化效率>104cfu/μg DNA。

保存与运输条件:

保存:-80℃保存,一年有效。

运输:干冰运输。

注意事项

1)   感受态细胞应保存在-80℃,不可反复冻融和放置时间过长,以免降低感受态细胞的转化效率。

2)   整个转化操作,严格根据相应温度及无菌条件要求进行。

3)   加入质粒的体积不应大于感受态体积的1/10。质粒不纯或存在乙醇等有机物污染,会导致转化效率急剧下降。质粒增大一倍,转化效率下降一个数量级。

4)   混匀质粒时应用手指快速拨打管底或用枪吹吸混匀,务必使质粒快速、均匀分散开,与感受态细胞充分接触。

5)   转化高浓度的质粒可相应减少最终涂板用量。

6)   平板上克隆密度过大时,由于营养不足,克隆生长变慢,菌落变小。为获得大菌落,应减少质粒用量或降低涂板的菌量。

7)   C58C1具有链霉素、利福平抗性,不可用于具链霉素或者利福平抗性质粒的转化。

8)   为了保证最佳的转化效率,发根农杆菌的培养务必使用TY培养基(配方见附表1)。

9)   为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法

1)        取-80℃保存的感受态细胞于室温或手心片刻待其部分融化,达到冰水混合状态时插入冰浴中使其完全融化。

2)        往100μl感受态细胞悬液中加入0.01~1μg质粒DNA(转化效率较高,第一次使用前最好做预实验确定所加质粒的量),用手快速、剧烈拨打管底混匀或用枪吹吸混匀,依次放于冰中间静置5min,液氮5min,37℃水浴5min,冰浴5min。

3)        冰浴中拿出放室温,加入700μl无抗生素的TY液体培养基,于28℃振荡培养2h。

4)        6,000rpm离心1min,吸掉600ul上清,之后用枪轻轻吹打重悬菌体。之后加到含相应抗生素的TY平板上,用无菌玻棒轻轻的将细胞均匀涂开。室温正置10 min,待液体被吸收后,倒置平板,28℃培养2-3天。

附表1 固体和液体TY培养基配方

附表2 常见发根农杆菌对抗生素敏感性总表

农杆菌菌株  羧苄(carb) 链霉素(strep) 利福平(rif) 庆大霉素(gent) 卡那霉素(kan)
Ar A4 S S S S R
Ar Qual S R S R S
Ar 1193 R R R S S
K599 S R S S S
C58C1 S R R S S
MSU440 S R S S S
【备注】:S代表敏感,R代表抗性。

附表3 常见农杆菌抗生素配制方法

抗生素 配方 母液              工作液       
羧苄青霉素 去离子水溶解,0.22μm滤膜除菌 50mg/ml 50μg/ml
硫酸卡那霉素          去离子水溶解,0.22μm滤膜除菌 50mg/ml 50μg/ml
链霉素 去离子水溶解,0.22μm滤膜除菌 10mg/ml 50μg/ml
庆大霉素 去离子水溶解,0.22μm滤膜除菌 20mg/ml 40μg/ml
利福平 DMSO溶解,0.22μm有机相滤膜除菌 10mg/ml 20μg/ml
氯霉素 无水乙醇溶解,0.22μm有机相滤膜除菌           34mg/ml 34μg/ml

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货号 名称 规格             
MF2451-1000UL     MSU440 Chemically Competent Cell农杆菌化学感受态细胞     10×100μl
MF2453-1000UL C58C1 Chemically Competent Cell农杆菌化学感受态细胞 10×100μl
MF2455-1000UL K599 Chemically Competent Cell农杆菌化学感受态细胞 10×100μl
MF2457-1000UL Ar A4 Chemically Competent Cell农杆菌化学感受态细胞 10×100μl
MF2459-1000UL Ar Qual Chemically Competent Cell农杆菌化学感受态细胞 10×100μl
MF2461-1000UL Ar 1193 Chemically Competent Cell农杆菌化学感受态细胞 10×100μl
MS0021-10G Chloramphenicol, USP Grade氯霉素 10g
MS0018-10G Ampicillin, Sodium Salt氨苄青霉素钠 10g
MS0017-5G Carbenicillin, Disodium Salt羧苄青霉素二钠盐 5g
MS0019-10G Kanamycin Sulfate硫酸卡那霉素 10g
MS0014-1G Rifampicin, USP Grade利福平 1g

 

GV3101 Chemically Competent Cell 农杆菌化学感受态细胞

EHA101菌株;农杆菌感受态细胞;Rifampicin(Rif)利福平;Kanamycin(kan)卡那霉素;EHA105;LBA4404;GV3101;AGL1;植物转基因研究;

 货号  产品名称  规格     
 MF2304-1000UL      GV3101 Chemically Competent Cell 农杆菌化学感受态细胞       10×100μl       
 MF2304-5000UL  GV3101 Chemically Competent Cell 农杆菌化学感受态细胞  50×100μl  

产品描述:

GV3101菌株的染色体背景为C58,核基因含利福平抗性基因rif,为了便于转化操作,此菌株携带一无自身转运功能的胭脂碱型Ti质粒pMP90(pTiC58DT-DNA),此质粒含有vir基因(vir基因是T-DNA插入植物基因组必需的元件,pMP90(pTiC58DT-DNA)质粒自身的T-DNA转移功能虽被破坏,但可以帮助转入的双元载体T-DNA顺利转移)。pMP90(pTiC58DT-DNA)型Ti质粒携带筛选标签Gent,赋予GV3101菌株庆大霉素抗性,适用于拟南芥、烟草、玉米、土豆等植物的转基因操作。

我司提供的GV3101化学转化感受态细胞经特殊工艺制作,基因型C58 (rifR) Ti pMP90 (pTiC58DT-DNA) ( gentR) Nopaline,经pCAMBIA2301质粒检测转化效率>104cfu/μg DNA。

产品组分:

组分编号 组分名称

货号(规格)

MF2304-1000UL     MF2304-5000UL   
MF2304-A      GV3101 Chemically Competent Cell 10×100μl 50×100μl
MF2304-B pCAMBIA2301 Control Vector (10ng/μl)       10μl 10μl

保存与运输条件:

保存:-80℃保存,6个月有效。

运输:干冰运输。

注意事项

1、感受态细胞应保存在-80℃,不可反复冻融和放置时间过长,以免降低感受态细胞的转化效率。

2、整个转化操作,严格根据相应温度及无菌条件要求进行。

3、加入质粒的体积不应大于感受态体积的1/10。质粒不纯或存在乙醇等有机物污染,会导致转化效率急剧下降。质粒增大一倍,转化效率下降一个数量级。

4、为确保最高转化效率,整个操作过程应尽量轻柔,并保持低温。

5、转化高浓度的质粒可相应减少最终涂板用量。

6、平板上克隆密度过大时,由于营养不足,克隆生长变慢,菌落变小。为获得大菌落,应减少质粒用量。

7、利福平浓度应≤25μg/ml,过高浓度不利于农杆菌生长,会降低其生长速度和转化效率。我司EHA101感受态计算转化效率时所用平板只含50μg/ml卡那霉素,若所用平板含20μg/ml利福平,则转化效率降低到1/2。

8、培养基中加入利福平的目的是防止杂菌生长、筛选农杆菌;根据所用菌株抗性加入链霉素或庆大霉素可防止Ti质粒丢失,但链霉素不利于农杆菌的转基因操作,一般培养农杆菌时不考虑链霉素或庆大霉素,因Ti质粒丢失的概率极低(基本可以忽略)。

9、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法

1、取-80℃保存的感受态细胞于室温或手心片刻待其部分融化,达到冰水混合状态时插入冰浴中使其完全融化。

2、往100μl感受态细胞悬液中加入1μg(体积不大于10μl)目的DNA,用手拨打管底使其混匀,依次于冰上静置5min,液氮5min,37℃水浴5min,冰浴5min。

3、加入700μl无抗生素的LB或YEB液体培养基,于28℃振荡培养2-3h。

4、6,000rpm离心1min,吸掉600ul上清,之后用枪轻轻吹打重悬菌体。之后加到含相应抗生素的LB或YEB平板上,用无菌玻棒轻轻的将细胞均匀涂开。室温正置10 min,待液体被吸收后,倒置平板,28℃培养2-3天。

    【注意】:当平板只含50μg/ml卡那霉素时,28℃培养48h即可;当平板中同时加入50μg/ml卡那霉素和20μg/ml利福平时,需28℃培养60h;若使用的平板含50μg/ml利福平,需在28℃培养72-90h。

 

附表1 固体和液体LB培养基配方

组分Component                    LB(液体)/升           LB(固体)/升          
胰蛋白胨Tryptone 10g 10g
酵母提取物Yeast extract 5g 5g
氯化钠NaCl 10g 10g
1N NaOH 调整pH至7.0 调整pH至7.0
琼脂Agar / 15g

附表2 固体和液体YEB培养基配方

组分Component                    YEB(液体)/升         YEB(固体)/升         
胰蛋白胨Tryptone 5g 5g
酵母提取物Yeast extract 1g 1g
牛肉浸膏Beef Extract 5g 5g
蔗糖Sucrose 5g 5g
七水硫酸镁MgSO4·7H2O 0.49g 0.49g
1N NaOH 调整pH至7.0 调整pH至7.0
琼脂Agar / 15g

附表3 常见农杆菌对抗生素敏感性总表

农杆菌菌株  羧苄(carb)    链霉素(strep) 利福平(rif)    庆大霉素(gent) 卡那霉素(kan)
EHA101 S S R S R
EHA105 S S R S S
LBA4404 S R R S S
GV3101 S S R R S
AGL1 R S R S S
【备注】:S代表敏感,R代表抗性。

 

EHA101菌株/农杆菌感受态细胞/GV3101 Chemically Competent Cell 农杆菌化学感受态细胞

EHA101菌株;农杆菌感受态细胞;Rifampicin(Rif)利福平;Kanamycin(kan)卡那霉素;EHA105;LBA4404;GV3101;AGL1;植物转基因研究;

货号 产品名称 规格    
MF2304-1000UL     GV3101 Chemically Competent Cell 农杆菌化学感受态细胞      10×100μl     
MF2304-5000UL GV3101 Chemically Competent Cell 农杆菌化学感受态细胞 50×100μl

产品描述:

GV3101菌株的染色体背景为C58,核基因含利福平抗性基因rif,为了便于转化操作,此菌株携带一无自身转运功能的胭脂碱型Ti质粒pMP90(pTiC58DT-DNA),此质粒含有vir基因(vir基因是T-DNA插入植物基因组必需的元件,pMP90(pTiC58DT-DNA)质粒自身的T-DNA转移功能虽被破坏,但可以帮助转入的双元载体T-DNA顺利转移)。pMP90(pTiC58DT-DNA)型Ti质粒携带筛选标签Gent,赋予GV3101菌株庆大霉素抗性,适用于拟南芥、烟草、玉米、土豆等植物的转基因操作。

我司提供的GV3101化学转化感受态细胞经特殊工艺制作,基因型C58 (rifR) Ti pMP90 (pTiC58DT-DNA) ( gentR) Nopaline,经pCAMBIA2301质粒检测转化效率>104cfu/μg DNA。

产品组分:

组分编号 组分名称

货号(规格)

MF2304-1000UL     MF2304-5000UL   
MF2304-A      GV3101 Chemically Competent Cell 10×100μl 50×100μl
MF2304-B pCAMBIA2301 Control Vector (10ng/μl)       10μl 10μl

保存与运输条件:

保存:-80℃保存,6个月有效。

运输:干冰运输。

注意事项

1、感受态细胞应保存在-80℃,不可反复冻融和放置时间过长,以免降低感受态细胞的转化效率。

2、整个转化操作,严格根据相应温度及无菌条件要求进行。

3、加入质粒的体积不应大于感受态体积的1/10。质粒不纯或存在乙醇等有机物污染,会导致转化效率急剧下降。质粒增大一倍,转化效率下降一个数量级。

4、为确保最高转化效率,整个操作过程应尽量轻柔,并保持低温。

5、转化高浓度的质粒可相应减少最终涂板用量。

6、平板上克隆密度过大时,由于营养不足,克隆生长变慢,菌落变小。为获得大菌落,应减少质粒用量。

7、利福平浓度应≤25μg/ml,过高浓度不利于农杆菌生长,会降低其生长速度和转化效率。我司EHA101感受态计算转化效率时所用平板只含50μg/ml卡那霉素,若所用平板含20μg/ml利福平,则转化效率降低到1/2。

8、培养基中加入利福平的目的是防止杂菌生长、筛选农杆菌;根据所用菌株抗性加入链霉素或庆大霉素可防止Ti质粒丢失,但链霉素不利于农杆菌的转基因操作,一般培养农杆菌时不考虑链霉素或庆大霉素,因Ti质粒丢失的概率极低(基本可以忽略)。

9、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法

1、取-80℃保存的感受态细胞于室温或手心片刻待其部分融化,达到冰水混合状态时插入冰浴中使其完全融化。

2、往100μl感受态细胞悬液中加入1μg(体积不大于10μl)目的DNA,用手拨打管底使其混匀,依次于冰上静置5min,液氮5min,37℃水浴5min,冰浴5min。

3、加入700μl无抗生素的LB或YEB液体培养基,于28℃振荡培养2-3h。

4、6,000rpm离心1min,吸掉600ul上清,之后用枪轻轻吹打重悬菌体。之后加到含相应抗生素的LB或YEB平板上,用无菌玻棒轻轻的将细胞均匀涂开。室温正置10 min,待液体被吸收后,倒置平板,28℃培养2-3天。

    【注意】:当平板只含50μg/ml卡那霉素时,28℃培养48h即可;当平板中同时加入50μg/ml卡那霉素和20μg/ml利福平时,需28℃培养60h;若使用的平板含50μg/ml利福平,需在28℃培养72-90h。

附表1 固体和液体LB培养基配方

组分Component                    LB(液体)/升           LB(固体)/升          
胰蛋白胨Tryptone 10g 10g
酵母提取物Yeast extract 5g 5g
氯化钠NaCl 10g 10g
1N NaOH 调整pH至7.0 调整pH至7.0
琼脂Agar / 15g

附表2 固体和液体YEB培养基配方

组分Component                    YEB(液体)/升         YEB(固体)/升         
胰蛋白胨Tryptone 5g 5g
酵母提取物Yeast extract 1g 1g
牛肉浸膏Beef Extract 5g 5g
蔗糖Sucrose 5g 5g
七水硫酸镁MgSO4·7H2O 0.49g 0.49g
1N NaOH 调整pH至7.0 调整pH至7.0
琼脂Agar / 15g

附表3 常见农杆菌对抗生素敏感性总表

农杆菌菌株  羧苄(carb)    链霉素(strep) 利福平(rif)    庆大霉素(gent) 卡那霉素(kan)
EHA101 S S R S R
EHA105 S S R S S
LBA4404 S R R S S
GV3101 S S R R S
AGL1 R S R S S
【备注】:S代表敏感,R代表抗性。

 

EHA101菌株/农杆菌感受态细胞/LBA4404 Chemically Competent Cell 农杆菌化学感受态细胞

EHA101菌株;农杆菌感受态细胞;Rifampicin(Rif)利福平;Kanamycin(kan)卡那霉素;EHA105;LBA4404;GV3101;AGL1;植物转基因研究;

货号 产品名称 规格    
MF2303-1000UL     LBA4404 Chemically Competent Cell 农杆菌化学感受态细胞     10×100μl      
MF2303-5000UL LBA4404 Chemically Competent Cell 农杆菌化学感受态细胞 50×100μl

产品描述:

LBA4404菌株的染色体背景为Ach5,核基因含利福平抗性基因rif,为了便于转化操作,此菌株携带一无自身转运功能的章鱼碱型Ti质粒pAL4404,此质粒含有vir基因(vir基因是T-DNA插入植物基因组必需的元件,pAL4404质粒自身的T-DNA转移功能虽被破坏,但可以帮助转入的双元载体T-DNA顺利转移)。pAL4404型Ti质粒携带筛选标签Strep,赋予LBA4404菌株链霉素抗性,适用于菸草、番茄、烟草等植物的转基因操作。

我司提供的LBA4404化学转化感受态细胞经特殊工艺制作,基因型Ach5 (rifR) Ti pAL4404 (strepR) Octopine,经pCAMBIA2301质粒检测转化效率>104cfu/μg DNA。

产品组分:

组分编号 组分名称

货号(规格)

MF2303-1000UL     MF2303-5000UL   
MF2303-A    LBA4404 Chemically Competent Cell 10×100μl 50×100μl
MF2303-B pCAMBIA2301 Control Vector (10ng/μl)      10μl 10μl

保存与运输条件:

保存:-80℃保存,6个月有效。

运输:干冰运输。

注意事项

1、感受态细胞应保存在-80℃,不可反复冻融和放置时间过长,以免降低感受态细胞的转化效率。

2、整个转化操作,严格根据相应温度及无菌条件要求进行。

3、加入质粒的体积不应大于感受态体积的1/10。质粒不纯或存在乙醇等有机物污染,会导致转化效率急剧下降。质粒增大一倍,转化效率下降一个数量级。

4、为确保最高转化效率,整个操作过程应尽量轻柔,并保持低温。

5、转化高浓度的质粒可相应减少最终涂板用量。

6、平板上克隆密度过大时,由于营养不足,克隆生长变慢,菌落变小。为获得大菌落,应减少质粒用量。

7、利福平浓度应≤25μg/ml,过高浓度不利于农杆菌生长,会降低其生长速度和转化效率。我司EHA101感受态计算转化效率时所用平板只含50μg/ml卡那霉素,若所用平板含20μg/ml利福平,则转化效率降低到1/2。

8、培养基中加入利福平的目的是防止杂菌生长、筛选农杆菌;根据所用菌株抗性加入链霉素或庆大霉素可防止Ti质粒丢失,但链霉素不利于农杆菌的转基因操作,一般培养农杆菌时不考虑链霉素或庆大霉素,因Ti质粒丢失的概率极低(基本可以忽略)。

9、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法

1、取-80℃保存的感受态细胞于室温或手心片刻待其部分融化,达到冰水混合状态时插入冰浴中使其完全融化。

2、往100μl感受态细胞悬液中加入1μg(体积不大于10μl)目的DNA,用手拨打管底使其混匀,依次于冰上静置5min,液氮5min,37℃水浴5min,冰浴5min。

3、加入700μl无抗生素的LB或YEB液体培养基,于28℃振荡培养2-3h。

4、6,000rpm离心1min,吸掉600ul上清,之后用枪轻轻吹打重悬菌体。之后加到含相应抗生素的LB或YEB平板上,用无菌玻棒轻轻的将细胞均匀涂开。室温正置10 min,待液体被吸收后,倒置平板,28℃培养2-3天。

     【注意】:当平板只含50μg/ml卡那霉素时,28℃培养48h即可;当平板中同时加入50μg/ml卡那霉素和20μg/ml利福平时,需28℃培养60h;若使用的平板含50μg/ml利福平,需在28℃培养72-90h。

附表1 固体和液体LB培养基配方

组分Component                   LB(液体)/升         LB(固体)/升        
胰蛋白胨Tryptone 10g 10g
酵母提取物Yeast extract 5g 5g
氯化钠NaCl 10g 10g
1N NaOH 调整pH至7.0 调整pH至7.0
琼脂Agar / 15g

附表2 固体和液体YEB培养基配方

组分Component                   YEB(液体)/升       YEB(固体)/升      
胰蛋白胨Tryptone 5g 5g
酵母提取物Yeast extract 1g 1g
牛肉浸膏Beef Extract 5g 5g
蔗糖Sucrose 5g 5g
七水硫酸镁MgSO4·7H2O 0.49g 0.49g
1N NaOH 调整pH至7.0 调整pH至7.0
琼脂Agar / 15g

附表3 常见农杆菌对抗生素敏感性总表

农杆菌菌株  羧苄(carb)  链霉素(strep) 利福平(rif)   庆大霉素(gent) 卡那霉素(kan)
EHA101 S S R S R
EHA105 S S R S S
LBA4404 S R R S S
GV3101 S S R R S
AGL1 R S R S S
【备注】:S代表敏感,R代表抗性。

 

EHA101 Chemically Competent Cell 农杆菌化学感受态细胞

EHA101菌株;农杆菌感受态细胞;Rifampicin(Rif)利福平;Kanamycin(kan)卡那霉素;EHA105;LBA4404;GV3101;AGL1;植物转基因研究;

 货号  产品名称  规格    
 MF2301-1000UL   EHA101 Chemically Competent Cell 农杆菌化学感受态细胞    10×100μl        
 MF2301-5000UL  EHA101 Chemically Competent Cell 农杆菌化学感受态细胞  50×100μl  

产品描述:

EHA101菌株的染色体背景为C58,核基因含利福平抗性基因rif,为了便于转化操作,此菌株携带一无自身转运功能的胭脂碱型Ti质粒pEHA101(pTiBo542DT-DNA),此质粒含有vir基因(vir基因是T-DNA插入植物基因组必需的元件,pEHA101(pTiBo542DT-DNA)质粒自身的T-DNA转移功能虽被破坏,但可以帮助转入的双元载体T-DNA顺利转移)。pEHA101(pTiBo542DT-DNA)质粒携带筛选标签kan,赋予EHA101菌株卡那霉素抗性,适用于玉米、水稻、烟草等植物的转基因操作。

我司提供的EHA101化学转化感受态细胞经特殊工艺制作,基因型为C58 (rifR) Ti pEHA101 (pTiBo542D T- DNA) (kanR) Nopaline,经pK7WGF2质粒(壮观霉素抗性)检测转化效率>104cfu/μg DNA。

 

产品组分:

组分编号           组分名称                                                    规格                储存方法         
MF2301-A EHA101 Chemically Competent Cell 10×100μl -80ºC保存
MF2301-B pK7WGF2 Control Vector (10ng/μl) 10μl -80ºC保存

 

保存与运输条件:

保存:-80℃保存,6个月有效。

运输:干冰运输。

 

注意事项

1、感受态细胞应保存在-80℃,不可反复冻融和放置时间过长,以免降低感受态细胞的转化效率。

2、整个转化操作,严格根据相应温度及无菌条件要求进行。

3、加入质粒的体积不应大于感受态体积的1/10。质粒不纯或存在乙醇等有机物污染,会导致转化效率急剧下降。质粒增大一倍,转化效率下降一个数量级。

4、为确保最高转化效率,整个操作过程应尽量轻柔,并保持低温。

5、转化高浓度的质粒可相应减少最终涂板用量。

6、平板上克隆密度过大时,由于营养不足,克隆生长变慢,菌落变小。为获得大菌落,应减少质粒用量。

7、利福平浓度应≤25μg/ml,过高浓度不利于农杆菌生长,会降低其生长速度和转化效率。我司EHA101感受态计算转化效率时所用平板只含50μg/ml卡那霉素,若所用平板含20μg/ml利福平,则转化效率降低到1/2。

8、培养基中加入利福平的目的是防止杂菌生长、筛选农杆菌;根据所用菌株抗性加入链霉素或庆大霉素可防止Ti质粒丢失,但链霉素不利于农杆菌的转基因操作,一般培养农杆菌时不考虑链霉素或庆大霉素,因Ti质粒丢失的概率极低(基本可以忽略)。

9、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法

1、取-80℃保存的感受态细胞于室温或手心片刻待其部分融化,达到冰水混合状态时插入冰浴中使其完全融化。

2、往100μl感受态细胞悬液中加入1μg(体积不大于10μl)目的DNA,用手拨打管底使其混匀,依次于冰上静置5min,液氮5min,37℃水浴5min,冰浴5min。

3、加入700μl无抗生素的LB或YEB液体培养基,于28℃振荡培养2-3h。

4、6,000rpm离心1min,吸掉600ul上清,之后用枪轻轻吹打重悬菌体。之后加到含相应抗生素的LB或YEB平板上,用无菌玻棒轻轻的将细胞均匀涂开。室温正置10 min,待液体被吸收后,倒置平板,28℃培养2-3天。

   【注意】:当平板只含转化所用双元载体抗生素时,28℃培养48h即可;当平板中加入双元载体抗生素的同时,再加入20μg/ml利福平时,需28℃培养60h;若使用的平板含50μg/ml利福平,需在28℃培养72-90h。

 

附表1 固体和液体LB培养基配方

组分Component                 

LB(液体)/升           

LB(固体)/升            

胰蛋白胨Tryptone

10g

10g

酵母提取物Yeast extract

5g

5g

氯化钠NaCl

10g

10g

1N NaOH

调整pH至7.0

调整pH至7.0

琼脂Agar

/

15g

附表2 固体和液体YEB培养基配方

组分Component                YEB(液体)/升         YEB(固体)/升       
胰蛋白胨Tryptone 5g 5g
酵母提取物Yeast extract 1g 1g
牛肉浸膏Beef Extract 5g 5g
蔗糖Sucrose 5g 5g
七水硫酸镁MgSO4·7H2O 0.49g 0.49g
1N NaOH 调整pH至7.0 调整pH至7.0
琼脂Agar / 15g

 

EHA101 Chemically Competent Cell 农杆菌化学感受态细胞

EHA101菌株;农杆菌感受态细胞;Rifampicin(Rif)利福平;Kanamycin(kan)卡那霉素;EHA105;LBA4404;GV3101;AGL1;植物转基因研究;

 货号  产品名称  规格    
 MF2301-1000UL   EHA101 Chemically Competent Cell 农杆菌化学感受态细胞    10×100μl        
 MF2301-5000UL  EHA101 Chemically Competent Cell 农杆菌化学感受态细胞  50×100μl  

EHA101菌株的染色体背景为C58,核基因含利福平抗性基因rif,为了便于转化操作,此菌株携带一无自身转运功能的胭脂碱型Ti质粒pEHA101(pTiBo542DT-DNA),此质粒含有vir基因(vir基因是T-DNA插入植物基因组必需的元件,pEHA101(pTiBo542DT-DNA)质粒自身的T-DNA转移功能虽被破坏,但可以帮助转入的双元载体T-DNA顺利转移)。pEHA101(pTiBo542DT-DNA)质粒携带筛选标签kan,赋予EHA101菌株卡那霉素抗性,适用于玉米、水稻、烟草等植物的转基因操作。

我司提供的EHA101化学转化感受态细胞经特殊工艺制作,基因型为C58 (rifR) Ti pEHA101 (pTiBo542D T- DNA) (kanR) Nopaline,经pK7WGF2质粒(壮观霉素抗性)检测转化效率>104cfu/μg DNA。

产品组分:

组分编号           组分名称                                                    规格                储存方法         
MF2301-A EHA101 Chemically Competent Cell 10×100μl -80ºC保存
MF2301-B pK7WGF2 Control Vector (10ng/μl) 10μl -80ºC保存

保存与运输条件:

保存:-80℃保存,6个月有效。

运输:干冰运输。

注意事项

1、感受态细胞应保存在-80℃,不可反复冻融和放置时间过长,以免降低感受态细胞的转化效率。

2、整个转化操作,严格根据相应温度及无菌条件要求进行。

3、加入质粒的体积不应大于感受态体积的1/10。质粒不纯或存在乙醇等有机物污染,会导致转化效率急剧下降。质粒增大一倍,转化效率下降一个数量级。

4、为确保最高转化效率,整个操作过程应尽量轻柔,并保持低温。

5、转化高浓度的质粒可相应减少最终涂板用量。

6、平板上克隆密度过大时,由于营养不足,克隆生长变慢,菌落变小。为获得大菌落,应减少质粒用量。

7、利福平浓度应≤25μg/ml,过高浓度不利于农杆菌生长,会降低其生长速度和转化效率。我司EHA101感受态计算转化效率时所用平板只含50μg/ml卡那霉素,若所用平板含20μg/ml利福平,则转化效率降低到1/2。

8、培养基中加入利福平的目的是防止杂菌生长、筛选农杆菌;根据所用菌株抗性加入链霉素或庆大霉素可防止Ti质粒丢失,但链霉素不利于农杆菌的转基因操作,一般培养农杆菌时不考虑链霉素或庆大霉素,因Ti质粒丢失的概率极低(基本可以忽略)。

9、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法

1、取-80℃保存的感受态细胞于室温或手心片刻待其部分融化,达到冰水混合状态时插入冰浴中使其完全融化。

2、往100μl感受态细胞悬液中加入1μg(体积不大于10μl)目的DNA,用手拨打管底使其混匀,依次于冰上静置5min,液氮5min,37℃水浴5min,冰浴5min。

3、加入700μl无抗生素的LB或YEB液体培养基,于28℃振荡培养2-3h。

4、6,000rpm离心1min,吸掉600ul上清,之后用枪轻轻吹打重悬菌体。之后加到含相应抗生素的LB或YEB平板上,用无菌玻棒轻轻的将细胞均匀涂开。室温正置10 min,待液体被吸收后,倒置平板,28℃培养2-3天。

   【注意】:当平板只含转化所用双元载体抗生素时,28℃培养48h即可;当平板中加入双元载体抗生素的同时,再加入20μg/ml利福平时,需28℃培养60h;若使用的平板含50μg/ml利福平,需在28℃培养72-90h。

附表1 固体和液体LB培养基配方

组分Component                 

LB(液体)/升           

LB(固体)/升            

胰蛋白胨Tryptone

10g

10g

酵母提取物Yeast extract

5g

5g

氯化钠NaCl

10g

10g

1N NaOH

调整pH至7.0

调整pH至7.0

琼脂Agar

/

15g

附表2 固体和液体YEB培养基配方

组分Component                YEB(液体)/升         YEB(固体)/升       
胰蛋白胨Tryptone 5g 5g
酵母提取物Yeast extract 1g 1g
牛肉浸膏Beef Extract 5g 5g
蔗糖Sucrose 5g 5g
七水硫酸镁MgSO4·7H2O 0.49g 0.49g
1N NaOH 调整pH至7.0 调整pH至7.0
琼脂Agar / 15g

 

Apoptosis inducer 凋亡诱导剂 Colistin Sulfate (Polymyxin E) 硫酸粘杆菌素

Polymyxin E多 粘菌素E;Colistin Sulfate 硫酸粘杆菌素;Cationic Antimicrobial Peptides 阳离子抗菌肽;Gram-negative bacteria 革兰氏阴性菌;Lipopolysaccharide(LPS)脂多糖;Bacillus polymyxa 多粘芽孢杆菌;Apoptosis inducer 凋亡诱导剂;CAS:1264-72-8

基本描述:

粘杆菌素(Colistin),也称为多粘菌素E(Polymyxin E),来自多粘菌素家族的阳离子环多肽,一种极其强效的抗生素,有效抵抗大多数革兰氏阴性芽孢杆菌。机理研究发现,粘杆菌素通过与质膜的相互作用能诱导凋亡,且具有极强的毒性。毒性效应包括神经毒性、肾毒性、脑血管的血管充血、极端的肾脏和中枢神经系统CNS的负面效应。还有研究显示粘杆菌素进入细胞后可沉淀胞浆成分,主要是核糖体。

作用机制(bacteriostatic antibiotics):

作为一种表面活性试剂,能够穿透和破坏细菌细胞膜。粘杆菌素具聚阳离子特性,呈有亲水性和亲脂质,能够与细菌质膜上的脂质结合,增强质膜的渗透性,导致细胞裂解而死。

抗菌谱(Spectrum):

具有快速的体外抑菌活性,主要抵抗革兰氏阴性菌。【注意】:本品仅能用作科研研究,不能用作人用或者兽用。

生理应用(Application):

1. 透化细菌细胞膜,研究甘露糖抵抗血凝反应(mannose-resistant hemagglutination,MRHA)和某些物种比如鲍曼不动杆菌(A. baumannii)的抗生素耐性实验.

2. 研究大鼠肾脏的肝中毒(hephrotoxicity);

3. 微生物药敏性实验,抗生素MICs,时间点-杀死的动力学分析;

4. 抵制绿脓杆菌(P.aeruginosa)的抗菌后效应;

5. 属于Colistin-Oxolinic Acid Blood Agar粘菌素-萘四酮酸(colistin-oxolinic acid)血琼脂的微生物研究关键成分,用来培养嗜氨基氨基杆菌(Aminobacter aminovorans)、芽孢杆菌种、生丝微菌属种(Hyphomicrobium species)、甲基杆菌属种(Methylobacterium species);

6. VCN抑制剂&VCNT抑制剂生长培养基的关键成分,用来分离奈瑟氏菌属种(Neisseria species);

基本特性:

1)CAS NO:1264-72-8

2)英文同义名:Polymixin E Sulfate;Mixture of Polymixin E Sulfate; Belcomycin;Colimycin;

3)中文同义名:硫酸多粘菌素E;多粘菌素E硫酸盐混合物;硫酸粘菌素;粘杆菌素硫酸盐;

4)分子式:2(C52H98N16O13).5(H2SO4)

5)分子量:2801.27

6)含量:≥19000IU/mg(on dry basis)

7)干燥失重:≤3.5%

8)外观:白色至类白色粉末

9)溶解性:易溶于水(50mg/ml),微溶于甲醇和乙醇,几乎不溶于丙酮、氯仿和乙醚

10)化学结构图: 

产品订购:

货号                  产品名称                                                         规格                货期            
MS0033-1G Colistin Sulfate (Polymyxin E) 硫酸粘杆菌素 1g 现货
MS0033-5G Colistin Sulfate (Polymyxin E) 硫酸粘杆菌素 5g 现货

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MS0032-1G Polymyxin B Sulphate 硫酸多粘菌素B 1g 现货
MS0032-5G Polymyxin B Sulphate 硫酸多粘菌素B 5g  现货

注意事项

为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。 

Bacitracin 杆菌肽

Peptide antibiotic 多肽抗生素;氨苄青霉素钠;盐酸万古霉素;噻孢霉素;羧苄青霉素钠盐;CAS:1405-87-4;

产品信息

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产品编号          CAS NO.        规格            

Bacitracin 杆菌肽

MS0030-1G 1405-87-4 1g  
Bacitracin 杆菌肽 MS0030-5G 1405-87-4 5g 

 

Bacitracin 杆菌肽 MS0030-25G 1405-87-4 25g

杆菌肽(Bacitracin,CAS NO:1405-87-4),一种环形多肽抗生素和肽聚糖合成抑制剂,通过抑制脂质焦磷酸酯的去磷酸化来阻止细菌细胞壁合成。抑制革兰氏阳性菌生长,包括化脓性链球菌和金黄色葡萄球菌。杆菌肽是蛋白二硫键异构酶(PDI)抑制剂,可阻断载体磷脂的再生,刺激5-羟色胺受体和增加血管阻力。本品由各种抗生素多肽片段组成的混合物,包括A,A1,B,B1,B2,C,E,F,G和X。其中杆菌肽A具有最高的抗菌活性,杆菌肽B1和B2两种组分混合在一起的活性相当于杆菌肽A的90%,其他结构类似物目前未广泛研究,可能具有微弱的活性。

本品以粉末形式提供,USP级别,可溶于水配制成50mg/ml的储存液,经0.22µm滤膜过滤除菌后,-20℃冻存,避免反复冻融,至少6个月稳定。

产品特性

1)CAS NO:1405-87-4

2)同义名:Bacitracin;枯草菌素;枯草菌肽;枯草杆菌肽;杆菌酞;杆菌素;枯草杆菌素;亚枯草菌素;

3)分子式:C66H103N17O16S

4)分子量:1422.69g/mol

5)外观:白色至浅黄色粉末

6)溶解性:溶于水(50 mg/ml)

7)活性:>60 u/mg(dry basis)

8)化学结构式:

保存与运输方法

保存:2-8°C干燥保存,长期不用置于-20°C保存,2年有效。

运输:常温运输。

注意事项

为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

Bacitracin 杆菌肽 CAS:1405-87-4

Peptide antibiotic 多肽抗生素;氨苄青霉素钠;盐酸万古霉素;噻孢霉素;羧苄青霉素钠盐;CAS:1405-87-4;

产品信息

产品名称                 

产品编号          CAS NO.        规格            

Bacitracin 杆菌肽

MS0030-1G 1405-87-4 1g  
Bacitracin 杆菌肽 MS0030-5G 1405-87-4 5g 

 

Bacitracin 杆菌肽 MS0030-25G 1405-87-4 25g

杆菌肽(Bacitracin,CAS NO:1405-87-4),一种环形多肽抗生素和肽聚糖合成抑制剂,通过抑制脂质焦磷酸酯的去磷酸化来阻止细菌细胞壁合成。抑制革兰氏阳性菌生长,包括化脓性链球菌和金黄色葡萄球菌。杆菌肽是蛋白二硫键异构酶(PDI)抑制剂,可阻断载体磷脂的再生,刺激5-羟色胺受体和增加血管阻力。本品由各种抗生素多肽片段组成的混合物,包括A,A1,B,B1,B2,C,E,F,G和X。其中杆菌肽A具有最高的抗菌活性,杆菌肽B1和B2两种组分混合在一起的活性相当于杆菌肽A的90%,其他结构类似物目前未广泛研究,可能具有微弱的活性。

本品以粉末形式提供,USP级别,可溶于水配制成50mg/ml的储存液,经0.22µm滤膜过滤除菌后,-20℃冻存,避免反复冻融,至少6个月稳定。

产品特性

1)CAS NO:1405-87-4

2)同义名:Bacitracin;枯草菌素;枯草菌肽;枯草杆菌肽;杆菌酞;杆菌素;枯草杆菌素;亚枯草菌素;

3)分子式:C66H103N17O16S

4)分子量:1422.69g/mol

5)外观:白色至浅黄色粉末

6)溶解性:溶于水(50 mg/ml)

7)活性:>60 u/mg(dry basis)

8)化学结构式:

保存与运输方法

保存:2-8°C干燥保存,长期不用置于-20°C保存,2年有效。

运输:常温运输。

注意事项

为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

Bacitracin 杆菌肽 氨苄青霉素钠 盐酸万古霉素 噻孢霉素 羧苄青霉素钠盐 CAS:1405-87-4

Peptide antibiotic 多肽抗生素;氨苄青霉素钠;盐酸万古霉素;噻孢霉素;羧苄青霉素钠盐;CAS:1405-87-4;

产品信息

产品名称                 

产品编号          CAS NO.        规格          

Bacitracin 杆菌肽

MS0030-1G 1405-87-4 1g
Bacitracin 杆菌肽 MS0030-5G 1405-87-4 5g 

 

Bacitracin 杆菌肽 MS0030-25G 1405-87-4 25g

产品描述

杆菌肽(Bacitracin,CAS NO:1405-87-4),一种环形多肽抗生素和肽聚糖合成抑制剂,通过抑制脂质焦磷酸酯的去磷酸化来阻止细菌细胞壁合成。抑制革兰氏阳性菌生长,包括化脓性链球菌和金黄色葡萄球菌。杆菌肽是蛋白二硫键异构酶(PDI)抑制剂,可阻断载体磷脂的再生,刺激5-羟色胺受体和增加血管阻力。本品由各种抗生素多肽片段组成的混合物,包括A,A1,B,B1,B2,C,E,F,G和X。其中杆菌肽A具有最高的抗菌活性,杆菌肽B1和B2两种组分混合在一起的活性相当于杆菌肽A的90%,其他结构类似物目前未广泛研究,可能具有微弱的活性。

本品以粉末形式提供,USP级别,可溶于水配制成50mg/ml的储存液,经0.22µm滤膜过滤除菌后,-20℃冻存,避免反复冻融,至少6个月稳定。

产品特性

1)CAS NO:1405-87-4

2)同义名:Bacitracin;枯草菌素;枯草菌肽;枯草杆菌肽;杆菌酞;杆菌素;枯草杆菌素;亚枯草菌素;

3)分子式:C66H103N17O16S

4)分子量:1422.69g/mol

5)外观:白色至浅黄色粉末

6)溶解性:溶于水(50 mg/ml)

7)活性:>60 u/mg(dry basis)

8)化学结构式:

保存与运输方法

保存:2-8°C干燥保存,长期不用置于-20°C保存,2年有效。

运输:常温运输。

注意事项

为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

百日咳毒素(百日咳杆菌)

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百日咳毒素(百日咳杆菌)

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  • 参考文献

百日咳毒素(百日咳杆菌)百日咳毒素(百日咳杆菌)

可提供优质抗原性的超纯百日咳毒素



● 更高的特异性和敏感性

● 产品间批次差异小

● 可重复批量放大

● 延长保质期的冻干形式

 


◆产品规格


别名:胰岛激活蛋白,PTX,全毒素

来源:百日咳博德特氏菌,菌株165。

CAS:70323-44-3 

配方:冻干。含有磷酸钠和氯化钠。

纯度:≥99%

纯度细节:

  在12%聚丙烯酰胺SDS-尿素凝胶上运行时,该产品以5个不同的条带迁移。五个条带由一个A原子亚基(S1,MW=26.2 kDa)和四个B寡聚体亚基(S2,S3,2x S4,S5;MW's:21.9,21.9,12.1,10.9 kDa)组成。

运输:室温

长期储存:+ 4°C

使用/稳定性:

  将该制剂冻干,无菌包装并真空密封。不要旋涡。在重组前和之后储存于4°C。不要冻结。这种毒素被认为具有生物活性。冻干制剂将保持活性至少一年。用无菌水复溶后,如果在4℃下储存,该产品应保持活性至少6个月。每个小瓶在用无菌蒸馏水复溶为500 μL时,pH 7.0下,在50 mM氯化钠、10 mM磷酸钠缓冲液中含有50 μg百日咳毒素。毒素具有不溶性,所得到的悬浮液应在取出等分试样之前通过温和混合而不是涡旋进行匀液。不要无菌过滤。为了与纯化的G蛋白一起使用,毒素必须在结构上被转化成人为产生与G蛋白直接相互作用的毒素形式。

  参见Kaslow等(1987)

  本产品只能由技术人员使用。应采用良好的实验室设备:切勿口腔吸移;戴手套、穿着防护服;避免吸入;避免与皮肤接触或开放伤口;用肥皂和水彻底清洗与毒素接触的身体任何区域;用水洗眼十五分钟;运动护理在皮下注射针头处理以避免无意中的静脉或皮下注射。

处理:

  无菌包装,真空密封。不要旋涡,不要冻结。

科学背景:

  百日咳毒素由具有NAD +糖水解酶和ADP-核糖基转移酶活性的酶活性A原子亚基(S-1)和B寡聚体亚基(S-2,S-3,S-4和S-5)组成),其负责将天然毒素附着到真核细胞表面。百日咳毒素通过ADP核糖基化A亚基的羧基末端附近的半胱氨酸将来自受体的G蛋白解偶联。


参考文献

[1] 

Comprehensive analysis of chemokine-induced cAMP-inhibitory responses using a real-time luminescent biosensor: V. Felouzis, et al.; Cell. Signal. 28, 120 (2016), Application(s): Cell culture , Abstract;

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In vivo immunomodulatory effects of adipose-derived mesenchymal stem cells conditioned medium in experimental autoimmune encephalomyelitis: F. Yousefi, et al.; Immunol. Lett. 172, 94 (2016),Application(s): Injection into mice, Abstract;

[4] 

Metformin ameliorates the development of experimental autoimmune encephalomyelitis by regulating T helper 17 and regulatory T cells in mice: Y. Sun, et al.; J. Neuroimmunol. 292, 58 (2016), Application(s):Injected into mice, AbstractFull Text

[5] 

Treatment with NAD+ inhibited experimental autoimmune encephalomyelitis by activating AMPK/SIRT1 signaling pathway and modulating Th1/Th17 immune responses in mice: J. Wang, et al.; Int. Immunopharmacol. 39, 287 (2016), Application(s): Experimental autoimmune encephalomyelitis (EAE) induction, mice, Abstract;

[6] 

GABAB receptors inhibit low-voltage activated and high-voltage activated Ca2+ channels in sensory neurons via distinct mechanisms: D. Huang, et al.; Biochem. Biophys. Res. Commun. 465, 188 (2015), Application(s):LVA and HVA channel inhibition , Abstract;

[7] 

Protective effect of a novel Rho kinase inhibitor WAR-5 in experimental autoimmune encephalomyelitis by modulating inflammatory response and neurotrophic factors: Y.H. Li, et al.; Exp. Mol. Pathol. 99, 220 (2015),Application(s): Injection into mouse abdominal cavity, Abstract;

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Amidate prodrugs of 9-[2-(phosphonomethoxy)ethyl]adenine as inhibitors of adenylate cyclase toxin from Bordetella pertussis: M. Šmídková, et al.; Antimicrob. Agents Chemother. 58, 664 (2014), Application(s): Cell Culture, AbstractFull Text

[9] 

Myelin Oligodendrocyte Glycoprotein (MOG35-55) Induced Experimental Autoimmune Encephalomyelitis (EAE) in C57BL/6 Mice: S. Bittner, et al.; J. Vis. Exp. 86, e51275 (2014), Application(s): Immunization,AbstractFull Text

[10] 

The therapeutic effects of MSc1 nanocomplex, synthesized by nanochelating technology, on experimental autoimmune encephalomyelitic C57/BL6 mice: S. Fakharzadeh, et al.; Int. J. Nanomedicine 9, 3841 (2014),Application(s): Immunization, AbstractFull Text

[11] 

Human apolipoprotein AI induces cyclooxygenase-2 expression and prostaglandin I-2 release in endothelial cells through ATP-binding cassette transporter A1: D. Liu, et al.; Am. J. Physiol. Cell Physiol. 301, C739 (2011), Application(s): Treatment of HUVEC, AbstractFull Text

[12] 

A proposed mechanism of ADP-ribosylation catalyzed by the pertussis toxin S1 subunit: C. Locht& R. Antoine; Biochimie 77, 333 (1995), Abstract;

[13] 

Pertussis toxin and target eukaryotic cells: binding, entry, and activation: H.R. Kaslow& D.L. Burns; FASEB J.6, 2684 (1992), Abstract;

[14] 

Structure-activity analysis of the activation of pertussis toxin: H.R. Kaslow et al.; Biochemistry 26, 123 (1987),Abstract;

[15] 

Induction of a novel morphological response in Chinese hamster ovary cells by pertussis toxin: E.L. Hewlett et al.; Infect. Immun. 40, 1198 (1983), Abstract;

[16] 

Subunit structure of islet-activating protein, pertussis toxin, in conformity with the A-B model: M. Tamura et al.; Biochemistry 21, 5516 (1982), Abstract;


产品列表

产品编号 产品名称 产品规格 产品等级 备注
BML-G100-0050 百日咳毒素(百日咳杆菌)
 Pertussis toxin (Bordetella pertussis)
50 μg

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