Proteinase K, Molecular Biology Grade 蛋白酶K

Proteinase K, Molecular Biology Grade 蛋白酶K

金畔生物重组蛋白酶K的产品优势一
◇  重组蛋白酶K是突变改造的天然蛋白酶K,具有改善的比活力、更高产量和更宽广的pH/温度优化活性;

◇  大规模重组表达产物能够满足批次一致性、优越纯度和低成本的优点;

◇  重组蛋白酶K不含DNA的天然属性使其非常适用于DNA/RNA模板制备;

◇  重组蛋白酶K广泛适用于分子生物学内常见的蛋白水解和化学-酶法多肽合成,以及分子诊断和生物医药用途;

◇  重组蛋白酶K广谱的温度特征助其用于蛋白去折叠,能够轻易的打断蛋白结构;

金畔生物重组蛋白酶K的产品优势二
□  高纯度≥95%,经脱色和色谱纯化去除RNA和DNA,检测不到其它杂酶活性;

□  高比活≥34U/mg protein;

□  严格质控,每个批次都做残留杂酶检测,无DNase/RNase残留;

□  冻干粉和储存液(20mg/ml)两种形式,任君选择;

□  具备大规模生产能力,能够批量供货,可达公斤级;

搜索关键词

Proteinase K;蛋白酶K(分子生物学级);Endopeptidase K内肽酶K;DNase I脱氧核糖核酸酶I;RNase A核糖核酸酶A;CAS NO:39450-01-6;

产品描述

蛋白酶K,英文名Proteinase K,一种切割活性较广的丝氨酸蛋白酶,pH 4-12的宽广范围内均有活性,SDS、尿素或EDTA存在条件下也很稳定。相对分子量约29.3kDa,能够切割脂族氨基酸和芳香族氨基酸的羧基端肽键,用于生物样品内蛋白质的降解。

蛋白酶K基因来自林伯氏白色念球菌(Tritirachium album limber),通过酵母重组表达所得,达分子生物学级别。蛋白酶K应用广泛,主要用于去除DNA和RNA制备中的核酸酶,也可用于非蛋白组分制备体系内降解蛋白质杂质,比如DNA疫苗制备、肝素制备等。还可用于制备脉冲电泳的染色体DNA和蛋白质印迹实验。本品常用工作浓度为50-100µg/ml,根据缓冲体系是否含SDS、尿素、pH、温度等因素确定具体的工作浓度。

产品特性

1)   CAS NO:39450-01-6

2)   E.C. NO:3.4.21.64

3)   来源:基因来源林伯氏白色念球菌,酵母重组表达

4)   纯度:≥95%,经脱色和色谱纯化去除RNA和DNA,检测不到其它杂酶活性。

5)   pH范围:4.5-12.0,通常使用pH范围是7.5-9.0

6)   温度特征:在70℃活性最大,建议使用温度范围37-70℃

7)   比活力:≥34U/mg protein

8)   单位定义:在37℃,pH7.5的条件下,每分钟水解酪蛋白生成1µM酪氨酸时需要的酶量,定义为1个活性单位。

9)   激活剂:1-5mM Ca2+【为了活化蛋白酶K活性,加入1-5mM Ca2+。用激活剂优化实验条件能明显增加酶活性。当加入EDTA去除体系内Ca2+会降低酶活性。】

10)抑制剂:PMSF或DFP(酶可用DFP或PMSF失活,PMSF终浓度5mM。)

11)质量控制:a)以λ DNA为底物,37ºC消化4小时以上,未检测到脱氧核糖核酸酶活性。b)以λ DNA为底物,25ºC消化16小时以上,未检测到核糖核酸酶活性。

12)消光系数:E1%= 14.2 (280 nm, 10 mM NaCl and 5 mM CaCl2, pH 8.0)

13)稀释缓冲液:推荐 20 mM Tris-HCl (pH 7.4),1mM CaCl2

14)储存缓冲液:20 mM Tris-HCl (pH 7.4),1mM CaCl2,50% Glycerol

保存与运输方法

保存:冻干粉+4℃密封干燥保存,一年有效;-20℃密封干燥保存,三年有效。

运输:冻干粉室温运输。

注意事项

1)   本蛋白酶K是现有蛋白酶中活性最高的品种,pH活性范围4-12,温度范围为0-75℃,甚至在SDS、尿素或EDTA存在的情况下依旧保持活性。

2)   蛋白酶K粉末并非无菌,需要长期保存后使用或要求实验必须无菌,请务必过滤除菌处理。

3)   为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

配制方法

1)   先将蛋白酶K粉末溶于稀释缓冲液【20 mM Tris-HCl (pH 7.4),1mM CaCl2】或其他缓冲液配制成40-80mg/ml原液,用0.22 µm低蛋白吸附的PES或PVDF滤膜过滤除菌。

2)   加入等体积高温高压灭菌的分子生物学级甘油,混匀。

3)   根据一定用量分装,置于-20℃冻存。一年有效。

产品名称 产品编号 规格 储存                  

Proteinase K, Molecular Biology Grade    

蛋白酶K(分子生物学级别)

MF0201-100MG  100mg +4ºC
MF0201-500MG 500mg +4ºC
MF0201-1000MG 1g +4ºC

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15KU
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