5×SDS-PAGE Protein Loading Buffer

5×SDS-PAGE蛋白上样缓冲液

产品描述

5×SDS-PAGE蛋白上样缓冲液（5×SDS-PAGE Protein Loading Buffer）是一种经过改良的以溴酚蓝为染料的5倍浓缩的蛋白上样缓冲液。本品适用于常规的SDS-PAGE蛋白样品的上样。

保存与运输方法

保存：-20℃保存，至少1年有效。

运输：冰袋运输。

注意事项

1）   本品含少量二硫苏糖醇（DTT），有轻微刺激性气味，但不含剧毒的巯基乙醇。

2）   本品必须完全溶解后再使用。

3）   为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

操作步骤

1）   在室温或不超过37℃的水浴中溶解5×SDS-PAGE蛋白上样缓冲液。水浴溶解后立即室温存放，尽量避免长时间置于水浴中。

2）   取适量的蛋白样品和5×SDS-PAGE蛋白上样缓冲液按4:1混合，充分混匀。 

3）   100℃或沸水浴加热3～5min，以充分变性蛋白。

【注意】：如果起始细胞或组织用量较大，基因组DNA含量较高，煮沸3~5min后可能仍然比较粘稠或有粘稠状的半透明物体。此时需要再煮沸5~10min或加入适量已稀释的1×SDS-PAGE蛋白上样缓冲液后再煮沸3~5min。充分煮沸的目的一方面使结合在基因组DNA上的蛋白充分释放，另一方面也能引起基因组DNA的部分断裂从而使得粘稠感消失，这样不会影响后续的上样操作。

4）   冷却到室温后，直接上样到SDS-PAGE胶加样孔内即可。 

5）   通常电泳至蓝色染料到达PAGE胶的底部附近即可停止。

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