辣根过氧化物酶(Horseradish peroxidase,HRP,EC 1.11.1.7),一种含四个二硫键的单链多肽,也是一种由无色的酶蛋白和棕色的铁卟啉结合而成的糖蛋白,含18%碳水化合物。碳水化合物的组分包括半乳糖,阿拉伯糖,木糖,海藻糖,甘露糖,甘露糖胺和半乳糖胺,取决于同工酶类型。
HRP能快速结合过氧化氢(H2O2)产生HRP- H2O2复合物,其可氧化大量的氢供体,反应式为:Donor + H2O2→ Oxidized Donor + 2 H2O。过氧化物酶可氧化各种底物,包括生色底物、化学发光底物(鲁米诺和异鲁米诺)和荧光底物(酪胺,高香草酸和对羟基苯乙酸)。
辣根过氧化物酶(HRP)普遍用于标记许多不同免疫化学实验用的免疫球蛋白,包括ELISA,免疫印迹,免疫组化。还能通过几种不同方法偶联到抗体上,有二硫键介导的戊二醛交联,过碘酸氧化法;还有氨基和巯基直接介导的交联。HRP是最理想的抗体标记酶,因为在三种最受欢迎的标记酶(HRP,β-半乳糖苷酶和碱性磷酸酶AP)中,HRP不仅分子量最小和最稳定,而且糖基化使HRP产生更低的非特异性结合。
本品来自辣根(Amoracia rusticana),冻干粉形式提供,RZ>3,比活力≥250 units/mg protein,达偶联级别。
产品特性
1)CAS NO:9003-99-0
2)英文同义名:Horseradish peroxidase; HRP; Donor:hydrogen-peroxide oxidoreductase;
3)中文同义名:辣根过氧化物酶;过氧化物酶,来自辣根;氢供体-过氧化氢氧化还原酶;
4)分子量:~44kDa
5)最适pH:6.0-6.5
6)抑制剂:叠氮钠,氰化物,L-胱氨酸,重铬酸盐,亚乙基硫脲,羟胺,硫化物,钒酸盐,对氨基苯甲酸,Cd2+, Co2+, Cu2+, Fe3+, Mn2+, Ni2+, and Pb2+
7)外观:褐色至深褐色冻干粉
8)溶解性:溶于水或0.1M磷酸盐缓冲液,pH 6.0(1mg/ml)
9)比活力:≥250 units/mg protein (pyrogallol as substrate)
10)活性单位定义:在20℃,pH6.0反应条件,每20s内催化底物焦倍酚生成1.0 mg红棓酚所需的酶量定义为一个活性单位(pyrogallol unit,U)。
11)纯度值:RZ>3。RZ(Reinheitszahl)代表过氧化物酶纯度值,为溶于去离子水中的酶(0.5–1.0 mg/ml)的吸光度比值A403/A275。
保存与运输方法
保存:-20℃冻存,4年稳定。
运输:冰袋运输。
注意事项
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。