Biotin-NHS；NHS-Biotin；Sulfo-NHS；Sulfo-SMCC；异型双功能交联剂；NHS酯（胺基指向）；CAS NO：35013-72-0；

产品描述

D-生物素 N-羟基琥珀酰亚胺酯（D-Biotin N-Succinimidyl Ester, Biotin-NHS）是最受欢迎的胺反应生物素衍生物，用于修饰蛋白和其它生物分子（温和条件下）。Biotin-NHS具细胞膜渗透性，可用于共价标记胞内蛋白，以及常常用于蛋白检测，当与链霉亲和素和固定化链霉亲和素联合使用，用于各种生物素-链霉亲和素结合实验。

产品特性

保存与运输方法

保存：-20℃干燥保存，至少1年稳定。

运输：冰袋运输。

注意事项

1）Biotin-NHS用DMSO或DMF重溶配制成储存液（比如：10mg/ml），若单次不能用完，置于≤-20℃保存，2周内用完。

2）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

通用操作步骤

1. 开瓶前将本品从冰箱取出置于室温平衡至少20min。
2. 用100mM磷酸钠，150mM NaCl，pH 7.2-7.5或其它适合的无胺缓冲液来溶解蛋白使其浓度为1-10mg/ml。

【注①】：如果蛋白内含叠氮钠或小分子稳定剂的防腐剂，则需将蛋白先透析到无胺缓冲液内去除杂质；

【注②】：如果蛋白溶于Tris或甘氨酸缓冲液，则需将蛋白先透析到无胺缓冲液内去除杂质；

3. 3.一旦开始使用，用无水DMF或DMSO配制20mg/mlBiotin-NHS。
4. 4. 加入足量的Biotin-NHS储存液到蛋白溶液中，使得Biotin-NHS与蛋白的过剩摩尔比达10-20倍，充分混匀。

【注①】：为了保证最佳结果，第一次实验可测试5:1; 10:1; 15:1; 20:1的过剩摩尔比，以确定最优比率。

【注②】：最终标记体系内确保DMSO或DMF的含量≤10%总体积。

5. 5.于室温孵育30-60min，或于4℃孵育≥2h，反应过程溶液处于持续震荡中。
6. 6.通过透析或者树脂凝胶过柱（比如：SephadexG-25）的方法脱盐纯化生物素化标记蛋白。

【注①】：生物素化标记蛋白需保存在含载体蛋白（比如：0.1% BSA）的缓冲液内，浓度＞0.5mg/ml。

【注②】：为了长期保存，生物素化标记蛋白可以冻干或分装成单次用量置于-80℃保存。

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