喜树碱(Camptothecin,CPT),从Camptotheca acuminata(喜树)的树皮和树干中分离到的一种具细胞毒性的喹啉类生物碱,是一种有效的拓扑异构酶I(Topoisomerase I)抑制剂(IC50=0.68 μM),不可逆结合DNA-Topo I裂解复合物,诱导DNA链的断裂。喜树碱在各种实验肿瘤模型中表现出强抗肿瘤活性,同时抑制哺乳动物细胞的DNA和RNA合成。在HT-29细胞中呈现细胞毒性(IC50=10nM),完整细胞中低至51nM的工作浓度诱发DNA损伤,而在纯化分离的细胞核中低至12nM诱发DNA损伤。低浓度的喜树碱可停滞细胞周期在S期,并以细胞周期依赖或者非依赖的方式诱导大量正常或癌变细胞发生凋亡。
产品特性
1) 化学名:(4S)-4-ethyl-4-hydroxy-1H-pyrano[3′,4′:6,7]indolizino[1,2-b]quinoline-3,14(4H,12H)-dione
2) 同义名:Campathecin, (S)-(+)-Camptothecin, NSC-100880
3) CAS NO:7689-03-4
4) MDLNO:MFCD00081076
5) 分子式:C20H16N2O4
6) 分子量:348.35
7) 纯度:≥98%
8) 外观:浅黄色至极深黄色和浅棕色至棕色粉末
9) 溶解性:溶于DMSO(≥3mg/ml,可能需超声助溶),不溶于乙醇和水
10) 化学结构式:
保存与运输方法
保存:-20℃避光干燥保存,频繁使用亦可置于2-8℃避光干燥保存,至少2年有效。
运输:常温运输。
储存液制备
质量
溶剂体积 浓度 |
1mg | 5mg | 10mg |
1mM | 2.8707 mL | 14.3534 mL | 28.7068 mL |
5mM | 0.5741 mL | 2.8707 mL | 5.7414 mL |
10mM | 0.2871 mL | 1.4353 mL | 2.8707 mL |
【温馨提示】:请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液;一旦配成溶液,请分装保存,避免反复冻融造成的产品失效。储备液置于-80°C避光保存,约6个月有效;-20°C避光保存,约1个月有效。
使用方法(凋亡模型诱导)
1) 储存液:取喜树碱粉末于室温回温至少20min,低速离心后,直接往管内加入一定量无水DMSO使其充分溶解配置成5mM储存液(比如:5mg粉末加入2.8707mL DMSO即得到5mM储存液),根据单次用量,分装冻存后≤-20℃保存,避免反复冻融。
2) 工作液:于实验前用完全培养基稀释喜树碱储存液使其工作浓度在1-10μM,最佳的工作浓度需根据实际情况优化调整。同时,准备用完全培养基等倍数稀释的DMSO作为阴性对照。
3) 操作流程:j在合适的培养皿或培养瓶内培养细胞,使其密度在0.5×106/ml;k用PBS清洗细胞2次;l用新鲜配置的工作液重悬细胞,于37℃,5% CO2培养箱内孵育1-24h。建议初次实验,做一个时间周期实验以了解待研究细胞对药品凋亡诱导的敏感程度。m离心收集细胞,之后用合适的方法来评估凋亡水平。【注】:凋亡诱导化合物还包括:放线菌素D、放线菌酮、地塞米松、星孢菌素、依托泊苷、5-氟尿嘧啶等。
注意事项
1) 我本品具细胞毒性,具潜在的致癌性和致畸性,操作时一定注意防护避免接触皮肤和身体。
2) 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
相关产品
名称 | 规格 | |
Dexamethasone地塞米松 | 25mg | |
Dexamethasone (10 mM)地塞米松(10 mM) | 1ml | |
Camptothecin喜树碱 | 25mg | |
Camptothecin (10mM)喜树碱(10mM) | 1ml | |
Etoposide依托泊苷 | 100mg | |
CCCP (50 mM)凋亡诱导剂/质子载体 | 100μl | |
CCCP (Powder)凋亡诱导剂/质子载体 | 10mg | |
FCCP (50 mM)凋亡诱导剂/质子载体 | 100μl | |
FCCP (Powder)凋亡诱导剂/质子载体 | 10mg | |
Staurosporine星孢菌素 | 1mg |