X-α-Gal 5-溴-4-氯-3-吲哚-α-D-吡喃半乳糖苷；α-半乳糖苷酶 a-galactosidase；MEL1基因；GAL4酵母双杂交系统；蓝白斑筛选；CAS：107021-38-5；
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产品名称 |
CAS NO. | 规格 | |
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X-α-Gal 5-溴-4-氯-3-吲哚-α-D-吡喃半乳糖苷 | 107021-38-5 | 25mg | |
| X-α-Gal 5-溴-4-氯-3-吲哚-α-D-吡喃半乳糖苷 | 107021-38-5 | 100mg |
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| X-α-Gal 5-溴-4-氯-3-吲哚-α-D-吡喃半乳糖苷 | 107021-38-5 | 250mg |
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| X-α-Gal Solution (20mg/ml) | 107021-38-5 | 1ml |
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产品描述
X-α-Gal（5-溴-4-氯-3-吲哚-α-D-吡喃半乳糖苷，CAS：107021-38-5），一种用来检测α-半乳糖苷酶（也称为蜜二糖酶，α-D-半乳糖苷半乳糖水解酶，EC 3.2.1.22）活性的显色底物。X-α-Gal的使用，避开双杂交分析中β-半乳糖苷酶溶液制备和滤膜提升实验（filter-lift assay）的繁琐操作，只需直接添加在培养基上，通过蓝色沉淀的生成与否，即可用来检测双杂交相互作用。X-α-Gal可用来区分肠杆菌科内的不同物种以及划分乳酸菌和双歧杆菌。组织学研究中，X-α-Gal还可借助光学显微镜来检测组织的α-半乳糖苷酶活性。
利用α-半乳糖苷酶水解二糖-蜜二糖作为碳源，酵母菌得以正常生长或进行发酵。酿酒酵母菌内，该酶由几种GAL基因调控的MEL1基因所编码。一旦GAL4激活，α-半乳糖苷酶分泌，之后水解培养基上的X-α-Gal，使得菌落产生蓝斑。酵母双杂交研究用的工程菌包括AH109，PJ69-2A，Y190和Y187。
一种以冻干粉形式提供，
一种以溶于DMF的储存液形式提供，浓度为20mg/ml
产品特性
1）CAS NO：107021-38-5
2）化学名：5-Bromo-4-chloro-3-indoxyl-α-D-galactopyranoside5-溴-4-氯-3-吲哚-α-D-吡喃半乳糖苷；X-α-D-Galactoside X-α-D-半乳糖苷；
3）分子式：C14H15BrClNO6
4）分子量：408.64g/mol
5）纯度：≥98%（TLC）
6）外观：白色或近白色结晶粉末
7）溶解性：溶于DMF（20 mg/ml）
8）化学结构式：
保存与运输方法
保存：粉末-20℃避光干燥保存，2年有效。
运输：冰袋运输。
使用方法
方法1：直接倒入固体培养基
- 溶解60mgX-α-gal于3ml DMF得20mg/ml储存液，马上使用或者避光储存于-20℃，6个月稳定；
- 将高压灭菌好的琼脂培养基于室温冷却至50℃；
- 按照每升培养基加入1ml 20mg/mlX-α-gal储存液的用量，直接加入冷却好的琼脂培养基；【若有需要，此时也可加入筛选用的抗生素】；
- 倒平板，使用前必须让培养基室温凝固（通常至少需30min）。
方法2：涂布于预制培养平板上
- 溶解24mg X-α-gal于6ml DMF得4mg/ml储存液，马上使用或者避光储存于-20℃，6个月稳定；
- 超净工作台内放置已经倒好的固体培养基，使其表面干燥；
- 吸取200μl (15cm平板) 或100μl（10cm平板）4mg/ml X-α-gal 储存液于预制培养平板上，并涂布使其均匀分散在表面【注意：平板边缘通常很难得以充分涂布，可能导致假阳性克隆生成。建议条件可能下，于平板中央挑取克隆】。
- 使用前将上述涂布好的筛选平板于超净工作台内，至少晾干30min；
- 将转化好的细菌或酵母涂于平板上，分别置于37℃或30℃倒置培养，直至蓝色菌落出现。
注意事项
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
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一、富集培养基（Rich Medium酵母培养）
| 名称 | 规格 | ||
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| YPDA Medium YPDA液体培养基 | 250g |
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| 货号 | 名称 | 规格 | 价格（元） |
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DO Supplement -His | 10g | ||
| DO Supplement -Leu | 10g | |||
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DO Supplement -His/-Leu | 10g | ||
| DO Supplement -His/-Ura | 10g | |||
| DO Supplement -Leu/-Trp | 10g | |||
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| DO Supplement -Trp/-Ura | 10g | |||
| DO Supplement -Trp/-His | 10g | |||
| DO Supplement -Ura/-Leu | 10g | |||
| Triple Dropout Supplements (TDO)
三省却成分添加剂 |
DO Supplement -His/-Leu/-Trp | 10g | ||
| DO Supplement -His/-Leu/-Ura | 10g | |||
| DO Supplement -His/-Trp/-Ura | 10g | |||
| DO Supplement -Leu/-Met/-Trp | 10g | |||
| DO Supplement -Leu/-Trp/-Ura | 10g | |||
| Quadruple Dropout Supplements (QDO)
四省却成分添加剂 |
DO Supplement -Ade/-His/-Leu/-Trp | 10g | ||
| DO Supplement -His/-Leu/-Met/-Trp | 10g | |||
| DO Supplement -His/-Leu/-Trp/-Ura | 10g |
四、筛选抗生素（底物）
| 名称 | 规格 | ||
| Aureobasidin A（AbA）金担子素A（1 mg/ml） | 1ml | ||
| X-α-Gal 5-溴-4-氯-3-吲哚-α-D-吡喃半乳糖苷 | 25mg |
五、酵母质粒提取试剂盒
| 名称 | 规格 | ||
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六、酵母转化试剂盒
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