PowerUp? SYBR? Green 预混液是一种预配制、优化的通用型 2X 预混液,适用于实时 PCR 工作流程。与用户提供的引物组和模板相结合,PowerUp? SYBR? Green 预混液设计用于扩增靶标,以实现精确的基因表达分析。
PowerUp? SYBR? Green 预混液的特性包括:
?双重热启动机制,可实现出色的特异性
?在广泛动态范围内具有高度可重现的 CT
?含有 UDG 以避免残留污染
?持续72小时的预混反应稳定性
?可兼容大多数实时 qPCR 仪器
双重热启动机制提供了出众的特异性
特异性是获取 SYBR? Green 反应高质量数据的关键,而在严格的引物结合前,可在较低温度下通过控制 Taq DNA 聚合酶来提高特异性。PowerUp? SYBR? Green 混合液采用 Dual-Lock? Taq DNA 聚合酶,其结合了两种独特的热启动机制,有助于控制其活性,并防止聚合酶在低温下出现不需要的早期活性。在评估24种不同引物组的实验中,PowerUp? SYBR? Green 预混液生成单熔解曲线100%的时间与高特异性扩增一致
CT 在较宽的动态范围内具有严格的重现性
PowerUp? SYBR? Green 预混液在广泛动态范围内对各种受测靶标表现出了出色的重现性(见图)。此外,此预混液还可在6个对数级样品起始量下实现高效扩增。与其他竞争产品不同,在动态范围实验中,PowerUp? SYBR? Green 预混液未在高 cDNA 起始量、低相关系数下出现抑制现象,并在全动态范围内维持了稳定的效率,较大限度确保了数据质量的可信度(参见图)。
含有 UDG 以实现残留污染控制
在 PowerUp? SYBR? Green 预混液中加入尿嘧啶-DNA 糖基化酶 (UDG) 和 dUTP,能够降解任何先前扩增的 PCR 产物,有助于防止后续 qPCR 反应污染和可能的假阳性结果
预混反应稳定性
PowerUp? SYBR? Green 预混液中的 Dual-Lock? Taq DNA 聚合酶的严格控制使得反应可以在循环前混合长达72小时而不影响数据(见图)。这种一致性使用户能够在许多工作流程方案中可靠、灵活地使用 PowerUp? SYBR? Green 预混液1。
兼容多种仪器
PowerUp? SYBR? Green 预混液可在标准或快速循环模式下使用,并与所有 Applied Biosystems? 实时 PCR 仪器兼容2。它还兼容 Bio-Rad IQ?5 和 CFX96?/CFX384? 系统、Roche LightCycler? LC480 和 Stratagene? MX3005 P? 系统。为确保获得最佳的结果,推荐的引物浓度为300–800 nM。
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1 Pre-PCR 的稳定性不仅受预混液的影响,还受分析的靶标的影响。为确保最佳的可信度,研究人员应验证自身具体靶标的稳定性曲线。
2 为获得较佳性能,建议使用 Applied Biosystems? 7900 系统进行标准循环。