Hoechst 33258 活细胞细胞核探针；Hoechst 33342；DAPI；PI 碘化丙啶；7-AAD；CAS：23491-45-4；

产品信息

Hoechst 33258，也称为bisBenzimide H 33258（双苯酰亚胺H33258），是一种通过荧光显微镜和流式细胞仪进行DNA检测的蓝色荧光探针。Hoechst 33258可用于活细胞或固定细胞，也适用于流式细胞术对细胞周期的分析和DNA浓缩的监测。虽然Hoechst 33258比其他衍生物（如Hoechst 33342）的细胞膜渗透性差些，但其能通过绘制发射光强度与DNA含量的标准曲线（a standard emission-to-content curve）来定量测量DNA含量。Hoechst 33258的最大激发波长是346nm，最大发射波长为460nm；与双链DNA结合后的最大激发波长为352nm，最大发射波长为461nm。

本品为即用型的Hoechst 33258染色液，可直接用于固定细胞或组织的核染色，也可直接用于活细胞或组织的核染色。

保存与运输方法

保存：2-8°C避光保存，6个月有效。

运输：冰袋运输。

使用方法

1. 固定的细胞或组织染色

对于固定的细胞或组织样品，固定后，适当洗涤去除固定剂。Hoechst 33258染色通常在其他染色的最后进行。如果不需要进行其它染色，则直接进行Hoechst 33258染色。

1.1 对于贴壁细胞或组织切片：加入适量Hoechst 33258染色液，覆盖住样品即可。对于悬浮细胞：至少加入待测染色样品体积3倍的染色液，混匀。室温放置3-5min。

1.2 吸除Hoechst 33258染色液，用TBST、PBS或生理盐水洗涤2-3次，每次3-5min。

1.3 直接在荧光显微镜下观察或封片后荧光显微镜下观察。Ex/Em=352/461nm。

2. 活的细胞或组织染色

2.1 细胞培养物中加入适量Hoechst 33258染色液，约1/10细胞培养基体积，必须充分覆盖住待染色的样品。对于六孔板，一个孔通常需加入1ml染色液；对于96孔板，一个孔通常需加入100μl染色液。

2.2 在37℃培养细胞10～20min。

2.3 用PBS或合适的缓冲液洗细胞两次。

2.4 直接在荧光显微镜下观察或封片后荧光显微镜下观察。Ex/Em=352/461nm。

注意事项

1）Hoechst 33258对人体有一定刺激性，请注意适当防护。

2）荧光染料都存在淬灭的问题，建议染色后尽量当天完成检测。

3）为减缓荧光淬灭可以使用抗荧光淬灭封片液（Fluoromount-GTM抗荧光淬灭封片剂（水溶性），货号：MM1401-5ML）。

4）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。