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Zeocin博莱霉素（博来霉素）CAS NO.：11006-33-0

发表于由

Zeocin博莱霉素（博来霉素）；Phleomycin腐草霉素；Sh ble基因；Hygromycin B潮霉素B；G418遗传霉素；CAS NO.：11006-33-0

产品描述

Zeocin是一种作用于真核和原核细胞的选择性抗生素。来自Streptoalloteichus hindustanus的Sh ble基因赋予Zeocin抗性，该基因编码一种13,665Da大小的蛋白，以化学计量方式结合Zeocin，抑制其DNA双链切割活性。因此，能表达此蛋白的真核和原核宿主细胞具有Zeocin抗性。

Zeocin是腐草霉素D1（Phleomycin D1）的商业名称，是一种铜离子螯合的糖肽抗生素（来源于链霉菌Streptomyces verticillus的突变株），铜离子的存在使其呈蓝色，此铜螯合的形式为无活性。当抗生素进入细胞后，二价铜离子（Cu2+）被还原为一价铜离子（Cu+），并被细胞内的巯基化合物去除。铜离子被去除后，Zeocin被活化，嵌入DNA使其断裂，最终导致细胞死亡。Zeocin作用谱广泛，对细菌、真核微生物、植物和哺乳动物细胞具很强的毒性。

本品以蓝色粉末形式提供，低内毒素水平，达细胞培养级。通常情况，哺乳动物细胞的筛选浓度范围是50-400 µg/ml，细菌的筛选浓度为25 µg/ml。

我司还提供无菌溶液形式的Zeocin（货号：MS0009-125MG，MS0009-1000MG），浓度是100mg/ml，使用起来更加方便，只需直接加入培养基到所需工作浓度即可。

产品特性

1） CAS NO.：11006-33-0

2） 外观：蓝色粉末

3） 内毒素：＜1 EU/mg

4） 溶解性：易溶于水（>500 mg/ml）

5） 质量控制：分别对Zeocin敏感或Zeocin耐性的哺乳动物细胞测定抗生素活性。

保存与运输方法

保存： +4℃干燥保存，至少1年有效。

运输：室温运输。

注意事项

1） Zeocin粉末容易受潮，一定要注意干燥保存。每一次使用完后需盖紧管子。

2） Zeocin是一种不稳定化合物，在高pH和低pH或存在弱氧化剂的情况下会发生不可逆变性。

3） Zeocin对高浓度酸和碱都很敏感，但短期暴露在弱酸下能耐受。

4） Zeocin对光敏感，需将抗生素，或含该抗生素的平板或培养基置于黑暗处。

5） Zeocin有毒，操作时需注意防护，切勿与身体或皮肤直接接触。

6） Zeocin™是Invivogen公司的商标产品。

7） 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

母液制备

1）将低温保存的Zeocin置于室温回温至少20min，加入适量HEPES buffer（5g/L, pH 7.2±0.1），充分溶解，配制成100mg/ml溶液。2）用0.22µm滤膜过滤除菌。3）溶液置于4℃保存12个月有效，或-20℃保存，18个月有效。

操作步骤（以哺乳动物细胞为例）

【注1】：Zeocin的杀灭机制不同于新生霉素（neomycin）和潮霉素B（hygromycin B），细胞不会聚集成团和从培养板表面脱落。一旦接触到Zeocin，敏感细胞会出现如下的形态变化：1）细胞体积明显增加（类似于巨细胞病毒感染容纳性细胞引起的肿大效应）；2）异常的细胞形状包括细胞长臂（long appendages）出现；3）胞浆内出现大型空泡（源于内质网、高尔基体或支撑蛋白的破裂）；4）质膜和核膜破裂，导致膜上出现许多孔。这些敏感细胞最终会完全破损，仅仅以细胞碎片的形式存在。

【注2】：Zeocin抗性细胞按正常周期分化产生不同于敏感细胞的克隆。抗性细胞在形态上，与未接触Zeocin™的正常细胞没有任何差异。

【注3】：Zeocin用于哺乳动物细胞筛选常用浓度为50-1000µg/ml（平均常用浓度为250-400μg/mL），影响筛选浓度的主要因素包括离子强度，细胞类型，细胞密度以及生长速率。以下步骤仅作参考，请根据自身实验体系做适当调整。

一、细胞对Zeocin敏感性的确定（杀灭曲线建立）

1) 重新铺板或者将满盘细胞重新分盘，使得细胞密度约25%，按照8个平板/组准备，培养24h，去除旧培养基。

2) 加入含不同浓度Zeocin的筛选培养基，Zeocin浓度可设置为0, 50, 100, 200, 400, 600, 800和1000 μg/ml，每个浓度做3个平行；也可根据自身实验体系，设置不同的浓度梯度。

3) 每3-4天更换新鲜的筛选培养基，并观察存活细胞的比例。选择在合适时间（1-2周内）杀死大多数细胞的浓度为最佳工作浓度。【注】：若是难以在显微观察下区分活细胞，建议使用台盼蓝染色来计算存活细胞的数量，以确定Zeocin的最适浓度。

二、筛选稳定转染细胞系

1) 转染细胞，用100mm培养皿进行培养。以未转染的细胞作为阴性对照。

2) 转染后，用预热的1X PBS洗涤一次，加入新鲜培养基。

3) 转染48-72h后，用含有最佳浓度Zeocin（由灭杀曲线确定）的新鲜培养基筛选细胞。为了更好的鉴定和筛选细胞集落，建议将细胞按比例稀释成一系列浓度。

【注】：若待筛选细胞对Zeocin的抗性明显强于大部分细胞，按照以下方法克服此类耐性：用含Zeocin培养基进行细胞分盘，置于37°C孵育2-3h，使得细胞贴壁。然后将细胞置于4°C，2h。记得使用Hepes作为培养基的缓冲体系。重新将细胞置于37°C孵育。4°C孵育细胞的目的是短时间内终止细胞分化，使得Zeocin能发挥作用，杀死细胞。

4) 每3-4天更换新鲜的选择培养基，直到出现细胞集落。

5) 挑选并转移克隆到96或48孔板中。在进行更大孔径培养板或培养皿上扩大培养之前，确保培养细胞密度近100%。

三、稳定转染细胞系的维持培养

可采取以下方式维持培养稳定转染细胞：

1）使用含相同剂量Zeocin的筛选培养基来维持培养；

2）降低Zeocin剂量为原来的一半进行维持培养；

3）使用正好能预防敏感细胞生长但不足以致死的Zeocin剂量来维持培养【根据杀灭曲线来判断】。

相关产品 

名称 简单描述
Blasticidin S杀稻瘟菌素S（灭瘟素） bsr/BSD基因筛选抗生素
Phleomycin腐草霉素 Sh ble基因筛选抗生素
Zeocin博莱霉素 Sh ble基因筛选抗生素
G418 Sulfate (Geneticin)遗传霉素 neo基因筛选抗生素
Puromycin Dihydrochloride嘌呤霉素盐酸盐 pac基因筛选抗生素
Hygromycin B潮霉素B hph基因筛选抗生素

附表一某些哺乳动物细胞的Zeocin工作浓度

Zeocin常用的工作浓度为100μg/ml，但是，最佳的工作浓度需要根据细胞类型和实际的实验体系来确定。某些哺乳动物细胞的建议工作浓度列在下表：

细胞系 培养基 Zeocin工作浓度（μg/ml）
B16 RPMI 20-250
CHO DMEM 100-500
COS DMEM 100-400
HEK293 DMEM 100-400
HeLa DMEM 50-100
J558L RPMI 400
MCF-7 DMEM 100-400
MEFs DMEM 200-400
THP-1 RPMI 200

 

博莱霉素（Bleomycin Sulfate）是由轮枝链霉菌（Streptomyces verticillus）代谢产生的一种糖肽抗肿瘤抗生素

发表于由

Bleomycin Sulfate硫酸博莱霉素；Bleomycin A2博莱霉素A2；Bleomycin B2博莱霉素B2；Bleomycin A5 Hydrochloride盐酸平阳霉素；CAS：9041-93-4；

产品描述

博莱霉素（Bleomycin Sulfate）是由轮枝链霉菌（Streptomyces verticillus）代谢产生的一种糖肽抗肿瘤抗生素。作用机理在于引起肿瘤细胞内的ssDNA和dsDNA断裂，从而中断细胞周期。研究认为博莱霉素通过螯合金属离子，产生一种假酶，与氧气反应生成超氧化物和氢氧自由基，从而实现DNA断裂。博莱霉素是一种凋亡诱导剂和调节剂，抑制肿瘤血管形成。博莱霉素可用来治疗霍奇金淋巴病（与阿霉素联合使用）、鳞状细胞癌、睾丸癌，以及肺纤维化动物模型的建立。

本品是博莱霉素硫酸盐构成的混合物，主要含博莱霉素A2和博莱霉素B2，不同的异构体在氨基末端结构不同，生物活性也有所差异。本品纯度≥90% (A₂ +B₂)，活性为1.5-2.0 units/mg solid。用于细胞培养的常用工作浓度范围是10-100 μg/ml。

产品特性

1） CAS NO：9041-93-4  

2） 同义名：Bleomycin sulfate salt; NSC125066; Blenoxane; Blexane; Bleo;硫酸博来霉素；争光霉素；

3） 分子式：C55H85N17O25S4

4） 分子量：1512.62

5） 纯度：≥90% (A₂ +B₂)

6） 效价：1.5-2.0 units/mg solid

7） 外观：白色至微黄色粉末

8） 溶解性：溶于水（≥20mg/ml）、DMSO（≥10mg/ml）、甲醇，微溶于乙醇

保存与运输方法

保存：2-8℃干燥保存，也可置于-20ºC干燥长期保存，至少2年有效。

运输：室温运输。

注意事项

1） 关于化合物溶解性：产品特性内的“≥”表明溶于标示浓度，但饱和溶解度未知。不同批次化合物的溶解度会有差异。

2） 为了让化合物更好的溶解，可通过37℃加热或（和）超声波水浴中震动片刻来处理。若实验所需浓度过大甚至达产品溶解极限，请添加助溶剂助溶或自行调整浓度。

3） 本品仅用作科研用途，不得用作临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，绝对禁止用在人身上。

4） 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

储存液制备

          质量

溶剂体积

浓度

 1mg 5mg 10mg
1mM 0.6611 mL                           3.3055 mL                           6.6110 mL                              
5mM                     0.1322 mL 0.6611 mL 1.3222 mL
10mM 0.0661 mL 0.3306 mL 0.6611 mL

 使用方法【源自文献，仅作参考】

文献1，Fanny M et al. The IL-33 Receptor ST2 Regulates Pulmonary Inflammation and Fibrosis to Bleomycin. Front Immunol. 2018 Jun 25;9:1476. PMID: 29988569

体内研究（动物模型）：

细胞类型（Cell type）：8- to 14-week-old C57BL/6J WT mice; ST2-deficient mice (ST2−/−) on C57BL6/J background;

实验方法（Assay）：Bleomycin sulfate (7.5 and 3 mg/kg for 1 and 11–14 days experiment, respectively) in saline or saline alone were given through the airways by nasal instillation in a volume of 40 µl under light ketamine–xylasine anesthesia. The mice were monitored daily.
文献2，Kato S et al. Changes in pulmonary endothelial cell properties during bleomycin-induced pulmonary fibrosis. Respir Res. 2018 Jun 26;19(1):127. PMID: 29940932

体内研究（动物模型）：

动物模型（Animal Model）：Male C57/BL6 mice 8 to 12 weeks old (20–25 g)

实验方法（Assay）：Male C57/BL6 mice 8 to 12 weeks old (20–25 g) were anesthetized with intraperitoneal ketamine (80 mg/kg) and xylazine (10 mg/kg) andreceived a single tracheal injection of 2 mg/kg bleomycin sulfate in 50 μL sterile saline using a Microsprayer Aerosolizeron day 0. All mice were killed by cervical dislocation and lungs were harvested at day 7, 14, 21 or 28 after intratracheal bleomycin or saline treatment.

相关产品

名称 规格
        Bleomycin Sulfate硫酸博莱霉素 10mg
Bleomycin A5 Hydrochloride盐酸博莱霉素A5（平阳霉素)            10mg
Phleomycin (20mg/ml)腐草霉素（20 mg/ml） 1ml
Zeocin (100mg/ml)  博莱霉素（100 mg/ml） 125mg               

 

博莱霉素（Bleomycin Sulfate）是由轮枝链霉菌（Streptomyces verticillus）代谢产生的一种糖肽抗肿瘤抗生素

发表于由

Bleomycin Sulfate硫酸博莱霉素；Bleomycin A2博莱霉素A2；Bleomycin B2博莱霉素B2；Bleomycin A5 Hydrochloride盐酸平阳霉素；CAS：9041-93-4；

产品描述

博莱霉素（Bleomycin Sulfate）是由轮枝链霉菌（Streptomyces verticillus）代谢产生的一种糖肽抗肿瘤抗生素。作用机理在于引起肿瘤细胞内的ssDNA和dsDNA断裂，从而中断细胞周期。研究认为博莱霉素通过螯合金属离子，产生一种假酶，与氧气反应生成超氧化物和氢氧自由基，从而实现DNA断裂。博莱霉素是一种凋亡诱导剂和调节剂，抑制肿瘤血管形成。博莱霉素可用来治疗霍奇金淋巴病（与阿霉素联合使用）、鳞状细胞癌、睾丸癌，以及肺纤维化动物模型的建立。

本品是博莱霉素硫酸盐构成的混合物，主要含博莱霉素A2和博莱霉素B2，不同的异构体在氨基末端结构不同，生物活性也有所差异。本品纯度≥90% (A₂ +B₂)，活性为1.5-2.0 units/mg solid。用于细胞培养的常用工作浓度范围是10-100 μg/ml。

产品特性

1） CAS NO：9041-93-4  

2） 同义名：Bleomycin sulfate salt; NSC125066; Blenoxane; Blexane; Bleo;硫酸博来霉素；争光霉素；

3） 分子式：C55H85N17O25S4

4） 分子量：1512.62

5） 纯度：≥90% (A₂ +B₂)

6） 效价：1.5-2.0 units/mg solid

7） 外观：白色至微黄色粉末

8） 溶解性：溶于水（≥20mg/ml）、DMSO（≥10mg/ml）、甲醇，微溶于乙醇

保存与运输方法

保存：2-8℃干燥保存，也可置于-20ºC干燥长期保存，至少2年有效。

运输：室温运输。

注意事项

1） 关于化合物溶解性：产品特性内的“≥”表明溶于标示浓度，但饱和溶解度未知。不同批次化合物的溶解度会有差异。

2） 为了让化合物更好的溶解，可通过37℃加热或（和）超声波水浴中震动片刻来处理。若实验所需浓度过大甚至达产品溶解极限，请添加助溶剂助溶或自行调整浓度。

3） 本品仅用作科研用途，不得用作临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，绝对禁止用在人身上。

4） 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

储存液制备

          质量

溶剂体积

浓度

 1mg 5mg 10mg
1mM 0.6611 mL                           3.3055 mL                           6.6110 mL                              
5mM                     0.1322 mL 0.6611 mL 1.3222 mL
10mM 0.0661 mL 0.3306 mL 0.6611 mL

 

使用方法【源自文献，仅作参考】

文献1，Fanny M et al. The IL-33 Receptor ST2 Regulates Pulmonary Inflammation and Fibrosis to Bleomycin. Front Immunol. 2018 Jun 25;9:1476. PMID: 29988569

体内研究（动物模型）：

细胞类型（Cell type）：8- to 14-week-old C57BL/6J WT mice; ST2-deficient mice (ST2−/−) on C57BL6/J background;

实验方法（Assay）：Bleomycin sulfate (7.5 and 3 mg/kg for 1 and 11–14 days experiment, respectively) in saline or saline alone were given through the airways by nasal instillation in a volume of 40 µl under light ketamine–xylasine anesthesia. The mice were monitored daily.
文献2，Kato S et al. Changes in pulmonary endothelial cell properties during bleomycin-induced pulmonary fibrosis. Respir Res. 2018 Jun 26;19(1):127. PMID: 29940932

体内研究（动物模型）：

动物模型（Animal Model）：Male C57/BL6 mice 8 to 12 weeks old (20–25 g)

实验方法（Assay）：Male C57/BL6 mice 8 to 12 weeks old (20–25 g) were anesthetized with intraperitoneal ketamine (80 mg/kg) and xylazine (10 mg/kg) andreceived a single tracheal injection of 2 mg/kg bleomycin sulfate in 50 μL sterile saline using a Microsprayer Aerosolizeron day 0. All mice were killed by cervical dislocation and lungs were harvested at day 7, 14, 21 or 28 after intratracheal bleomycin or saline treatment.

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名称 规格
       Bleomycin Sulfate硫酸博莱霉素 10mg
Bleomycin A5 Hydrochloride盐酸博莱霉素A5（平阳霉素)            10mg
Phleomycin (20mg/ml)腐草霉素（20 mg/ml） 1ml
Zeocin (100mg/ml)  博莱霉素（100 mg/ml） 125mg               

 

Bleomycin A2博莱霉素A2 Bleomycin Sulfate 硫酸博莱霉素 9041-93-4  

发表于由

Bleomycin Sulfate硫酸博莱霉素；Bleomycin A2博莱霉素A2；Bleomycin B2博莱霉素B2；Bleomycin A5 Hydrochloride盐酸平阳霉素；CAS：9041-93-4；

博莱霉素（Bleomycin Sulfate）是由轮枝链霉菌（Streptomyces verticillus）代谢产生的一种糖肽抗肿瘤抗生素。作用机理在于引起肿瘤细胞内的ssDNA和dsDNA断裂，从而中断细胞周期。研究认为博莱霉素通过螯合金属离子，产生一种假酶，与氧气反应生成超氧化物和氢氧自由基，从而实现DNA断裂。博莱霉素是一种凋亡诱导剂和调节剂，抑制肿瘤血管形成。博莱霉素可用来治疗霍奇金淋巴病（与阿霉素联合使用）、鳞状细胞癌、睾丸癌，以及肺纤维化动物模型的建立。

本品是博莱霉素硫酸盐构成的混合物，主要含博莱霉素A2和博莱霉素B2，不同的异构体在氨基末端结构不同，生物活性也有所差异。本品纯度≥90% (A₂ +B₂)，活性为1.5-2.0 units/mg solid。用于细胞培养的常用工作浓度范围是10-100 μg/ml。

产品特性

1） CAS NO：9041-93-4  

2） 同义名：Bleomycin sulfate salt; NSC125066; Blenoxane; Blexane; Bleo;硫酸博来霉素；争光霉素；

3） 分子式：C55H85N17O25S4

4） 分子量：1512.62

5） 纯度：≥90% (A₂ +B₂)

6） 效价：1.5-2.0 units/mg solid

7） 外观：白色至微黄色粉末

8） 溶解性：溶于水（≥20mg/ml）、DMSO（≥10mg/ml）、甲醇，微溶于乙醇

保存与运输方法

保存：2-8℃干燥保存，也可置于-20ºC干燥长期保存，至少2年有效。

运输：室温运输。

注意事项

1） 关于化合物溶解性：产品特性内的“≥”表明溶于标示浓度，但饱和溶解度未知。不同批次化合物的溶解度会有差异。

2） 为了让化合物更好的溶解，可通过37℃加热或（和）超声波水浴中震动片刻来处理。若实验所需浓度过大甚至达产品溶解极限，请添加助溶剂助溶或自行调整浓度。

3） 本品仅用作科研用途，不得用作临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，绝对禁止用在人身上。

4） 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

储存液制备

          质量

溶剂体积

浓度

 1mg 5mg 10mg
1mM 0.6611 mL                           3.3055 mL                           6.6110 mL                              
5mM                     0.1322 mL 0.6611 mL 1.3222 mL
10mM 0.0661 mL 0.3306 mL 0.6611 mL

 

使用方法【源自文献，仅作参考】

文献1，Fanny M et al. The IL-33 Receptor ST2 Regulates Pulmonary Inflammation and Fibrosis to Bleomycin. Front Immunol. 2018 Jun 25;9:1476. PMID: 29988569

体内研究（动物模型）：

细胞类型（Cell type）：8- to 14-week-old C57BL/6J WT mice; ST2-deficient mice (ST2−/−) on C57BL6/J background;

实验方法（Assay）：Bleomycin sulfate (7.5 and 3 mg/kg for 1 and 11–14 days experiment, respectively) in saline or saline alone were given through the airways by nasal instillation in a volume of 40 µl under light ketamine–xylasine anesthesia. The mice were monitored daily.
文献2，Kato S et al. Changes in pulmonary endothelial cell properties during bleomycin-induced pulmonary fibrosis. Respir Res. 2018 Jun 26;19(1):127. PMID: 29940932

体内研究（动物模型）：

动物模型（Animal Model）：Male C57/BL6 mice 8 to 12 weeks old (20–25 g)

实验方法（Assay）：Male C57/BL6 mice 8 to 12 weeks old (20–25 g) were anesthetized with intraperitoneal ketamine (80 mg/kg) and xylazine (10 mg/kg) andreceived a single tracheal injection of 2 mg/kg bleomycin sulfate in 50 μL sterile saline using a Microsprayer Aerosolizeron day 0. All mice were killed by cervical dislocation and lungs were harvested at day 7, 14, 21 or 28 after intratracheal bleomycin or saline treatment.

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名称 规格
        Bleomycin Sulfate硫酸博莱霉素 10mg
Bleomycin A5 Hydrochloride盐酸博莱霉素A5（平阳霉素)            10mg
Phleomycin (20mg/ml)腐草霉素（20 mg/ml） 1ml
Zeocin (100mg/ml)  博莱霉素（100 mg/ml） 125mg               

 

Hygromycin B潮霉素B Zeocin (Powder) 博莱霉素（粉末）11006-33-0

发表于由

Zeocin博莱霉素（博来霉素）；Phleomycin腐草霉素；Sh ble基因；Hygromycin B潮霉素B；G418遗传霉素；CAS NO.：11006-33-0

产品信息

产品名称 产品编号 规格
Zeocin (Powder)博莱霉素（粉末）  MS0009P-100MG 100mg
Zeocin (Powder)博莱霉素（粉末）  MS0009P-500MG 500mg
Zeocin (Powder)博莱霉素（粉末）  MS0009P-1000MG 1g

 

产品名称 产品编号 规格
Zeocin (100mg/ml) 博莱霉素（100 mg/ml） MS0009-125MG 125mg
Zeocin (100mg/ml)博莱霉素（100 mg/ml） MS0009-1000MG 8×125mg

Zeocin是一种作用于真核和原核细胞的选择性抗生素。来自Streptoalloteichus hindustanus的Sh ble基因赋予Zeocin抗性，该基因编码一种13,665Da大小的蛋白，以化学计量方式结合Zeocin，抑制其DNA双链切割活性。因此，能表达此蛋白的真核和原核宿主细胞具有Zeocin抗性。

Zeocin是腐草霉素D1（Phleomycin D1）的商业名称，是一种铜离子螯合的糖肽抗生素（来源于链霉菌Streptomyces verticillus的突变株），铜离子的存在使其呈蓝色，此铜螯合的形式为无活性。当抗生素进入细胞后，二价铜离子（Cu2+）被还原为一价铜离子（Cu+），并被细胞内的巯基化合物去除。铜离子被去除后，Zeocin被活化，嵌入DNA使其断裂，最终导致细胞死亡。Zeocin作用谱广泛，对细菌、真核微生物、植物和哺乳动物细胞具很强的毒性。

本品以蓝色粉末形式提供，低内毒素水平，达细胞培养级。通常情况，哺乳动物细胞的筛选浓度范围是50-400 µg/ml，细菌的筛选浓度为25 µg/ml。

我司还提供无菌溶液形式的Zeocin（货号：MS0009-125MG，MS0009-1000MG），浓度是100mg/ml，使用起来更加方便，只需直接加入培养基到所需工作浓度即可。

产品特性

1） CAS NO.：11006-33-0

2） 外观：蓝色粉末

3） 内毒素：＜1 EU/mg

4） 溶解性：易溶于水（>500 mg/ml）

5） 质量控制：分别对Zeocin敏感或Zeocin耐性的哺乳动物细胞测定抗生素活性。

保存与运输方法

保存： +4℃干燥保存，至少1年有效。

运输：室温运输。

注意事项

1） Zeocin粉末容易受潮，一定要注意干燥保存。每一次使用完后需盖紧管子。

2） Zeocin是一种不稳定化合物，在高pH和低pH或存在弱氧化剂的情况下会发生不可逆变性。

3） Zeocin对高浓度酸和碱都很敏感，但短期暴露在弱酸下能耐受。

4） Zeocin对光敏感，需将抗生素，或含该抗生素的平板或培养基置于黑暗处。

5） Zeocin有毒，操作时需注意防护，切勿与身体或皮肤直接接触。

6） Zeocin™是Invivogen公司的商标产品。

7） 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

母液制备

1）将低温保存的Zeocin置于室温回温至少20min，加入适量HEPES buffer（5g/L, pH 7.2±0.1），充分溶解，配制成100mg/ml溶液。2）用0.22µm滤膜过滤除菌。3）溶液置于4℃保存12个月有效，或-20℃保存，18个月有效。

操作步骤（以哺乳动物细胞为例）

【注1】：Zeocin的杀灭机制不同于新生霉素（neomycin）和潮霉素B（hygromycin B），细胞不会聚集成团和从培养板表面脱落。一旦接触到Zeocin，敏感细胞会出现如下的形态变化：1）细胞体积明显增加（类似于巨细胞病毒感染容纳性细胞引起的肿大效应）；2）异常的细胞形状包括细胞长臂（long appendages）出现；3）胞浆内出现大型空泡（源于内质网、高尔基体或支撑蛋白的破裂）；4）质膜和核膜破裂，导致膜上出现许多孔。这些敏感细胞最终会完全破损，仅仅以细胞碎片的形式存在。

【注2】：Zeocin抗性细胞按正常周期分化产生不同于敏感细胞的克隆。抗性细胞在形态上，与未接触Zeocin™的正常细胞没有任何差异。

【注3】：Zeocin用于哺乳动物细胞筛选常用浓度为50-1000µg/ml（平均常用浓度为250-400μg/mL），影响筛选浓度的主要因素包括离子强度，细胞类型，细胞密度以及生长速率。以下步骤仅作参考，请根据自身实验体系做适当调整。

一、细胞对Zeocin敏感性的确定（杀灭曲线建立）

1) 重新铺板或者将满盘细胞重新分盘，使得细胞密度约25%，按照8个平板/组准备，培养24h，去除旧培养基。

2) 加入含不同浓度Zeocin的筛选培养基，Zeocin浓度可设置为0, 50, 100, 200, 400, 600, 800和1000 μg/ml，每个浓度做3个平行；也可根据自身实验体系，设置不同的浓度梯度。

3) 每3-4天更换新鲜的筛选培养基，并观察存活细胞的比例。选择在合适时间（1-2周内）杀死大多数细胞的浓度为最佳工作浓度。【注】：若是难以在显微观察下区分活细胞，建议使用台盼蓝染色来计算存活细胞的数量，以确定Zeocin的最适浓度。

二、筛选稳定转染细胞系

1) 转染细胞，用100mm培养皿进行培养。以未转染的细胞作为阴性对照。

2) 转染后，用预热的1X PBS洗涤一次，加入新鲜培养基。

3) 转染48-72h后，用含有最佳浓度Zeocin（由灭杀曲线确定）的新鲜培养基筛选细胞。为了更好的鉴定和筛选细胞集落，建议将细胞按比例稀释成一系列浓度。

【注】：若待筛选细胞对Zeocin的抗性明显强于大部分细胞，按照以下方法克服此类耐性：用含Zeocin培养基进行细胞分盘，置于37°C孵育2-3h，使得细胞贴壁。然后将细胞置于4°C，2h。记得使用Hepes作为培养基的缓冲体系。重新将细胞置于37°C孵育。4°C孵育细胞的目的是短时间内终止细胞分化，使得Zeocin能发挥作用，杀死细胞。

4) 每3-4天更换新鲜的选择培养基，直到出现细胞集落。

5) 挑选并转移克隆到96或48孔板中。在进行更大孔径培养板或培养皿上扩大培养之前，确保培养细胞密度近100%。

三、稳定转染细胞系的维持培养

可采取以下方式维持培养稳定转染细胞：

1）使用含相同剂量Zeocin的筛选培养基来维持培养；

2）降低Zeocin剂量为原来的一半进行维持培养；

3）使用正好能预防敏感细胞生长但不足以致死的Zeocin剂量来维持培养【根据杀灭曲线来判断】。

相关产品 

货号 名称 简单描述
MS0007-1ML Blasticidin S杀稻瘟菌素S（灭瘟素） bsr/BSD基因筛选抗生素
MS0008-1ML Phleomycin腐草霉素 Sh ble基因筛选抗生素
MS0009-125MG Zeocin博莱霉素 Sh ble基因筛选抗生素
MS0010-1G G418 Sulfate (Geneticin)遗传霉素 neo基因筛选抗生素
MS0011-25MG Puromycin Dihydrochloride嘌呤霉素盐酸盐 pac基因筛选抗生素
MS0003-1G Hygromycin B潮霉素B hph基因筛选抗生素

附表一某些哺乳动物细胞的Zeocin工作浓度

Zeocin常用的工作浓度为100μg/ml，但是，最佳的工作浓度需要根据细胞类型和实际的实验体系来确定。某些哺乳动物细胞的建议工作浓度列在下表：

细胞系 培养基 Zeocin工作浓度（μg/ml）
B16 RPMI 20-250
CHO DMEM 100-500
COS DMEM 100-400
HEK293 DMEM 100-400
HeLa DMEM 50-100
J558L RPMI 400
MCF-7 DMEM 100-400
MEFs DMEM 200-400
THP-1 RPMI 200

Zeocin (100mg/ml) 博莱霉素（100 mg/ml）

发表于由

描述

Zeocin (100mg/ml)  博莱霉素（100 mg/ml）

【温馨提示】：如果你对市场上常见中文名都叫【博莱霉素】，但英文名又不同的一些产品感到有所迷惑，可参考我司【金畔生物】整理的Bleomycins (BLMs) 博莱霉素家族常用抗生素成员的应用选择，也许有所收获。

博莱霉素家族常见产品：

筛选抗生素：Zeocin【冻干粉】  Zeocin【100mg/ml】     Phleomycin 腐草霉素

细胞功能研究：Bleomycin Sulfate 硫酸博莱霉素     Bleomycin A5 Hydrochloride 盐酸博莱霉素A5

产品标签

Zeocin 博莱霉素（博来霉素）；Phleomycin 腐草霉素；Sh ble基因；Streptomyces verticillus 轮枝链霉菌；Hygromycin B 潮霉素B；G418遗传霉素；CAS NO.：11006-33-0

 

产品信息

产品名称

 产品编号 规格 价格（元）    

Zeocin (100mg/ml) 博莱霉素（100 mg/ml）   

 MS0009-125MG       125mg  

420
Zeocin (100mg/ml) 博莱霉素（100 mg/ml） MS0009-500MG 4×125mg

1480
Zeocin (100mg/ml) 博莱霉素（100 mg/ml） MS0009-1000MG 8×125mg

2850

【提示1】：另现货供应Invitrogen原装进口的Zeocin（博来霉素）；

【提示2】：对Zeocin不敏感的细胞，如丝状真菌和一些酵母菌，建议使用腐草霉素（货号：MS0008-1ML），抗性基因同样为Sh ble。

【提示3】：特价供应含Zeo+基因序列的质粒— — pcDNA 3.1/Zeo（+）（Invitrogen of Thermo），序列图谱点击下载文档。

产品描述

Zeocin™是博来霉素/腐草霉素（bleomycin/phleomycin）抗生素家族的成员之一，从轮枝链霉菌Streptomyces verticillus中分离得到。作用谱广泛，对细菌、真菌（包括酵母菌）、植物和哺乳动物细胞具很强的毒性。

Zeocin™是腐草霉素D1的商业名称，一种碱性、水溶性、铜离子螯合的糖肽抗生素。铜离子的存在使得溶液为蓝色，此铜螯合的形式为无活性。当抗生素进入细胞后，二价铜离子（Cu2+）被还原为一价铜离子（Cu+），并被细胞内的巯基化合物去除。铜离子被去除后，Zeocin被活化，嵌入DNA使其断裂，最终导致细胞死亡。来自Streptoalloteichus hindustanus的Sh ble基因赋予Zeocin抗性，该基因编码一种13,665Da大小的蛋白，以化学计量方式结合Zeocin，抑制其DNA双链切割活性。因此，能表达此蛋白的真核和原核宿主细胞被赋予Zeocin抗性。

本品为溶于去离子水的无菌溶液，浓度为100mg/ml，细胞培养级别。

产品特性

1）CAS NO.：11006-33-0

2）化学式：C55H83N19O21S2Cu

3）分子量：1137.41 g/mol

4）外观：蓝色溶液（100mg/ml in deionized，autoclaved water）

保存与运输方法

保存：-20℃避光保存，至少1年有效，避免反复冻融。

运输：冰袋运输。

建议工作浓度

1）大肠杆菌筛选：25-50μg/mL（低盐LB培养基，NaCl浓度不能超过5g/L）

2）酵母菌筛选：50-300μg/mL（YPD或基本培养基）

3）哺乳动物细胞筛选：50-1000μg/mL（合适培养基，根据细胞系而不同）

注意事项

1）Zeocin™对光敏感，需将抗生素，或含该抗生素的平板或培养基置于黑暗处。

2）降低细菌培养基的盐浓度，调整pH到7.5使其保持活性，因高离子强度和酸或碱性都会抑制Zeocin™活性。

3）储存Zeocin™在-30°C~-10°C，使用前需冰上融化。

4）Zeocin™有毒，操作时需注意防护，切勿与身体或皮肤直接接触。

5）Zeocin™是Invivogen公司的商标产品。

6）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

操作步骤（以哺乳动物细胞为例）

【注1】：Zeocin™的杀灭机制不同于新生霉素（neomycin）和潮霉素B（hygromycin B），细胞不会聚集成团和从培养板表面脱落。一旦接触到Zeocin™，敏感细胞会出现如下的形态变化：1）细胞体积明显增加（类似于巨细胞病毒感染容纳性细胞引起的肿大效应）；2）异常的细胞形状包括细胞长臂（long appendages）出现；3）胞浆内出现大型空泡（源于内质网、高尔基体或支撑蛋白的破裂）；4）质膜和核膜破裂，导致膜上出现许多孔。这些敏感细胞最终会完全破损，仅仅以细胞碎片的形式存在。

【注2】：Zeocin™抗性细胞按正常周期分化产生不同于敏感细胞的克隆。抗性细胞在形态上，与未接触Zeocin™的正常细胞没有任何差异。

【注3】：Zeocin™用于哺乳动物细胞筛选常用浓度为50-1000µg/ml（平均常用浓度为250-400μg/mL），影响筛选浓度的主要因素包括离子强度，细胞类型，细胞密度以及生长速率。以下步骤仅作参考，请根据自身实验体系做适当调整。

一、细胞对Zeocin™敏感性的确定（杀灭曲线建立）

1）重新铺板或者将满盘细胞重新分盘，使得细胞密度约25%，按照8个平板/组准备，培养24h，去除旧培养基。

2）加入含不同浓度Zeocin™的筛选培养基，Zeocin™浓度可设置为0, 50, 100, 200, 400, 600, 800和1000 μg/ml，每个浓度做3个平行；也可根据自身实验体系，设置不同的浓度梯度。

3）每3-4天更换新鲜的筛选培养基，并观察存活细胞的比例。选择在合适时间（1-2周内）杀死大多数细胞的浓度为最佳工作浓度。【注】：若是难以在显微观察下区分活细胞，建议使用台盼蓝染色来计算存活细胞的数量，以确定Zeocin™的最适浓度。

二、筛选稳定转染细胞系

1）转染细胞，用100mm培养皿进行培养。以未转染的细胞作为阴性对照。

2）转染后，用预热的1X PBS洗涤一次，加入新鲜培养基。

3）转染48-72h后，用含有最佳浓度Zeocin™（由灭杀曲线确定）的新鲜培养基筛选细胞。为了更好的鉴定和筛选细胞集落，建议将细胞按比例稀释成一系列浓度。

【注】：若待筛选细胞对Zeocin的抗性明显强于大部分细胞，按照以下方法克服此类耐性：用含Zeocin™培养基进行细胞分盘，置于37°C孵育2-3h，使得细胞贴壁。然后将细胞置于4°C，2h。记得使用Hepes作为培养基的缓冲体系。重新将细胞置于37°C孵育。4°C孵育细胞的目的是短时间内终止细胞分化，使得Zeocin™能发挥作用，杀死细胞。

4）每3-4天更换新鲜的选择培养基，直到出现细胞集落。

5）挑选并转移克隆到96或48孔板中。在进行更大孔径培养板或培养皿上扩大培养之前，确保培养细胞密度近100%。

三、稳定转染细胞系的维持培养

可采取以下方式维持培养稳定转染细胞：

1）使用含相同剂量Zeocin™的筛选培养基来维持培养；

2）降低Zeocin™剂量为原来的一半进行维持培养；

3）使用正好能预防敏感细胞生长但不足以致死的Zeocin剂量来维持培养【根据杀灭曲线来判断】；

 

Bleomycin A5 Hydrochloride  盐酸博莱霉素A5

发表于由

描述

Bleomycin A5 Hydrochloride  盐酸博莱霉素A5

 

产品标签

Bleomycin A5 Hydrochloride 盐酸博莱霉素A5；Pingyangmycin hydrochloride 盐酸平阳霉素；Bleomycin Sulfate硫酸博莱霉素；Bleomycin A2博莱霉素A2；Bleomycin B2博莱霉素B2；CAS：55658-47-4；

 

 产品信息

 

产品名称 产品编号 CAS NO. 规格 价格（元）         
Bleomycin A5 Hydrochloride                   MZ3506-10MG            9041-93-4            10mg     1269

 

【温馨提示】：见我司金畔生物整理的博莱霉素家族（Bleomycins, BLMs）常用抗生素成员的应用选择。

 

 产品描述

博莱霉素A5（Bleomycin A5）是最初分离自轮枝链霉菌（Streptomyces verticillus）的一类糖肽抗生素家族成员之一。作为一大家族，博莱霉素（Bleomycins，BLMs）包含碳水化合物和通过一个连接结构域绞合到一可变碳端尾部的金属结合域。这一金属结合域和C端尾部介导DNA和RNA结合，在氧气存在的时候，产生自由基引起核酸断裂。博莱霉素A5含有一个能模拟多胺的C端，使其能进入细胞，通过卡尼汀转运体SLC22A16进入细胞。与缺乏此转运体的细胞相比，表达该转运体的细胞对博莱霉素A5约灵敏300倍，由此表明，博莱霉素A5选择性攻击过表达SLC22A16的肿瘤细胞。博莱霉素A5通过增加caspase-3活性、P53生成和TGF-β1形成，刺激下游凋亡。这些蛋白直接或间接阻止细胞生长来诱导凋亡。

 

 产品特性

1） CAS NO：55658-47-4

2） 化学名：N1-[3-[(4-aminobutyl)amino]propyl]-bleomycinamide, hydrochloride

3） 同义名：PYM; Pingyangmycin hydrochloride; 1-Bleomycinoic acid hydrochloride;盐酸平阳霉素；

4） 分子式：C57H89N19O21S2•x(HCl)

5） 分子量：1440.57•x(36.46)

6） 含量：≥85%

7） 外观：白色至类白色粉末

8） 溶解性：易溶于水

10） 化学结构式：

 

 保存与运输方法

保存：2-8℃干燥保存，也可置于-20ºC干燥长期保存，至少2年有效。

运输：室温运输。

 

 注意事项

1） 关于化合物溶解性：产品特性内的“≥”表明溶于标示浓度，但饱和溶解度未知。不同批次化合物的溶解度会有差异。

2） 为了让化合物更好的溶解，可通过37℃加热或（和）超声波水浴中震动片刻来处理。若实验所需浓度过大甚至达产品溶解极限，请添加助溶剂助溶或自行调整浓度。

3） 本品仅用作科研用途，不得用作临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，绝对禁止用在人身上。

4） 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

 使用方法【源自文献，仅作参考】

文献1，Shi K et al. Dexamethasone attenuates bleomycin-induced lung fibrosis in mice through TGF-β, Smad3 and JAK-STAT pathway. Int J Clin Exp Med. 2014 Sep 15;7(9):2645-50. PMID: 25356121

体内研究（动物模型）：

细胞类型（Cell type）：CD-1 mice

实验方法（Assay）：60 mice were randomly divided into the following 3 groups (n=20 each): saline-water; BLM-water; BLM plus DEX.Mice in the saline group were injected intratracheally with 2 ml/kg saline; the others were injected intratracheally with BLM (5 mg/kg, 2 ml/kg in saline).Twenty-four hours after BLM treatment, mice were given by gavage 0.45 mg/kg/d DEX. The day of intratracheal injection with BLM or saline was designated day 0.

 

 

相关产品

货号 名称 规格
MZ3504-10MG                       Bleomycin Sulfate 硫酸博莱霉素 10mg
MZ3506-10MG Bleomycin A5 Hydrochloride 盐酸博莱霉素A5（平阳霉素)                 10mg
MS0008-1ML Phleomycin (20mg/ml) 腐草霉素（20 mg/ml） 1ml
MS0009-125MG Zeocin (100mg/ml)  博莱霉素（100 mg/ml） 125mg              

 

 

Zeocin (Powder) 博莱霉素（粉末）

发表于由

描述

Zeocin (Powder) 博莱霉素

 

产品标签

Zeocin博莱霉素（博来霉素）；Phleomycin腐草霉素；Sh ble基因；Hygromycin B潮霉素B；G418遗传霉素；CAS NO.：11006-33-0

 

产品信息

产品名称 产品编号 规格 价格（元）
Zeocin (Powder)博莱霉素（粉末）  MS0009P-100MG 100mg 360
Zeocin (Powder)博莱霉素（粉末）  MS0009P-500MG 500mg 1460
Zeocin (Powder)博莱霉素（粉末）  MS0009P-1000MG 1g 2760

【提示1】：另现货供应Invitrogen原装进口的Zeocin（博来霉素）； 

【提示2】：另现货供应母液形式的Zeocin（博来霉素），使用更便捷，且价格更经济。

产品名称 产品编号 规格 价格（元）
Zeocin (100mg/ml) 博莱霉素（100 mg/ml） MS0009-125MG 125mg 420
Zeocin (100mg/ml)博莱霉素（100 mg/ml） MS0009-1000MG 8×125mg 2850

【提示3】：对Zeocin不敏感的细胞，如丝状真菌和一些酵母菌，建议使用腐草霉素（货号：MS0008-1ML），抗性基因同样为Sh ble。

【提示4】：特价供应含Zeo+基因序列的质粒—pcDNA 3.1/Zeo（+）（Invitrogen of Thermo），序列图谱点击下载文档。 

 

产品描述

Zeocin是一种作用于真核和原核细胞的选择性抗生素。来自Streptoalloteichus hindustanus的Sh ble基因赋予Zeocin抗性，该基因编码一种13,665Da大小的蛋白，以化学计量方式结合Zeocin，抑制其DNA双链切割活性。因此，能表达此蛋白的真核和原核宿主细胞具有Zeocin抗性。

 

Zeocin是腐草霉素D1（Phleomycin D1）的商业名称，是一种铜离子螯合的糖肽抗生素（来源于链霉菌Streptomyces verticillus的突变株），铜离子的存在使其呈蓝色，此铜螯合的形式为无活性。当抗生素进入细胞后，二价铜离子（Cu2+）被还原为一价铜离子（Cu+），并被细胞内的巯基化合物去除。铜离子被去除后，Zeocin被活化，嵌入DNA使其断裂，最终导致细胞死亡。Zeocin作用谱广泛，对细菌、真核微生物、植物和哺乳动物细胞具很强的毒性。

本品以蓝色粉末形式提供，低内毒素水平，达细胞培养级。通常情况，哺乳动物细胞的筛选浓度范围是50-400 µg/ml，细菌的筛选浓度为25 µg/ml。

 

我司还提供无菌溶液形式的Zeocin（货号：MS0009-125MG，MS0009-1000MG），浓度是100mg/ml，使用起来更加方便，只需直接加入培养基到所需工作浓度即可。

 

产品特性

1） CAS NO.：11006-33-0

2） 外观：蓝色粉末

3） 内毒素：＜1 EU/mg

4） 溶解性：易溶于水（>500 mg/ml）

5） 质量控制：分别对Zeocin敏感或Zeocin耐性的哺乳动物细胞测定抗生素活性。

 

保存与运输方法

保存： +4℃干燥保存，至少1年有效。

运输：室温运输。

 

注意事项

1） Zeocin粉末容易受潮，一定要注意干燥保存。每一次使用完后需盖紧管子。

2） Zeocin是一种不稳定化合物，在高pH和低pH或存在弱氧化剂的情况下会发生不可逆变性。

3） Zeocin对高浓度酸和碱都很敏感，但短期暴露在弱酸下能耐受。

4） Zeocin对光敏感，需将抗生素，或含该抗生素的平板或培养基置于黑暗处。

5） Zeocin有毒，操作时需注意防护，切勿与身体或皮肤直接接触。

6） Zeocin™是Invivogen公司的商标产品。

7） 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

 

母液制备

1）将低温保存的Zeocin置于室温回温至少20min，加入适量HEPES buffer（5g/L, pH 7.2±0.1），充分溶解，配制成100mg/ml溶液。2）用0.22µm滤膜过滤除菌。3）溶液置于4℃保存12个月有效，或-20℃保存，18个月有效。

操作步骤（以哺乳动物细胞为例）

 

【注1】：Zeocin的杀灭机制不同于新生霉素（neomycin）和潮霉素B（hygromycin B），细胞不会聚集成团和从培养板表面脱落。一旦接触到Zeocin，敏感细胞会出现如下的形态变化：1）细胞体积明显增加（类似于巨细胞病毒感染容纳性细胞引起的肿大效应）；2）异常的细胞形状包括细胞长臂（long appendages）出现；3）胞浆内出现大型空泡（源于内质网、高尔基体或支撑蛋白的破裂）；4）质膜和核膜破裂，导致膜上出现许多孔。这些敏感细胞最终会完全破损，仅仅以细胞碎片的形式存在。

 

【注2】：Zeocin抗性细胞按正常周期分化产生不同于敏感细胞的克隆。抗性细胞在形态上，与未接触Zeocin™的正常细胞没有任何差异。

【注3】：Zeocin用于哺乳动物细胞筛选常用浓度为50-1000µg/ml（平均常用浓度为250-400μg/mL），影响筛选浓度的主要因素包括离子强度，细胞类型，细胞密度以及生长速率。以下步骤仅作参考，请根据自身实验体系做适当调整。

 

一、细胞对Zeocin敏感性的确定（杀灭曲线建立）

1) 重新铺板或者将满盘细胞重新分盘，使得细胞密度约25%，按照8个平板/组准备，培养24h，去除旧培养基。

2) 加入含不同浓度Zeocin的筛选培养基，Zeocin浓度可设置为0, 50, 100, 200, 400, 600, 800和1000 μg/ml，每个浓度做3个平行；也可根据自身实验体系，设置不同的浓度梯度。

3) 每3-4天更换新鲜的筛选培养基，并观察存活细胞的比例。选择在合适时间（1-2周内）杀死大多数细胞的浓度为最佳工作浓度。【注】：若是难以在显微观察下区分活细胞，建议使用台盼蓝染色来计算存活细胞的数量，以确定Zeocin的最适浓度。

 

二、筛选稳定转染细胞系

1) 转染细胞，用100mm培养皿进行培养。以未转染的细胞作为阴性对照。

2) 转染后，用预热的1X PBS洗涤一次，加入新鲜培养基。

3) 转染48-72h后，用含有最佳浓度Zeocin（由灭杀曲线确定）的新鲜培养基筛选细胞。为了更好的鉴定和筛选细胞集落，建议将细胞按比例稀释成一系列浓度。

 

【注】：若待筛选细胞对Zeocin的抗性明显强于大部分细胞，按照以下方法克服此类耐性：用含Zeocin培养基进行细胞分盘，置于37°C孵育2-3h，使得细胞贴壁。然后将细胞置于4°C，2h。记得使用Hepes作为培养基的缓冲体系。重新将细胞置于37°C孵育。4°C孵育细胞的目的是短时间内终止细胞分化，使得Zeocin能发挥作用，杀死细胞。

4) 每3-4天更换新鲜的选择培养基，直到出现细胞集落。

5) 挑选并转移克隆到96或48孔板中。在进行更大孔径培养板或培养皿上扩大培养之前，确保培养细胞密度近100%。

 

三、稳定转染细胞系的维持培养

可采取以下方式维持培养稳定转染细胞：

1）使用含相同剂量Zeocin的筛选培养基来维持培养；

2）降低Zeocin剂量为原来的一半进行维持培养；

3）使用正好能预防敏感细胞生长但不足以致死的Zeocin剂量来维持培养【根据杀灭曲线来判断】。

 

相关产品 

货号 名称 简单描述
MS0007-1ML Blasticidin S杀稻瘟菌素S（灭瘟素） bsr/BSD基因筛选抗生素
MS0008-1ML Phleomycin腐草霉素 Sh ble基因筛选抗生素
MS0009-125MG Zeocin博莱霉素 Sh ble基因筛选抗生素
MS0010-1G G418 Sulfate (Geneticin)遗传霉素 neo基因筛选抗生素
MS0011-25MG Puromycin Dihydrochloride嘌呤霉素盐酸盐 pac基因筛选抗生素
MS0003-1G Hygromycin B潮霉素B hph基因筛选抗生素

附表一某些哺乳动物细胞的Zeocin工作浓度

 

Zeocin常用的工作浓度为100μg/ml，但是，最佳的工作浓度需要根据细胞类型和实际的实验体系来确定。某些哺乳动物细胞的建议工作浓度列在下表：

细胞系 培养基 Zeocin工作浓度（μg/ml）
B16 RPMI 20-250
CHO DMEM 100-500
COS DMEM 100-400
HEK293 DMEM 100-400
HeLa DMEM 50-100
J558L RPMI 400
MCF-7 DMEM 100-400
MEFs DMEM 200-400
THP-1 RPMI 200

 

 

 

 

Zeocin (100mg/ml) 博莱霉素（100 mg/ml）

发表于由

描述

Zeocin (100mg/ml)  博莱霉素（100 mg/ml）

【温馨提示】：如果你对市场上常见中文名都叫【博莱霉素】，但英文名又不同的一些产品感到有所迷惑，可参考我司【金畔生物】整理的Bleomycins (BLMs) 博莱霉素家族常用抗生素成员的应用选择，也许有所收获。

博莱霉素家族常见产品：

筛选抗生素：Zeocin【冻干粉】  Zeocin【100mg/ml】     Phleomycin 腐草霉素

细胞功能研究：Bleomycin Sulfate 硫酸博莱霉素     Bleomycin A5 Hydrochloride 盐酸博莱霉素A5

产品标签

Zeocin 博莱霉素（博来霉素）；Phleomycin 腐草霉素；Sh ble基因；Streptomyces verticillus 轮枝链霉菌；Hygromycin B 潮霉素B；G418遗传霉素；CAS NO.：11006-33-0

 

产品信息

产品名称

 产品编号 规格 价格（元）    

Zeocin (100mg/ml) 博莱霉素（100 mg/ml）   

 MS0009-125MG       125mg  

420
Zeocin (100mg/ml) 博莱霉素（100 mg/ml） MS0009-500MG 4×125mg

1480
Zeocin (100mg/ml) 博莱霉素（100 mg/ml） MS0009-1000MG 8×125mg

2850

【提示1】：另现货供应Invitrogen原装进口的Zeocin（博来霉素）；

【提示2】：对Zeocin不敏感的细胞，如丝状真菌和一些酵母菌，建议使用腐草霉素（货号：MS0008-1ML），抗性基因同样为Sh ble。

【提示3】：特价供应含Zeo+基因序列的质粒— — pcDNA 3.1/Zeo（+）（Invitrogen of Thermo），序列图谱点击下载文档。

产品描述

Zeocin™是博来霉素/腐草霉素（bleomycin/phleomycin）抗生素家族的成员之一，从轮枝链霉菌Streptomyces verticillus中分离得到。作用谱广泛，对细菌、真菌（包括酵母菌）、植物和哺乳动物细胞具很强的毒性。

Zeocin™是腐草霉素D1的商业名称，一种碱性、水溶性、铜离子螯合的糖肽抗生素。铜离子的存在使得溶液为蓝色，此铜螯合的形式为无活性。当抗生素进入细胞后，二价铜离子（Cu2+）被还原为一价铜离子（Cu+），并被细胞内的巯基化合物去除。铜离子被去除后，Zeocin被活化，嵌入DNA使其断裂，最终导致细胞死亡。来自Streptoalloteichus hindustanus的Sh ble基因赋予Zeocin抗性，该基因编码一种13,665Da大小的蛋白，以化学计量方式结合Zeocin，抑制其DNA双链切割活性。因此，能表达此蛋白的真核和原核宿主细胞被赋予Zeocin抗性。

本品为溶于去离子水的无菌溶液，浓度为100mg/ml，细胞培养级别。

产品特性

1）CAS NO.：11006-33-0

2）化学式：C55H83N19O21S2Cu

3）分子量：1137.41 g/mol

4）外观：蓝色溶液（100mg/ml in deionized，autoclaved water）

保存与运输方法

保存：-20℃避光保存，至少1年有效，避免反复冻融。

运输：冰袋运输。

建议工作浓度

1）大肠杆菌筛选：25-50μg/mL（低盐LB培养基，NaCl浓度不能超过5g/L）

2）酵母菌筛选：50-300μg/mL（YPD或基本培养基）

3）哺乳动物细胞筛选：50-1000μg/mL（合适培养基，根据细胞系而不同）

注意事项

1）Zeocin™对光敏感，需将抗生素，或含该抗生素的平板或培养基置于黑暗处。

2）降低细菌培养基的盐浓度，调整pH到7.5使其保持活性，因高离子强度和酸或碱性都会抑制Zeocin™活性。

3）储存Zeocin™在-30°C~-10°C，使用前需冰上融化。

4）Zeocin™有毒，操作时需注意防护，切勿与身体或皮肤直接接触。

5）Zeocin™是Invivogen公司的商标产品。

6）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

操作步骤（以哺乳动物细胞为例）

【注1】：Zeocin™的杀灭机制不同于新生霉素（neomycin）和潮霉素B（hygromycin B），细胞不会聚集成团和从培养板表面脱落。一旦接触到Zeocin™，敏感细胞会出现如下的形态变化：1）细胞体积明显增加（类似于巨细胞病毒感染容纳性细胞引起的肿大效应）；2）异常的细胞形状包括细胞长臂（long appendages）出现；3）胞浆内出现大型空泡（源于内质网、高尔基体或支撑蛋白的破裂）；4）质膜和核膜破裂，导致膜上出现许多孔。这些敏感细胞最终会完全破损，仅仅以细胞碎片的形式存在。

【注2】：Zeocin™抗性细胞按正常周期分化产生不同于敏感细胞的克隆。抗性细胞在形态上，与未接触Zeocin™的正常细胞没有任何差异。

【注3】：Zeocin™用于哺乳动物细胞筛选常用浓度为50-1000µg/ml（平均常用浓度为250-400μg/mL），影响筛选浓度的主要因素包括离子强度，细胞类型，细胞密度以及生长速率。以下步骤仅作参考，请根据自身实验体系做适当调整。

一、细胞对Zeocin™敏感性的确定（杀灭曲线建立）

1）重新铺板或者将满盘细胞重新分盘，使得细胞密度约25%，按照8个平板/组准备，培养24h，去除旧培养基。

2）加入含不同浓度Zeocin™的筛选培养基，Zeocin™浓度可设置为0, 50, 100, 200, 400, 600, 800和1000 μg/ml，每个浓度做3个平行；也可根据自身实验体系，设置不同的浓度梯度。

3）每3-4天更换新鲜的筛选培养基，并观察存活细胞的比例。选择在合适时间（1-2周内）杀死大多数细胞的浓度为最佳工作浓度。【注】：若是难以在显微观察下区分活细胞，建议使用台盼蓝染色来计算存活细胞的数量，以确定Zeocin™的最适浓度。

二、筛选稳定转染细胞系

1）转染细胞，用100mm培养皿进行培养。以未转染的细胞作为阴性对照。

2）转染后，用预热的1X PBS洗涤一次，加入新鲜培养基。

3）转染48-72h后，用含有最佳浓度Zeocin™（由灭杀曲线确定）的新鲜培养基筛选细胞。为了更好的鉴定和筛选细胞集落，建议将细胞按比例稀释成一系列浓度。

【注】：若待筛选细胞对Zeocin的抗性明显强于大部分细胞，按照以下方法克服此类耐性：用含Zeocin™培养基进行细胞分盘，置于37°C孵育2-3h，使得细胞贴壁。然后将细胞置于4°C，2h。记得使用Hepes作为培养基的缓冲体系。重新将细胞置于37°C孵育。4°C孵育细胞的目的是短时间内终止细胞分化，使得Zeocin™能发挥作用，杀死细胞。

4）每3-4天更换新鲜的选择培养基，直到出现细胞集落。

5）挑选并转移克隆到96或48孔板中。在进行更大孔径培养板或培养皿上扩大培养之前，确保培养细胞密度近100%。

三、稳定转染细胞系的维持培养

可采取以下方式维持培养稳定转染细胞：

1）使用含相同剂量Zeocin™的筛选培养基来维持培养；

2）降低Zeocin™剂量为原来的一半进行维持培养；

3）使用正好能预防敏感细胞生长但不足以致死的Zeocin剂量来维持培养【根据杀灭曲线来判断】；

 

Zeocin (100mg/ml) 博莱霉素（100 mg/ml）

发表于由

描述

Zeocin (100mg/ml)  博莱霉素（100 mg/ml）

【温馨提示】：如果你对市场上常见中文名都叫【博莱霉素】，但英文名又不同的一些产品感到有所迷惑，可参考我司【金畔生物】整理的Bleomycins (BLMs) 博莱霉素家族常用抗生素成员的应用选择，也许有所收获。

博莱霉素家族常见产品：

筛选抗生素：Zeocin【冻干粉】  Zeocin【100mg/ml】     Phleomycin 腐草霉素

细胞功能研究：Bleomycin Sulfate 硫酸博莱霉素     Bleomycin A5 Hydrochloride 盐酸博莱霉素A5

产品标签

Zeocin 博莱霉素（博来霉素）；Phleomycin 腐草霉素；Sh ble基因；Streptomyces verticillus 轮枝链霉菌；Hygromycin B 潮霉素B；G418遗传霉素；CAS NO.：11006-33-0

 

产品信息

产品名称

 产品编号 规格 价格（元）    

Zeocin (100mg/ml) 博莱霉素（100 mg/ml）   

 MS0009-125MG       125mg  

420
Zeocin (100mg/ml) 博莱霉素（100 mg/ml） MS0009-500MG 4×125mg

1480
Zeocin (100mg/ml) 博莱霉素（100 mg/ml） MS0009-1000MG 8×125mg

2850

【提示1】：另现货供应Invitrogen原装进口的Zeocin（博来霉素）；

【提示2】：对Zeocin不敏感的细胞，如丝状真菌和一些酵母菌，建议使用腐草霉素（货号：MS0008-1ML），抗性基因同样为Sh ble。

【提示3】：特价供应含Zeo+基因序列的质粒— — pcDNA 3.1/Zeo（+）（Invitrogen of Thermo），序列图谱点击下载文档。

产品描述

Zeocin™是博来霉素/腐草霉素（bleomycin/phleomycin）抗生素家族的成员之一，从轮枝链霉菌Streptomyces verticillus中分离得到。作用谱广泛，对细菌、真菌（包括酵母菌）、植物和哺乳动物细胞具很强的毒性。

Zeocin™是腐草霉素D1的商业名称，一种碱性、水溶性、铜离子螯合的糖肽抗生素。铜离子的存在使得溶液为蓝色，此铜螯合的形式为无活性。当抗生素进入细胞后，二价铜离子（Cu2+）被还原为一价铜离子（Cu+），并被细胞内的巯基化合物去除。铜离子被去除后，Zeocin被活化，嵌入DNA使其断裂，最终导致细胞死亡。来自Streptoalloteichus hindustanus的Sh ble基因赋予Zeocin抗性，该基因编码一种13,665Da大小的蛋白，以化学计量方式结合Zeocin，抑制其DNA双链切割活性。因此，能表达此蛋白的真核和原核宿主细胞被赋予Zeocin抗性。

本品为溶于去离子水的无菌溶液，浓度为100mg/ml，细胞培养级别。

产品特性

1）CAS NO.：11006-33-0

2）化学式：C55H83N19O21S2Cu

3）分子量：1137.41 g/mol

4）外观：蓝色溶液（100mg/ml in deionized，autoclaved water）

保存与运输方法

保存：-20℃避光保存，至少1年有效，避免反复冻融。

运输：冰袋运输。

建议工作浓度

1）大肠杆菌筛选：25-50μg/mL（低盐LB培养基，NaCl浓度不能超过5g/L）

2）酵母菌筛选：50-300μg/mL（YPD或基本培养基）

3）哺乳动物细胞筛选：50-1000μg/mL（合适培养基，根据细胞系而不同）

注意事项

1）Zeocin™对光敏感，需将抗生素，或含该抗生素的平板或培养基置于黑暗处。

2）降低细菌培养基的盐浓度，调整pH到7.5使其保持活性，因高离子强度和酸或碱性都会抑制Zeocin™活性。

3）储存Zeocin™在-30°C~-10°C，使用前需冰上融化。

4）Zeocin™有毒，操作时需注意防护，切勿与身体或皮肤直接接触。

5）Zeocin™是Invivogen公司的商标产品。

6）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

操作步骤（以哺乳动物细胞为例）

【注1】：Zeocin™的杀灭机制不同于新生霉素（neomycin）和潮霉素B（hygromycin B），细胞不会聚集成团和从培养板表面脱落。一旦接触到Zeocin™，敏感细胞会出现如下的形态变化：1）细胞体积明显增加（类似于巨细胞病毒感染容纳性细胞引起的肿大效应）；2）异常的细胞形状包括细胞长臂（long appendages）出现；3）胞浆内出现大型空泡（源于内质网、高尔基体或支撑蛋白的破裂）；4）质膜和核膜破裂，导致膜上出现许多孔。这些敏感细胞最终会完全破损，仅仅以细胞碎片的形式存在。

【注2】：Zeocin™抗性细胞按正常周期分化产生不同于敏感细胞的克隆。抗性细胞在形态上，与未接触Zeocin™的正常细胞没有任何差异。

【注3】：Zeocin™用于哺乳动物细胞筛选常用浓度为50-1000µg/ml（平均常用浓度为250-400μg/mL），影响筛选浓度的主要因素包括离子强度，细胞类型，细胞密度以及生长速率。以下步骤仅作参考，请根据自身实验体系做适当调整。

一、细胞对Zeocin™敏感性的确定（杀灭曲线建立）

1）重新铺板或者将满盘细胞重新分盘，使得细胞密度约25%，按照8个平板/组准备，培养24h，去除旧培养基。

2）加入含不同浓度Zeocin™的筛选培养基，Zeocin™浓度可设置为0, 50, 100, 200, 400, 600, 800和1000 μg/ml，每个浓度做3个平行；也可根据自身实验体系，设置不同的浓度梯度。

3）每3-4天更换新鲜的筛选培养基，并观察存活细胞的比例。选择在合适时间（1-2周内）杀死大多数细胞的浓度为最佳工作浓度。【注】：若是难以在显微观察下区分活细胞，建议使用台盼蓝染色来计算存活细胞的数量，以确定Zeocin™的最适浓度。

二、筛选稳定转染细胞系

1）转染细胞，用100mm培养皿进行培养。以未转染的细胞作为阴性对照。

2）转染后，用预热的1X PBS洗涤一次，加入新鲜培养基。

3）转染48-72h后，用含有最佳浓度Zeocin™（由灭杀曲线确定）的新鲜培养基筛选细胞。为了更好的鉴定和筛选细胞集落，建议将细胞按比例稀释成一系列浓度。

【注】：若待筛选细胞对Zeocin的抗性明显强于大部分细胞，按照以下方法克服此类耐性：用含Zeocin™培养基进行细胞分盘，置于37°C孵育2-3h，使得细胞贴壁。然后将细胞置于4°C，2h。记得使用Hepes作为培养基的缓冲体系。重新将细胞置于37°C孵育。4°C孵育细胞的目的是短时间内终止细胞分化，使得Zeocin™能发挥作用，杀死细胞。

4）每3-4天更换新鲜的选择培养基，直到出现细胞集落。

5）挑选并转移克隆到96或48孔板中。在进行更大孔径培养板或培养皿上扩大培养之前，确保培养细胞密度近100%。

三、稳定转染细胞系的维持培养

可采取以下方式维持培养稳定转染细胞：

1）使用含相同剂量Zeocin™的筛选培养基来维持培养；

2）降低Zeocin™剂量为原来的一半进行维持培养；

3）使用正好能预防敏感细胞生长但不足以致死的Zeocin剂量来维持培养【根据杀灭曲线来判断】；