描述
Celltracker CM-DiI 活细胞示踪剂CM-DiI(红色)
搜索关键词:
Celltracker CM-DiI;细胞膜荧光探针,DiI,DiO,DiD,DiR,DiA, CAS NO. 180854-97-1
订购信息:
产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格(元) |
Celltracker CM-DiI 活细胞示踪剂CM-DiI(红色) | MX4007-50UG | 1×50μg | 452 |
Celltracker CM-DiI 活细胞示踪剂CM-DiI(红色) | MX4007-250UG | 5×50μg | 1882 |
Celltracker CM-DiI 活细胞示踪剂CM-DiI(红色) | MX4007-500UG | 10×50μg | 3542 |
【温馨提示1】:更多关于CM-DiI示踪探针的优势请见金畔生物整理:更多关于CM-DiI示踪探针的优势请见金畔生物整理:Celltracker CM-DiI/活细胞示踪剂/DiI改良探针 单品专题。
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产品描述:
CellTracker CM-DiI,CAS NO. 180854-97-1,DiI(DiIC18(3))衍生物,在DiI结构上加入了具中度巯基反应性的CM氯甲基替代基团,使其能与细胞内含巯基的肽和蛋白结合,使其能抵抗醛类的固定作用。不同于传统的细胞膜探针PKH26和DiI,CM-DiI 在细胞固定、破膜及石蜡包埋的整个过程中均能很好的保留在细胞内,因此,特别适合同时做细胞膜标记以及后续的免疫组化、荧光原位杂交或电镜观察的分析实验。
CellTracker CM-DiI适用于细胞运动或定位的监测,染料能很好维持,允许对细胞运动的多代示踪研究。具备以下特征:
a)使用方便,只需吸掉培养液,加入探针,30min孵育,显微成像即可;
b)荧光信号至少可持续72h以上(一般3-6代),染料只传到子代细胞,不会染上邻近细胞;
c)毒性很低,不会影响细胞增殖和活力;
d)红色激发/发射的光谱特性(Ex/Em=553/570 nm),适合同绿色荧光染料或蛋白联合使用进行多重标记;
总而言之,CellTracker CM-DiI具有良好的示踪特征:对细胞无毒,稳定长效,染料很好保留在胞内,生理pH下荧光信号非常强。
产品特性
1) CAS NO:180854-97-1
2) 化学名:3H-Indolium, 5-[[[4-(chloromethyl)benzoyl]amino]methyl]-2-[3-(1,3-dihydro-3,3-dimethyl-1- octadecyl-2H-indol-2-ylidene)-1-propenyl]-3,3-dimethyl-1-octadecyl-, chloride
3) 分子式:C68H105Cl2N3O
4) 分子量:1051.5 g/mol
5) 化学结构图:
6) 纯度:≥95%
7) 外观:红色固体
8) Ex/Em:553/570 nm(甲醇)
9) 推荐滤光器:Omega-XF32, Chroma-31002
10)溶解性:溶于DMSO,乙醇,DMF
保存与运输方法
保存:-20ºC干燥避光保存,有效期一年。
运输:室温运输。
注意事项
1) 荧光染料均存在淬灭问题,请尽量注意避光,以减缓荧光淬灭。
2) 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用方法
【注意】以下使用方法仅用作参考,可根据具体的实验条件做出调整。
1. 染色液制备
1) 储存液制备:用DMF、 DMSO或乙醇配置浓度1-2mM的储存液。例如,将50 μg CM-DiI (Mw:1051.5g/mol)溶于48 μl无水DMSO中,充分溶解,即得到1mM的储存液。【注意】未使用的储存液分装储存在-20℃,避免反复冻融,且避光干燥保存。
2)工作液制备:用合适的缓冲液(如:无血清培养基,HBSS或DPBS)稀释储存液,调整到1-2 μM的工作浓度。【注意】最佳的工作浓度需要根据不同细胞系和实验体系来优化。
2. 细胞染色
1) 于实验前准备好染色工作液;
2) 加染色工作液进入待标记细胞,37℃孵育≤5min,然后再于4℃孵育15min。【低温孵育可降低细胞对
染料的内吞作用,有助于染料对质膜的标记,并且降低染料定位细胞质囊泡的可能性。】
3) 染色结束后,用PBS清洗细胞,并用新鲜培养基重悬细胞。
【注意】对于贴壁细胞,可直接在其贴壁状态下进行荧光标记,相较于消化处理后的细胞呈现更高活力。
3. 细胞染色后处理
1)经CM-DiI染色后的细胞置于3.7%(w/v)多聚甲醛(溶于PBS),于37℃固定10min;
2)室温条件,用PBS清洗2次,每次5min;
3)于-20℃中,用丙酮透化处理10min;
4)室温条件PBS清洗2次,每次5min;
5)之后根据自身的实验要求以及细胞类型,进行后续的实验如石蜡包埋-免疫组化分析,电镜分析等。
资料显示,a)经CM-DiI染色后的PC12大鼠嗜铬细胞瘤细胞兼容于2%(w/v)多聚甲醛固定和0.2%(w/v)Triton X-100的透化作用;b)经绵阳淋巴系统纯化的CM-DiI标记细胞,经甲醛固定,石蜡包埋,切片,二甲苯脱蜡,梯度乙醇、水化后仍能维持荧光;