Streptavidin 链霉亲和素(链亲和素);Avidin 亲和素;链霉亲和素-生物素放大系统;Streptavidin Magbeads 链霉亲和素免疫磁珠;CAS:9013-20-1
产品信息
产品名称 | 产品编号 | 规格 | |
Streptavidin Magnetic Beads 5 µm 链霉亲和素免疫磁珠(5 µm) | MP3903-1ML | 1ml (10mg/ml) | |
MP3903-10ML | 10ml (10mg/ml) |
链霉亲和素磁珠(Streptavidin Magnetic Beads)采用专利的蛋白偶联技术将链霉亲和素(SA)共价连接于固相载体表面,可高效结合生物素化抗体、核酸、蛋白等配体分子。本品采用超顺磁性微球,粒径均一,形貌规整,有利于方便快捷的捕获目标分子以及实现磁性分离。本品还能配套自动化设备进行高通量操作。
本品为结合5 µm粒径磁珠的链霉亲和素,浓度为10mg/ml,保存于1×PBS,0.1%(v/v)Tween-20,0.1%(w/v)NaN3溶液。
产品特性
1)同义名:Streptavidin Magbeads链霉亲和素免疫磁珠;链霉亲和素磁珠;
2)与游离生物素结合能力:600 pmol/mg磁珠
3)与与生物素化单链寡核苷酸(24nt)结合能力:200 pmol/mg磁珠
4)与生物素化IgG结合能力:10 pmol/mg磁珠
5)磁珠表面:亲水基团
6)保存缓冲液:10mg/ml in 1×PBS,0.1%(v/v)Tween-20,0.1%(w/v)NaN3
保存与运输方法
保存:2-8°C保存,1年有效。
运输:冰袋运输。
注意事项
- 避免对磁珠进行冷冻操作;
- 为减少磁珠损失,每次磁性分离的时间应不少于1min;
- 吸取磁珠前需要先充分震荡将其重悬均匀,且操作过程中避免产生气泡;
- 建议使用质量好的移液器吸头和反应管,避免因粘附磁珠及溶液造成的损失;
- 生物素化分子的大小会影响磁珠的载体。用户需根据实验确定磁珠对特定生物素化分子的载量;
- 生物素化分子的加入量应为磁珠载量的1-2倍,以使磁珠饱和;
- 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
操作步骤
1. 需要材料
1.1 缓冲液:以下为常用的缓冲液成分,用户可根据需要调整缓冲液的盐浓度及pH。
Buffer I(适用于结合生物素化核酸):10 mM Tris-HCl(pH 7.5),1 mM EDTA,1 M NaCl,0.01%~0.1% Tween-20
Buffer II(适用于结合生物素化抗体/蛋白):1×PBS,pH 7.4,含0.05% Tween-20,可根据需要添加0.01%~0.1% BSA
1.2 磁性分离器:可选用磁性分离器,适用于1.5 mL、2 mL或15 mL离心管
1.3 漩涡振荡器
1.4 旋转混合仪
1.5 移液器及吸头
1.6 合适的离心管
2. 结合生物素化核酸
2.1. 将磁珠瓶置于漩涡振荡器上20 s,振荡重悬磁珠。用移液器移取100 μl磁珠到新的离心管中。将离心管置于磁性分离器上,静置1 min(此操作后续简称为磁性分离),用移液器吸去上清液,从磁性分离器上取下离心管。
【注意】:用户可根据生物素化分子的多少,参考产品特性中磁珠的载量,计算需要取用的磁珠量。建议生物素化分子的加入量为磁珠载量的1~2倍,使磁珠饱和。
2.2. 加入1 ml Buffer I到离心管中,盖上离心管盖,充分振荡重悬磁珠。磁性分离,移去上清液。
【备注】:当步骤2.1取用磁珠体积大于1 ml时,加入与磁珠体积相同的Buffer I。
2.3. 重复“步骤2.2”一次。
2.4. 加入500 μl用Buffer I稀释的生物素化核酸(使磁珠浓度为2 mg/ml),充分振荡重悬磁珠。将离心管置于旋转混合仪上,室温旋转混合30 min。
2.5. 磁性分离,将上清液转移至新的离心管。
2.6. 按“步骤2.2”的方法洗涤磁珠三次。
2.7. 根据后续实验的要求,加入合适的低盐缓冲液,重悬磁珠。至此结合生物素化核酸步骤完成。磁珠可用于后续操作。
2.8. 用户可以通过测定反应前后核酸的浓度,计算结合到磁珠上的核酸量﹝(反应前浓度-反应后浓度)×反应溶液体积﹞。
3. 结合生物素化抗体/蛋白
3.1 将磁珠瓶置于漩涡振荡器上20 s,振荡重悬磁珠。用移液器移取100 μl磁珠到新的离心管中。磁性分离,用移液器吸去上清液,从磁性分离器上取下离心管。
【注意】:用户可根据生物素化分子的多少,参考产品特性中磁珠的载量,计算需要取用的磁珠量。建议生物素化分子的加入量为磁珠载量的1~2倍,使磁珠饱和。
3.2 加入1 ml Buffer II到离心管中,盖上离心管盖,充分振荡重悬磁珠。磁性分离,移去上清液。
【注意】:当步骤3.1取用磁珠体积大于1 ml时,加入与磁珠体积相同的Buffer II。
3.3 重复“步骤3.2”两次,共洗涤三次。
3.4 加入1 ml用Buffer II稀释的生物素化抗体/蛋白(使磁珠浓度为1 mg/ml),充分振荡重悬磁珠。将离心管置于旋转混合仪上,室温旋转混合60 min。
3.5 磁性分离,将上清液转移至新的离心管。
3.6 按“步骤3.2”的方法洗涤磁珠五次。
3.7 根据后续实验的要求,加入Buffer II或其他合适的缓冲液,重悬磁珠。至此结合生物素化抗体/蛋白步骤完成。磁珠可用于后续操作。
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