高尔基体绿色荧光探针(活细胞成像用)Golgi-Tracker Green (BODIPY™ FL C5-Ceramide)

Golgi-Tracker Green;BODIPY™ FL C5-Ceramide;Golgi apparatus高尔基体;Golgi-Tracker Red;高尔基体染色探针;BODIPY™ FL;ER-Tracker Green 内质网荧光探针;

产品信息

产品名称

规格

Golgi-Tracker Green (BODIPY™ FL C5-Ceramide), for live-cell imaging 高尔基体绿色荧光探针(活细胞成像用)

1mg

产品描述

Golgi-Tracker Green是神经酰胺的荧光偶联物,即BODIPY™ FL标记的C5-ceramide(BODIPY™ FL C5- Ceramide),选择性结合高尔基体(Golgi apparatus),Ex/Em=505/511nm(光谱特征见Fig 1),用荧光素光学滤片设置来观察。Golgi-Tracker Green与同类型的NBD C6-ceramide相比较,表现出更好的抗光衰减性和更明亮的荧光,在很多应用上都能替代NBD C6-ceramide。Golgi-Tracker Green也能用于鞘脂运输和代谢研究,测定Schwann细胞合成脂类的速率,以及标记细胞轮廓以便在共聚焦显微镜下观察形态运动。

提供的Golgi-Tracker Green是与BSA结合后的复合物,不仅避免有机溶剂的引入,而且对活细胞呈现出更高效的高尔基体标记率。本品另提供稀释液B(Diluent B),使用更便捷。本品适用于活细胞的高尔基体荧光标记,不适用于固定细胞。若需要做固定细胞的高尔基体染色,可选择NBD C6- ceramide。

产品包装

产品组分

组分名称

规格

保存

A

Golgi-Tracker Green (0.5mM) 高尔基体绿色荧光探针

1mg

-20℃避光保存

B

Golgi-Tracker Diluent Buffer Golgi-Tracker稀释液

10ml

-20℃~4℃保存

保存与运输方法

保存:-20ºC避光干燥保存,至少6个月有效。 

运输:冰袋运输。

注意事项

1) 整个染色过程中需注意避光。

2) Golgi-Tracker Green在4℃,冰浴等较低温度下会凝固而粘附在离心管官底、管壁或管盖内,可将置于25℃水浴温育片刻直至全部融解后使用。对于微量液体,每次使用前低速离心使得液体全部沉降至管底,再开盖使用。

3) 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法

1. Golgi-Tracker Green工作液的配制

① 第一次使用本品,可将Golgi-Tracker Green (0.5mM)根据单次用量分装,比如10µl/管。本品一管含30µl(总量:1mg),由于本身量微少,务必低速离心后再开盖,然后用低吸附枪头吸取母液,并分装-20℃冻存,避免反复冻融。

②吸取少量Golgi-Tracker Green (0.5mM)按照1:100的比例用Golgi-Tracker稀释液来稀释,比如:取10µl Golgi-Tracker Green (0.5mM)加入到1ml Golgi-Tracker稀释液中,混匀后即为Golgi-Tracker Green工作液,工作液请现配现用。

【注意】:Golgi-Tracker Green的工作浓度可以根据实际情况进行适当调整,推荐的稀释比例调整范围为1:50~1:200。

2. 活细胞高尔基体的荧光标记

① 去除细胞培养液,用适量的溶液如Hanks平衡盐溶液(含钙镁)(货号:MS3505-500ML)或其他缓冲液来洗涤生长在盖玻片上的细胞。

② 去除洗涤液,加入新鲜配制的Golgi-Tracker Green染色工作液,4℃孵育30min。

③ 吸走染色液,用冰浴预冷的细胞培养液洗涤细胞3次左右,换新鲜培养液37℃再孵育30min。

④ 用新鲜培养液再洗涤一次,随后用荧光显微镜进行观察。此时可观察到高尔基体呈明亮的强荧光染色,而细胞内的其他膜系统呈比较微弱的荧光染色。

染色示例 

Fig 2. Selective staining of the Golgi apparatus using the green-fluorescent BODIPY FL C5-ceramide (MX4356) (top panel). At high concentrations, the BODIPY FL fluorophore forms excimers that can be visualized using a red longpass optical filter (bottom panel). The BODIPY FL C5-ceramide accumulation in the trans-Golgi is sufficient for excimer formation J Cell Biol (1991) 113:1267).

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名称

规格

NBD C6-Ceramide for Golgi Staining 高尔基体绿色荧光探针

1mg

Golgi-Tracker Red (BODIPY™ TR Ceramide), for live-cell imaging 高尔基体红色荧光探针(活细胞成像用)

1mg

Golgi-Tracker Green (BODIPY™ FL C5-Ceramide), for live-cell imaging 高尔基体绿色荧光探针(活细胞成像用)

1mg