0.4% Trypan Blue Solution 0.4%台盼蓝染色液


描述

0.4% Trypan Blue Solution 0.4%台盼蓝染色液

产品标签

Trypan Blue 台盼蓝;曲利苯蓝;死细胞着色法;染料排斥法;活细胞着色法;亚甲基蓝;CAS:72-57-1;

产品信息

产品名称 产品编号 规格 价格(元)
0.4% Trypan Blue Solution 0.4%台盼蓝染色液 MX3002-50ML 50ml 120
0.4% Trypan Blue Solution 0.4%台盼蓝染色液 MX3002-100ML 100ml 200
0.4% Trypan Blue Solution 0.4%台盼蓝染色液 MX3002-500ML 500ml 850

产品描述

台盼蓝(Trypan Blue,CAS NO. 72-57-1)是一种蓝色酸性染料,含有两个偶氮发色团。是一种较大、亲水和四磺酸化的阴离子染料,普遍用于检测细胞膜的完整性以及评估细胞的存活率。作为一种鉴定细胞存活的简易方法,台盼蓝渗透进入丧失活性或细胞膜不完整的细胞将其染成蓝色(通常认为细胞膜完整性丧失,即可认为细胞已经死亡),而具有完整细胞膜的活细胞将染料排斥在外。因此,通过颜色的差异能肉眼直接区分死细胞和活细胞。

本品是0.4%台盼蓝染色液,使用方便,只需经简单的染色,即可通过光学显微镜直接计数来鉴定细胞的存活情况。

保存与运输方法

保存:2-8℃保存,1年有效。

运输:冰袋运输。

注意事项

1) 台盼蓝具有轻微的细胞毒性,操作过程中请注意防护,避免与身体的直接接触。

2) 凋亡小体偶尔也有台盼蓝拒染现象。

3) 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法

1) 细胞收集

对于悬浮细胞:离心收集细胞,充分清洗后,用适当缓冲液如PBS、HBSS重悬,制备成单细胞悬液。若有需要,可做适当稀释。

对于贴壁细胞:先用胰酶消化细胞,之后离心收集细胞,经充分清洗后,再用适当缓冲液重悬,制备成单细胞悬液。若有需要,可做适当稀释。

2) 台盼蓝染色

将细胞悬液与0.4%台盼蓝染色液按照9:1的比例稀释,轻轻混匀后,室温染色3min。【注意】:一般情况染色3min足矣。某些情况可延长染色时间,但不宜超过10min。

3) 细胞计数

吸取少量染色细胞到血球计数板内,于普通光镜10×物镜下计数四个大格内的细胞数,压线者数上不数下,数左不数右,分别记录着色细胞(包括损伤细胞和死细胞)和未着色细胞(活细胞)。

【注意】:用移液枪加样,沿着盖玻片的边缘轻轻加液使其完全覆盖住整个小室。不宜过量或量太少。

【注意】:1mm2方格内细胞数目通常控制在20-50个。当细胞数目超过200个,需重新调整稀释倍数。

4) 结果分析

按照以下公式来计算细胞数目和活细胞百分比,

i)计算每ml细胞数目:细胞数 /ml= 1mm2大方格内的平均细胞数×稀释倍数×104;

【注意】:此处的稀释倍数即为步骤2)内的单细胞悬液与台盼蓝染色液混合后的稀释倍数。

ii)总细胞数目:细胞总数 = (细胞数/ml) × 最初制备单细胞悬液的总体积

iii)细胞存活率(活细胞率):活细胞率(%)=(总细胞数目-总着色细胞数)/总细胞数 × 100

【注意】:处于健康的对数生长期细胞,通常情况活细胞至少占到95%。

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