CELLSTORTM Serum-free Cell Freezing Medium 无血清细胞冻存液


描述

CELLSTORTM Serum-free Cell Freezing Medium

无血清细胞冻存液

产品标签

无血清细胞冻存液;BAMBANKER™;DMSO二甲基亚砜;D2650 Sigma;程序性降温盒;CELLBANKER®;

产品信息

 产品名称  产品编号   规格    价格(元)
 CELLSTORTM无血清细胞冻存液      MX2008-100ML   100ml           680

产品描述

CELLSTORTM是一款无血清细胞冻存液,通用于各种动物细胞株(常规细胞和肿瘤细胞)。CELLSTORTM配方组分明确,不含动物来源性蛋白,不含血清,因此减少各类细菌、霉菌、病毒和支原体等污染,保证冻存细胞的安全。另,CELLSTORTM特别添加各种细胞所需的营养因子,有效提高细胞存活率和细胞活力,也适用于无血清培养细胞和蛋白表达细胞的冻存。

产品特征

  • 使用方便快捷:即用型细胞冻存液,直接置于-80℃冰箱冻存,不需要程序性降温
  • 保存周期久:置于-80℃可长期保存(>5年)
  • 安全性高:成分明确,无动物来源蛋白,不含血清,无病毒、病菌和支原体等污染
  • 高细胞存活率和细胞活力,批次间差异小

质量控制

※ CELLSTORTM经过严格的内毒素、渗透压、病原体和pH检验,确保产品不含病菌、病毒以及支原体等。

※ CELLSTORTM用于常规的细胞冻存,-80℃可长期保存(>5年),细胞存活率在90-98%。

保存与运输方法

保存:2-8℃保存,长期不用置于-20℃保存,3年有效。

运输:常温运输。

使用方法

一、细胞冻存步骤

1.1常规方法收集对数期的贴壁细胞或悬浮细胞于试管中。

1.2根据培养细胞的密度和冻存管的大小确定所需冻存细胞数。

1.3将所需数目的细胞悬浮液置于离心管中,1000rpm,5min离心收集培养细胞沉淀,彻底弃去离心管中的上清液。

1.4加入适量的CELLSTORTM细胞冻存液于离心管中,使细胞浓度约5×105-1×107/ml。轻柔混匀细胞,制成细胞混合液。

1.5将离心管中的细胞混合液分装于已标记的冻存管中,建议每管1ml或1.5ml。

1.6直接将分装好的细胞冻存管放入-80℃超低温冰箱中,可长期冷冻保存。

1.7如果想置于液氮中长期保存,需先置于-80℃冰箱存放至少一天,再移至液氮罐保存。

二、冻存细胞的复苏步骤

2.1从冰箱中取出冻存的细胞,立即放入37℃水浴快速解冻。

2.2待冻存管中细胞混合液完全融化,即刻加入1ml细胞培养液于冻存管中与细胞混合,将其中的混合液移至约含5ml细胞培养液的离心管中,1000rpm,5min离心收集冻存细胞沉淀,移去上清液(操作时小心,切勿将细胞沉淀移去)。

2.3加入适量的新鲜细胞培养液,使用移液管缓缓加入到细胞沉淀上,轻柔混匀,将细胞混合液移至事先准备好的培养容器中。

2.4 镜检细胞后,可根据各自研究的需要和方法进行细胞常规培养。

注意事项

  1. 加入CELLSTORTM的待冻存细胞分装后,应减少在外存放时间,需尽快移入-80℃冰箱。
  2. 对于干细胞、原代细胞等细胞的东存,建议正式使用前,事先对需冻存细胞进行CELLSTORTM至少1周冷冻保存和复苏培养的预实验,以确认产品性能是否满足需求。
  3. CELLSTORTM含10% DMSO,部分对DMSO敏感细胞,建议对需冻存细胞进行CELLSTORTM至少1周冷冻保存和复苏培养的预实验,以确认产品性能是否满足需求。
  4. 对于没有保种的新细胞类型,使用CELLSTORTM时,建议同时用含血清的细胞冻存液保种,确保细胞冻存不出现意外或全部死亡等现象。
  5. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

 

 

wako 197-17831 StemSure® hPSC冻存液, AF 用于人iPS细胞冻存

用于人iPS细胞冻存

StemSure® hPSC冻存液, AF 用于人iPS细胞冻存

StemSure® hPSC 冻存液,AF

 

 

StemSure® hPSC 冻存液,AF 是无动物源成分的人 iPS 细胞用冻存液。本品含 DMSO。

 

◆特点

 

● 能以高细胞存活率冻存人 iPS 细胞

● 不含动物源成分

● 可以以缓慢冻结的方式进行冻存

● 可用于无饲养层培养的细胞

● 无需进行繁杂的试剂配制

● 无需程序降温

 

 StemSure® hPSC冻存液, AF 用于人iPS细胞冻存

 

 

◆人 iPS 细胞冻存步骤

 

 1. 在除去人 iPS 细胞培养皿中的培养液,用 D-PBS(-)清洗后,用 Accutase 等分散细胞。

 2. 添加含有 10 µmol/L Y-27632 的人 iPS 细胞用培养基(hPSC 培养基(+ROCKi)),用移液器吹散成单细胞。

 3. 将吹打分散后的细胞悬浮液移至样本管中,离心(1,000 rpm,3分钟,室温)后,除去上清液。

 4. 添加 hPSC 培养基(+ROCKi),用移液器悬浮。

 5. 计算细胞数,将样本管离心(1,000 rpm,3分钟,室温)后,除去上清液。

 6. 利用本产品使细胞悬浮成 2×10cells/mL,并以 500 µL/管进行分装。

 7. 在 -80°C 下冷冻后,在 -150°C 或者 -80°C 的条件下保存(长期保存建议保存在 -150°C)。

 1. 添加 hPSC 培养基(+ROCKi)到冻存瓶中,复苏冷冻细胞。
(使用温水浴复苏冷冻细胞的情况下,只需要半溶解)

 2. 离心(室温下,1,000 rpm,3分钟)后,除去上清液,添加 hPSC 培养基(+ROCKi),使细胞悬浮。

 3. 计算细胞数,以 2×10cells/6 cm dish的条件接种

◆人iPS细胞201B7株的冻存

 

确认细胞存活率和细胞增殖率

 

将培养中的人 iPS 细胞 201B7 株分散成单细胞后,重悬于 StemSure® hPSC 冻存液,AF 中,在 -80°C下冻存2~4天。

确认冷冻复苏后的细胞存活率和细胞增殖率。反复冷冻复苏5次后,确认细胞、细胞集落的形态和各种未分化标记(Oct3/4、Nanog、BC2LCN)的表达。

 

StemSure® hPSC冻存液, AF 用于人iPS细胞冻存

确认细胞集落的形态

 

StemSure® hPSC冻存液, AF 用于人iPS细胞冻存

 

 

确认细胞存活率和细胞增殖率

 

StemSure® hPSC冻存液, AF 用于人iPS细胞冻存

结果表明,用 StemSure® hPSC 冻存液,AF 冻存的人 iPS 细胞显示出高细胞存活率和细胞增殖率。

另外还确认了各种未分化标记的表达。

 

 

◆人iPS细胞冻存步骤

 

使用用 StemSure® hPSC 冻存液,AF 冷冻复苏5次后的 iPS 细胞 201B7 株,形成胚叶体,βⅢ-Tubulin,α-SMA,AFP 的表达确认其分化成了三胚叶。

(胚叶体形成,三胚叶分化诱导时的培养基组成)

Stemsure D-MEM+SSR+2mol/L L-Glutamine+10mmol/L2-Mercaptoethanol +1×Non-essential Amino Acids Solution

 

StemSure® hPSC冻存液, AF 用于人iPS细胞冻存

测试项目:外观,应用试验(iPS 细胞 201B7株),无菌试验,内毒素,支原体测试

 

 

 

可用于ES干细胞的冻存液,请点击:StemSure细胞冻存液

通用动物细胞冻存液,请点击:CultureSure无血清细胞冻存液


产品列表
产品编号 产品名称 产品规格 产品等级 备注
197-17831 StemSure® hPSC Freezing Medium, AF
StemSure® hPSC冻存液,AF
100 mL 细胞培养用

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wako 脑组织冻存液即用型

本品是冷冻保存大鼠或小鼠胚胎脑组织用的冻存液。

只要将脑组织放入解冻后的本品中即可实现冻存。

冻存的脑组织在解冻后可通过神经细胞分散溶液(产品编号:291-78001,297-78101)和神经细胞培养基(产品编号:148-09671)进行分散和培养。

 

 

◆特点

 

● 能冻存解剖后的大鼠或小鼠的脑组织。

● 随时可用

◆冻存数据:大鼠海马体(胎生19日)

实验方案例子

 

解剖

 

1. 麻醉小鼠或大鼠。

2. 用70%乙醇对麻醉动物进行全身(包括胡须和尾巴)消毒。

3. 用不锈钢盘将动物送入铺好无尘纸的清洁区。

4. 从妊娠动物中取出胚胎,放入含有L-15溶液的培养皿中。预先将培养皿与L-15溶液的温度调节到4℃。将盛放胚胎的培养皿至于冰块上。

4. ※L-15溶液:含有终浓度为0.05 mg/mL硫酸庆大霉素的Leibovitz’s L-15培养基

5. 将胚胎转移到培养皿的盖子上,并使用显微镜快速移除脑组织。

6. 解剖后的脑组织放入另一个装有L-15溶液的培养皿,再将培养皿放置到冰块上。

 

 

一次冷冻

 

1. 将从冰箱中取出本品和冷冻用碎冰盒放到清洁区附近。

2. 用镊子把冷冻的脑组织放入本品中,盖好试管盖(放入脑组织前要充分混合保存溶液)。

3. 将试管埋入冷冻用碎冰盒中,试管与冰块要紧密接触(试管要埋入试管盖刚好露出冰面的位置)。

4. 盖上泡沫箱,静置90分钟。

 

 

二次冷冻

 

1. 一次冷冻后,将装有组织的试管转移至防冻套管,然后立刻放入超低温冰箱(-80℃)。(防冻套管要直接放置到冰箱内的底面。)

1. ※为了将装有组织的试管的温度变化控制在最小范围,操作时动作要快速。

1. ※进行这一步操作时,需注意样品管盖切勿与保存溶液相接触。

2. 在超低温冰箱(-80℃)中静置3小时。(静置时间可延长30分钟左右。但不能少于3小时。)

2. ※期间避免反复开关冰箱门。

 

 

保存

 

1. 二次冷冻后,将装有组织的样品管置于冻存架上,然后立刻放入液氮罐中。

1. ※进行这一步操作时,需注意样品管盖切勿与管内的保存溶液相接触。

 

产品编号

产品名称

规格

包装

029-19161

Brain Tissue Freezing Medium
脑组织冻存液

细胞培养用

1 mL×10

产品编号

产品名称

规格

包装

148-09671

Neuron Culture Medium
神经细胞用培养基

细胞培养用

100 mL

291-78001

Neuron Dissociation Solutions
神经细胞用分散液

细胞培养用

4 set