SYBR Green I；Evagreen；GelRed；DuRed；GelGreen；溴化乙锭（EB）；qPCR；

SYBR Green I Nucleic Acid Stain是一种直接与dsDNA结合的荧光染料，是荧光定量PCR最常用的DNA结合染料。定量PCR中，SYBR Green I与dsDNA非特异性结合发出荧光，通过检测反应体系中的荧光强度，进而达到检测PCR产物扩增量的目的。游离状态下SYBR Green I发出微弱荧光，一旦与dsDNA结合后，荧光强度增加1000倍，一个反应发出的荧光信号与dsDNA量成比例，且随扩增产物的增加而增加。因此，通过检测PCR反应液内的荧光信号强度，实现对目的基因的准确定量，同时还能测定扩增DNA片段的熔解温度。本品为10,000×的SYBR Green I核酸染料，达PCR级别。

保存与运输方法

保存：-20°C避光干燥保存，1年有效。

运输：冰袋运输。

注意事项

1） 独立实验室进行的艾姆斯试验表明SYBR Green I的致突变性明显比EB要低很多。但是，必须警告用户注意，目前尚无关于SYBR Green I对人体的致突变性或毒性的数据。由于该染料与核酸结合，应当被看作潜在诱变剂，使用时要小心谨慎。在处理DMSO储存液时应特别小心，因DMSO能促进有机分子进入组织。染料的废弃处理应当符合当地的规定。

2） 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法

配置PCR反应混合液时，将10,000× SYBR Green I加入到PCR反应体系使其终浓度为0.5×（在0.2×~1×之间调整）。以上操作建议冰上进行。

【注意】：1）反应液配制方法和PCR扩增条件请参照DNA聚合酶使用说明；2）荧光定量扩增仪的使用方法，请参照各仪器说明。

【影响荧光定量PCR的一些小细节】：

1） SYBR Green I使用浓度对荧光定量PCR的影响

合适的SYBR Green I使用浓度是保证荧光定量PCR实验成功非常关键的因素。如果SYBR Green I浓度过低使得荧光信号的变化降低，这意味着低拷贝样品可能无法检出；而浓度过高，可能会抑制PCR反应，降低PCR反应效率。因此，初次使用SYBR Green I需根据实际情况优化工作浓度，反应终浓度可在0.2×~1×之间调整。

2） 镁离子浓度对荧光定量PCR的影响

提高镁离子浓度能降低SYBR Green I对PCR反应的抑制作用。建议用SYBR Green I进行荧光定量PCR反应时，镁离子浓度比不含SYBR Green I的普通PCR体系高出0.5~3mM。 

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