Merck Benzonase Nuclease 全能核酸酶(带Strep标签)CAS:9025-65-4

Benzonase Nuclease 全能核酸酶(广谱核酸酶);粘质沙雷氏菌(Serratia Marcescen);RIPA裂解液;DNA/RNA降解;Strep-tag II Tag;Strep-Tactin®XT;CAS:9025-65-4;

品牌/名称 货号 规格 浓度
Merck(Benzonase Nuclease,纯度>90%,E. Coli) 70746-3 10KU 25 U/μL
Merck(Benzonase Nuclease,纯度>90%,E. Coli) 71205-3 25KU 250 U/μL
Sigma(Benzonase Nuclease,纯度>90%,E. Coli) E1014 5KU ≥250 U/μL
Sigma(Benzonase Nuclease,纯度>90%,E. Coli) E1014 25KU ≥250 U/μL

【注】:Benzonase is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

基本描述:

Benzonase,中文名全能核酸酶,或广谱核酸酶,一种源于粘质沙雷氏菌(Serratia Marcescen,又称为灵杆菌)的非特异性核酸内切酶,由两个完全一样的亚基构成,每个亚基大约30kDa,含有245个氨基酸和两个必需的二硫键。可以切割和降解各种形式的DNA和RNA(单链,双链,线性,环状,或超螺旋形式),生成含有5’-磷酸末端的3-5个寡核苷酸残基片段,并且在很多种操作条件下有效。对核酸碱基序列无特异性要求,可在链内任意核苷酸间进行切割,广泛用于去除生物制品中的核酸。

本品经基因工程改造的原核表达纯化所得,携带Strep-tag II标签(Trp-Ser-His-Pro-Gln-Phe-Glu-Lys),核酸消化后可用牢固结合Strep-tag II的磁珠或树脂来去除。Strep-tag II标签很小,对酶的结合和活性基本无影响。本品能有效降低蛋白样本粘度,去除蛋白样品中核酸的污染,无蛋白酶活性残留,核酸酶活性高达1×106 U/mg蛋白。本品未经特殊的内毒素去除处理,适用于常规的科研应用,包括常规蛋白样本(非药物蛋白)提取时核酸污染的去除,2D凝胶电泳蛋白样本的制备,WB,WB-IP等。

产品特性

1)CAS NO:9025-65-4

2)同义名:BenzNuclease; Universal Nuclease; Benzonase endonuclease

3)纯度:≥ 90%(SDS-PAGE)

4)酶活性值:≥250 U/μL

5)比活性值:≥1×106U/mg蛋白

6)蛋白酶:未检出

7)最适pH:8.0(工作范围pH6-10)

8)最适温度:37℃(工作范围0-42℃)

9)活性单位定义:在37℃,pH8.0反应条件,30min内使△A260值降低1.0(相当于完全消化37μg DNA)所用的酶量定义为一个活性单位(U)。

保存与运输方法

保存:-20℃冻存,至少1年稳定。【注】:不要置于-70℃,因冷冻结冰会造成酶活性的丧失。

运输:冰袋运输。

注意事项

1) 对于不带标签的全能核酸酶,可通过色谱纯化去除,常用的色谱纯化方式有阳离子交换介质和阴离子交换介质。具体的去除条件可与我司联系。

2) 若需带标签的全能核酸酶,可选择带Strep标签的全能核酸酶(货号:MP1511-25KU)或带His标签的全能核酸酶(货号:MP1509-25KU)。

3) 若需不含内毒素污染的全能核酸酶,请选择真核重组表达的全能核酸酶(货号:MP1509-25KU)。

4) 若处理样本中含高浓度蛋白、其他盐分或细胞壁残留成分,可能会部分抑制酶活性,因此,需增加酶的使用量。

5) 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

产品使用

本品为即用型溶液,可根据终浓度直接加入反应体系。对于不同的应用,酶使用量有所差别,建议用量参考下表,具体实验请做优化调整。

应用试验 样本量 建议用量 工作条件*
电泳蛋白样品制备 106个细胞(10mg组织) 500U,不少于125U 37℃30-60min
非药物蛋白生产 1g湿重(10ml重悬液) 250U/ml,不少于50U/ml 37℃30-60min
【*】Benzonase Nuclease的有效工作温度是0-42°C,最佳工作温度是37℃。低温使用酶活性有所降低,可通过多添加2-5倍Benzonase Nuclease或延长消化时间(2-3h)来进行活力补偿。

全能核酸酶的去除

对于Strep-tag II标签的全能核酸酶(Benzonase Nuclease),可通过牢固结合Strep-tag II的磁珠或树脂来去除,比如:MagStrep “type3” XT beads(2-4090, IBA Life Sciences)或Strep-Tactin®XT Superflow® Resin(2-4010, IBA Life Sciences),去除率>95%。

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产品名称 规格
Benzonase Nuclease 全能核酸酶(无内毒素) 25KU
Benzonase Nuclease 全能核酸酶(不含标签) 25KU
Benzonase Nuclease 全能核酸酶(带Strep标签) 25KU
RIPA Lysis Buffer (Strong) RIPA裂解液(强) 100ml
RIPA Lysis Buffer (Medium) RIPA裂解液(中) 100ml
RIPA Lysis Buffer (Weak) RIPA裂解液(弱) 100ml
Lysis Buffer for WB/IP Assays 免疫印迹及免疫沉淀用(WB/IP)裂解液 100ml
NP-40 Lysis Buffer NP-40 裂解液 100ml
SDS Lysis Buffer SDS 裂解液 100ml
Deoxyribonuclease I (DNase I), ≥2,000 units/mg protein 15KU
Deoxyribonuclease I (DNase I), ≥500 units/mg protein   10MG
Ribonuclease A (RNase A) from Bovine Pancreas 100MG